茉莉花快速繁殖用培养基的制备方法与流程

文档序号:16879082发布日期:2019-02-15 21:50阅读:691来源:国知局
本发明属于茉莉花繁殖领域,具体涉及茉莉花快速繁殖用培养基的制备方法。
背景技术
:茉莉[jasminumsambac(l.)aiton]为木犀科茉莉属常绿灌木,树冠呈直立状或半开展状,原产于热带、亚热带地区。常见的茉莉品种有蔓生茉莉、木本茉莉、宝珠茉莉、洋茉莉等60多种,依其花形构造可分为单瓣茉莉、双瓣茉莉、多瓣茉莉3种。中国是世界上茉莉产量最多的国家,年产量占世界总产量的60%以上,现以广西、福建、广东、云南等地种植最为广泛,其中广西是我国茉莉花最大的产地,占全国产量的80%。然而,茉莉花栽培品种单一,长期以来仅栽培广西横县当地双瓣茉莉,且病虫害逐渐增多,如白绢病已开始蔓延;茉莉自然结实率低,如双瓣茉莉仅为0.19%;有性繁殖后代分离严重,生产上多采用扦插繁殖,但长期的无性繁殖导致茉莉种性退化、抗逆性下降、花朵产量逐年降低。因此,应尽快应用组培快繁技术进行茉莉良种的商品化繁育,通过母树外植体的复壮和筛选再作离体培养,可进一步提高种苗质量;此外,也可以通过芽变筛选获得新品系。组培所需外植体材料很少,且增殖系数高,而扦插则需要大量枝条。因此,良种的繁育应以组培途径为主,而组培过程中,培养基对茉莉的生根状况及成活状况至关重要。技术实现要素:本发明的目的在于提供茉莉花快速繁殖用培养基的制备方法,培养基的制备方法简单,其培养基中的促分化、促生芽、促生根的活性物质的生物学功能能到较好的保存,可满足从茉莉花种子到生根苗全时段的快速繁殖用培养基的营养需求,可显著提高生根率与根的健壮度。为实现上述发明目的,本发明提供以下技术方案:本发明提供了一种茉莉花快速繁殖用培养基,包括初代培养基、增殖培养基与生根培养基;所述初代培养基为:含有0.12~0.15mg/lkt、5~10mg/lctk、22~25g/l蔗糖、12~15g/l天门冬提取液、8~10g/l琼脂的ms培养基,ph为6.4~6.6;初代培养基可满足茉莉组织初步培养的营养需求,ctk可促进细胞伸长与分裂,为进一步的增殖培养做好准备,天门冬提取液可有效避免茉莉组织发生褐化、腐败,促进其组织细胞顺利分裂、分化,提高所获取的组培苗的活力与健壮度,利于后续增殖培养与生根培养;所述增殖培养基为:含有0.25~0.3mg/lkt、5~6mg/l吲哚乙酸、1~1.2mg/l(-)-8-苯基薄荷醇、1.5~2g/l醋酸、25~28g/l蔗糖、3~5g/l琼脂的ms培养基,ph为6.5~6.6;吲哚乙酸可促进细胞分化、促进芽的生成,但其暴露在光下较易被光降解为吲哚与乙酸,从而失去其功效促分化、促生芽的功效,在增殖培养基中加入(-)-8-苯基薄荷醇的乙醇溶液可以有效地防止吲哚乙酸的光降解,少量的(-)-8-苯基薄荷醇在乙醇存在的条件下可以迅速地与吲哚乙酸发生复合反应,生成的(-)-8-苯基薄荷醇-吲哚乙酸复合物可作为吲哚乙酸的一种稳定保存形式而进入植物体内,从而避免了吲哚乙酸的光降解,在适当条件下,植物体内的该(-)-8-苯基薄荷醇-吲哚乙酸复合物可以解离出吲哚乙酸而发挥生物学功效,诱导腋芽和不定芽的产生,极大地提升丛生芽中幼芽的数量与质量;所述生根培养基为:含有0.3~0.4mg/lkt、30~32g/l蔗糖、15~25g/l椰汁、1.5~3g/l薏米浸出液、8~10g/l嫩柳汁、4~10g/l琼脂的ms培养基,ph为6.5~6.8;生根培养基可为经过增殖培养的幼苗提供充足的碳水化合物能源,薏米浸出液能有效地强化、调控茉莉幼苗体内内源激素的含量和重要酶的活性,促进生物大分子的合成,同时诱导主根和侧根的生长,调节代谢强度,增强幼苗根系粗壮度,达到促生根、保成活的功效,增苗壮苗,大大提高育苗繁殖效率,扩大经济效益。