专利名称：固定化原油降解菌的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种石油降解物质的制备方法。
背景技术：
石油在生产、贮运、炼制加工及使用过程中，由于事故、不正常操作及检修等原因，都会有石油烃类的溢出和排放，不可避免地造成石油废弃物对土壤的污染。目前国内外的土壤修复技术主要分为物理方法、化学方法和生物处理法。生物修复技术包括游离的生物修复技术和固定化的生物修复技术。所谓固定化技术，是指利用物理或化学手段将游离的微生物或酶，定位于限定的空间区域并使其保持活性和可反复使用的一种基本技术。目前，固定化微生物技术广泛应用于环境污染治理，主要的治理对象为难处理的有机废水及重金属污染的废水，同时研究还涉及到大气和土壤的污染治理。如何固定、选择何种载体使固定化的细胞能较长时间保持强度和活度、降低成本，且能延长其使用寿命是固定化技术能否在工业生产中广泛应用的关键。一般来说，固定化微生物的制备方法分为吸附法、包埋法、共价结合法和交联法等4大类，其中吸附法与包埋法最为常用。包埋法是利用高聚物在形成凝胶时将细胞包埋在其内部，从而达到固定细胞的目的。有机高分子载体海藻酸钠(SA)、聚乙烯醇(PVA)价格低廉，对细胞相对毒性小、传质性能好，是应用最为广泛的固定化微生物载体材料。无机载体如多孔陶珠、活性炭等，具有机械强度大、对微生物无毒性、不易被微生物分解、耐酸碱、成本低、寿命长等特性，因而是一类重要的载体材料。
发明内容
本发明旨在提供一种微球状固定化原油降解菌的制备方法。
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本发明所述的固定化原油降解菌的制备方法，包括:
将PVA在80-100°C下完全溶解，制成10%的溶液，然后与1%的SA溶液混合均匀，再加入活性炭混匀，冷却到40°C后，加入处于对数生长期的菌液，然后用注射器滴入含有3%的CaCl2的饱和硼酸溶液中，0-4°C下搅拌均匀，并保温26小时，过滤出微球，并用生理盐水洗涤即可。优选地，菌液的加入量为20%。或者优选地,活性炭的加入量为50 g/Lo本发明制备的固定化微球具有良好的机械强度、弹性和渗透性、较高的比表面积和孔容，致密的孔隙结构；固定化细菌的降解率比游离细菌的要高，球形的比片状的固定化细菌对原油的降解率高；固定化细菌对PH值的适应性比游离菌更强，活化21 h处于稳定期的固定化微球的运行效果最好。
具体实施例方式实施例一。
将10 g PVA在80-100°C下完全溶解，制成10%的溶液，然后与IOOmL 1%的SA溶液混合均匀，再加入0.1 L活性炭混匀，冷却到40°C后，加入20%处于对数生长期的菌液，然后用注射器滴入含有3%的CaCl2的饱和硼酸溶液中，0-4°C下搅拌均匀，并保温26小时，过滤出微球，并用生理盐水洗涤即可。 经检测，微球的弹性系数为98 N/m,渗透时间为35分钟，破碎率为4.4%。
权利要求
1.固定化原油降解菌的制备方法，其特征在于包括: 将PVA在80-100°C下完全溶解，制成10%的溶液，然后与1%的SA溶液混合均匀，再加入活性炭混匀，冷却到40°C后，加入处于对数生长期的菌液，然后用注射器滴入含有3%的CaCl2的饱和硼酸溶液中，0-4°C下搅拌均匀，并保温26小时，过滤出微球，并用生理盐水洗涤即可。
2.如权利要求1所述的固定化原油降解菌的制备方法，其特征在于菌液的加入量为20%。
3.如权利要求2所述的固定化原油降解菌的制备方法，其特征在于活性炭的加入量为,50 g/ Lo
全文摘要
本发明涉及一种石油降解物质的制备方法。本发明所述的固定化原油降解菌的制备方法，包括将PVA在80-100℃下完全溶解，制成10%的溶液，然后与1%的SA溶液混合均匀，再加入活性炭混匀，冷却到40℃后，加入处于对数生长期的菌液，然后用注射器滴入含有3%的CaCl2的饱和硼酸溶液中，0-4℃下搅拌均匀，并保温26小时，过滤出微球，并用生理盐水洗涤即可。本发明制备的固定化微球具有良好的机械强度、弹性和渗透性、较高的比表面积和孔容，致密的孔隙结构。
文档编号C12N11/14GK103074323SQ20121055097
公开日2013年5月1日 申请日期2012年12月18日 优先权日2012年12月18日
发明者周莉英 申请人:陕西宣和通科技发展有限责任公司