一种桃仁活性肽及制备方法与流程

文档序号:13969807阅读:166来源:国知局
本发明属于生物
技术领域
,具体涉及一种桃仁活性肽及制备方法。
背景技术
:桃仁,中药名。为蔷薇科植物桃或山桃的干燥成熟种子。果实成熟后采收,除去果肉和核壳,取出种子,晒干。全国各地普遍栽培。具有活血祛瘀,润肠通便,止咳平喘的功效。用于经闭痛经,瘕瘕痞块,肺痈肠痈,跌扑损伤,肠燥便秘,咳嗽气喘。祛瘀血作用:本品水煎醇沉液可使离体兔耳静脉血管流量增加,有舒张血管作用。给麻醉犬动脉注射,能增加股动脉血流量及降低血管阻力,对血管壁有直接扩张作用。桃仁具有多种功效,其中对心血管系统具有积极的作用,另外还有抗炎镇痛作用、镇咳、抗肿瘤等作用。桃仁是一种高蛋白的作用,蛋白质含量约27%,桃仁蛋白具有相当强的sod样活性以及免疫调节作用和抗肿瘤作用。申请号为cn201710250086.7公开了“一种高生物利用度的桃仁多肽口服液的制备方法”包括如下步骤:粉碎、脱脂、蛋白质提取、酶解、超滤分离、化学修饰、均质、微胶囊化处理、风味调整、灌装、超高压灭菌、检验入库。在脱脂中使用石油醚,存在极大的安全隐患。提取蛋白质使用强酸强碱,不利于活性肽的营养物质保留。12000~15000r/min的转速离心,在工业中无法应用,利用单一碱性蛋白酶不利于桃仁蛋白质的酶解。也未使用过滤剂直接使用滤膜,不利于出去酶解液中的杂质和异味,且不利于工业化生产和节约成本。技术实现要素:本发明第一目的在于提供一种桃仁活性肽。本发明的另一目的在于提供上述活性肽的制备方法。一种桃仁活性肽的制备方法,包括以下步骤:a、将桃仁预处理,进行超微粉碎,过200~600目,加水混合,调节ph8~9微碱化处理,浸泡18~24h。机械搅拌、反应罐中的料液离心分离,收取上清液;b、在上清液中加入弱酸,沉淀蛋白质。调节上清液的ph值至4~6后,机械搅拌、离心,收取沉淀,沉淀即为桃仁蛋白;c、将沉淀加水复溶,加热,使得蛋白质变性,然后进行高压均质;d、调节上述溶液ph至5~10,加入专用酶制剂,酶解;e、酶解结束之后,加入特定中药组合,浸提灭酶结束后得粗酶解液;f、将粗酶解液制成桃仁活性肽粉。如上述的桃仁活性肽的制备方法,其特征在于,f步骤还包括:f1:为将粗酶解液离心,然后过装有特制过滤助剂组合的板框压滤机过滤;f2:将滤液采用孔径为20~500nm的陶瓷膜过滤,制得澄清的活性肽透过液;f3:将步骤f2中滤液进行蒸发浓缩,然后喷雾干燥得到精制桃仁活性肽粉。如上述的桃仁活性肽的制备方法,其特征在于,f步骤还包括:f11:将粗酶解液直接旋转蒸发、均质乳化,然后喷雾干燥得到全营养桃仁活性肽粉。如上述的桃仁活性肽的制备方法,其特征在于,所述的步骤a中,进行超微粉碎可以提高酶解率,充分利用物质组分。如上述的桃仁活性肽的制备方法,其特征在于,所述的步骤b中,所述弱酸为醋酸、乳酸、柠檬酸中的一种或多种,时间8~12h。采用弱酸沉淀蛋白质,减少强酸对蛋白质营养物质的破坏,有利于优化活性肽的营养组分。如上述的桃仁活性肽的制备方法,其特征在于,所述的步骤c中,加热温度为75~100度,时间15~30分钟。采用热变性的方法,可以更加利于酶解,酶解更加充分。同时热变性之后进行高压均质,进一步提高酶解效率。如上述的桃仁活性肽的制备方法,其特征在于,所述的步骤d,专用酶制剂组合包括胰蛋白酶∶木瓜蛋白酶∶中性蛋白酶为2~3∶1~2∶1~2。所述酶制剂的加入量为所述混悬液重量的0.1~3wt%。研究发现其专用酶制剂组合的酶解效率远大约单一酶的酶解效率。如上述的桃仁活性肽的制备方法,其特征在于,其特征在于,所述的步骤d,酶解条件为:酶解温度为40~65℃,酶解时间为1.5~6h。如上述的桃仁活性肽的制备方法,其特征在于,所述的步骤e中,特定中药组合为:紫苏子和决明子,添加量各为干桃仁粉固体质量的1~2%。加入传统中药可以进一步发挥活性肽的营养价值和改变肽的苦味。如上述的桃仁活性肽的制备方法,其特征在于,所述的步骤e中。浸提灭酶的条件为:浸提灭酶温度为90~125℃,时间为0.5~3h。