采用本发明提供的培养基配方可显著降低茉莉花组织块的褐化率与腐败率,同时提高其生根率与成活率,根系庞大、粗壮,提高繁殖效率,缩短繁殖周期,提高经济效益,为茉莉花的产业化生产提供了更加有效的途径。优选的,初代培养基为:含有0.14mg/lkt、8mg/lctk、24g/l蔗糖、15g/l天门冬提取液、8g/l琼脂的ms培养基,ph为6.55;增殖培养基为:含有0.28mg/lkt、5.5mg/l吲哚乙酸、1.1mg/l(-)-8-苯基薄荷醇、1.8g/l醋酸、26g/l蔗糖、4g/l琼脂的ms培养基,ph为6.6;生根培养基为:含有0.35mg/lkt、30g/l蔗糖、20g/l椰汁、2g/l薏米浸出液、10g/l嫩柳汁、8g/l琼脂的ms培养基,ph为6.7。本发明中采用的天门冬提取液、薏米浸出液、嫩柳汁均采用过滤除菌的方式进行除菌,既保持了天然添加物的生物活性,又能够有效除菌。本发明还提供一种茉莉花快速繁殖用培养基的制备方法,包括如下步骤:制备初代培养基:往ms培养基中依次加入0.12~0.15mg/lkt、5~10mg/lctk、22~25g/l蔗糖、12~15g/l天门冬提取液、8~10g/l琼脂至完全溶解,调节ph为6.4~6.6,于121℃高压灭菌15~25min;初代培养基中ctk可促进细胞伸长与分裂,为进一步的增殖培养做好准备,天门冬提取液可有效避免茉莉组织发生褐化、腐败,促进其组织细胞顺利分裂、分化,提高所获取的组培苗的活力与健壮度,利于后续增殖培养与生根培养;制备增殖培养基:往ms培养基中依次加入0.25~0.3mg/lkt、1~1.2mg/l(-)-8-苯基薄荷醇、1.5~2g/l醋酸、25~28g/l蔗糖、3~5g/l琼脂至完全溶解,调节ph为6.4~6.6,于121℃高压灭菌15~25min,冷却后,于暗光、1~2℃温度下加入5~6mg/l吲哚乙酸,溶解后暗光、1~2℃温度下保存;吲哚乙酸可促进细胞分化、促进芽的生成,但其暴露在光下较易被光降解为吲哚与乙酸,从而失去其功效促分化、促生芽的功效,因此在暗光、1~2℃温度下配置有助于保存期生物学功效,同时在增殖培养基中加入(-)-8-苯基薄荷醇的乙醇溶液可以有效地防止吲哚乙酸的光降解,少量的(-)-8-苯基薄荷醇在乙醇存在的条件下可以迅速地与吲哚乙酸发生复合反应,生成的(-)-8-苯基薄荷醇-吲哚乙酸复合物可作为吲哚乙酸的一种稳定保存形式而进入植物体内,从而避免了吲哚乙酸的光降解,在适当条件下,植物体内的该(-)-8-苯基薄荷醇-吲哚乙酸复合物可以解离出吲哚乙酸而发挥生物学功效,诱导腋芽和不定芽的产生,极大地提升丛生芽中幼芽的数量与质量;制备生根培养基:往ms培养基中依次加入0.3~0.4mg/lkt、30~32g/l蔗糖、15~25g/l椰汁、1.5~3g/l薏米浸出液、8~10g/l嫩柳汁、4~10g/l琼脂,调节ph为6.5~6.8,于121℃高压灭菌15~25min;生根培养基可为经过增殖培养的幼苗提供充足的碳水化合物能源,薏米浸出液能有效地强化、调控茉莉幼苗体内内源激素的含量和重要酶的活性,促进生物大分子的合成,同时诱导主根和侧根的生长,调节代谢强度,增强幼苗根系粗壮度,达到促生根、保成活的功效,增苗壮苗,大大提高育苗繁殖效率,扩大经济效益。