一种药物组合物在制备增加放射治疗与化学治疗效果的药剂中的用途的制作方法

专利名称：一种药物组合物在制备增加放射治疗与化学治疗效果的药剂中的用途的制作方法
技术领域：
本发明是涉及药物组合物在化学疗法及/或放射疗法诱发损伤的治疗的应用，更特别地，是涉及一种药物组合物在增加放射治疗与化学治疗的治疗效果的药剂制备中的用途。
背景技术：
单独放射治疗或与化学治疗同时或相继治疗是对于头颈部、胸部、皮肤、肛门生殖道癌症，以及某些非恶性疾病如瘢痕(keloid)、硬纤维瘤(desmoid tumor)、血管瘤(hemangioma)、动静脉畸形(arteriovenous malformation)、及组织细胞增生病X(histocytosis X)有效的疗法。然而，治疗优点会受限于放射治疗或化学治疗所引发的黏膜上皮损伤与表皮放射性并发症(cutaneous radiation syndrome，简称CRS)，上述并发症包括急性反应如组织水肿、黏膜炎、皮肤炎、脱皮及溃疡，以及长期效应包括组织/皮肤纤维化、坏死、与后续演变可能危及生命的肉瘤、表皮与基底细胞癌(Peter，R.U.表皮放射性并发症。放射损伤的治疗的进展参见Advances in the treatment of radiationinjuries，第237-240页OxfordElsevier，1996)。事实上，皮肤会受到外来针对内脏的各种形式的放射治疗的影响，且黏膜炎可能在口腔、食道、胃肠道、膀胱、阴道、直肠、肺脏、鼻腔、耳及眼窝发生，为化疗与放射治疗的副作用。对于放射性或化学治疗所致组织损伤的治疗最常使用类固醇或非类固醇类抗炎症药，但其效果并不令人满意。类固醇出现副作用如下红斑，干燥，脱屑，毛细血管扩张，皮肤萎缩，毛囊性炎性丘疹，色素沉着，粉刺，多毛，色素减退，毛囊性脓疱等。一般认为非类固醇类药物的作用机制是抑制前列腺素合成，由于前列腺素在身体的很多部位作为局部激素发挥重要作用，不难理解这类药物除镇痛、抗炎和解热作用外，还有很多副作用。如抑制前列腺素合成可致溃疡性疾病等。能选择性地减低皮肤发生损伤且不损及放射疗法与化疗的杀肿瘤效果的方法是放射线与医疗肿瘤学长期以来所寻求的目标。
已测试过可用于处理放射性或化疗引发的损伤的药物包括抗氧化剂(维他命E与超氧化物歧化酶(superoxide dismutase))、抗炎症剂(类固醇、秋水仙素、D-青霉胺，以及TNF-α拮抗性抗体)、以及抗纤维原剂(干扰素、TGF-β拮抗剂、以及血管紧张素转化酶抑制剂)。这些药物皆无法同时减轻急性皮肤炎与黏膜炎，预防纤维化发生，以及减少晚期肿瘤发生；还有药物毒性、副作用、肿瘤保护可能性，另外缺乏抗肿瘤作用也很棘手。
在放射线及/或化疗药剂引发损伤后，受影响组织分泌细胞因子(如肿瘤坏死因子(TNF-α))及生长因子(如转形生长因子(TGF-β))持续并增强免疫反应，同时促进成纤维细胞的补充与增生，但抑制上皮细胞生长(Hill et al，Int.J.Radiat.Oncol.Biol.Phys.，49353-365，2001；Seong et al，Int.J.Radiat.Oncol.Biol.Phys.，46639-643，2000；Wang et al，Am.J.Pathol.，1531531-1540，1998；Fedorocko et al，Int.J.Radiat.Biol.，78305-313，2002；Martin et al，Int.J.Radiat.Oncol.Biol.Phys.，47277-290，2000；Randall et al，Int.J.Radiat.Biol.，70351-360，1996；Border et al，N.Engl.J.Med.，3311286-1292，1994；Singer et al，N.Engl.J.Med.，341738-746，1999)。特别是，由上皮、内皮、及结缔组织细胞持续分泌TNF-α与TGF-β会增大损伤对于放射线的反应，这可能是因为遗传学上细胞分化与增生的修饰，导致组织学上的修饰，特征为CRS(Zhou et al，Int.J.Radiat.Biol.，77763-772，2001；Skwarchuk et al，Int.J.Radiat.Oncol.Biol.Phys.，42169-178，1998；Sivan et al，Int.J.Radiat.Oncol.Biol.Phys.，53385-393，2002；Delanian et al，Radiother.Oncol.，47255-261，1998)。TGF-β的慢性活化路径也会刺激后期肿瘤生成(Wieser et al，Curr.Opin.Oncol.，1370-77，2001；Massague et al，Cell，103295-309，2000)。因此，CRS与放射性引发的癌症发生可能被视为放射线暴露后伤口修复程序的遗传异常现象。
