本发明属于生物中药技术领域，具体涉及一种发酵型强壮散合剂、制备方法及其应用。
背景技术：
强壮散的中药发酵是将中药提取液和经过优选的人体内的有益菌作为菌种，依据微生态学和仿生学理论，通过生物嫁接方式，在模拟人体胃肠环境的条件下对中药提取物进行生物转化而成的新型中药。利用现代生物技术使中药与有益菌完美结合，中药成份经过益生菌转化，由大分子变成小分子，极易被机体吸收、提高药效，发酵中药比传统中药药效提高数倍到几十倍，在抗生素耐药，超级细菌不断出现的形势下具有重要意义。
强壮散功能重在益气健脾，消积化食。具有增强免疫、健胃增食、增重促长、补充营养、补肝、益气、益精、抗菌消炎、防病抗病的作用，主治食欲不振，体瘦毛焦，生长迟缓。现有技术中直接以强壮散喂食猪，强壮散中中药材食用的药效低、难以充分吸收，从而起不到中药应有的效果。
技术实现要素：
本发明提供了一种发酵型强壮散合剂及其制备方法，解决了现有技术中直接以强壮散喂食猪，强壮散中中药材食用的药效低、难以充分吸收，从而起不到中药应有效果的问题。
本发明的第一个目的是提供一种发酵型强壮散合剂的制备方法，包括以下步骤：
步骤1，按质量百分比称取以下各中药组分：党参20％、六神曲7％、麦芽7％、炒山楂7％、黄芪20％、茯苓15％、白术10％、草豆蔻14％；
步骤2，将步骤1中称取的各中药组分粉碎后混匀，过50-100目筛，得到强壮散合剂，将所述强壮散合剂灭菌后备用；
步骤3，制备复合菌剂：所述复合菌剂由枯草芽孢杆菌固体菌剂、酵母菌固体菌剂、凝结芽孢杆菌固体菌剂以及嗜酸乳杆菌固体菌剂中的任意两种、或三种、或四种菌剂混合而成；
步骤4，将步骤3的复合菌剂与无菌水、蔗糖、食盐按照1：5：0.25：0.025的质量比混合均匀，得到预处理复合菌剂，将预处理复合菌剂接种到步骤2灭菌的强壮散合剂中，其中，所述强壮散合剂的用量相当于所述复合菌剂质量的50倍；然后在20-40℃、湿度≥35％的条件下厌氧固体发酵培养5-7d，发酵培养结束后，干燥发酵产物，即得到所述发酵型强壮散合剂。
优选的，所述步骤2中强壮散合剂灭菌条件为：121℃下高温灭菌20-30min。
优选的，所述步骤3中复合菌剂由枯草芽孢杆菌固体菌剂、酵母菌固体菌剂、凝结芽孢杆菌固体菌剂以及嗜酸乳杆菌固体菌剂中的任意两种菌剂按照1-3:1的质量比混合而成，或任意三种菌剂按照1:1-2:1的质量比混合而成，或四种菌剂按照1：1：1：1的质量比混合而成。
优选的，所述步骤3中枯草芽孢杆菌固体菌剂是按照如下方法制备得到的：将枯草芽孢杆菌菌种按体积分数为5％的接种量接种于发酵罐中进行液体培养，于35℃、搅拌速度为300r/min的条件下培养18-48h，获得的发酵液经固态吸附剂吸附、干燥得枯草芽孢杆菌固体菌剂；
所述酵母菌固体菌剂是按照如下方法制备得到的：将酵母菌种按体积分数为3％的接种量接种于发酵罐中进行液体培养，于30℃下培养18-68h，获得的发酵液经固态吸附剂吸附、干燥得酵母菌固体菌剂；
所述凝结芽孢杆菌固体菌剂是按照如下方法制备得到的：将凝结芽孢杆菌按体积分数为5％的接种量接种于发酵罐中进行液体培养，控制罐压为0.05mpa，在40℃下培养30-32h，获得的发酵液经固态吸附剂吸附、干燥得凝结芽孢杆菌固体菌剂；
所述嗜酸乳杆菌固体菌剂是按照如下方法制备得到的：将嗜酸乳杆菌按体积分数为5％的接种量接种于发酵罐中进行液体培养，于30℃下培养18-68h，获得的发酵液经固态吸附剂吸附、干燥得嗜酸乳杆菌固体菌剂。
优选的，所述枯草芽孢杆菌采用的每升液体培养基配方为：蔗糖10g、蛋白胨10g、氯化钠5g，水定容至1l，ph为7.0；
所述酵母菌采用ypd液体培养基培养；
所述凝结芽孢杆菌采用的每升液体培养基配方为：酵母膏10g、mnso4为0.05g、葡萄糖6g、蛋白胨10g、磷酸氢二钾2g、mgso4为1g，水定容至1l；