本发明中提供的茉莉花快速繁殖用培养基的制备方法简便易行、低廉环保,明确地为茉莉花快速繁殖的不同阶段提供了不同培养基,可满足茉莉花不同繁殖时期对不同能量物质与生效物质的不同需求,既避免了生长素类物质的光降解,又可降低了其在茉莉幼苗体内的积累对幼苗造成的侵害,促进幼苗健康成长,增苗壮苗。优选的,所述天门冬提取液的获取方法为:将天门冬嫩枝嫩叶搅碎,按照固液比1:2.5~4加入蒸馏水,在45~48℃温度不断搅拌2~3小时,过滤取滤液即为天门冬提取液;在高温下搅拌有利于天门冬嫩枝嫩叶中的有效成分释出,天门冬提取液可有效避免茉莉组织发生褐化、腐败,促进其组织细胞顺利分裂、分化,提高所获取的组培苗的活力与健壮度,利于后续增殖培养与生根培养。优选的,所述薏米浸出液的获取方法为:取薏米仁淘洗干净后至于2~3重量倍的水中,泡软后加入食醋与白糖,搅拌使白糖完全溶化,室温浸提36~48小时,过滤取滤液即得薏米浸出液;薏米软化后添加食醋与白糖有助于薏米仁中有效成分的浸出,所得到的薏米浸出液能有效地强化、调控茉莉幼苗体内内源激素的含量和重要酶的活性,促进生物大分子的合成,同时诱导主根和侧根的生长,调节代谢强度,增强幼苗根系粗壮度,达到促生根、保成活的功效,增苗壮苗,大大提高育苗繁殖效率,扩大经济效益。作为对本发明的进一步优选,薏米浸出液的获取方法中,食醋的添加量为水重量的0.5~1%,白糖的添加量为水重量的1%;食醋与白糖有助于薏米仁中有效成分的浸出,所得到的薏米浸出液能有效地强化、调控茉莉幼苗体内内源激素的含量和重要酶的活性,促进生物大分子的合成,同时诱导主根和侧根的生长,调节代谢强度,增强幼苗根系粗壮度,达到促生根、保成活的功效。优选的,所述嫩柳汁的获取方法为:取当年生嫩柳枝,集中按压酥软后切段,至于水中浸提,水刚刚没过嫩柳枝段,持续浸提24~48小时,取出柳枝段,去除不溶物即得嫩柳汁。本发明至少具有如下优势之一:1)初代培养基中添加天门冬提取液可有效避免茉莉组织发生褐化、腐败,促进其组织细胞顺利分裂、分化,提高所获取的组培苗的活力与健壮度,利于后续增殖培养与生根培养;2)增殖培养基中添加的(-)-8-苯基薄荷醇在乙醇存在的条件下可以迅速地与吲哚乙酸发生复合反应,生成的复合物可作为吲哚乙酸的一种稳定保存形式,避免了吲哚乙酸的光降解,适当条件下,植物体内的该(-)-8-苯基薄荷醇-吲哚乙酸复合物可以解离出吲哚乙酸而发挥生物学功效,诱导腋芽和不定芽的产生;3)生根培养基中添加了薏米浸出液,薏米浸出液能有效地强化、调控茉莉幼苗体内内源激素的含量和重要酶的活性,促进生物大分子的合成,同时诱导主根和侧根的生长,调节代谢强度,增强幼苗根系粗壮度,达到促生根、保成活的功效,增苗壮苗,大大提高育苗繁殖效率;4)本发明提供的培养基配方可显著降低茉莉花组织块的褐化率与腐败率,同时提高其生根率与成活率,根系庞大、粗壮,提高繁殖效率,缩短繁殖周期,提高经济效益,为茉莉花的产业化生产提供了更加有效的途径;5)薏米软化后添加食醋与白糖有助于薏米仁中有效成分的浸出,所得到的薏米浸出液能有效地强化、调控茉莉幼苗体内内源激素的含量和重要酶的活性,促进生物大分子的合成,同时诱导主根和侧根的生长;6)本制备方法简便易行、低廉环保,明确地为茉莉花快速繁殖的不同阶段提供了不同培养基,可满足茉莉花不同繁殖时期对不同能量物质与生效物质的不同需求,既避免了生长素类物质的光降解,又可降低了其在茉莉幼苗体内的积累对幼苗造成的侵害,促进幼苗健康成长,增苗壮苗。本发明采用了上述技术方案提供茉莉花快速繁殖用培养基的制备方法,弥补了现有技术的不足,设计合理,操作方便。具体实施方式本发明公开了一种茉莉花快速繁殖用培养基的制备方法,本领域技术人员可以借鉴本文内容,适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是,所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的,它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述,相关人员明显能在不脱离本
