专利名称：高纯度绿原酸工业化生产工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及药物原料的制备工艺，特别是高纯度绿原酸工业化生产的工艺。
背景技术：
1.在马希汉等所撰写的“从杜仲叶中提取绿原酸纯品的研究”(参见《西北林学院学报》1996，11(2)58-60)中，采用氯仿脱脂、化学萃取、无机盐沉，此工艺方法未能有效的去除杜仲叶中的杂质(如蛋白质、胶体、纤维素)，使绿原酸很难溶出，且只适用于实验室小剂量制备。2.在汪洪武等所撰写的“杜仲叶中绿原酸类物质的提取研究”(参见《江西师范大学学报》(自然科学版)1997，21(4)339-341)中，采用的是溶剂提取、碱性Pb(OAc)和KOAc沉淀，再溶解萃取重结晶制得，但铅会在绿原酸产品中存有残留，含铅提取废液会对环境造成不良影响，因此，该方法不适宜工业化大规模生产。3.在戚向阳等撰写的《杜仲叶绿原酸的提取、分离和鉴定》(参见《植物资源与环境》1998，7(1)61-62)中，采用水浸提、101树脂分离、有机溶剂萃取纯化，其绿原酸的含量仅为24.33％。以上工艺技术未对绿原酸提取、纯化过程中的各种影响因素没有给以综合考虑和解决，均不能达到99％以上的含量和工业化生产的规摸。
发明内容
本发明正是为了克服上述现有技术中的不足之处而提出一种解决生产过程中绿原酸所含的酚羟基氧化、烯酸酯键水解和相继分子内酯基迁移而发生异构等问题；以及突破工业化生产得率低、含量达不到要求99％以上的瓶颈。
本发明高纯度绿原酸工业化生产工艺分如下步骤完成1.预处理加粉碎后的杜仲叶2至3倍重量的石油醚将杜仲叶进行脱酯，过滤后在杜仲叶中添加0.5-1％的生物复合酶制剂并放入密闭容器中储存24-36小时；其中复合生物酶制剂是由45％-65％纤维素酶、5％-10％蛋白酶和30％-45％果胶酶组成。
2.提取以杜仲叶重量的4-5倍、浓度为40％-60％的乙醇或丁醇，在40℃-50℃温度下提取0.5-1小时，用相同的条件提取两次，离心过滤并压榨；
3.提纯在提取液中添加2％-3％复合还原溶媒，这种复合还原溶媒由是具有较强还原性的无机盐组成，如由85％-95％硫代硫酸钠和5％-15％亚硫酸氢钠组成。将加有还原溶媒的提取液浓缩后用浓盐酸调pH至2-3，加浓缩液3-4倍的乙酸乙酯萃取两次，得乙酸乙酯层，其中加入3％-5％NaOH液中和使乙酸乙酯中的绿原酸进入水相，水相分离后再用浓盐酸酸沉析出绿原酸沉淀，沉淀分离后用少量的乙酸乙酯不完全溶解重结晶，干燥即得绿原酸粗品，含量一般为95％-98％左右，提取率约2.7％；4.成品精制绿原酸粗品和去离子水以1∶3或1∶4的料液比，在连续通99.99％的高纯氮气，保持正压，压差＞5Pa的条件下，溶解并加入8％-10％活性碳加热到50-60℃回流0.5-1小时、过滤、冷却结晶，结晶用2-5倍的分析纯丙酮清洗、真空干燥获得99％以上高纯度绿原酸。
说明书附图为本发明的详细工艺流程图。
以下是本发明与现有技术相比所具有的积极效果1.添加生物复合酶提高绿原酸的溶出率和还原溶媒保护绿原酸分子基团避免被氧化技术是高纯度绿原酸生产的重大突破，本发明的使用，使申请人首家完成工业化规模生产高纯度绿原酸(含量99％以上)的企业，年产量达到500公斤。
2.绿原酸纯度达到99％以上，完全能满足生产冻干粉针的各项指标。
3.溶剂用量少，产品溶剂残留可达到国家有关要求和各项指标具体实施方案实施例1一种高纯度绿原酸工业化生产工艺，是将粉碎过的杜仲叶，用2倍的石油醚将杜仲叶进行脱酯，并在其中添加1％的，由65％纤维素酶、5％蛋白酶和30％果胶酶组成的生物复合酶制剂，处理24时，再用4倍的40％乙醇溶液分2次在40℃回流提取，第1次0.5小时，第2次0.5小时，每次提取后过滤，合并滤液，在滤液中添加3％的，由90％硫代硫酸钠、10％亚硫酸氢钠组成的复合还原溶媒，并将滤液液浓缩后用浓盐酸调pH至2，加3倍乙酸乙酯萃取2次，得乙酸乙酯层。加入3％NaOH液中和，水相再用浓盐酸酸沉析出绿原酸，分离后用少量的乙酸乙酯不完全溶解重结晶，干燥即得绿原酸粗品。将绿原酸粗品以1∶4的料液比，在连续通入99.99％的高纯氮气保持正压，压差＞5Pa的条件下，在水中加入10％活性炭回流0.5小时、过滤、冷却结晶，结晶用0.5倍的分析纯丙酮清洗、真空干燥获得含量为99.25％高纯度绿原酸。