所述嗜酸乳杆菌采用的每升液体培养基配方为：葡萄糖5g、大豆低聚糖15g、酵母膏10g、蛋白胨10g、西红柿汁120g、磷酸氢二钾1g、吐温80为1g，水定容至1l；
所述固态吸附剂为麦麸粉。
优选的，发酵液经固态吸附剂吸附时，发酵液与固态吸附剂的料比为1l:1.5-5kg。
本发明的第二个目的是提供一种上述发酵型强壮散合剂的制备方法制备而成的发酵型强壮散合剂。
本发明的第三个目的是提供一种发酵型强壮散合剂的制备方法在生产发酵型强壮散合剂中的应用。
本发明的发酵型强壮散合剂依据中兽医学理论之辨证论治原理，结合畜类的饮食生长情况，以经典处方为基础而得。在该处方中，党参、黄芪补中益气，健脾养血；六神曲健脾和胃，消食调中；麦芽、炒山楂行气消食，健脾开胃；茯苓、白术、草豆蔻发散表邪、醒脾散滞、疏肝解郁、升阳除湿、升阳举陷。上述配方相互协同作用，互补增益，共同起到预防和治疗脾肠胃病的作用。
与现有技术相比，本发明的发酵型强壮散合剂的制备方法，具有以下有益效果：
本发明将中药发酵技术运用到强壮散合剂的制备过程中，把现代生物技术和传统中药炮制方法相结合，利用特定的肠道有益菌枯草芽孢杆菌、酵母菌、凝结芽孢杆菌和嗜酸乳杆菌酸菌之间的协同和拮抗作用，模拟肠道环境对中药进行生物发酵，充分发挥中草药组分的保健作用，避免中药材直接粉碎食用的药效低、不吸收的问题，增强了猪的抵抗力，减少了疾病的发生，有助于猪的成长。
具体实施方式
下面结合具体实例对本发明进行详细说明，但不应理解为本发明的限制。下面实例中未注明具体条件的实验方法，均按照本领域的常规方法和条件进行。
下述实施实例中，所用ypd液体培养基的配方组成采用本领域常规配方。枯草芽孢杆菌、酵母菌、凝结芽孢杆菌以及嗜酸乳杆菌均购自中国普通微生物菌种保藏管理中心。
实施例1
一种发酵型强壮散合剂的制备方法，包括以下步骤：
步骤1，按质量百分比称取以下各中药组分：党参20％、六神曲7％、麦芽7％、炒山楂7％、黄芪20％、茯苓15％、白术10％、草豆蔻14％；
步骤2，将步骤1中称取的各中药组分粉碎后混匀，过50目筛，得到强壮散合剂，将所述强壮散合剂灭菌后备用；
步骤3，制备复合菌剂：所述复合菌剂由枯草芽孢杆菌固体菌剂、酵母菌固体菌剂按照3：1的质量比混合而成；
枯草芽孢杆菌固体菌剂是按照如下方法制备的：将预先活化好枯草芽孢杆菌菌种按5％的体积比接种量接种于50l发酵罐中进行液体培养，发酵罐中液体培养基装液量占发酵罐总体积的40％，然后在温度35℃、搅拌速度为300r/min、通气量为15l/min、罐压为0.03mpa的条件下发酵培养至菌体量达4×109cfu/ml以上，获得的发酵液经50目的麦麸粉吸附、50℃真空干燥得枯草芽孢杆菌固体菌剂；其中吸附时，将发酵液与麦麸粉按照1l:1.5kg的比例混合；
其中，枯草芽孢杆菌发酵采用的液体培养基配方为：蔗糖10g、蛋白胨10g、氯化钠5g、水定容至1l，ph为7.0；
酵母菌固体菌剂是按照如下方法制备的：将预先活化好的酵母菌菌种按3％的体积比接种量接种于50l发酵罐中进行液体培养，发酵罐中液体培养基装液量占发酵罐总体积的40％，于温度30℃下发酵培养至菌体量达4×108cfu/ml以上，获得的发酵液经50目的麦麸粉吸附、50℃真空干燥得酵母菌固体菌剂；其中吸附时，将发酵液与麦麸粉按照1l:1.5kg的比例混合；
酵母菌采用ypd液体培养基培养；
步骤4，将步骤3的复合菌剂与无菌水、蔗糖、食盐按照1：5：0.25：0.025的质量比混匀，得到预处理复合菌剂，将预处理复合菌剂接种到相当于所述复合菌剂质量50倍的、步骤1的灭菌的强壮散合剂中，控制湿度为35％，然后在20℃下厌氧固体发酵培养7d，发酵培养结束后，干燥发酵产物，即得到发酵型强壮散合剂。
实施例2
步骤1，按质量百分比称取以下各中药组分：党参20％、六神曲7％、麦芽7％、炒山楂7％、黄芪20％、茯苓15％、白术10％、草豆蔻14％；