发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合,来实现和应用本发明技术。以下结合实施例对本发明作进一步详细描述:实施例1:一种茉莉花快速繁殖用培养基的制备方法,包括如下步骤:制备初代培养基:往ms培养基中依次加入0.12mg/lkt、5mg/lctk、22g/l蔗糖、12g/l天门冬提取液、8g/l琼脂至完全溶解,调节ph为6.4,于121℃高压灭菌15min;初代培养基中ctk可促进细胞伸长与分裂,为进一步的增殖培养做好准备,天门冬提取液可有效避免茉莉组织发生褐化、腐败,促进其组织细胞顺利分裂、分化,提高所获取的组培苗的活力与健壮度,利于后续增殖培养与生根培养;制备增殖培养基:往ms培养基中依次加入0.25mg/lkt、1.5g/l醋酸、25g/l蔗糖、3g/l琼脂至完全溶解,调节ph为6.4,于121℃高压灭菌15min,冷却后,于暗光、1℃温度下加入5mg/l吲哚乙酸,溶解后暗光、1℃温度下保存;吲哚乙酸可促进细胞分化、促进芽的生成,诱导腋芽和不定芽的产生,极大地提升丛生芽中幼芽的数量与质量;制备生根培养基:往ms培养基中依次加入0.3mg/lkt、30g/l蔗糖、15g/l椰汁、1.5g/l薏米浸出液、8g/l嫩柳汁、4g/l琼脂,调节ph为6.5,于121℃高压灭菌15min;生根培养基可为经过增殖培养的幼苗提供充足的碳水化合物能源,薏米浸出液能有效地强化、调控茉莉幼苗体内内源激素的含量和重要酶的活性,促进生物大分子的合成,同时诱导主根和侧根的生长,调节代谢强度,增强幼苗根系粗壮度,达到促生根、保成活的功效,增苗壮苗,大大提高育苗繁殖效率,扩大经济效益。所述天门冬提取液的获取方法为:将天门冬嫩枝嫩叶搅碎,按照固液比1:2.5加入蒸馏水,在45℃温度不断搅拌2小时,过滤取滤液即为天门冬提取液;在高温下搅拌有利于天门冬嫩枝嫩叶中的有效成分释出,天门冬提取液可有效避免茉莉组织发生褐化、腐败,促进其组织细胞顺利分裂、分化,提高所获取的组培苗的活力与健壮度,利于后续增殖培养与生根培养。所述薏米浸出液的获取方法为:取薏米仁淘洗干净后至于2重量倍的水中,泡软后加入水重量0.5%的食醋与1%的白糖,搅拌使白糖完全溶化,室温浸提36小时,过滤取滤液即得薏米浸出液;薏米软化后添加食醋与白糖有助于薏米仁中有效成分的浸出,所得到的薏米浸出液能有效地强化、调控茉莉幼苗体内内源激素的含量和重要酶的活性,促进生物大分子的合成,同时诱导主根和侧根的生长,调节代谢强度,增强幼苗根系粗壮度,达到促生根、保成活的功效,增苗壮苗,大大提高育苗繁殖效率,扩大经济效益。所述嫩柳汁的获取方法为:取当年生嫩柳枝,集中按压酥软后切段,至于水中浸提,水刚刚没过嫩柳枝段,持续浸提24小时,取出柳枝段,去除不溶物即得嫩柳汁。