樟菇酸类化合物用以改善藻华现象的用图
【专利摘要】一种樟菇酸类化合物用以改善藻华现象的用途，该樟菇酸类化合物投于一淡水水体，以抑制该淡水水体中藻细胞的过度增殖；其中，该樟菇酸类化合物选自樟菇酸A、樟菇酸B、樟菇酸C、樟菇酸H或樟菇酸K。
【专利说明】
樟菇酸类化合物用以改善藻华现象的用途
技术领域
[0001] 本发明关于一种樟菇酸类化合物的用途，特别关于一种樟菇酸类化合物用以改善 藻华现象的用途。
【背景技术】
[0002] 藻华现象（algal bloom)又称为水体富营养化，为淡水水体中氮磷含量过高，超出 环境容量及自净能力，导致藻类过度增殖的现象，可能会造成饮用水源的污染，而对人体健 康造成危害。
【发明内容】
[0003] 本发明目的是提供一种樟菇酸类化合物用以改善藻华现象的用途，将樟菇酸类化 合物作为用以抑制藻细胞过度增殖的活性成分。
[0004] 本发明所述的樟菇酸类化合物用以改善藻华现象的用途，该樟菇酸类化合物投于 一淡水水体，以抑制该淡水水体中藻细胞的过度增殖；其中，该樟菇酸类化合物选自樟菇酸 A、樟燕酸B、樟燕酸C、樟燕酸Η或樟燕酸K。
[0005] 本发明所述的樟菇酸类化合物用以改善藻华现象的用途，其中，该樟菇酸类化合 物为樟菇酸Α，且以每个月一次，每次30~500 μ g/mL的投予剂量投予该淡水水体。
[0006] 本发明所述的樟菇酸类化合物用以改善藻华现象的用途，其中，该樟菇酸类化合 物为樟菇酸B，且以每个月一次，每次30~500 μ g/mL的投予剂量投予该淡水水体。
[0007] 本发明所述的樟菇酸类化合物用以改善藻华现象的用途，其中，该樟菇酸类化合 物为樟菇酸C，且以每个月一次，每次700~2500 μ g/mL的投予剂量投予该淡水水体。
[0008] 本发明所述的樟菇酸类化合物用以改善藻华现象的用途，其中，该樟菇酸类化合 物为樟菇酸H，且以每个月一次，每次30~500 μ g/mL的投予剂量投予该淡水水体。
[0009] 本发明所述的樟菇酸类化合物用以改善藻华现象的用途，其中，该樟菇酸类化合 物为樟菇酸K，且以每个月一次，每次30~500 μ g/mL的投予剂量投予该淡水水体。
[0010] 本发明的樟菇酸类化合物用以改善藻华现象的用途，借助以该樟菇酸类化合物作 为用以抑制藻细胞过度增殖的活性成分，以防止藻华现象所造成的饮用水源污染问题，达 到维护人体健康的功效。
【附图说明】
[0011] 图la :是樟菇酸A的化学结构式。
[0012] 图lb :是樟菇酸B的化学结构式。
[0013] 图lc :是樟菇酸C的化学结构式。
[0014] 图Id :是樟菇酸Η的化学结构式。
[0015] 图le :是樟菇酸Κ的化学结构式。
[0016] 图2a :是樟菇酸类化合物的总离子层析结果。
[0017] 图2b :是樟菇酸类化合物的选择性离子层析结果。
[0018] 图3a:是樟菇酸类化合物樟菇酸A对藻细胞存活率的影响(趋势线公式： y=92. 699*e~ (-0.0045757x)，R2=0. 9691)。
[0019] 图3b :是樟菇酸类化合物樟菇酸B对藻细胞存活率的影响(趋势线公式： y=106. 19*e~(-0. 0054494x)，R2=0. 98493)。
[0020] 图3c :是樟菇酸类化合物樟菇酸C对藻细胞存活率的影响(趋势线公式： y=89. 828*e~(-〇. 00088987x), R2=0. 90144)〇
