专利名称：一种产氨菌的培养方法及其应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种新的产氨微生物的培养方法及其应用。属于微生物腐蚀领域。
背景技术：
微生物腐蚀导致的后果相当严重，约占所有腐蚀的20％(A Review ofSome Characteristics of MIC Caused by Sulfate-reducing BacteriaPast，Present and Future，Anti-corrosion Methods and Materials[J]，Bradford，P.173-182)。铜和铜合金在清洁海水中有非常好的耐海水腐蚀性能，但在污染海水或富营养海水中其腐蚀速率却很高。在腐蚀部位若有机物的含量超过20％时，则这种腐蚀就非常可能是由生物造成的(Licina)。但是由于除硫酸盐还原菌外，人们对其他腐蚀性细菌的了解很少，所以给了解某些腐蚀性微生物的腐蚀机制及研究相关的防护技术带来了困难。
发明内容
本发明的目的是提供一种产氨菌的培养方法，使得该菌能够稳定、高效地产生氨。
本发明的另一目的是提供产氨菌在铜合金腐蚀中的应用，为微生物腐蚀和防护技术的研究提供方便有力的手段。
本发明所涉及的产氨菌为浅井氏葡萄杆菌(Gluconobacter asaii)725A，该菌株已于2004年9月1日在中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC)登记，保藏号为CCTCC NO.M204062。
本发明的菌株是从发生腐蚀的铜镍合金B30表面分离纯化出的。
本发明的产氨菌的培养方法，是先将该菌株接种于斜面培养基上进行培养，然后将该菌株从斜面培养基上取一环接种于液体培养基中培养，24h后接入产氨培养液中培养。
所述产氨菌斜面培养基的配方为葡萄糖5-10g，牛肉膏20-30g，蛋白胨2-5g，陈海水1000ml，pH值自然，琼脂20g；所述产氨菌液体培养基的配方为葡萄糖5-10g，牛肉膏20-30g，蛋白胨2-5g，陈海水1000ml，pH值自然；所述产氨菌产氨培养液的配方为蛋白胨1-5g，陈海水1000ml，pH7.2。
本发明的菌株在产氨培养液中培养后，具有良好的产氨性能，对铜合金具有明显的腐蚀作用。
本发明的效果将产氨菌在产氨培养液中培养24h，向培养液中滴加奈氏试剂，溶液产生黄棕色沉淀，这说明该菌具有良好的产氨性能。将铜合金放在含产氨菌的培养液中浸泡后，产生了明显的腐蚀，为研究微生物的腐蚀机制和防护技术提供方便有力的手段。
图1为铜镍合金B30在含产氨菌的培养液中浸泡30天后的腐蚀形貌。
图2为高锰铝青铜在含产氨菌的培养液中浸泡30天后的腐蚀形貌。
具体实施例方式
实施例1实验室条件下，采用分离后的保藏菌种浅井氏葡萄杆菌(Gluconobac ter asaii)725A CCTCC NO.M204062，在30℃于斜面培养基上(配方为葡萄糖10g，牛肉膏20g，蛋白胨5g，陈海水1000ml，pH值自然，琼脂20g。)培养两天，然后用接种针取一环接种于液体培养基上。产氨菌液体培养基的配方为海水1000ml，5g蛋白胨，30g牛肉膏，10g葡萄糖，pH值为7.2，在灭菌锅中高温高压杀菌。按10％的菌种比例接入腐蚀实验瓶中，将B30试样浸入含菌溶液，温度为室温22℃，一个月后取出，清除试样表面腐蚀产物，进行表面电镜分析，得到如图1所示的腐蚀效果。
由图1可以看出，B30表面发生了严重的点蚀，蚀孔密度达到20个/cm2，蚀孔深度和宽度也表现出很严重的腐蚀。
实施例2将斜面培养基上的新鲜浅井氏葡萄杆菌(Gluconobacter asaii)725ACCTCC NO.M204062用接种针取一环接种于液体培养基(葡萄糖5g，牛肉膏20g，蛋白胨5g，陈海水1000ml)，培养24h后，按15％比例接入已灭菌的产氨培养液中。产氨培养液配方如下蛋白胨5g，陈海水1000ml，pH7.2。将高锰铝青铜试样浸入含菌溶液，一个月后取出，清除试样表面腐蚀产物，进行表面电镜分析，得到如图2所示的腐蚀效果。
由图2可以看出，高锰铝青铜表面也发生了点蚀。
权利要求
1.一种产氨菌的培养方法，是先将该菌株接种于斜面培养基上进行培养，然后接种于液体培养基中培养，最后接入产氨培养液中培养。
2.根据权利要求1所述的产氨菌的培养方法，其特征是所述斜面培养基的配方为葡萄糖5-10g，牛肉膏20-30g，蛋白胨2-5g，陈海水1000ml，pH值自然，琼脂20g。
3.根据权利要求1所述的产氨菌的培养方法，其特征是所述液体培养基的配方为葡萄糖5-10g，牛肉膏20-30g，蛋白胨2-5g，陈海水1000ml，pH值自然。
4.根据权利要求1所述的产氨菌的培养方法，其特征是所述产氨培养液的配方为蛋白胨1-5g，陈海水1000ml，pH7.2。
5.一种产氨菌在铜合金腐蚀中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种产氨菌的培养方法及其应用，该方法是先将菌株在斜面培养基上进行培养，然后接种于液体培养基中培养，最后接入产氨培养液中培养产氨。通过优化培养基和培养条件，使该菌繁殖快，产氨量稳定。将铜合金放在含产氨菌的培养液中浸泡后，产生了明显的腐蚀，为研究微生物的腐蚀机制和防护技术提供方便有力的手段。
文档编号C12N1/20GK1702170SQ20051004229
公开日2005年11月30日 申请日期2005年4月8日 优先权日2005年4月8日
发明者刘光洲, 段东霞, 黄国胜, 王军 申请人:中国船舶重工集团公司第七二五研究所