步骤2，将步骤1中称取的各中药组分粉碎后混匀，过80目筛，得到强壮散合剂，将所述强壮散合剂灭菌后备用；
步骤3，制备复合菌剂：所述复合菌剂由凝结芽孢杆菌固体菌剂与嗜酸乳杆菌固体菌剂按照2：1的质量比混合而成；
凝结芽孢杆菌固体菌剂是按照如下方法制备的：将预先活化好的凝结芽孢杆菌菌种按5％的体积分数接种量接种于50l发酵罐中进行液体培养，发酵罐中液体培养基装液量占发酵罐总体积的40％，然后在温度40℃、搅拌速度为300r/min、通气量为18l/min、罐压为0.05mpa的条件下发酵培养至菌体量达4×109cfu/ml以上，获得的发酵液经50目的麦麸粉吸附、50℃真空干燥得凝结芽孢杆菌固体菌剂；其中吸附时，将发酵液与麦麸粉按照1l:3kg的比例混合；
其中，凝结芽孢杆菌采用的每升液体培养基配方为：酵母膏10g、mnso4为0.05g、葡萄糖6g、蛋白胨10g、磷酸氢二钾2g、mgso4为1g，水定容至1l；
嗜酸乳杆菌固体菌剂是按照如下方法制备得到的：将预先活化好的嗜酸乳杆菌菌种按5％的体积比接种量接种于50l发酵罐中进行液体培养，发酵罐中液体培养基装液量占发酵罐总体积的40％，于温度30℃、搅拌速度为250r/min、通气量为15l/min、罐压0.04mpa的条件下发酵培养至菌体量达6×109cfu/ml以上，获得的发酵液经50目的麦麸粉吸附、50℃真空干燥得地衣芽孢杆菌固体菌剂；其中吸附时，将发酵液与麦麸粉按照1l:5kg的比例混合；
其中，嗜酸乳杆菌采用的每升液体培养基配方为：葡萄糖5g、大豆低聚糖15g、酵母膏10g、蛋白胨10g、西红柿汁120g、磷酸氢二钾1g、吐温80为1g，水定容至1l；
步骤4，将步骤3的复合菌剂与无菌水、蔗糖、食盐按照1：5：0.25：0.025的质量比混匀，得到预处理复合菌剂，将预处理复合菌剂接种到相当于所述复合菌剂质量50倍的、步骤1的灭菌的强壮散合剂中，控制湿度为40％，然后在25℃下厌氧固体发酵培养6d，发酵培养结束后，干燥发酵产物，即得到发酵型强壮散合剂。
实施例3
一种发酵型强壮散合剂的制备方法，包括以下步骤：
步骤1，按质量百分比称取以下各中药组分：党参20％、六神曲7％、麦芽7％、炒山楂7％、黄芪20％、茯苓15％、白术10％、草豆蔻14％；
步骤2，将步骤1中称取的各中药组分粉碎后混匀，过80目筛，得到强壮散合剂，将所述强壮散合剂灭菌后备用；
步骤3，制备复合菌剂：所述复合菌剂由枯草芽孢杆菌固体菌剂、酵母菌固体菌剂、凝结芽孢杆菌固体菌剂按照1：2：1的质量比混合而成；
其中，枯草芽孢杆菌固体菌剂、酵母菌固体菌剂的制备方法同实施例1，凝结芽孢杆菌固体菌剂的制备方法同实施例2；
步骤4，将步骤3的复合菌剂与无菌水、蔗糖、食盐按照1：5：0.25：0.025的质量比混匀，得到预处理复合菌剂，将预处理复合菌剂接种到相当于所述复合菌剂质量50倍的、步骤1的灭菌的强壮散合剂中，控制湿度为38％，然后在30℃下厌氧固体发酵培养6d，发酵培养结束后，干燥发酵产物，即得到发酵型强壮散合剂。
实施例4
一种发酵型强壮散合剂的制备方法，包括以下步骤：
步骤1，按质量百分比称取以下各中药组分：党参20％、六神曲7％、麦芽7％、炒山楂7％、黄芪20％、茯苓15％、白术10％、草豆蔻14％；
步骤2，将步骤1中称取的各中药组分粉碎后混匀，过100目筛，得到强壮散合剂，将所述强壮散合剂灭菌后备用；
步骤3，制备复合菌剂：所述复合菌剂由枯草芽孢杆菌固体菌剂、凝结芽孢杆菌固体菌剂、嗜酸乳杆菌固体菌剂按照1：1：1的质量比混合而成；
其中，枯草芽孢杆菌固体菌剂的制备方法同实施例1，凝结芽孢杆菌固体菌剂、嗜酸乳杆菌固体菌剂的制备方法同实施例2；
步骤4，将步骤3的复合菌剂与无菌水、蔗糖、食盐按照1：5：0.25：0.025的质量比混匀，得到预处理复合菌剂，将预处理复合菌剂接种到相当于所述复合菌剂质量50倍的、步骤1的灭菌的强壮散合剂中，控制湿度为36％，然后在35℃下厌氧固体发酵培养6d，发酵培养结束后，干燥发酵产物，即得到发酵型强壮散合剂。
