基因修饰的细胞和使用所述细胞的方法
【专利摘要】本发明涉及呋喃化合物的生物转化的领域。更具体地，本发明涉及具有改善的呋喃化合物生物催化转化特征的新的基因修饰的细胞和适于宿主细胞的基因修饰的载体。本发明进一步的方面旨在使用根据本发明的细胞生物转化5-(羟甲基)呋喃-2-羧酸(HMF-酸)和其前体的方法。
【专利说明】基因修饰的细胞和使用所述细胞的方法
【技术领域】
[0001]本发明大体上涉及呋喃化合物生物转化的领域。这种生物转化可用于生产呋喃-2，5-二羧酸(FDCA)和处理含木质纤维素的材料(例如用于生产生物燃料和生物化学品)。更具体地，本发明涉及新的基因修饰的细胞，其具有改善的用于呋喃化合物的生物催化转化的特征。本发明的进一步方面涉及适合宿主细胞基因修饰以提高其呋喃化合物的生物转化特征的载体。本发明的其他方面涉及使用根据本发明的细胞生物转化5_(羟甲基)呋喃-2-羧酸(HMF-酸)和其前体的方法。
【背景技术】
[0002]呋喃化合物的生物转化逐渐引起人们注意。这涉及下述两个方面:从生物质中生物生产有希望的增值化学品——呋喃_2，5-二羧酸(FDCA)的方面(Werpy等(2004))，和它们在从含木质纤维素的材料发酵生产生物燃料和生物化学品的不利作用方面(Almeida等(2009))。
[0003]最近已经分离了利用呋喃化合物的生物体，Cupriavidus basilensisHMF14 (Koopman等(2010a)。该生物体能够代谢糠醛和5_(羟甲基)呋喃-2-甲醛(HMF)。Koopman 等(2010a)已经公开了 Cupriavidus basilensis HMF14 中糖醒和 HMF 降解路径以及涉及的基因。
[0004]Koopman 等(2010b)公开了将来自 Cupriavidus basilensis HMF14 的 hmfH 基因功能性引入Pseudomonas putida S12中。所得菌株具有好的使用HMF作为底物的FDCA生产能力。然而，观测到的5-(羟甲基)呋喃-2-羧酸(HMF-酸)的积累物将需要长的处理时间或需要采取措施以去除该副 产品。对于可能生产FDCA的许多应用，期望充分去除HMF-酸副产品，并且有时甚至是必要的。
[0005]在寻找HMF-酸积累问题的解决方案时，本发明的发明人现在已经令人吃惊地发现Pseudomonas putida S12 FDCA生产系统中某些多肽的表达有效降低HMF-酸积累。
【发明内容】
[0006]发明人的该发现已经得出下述一般概念:宿主中具有SEQ ID.N0.1或2或其相似物/同源物(比如SEQ ID NO:3或4)的氨基酸序列的多肽与一种或多种能够转化5_(羟甲基)呋喃-2-羧酸(HMF-酸)的多肽一起表达产生有效的HMF-酸生物转化。提高的HMF-酸生物转化有益于从那些呋喃化合物被认为是有害的原料(比如用于生产例如生物燃料的产醇发酵原料或用于化学品的生物学生产的发酵原料)中消除HMF-酸和其呋喃前体。在其他应用中，改善的HMF-酸生物转化将比如在FDCA生物生产中改善其中HMF-酸是起始材料或中间产物的化学品的生物生产。
[0007]因此本发明的第一目标是基因修饰的细胞，其包含编码具有SEQ ID.N0:1、2、3或4或其相似物/同源物的氨基酸序列的第一多肽的第一多核苷酸序列和编码具有HMF-酸转化活性的第二多肽的第二多核苷酸序列。转化HMF-酸的多肽可以是由之前描述的Cupriavidus basilensis HMFH hmfH 基因(Koopman 等 2010a 和 Koopman 等 2010b)编码的氧化还原酶。根据某些实施方式，优选地，基因修饰的细胞包含第三多核苷酸序列，其编码具有SEQ 10.勵:19、20、21、22、23、24、25或其相似物/同源物的氨基酸序列的第三多肽。第三氨基酸序列的功能性表达产生能够转化呋喃醛的醛脱氢酶活性。
[0008]如果第二多肽是氧化还原酶，第一多肽与氧化还原酶的同时共表达就生物催化FDCA生产而言也可提高包含氧化还原酶的全细胞生物催化剂的质量。
[0009]通过功能性引入至少第一多核苷酸序列来对根据本发明的细胞进行基因修饰。优选地，通过功能性引入第一和第二多核苷酸序列二者对细胞进行基因修饰。或者，通过功能性引入第一和第三多核苷酸序列对细胞进行基因修饰。功能性引入第一、第二和第三多核苷酸所有三个多核苷酸是进一步可选的。