实施例2:一种茉莉花快速繁殖用培养基的制备方法,包括如下步骤:制备初代培养基:往ms培养基中依次加入0.15mg/lkt、10mg/lctk、25g/l蔗糖、15g/l天门冬提取液、10g/l琼脂至完全溶解,调节ph为6.6,于121℃高压灭菌25min;初代培养基中ctk可促进细胞伸长与分裂,为进一步的增殖培养做好准备,天门冬提取液可有效避免茉莉组织发生褐化、腐败,促进其组织细胞顺利分裂、分化,提高所获取的组培苗的活力与健壮度,利于后续增殖培养与生根培养;制备增殖培养基:往ms培养基中依次加入0.3mg/lkt、1.2mg/l(-)-8-苯基薄荷醇、2g/l醋酸、28g/l蔗糖、5g/l琼脂至完全溶解,调节ph为6.6,于121℃高压灭菌25min,冷却后,于暗光、2℃温度下加入6mg/l吲哚乙酸,溶解后暗光、2℃温度下保存;吲哚乙酸可促进细胞分化、促进芽的生成,但其暴露在光下较易被光降解为吲哚与乙酸,从而失去其功效促分化、促生芽的功效,因此在暗光、低温度下配置有助于保存期生物学功效,同时在增殖培养基中加入(-)-8-苯基薄荷醇的乙醇溶液可以有效地防止吲哚乙酸的光降解,少量的(-)-8-苯基薄荷醇在乙醇存在的条件下可以迅速地与吲哚乙酸发生复合反应,生成的(-)-8-苯基薄荷醇-吲哚乙酸复合物可作为吲哚乙酸的一种稳定保存形式而进入植物体内,从而避免了吲哚乙酸的光降解,在适当条件下,植物体内的该(-)-8-苯基薄荷醇-吲哚乙酸复合物可以解离出吲哚乙酸而发挥生物学功效,诱导腋芽和不定芽的产生,极大地提升丛生芽中幼芽的数量与质量;制备生根培养基:往ms培养基中依次加入0.4mg/lkt、32g/l蔗糖、25g/l椰汁、3g/l薏米浸出液、10g/l嫩柳汁、10g/l琼脂,调节ph为6.8,于121℃高压灭菌25min;生根培养基可为经过增殖培养的幼苗提供充足的碳水化合物能源,薏米浸出液能有效地强化、调控茉莉幼苗体内内源激素的含量和重要酶的活性,促进生物大分子的合成,同时诱导主根和侧根的生长,调节代谢强度,增强幼苗根系粗壮度,达到促生根、保成活的功效,增苗壮苗,大大提高育苗繁殖效率,扩大经济效益。所述天门冬提取液的获取方法为:将天门冬嫩枝嫩叶搅碎,按照固液比1:4加入蒸馏水,在48℃温度不断搅拌3小时,过滤取滤液即为天门冬提取液。所述薏米浸出液的获取方法为:取薏米仁淘洗干净后至于3重量倍的水中,泡室温浸提48小时,过滤取滤液即得薏米浸出液。所述嫩柳汁的获取方法为:取当年生嫩柳枝,集中按压酥软后切段,至于水中浸提,水刚刚没过嫩柳枝段,持续浸提48小时,取出柳枝段,去除不溶物即得嫩柳汁。实施例3:一种茉莉花快速繁殖用培养基的制备方法,包括如下步骤:制备初代培养基:往ms培养基中依次加入0.14mg/lkt、8mg/lctk、24g/l蔗糖、8g/l琼脂至完全溶解,调节ph为6.5,于121℃高压灭菌20min;初代培养基中ctk可促进细胞伸长与分裂,为进一步的增殖培养做好准备,天门冬提取液可有效避免茉莉组织发生褐化、腐败,促进其组织细胞顺利分裂、分化,提高所获取的组培苗的活力与健壮度,利于后续增殖培养与生根培养;制备增殖培养基:往ms培养基中依次加入0.28mg/lkt、1mg/l(-)-8-苯基薄荷醇、1.8g/l醋酸、26g/l蔗糖、4g/l琼脂至完全溶解,调节ph为6.5,于121℃高压灭菌20min,冷却后,于暗光、1℃温度下加入5.5mg/l吲哚乙酸,溶解后暗光、1℃温度下保存;吲哚乙酸可促进细胞分化、促进芽的生成,但其暴露在光下较易被光降解为吲哚与乙酸,从而失去其功效促分化、促生芽的功效,因此在暗光、低温度下配置有助于保存期生物学功效,同时在增殖培养基中加入(-)-8-苯基薄荷醇的乙醇溶液可以有效地防止吲哚乙酸的光降解,少量的(-)-8-