一组名为组蛋白去乙酰化抑制剂(histone deacetylase(HDAC)inhibitors)的基因调控化合物会活化与抑制基因亚群，其是经由改变组蛋白乙酰化而重建染色质结构(Marks et al，J.Natl.Cancer Inst.，921210-1216，2000；Kramer et al，TrendsEndocrinol.Metab.，12294-300，2001)。组蛋白过乙酰化会造成细胞周期抑制剂(p21Cip1，p27Kip1，及p16INK4)的上调(即增量表达)，致癌基因(Myc及Bcl-2)的下调(即减量表达)，炎症细胞因子(白介素(IL)-1，IL-8，TNF-α，及TGF-β)的抑制，或无改变(GAPDH及γ-actin)(Lagger et al，EMBO J.，212672-2681，2002；Richon et al，Clin.Cancer Res.，8662-667，2002；Richon et al，Proc.Natl.Acad.Sci.USA.，9710014-10019，2000；Van Lint et al，Gene Expr.，5245-243，1996；Huang et al，Cytokine，927-36，1997；Mishra et al，Proc.Natl.Acad.Sci.USA.，982628-2633，2001；Stockhammer et al，J.Neurosurg.，83672-681，1995；Segainet al，Gut，47397-403，2000；Leoni et al，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，992995-3000，2002)。除了引发组蛋白过乙酰化，HDAC抑制剂也诱导非组蛋白如核糖体S3、p53或NF-κB的Rel-A亚单位的过乙酰化，调控蛋白质激酶C(PKC)活性，抑制蛋白异戊二烯化，减低DNA甲基化，以及结合至核受体(Webb et al，J.Biol.Chem.，27414280-14287，1999；Chen et al，Science，2931653-1657，2001)，HDAC抑制剂显示具有引发细胞周期休止、细胞分化以及肿瘤细胞的细胞凋零死亡的能力，且对免疫疾病具有降低炎症反应与纤维化的能力(Warrell et al，J.Natl.CancerInst.，901621-1625，1998；Vigushin et al，Clin.CancerRes.，7971-976，2001；Saunders et al，Cancer Res.，59399-404，1999；Gottlicher et al，EMBO J.，206969-6978，2001；Rombouts et al，Acta Gastroenterol.Belg.，64239-246，2001)。虽然HDAC抑制剂的效果引发大量组蛋白乙酰化，造成肿瘤细胞凋零死亡，末期分化，以及生长休止，但对于正常细胞无毒性(Garber et al，J.Natl.Cancer Inst.，94793-795，2002)。此外，染色质结构经HDAC抑制剂的调整也能使本质为放射抗性的肿瘤细胞更为放射敏感化，且使肿瘤细胞对于化疗也较敏感化(Ferrandina et al，Oncol.Res.，12429-440，2001；Miller et al，Int.J.Radiat.Biol.，72211-218，1997；Biadeet al，Int.J.Radiat.Biol.，771033-1042，2001)。
因此，基于可经由不同地重建正常与肿瘤细胞的染色质，同时、协同、选择性地在基因外控制肿瘤抑制子、致癌基因、前炎症细胞因子(TNF-α)，与纤维原生长因子(TGF-β)的表达。可以组蛋白去乙酰化抑制剂可以用于增加增生性恶性或非恶性疾病化学疗法及/或放射疗法的治疗效果的药剂的制备，其活性化合物通常为组蛋白过乙酰化剂(histone hyperacetylating agents)，如组蛋白去乙酰化抑制剂。已知多种这类化合物，请参见如P.Dulski，Histone Deacetylase as Target for Antiprotozoal Agents，PCTApplication WO 97/11366(Mar.27，1997)。
