一种具有高稳定性高活性的饲料用脂肪酶生产工艺的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种具有高稳定性高活性的饲料用脂肪酶生产工艺，包括胰蛋白酶修饰、粗纤维膨胀处理、粗纤维固化、成品加工，该工艺生产的脂肪经过物理固化保护的同时还进行了酶学修饰，在物理固化加强脂肪酶稳定性和抗酸性的同时采用对应的酶学修饰进一步提高其抗酸性和稳定性，酶学修饰尤其能提高未失活的脂肪酶的活性，加快油脂的分解，达到快速分解饲料中油脂的目的。
【专利说明】
一种具有高稳定性高活性的饲料用脂肪酶生产工艺
技术领域
[0001]本发明涉及微生物次级代谢产物中脂肪酶用于加工饲料添加剂的技术领域，尤指一种具有高稳定性高活性的饲料用脂肪酶生产工艺。
【背景技术】
[0002]在饲料中添加油脂能够提高饲料的适口性、营养性和降低饲料在生产中产生的粉尘度等，但添加的大部分油脂难于被胃肠道吸收，过多的油脂一方面造成物料浪费，另一方面还会导致家畜腹泻或消化不良等，现有技术针对油脂存在的不足提出在饲料中添加脂肪酶来促进饲料中油脂的消化，这一技术存在着饲料再造粒的时候会受到很大的机械挤压，从而产生大量的机械摩擦热，导致脂肪酶失活，若不进行造粒，饲料的适口性会下降的同时也存在油脂与饲料结块等问题，综上所述在饲料生产中直接添加脂肪酶的工艺在现有技术下不可取。
[0003]技术人员转而在饲料添加剂中加入脂肪酶，在饲喂时与饲料混合从而消除以上不足，但单纯的脂肪酶难于适应胃肠道的酸性环境，经家畜食用后经胃液后还未达到肠道所在的作用点就几乎已经失活，哪怕有部分未失活再经肠液和胆汁的消化，最终未失活的脂肪酶几乎为零，难于实现家畜食用脂肪酶后帮助消化饲料中油脂的目的。
【发明内容】
[0004]为解决上述问题，本发明提供了一种具有高稳定性高活性的饲料用脂肪酶生产工艺，该工艺生产的脂肪经过物理固化保护的同时还进行了酶学修饰，在物理固化加强脂肪酶稳定性和抗酸性的同时采用对应的酶学修饰进一步提高其抗酸性和稳定性，酶学修饰尤其能提高未失活的脂肪酶的活性，加快油脂的分解，达到快速分解饲料中油脂的目的。
[0005]为达到上述目的，本发明采用以下技术实现，一种具有高稳定性高活性的饲料用脂肪酶生产工艺，包括胰蛋白酶修饰、粗纤维膨胀处理、粗纤维固化、成品加工，具体步骤如下，
a.胰蛋白酶修饰:脂肪酶经胰蛋白酶修饰后获得修饰脂肪酶；
b.粗纤维膨胀处理:将干燥的粗纤维放置于水中浸泡0.5-3h，取出后自然滤干至表面没有水分为止，将处理后的粗纤维放入真空桶内自然膨胀处理，获得大孔隙粗纤维，将大孔隙粗纤维切割为2_5cm长的粗纤维片段；
c.粗纤维固化:将修饰脂肪酶溶于水后将粗纤维片段浸泡于修饰脂肪酶溶液中0.5-5h后将粗纤维片段取出进行冷冻干燥后获得固化脂肪酶，修饰脂肪酶溶液中修饰脂肪酶与水的质量比为1:1-50;
d.成品加工:将固化脂肪酶、膨润土和修饰脂肪酶按质量比5:3:1的比例加水混合获得粘稠液，将粘稠液低速搅拌混合0.3-2h后进行低温冻结获得固体混合物，将固体混合物粉碎后进行冷冻干燥获得成品。
[0006]作为本发明的进一步改进，所述干燥的粗纤维为将甘薯稍尖按10-20cm—段采摘后放置于清水中浸泡0.5-24h，将浸泡后的甘薯稍晾晒0.5-6h后弃除甘薯稍上的甘薯叶，将弃除甘薯叶后的甘薯稍用揉丝机进行揉丝处理，揉丝后经干燥处理的甘薯稍丝即为干燥的粗纤维。
