专利名称：包含具有非常规生物活性的甘氨酰-tRNA合成酶的组合物和方法
技术领域：
本发明通常涉及甘氨酰-tRNA合成酶(GlyRS)多肽、包含该多肽的组合物、和使用该多肽的方法。相关技术的描述在翻译过程中，催化tRNA分子氨酰化的氨酰-tRNA合成酶对于遗传信息的解码是必不可少的。每个真核生物的tRNA合成酶都由核心酶和附加于该核心酶氨基末端或羧基末端的另外的结构域组成，所述核心酶与tRNA合成酶的原核生物对应部分密切相关。例如，人酪氨酰-tRNA合成酶(TyrRS)具有的羧基末端结构域不是原核生物和低等真核生物 TyrRS分子的一部分。已经证实，数种氨酰tRNA合成酶具有不同于其参与翻译的非常规功能。例如，小酪氨酰tRNA合成酶(mini-tyrosyl tRNA)(小TyrRS)，即对应于氨基酸残基1_364并且被多形核细胞弹性蛋白酶和纤维蛋白溶酶切割的TyrRS的N末端结构域，表现出在全长蛋白中未发现的非常规生物活性。在体外，小TyrRS表现出刺激嗜中性粒细胞活化和趋化作用、 内皮细胞增殖和迁移，并且在鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)和小鼠基质胶分析中促进血管生成。 小TyrRS具有ELR基序，所述ELR基序与诸如IL-8的CXC趋化因子相似，参与多种其趋化因子或血管生成活性。与其它包含ELR的细胞因子一样，该基序的突变抑制小TyrRS结合并刺激白细胞和血管生成。
此外，已经证实，TrpRS的截短形式具有抗血管生成的特性。在正常的人细胞中，可以检测到两种形式的TrpRS:由全长分子(氨基酸残基1-471)构成的主要形式和次要的截短形式。所述次要形式是通过前体mRNA的其它剪接使氨基末端结构域缺失而产生的并且被称为小TrpRS。已经确定，小TrpRS的氨基末端是位于全长TrpRS分子的位置48处的蛋氨酸残基。可选择地，可以通过蛋白质水解产生截短的TrpRS。例如，牛TrpRS在胰腺中高表达并被分泌进胰液中，由此产生截短的TrpRS分子。其它的研究表明，小TrpRS抑制VEGF 诱导的细胞增殖和迁移(Wakasugiet al.，Proc. Natl. Acad. Sci. 99 173-177 (2002))。尤其是，鸡CAM分析表明，小TrpRS阻断VEGF的血管生成活性。相比之下，全长TrpRS不抑制血管生成。因此，移除前48个氨基酸残基可以暴露TrpRS的抗血管生成的活性。因此，与 TyrRS 一样，某些形式的TrpRS具有除tRNA的氨酰化之外的活性。 鉴于对于其他形式的TyrRS和TrpRS相关的非常规活性和治疗相关活性的这些发现，有必要鉴定其它氨酰tRNA合成酶蛋白的生物学相关的形式，从而开发出该蛋白家族的全部治疗潜能。因此，本发明满足这些需要并且提供其他相关的优势。发明概述本发明源于下述发现甘氨酰-tRNA合成酶(GlyRS)和衍生于GlyRS的某些多肽具有治疗相关的非常规生物活性。因此，一方面，本发明提供具有至少一种非常规生物活性的分离的GlyRS多肽，以及基本上保留所述非常规活性的所述多肽的活性片段和变体。 本文使用的“非常规活性”通常是指本发明的GlyRS多肽所具有的、除了将甘氨酸添加至 tRNAay分子以外的活性。如本文详述，在某些实施方案中，本发明GlyRS多肽表现出的非常规生物活性可以包括，但不限于，细胞增殖的调节、凋亡的调节、细胞迁移的调节、细胞信号转导的调节和/或细胞因子产生和/或分泌的调节。