另有关研究表明(《生物化学与生物物理进展》2003；30(1)19-23)肿瘤发生的一个重要起因是细胞增殖和分化失常，细胞增殖分化在正常情况下受到许多信息的调控而保持平衡状态，一旦这种平衡受到各种物理，化学或生物因素的扰乱失去平衡，就会引起异常分化与增殖或进而导致恶性生长，细胞及有机体内组蛋白的乙酰化和去乙酰化之间存在着一种平衡，这种平衡是受到严格控制的，是调节基因表达的一个重要因素，从而参与决定细胞的命运，平衡的打破成为产生某些癌症或抑制另一些癌症的直接诱因，越来越多的证据表明在组蛋白乙酰化的失衡与癌症发生之间存在着密切的联系，在几种类型的癌症中发现编码HAT和HDAC基因的参与和突变。编码HAT的基因易于易位、扩增、过量表达或点突变。同时也发现HDAC介导产生致癌的易位产物，HDAC与一些本身就经常发生突变的肿瘤抑制蛋白相互作用。有试验表明组蛋白去乙酰化与癌症的发生存在着明显的联系。自20世纪90年代以来，越来越多的HDAC抑制剂(inhibitor)被发现和验证，这些抑制剂能够诱导很多培养的转化细胞生长停滞、分化或细胞凋亡，包括成神经细胞瘤、黑色素瘤、白血病细胞以及来自乳腺、前列腺、肺、卵巢和结肠癌的细胞。HDAC抑制剂对于基因表达的作用有高度的选择性，可以激活某些基因(如p21WAF1/CIP1)的表达而抑制另一些基因的表达。HDAC抑制剂不仅导致组蛋白的乙酰化，而且可使转录因子(如p53，GATA1等)乙酰化。在肿瘤和正常组织中，HDAC抑制剂导致乙酰化组蛋白的积累，在正常细胞中，这些乙酰化组蛋白的积累不足以抑制细胞的增长，乙酰化组蛋白的积累作为HDAC抑制剂活性的一个有效性指标。
但是，目前关于组蛋白去乙酰化抑制剂的研究成果中，没有提及该物质在制备增加放射治疗与化学治疗的治疗效果的方法与药物组合物的用途中的详实、可靠数据，更没有该制剂的施用时的方法和剂量的试验研究。也缺乏该组蛋白去乙酰化抑制剂中不同构造的活性化合物是否具有类似的有益效果等等，从而不能广泛、容易的为社会所用。

发明内容
本发明的目的是提供一种药物组合物在制备增加放射治疗与化学治疗效果的药剂中的用途，以在所需个体产生高肿瘤控制率与低治疗后遗症发生率。
本发明还包括施用该药物组合物至一所需个体。
本发明的药物组合物能够同时(1)增加需放射治疗及/或化疗的宿主的肿瘤或增生细胞生长抑制，以及(2)预防或减缓放射治疗及或化疗引发的后遗症，包括黏膜炎、皮肤炎、溃疡、纤维化、口干症、跖-掌并发症、及肿瘤生成。(3)增进肿瘤的放射敏感性。
本发明为达到发明目的采取的技术方案为该药物组合物包括治疗上有效量的组蛋白过乙酰化剂以及药学上可接受的载体或有效量的组蛋白过乙酰化剂在药学上可接受盐。其中
该组蛋白过乙酰化剂为组蛋白去乙酰化抑制剂。
该组蛋白去乙酰化抑制剂在药学上可接受盐包括碱金属盐、碱土金属盐、含有机碱的盐、含有机碱的盐。
该可接受盐包括钙盐、镁盐、铵盐、三乙基胺盐、乙醇胺盐。
该药物组合物的制备方法包括按重量比例取组蛋白过乙酰化剂∶药学可接受的载体为1∶100-10∶100，将其混合加热形成糊状物，搅拌混匀后冷却。该加热温度为30℃-100℃。
该载体可为矿脂、软石蜡、液态石蜡等。
上述制备方法中可将一种或两种以上的载体加热作为第一成分，将一种或两种以上的组蛋白过乙酰化剂加热溶于离子水作为第二成分，将第二成分加入第一成分搅拌混匀，冷却。可使用体积重量比为0.10％-10.00％的磷酸调整该药物组合物混匀后PH值为3-6。
该组蛋白过乙酰化剂为毛斯达丁A(Trichostatin A)或毛斯达丁C(Trichostatin C)；为选自澳杉弗利廷(Oxamflatin)，穿普克辛A(Trapoxin A)，FR901228，艾皮斯汀(Apicidin)，HC-毒素，WF27082，以及衣原体素(chlamydocin)所组成的族群；为选自柳酰基异羟肟酸(salicylihydroxamic acid)，辛二烯胺苯异羟肟酸(suberoylanilide hydroxamic acid)，及壬二双异羟肟酸(azelaic bishydroxamic acid)所组成的族群；为选自壬二-1-异羟肟酸-9-胺苯(azelaic-1-hydroxamate-9-anilide)，M-羧桂皮酸双氢氧胺(M-carboxycinnamic acid bishydroxamide)，6-(3-氯苯尿基)卡玻酸异羟肟酸((6-(3-chlorophenylureido)carpoichydroxamic acid)，MW2796，以及MW2996所组成的族群；为选自丁酸钠(sodium butyrate)，异戊酸(isovalerate)，丙戊酸(valproic acid)，戊酸酯(valerate)，4-丁酸苯酯(4-phenylbutyrate)，丁酸苯酯钠(sodium phenylbutyrate)，丙酸(propionate)，丁亚酰胺(Butrymide)，异丁酰胺(isobutyramide)，乙酸苯酯(phenylacetate)，丙酸3溴(3-bromopropionate)，以及丁酸甘油酯(tributyrin)所组成的族群；为MS-27-275或其3′-胺基衍生物；或为低朴第辛(音译depudecin)或史奎普泰(Scriptaid)。