[0021] 图3d:是樟菇酸类化合物樟菇酸H对藻细胞存活率的影响(趋势线公式： y=105. 09*e~ (-0. 0065006x)，R2=0. 98735)。
[0022] 图3e :是樟菇酸类化合物樟菇酸K对藻细胞存活率的影响(趋势线公式： y=84. 873*e~(-0· 010659x)，R2=0. 93987)。
【具体实施方式】
[0023] 为让本发明的上述及其他目的、特征及优点能更明显易懂，下文特举本发明的较 佳实施例，并配合附图，作详细说明如下： 本发明所述的"淡水水体"，泛指各种水累积之处，可以为河川、湖泊、池塘、溪涧等自然 水体，亦包含水库及港湾等人工水体。
[0024] 本发明的樟菇酸类化合物，可以投于一淡水水体，以抑制该淡水水体中藻细胞的 过度增殖，其中，该樟燕酸类化合物可以为樟燕酸六（zhankuic acid A，其化学结构式如图 la所示)、樟燕酸13 (zhankuic acid B，其化学结构式如图lb所示)、樟燕酸(3 (zhankuic acid C，其化学结构式如图lc所示)、樟^^|H(zhankuic acid H，其化学结构式如图Id所 示)、樟燕酸K (zhankuic acid K，其化学结构式如图le所示)。前述樟燕酸类化合物可以 为经人工合成的合成化合物，或者为萃取自牛樟芝等中草植物药材的天然化合物，于此不 加以设限。
[0025] 值得注意的是，该樟菇酸类化合物的投予剂量及使用频率可以依据藻华现象的形 成与否而有所不同。例如：于该淡水水体中尚未形成藻华现象时，可以借助该樟菇酸类化合 物的投予，以预防该淡水水体发生藻华现象，此时，该樟菇酸类化合物的使用频率可以为每 个月1次，且投予剂量可以为30~200 yg/mL(樟菇酸A、樟菇酸B、樟菇酸Η或樟菇酸K) 或700~1000 yg/mL(樟菇酸C);又或者，于该淡水水体中已形成藻华现象后，则可以借助 该樟菇酸类化合物的投予，促进过度增殖的藻细胞的死亡，以达到清除该淡水水体的藻华 现象，此时，该樟菇酸类化合物的使用频率可以为每个月1~2次，连续投予至少3个月，且 投予剂量可以为200~500 μ g/mL (樟燕酸A、樟燕酸B、樟燕酸Η或樟燕酸K)或1000~ 2500 yg/mL (樟燕酸0。
[0026] 为证实本发明樟菇酸类化合物确实具有抑制藻细胞的生长，进而可以作为用以改 善藻华现象的活性成分，遂进行以下试验： (A)樟菇酸类化合物的萃取、纯化 本试验取一牛樟芝（A? iroi/ia ci/Mamwea)样品，先行粉碎至粒径约为100 nm后，以 一乙醇水溶液(体积百分浓度为95%)进行萃取2小时(每公斤的牛樟芝样品以1~3公升 的乙醇水溶液进行萃取)，续进行减压浓缩，以获得一初萃物。
[0027] 续将该初萃物进行液相一液相分配萃取，将该初萃物溶于纯水后，加入等体积的 正己烷，均匀摇晃混合后，静置待其完全分层，以取得一水层溶液，将该水层溶液混合等体 积的乙酸乙酯，均匀摇晃混合后，静置待其完全分层，以取得一乙酸乙酯层溶液，将该乙酸 乙酯层溶液进行减压浓缩，以获得一乙酸乙酯层萃取物。
[0028] 以乙酸乙酯回溶该乙酸乙酯层萃取物后，吸附于硅胶颗粒，并将该硅胶颗粒充填 于管柱中，以水及氰甲烷的混合液作为流动相，以2 mL/min的流速进行冲提，以取得分别包 含樟菇酸A、樟菇酸B、樟菇酸C、樟菇酸Η及樟菇酸K的数个冲提液，续将该数个冲提液进行 洗结晶或再结晶，以获得超高纯度的樟菇酸Α、樟菇酸Β、樟菇酸C、樟菇酸Η及樟菇酸Κ。