在更具体的实施方案中，所述活性包括Akt介导的细胞信号转导的调节、Erkl/2介导的细胞信号转导的调节和GPCR介导的细胞信号转导的调节、内皮细胞成管的调节和细胞结合的调节。在其他的具体的实施方案中， 所述活性包括CD71和/或CD80的调节。在其他的具体的实施方案中，所述活性包括细胞因子产生和/或释放的调节，其中所述细胞因子选自TNF-α、ILl-β、IL_6、IL_8、IL-10、 IL-12p40, MIPl-α、MIP-I β、GRO- α、MCP-I 禾口 IL—lra。在某些实施方案中，本发明的GlyRS多肽是全长哺乳动物GlyRS蛋白的连续片段。 在更具体的实施方案中，GlyRS多肽是SEQ ID NO :1所示的人GlyRS蛋白序列的连续片段。 作为说明，所述片段基本上可以为任何长度，只要其保留至少一种目的非常规生物活性。在某些示例性实施方案中，本发明GlyRS多肽的大小在长度上为约50-100、50-200、50-300、 50-400,50-500或50-600个氨基酸。在其他的实施方案中，本发明GlyRS多肽的大小在长度上为约100-200、100-300、100-400、100-500或100-600个氨基酸。在其他的示例性实施方案中，本发明GlyRS多肽的大小在长度上为约200-300、200-400、200-500或200-600个氨基酸。在本发明的其他实施方案中，GlyRS多肽包含GlyRS蛋白序列的片段的活性变体 (即，保留至少一种目的非常规生物活性)，所述GlyRS蛋白序列例如SEQ ID N0:1所示的人GlyRS蛋白序列。在更具体的实施方案中，所述活性变体是这样的多肽，该多肽沿其长度与SEQ ID NO :1所示的人甘氨酰-tRNA合成酶序列具有至少70%、80%、90%、95%或99% 同一性。本发明的其他实施方案提供了天然存在的或非天然存在的GlyRS剪接变体和突变体，其具有如本文所描述的一种或多种非常规活性。在本发明更具体的实施方案中，GlyRS多肽包含GlyRS序列(例如，SEQ ID NO 1)的片段，所述片段基本上由氨基酸残基57-685、214-685、239-685、311-685、439-685、 511-658、214-438、367-438、214-420、214-338、85-127 或 25-56、1-213、1-61、85_214、 333-685、128-685、265-685或483-685、或以上的活性片段或变体组成，所述活性片段或变体基本上保留至少一种目的非常规生物活性。
在其他具体的实施方案中，所述GlyRS多肽不是NCBI#CR594947、U09587和/或 U09510任一项所示的多肽。按照本发明的另一方面，提供了包含至少一种如本文所述的GlyRS多肽和异源融合伴侣的融合蛋白。按照本发明的另一方面，提供了编码本文所述的多肽和融合蛋白的分离的多核苷酸、以及包含这些多核苷酸的表达载体和包含这些表达载体的宿主细胞。按照本发明的另一方面，提供了组合物，例如药学组合物，其包含生理可接受的载体和至少一种本文所述的本发明的分离的多肽、融合蛋白、抗体、分离的多核苷酸、表达载体、宿主细胞等。 在其它方面，本发明还提供了通过将细胞或组织与本文所述的本发明的组合物接触而调节细胞活性的方法，其中所述待调节的细胞活性选自细胞增殖、凋亡的调节、细胞迁移的调节、细胞信号转导的调节和/或细胞因子产生和/或分泌的调节。在更具体的实施方案中，所述细胞活性选自Akt介导的细胞信号转导的调节、Erkl/2介导的细胞信号转导的调节、GPCR介导的细胞信号转导的调节、内皮细胞成管的调节、和细胞结合的调节。