苯基薄荷醇在乙醇存在的条件下可以迅速地与吲哚乙酸发生复合反应,生成的(-)-8-苯基薄荷醇-吲哚乙酸复合物可作为吲哚乙酸的一种稳定保存形式而进入植物体内,从而避免了吲哚乙酸的光降解,在适当条件下,植物体内的该(-)-8-苯基薄荷醇-吲哚乙酸复合物可以解离出吲哚乙酸而发挥生物学功效,诱导腋芽和不定芽的产生,极大地提升丛生芽中幼芽的数量与质量;制备生根培养基:往ms培养基中依次加入0.35mg/lkt、32g/l蔗糖、18g/l椰汁、2g/l薏米浸出液、9g/l嫩柳汁、8g/l琼脂,调节ph为6.6,于121℃高压灭菌22min;生根培养基可为经过增殖培养的幼苗提供充足的碳水化合物能源,薏米浸出液能有效地强化、调控茉莉幼苗体内内源激素的含量和重要酶的活性,促进生物大分子的合成,同时诱导主根和侧根的生长,调节代谢强度,增强幼苗根系粗壮度,达到促生根、保成活的功效,增苗壮苗,大大提高育苗繁殖效率,扩大经济效益。所述薏米浸出液的获取方法为:取薏米仁淘洗干净后至于2重量倍的水中,泡软后加入水重量0.6%的食醋与1%的白糖,搅拌使白糖完全溶化,室温浸提36小时,过滤取滤液即得薏米浸出液;薏米软化后添加食醋与白糖有助于薏米仁中有效成分的浸出,所得到的薏米浸出液能有效地强化、调控茉莉幼苗体内内源激素的含量和重要酶的活性,促进生物大分子的合成,同时诱导主根和侧根的生长,调节代谢强度,增强幼苗根系粗壮度,达到促生根、保成活的功效,增苗壮苗,大大提高育苗繁殖效率,扩大经济效益。所述嫩柳汁的获取方法为:取当年生嫩柳枝,集中按压酥软后切段,至于水中浸提,水刚刚没过嫩柳枝段,持续浸提36小时,取出柳枝段,去除不溶物即得嫩柳汁。实施例4:茉莉花快速繁殖用培养基,包括初代培养基、增殖培养基与生根培养基,所述初代培养基为:含有0.14mg/lkt、8mg/lctk、24g/l蔗糖、15g/l天门冬提取液、8g/l琼脂的ms培养基,ph为6.55;其制备方法为:往ms培养基中依次加入kt、ctk、蔗糖、天门冬提取液、琼脂至完全溶解,调节ph,于121℃高压灭菌20min;初代培养基可满足茉莉组织初步培养的营养需求,ctk可促进细胞伸长与分裂,为进一步的增殖培养做好准备,天门冬提取液可有效避免茉莉组织发生褐化、腐败,促进其组织细胞顺利分裂、分化,提高所获取的组培苗的活力与健壮度,利于后续增殖培养与生根培养;所述增殖培养基为:含有0.28mg/lkt、5.5mg/l吲哚乙酸、1.1mg/l(-)-8-苯基薄荷醇、1.8g/l醋酸、26g/l蔗糖、4g/l琼脂的ms培养基,ph为6.6;其制备方法为:往ms培养基中依次加入kt、(-)-8-苯基薄荷醇、醋酸、蔗糖、琼脂至完全溶解,调节ph,于121℃高压灭20min,冷却后,于暗光、1℃温度下加入吲哚乙酸,溶解后暗光、1℃温度下保存;在增殖培养基中加入(-)-8-苯基薄荷醇的乙醇溶液可以有效地防止吲哚乙酸的光降解,少量的(-)-8-苯基薄荷醇在乙醇存在的条件下可以迅速地与吲哚乙酸发生复合反应,生成的(-)-8-苯基薄荷醇-吲哚乙酸复合物可作为吲哚乙酸的一种稳定保存形式而进入植物体内,从而避免了吲哚乙酸的光降解,在适当条件下,植物体内的该(-)-8-苯基薄荷醇-吲哚乙酸复合物可以解离出吲哚乙酸而发挥生物学功效,诱导腋芽和不定芽的产生,极大地提升丛生芽中幼芽的数量与质量;所述生根培养基为:含有0.35mg/lkt、30g/l蔗糖、20g/l椰汁、2g/l薏米浸出液、10g/l嫩柳汁、8g/l琼脂的ms培养基,ph为6.7;其制备方法为:往ms培养基中依次加入kt、蔗糖、椰汁、薏米浸出液、嫩柳汁、琼脂,调节ph,于121℃高压灭菌20min;生根培养基可为经过增殖培养的幼苗提供充足的碳水化合物能源,薏米浸出液能有效地强化、调控茉莉幼苗体内内源激素的含量和重要酶的活性,促进生物大分子的合成,同时诱导主根和侧根的生长,调节代谢强度,增强幼苗根系粗壮度,达到促生根、保成活的功效,增苗壮苗,大大提高育苗繁殖效率,扩大经济效益。