[0010]本发明的进一步方面涉及适合宿主细胞基因修饰的载体。载体包含编码具有SEQID.N0.1、2、3或4或其相似物/同源物的氨基酸序列的第一多肽的第一多核苷酸序列和编码具有5-(羟甲基)呋喃-2-羧酸(HMF-酸)转化活性的第二多肽的第二多核苷酸序列。任选地载体可包含编码具有SEQ ID.NO:19、20、21、22、23、24、25或其相似物/同源物的氨基酸序列的第三多肽的第三多核苷酸序列。这种载体适合获得根据本发明的基因修饰的细胞。
[0011]本发明的其他方面涉及转化5-(羟甲基)呋喃-2-羧酸(HMF-酸)的方法。该方法利用根据本发明的细胞。根据优选的实施方式，该方法适合生产FDCA。
[0012]本发明的进一步方面在于根据本发明的基因修饰的细胞的用途，所述细胞用于将呋喃前体生物转化成FDCA。
【专利附图】
【附图说明】
[0013]图1公开呋喃化合物氧化反应生成2，5_呋喃二羧酸的示意性标示图。列出了下列呋喃化合物:1，HMF-醇；2，HMF ;3，HMF-酸；4，FFA ;5，FDCA。
[0014]图2 公开 P.putida S12_2642 (图 2a)和 P.putida S12_B38 (图 2b)的进料 HMF的培养物中FDCA生产和HMF-酸积累(?，FDCA(mM) ；HMF-酸(mM) ;O，细胞干重(CDW ；g/Ι);虚线:HMF进料速度(1111，41溶液/11))。
[0015]图3公开图2中显示的分批进料过程期间在不同时间点下的FDCA比生产率(深:P.putida S12_2642 ;浅:P.putida S12_B38)。
[0016]图4公开P.putida S12_B38 (图4a)和B51 (图4b)摇瓶实验中FDCA生产和HMF-酸积累 dHMFOnM) ；?, FDCA (mM)酸(mM);〇，细胞干重(CDW;g/l))；
[0017]图5公开以高细胞密度开始对P.putida S12_B38的进料HMF的高细胞密度培养物中 FDCA 生产和 HMF-酸积累(□，HMF ; ?，FDCA (mM) ； HMF-酸(mM);〇，细胞干重(CDW ；g/Ι);虚线=HMF进料速度(ml 4M溶液/h))。
[0018]图6 公开 FDCA、FFA 和 HMF-酸在 P.putida S12_B38 (共表达的 HmfH 和 HmfTl ;A) ;S12_B97(共表达的HmfH，HmfTl和醛脱氢酶；B);和S12_B101 (共表达的HmfH和醛脱氢酶；C)的含HMF的摇瓶培养物中的积累。tHMFOnM) ；4,FDCA(mM)酸(mM) ；.,FFA(mM) ;0，细胞干重(CDW ;g/l)。
[0019]序列概沭[0020]SEQ ID NO:1 列出来自 Cupriavidus basilensis HMF14 的 HmfTl 的氨基酸序列。该序列的GenBank获取号为ADE20411.1。
[0021]SEQ ID NO:2 列出来自 Cupriavidus basilensis HMF14 的 HmfT2 的氨基酸序列。该序列的GenBank获取号为ADE20404.1。
[0022]SEQ ID NO:3 列出来自具有来自 Methylobacterium radiotolerans JCM 2831( =ATCC 27329 = DSM 1819)的基因座标签(locus tag)mrad2831_4728的基因的蛋白产物的氨基酸序列。该序列的GenBank获取号为ACB26689.1。
[0023]SEQ ID NO:4 列出来自 Sulfolobus acidocaldarius DSM 639 的 saci_2058 基因蛋白产物的氨基酸序列。该序列的GenBank获取号为AAY81352.1。
[0024]SEQ ID NO:5 列出来自 Cupriavidus basilensis HMF14 的 HmfH 的氨基酸序列。该序列的GenBank获取号为ADE20408.1。
[0025]SEQ ID NO:6 列出来自 Bradyrhizobium japonicum USDA 110 的 blr0367 基因的蛋白产物的氨基酸序列。该序列的GenBank获取号为BAC45632.1。
[0026]SEQ ID NO:7 列出来自 Cupriavidus basilensis HMF14 的 hmfTl 的编码序列。
[0027]SEQ ID NO:8 列 出来自 Cupriavidus basilensis HMF14 的 hmfT2 的编码序列。
[0028]SEQ ID NO:9 列出来自 Methylobacterium radiotolerans JCM 2831 ( = ATCC27329 = DSM 1819)的具有基因座标签mrad2831_4728的基因的编码序列。