实施例5
一种发酵型强壮散合剂的制备方法，包括以下步骤：
步骤1，按质量百分比称取以下各中药组分：党参20％、六神曲7％、麦芽7％、炒山楂7％、黄芪20％、茯苓15％、白术10％、草豆蔻14％；
步骤2，将步骤1中称取的各中药组分粉碎后混匀，过50目筛，得到强壮散合剂，将所述强壮散合剂灭菌后备用；
步骤3，制备复合菌剂：所述复合菌剂由酵母菌固体菌剂、凝结芽孢杆菌固体菌剂、嗜酸乳杆菌固体菌剂按照1：2：1的质量比混合而成；
其中，酵母菌固体菌剂的制备方法同实施例1，凝结芽孢杆菌固体菌剂、嗜酸乳杆菌固体菌剂的制备方法同实施例2；
步骤4，将步骤3的复合菌剂与无菌水、蔗糖、食盐按照1：5：0.25：0.025的质量比混匀，得到预处理复合菌剂，将预处理复合菌剂接种到相当于所述复合菌剂质量50倍的、步骤1的灭菌的强壮散合剂中，控制湿度为37％，然后在25℃下厌氧固体发酵培养7d，发酵培养
实施例6
一种发酵型强壮散合剂的制备方法，包括以下步骤：
步骤1，按质量百分比称取以下各中药组分：党参20％、六神曲7％、麦芽7％、炒山楂7％、黄芪20％、茯苓15％、白术10％、草豆蔻14％；
步骤2，将步骤1中称取的各中药组分粉碎后混匀，过100目筛，得到强壮散合剂，将所述强壮散合剂灭菌后备用；
步骤3，制备复合菌剂：所述复合菌剂由枯草芽孢杆菌固体菌剂、酵母菌固体菌剂、凝结芽孢杆菌固体菌剂以及嗜酸乳杆菌固体菌剂按照1：1：1：1的质量比混合而成；
其中，枯草芽孢杆菌固体菌剂、酵母菌固体菌剂的制备方法同实施例1，凝结芽孢杆菌固体菌剂、嗜酸乳杆菌固体菌的制备方法同实施例2；
步骤4，将步骤3的复合菌剂与无菌水、蔗糖、食盐按照1：5：0.25：0.025的质量比混匀，得到预处理复合菌剂，将预处理复合菌剂接种到相当于所述复合菌剂质量50倍的、步骤1的灭菌的强壮散合剂中，控制湿度为40％，然后在40℃下厌氧固体发酵培养5d，发酵培养结束后，干燥发酵产物，即得到发酵型强壮散合剂。
实施例1-6均制备出了效果良好的发酵型强壮散合剂，且效果相当，因此仅以实施例1为例，说明相关动物试验效果(动物试验在河南秀田农牧股份有限公司万头猪场进行)。
将28只育肥猪随机分为两组，一组为实验组，另一组为对照组，每组14只。2016年4月20日开始，按质量比为0.1％的添加量将实施例1制备出的强壮散加入正常日料中喂养实验组7天，对照组喂食正常日料，然后从2016年4月28日起观察30天的结果，具体试验效果如表1所示。
表1育肥猪喂养实验结果
由表1可知，在上述实验条件下，实验组比对照组平均每头猪增重2.5kg，增重率提高了10.8％，且试验间观察到实验组猪的采食量明显增加，粪便减少且蓬松，此外，实验组无拉稀现象，猪的皮毛光亮，对照组的猪则出现腹泻现象。
上述动物试验结果表明，本发明的发酵型强壮散合剂中中药成分经过优选的益生菌进行发酵处理后，主要成分发生较大的变化，其中难以吸收利用的大分子物质经过微生物的代谢作用变成易吸收的小分子，毒性物质的含量也随之降低，利用微生物和中药的相互作用得到全新产品，该产品充分发挥了中草药组分的保健作用，避免中药材直接粉碎食用的药效低、不吸收问题，具有增强免疫、健胃增食、增重促长、补充营养、补肝、益气、益精、抗菌消炎、防病抗病的功能，猪食用后增强了其抵抗力，减少了疾病的发生，有助于其成长。
需要说明的是，为了防止赘述，本发明的描述了优选的实施例1-6，尽管已描述了本发明的优选实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以，所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。
显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。