初代培养基中天门冬提取液的获取方法为:将天门冬嫩枝嫩叶搅碎,按照固液比1:3加入蒸馏水,在45℃温度不断搅拌2.5小时,过滤取滤液即为天门冬提取液;在高温下搅拌有利于天门冬嫩枝嫩叶中的有效成分释出,天门冬提取液可有效避免茉莉组织发生褐化、腐败,促进其组织细胞顺利分裂、分化,提高所获取的组培苗的活力与健壮度,利于后续增殖培养与生根培养。生根培养基中薏米浸出液的获取方法为:取薏米仁淘洗干净后至于2.5重量倍的水中,泡软后加入水重量1%的食醋与1%的白糖,搅拌使白糖完全溶化,室温浸提48小时,过滤取滤液即得薏米浸出液;薏米软化后添加食醋与白糖有助于薏米仁中有效成分的浸出,所得到的薏米浸出液能有效地强化、调控茉莉幼苗体内内源激素的含量和重要酶的活性,促进生物大分子的合成,同时诱导主根和侧根的生长,调节代谢强度,增强幼苗根系粗壮度,达到促生根、保成活的功效,增苗壮苗,大大提高育苗繁殖效率,扩大经济效益。生根培养基嫩柳汁的获取方法为:取当年生嫩柳枝,集中按压酥软后切段,至于水中浸提,水刚刚没过嫩柳枝段,持续浸提36小时,取出柳枝段,去除不溶物即得嫩柳汁。测试例5:茉莉花快速繁殖,将茉莉花种子经浸泡、消毒后剥皮获得茉莉种子种胚,依次按下列步骤进行培养并进行移栽:初步培养:将种胚接种初步培养基中,在培养温度为26℃、光照时间为12h、光照强度为2500lux,培养25d后获得组培苗;增殖培养:无菌条件下选取组培苗的茎段按照2~3个节剪成小段,插入增殖培养基中,在培养温度为23℃、光照时间为10h、光照强度为2200lux,培养25d后获得丛生芽;生根培养:无菌条件下从丛生芽中剪取1.5~3cm有芽的茎段,插入生根培养基中,在培养温度为22℃、光照时间为10h、光照强度为2800lux,培养30d后获得生根苗;移栽:选择质优生根苗炼苗后移栽。依次选择实施例1~4中的不同初步培养基、增殖培养基与生根培养基,按照上述步骤对茉莉种子进行培养繁殖,检测最终炼苗移栽时的生根苗,目测法测定平均生根条数与生根率,游标卡尺法测定平均根长度,同时检测移栽一周后的幼苗成活率,统计数据如表1所示。表1.实施例1~4中生根苗的统计数据例别平均生根条数(条)生根率平均根长度(cm)幼苗成活率实施例16.582.6%1.892.5%实施例218.698.5%3.097.8%实施例321.599.5%3.5100%实施例422.5100%3.8100%由表1可以看出,在实施例4中,其幼苗生根率与成活率均达到了100%,而且平均生根条数超过了20条,说明本发明方法在提升根系活力、生根率与幼苗成活率方面具有较为积极的作用。上述实施例中的常规技术为本领域技术人员所知晓的现有技术,故在此不再详细赘述。以上实施方式仅用于说明本发明,而并非对本发明的限制,本领域的普通技术人员,在不脱离本发明的精神和范围的情况下,还可以做出各种变化和变型。因此,所有等同的技术方案也属于本发明的范畴,本发明的专利保护范围应由权利要求限定。当前第1页12
当前第1页1 2 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1