具有pH响应性的控释氢氧化钙微胶囊及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种氢氧化钙制剂微胶囊及其制备方法，特别涉及一种具有pH响应性的控释氢氧化钙微胶囊及其制备方法。
【背景技术】
[0002]在口腔内科的治疗中，氢氧化钙具有抗菌、消炎、促进成骨等特点，因此氢氧化钙被广泛应用于根管内临时封药、盖髓、根管充填，以及对于根管侧穿、牙根吸收和牙齿创伤等方面的治疗(Z.Mohammadi PMHD.Properties and applicat1ns of calcium hydroxidein endodontics and dental traumatology.1nternat1nal Endodontic Journal 2011 ；44:697-730.)。但纯氢氧化钙粉剂作用于局部组织，易造成局部环境pH突然升高至12.0以上，破坏局部组织微环境的平衡，导致局部组织坏死、激活破骨细胞分化因子表达、下调骨保护素的表达等。因此，亟需制备一种具有控释缓释能力的氢氧化钙释放系统。
[0003]缓释控释给药系统具有用药少、目标性强的优点，药物微胶囊化技术是实现药物缓释和控释的重要技术途径之一。药物微胶囊化是指采用特定技术利用天然、合成或半合成高分子材料将药物包裹(形成微囊)或将材料分散于高分子载体中(形成微胶囊)。药物微胶囊化具有降低药物毒性、延长药效、提高药物稳定性等优势，一直是药剂学领域的重要研究内容。随着口腔医学、高分子物理与化学和药剂学等学科的交叉融合，将药物微胶囊化引入口腔医学领域，解决口腔临床治疗及用药的存在的具体问题具有极其重要的实践意义。已有学者针对药物微胶囊化在口腔医学领域中的运用有所研究，如Inanc等(InaneB，Eser EAjKoc A, et al.Encapsulat1n and osteoinduct1n of human per1dontalligament fibroblasts in chitosan-hydroxyapatite microspheres[J].J B1med MaterRes A, 2007, 82(4):917-926.)通过使用壳聚糖包覆牙周膜细胞，将细胞微囊与羟磷灰石复合形成三维组织支架，用于牙周组织工程研究。Zhang等(Zhang ff, Walboomers XF, JansenJA.The format1n of tertiary dentin after pulp capping with a calcium phosphatecement, loaded with PLGA microparticles containing TGF-betal[J].J B1med MaterRes A, 2008，85(2):439-444.)使用PLGA制备转化生长因子β I微胶囊，利用TGF-β I能够促进牙髓细胞中未分化间充质细胞向成牙本质细胞转化的特点，延长释放TGF-βΙ，达到促进牙本质形成的目的。Perets 等(Perets A, Baruch Y, Weisbuch F，et al.Enhancing thevascularizat1n of three-dimens1nal porous alginate scaffolds by incorporatingcontrolled release basic fibroblast growth factor microspheres[J].J B1med MaterRes A, 2003, 65A(4):489-497.)使用PLGA包覆成纤维细胞生长因子，用于组织工程促进局部组织修复。但是迄今，口腔领域关于微胶囊药物控释系统的研究还比较局限。目前的氢氧化钙微胶囊存在以下缺陷:
[0004]I)现有氢氧化钙制剂微胶囊虽然具有一定程度的氢氧化钙缓释作用，但仍存在早期的突释问题。