[0029] 续将经由前述流程所获得的樟菇酸Α、樟菇酸Β、樟菇酸C、樟菇酸Η及樟菇酸Κ进 行总离子层析（total ion chromatogram，简称TIC)及选择性离子层析（selective ion monitoring，简称SIM)结果分别如图2a、图2b所示，而樟燕酸A、樟燕酸B、樟燕酸(3、樟燕 酸Η及樟燕酸K的质荷比（m/z)及滞留时间（retention time，简称RT)分别纪录于表1。
[0030] 表1、本试验各樟菇酸类化合物的质荷比及滞留时间。
[0031 ] 据此，即可以自该牛樟芝样品萃取、纯化出樟燕酸A、樟燕酸B、樟燕酸C、樟燕酸H、 樟菇酸K等五种樟菇酸类化合物。
[0032] (B)樟菇酸类化合物对藻细胞存活率的影响 本试验以铜绿微囊藻aeri/giflosa)的藻细胞进行测试，其为淡水产的藻 类，具有产毒性，故于过度增殖形成藻华后，可能会危害人体健康。
[0033] 分别将不同浓度的樟燕酸六、樟燕酸B、樟燕酸C、樟燕酸H、樟燕酸1(加入已培养至 稳定期的藻细胞中，以流式细胞仪观察72小时后的藻细胞存活率，结果分别如图3a~图3e 所示。
[0034] 依据图3a~图3e所示的结果可以得知，樟菇酸A、樟菇酸B、樟菇酸C、樟菇酸H、 樟菇酸K确实都可以抑制藻细胞的生长，且经计算可以得知，樟菇酸A、樟菇酸B、樟菇酸C、 樟燕酸 H、樟燕酸1(的 IC5(Jj(值分别为 135 yg/mL、138 yg/mL、658 yg/mL、114 yg/mL 及 50 iig/mL〇
[0035] 综合上述，本发明的樟菇酸类化合物用以改善藻华现象的用途，借助以该樟菇酸 类化合物作为用以抑制藻细胞过度增殖的活性成分，以防止藻华现象所造成的饮用水源污 染问题，达到维护人体健康的功效。
【主权项】
1. 一种樟菇酸类化合物用以改善藻华现象的用途，该樟菇酸类化合物投于一个淡水水 体，以抑制该淡水水体中藻细胞的过度增殖；其中，该樟菇酸类化合物选自樟菇酸A、樟菇 酸B、樟菇酸C、樟菇酸Η或樟菇酸K。2. 如权利要求1所述的樟菇酸类化合物用以改善藻华现象的用途，其特征在于：该樟 菇酸类化合物为樟菇酸Α，且以每个月一次，每次30~500 μ g/mL的投予剂量投予该淡水 水体。3. 如权利要求1所述的樟菇酸类化合物用以改善藻华现象的用途，其特征在于：该樟 菇酸类化合物为樟菇酸B，且以每个月一次，每次30~500 μ g/mL的投予剂量投予该淡水 水体。4. 如权利要求1所述的樟菇酸类化合物用以改善藻华现象的用途，其特征在于：该樟 菇酸类化合物为樟菇酸C，且以每个月一次，每次700~2500 μ g/mL的投予剂量投予该淡 水水体。5. 如权利要求1所述的樟菇酸类化合物用以改善藻华现象的用途，其特征在于：该樟 菇酸类化合物为樟菇酸H，且以每个月一次，每次30~500 μ g/mL的投予剂量投予该淡水 水体。6. 如权利要求1所述的樟菇酸类化合物用以改善藻华现象的用途，其特征在于：该樟 菇酸类化合物为樟菇酸K，且以每个月一次，每次30~500 μ g/mL的投予剂量投予该淡水 水体。
【文档编号】A01N45/00GK105935053SQ201510478790
【公开日】2016年9月14日
【申请日】2015年8月7日
【发明人】颜宏愷, 林财富, 翁顺祥
【申请人】美和学校财团法人美和科技大学