旋覆花组培快繁方法与流程

文档序号:11113243阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种旋覆花组培快繁方法,其特征在于,包括以下的步骤:

⑴外植体消毒:采取当年生的腋芽的茎段为外植体,去尘,放入清水中培养,24h换水一次,培养至抽出嫩芽,取生长健壮的嫩芽,流水冲洗1h,在超净台上用75%酒精处理20s,无菌水漂洗3次,再用质量比为1%NaClO处理5min,之后无菌水漂洗4次,并用无菌滤纸吸去多余水分,得到无菌苗;

⑵诱导培养:在无菌条件下将获得的无菌苗接种于诱导培养基上,在23℃、光照8h、光强2500lx条件下培养,获得丛生芽;其中所述快诱导培养基的组成为:MS培养基+TDZ0.015mg/L+6-BA0.01mg/L+蔗糖30g/L+琼脂5g/L,pH值为5.8;

⑶生根培养:步骤⑵培养得到的丛生芽生长至3cm高时,在无菌条件下将获得的丛生芽分成单株,切去基部直接转入生根培养基上进行培养,在25℃、光照16小时、光照强度为3000lx条件下培养;其中所述生根培养基的组成为MS培养基+IBA0.1mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖20g/L+琼脂5g/L,pH值为5.8;

⑷炼苗移栽:将获得的生根组培苗移至炼苗室,室内温度22℃,湿度70%,闭瓶炼苗7天,开瓶盖炼苗5天,取出小苗,洗净培养基后,移栽至锯末:蛭石:河沙:腐叶土=1:2:3:1的基质中,在温室内继续炼苗35天,待根系发育正常,苗株生长健壮后移栽至大田。

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