[0005]2)现有氢氧化钙制剂微胶囊没有明显的pH响应性，无法具有针对性的在口腔局部炎性的微环境中释放。
【发明内容】
[0006]本发明的目的在于提供一种制备氢氧化钙控释微胶囊的方法，该方法制备的氢氧化钙制剂微胶囊具有PH响应性的，并进一步大大降低了突释现象。
[0007]本发明提供的具有pH响应性的氢氧化钙控释微胶囊的制备方法，包括如下步骤:
[0008]I)将壳聚糖溶于醋酸溶液中，加入氢氧化钙微胶囊制剂，在转速为800-1200rpm，搅拌8-12min ;所述含壳聚糖的添加量为每10mL醋酸溶液添加30_50mg壳聚糖；所述醋酸溶液的质量百分浓度为0.8-1.2% ;所述氢氧化钙微胶囊制剂的添加量为每10mL醋酸溶液 200-400mg ；
[0009]2)将pH值为13.0的NaOH溶液以5_7mL/min的滴速滴入步骤I的反应体系中，同时进行机械搅拌，搅拌转速为800-1200rpm ；
[0010]3)步骤2)的反应体系的pH升至10.0时停止滴加NaOH溶液，继续机械搅拌，转速为 800-1200rpm，搅拌 15_25min ；
[0011]4)停止搅拌，离心，取沉淀物，冻干得到具有pH响应性的控释氢氧化钙微胶囊。
[0012]在本发明的一个技术方案中，所述氢氧化钙微胶囊制剂为以乙基纤维素(EC)或乙基纤维素与聚乳酸(PLA)共混物为壳材料的载有氢氧化钙的微胶囊。
[0013]在本发明的又一个技术方案中，所述氢氧化钙微胶囊制剂中壳材料为乙基纤维素、或乙基纤维素与聚乳酸以质量比为4:1?1:4的混合物；优选为所述氢氧化钙微胶囊制剂中壳材料为乙基纤维素、或乙基纤维素与聚乳酸以质量比为4:1、1:1或1:4的混合物。
[0014]在本发明的一个优选的技术方案中，所述氢氧化钙微胶囊制剂为以乙基纤维素(EC)作为壳材料的载有氢氧化?丐的微胶囊。
[0015]在本发明一个优选的技术方案中，所述氢氧化钙微胶囊制剂中氢氧化钙的载药量为70%以上，如77.2-86.7%, 79.4-8.64%。所述百分含量为重量百分含量。
[0016]在本发明的一个优选的技术方案中，所述氢氧化钙微胶囊制剂的粒径为513-3489nm,优选 513_1383nm。
[0017]在本发明一个优选的技术方案中，所述步骤I)中，所述壳聚糖的添加量为每10mL醋酸溶液添加40mg壳聚糖；所述醋酸溶液的质量百分浓度为I 所述氢氧化钙微胶囊制剂的添加量为每10mL醋酸溶液300mg。
[0018]在本发明又一个优选的技术方案中，所述步骤2)中，所述pH值为13.0的NaOH溶液以6mL/min的滴速滴入步骤I)的反应体系中，同时进行机械搅拌，搅拌转速为lOOOrpm。
[0019]在本发明再一个优选的技术方案中，所述步骤3)中，转速为100rpm,搅拌20min。
[0020]在本发明另一个优选的技术方案中，所述步骤I)中，将壳聚糖溶于醋酸溶液中，加入氢氧化I丐微胶囊制剂，在转速为100rpm,搅拌lOmin。
[0021]具体的，上述氢氧化钙微胶囊制剂可以按照如下方法制备:将壳材料(纯EC或者质量比为4:1、1:1或1:4的EC和PLA共混物)2.4g溶于50mL 二氯甲烷，高速搅拌至完全溶解；将9.6g氢氧化I丐分散于上述壳材料的溶液中，机械搅拌2h,转速500rpm,形成一个稳定的、分散相呈细小微粒的分散体系，如图1中(a);将160mL石油醚缓慢加入反应体系中，滴速为2滴/秒，使连续相发生相分离，形成两个新相，一个是壳材料丰富相，另一个是壳材料缺乏相，如图1中(b);继续搅拌1.5h,转速500rpm,由于体系中存在降低表面自由能的自发倾向，可以自由流动的聚合物丰富相会在囊心分散相表面聚集，见如图1中(c);壳材料逐渐把囊心包裹，最后囊心周围的壳材料形成连续的包膜并固化，见图1中(d)，图1中(e);最后，将反应物过滤，石油醚洗涤两次，真空干燥得到氢氧化钙微胶囊制剂。
[0022]本发明制备pH响应性氢氧化钙控释微胶囊是在本研究组按上述方法制备出的氢氧化钙制剂微胶囊的基础上，包被壳聚糖