在共同环境中养殖2月和5月时，分别从各家系中随机抽取30尾对虾测量对虾体重、体长、头胸甲长、腹节长、头胸甲宽，将取样对虾进行眼柄套环标记，标记好的对虾在虾池暂养2d，如有死虾，从其所在家系中随机抽取对虾标记测量补充至30尾，将实验对虾放于800L的圆形塑料桶中，待对虾将水体中溶氧消耗至1.2mg.L-1开始计时，通过调节气阀控制使水体溶氧维持在0.8"?.2mg.L-1 (96小时预实验确定的氧浓度范围)，进行94h低溶氧胁迫,桶中放有水泵维持上下水体溶氧均匀，每Ih检测水体溶氧情况，每8h检测对虾存活情况，对各家系溶氧胁迫时不同时间段死亡和成活对虾，进行抗低溶氧性状相关基因SNP位点分析；
(5)数据分析:利用ASReml软件，采用多性状个体动物模型估算生长性状与耐低溶氧性状遗传力与遗传相关，预测生长性状与耐低溶氧性状育种值。结果显示:体重的遗传力为0.27±0.11 (中等遗传力)，耐低溶氧遗传为0.13±0.07 (中等遗传力)，体重与耐低溶氧间遗传相关为0.22 ±0.09，均Z-Score检验显著(P〈0.05)。采用5月龄体重性状育种值加权50%加5月龄低溶氧存活育种值加权50%算得选择指数，筛选家系选择指数高的20个家系作为留种豕系。
[0019](6)构建F2代家系:从20个留种家系中挑选个体大、活力强、性腺发育正常的雌虾20尾，雄虾10尾作为亲本，控制近交系数0.1以下，通过人工受精的方式，构建F2代家系;
(7)继代选择:将上述实验家系经过4代的连续选择，在生长性能优异耐低溶氧性能强的家系中，选择亲缘关系较远的家系，从中挑选个体大、活力强、性腺发育正常的雌雄对虾作为亲本，繁育后代作为优良品种供生产应用。
[0020]实施例5
一种对虾耐低溶氧家系选育方法，包括如下步骤:
(1)基础群体的建立:收集来自美国弗罗里达对虾改良公司SIS、科纳湾海洋资源公司Konna Bay、夏威夷海洋研究所O1、泰国正大亲虾公司ZD和国内选育的中兴I号、中科I号、桂海I号亲虾作为群体，采用AFLP的技术对不同来源亲虾进行遗传多样性分析，通过群体交配建立15个交配组合作为选育基础群体；
(2)构建Fl代家系:从上述15个交配组合中，按2%选择强度，挑选个体大的，雌虾60g，雄虾50g的个体，雌虾300尾，雄虾150尾，雌雄虾性腺发育正常、附肢齐全、无病、食欲旺盛、对外界刺激反应敏感，作为亲虾进行留种，通过人工受精的方式，按雌雄比例2:1，建立全同胞家系90个，父系半同胞家系45个，为Fl代家系；
(3)同池培养:各Fl代家系对虾从仔虾阶段分别取400尾虾苗于3mXImX Im网箱中，每Ild清洗更换一次网箱网布,全部网箱置于20mX30mX 1.5m的大池子中进行共同环境养殖；
(4)抗低溶氧测试:各Fl代对虾在共同环境中养殖2月和5月时，分别从各家系中随机抽取30尾对虾测量对虾体重、体长、头胸甲长、腹节长、头胸甲宽，将取样对虾进行眼柄套环标记，标记好的对虾在虾池暂养2d，如有死虾，从其所在家系中随机抽取对虾标记测量补充至30尾，将实验对虾放于800L的圆形塑料桶中，待对虾将水体中溶氧消耗至1.2mg.L-1开始计时，通过调节气阀控制使水体溶氧维持在0.8"?.2mg.L-1 (96小时预实验确定的氧浓度范围)，进行94h低溶氧胁迫,桶中放有水泵维持上下水体溶氧均匀，每Ih检测水体溶氧情况，每8h检测对虾存活情况，对各家系溶氧胁迫时不同时间段死亡和成活对虾，进行抗低溶氧性状相关基因SNP位点分析；
(5)数据分析:利用ASReml软件，采用多性状个体动物模型估算生长性状与耐低溶氧性状遗传力与遗传相关，预测生长性状与耐低溶氧性状育种值。结果显示:体重的遗传力为0.27±0.11 (中等遗传力)，耐低溶氧遗传为0.13±0.07 (中等遗传力)，体重与耐低溶氧间遗传相关为0.22 ±0.09，均Z-Score检验显著(P〈0.05)。采用5月龄体重性状育种值加权50%加5月龄低溶氧存活育种值加权50%算得选择指数，筛选家系选择指数高的20个家系作为留种豕系。