实施例2一种高纯度绿原酸工业化生产工艺，是将粉碎过的杜仲叶，用2倍的石油醚将杜仲叶进行脱酯，并在其中添加1％的，由45％纤维素酶、10％蛋白酶和45％果胶酶组成生物复合酶制剂，处理28时，再用6倍的50％乙醇溶液分2次在45℃回流提取，第2次0.5小时，第2次1小时，每次提取后过滤，合并滤液，在滤液中添加3％的，由85％硫代硫酸钠、15％亚硫酸氢钠组成的复合还原溶媒，并将滤液液浓缩后用浓盐酸调pH至2.5，加3倍乙酸乙酯萃取2次，得乙酸乙酯层。加入4％NaOH液中和，水相再用浓盐酸酸沉析出绿原酸，分离后用少量的乙酸乙酯不完全溶解重结晶，干燥即得绿原酸粗品。将绿原酸粗品以1∶5的料液比，在连续通入99.99％的高纯氮气保持正压，压差＞5Pa的条件下，在水中加入10％活性炭回流0.5小时、过滤、冷却结晶，结晶用0.5倍的分析纯丙酮清洗、真空干燥获得含量为99.76％高纯度绿原酸。
实施例3一种高纯度绿原酸工业化生产工艺，是将粉碎过的杜仲叶，用2倍的石油醚将杜仲叶进行脱酯，并在其中添加1％生物复合酶制剂(同实施例1相同)处理32时，再用6倍的60％乙醇溶液分2次在50℃回流提取，第1次1小时，第2次1小时，每次提取后过滤，合并滤液，在滤液中添加3％的，由85％硫代硫酸钠、15％亚硫酸氢钠组成的复合还原溶媒，将滤液液浓缩后用浓盐酸调pH至3，加3倍乙酸乙酯萃取2次，得乙酸乙酯层。加入5％NaOH液中和，水相再用浓盐酸酸沉析出绿原酸，分离后用少量的乙酸乙酯不完全溶解重结晶，干燥即得绿原酸粗品。将绿原酸粗品以1∶5的料液比，在连续通入99.99％的高纯氮气保持正压，压差＞5Pa的条件下，在水中加入10％活性炭回流1小时、过滤、冷却结晶，结晶用1倍的分析纯丙酮清洗、真空干燥获得含量为99.99％高纯度绿原酸。
实施例4生产的工艺如实施例1所述，所不同的是用40％丁醇溶液作为提取液，获得绿原酸含量为99.56％。
实施例5生产的工艺如实施例2所述，所不同的是添加1％生物复合酶制剂，组成同实施例2，处理36时；4倍乙酸乙酯萃取3次，获得含量为99.52％绿原酸。
实施例6生产工艺如实施例2所述，所不同的是将绿原酸粗品以1∶3的料液比，在连续通入99.99％的高纯氮气保持正压，压差＞5Pa的条件下，在水中加入8％活性炭回流1小时，获得含量为99.7％绿原酸。
实施例7生产的工艺如实施例3所述，所不同的是添加3％的，由95％硫代硫酸钠、5％亚硫酸氢钠组成的复合还原溶媒，获得含量为99.89％绿原酸。
权利要求
1.一种高纯度绿原酸工业化生产工艺，其特征在于分如下步骤完成1.1预处理加粉碎后的杜仲叶2至3倍重量的石油醚将杜仲叶进行脱酯，过滤后在杜仲叶中添加0.5-1％的生物复合酶制剂并放入密闭容器中储存24-36小时；1.2提取以杜仲叶重量的4-5倍、浓度为40％-60％的乙醇或丁醇，在40℃-50℃温度下提取0.5-1小时，用相同的条件提取两次，离心过滤并压榨；1.3提纯在提取液中添加2％-3％复合还原溶媒，将提取液浓缩后用浓盐酸调pH至2-3，加浓缩液3-4倍的乙酸乙酯萃取两次，得乙酸乙酯层，其中加入3％-5％NaOH液中和使乙酸乙酯中的绿原酸进入水相，水相分离后再用浓盐酸酸沉析出绿原酸沉淀，沉淀分离后用少量的乙酸乙酯不完全溶解重结晶，干燥即得绿原酸粗品，含量一般为95％-98％左右，提取率约2.7％；1.4成品精制绿原酸粗品和去离子水以1∶3或1∶4的料液比，在连续通入99.99％的高纯氮气保持正压，压差＞5Pa的条件下，溶解并加入8％-10％活性碳加热到50-60℃回流0.5-1小时、过滤、冷却结晶，结晶用2-5倍的分析纯丙酮清洗、真空干燥获得99％以上高纯度绿原酸。
2.根据权利要求1所述的高纯度绿原酸工业化生产工艺，其特征在于所说的复合生物酶制剂是由45％-65％纤维素酶、5％-10％蛋白酶和30％-45％果胶酶组成的。
3.根据权利要求1所述的高纯度绿原酸工业化生产工艺，其特征在于所说的复合还原溶媒由是具有较强还原性的无机盐组成，如85％-95％硫代硫酸钠和5％-15％亚硫酸氢钠组成。
全文摘要
本发明涉及高纯度绿原酸工业化生产的工艺。是在工艺中添加了生物复合酶提高绿原酸的溶出率和还原溶媒保护绿原酸分子基团避免被氧化技术是高纯度绿原酸生产的重大突破，解决了工业化生产过程中绿原酸所含的酚羟基氧化、烯酸酯键水解和相继分子内酯基迁移而发生异构问题。该技术的使用，是首家完成工业化规模生产高纯度绿原酸的企业，年产量达到500公斤。本发明所生产的绿原酸纯度达到99％以上，完全能满足生产冻干粉针的各项指标。生产中溶剂用量少，产品溶剂残留可达到国家有关要求和各项指标。
文档编号C12P7/62GK1687435SQ20051002070
公开日2005年10月26日 申请日期2005年4月14日 优先权日2005年4月14日
发明者张洁, 张亮, 李鑫泉 申请人:四川九章生物化工科技发展有限公司