如上述的桃仁活性肽的制备方法,其特征在于,所述的步骤f1中,特制过滤助剂组合为:活性炭、珍珠岩、硅藻土,其比例为3~4∶1~2∶1~2。研究发现其特制过滤助剂组合的过滤效率远大约单一过滤剂的过滤效率。如上述的桃仁活性肽的制备方法,其特征在于,喷雾干燥所用的为中低温喷雾干燥塔,进一步保留热敏活性物质,并且中低温喷雾干燥塔是首次在肽工艺中得到应用。一种桃仁活性肽,其特征在于,按照上述任一所述的制备方法制得,所述精制桃仁活性肽的质量含量≥80%,所述全营养桃仁活性肽的质量含量≥30%。本发明的桃仁活性肽的制备方法,首次特定中药组合紫苏子和决明子,可以进一步提升制备的桃仁活性肽的营养成分保健功能。紫苏子和决明子对机体的主要作用如下:紫苏子:为唇形科植物紫苏的干燥成熟果实。多系栽培。味辛,性温。归肺经。功效降气消痰、止咳平喘、润肠。临床用名有紫苏子、炒紫苏子、蜜炙紫苏子、紫苏子霜。最新研究发现紫苏是世界上α~亚麻酸含量最高的植物资源。美国心脏协会官方网站显示:α~亚麻酸具有:调节血压;调节血脂;抑制肿瘤;抑制血小板聚集,防止血栓形成;对视觉功能和学习行为活动起促进作用。营养科学最新成果显示:紫苏醇、柠檬烯(紫苏的成分之一)是一种被发现具有抗癌特性的天然化合物。决明子:中药决明子,也叫草决明、还瞳子、狗屎豆、假绿豆、马蹄子、千里光,为豆科草本植物决明或小决明的成熟种子,味苦、甘而性惊,具有清肝明目、润肠通便的功效。现代药理研究证实,决明子所含的有效成分具有调节免疫、抑菌、抗癌、降血压、调节血脂及明目通便等作用。对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎球菌等均有不同程度的抑制作用;通过作用于迷走神经有降压效果,可与传统降压药利血平相媲美;通过导泻可减少肠道对胆固醇的吸收,并能反馈调节低密度脂蛋白的代谢;能防治近视眼及老年性白内障等眼科疾病。除了上面所描述的目的、特征和优点之外,本发明还有其它的目的、特征和优点。下面将对本发明作进一步详细的说明。具体实施方式下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明,但本发明的保护范围并不限于此。以下对本发明的实施例进行详细说明,但是本发明可以根据权利要求限定和覆盖的多种不同方式实施。实施例1一种桃仁活性肽的制备方法,包括以下步骤:a、将桃仁预处理,进行超微粉碎,过400目,加水混合,调节ph8~9微碱化处理,浸泡20h。机械搅拌、反应罐中的料液离心分离,收取上清液;b、在上清液中加入醋酸,沉淀蛋白质。调节上清液的ph值至4~6后,机械搅拌、离心,收取沉淀,沉淀即为桃仁蛋白;c、将沉淀加水复溶,加热至90度,使得蛋白质变性,然后进行高压均质;d、调节上述溶液ph至7~8,加入专用酶制剂(胰蛋白酶∶木瓜蛋白酶∶中性蛋白酶为2.5∶1.5∶1.2),酶解,酶解温度为50℃,酶解时间为3h;e、酶解结束之后,加入特定中药组合(紫苏子和决明子),浸提灭酶结束后得粗酶解液;f、将粗酶解液制成桃仁活性肽粉。如上述的桃仁活性肽的制备方法,其特征在于,f步骤还包括:f1:为将粗酶解液离心,然后过装有特制过滤助剂组合的板框压滤机过滤;f2:将滤液采用孔径为20~500nm的陶瓷膜过滤,制得澄清的活性肽透过液;f3:将步骤f2中滤液进行蒸发浓缩,然后进行喷雾干燥得到精制桃仁活性肽粉。如上述的桃仁活性肽的制备方法,其特征在于,f步骤还包括:f11:将粗酶解液直接旋转蒸发、均质乳化,然后喷雾干燥得到全营养桃仁活性肽粉。所述的步骤e中,紫苏子和决明子的添加量各为干桃仁粉固体质量的1.5%。所述的步骤e中,灭酶温度为90℃,酶解时间为1h。所述的步骤f1中,特制过滤助剂组合为:活性炭、珍珠岩、硅藻土,其比例为3.7∶1.5∶1.5。实施例2一种桃仁活性肽的制备方法,包括以下步骤:a、将干桃仁预处理,进行超微粉碎,过400目,加水混合,调节ph8~9微碱化处理,浸泡20h。机械搅拌、反应罐中的料液离心分离,收取上清液;b、在上清液中加入醋酸,沉淀蛋白质。