在其他具体的实施方案中，所述细胞活性选自CD71和/或CD80的调节。在其他具体的实施方案中，所述细胞活性选自细胞因子产生和/或释放的调节，例如，其中所述细胞因子选自 TNF-α、ILl-β、IL-6、IL-8、IL-10、IL_12p40、MIPl_α ,MIP-I β、GRO-α ,MCP-I和 IL-Ira0另一方面，本发明提供了通过给予本发明的组合物来治疗需要治疗的个体的疾病、病症或其他的疾病状态。作为示例，所述疾病、病症或疾病状态可以包括，但不限于，癌症、炎性疾病、免疫疾病(包括自身免疫性疾病)、异常造血活性相关的疾病、需要神经形成或神经保护的疾病、代谢性病症和/或异常血管生成相关的疾病状态。另一方面，所述多核苷酸、多肽、抗体和/或本发明的其他组合物基本上可以用于本领域内已知的并且可用的任何类型的筛查分析。例如，本发明的组合物(例如，多肽、多核苷酸和/或抗体)可以与已知的筛查方法联合使用，从而鉴定出适合于本发明的治疗的合适的细胞类型和/或疾病状态。在其他的实例中，本发明的组合物(例如，多肽、多核苷酸和/或抗体)可以与已知的筛查方法联合使用，从而鉴定出直接或间接地介导或调节本文组合物的非常规活性的激动剂、拮抗剂、结合伴侣、竞争性抑制剂、细胞效应物等。例如， 在具体的实施方案中，提供了鉴定受试化合物作为非常规活性的抑制剂或增强剂或作为本发明的组合物与一种或多种受调节的该组合物的结合伴侣、细胞效应物和/或细胞类型之间的相互作用的抑制剂或增强剂的筛查方法。例如，所述方法可以包括以下步骤形成包括以下的反应混合物(i)本发明的组合物，( )已知被所述组合物结合和/或调节的结合伴侶、细胞效应物和/或细胞类型，和(iii)受试化合物；并且检测在该受试化合物的存在下结合和/或调节是否增加或减少。相对于不存在受试化合物时的效应，受试化合物存在时的活性或调节的统计学显著的改变(增强或抑制)表明结合和/或活性的潜在激动剂(模拟剂或增强剂)或拮抗剂(抑制剂)。序列表简要说明SEQ ID NO=I是人细胞质甘氨酰_tRNA合成酶(GlyRS)的全长氨基酸序列。SEQ ID NO 2是编码SEQ ID NO 1的GlyRS多肽的核酸序列。SEQ ID NOs :3_9代表在确定GlyRS片段边界中所分析的示例性肽序列(参见实施例4和表1)。SEQ ID NOs 10和11是在鉴定LPS处理的小鼠巨噬细胞所分泌的片段中使用的 GlyRS序列(参见实施例12和
图16)。附图简要说明图1A-1D显示的是GlyRS蛋白的结构域结构和氨基酸序列(图IB ；SEQ ID NO 1)，以及通过使用人嗜中性粒细胞弹性蛋白酶进行的受控制的全长GlyRS蛋白水解而产生的GlyRS片段的SDS-PAGE分离。图2A-2B分别表明用本发明GlyRS片段处理的内皮细胞中Akt和Gi-GPCRs的激活。图3表明用本发明GlyRS片段处理的单核细胞中Erkl/2(促分裂原活化蛋白激酶 Erkl和Erk2)的激活。图4A描述了为了确定GlyRS片段边界而进行的GlyRS肽(例如，SEQID NO 9)的分析过程的概况。图4B显示了在全长人GlyRS二聚体的晶体结构中，对应于氨基酸214-438 的GlyRS片段G6的结构。图5表明对应于氨基酸214-438的GlyRS片段G6与内皮细胞结合。图6表明GlyRS片段G6调节单核细胞的迁移。图6 (插入图)表明GlyRS片段G6 通过选择趋化因子受体进行信号转导。图7A显示⑶41+集落的代表性染色。图7B表明小集落、中集落和大集落的定量结果，并且表明GlyRS片段G6影响巨核细胞祖细胞的集落形成。