[0007]作为本发明的进一步改进，所述胰蛋白酶修饰为将胰蛋白酶用Ph2.5-4.0的Hcl溶液配置为l_5mg/l的酶溶液，置于0-4°C冷藏备用获得低温酶溶液，将游离脂肪酶和低温酶溶液加入到Ph为7-8的缓冲液中，在25-37°C的恒温条件下处理20-60min后获得修饰脂肪酶，其中游离脂肪酶和胰蛋白酶的蛋白质质量比为1:1-5。
[0008]本发明与现有技术相比具有以下有益效果:
1、该工艺生产的脂肪经过物理固化保护的同时还进行了酶学修饰，在物理固化加强脂肪酶稳定性和抗酸性的同时采用对应的酶学修饰进一步提高其抗酸性和稳定性，酶学修饰尤其能提高未失活的脂肪酶的活性，加快油脂的分解，达到快速分解饲料中油脂的目的。
【具体实施方式】
[0009]实施例1
一种具有高稳定性高活性的饲料用脂肪酶生产工艺，包括胰蛋白酶修饰、粗纤维膨胀处理、粗纤维固化、成品加工，具体步骤如下，
a.胰蛋白酶修饰:脂肪酶经胰蛋白酶修饰后获得修饰脂肪酶；
b.粗纤维膨胀处理:将干燥的粗纤维放置于水中浸泡0.5h，取出后自然滤干至表面没有水分为止，将处理后的粗纤维放入真空桶内自然膨胀处理，获得大孔隙粗纤维，将大孔隙粗纤维切割为2cm长的粗纤维片段；
c.粗纤维固化:将修饰脂肪酶溶于水后将粗纤维片段浸泡于修饰脂肪酶溶液中0.5h后将粗纤维片段取出进行冷冻干燥后获得固化脂肪酶，修饰脂肪酶溶液中修饰脂肪酶与水的质量比为1:1;
d.成品加工:将固化脂肪酶、膨润土和修饰脂肪酶按质量比5:3:1的比例加水混合获得粘稠液，将粘稠液低速搅拌混合0.3h后进行低温冻结获得固体混合物，将固体混合物粉碎后进行冷冻干燥获得成品，所述干燥的粗纤维为将甘薯稍尖按1cm—段采摘后放置于清水中浸泡0.5h，将浸泡后的甘薯稍晾晒0.5h后弃除甘薯稍上的甘薯叶，将弃除甘薯叶后的甘薯稍用揉丝机进行揉丝处理，揉丝后经干燥处理的甘薯稍丝即为干燥的粗纤维，所述胰蛋白酶修饰为将胰蛋白酶用Ph2.5的He I溶液配置为lmg/1的酶溶液，置于O °C冷藏备用获得低温酶溶液，将游离脂肪酶和低温酶溶液加入到Ph为7的缓冲液中，在25°C的恒温条件下处理20min后获得修饰脂肪酶，其中游离脂肪酶和胰蛋白酶的蛋白质质量比为1:1。
[0010]实施例2
一种具有高稳定性高活性的饲料用脂肪酶生产工艺，包括胰蛋白酶修饰、粗纤维膨胀处理、粗纤维固化、成品加工，具体步骤如下，
a.胰蛋白酶修饰:脂肪酶经胰蛋白酶修饰后获得修饰脂肪酶；
b.粗纤维膨胀处理:将干燥的粗纤维放置于水中浸泡2h，取出后自然滤干至表面没有水分为止，将处理后的粗纤维放入真空桶内自然膨胀处理，获得大孔隙粗纤维，将大孔隙粗纤维切割为3cm长的粗纤维片段；
c.粗纤维固化:将修饰脂肪酶溶于水后将粗纤维片段浸泡于修饰脂肪酶溶液中0.5-5h后将粗纤维片段取出进行冷冻干燥后获得固化脂肪酶，修饰脂肪酶溶液中修饰脂肪酶与水的质量比为1: 25;
d.成品加工:将固化脂肪酶、膨润土和修饰脂肪酶按质量比5:3:1的比例加水混合获得粘稠液，将粘稠液低速搅拌混合I.5h后进行低温冻结获得固体混合物，将固体混合物粉碎后进行冷冻干燥获得成品，所述干燥的粗纤维为将甘薯稍尖按15cm—段采摘后放置于清水中浸泡llh，将浸泡后的甘薯稍晾晒3h后弃除甘薯稍上的甘薯叶，将弃除甘薯叶后的甘薯稍用揉丝机进行揉丝处理，揉丝后经干燥处理的甘薯稍丝即为干燥的粗纤维，所述胰蛋白酶修饰为将胰蛋白酶用Ph3.0的He I溶液配置为3mg/l的酶溶液，置于2 °C冷藏备用获得低温酶溶液，将游离脂肪酶和低温酶溶液加入到Ph为7.5的缓冲液中，在30°C的恒温条件下处理40min后获得修饰脂肪酶，其中游离脂肪酶和胰蛋白酶的蛋白质质量比为1:3。