[0029]SEQ ID NO: 10 列出来自 Sulfolobus acidocaldarius DSM 639 的 saci_2058 基因的编码序列。
[0030]SEQ ID N0:11 列出来自 Cupriavidus basilensis HMF14 的 hmfH 的编码序列。
[0031]SEQ ID NO: 12 列出来自 Bradyrhizobium japonicum USDA 110 的 blr0367 基因
的编码序列。
[0032]SEQ ID NO:13_18列出各种合成引物的序列。示出了限制区域(下划线)、起始密码子和终止密码子(反向互补)(斜体)和推定的核糖体结合位点(小写)。设计FN23引物刚好在hmfH起始密码子的上游。
[0033]SEQ ID NO:13列出合成DNA引物hmfTl (f)的核苷酸序列
[0034]5，-ACGAATTCAAaggagACAACA A TG' GAAG-3，
[0035]SEQ ID NO:14列出合成DNA引物hmfTl (r)的核苷酸序列
[0036]5，-AAGCTAGCTGAGCAGTCACCC TCA CTC-3，
[0037]SEQ ID NO:15列出合成DNA弓丨物FN23的核苷酸序列。
[0038]5， -CGGAATTCCACATGACAagggagACCG-3，
[0039]SEQ ID NO:16列出合成DNA弓丨物FN24的核苷酸序列。
[0040]5，-CGGAATTCGCTTCGGTCT TCA ACTCGGATG-3，
[0041]SEQ ID NO:17列出合成DNA弓丨物mrad(f)的核苷酸序列。
[0042]5，-ACGAATTCggaggAAATCT /17 (；< CAGACC-3，
[0043]SEQ ID NO:18列出合成DNA引物mrad(r)的核苷酸序列。
[0044]5，-AAGCTAGCGCAGAACCGTATCG TC\ G-3，
[0045]SEQ ID NO: 19 列出来自 Cupriavidus basilensis HMF14 的醒脱氢酶 Adh 的氨基
酸序列。[0046]SEQ ID NO:20列出具有Genbank获取号:YP_003609156.1的氨基酸序列。
[0047]SEQ ID NO:21列出具有Genbank获取号:ΖΡ_02881557.1的氨基酸序列。
[0048]SEQ ID NO:22列出具有Genbank获取号:ΥΡ_003451184.I的氨基酸序列。
[0049]SEQ ID NO:23列出具有Genbank获取号:ACA09737.1的氨基酸序列。
[0050]SEQ ID NO:24列出具有Genbank获取号:ΥΡ_530742.I的氨基酸序列。
[0051]SEQ ID NO:25列出具有Genbank获取号:ΥΡ_001541929.I的氨基酸序列。
[0052]SEQ ID Ν0:26 列出编码来自 Cupriavidus basilensis HMF14 的醒脱氢酶Adh 的adh的多核苷酸序列。
[0053]SEQ ID NO:27列出编码列具有Genbank获取号:YP_003609156.1的氨基酸序的多
核苷酸序列。
[0054]SEQ ID NO:28列出编码具有Genbank获取号:ΖΡ_02881557.1的氨基酸序列的多
核苷酸序列。
[0055]SEQ ID NO:29列出编码具有Genbank获取号:ΥΡ_003451184.1的氨基酸序列的多
核苷酸序列。
[0056]SEQ ID NO:30列出编 码具有Genbank获取号:ACA09737.1的氨基酸序列的多核苷
酸序列。
[0057]SEQ ID NO:31列出编码具有Genbank获取号:YP_530742.1的氨基酸序列的多核
苷酸序列。
[0058]SEQ ID NO:32列出编码具有Genbank获取号:ΥΡ_001541929.1的氨基酸序列的多
核苷酸序列。
[0059]SEQ ID NO:33列出合成DNA引物FN13的核苷酸序列:5’ -ATGCGGCCGCAACAaggagAAGATGGA ATGMCG-3’ (下划线序列=NotI 限制性酶切位点；醛脱氢酶编码基因的起始密码子(ATG)为斜体；推定的核糖体结合位点(RBS)为小写)。
[0060]SEQ ID NO:34列出合成DNA引物FN14的核苷酸序列:5，-ATGCGGCCGCGCGTCGGGGTCGGTG CTA _3’ (下划线序列=NotI限制性酶切位点；终止密码子(反向互补链)为斜体)。