图8显示用抗⑶71-FITC抗体染色并通过流式细胞仪分析后，G6_3处理的单核细胞中⑶71增殖标志物的上调。图9显示用抗⑶80-FITC抗体染色并通过流式细胞仪分析后，G6_3处理的单核细胞中⑶80活化标志物的上调。图10表明GlyRS和G6片段刺激多种细胞因子的分泌，所述细胞因子包括ILl- β、 IL-6、IL-8、IL-10、IL_12p40、MIPl- α、MIP-I β、GRO- α、MCP-I 和 IL-Ira0图IlA和IlB表明GlyRS片段G6和G6-3诱导小鼠白血病巨噬细胞的迁移。图12表明GlyRS片段G6诱导HL-60早幼粒细胞性白血病细胞的迁移。图13表明在小鼠巨噬细胞的细胞裂解物和培养基中均可检测到GlyRS，这表明全长GlyRS的内源性分泌。图14表明用LPS处理小鼠巨噬细胞的情况下，在分泌的培养基中可以发现GlyRS 的特异性片段，但在细胞裂解物中不能发现GlyRS的特异性片段，这表明GlyRS片段的产生和分泌。图15表示用LPS处理小鼠巨噬细胞以后，为了鉴定片段产生自哪部分的全长蛋白而进行的LC/MS/MS分析的结果。图16A显示了上清条带9的序列信息，所述上清条带9为分子量为约45_50kd的 GRS片段，加粗部分显示相关的肽序列。图16B显示了上清条带18的序列信息，所述上清条带18为分子量为约15kd的GRS片段，加粗部分显示相关的肽序列。发明的详细描述除非文中有明确相反指示，本发明的实践可利用本技术领域内的常 规分子生物学方法和重组DNA技术，为了说明的目的，其中很多方法和技术在下文进行了描述。这些技术在文献中有充分的讲解。参见，例如，Sambrook，et al., Molecular Cloning :A Laboratory Manual (分子克隆实验手册)(第 2 版，1989)； Maniatis et al. , Molecular Cloning :A LaboratoryManual (分子克隆实验手册)(1982) ;DNA Cloning :A Practical Approach (DNA 克隆操作方法)，vol. I&II(D. Glover, ed.) ；OligonucleotideSynthesis(寡核苷酸合成)(N. Gait, ed.， 1984) ；Nucleic Acid Hybridization (核酸杂交)(B. Hames&S. Higgins, eds.，1985)； Transcription andTranslation (转录禾口番羽译)(B. Hames&S. Higgins, eds. , 1984) ；Animal CellCulture (动物细胞培养)(R.Freshney，ed.，1986) ；A Practical Guide toMolecular Cloning (分子克隆操作指南)(B. Perbal，ed.，1984)。本文引用的所有出版物、专利、专利申请通过引用的方式将其全部内容并入本文。在本说明书和附加的权利要求中所用的单数形式、”、“皿”、“让6”包括复数形式， 除非文中明确指示不包括复数。本文所用的术语“多肽”和“蛋白”以常规含义使用，即氨基酸序列。多肽不被限制为特定的长度，但是，在本发明的背景下，其通常代表全长蛋白的片段，并且可以包括诸如糖基化、乙酰化、磷酸化等的翻译后修饰以及本领域内已知的其他修饰，并且包括天然存在的或非天然存在的修饰。可以使用多种公知的重组技术和/或合成技术来制备本发明的多肽和蛋白，这些技术的示例性实例将在下文进一步讨论。甘氨酰tRNA合成酶多肽 本发明通常涉及分离的GlyRS多肽、编码该多肽的多核苷酸、与该多肽结合的结合剂、该多肽的类似物、变体和片段等，以及使用上述任何物质的组合物和方法。因此，按照本发明的一方面，提供了具有治疗相关的非常规活性的GlyRS多肽，以及包含所述GlyRS多肽的组合物。在某些实施方案中，GlyRS多肽是GlyRS蛋白的截短的形式。本文所用的“截短的”GlyRS是指短于其对应的全长GlyRS蛋白的甘氨酰-tRNA合成酶蛋白，例如，由于从所述全长GlyRS蛋白N末端和/或C末端移除氨基酸。截短的程度， 即从全长GlyRS蛋白移除的N末端和/或C末端氨基酸残基的数量，可以明显不同，但是如本文所述，当给予细胞、组织或个体时，仍然提供所需的细胞效应。在某些实施方案中，从全长GlyRS蛋白的N末端和/或C末端截去至少约5、10、15、20、25、50、75、100、150、200、250、 300、350个氨基酸或更多，包括所有中间的长度。中间的长度意图包括之间的所有整数，例如，6、7、8 等，51、52、53 等，201、202、203 等。在某些示例性的实施方案中，可以使用本领域内已知的和可得到的技术、使用多种蛋白水解酶中的任何一种来产生截短的GlyRS多肽。示例性的蛋白酶包括，例如，无色肽酶、氨肽酶、安克洛酶、血管紧张素转换酶、菠罗蛋白酶、钙蛋白酶、钙蛋白酶I、钙蛋白酶 II、羧肽酶A、羧肽酶B、羧肽酶G、羧肽酶P、羧肽酶W、羧肽酶Y、半胱天冬酶1、半胱天冬酶2、 半胱天冬酶3、半胱天冬酶4、半胱天冬酶5、半胱天冬酶6、半胱天冬酶7、半胱天冬酶8、半胱天冬酶9、半胱天冬酶10、半胱天冬酶11、半胱天冬酶12、半胱天冬酶13、组织蛋白酶B、 组织蛋白酶C、组织蛋白酶D、组织蛋白酶E、组织蛋白酶G、组织蛋白酶H、组织蛋白酶L、木瓜凝乳蛋白酶、胃促胰酶、胰凝乳蛋白酶、梭菌蛋白酶、胶原酶、补体Clr、补体Cls、补体因子D、补体因子I、黄瓜素、二肽基肽酶IV、弹性蛋白酶(白细胞)、弹性蛋白酶(胰腺)、内蛋白酶Arg-C、内蛋白酶Asp-N、内蛋白酶Glu-C、内蛋白酶Lys-C、肠激酶、因子Xa、 无花果蛋白酶、弗林蛋白酶、粒酶A、粒酶B、HIV蛋白酶、IGase、组织激肽释放酶、亮氨酸氨基肽酶(总的)、亮氨酸氨基肽酶(细胞溶质的)、亮氨酸氨基肽酶(微粒体的)、基质金属蛋白酶、蛋氨酸氨基肽酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、纤维蛋白溶酶、氨酰基脯氨酸二肽酶、链酶蛋白酶E、前列腺特异性抗原、来自灰色链霉菌(Sti^ptomyces griseus)的碱性蛋白酶、 来自曲霉属(Aspergillus)的蛋白酶、来自佐氏曲霉(Aspergillus saitoi)的蛋白酶、来自酱油曲霉(Aspergillus sojae)的蛋白酶、蛋白酶(地衣芽孢杆菌(B. Iicheniformis)) (碱性的或碱性蛋白酶)、来自多黏芽孢杆菌(Bacillus polymyxa)的蛋白酶、来自芽孢杆菌(Bacillus sp.)的蛋白酶、来自根霉菌(Rhizopus sp.)的蛋白酶、蛋白酶S、蛋白酶体、 来自米曲霉(Aspergillus oryzae)的蛋白酶、蛋白酶3、蛋白酶Α、蛋白酶K、蛋白C、焦谷氨酸氨基肽酶、凝乳酶、链激酶、枯草杆菌蛋白酶、嗜热菌蛋白酶、凝血酶、组织纤维蛋白溶酶原激活剂、胰蛋白酶、类胰蛋白酶和尿激酶。在某些实施方案中，本发明提供了本文所述的GlyRS多肽的变体。