[0011]实施例3
一种具有高稳定性高活性的饲料用脂肪酶生产工艺，包括胰蛋白酶修饰、粗纤维膨胀处理、粗纤维固化、成品加工，具体步骤如下，
a.胰蛋白酶修饰:脂肪酶经胰蛋白酶修饰后获得修饰脂肪酶；
b.粗纤维膨胀处理:将干燥的粗纤维放置于水中浸泡3h，取出后自然滤干至表面没有水分为止，将处理后的粗纤维放入真空桶内自然膨胀处理，获得大孔隙粗纤维，将大孔隙粗纤维切割为5cm长的粗纤维片段；
c.粗纤维固化:将修饰脂肪酶溶于水后将粗纤维片段浸泡于修饰脂肪酶溶液中5h后将粗纤维片段取出进行冷冻干燥后获得固化脂肪酶，修饰脂肪酶溶液中修饰脂肪酶与水的质量比为1:50;
d.成品加工:将固化脂肪酶、膨润土和修饰脂肪酶按质量比5:3:1的比例加水混合获得粘稠液，将粘稠液低速搅拌混合2h后进行低温冻结获得固体混合物，将固体混合物粉碎后进行冷冻干燥获得成品，所述干燥的粗纤维为将甘薯稍尖按20cm—段采摘后放置于清水中浸泡24h，将浸泡后的甘薯稍晾晒6h后弃除甘薯稍上的甘薯叶，将弃除甘薯叶后的甘薯稍用揉丝机进行揉丝处理，揉丝后经干燥处理的甘薯稍丝即为干燥的粗纤维，所述胰蛋白酶修饰为将胰蛋白酶用Ph4.0的Hcl溶液配置为5mg/l的酶溶液，置于4°C冷藏备用获得低温酶溶液，将游离脂肪酶和低温酶溶液加入到Ph为8的缓冲液中，在37°C的恒温条件下处理60min后获得修饰脂肪酶，其中游离脂肪酶和胰蛋白酶的蛋白质质量比为1: 5。
【主权项】
1.一种具有高稳定性高活性的饲料用脂肪酶生产工艺，包括胰蛋白酶修饰、粗纤维膨胀处理、粗纤维固化、成品加工，具体步骤如下， a.胰蛋白酶修饰:脂肪酶经胰蛋白酶修饰后获得修饰脂肪酶； b.粗纤维膨胀处理:将干燥的粗纤维放置于水中浸泡0.5-3h，取出后自然滤干至表面没有水分为止，将处理后的粗纤维放入真空桶内自然膨胀处理，获得大孔隙粗纤维，将大孔隙粗纤维切割为2-5cm长的粗纤维片段； c.粗纤维固化:将修饰脂肪酶溶于水后将粗纤维片段浸泡于修饰脂肪酶溶液中0.5-5h后将粗纤维片段取出进行冷冻干燥后获得固化脂肪酶，修饰脂肪酶溶液中修饰脂肪酶与水的质量比为1:1-50; d.成品加工:将固化脂肪酶、膨润土和修饰脂肪酶按质量比5:3:1的比例加水混合获得粘稠液，将粘稠液低速搅拌混合0.3-2h后进行低温冻结获得固体混合物，将固体混合物粉碎后进行冷冻干燥获得成品。2.根据权利要求1所述一种具有高稳定性高活性的饲料用脂肪酶生产工艺，其特征在于:所述干燥的粗纤维为将甘薯稍尖按10-20cm—段采摘后放置于清水中浸泡0.5-24h，将浸泡后的甘薯稍晾晒0.5-6h后弃除甘薯稍上的甘薯叶，将弃除甘薯叶后的甘薯稍用揉丝机进行揉丝处理，揉丝后经干燥处理的甘薯稍丝即为干燥的粗纤维。3.根据权利要求1或2所述一种具有高稳定性高活性的饲料用脂肪酶生产工艺，其特征在于:所述胰蛋白酶修饰为将胰蛋白酶用Ph2.5-4.0的Hcl溶液配置为l-5mg/l的酶溶液，置于0-4 °C冷藏备用获得低温酶溶液，将游离脂肪酶和低温酶溶液加入到Ph为7-8的缓冲液中，在25-37 °C的恒温条件下处理20-60min后获得修饰脂肪酶，其中游离脂肪酶和胰蛋白酶的蛋白质质量比为1:1-5。
【文档编号】C12N9/20GK105995037SQ201610351280
【公开日】2016年10月12日
【申请日】2016年5月25日
【发明人】王春
【申请人】昆明诺本科技有限公司