专利名称：绿芦笋的组织培养生产法的制作方法
技术领域：
本发明所说的绿芦笋的组织培养生产法是绿芦笋的大量繁植、培养和生产的方法。
绿芦笋学名叫石刁柏，是多年生草本植物。因其含有丰富的叶酸、植物蛋白等人体所需要的稀有物质，具有显著地提高人体免役力的功能。在我国，现有的绿芦笋繁育方式，多是用籽粒种植和插条。籽粒种植须待秋天结籽后进行，生产受到时间和季节的限制；插条繁育则浪费了大量的绿芦笋材料。不管是籽粒种植还是插条，都不能适应大规模的生产。重要的是。一般人都认为，绿芦笋只能的长江以南种植，由于无法过冬，它无法在北纬40°正常生长。
本发明的目的就是，提出绿芦笋组织培养技术和方法，使普通蔬菜技术人员，通过培训，可以掌握本方法，在南方和北方都可以低成本地大量培植和生产绿芦笋。服务于广大人民。
现在来详细全面地叙述本发明提出的绿芦笋的组织培养生产法。所谓组织培养繁育是指，在植物离体的条件下，将植物的一部分，如一小段茎、一小块叶、甚至一个细胞，接种在培养基上，使它们重新形成一个完整植株的方法。由于植物细胞具有完整植株的全部信息，具有全能性和植物激素的调解作用，提供了繁育成功的可能。组织培养是一项崭新的生物技术，具有节约材料，又可不受时间、季节的限制，可全年在实验室里培养繁殖，并可按照一定的生产程序操作，实现工业化生产。
进行植物组织培养，首先必须选择和配制培养基，MS培养基是目前普遍使用的一种，其通用性强，易于普通技术人员配制，其次要选择适当的外植体(即培养材料)。外植体分为带芽外植体和由分子组织构成的外植体两种类型，本发明采用的带芽外植体，即用绿芦笋的幼芽、茎尖和花梗作为外植体。
组织培养的步骤分为培养基的配制、外植体(接种材料)的消毒、接种、植株诱导、生根和移栽六步。
一．关于培养基的配制其配方如下(组成物在每升培养基中的含量)(其组成物均为化学纯)(PH 5.8)(单位毫升/升
MS培养基有高效的无机盐浓度，对保证植物组织生长所需的矿物质营养和加速愈伤组织的生长十分有利，它保证了绿芦笋幼芽、茎尖和花梗切片悬浮培养的成功。
二．外植体的消毒本发明选择绿芦笋的幼芽、茎尖和花梗作为外植体(接种材料)，它自身常常附有多种多样的微生物，一旦带进培养基，就会迅速滋生，使组织培养前功尽弃。因此外植体在接种前，必须进行灭菌。灭菌前将绿芦笋的幼芽、茎尖和花梗用洁净水冲洗干净，用吸水纸将水吸干；再用70％的酒精漂洗一下。然后根据幼芽、茎尖和花梗的老嫩程度，用2-10％的次氯酸钠溶液浸泡6-15分钟，用洁净水冲洗三次，用无菌纸吸干，准备接种。
三．接种组织培养的接种是指，将灭过菌的外植体，在无菌的条件下，切成大于5mm2的小块，并放入培养基的过程。特别要说明的是，接种过程必须在无菌或者在超净工作台上进行。
四．植株诱导在培养基中植物激素的作用下，外植体可以通过三种途经迅速增殖，即侧芽增殖、诱导不定芽的形成和诱导胚状体的形成。本发明采用诱导不定芽的形成方式。很多植物的器官可以产生不定芽，本发明在自燃条件下，在培养基中，由于所需要的外植体很小，又加上激素的作用，可以使绿芦笋产生不定芽的能力得到极好的发辉，并较快地成长为嫩枝。
五．生根本发明采用浸泡的方法使嫩枝生根，即将在培养基中生长的嫩枝切下，浸泡在高浓度的生长素溶液中，生长素的浓度为100毫克/升左右，浸泡时间为10-15小时。然后取出，接种于不加任何激素的MS培养基上，10天左右即可生根。