[0021](6)构建F2代家系:从留种家系中挑选个体大、活力强、性腺发育正常的雌虾20尾，雄虾10尾作为亲本，控制近交系数0.1以下，通过人工受精的方式，构建F2代家系；
(7)继代选择:将上述实验家系经过4代的连续选择，在生长性能优异耐低溶氧性能强的家系中，选择亲缘关系较远的家系，从中挑选个体大、活力强、性腺发育正常的雌雄对虾作为亲本，繁育后代作为优良品种供生产应用。
[0022]本发明筛选出的耐低溶氧家系在低氧环境的存活率显著高于存活率均值，成活率提高25.72%, 2014年养殖本品种亲虾繁育群体在5000亩高密度养殖条件比对照群体成活率高21.42%、产量提高23.74%。
【主权项】
1.一种对虾耐低溶氧家系选育方法，其特征在于:包括如下步骤: (1)基础群体的建立:收集来自美国弗罗里达对虾改良公司SIS、科纳湾海洋资源公司Konna Bay、夏威夷海洋研究所O1、泰国正大亲虾公司ZD和国内选育的中兴I号、中科I号、桂海I号亲虾作为群体，采用AFLP的技术对不同来源亲虾进行遗传多样性分析，通过群体交配建立15个交配组合作为选育基础群体； (2)构建Fl代家系:从上述15个交配组合中，按2%选择强度，挑选个体大的作为亲虾进行留种，通过人工受精的方式，按照雌雄比例2:1，建立全同胞家系6(Γ100个，父系半同胞家系3(Γ50个，作为Fl代家系； (3)同池培养:各Fl代家系对虾从仔虾阶段分别取400尾虾苗于3mXImX Im网箱中，每8?12d清洗更换一次网箱网布，全部网箱置于20mX30mX1.5m的大池子中进行共同环境养殖； (4)抗低溶氧测试:各Fl代对虾在共同环境中养殖2个月和5个月时，分别从各家系中随机抽取30尾对虾测量对虾体重、体长、头胸甲长、腹节长、头胸甲宽，将取样对虾进行眼柄套环标记，标记好的对虾在虾池暂养2d，然后将实验对虾放于800L的圆形塑料桶中，待对虾将水体中溶氧消耗至1.2mg.L-1开始计时，通过调节气阀控制使水体溶氧维持在0.8^1.2mg.Γ1，进行94h低溶氧胁迫，桶中放有水泵维持上下水体溶氧均匀，每Ih检测水体溶氧情况，每8h检测对虾存活情况，筛选出生长性能优异抗低溶氧能力强的家系，并进行记录分析； (6)构建F2代家系:从留种家系中挑选个体大、活力强、性腺发育正常的雌虾20尾，雄虾10尾作为亲本，控制近交系数0.1以下，通过人工受精的方式，构建F2代家系； (7)继代选择:将上述实验家系经过4代的连续选择，在生长性能优异耐低溶氧性能强的家系中，选择亲缘关系较远的家系，从中挑选个体大、活力强、性腺发育正常的雌雄对虾作为亲本，繁育后代作为优良品种供生产应用。
2.根据权利要求1所述一种对虾耐低溶氧家系选育方法，其特征在于:步骤(2)所述亲虾是指个体大，雌虾45飞5g，雄虾35飞5g，雌雄虾性腺发育正常、附肢齐全、无病、食欲旺盛、对外界刺激反应敏感的个体。
3.根据权利要求1所述一种对虾耐低溶氧家系选育方法，其特征在于:步骤(5)所述实验家系的雌雄比例为2:1，近交系数控制在0.1以下。
【专利摘要】本发明涉及一种对虾耐低溶氧家系选育方法，属于对虾抗逆性状选育技术领域；该方法是：（1）基础群体的建立；（2）构建F1代家系；（3）同池培养；（4）抗低溶氧测试；（5）构建F2代家系；（6）继代选育，选用不同来源的亲虾通过定向交配构建全/半同胞家系，共同环境养殖，进行94h低溶氧胁迫，根据抗低溶氧测试结果及生长测度结果进行亲本选留，经过4代的连续选择，在生长性能优异、耐低溶氧性能强的家系中，选择亲缘关系较远的家系，从中挑选个体大、活力强、性腺发育正常的雌雄对虾作为亲本，繁育后代作为优良品种；本方法有效的解决了对虾高密度养殖时出现低溶氧影响对虾生长、导致对虾死亡的难题，极大的推动对虾高密度养殖产业的发展。
【IPC分类】A01K61-00
【公开号】CN104686430
【申请号】CN201510158892
【发明人】刘定, 刘建勇, 刘荡, 刘东晖, 郑大, 陈海龙, 许榕榕
【申请人】雷州市海威水产养殖有限公司
【公开日】2015年6月10日
【申请日】2015年4月7日