[0061]发明详沭
[0062]在本说明书和附带的权利要求书中，词语“包含”和“包括”及其语法变体如“包含，，(〃 comprises" , " comprising")、“包括，，(〃 includes" and " including")应被解释为开放式的。也就是说，在上下文允许时，这些词语旨在传达可能包括未明确指出的其它元素或整数。
[0063]冠词“一”(“a”和“an”)在本文中被用于表示一个或多于一个(即一个或至少一个)所述冠词的语法客体。例如，“一个元件”可表示一个元件或多于一个元件。
[0064]术语“许多”应理解为具有一种或多种的意思。
[0065]本文中呋喃化合物被理解为具有呋喃环的任何化合物。优选地呋喃化合物是可氧化成2，5-呋喃-二羧酸的化合物。与本发明背景相关的呋喃化合物包括[5-(羟甲基)呋喃-2-基]甲醇(“HMF-醇”)、5-(羟甲基)呋喃-2-甲醛(“!^”)、5-(羟甲基)呋喃-2-羧酸(“HMF-酸”)、5_甲酰呋喃-2-羧酸(“FFA”)、呋喃-2，5- 二甲醛(DFF)和呋喃-2，5- 二羧酸(“FDCA” )。呋喃环或任何其可取代的侧基可用例如OH、Cl-ClO烷基、烷基、烯丙基、芳基或RO-醚部分，包括环状基团，在呋喃环的任何可用位置上取代。下面列出
了许多相关呋喃化合物的化学结构。
[0066]
【权利要求】
1.基因修饰的细胞，其包含: (i)第一多核苷酸序列，其编码第一多肽，所述第一多肽包含与SEQ ID N0:l、2、3或4列出的氨基酸序列具有至少45%，优选至少60%，比如至少70%，更优选至少80%，比如90%，最优选至少95%序列相似度的氨基酸序列；和 (?)第二多核苷酸序列，其编码具有转化5-(羟甲基)呋喃-2-羧酸(HMF-酸)的活性的第二多肽； 其特征在于，通过功能性引入至少所述第一多核苷酸序列，和优选地通过功能性引入所述第一和第二多核苷酸序列二者，对所述细胞进行基因修饰。
2.根据权利要求1所述的基因修饰的细胞，其中所述第二多肽是5-(羟甲基)呋喃-2-羧酸氧化还原酶，优选地是与SEQ ID NO:5或6列出的氨基酸序列具有至少45%，优选至少60 %，比如至少70 %，更优选至少80 %，比如90 %，最优选至少95 %序列相似度的氨基酸序列的多肽。
3.根据权利要求1-2任一项所述的基因修饰的细胞，其中所述第一多核苷酸序列包含与SEQ ID NO:7、8、9或10列出的核苷酸序列具有至少45%，优选至少60%，比如至少70%，更优选至少80%，比如90%，最优选至少95%序列相似度的核苷酸序列。
4.根据权利要求1-3任一项所述的基因修饰的细胞，其中所述第二多核苷酸序列包含与SEQ ID NO:11或12列出的核苷酸序列具有至少45%，优选至少60%，比如至少70%，更优选至少80%，比如90%，最优选至少95%序列相似度的核苷酸序列。
5.根据权利要求1-4任一项所述的基因修饰的细胞，包含第三多核苷酸序列，其编码第三多肽，第三多肽包含与SEQ ID NO:19、20、21、22、23、24或25列出的氨基酸序列具有至少45 %，优选至少60 %，比如至少70 %`，更优选至少80 %，比如90 %，最优选至少95 %序列相似度的氨基酸序列。
6.根据权利要求1-5任一项所述的基因修饰的细胞，其中所述第三多核苷酸序列包含与SEQ ID NO:26、27、28、29、30、31或32列出的核苷酸序列具有至少45%，优选至少60%，比如至少70%，更优选至少80%，比如90%，最优选至少95%序列相似度的核苷酸序列。
7.根据权利要求1-6任一项所述的基因修饰的细胞，其中所述细胞是原核细胞，比如细菌细胞，或真核细胞，比如酵母细胞、真菌细胞、植物细胞或动物细胞。
8.根据权利要求1-7任一项所述的基因修饰的细胞，其中所述细胞是原核细胞，优选地选自下述属的细菌细胞:Escherichia、Anabaena、Caulobacter> Gluconobacter>Rhodobacterλ PseudomonasΛ Paracoccus、Bacillus、Brevibacterium、Corynebacterium、Rhizobium (Sinorhizobium)、Bradyrhizobium、Flavobacterium、Klebsiella、Enterobacter、Lactobacillus、Lactococcus、Methylobacterium、Staphylococcus、Streptomyces、ZymomonasΛ Acetobacter、Streptococcus、Bacteroides、Selenomonas、Megasphaera、Burkholderia、Cupriavidus Λ Ralstonia、Methylobacterium、Methylovorus、RhodopseudomonasΛ Acidiphilium、Dinoroseobacter、Agrobacterium、Sulfolobus 或 Sphingomonas，更优选由下述组成的组:Bacillus subtil is、Bacillusamyloliquefaciens、 Bacillus Iicheniformis、 Bacillus puntis、 Bacillusmegaterium、Bacillus halodurans、Bacillus pumilus、Gluconobacter oxydans、Caulobacter crescentus、Methylobacterium extorquens、Methylobacteriumradiotolerans、Methylobacterium nodulans、Rhodobacter sphaeroides、Pseudomonaszeaxanthinifaciens、Pseudomonas putida、Pseudomonas putida S12、Paracoccusdenitrificans、Escherichia col1、Corynebacterium glutamicum、Staphylococcuscarnosus、 Streptomyces lividans、 Sinorhizobium melilot1、 Bradyrhizobiumjaponicum、 Rhizobium radiobacter、 Rhizobium leguminosarum、 Rhizobiumleguminosarum bv.Trifoli1、Agrobacterium radiobacter、Cupriavidus basilensis、Cupriavidus necator (Ralstonia eutropha)、Ralstonia picketti1、Burkholderiaphytofirmans、Burkholderia phymatum、Burkholderia xenovorans、Burkholderiagraminis、Rhodopseudomonas palustris、Acidiphilium cryptum、Dinoroseobactershibae、 Sulfolobus acidocaldarius、 Sulfolobus islandicus、 Sulfolobussolfataricus、Sulfolobus tokodaii。
9.根据权利要求1-8任一项所述的基因修饰的细胞，其中所述细胞是真核宿主细胞，例如哺乳动物、昆虫、植物、真菌或藻类细胞，比如选自中国仓鼠卵巢(CHO)细胞、COS细胞、293细胞、PerC6细胞或杂交瘤的哺乳动物细胞，选自Sf9或Sf21细胞和其衍生物的昆虫细胞，优选选自真菌或酵母细胞的真核细胞，比如Candida、Hansenula、Kluyveromyces、Pichia、Saccharomyces、Schizosaccharomyces 或 Yarrowia species，更优选选自 Kluyveromyces lactis、Saccharomyces cerevisiae、Hansenula polymorpha、Yarrowia lipolytica、Pichia stipitis 或 Pichia pastoris 的真核细胞，或来自下述种的丝状真菌细胞，所述种选自亚门Eumycota和Oomycota或选自属Acremonium、Agaricus、Aspergillus、Aureobasidium、Chrysosporium、Coprinus、Cryptococcus、Filibasidium、Fusarium、Humicola、Magnaporthe、Mucor、MyceIiophthora、NeocalIimastix、Neurospora、Paecilomyces、Penicillium、Piromyces、Phanerochaete、Pleurotus、Schizophyllum、Talaromyces、Thermoascus、Thielavia、Tolypocladium 或 Trichoderma t匕如 Aspergillusniger、Aspergillus awamo r1、Aspergillus foetidus、Aspergillus sojae、Aspergillusfumigatus、Talaromyces emersoni1、Aspergillus oryzae、Chrysosporium lucknowense、Trichoderma reesei 或 Penicillium chrysogenum。