本发明某些示例性实施方案所包括的多肽变体通常沿其长度表现出与野生型GlyRS蛋白的对应的区的至少约 70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或 99% 的同一性(按照下文所述测定)，所述野生型GlyRS蛋白例如SEQ ID NO :1。多肽变体与天然存在的GlyRS多肽的区别可以是一个或多个取代、缺失、添加和/ 或插入。这些变体可以是天然存在的或可以是合成产生的，例如，通过修饰一个或多个本发明的上述多肽序列并按照本文所述用本领域内公知的多种技术中的任何一种评估其生物活性。在其他的示例性实施方案中，GlyRS变体可以是天然存在的或非天然存在的剪接变体，其中所述剪接变体具有至少一种非常规活性，例如本文所述的非常规活性。在其他的示例性实施方案中，相对于野生型GlyRS多肽序列，所述变体包含一个或多个天然存在的或非天然存在的点突变，其中所述变体多肽具有至少一种非常规活性， 例如本文所述的非常规活性。在某些实施方案中，变体包含保守型取代。“保守型取代”是指氨基酸被具有相似性质的另一个氨基酸所取代，这样本领域技术人员会预测到基本上未改变的多肽的二级结构和亲水性。可以在本发明的多核苷酸和多肽的结构内进行修饰，并且仍可获得编码具有所需特性的变体或衍生多肽的功能分子。当希望改变多肽的氨基酸序列来产生等同的甚至改进的本发明的GlyRS多肽的变体时，例如，本领域技术人员可以根据表1改变编码DNA序列的一个或多个密码子。 例如，在蛋白结构中，某些氨基酸可以被其他的氨基酸取代，而不会造成与诸如受体、抗体的抗原结合区或底物分子的结合位点的结构的相互作用结合能力的明显损失。因为通常是蛋白的相互作用能力和性质限定该蛋白的生物功能活性，所以可以在蛋白序列中进行某些氨基酸序列取代，也当然可以在其基本的DNA编码序列中进行取代，而仍然获得具有相似性质的蛋白。因此，已考虑到可以在所公开的组合物的多肽序列或编码所述多肽的相应DNA序列中进行各种改变，而不会造成所需的功效或活性的明显损失。
表 权利要求
1.具有非常规生物活性的分离的甘氨酰-tRNA合成酶多肽或其活性变体。
2.如权利要求1所述的分离的甘氨酰-tRNA合成酶多肽，其中所述非常规生物活性选自细胞增殖的调节、凋亡的调节、细胞信号转导的调节、细胞迁移的调、节细胞活化和细胞因子产生和/或释放的调节。
3.如权利要求1所述的分离的甘氨酰-tRNA合成酶多肽，其中所述非常规生物活性选自Akt介导的细胞信号转导的调节、Erkl/2介导的细胞信号转导的调节和GPCR介导的细胞信号转导的调节、CD71的调节和CD80的调节。
4.如权利要求1所述的分离的甘氨酰-tRNA合成酶多肽，其中所述非常规生物活性选自细胞因子产生和/或释放的调节，其中所述细胞因子选自TNF-α、ILl-β、IL_6、IL_8、 IL-10、IL-12p40、MIPl-α、MIP-I β、GRO- α、MCP-I 和 IL-Ira0
5.如权利要求1所述的分离的甘氨酰-tRNA合成酶多肽，其中所述多肽是SEQID NO 1所示的全长人甘氨酰-tRNA合成酶序列的片段。
6.如权利要求1所述的分离的甘氨酰-tRNA合成酶多肽，其中所述其活性变体是这样的多肽该多肽沿其长度与SEQ ID N0:1所示的人甘氨酰-tRNA合成酶序列具有至少90% 同一性。
7.如权利要求1所述的分离的甘氨酰-tRNA合成酶多肽，其中所述多肽包含SEQ ID NO 1 的氨基酸残基 57-685、214-685、239-685、311-685、439-685、511-658、214-438、 367-438、214-420、214-338、85-127、1-213、1-61、85-214、333-685、128-685、265-685、 483-685或25-56，或以上的活性片段。