六．移栽在上述生根过程中，当小苗的根原基突起或者形成几毫米长的短根时，将其取出，洗去粘在根部的琼脂，栽入有50％浓度营养的人工基质中。本发明所选用的基质是泡沫塑料板材，将板材放入容器中，在板材上钻孔以固定生根后的小苗，容器中充满营养液，进行水培育。即使小苗根部与营养液体充分接触。经过5-10天，即可定植到土壤中。
本发明的优点在于利用组织培养法生产绿芦笋，具有时间段，短增殖率高和可进行全年生产的优点，比大田生产快得多。加上培养材料和试管苗的小型化，可以利用有限的空间培养出大量的个体，使绿芦笋的生产可以变成大规模的工业生产。不受时间、季节、地理位置的限制，就是普通的蔬菜技术人员通过学习和培训，完全可以进行培育，进入规模化生产。试验表明，绿芦笋的组织培养，使绿芦笋可以在北纬40°正常生长，在没有大棚的条件下，冬天可在冻土中过冬，来年春天照常可以收割采摘，在长江以北黄河中下游可以种植。
权利要求
1．绿芦笋的组织培养生产法，组织培养方法是在MS培养基上，来实现植物大量地生产的方法，本发明特征在于，本发明的组织培养法，是专门用于绿芦笋的组织培养法，其组织培养的步骤分为，外植体的选择，外植体的消毒，接种、植株诱导、生根和移栽六步。一．外植体的选择本发明的外植体，采用的带芽外植体，即用绿芦笋的幼芽、茎芽和花梗作为外植体。二．外植体的消毒本发明选择绿芦笋的嫩茎和茎尖作为外植体(接种材料)，它自身常常附有多种多样的微生物，一旦带进培养基，就会迅速滋生，使组织培养前功尽弃。因此外植体在接种前，必须进行灭菌。灭菌前将绿芦笋的幼芽、茎尖和花梗用洁净水冲洗干净，用吸水纸将水吸干；再用70％的酒精漂洗一下。然后根据幼芽、茎尖和花梗的老嫩程度，用2-10％的次氯酸钠溶液浸泡6-15分钟，用洁净水冲洗三次，用无菌纸吸干，准备接种。三．接种组织培养的接种是指，将灭过菌的外植体，在无菌的条件下，切成大于5mm2的小块，并放人培养基的过程。特别要说明的是，接种过程必须在无菌或者在超净工作台上进行。四．植株诱导在培养基中植物激素的作用下，外植体可以通过三种途经迅速增殖，即侧芽增殖、诱导不定芽的形成和诱导胚状体的形成。本发明采用诱导不定芽的形成方式。很多植物的器官可以产生不定芽，本发明在自燃条件下，在培养基中，由于所需要的外植体很小，又加上激素的作用，可以使绿芦笋产生不定芽的能力得到极好的发辉，并较快地成长为嫩枝。五．生根本发明采用浸泡的方法使嫩枝生根，即将在培养基中生长的嫩枝切下，浸泡在高浓度的生长素溶液中，生长素的浓度为100毫克/升左右，浸泡时间为10-15小时。然后取出，接种于不加任何激素的MS培养基上，10天左右即可生根。六．移栽在上述生根过程中，当小苗的根原基突起或者形成几毫米长的短根时，将其取出，洗去粘在根部的琼脂，栽入有少量营养的人工基正中。本发明所选用的基质是泡沫塑料板材，将板材放入容器中，在板材上钻孔以固定生根后的小苗，容器中充满营养液，进行水培育。即使小苗根部与营养液体充分接触。经过5-10天，即可定植到土壤中。
全文摘要
本发明公开了一种以幼芽、茎尖和花梗作为外植体的绿芦笋的组织培养生产方法,它具有时间短,增殖率高和可进行全年生产的优点,比大田生产快得多,使绿芦笋的生产可以实现大规模的工业生产,不受时间、季节、地理位置的限制,就是普通的蔬菜技术人员通过学习和培训,完全可以进行培育,使绿芦笋可以在北纬40°正常生长,在没有大棚的条件下,冬天可在冻土中过冬,来年春天照常可以收割采摘,在长江以北黄河中下游可以种植。
文档编号A01H4/00GK1209266SQ97115259
公开日1999年3月3日 申请日期1997年8月27日 优先权日1997年8月27日
发明者刘惠林 申请人:刘宝林