提高西兰花种子的莱菔硫烷水解产量的预处理方法
【专利摘要】本发明涉及提高西兰花种子的莱菔硫烷水解产量的预处理方法。本方法将西兰花种子进行物理压榨，提高细胞破碎的程度，帮助水解生成莱菔硫烷(sulforaphane，简称SFA)的前体物质葡糖莱菔硫烷(glucophanin，简称GRA)充分溶出。将去除油脂之后的固体残渣回收，在去除油脂的过程中可以使西兰花中普遍存在的可以催化GRA转化为没有抗癌活性的莱菔硫烷腈的ESP蛋白失活。在特定的pH值下，将灭酶之后的油渣加入到不含有ESP酶的黑芥子酶液中，大幅度提高GRA水解生成SFA的转化率。本方法较老式的西兰花酶解莱菔硫烷处理方式简单，过程中GRA损失小，最终莱菔硫烷转化率高，西兰花种子选择范围广，适合大规模工业生产。
【专利说明】提高西兰花种子的莱菔硫烷水解产量的预处理方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物化工领域，涉及一种能显著提高西兰花种子水解产生莱菔硫烷产 量的预处理方式，以及缩短反应时间的方法。
【背景技术】
[0002] 十字花科的植物是目前广泛认为具有抗癌功能的一类植物。这主要是因为十字 花科的植物含有大量的硫代葡萄糖苷（glucosinolates，简称GLS)，硫代葡萄糖苷是植物 的一种含硫次级代谢产物，目前在植物中已发现了 120多种硫代葡萄糖苷，其基本结构如 下式所示。硫代葡萄糖苷是水溶性、无挥发性、热稳定性的离子型化合物。若植物细胞发生 破损，硫代葡萄糖水解酶，即芥子硫苷酸酶（myrosinase，thioglucoside glucohydrolase ; EC3. 2. 3. 1)被释放出来，并水解硫代葡萄糖苷，生成硫酸氢盐、葡萄糖和一系列葡萄糖苷配 基，这些配基在经过分子内的重排形成异硫氰酸酯、硫氰酸酯、腈和少量的环硫腈。目前，有 很多研宄已经表明异硫氰酸酯有良好的抗癌效果。同时，异硫氰酸酯还具有防止微生物繁 殖和间接的抗氧化作用。
[0003]
【权利要求】
1. 提高西兰花种子的莱菔硫烷水解产量的预处理方法，其特征在于，依次包括如下步 骤： A. 对西兰花种子进行物理挤压 将西兰花种子进行物理挤压，保持出油温度40°C -80°C，油渣出料温度80°C -130°C，分 别回收油脂与去除油脂后的种子残渣； B. 黑芥子酶的提取与纯化 将未经高温处理的十字花科植物的种子、花、茎或叶粉碎，超声破碎后用纱布过滤，得 到清液用饱和度55%的（NH4)2S(VK溶液将黑芥子酶沉淀析出；10000r/min离心20分钟后 弃去上清，将沉淀用8000-14000分子量的透析膜透析12小时后得到黑芥子酶粗酶液； C. 纯化莱菔硫烷 用黑芥子酶粗酶液反应（A)得到的西兰花种子残渣，调pH至7,温度30°C，水解60分 钟，水解后过滤用SP850树脂柱纯化，用3倍柱体积的去离子水和3倍柱体积体积浓度为 5%的乙醇溶液洗杂质，用5倍柱体积的体积浓度为85%乙醇洗产品；样品旋蒸脱除溶剂至 原体积的10%后，用二氯甲烷萃取3次，将二氯甲烷相旋干后进行冷冻干燥处理，得到纯度 为98 %的来藤硫烧广品。
2. 根据权利要求1所述的方法，其特征是：步骤B中的十字花科植物是西兰花、甘蓝、 芥蓝、白菜或花椰菜。
【文档编号】C12P13/00GK104498547SQ201410678132
【公开日】2015年4月8日 申请日期:2014年11月23日 优先权日:2014年11月23日
【发明者】袁其朋, 程立, 梁浩, 王忠鹏, 况鹏群, 周筱, 刘玉婷 申请人:北京化工大学