10.根据权利要求1-9任一项所述的基因修饰的细胞，其中所述第一和第二多核苷酸序列位于单个载体上，任选地位于进一步包含所述第三多核苷酸序列的载体上。
11.一种载体，其包含: (i)第一多核苷酸序列，其编码第一多肽，第一多肽包含与SEQ ID N0:l、2、3或4列出的氨基酸序列具有至少45%，优选至少60%，比如至少70%，更优选至少80%，比如90%，最优选至少95%序列相似度的氨基酸序列；和 (?)第二多核苷酸序列，其编码具有5-(羟甲基)呋喃-2-羧酸(HMF-酸)转化活性的第二多肽。
12.根据权利要求11所述的载体，其中所述第二多肽是5-羟甲基糠酸氧化还原酶，优选是具有与SEQ ID NO:5或6列出的氨基酸序列具有至少45%，优选至少60%，比如至少70%，更优选至少80%，比如90%，最优选至少95%序列相似度的氨基酸序列的多肽。
13.根据权利要求11-12任一项所述的载体，其中所述第一多核苷酸序列包含与SEQID NO:7，8，9或10列出的核苷酸序列具有至少45%，优选至少60%，比如至少70%，更优选至少80%，比如90%，最优选至少95%序列相似度的核苷酸序列。
14.根据权利要求11-13任一项所述的载体，其中所述第二多核苷酸序列包含与SEQID NO: 11或12列出的核苷酸序列具有至少45 %，优选至少60 %，比如至少70 %，更优选至少80%，比如90%，最优选至少95%序列相似度的核苷酸序列。
15.根据权利要求11-14任一项所述的载体，其包含编码第三多肽的第三多核苷酸序列，所述第三多肽包含与SEQ ID NO:19、20、21、22、23、24或25列出的氨基酸序列具有至少.45 %，优选至少60 %，比如至少70 %，更优选至少80 %，比如90 %，最优选至少95 %序列相似度的氨基酸序列。
16.根据权利要求11-15任一项所述的载体,其中所述第三多核苷酸序列包含与SEQID NO:26、27、28、29、30、31或32列出的核苷酸序列具有至少45%，优选至少60%，比如至少70%，更优选至少80%，比如90%，最优选至少95%序列相似度的核苷酸序列。
17.5-(羟甲基)呋喃-2-羧酸(HMF-酸)转化方法，其包括在存在HMF-酸的情况下孵育根据权利要求1-10任一项所述的细胞，其在适合HMF-酸被所述细胞转化的条件下进行。
18.根据权利要求17所述的方法，其中所述HMF-酸由HMF-酸的一种或多种呋喃前体在适合通过所述细胞将所述一种或多种呋喃前体转化成HMF-酸的条件下原位形成。
19.根据权利要求17-18任一项所述的方法，其中所述所述细胞的第二多肽是HMF-酸氧化还原酶，并且还包括使所述细胞经历适合将HMF-酸转化成FDCA的条件。
20.根据权利要求17-19任一项所述的方法，其中呋喃前体选自由下述组成的组:.5-(羟甲基)呋喃-2-甲醛(HMF)、呋喃-2，5-二甲醛(DFF)、[5_(羟甲基)呋喃_2_基]甲醇(HMF醇)，并且优选是HMF。
21.根据权利要求17-20任一项所述的方法，其中所述呋喃前体获得自一种或多种己糖，优选地获得自木质纤维生物质的一种或多种己糖，例如通过酸催化脱水获得。
22.根据权利要求17-21任一项所述的方法，其中通过包含酸沉淀然后冷却结晶或然后溶剂萃取的方法从反应混合物中回收FDCA。
23.根据权利要求1-10任一项所述的基因修饰的细胞的用途，用于将许多呋喃前体生物转化成FDCA。
24.根据权利要求23所述的用途，其中所述许多呋喃前体选自由下述组成的组:5-(羟甲基)呋喃-2-甲醛(HMF)、[5-(羟甲基)呋喃-2-基]甲醇(HMF醇)、5-(羟甲基)呋喃-2-羧酸(HMF-酸)、呋喃-2，5- 二甲醛(DFF)或5-甲酰呋喃_2_羧酸(FFA)。
【文档编号】C12P17/04GK103502441SQ201280012453
【公开日】2014年1月8日 申请日期:2012年3月7日 优先权日:2011年3月8日
【发明者】尼克·约翰尼斯·皮特斯·维尔克斯, 汤姆·丹尼尔·伊林克·舒尔曼, 斯皮克·马特恩·库基伯尔, 哈拉德·约翰·鲁杰瑟纳斯 申请人:普拉克生物化学有限公司