调节上清液的ph值至4~6后,机械搅拌、离心,收取沉淀,沉淀即为桃仁蛋白;c、将沉淀加水复溶,加热至95度,使得蛋白质变性,然后进行高压均质;d、调节上述溶液ph至7~8,加入专用酶制剂(胰蛋白酶∶木瓜蛋白酶∶中性蛋白酶为2.4∶1.6∶1.2),酶解,酶解温度为50℃,酶解时间为2.5h;e、酶解结束之后,加入特定中药组合,浸提灭酶结束后得粗酶解液;f、将粗酶解液制成桃仁活性肽粉。如上述的桃仁活性肽的制备方法,其特征在于,f步骤还包括:f1:为将粗酶解液离心,然后过装有特制过滤助剂组合的板框压滤机过滤;f2:将滤液采用孔径为20~500nm的陶瓷膜过滤,制得澄清的活性肽透过液;f3:将步骤f2中滤液进行蒸发浓缩,然后进行喷雾干燥得到精制桃仁活性肽粉。如上述的桃仁活性肽的制备方法,其特征在于,f步骤还包括:f11:将粗酶解液直接旋转蒸发、均质乳化,然后喷雾干燥得到全营养桃仁活性肽粉。所述的步骤e中,紫苏子和决明子的添加量各为干桃仁粉固体质量的1.7%。所述的步骤e中,灭酶温度为95℃,酶解时间为1h。所述的步骤f1中,特制过滤助剂组合为:活性炭、珍珠岩、硅藻土,其比例为3.4∶1.8∶2。实施例3一种桃仁活性肽的制备方法,包括以下步骤:a、将干桃仁预处理,进行超微粉碎,过400目,加水混合,调节ph8~9微碱化处理,浸泡22h。机械搅拌、反应罐中的料液离心分离,收取上清液;b、在上清液中加入醋酸,沉淀蛋白质。调节上清液的ph值至4~6后,机械搅拌、离心,收取沉淀,沉淀即为桃仁蛋白;c、将沉淀加水复溶,加热至95度,使得蛋白质变性,然后进行高压均质;d、调节上述溶液ph至7~8,加入专用酶制剂(胰蛋白酶∶木瓜蛋白酶∶中性蛋白酶为2.6∶1.6∶1.4),酶解,酶解温度为55℃,酶解时间为3h;e、酶解结束之后,加入特定中药组合(紫苏子和决明子),浸提灭酶结束后得粗酶解液;f、将粗酶解液制成桃仁活性肽粉。如上述的桃仁活性肽的制备方法,其特征在于,f步骤还包括:f1:为将粗酶解液离心,然后过装有特制过滤助剂组合的板框压滤机过滤;f2:将滤液采用孔径为20~500nm的陶瓷膜过滤,制得澄清的活性肽透过液;f3:将步骤f2中滤液进行蒸发浓缩,然后进行喷雾干燥得到精制桃仁活性肽粉。如上述的桃仁活性肽的制备方法,其特征在于,f步骤还包括:f11:将粗酶解液直接旋转蒸发、均质乳化,然后喷雾干燥得到全营养桃仁活性肽粉。所述的步骤e中,紫苏子和决明子的添加量各为干桃仁粉固体质量的1.7%。所述的步骤e中,灭酶温度为100℃,酶解时间为0.5h所述的步骤f1中,特制过滤助剂组合为:活性炭、珍珠岩、硅藻土,其比例为3.3∶1.5∶1.4。测定实施例1~3中活性肽中肽含量结果见表1。肽的含量测定方法为:根据gb/t22492大豆肽粉中肽含量的测定方法进行。表1肽含量实施例1实施例2实施例3精制桃仁活性肽含量%84.583.683.9全营养桃仁活性肽含量%34.333.833.3对于本领域技术人员而言,显然本发明不限于上述示范性实施例的细节,而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下,能够以其他的具体形式实现本发明。因此,无论从哪一点来看,均应将实施例看作是示范性的,而且是非限制性的,本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定,因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。此外,应当理解,虽然本说明书按照实施方式加以描述,但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案,说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见,本领域技术人员应当将说明书作为一个整体,各实施例中的技术方案也可以经适当组合,形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。当前第1页12
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