8.如权利要求3所述的分离的甘氨酰-tRNA合成酶多肽，其中所述多肽是全长人甘氨酰-tRNA合成酶的片段并且包含SEQ ID NO=I的氨基酸残基367-438或其活性片段。
9.融合蛋白，包含权利要求1-8中任一项所述多肽和异源融合伴侣。
10.编码权利要求1-9中任一项所述的多肽的分离的多核苷酸。
11.包含权利要求10所述的分离的多核苷酸的表达载体。
12.包含权利要求11所述的表达载体的宿主细胞。
13.包含至少一种权利要求1所述的分离的甘氨酰-tRNA合成酶多肽的二聚体复合物或多聚体复合物。
14.组合物，其包含生理可接受的载体和至少一种选自以下的组分(i)如权利要求1所述的分离的多肽；( )如权利要求9所述的融合蛋白；(iii)如权利要求10所述的分离的多核苷酸；(iv)如权利要求11所述的表达载体；(ν)如权利要求13所述的二聚体复合物或多聚体复合物；和(vi).与权利要求1所述的多肽结合的抗体或其抗原结合片段。
15.调节细胞活性的方法，包括使细胞或组织与权利要求14所述的组合物接触。
16.如权利要求15所述的方法，其中所述细胞活性选自细胞增殖的调节、凋亡的调节、 细胞信号转导的调节、细胞迁移的调节、细胞活化和细胞因子产生和/或释放的调节。
17.如权利要求15所述的方法，其中所述细胞活性选自Akt介导的细胞信号转导的调节、Erkl/2介导的细胞信号转导的调节和GPCR介导的细胞信号转导的调节、CD71的调节和⑶80的调节。
18.如权利要求15所述的方法，其中所述细胞活性是细胞因子产生和/或释放的调节， 其中所述细胞因子选自 TNF-α、ILl-β、IL-6、IL-8、IL-10、IL_12p40、MIPl-α、MIP-I β、 GRO-α、MCP-I 禾口 IL_lra。
19.调节GlyRS多肽的一种或多种非常规活性的方法，所述方法包括使表达所述GlyRS 多肽的细胞与调节剂接触，其中所述调节剂选自抗体或其抗原结合片段、干扰RNA分子、显性负性多肽和小分子。
20.治疗疾病状态的方法，包括将权利要求14所述的组合物给予需要治疗的个体，其中所述疾病状态选自炎性疾病、自身免疫性疾病、肿瘤疾病、代谢疾病、神经疾病、感染、心血管疾病和异常血管生成相关的疾病。
21.鉴定活性受试化合物的筛查方法，包括下述步骤(a)形成反应混合物，所述反应混合物包括以下(i)选自以下的组分权利要求1-6中任一项所述的多肽、权利要求7所述的多核苷酸、和/或与权利要求1-6中任一项所述的多肽特异性结合的抗体或其抗原结合片段；( )已知可被所述组分结合和/或调节的结合伴侣、细胞效应物和/或细胞类型；和(iii)受试化合物；和(b)检测在所述受试化合物的存在下所述组分的结合和/或调节的增加或减少，其中相对于不存在所述受试化合物时的结合和/或调节，所述受试化合物存在时的结合和/或调节的改变可以鉴定活性受试化合物。
全文摘要
提供了具有非常规生物活性的分离的甘氨酰-tRNA合成酶多肽和多核苷酸，以及与其相关的组合物和方法。
文档编号C12N9/64GK102159708SQ200980132761
公开日2011年8月17日 申请日期2009年6月26日 优先权日2008年6月26日
发明者伊娃·瑞比卡·斯蒂芬妮·阿莫尔, 克瑞斯迪·海伦·佩耶尔, 洪非, 莱斯利·安·格林尼, 赖安·安德鲁·亚当斯, 赵基 申请人:Atyr医药公司