本发明涉及的增加的治疗效果是同时增进肿瘤的放射线敏感性或使肿瘤对于化学疗法敏感化，增加肿瘤生长抑制，增进黏膜炎与皮肤炎的伤口复原，预防/减缓跖-掌症候群，减低组织纤维化，避免正常组织发生细胞死亡，预防口干症，及抑制肿瘤生成。
本发明涉及的放射疗法是体外照射放射治疗法(teletherapy)、腔内近接放射治疗法(brachytherapy)、或游离辐射法(ionizing radiation)。
本发明涉及的增生性恶性疾病是选自黑色素瘤，卡波西氏肉瘤(Kaposi’s sarcoma)，骨肉瘤(osteosarcoma)，神经母细胞瘤(neuroblastoma)，横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcoma)，依文氏肉瘤(Ewing‘s sarcoma)，软组织肉瘤，皮肤癌，淋巴瘤，血癌，乳癌，生殖细胞肿瘤，原始性神经外胚瘤(primitiveneuroectodermal tumor)，脑胶质瘤(brain glioma)，脑脊髓膜瘤(brain meningioma)，头颈癌症，甲状腺癌，胸腺癌，子宫颈癌，肛门癌症，直肠癌，前列腺癌，肺癌，肝细胞癌，胆管癌(cholangiocarcinoma)，胃癌，胰腺癌，食道癌，病毒相关肿瘤，及接受骨髓移植所导致的疾病所组成的族群。
该增生性非恶性疾病是选自角膜翼状努肉(pterygium)，葛瑞夫兹氏眼病变(Graves’ophthalmopathy)，框假瘤(orbitalpseudotumor)，黄斑病变(macular degeneration)，瘢痕疙瘩(keloid)，疣，角化棘皮瘤(keratoacanthoma)，血管瘤(hemangioma)，房室异形，肌腱炎，纤维类瘤(desmoid tumor)，培洛尼氏病(Peyronie’s disease)，血管狭窄(vascularstenosis)，造釉细胞瘤(ameloblastoma)，动脉瘤样骨囊肿(aneurysmal bone cyst)，异位性骨化(heterotopic boneformation)，男性女乳化(gynecomastia)，卵巢去除(ovariancastration)，腮腺炎(parotitis)，湿疹，异位性皮肤炎，牛皮癣，肩周炎(periarthritis humeroscapularis)，上髁炎(epicondylitis)，膝关节病变，汗腺炎，瘭疽(panaritium)，自体免疫炎症性关节炎，组织细胞增生病X，及接受器官移植所引发的疾病所组成的族群。
该药剂经静脉注射、胃肠道、非胃肠道、肌肉内、鼻内、皮下、局部等非口服或口服施用。施用该药剂量是该组合物中存在有0.001％至100重量百分比(以施用药物为总量)的组蛋白过乙酰化剂。
该药剂是乳剂，油剂，凝胶，糊状物，粉末，乳液，贴片，栓剂，脂肪体剂型，悬浮液，漱口剂、灌肠剂，注射溶液，或点滴注射剂。
该药剂更包括第二药剂，是选自细胞因子，介白素，抗癌症剂或抗新生剂、抗血管新生剂，化疗剂，抗体，共轭抗体，免疫刺激物，抗生素，视黄酸，酪胺酸激酶抑制剂、激素拮抗剂，及生长刺激物所组成的族群。
上述共轭抗体是选自贺塞汀，c225，及美罗华所组成的族群。
该化疗剂是选自烷化剂(alkylating agent)，嘌呤类似物(purine analog)，嘧啶类似物(pyrimidine analog)，长春花生物碱(vinca alkaloid)，类长春花生物碱(vinca-like alkaloid)，鬼臼亚乙苷(etoposide)，类鬼臼亚乙苷药物(etoposide-likedrug)，类固醇，亚硝基脲(nitrosourea)，抗代谢物(antimetabolite)，铂类细胞毒性药(platinum-based cytotoxicdrug)，抗雄性激素(anti-androgen)，及抗雌性激素(anti-estrogen)所组成的族群。
该抗血管新生剂是选自沙利窦迈(thalidomide)，SU5416，SU6668，凝血栓蛋白-1(thrombospondin-1)，血管内皮抑制素(endostatin)，及血管阻断素(angiostatin)所组成的族群。
该抗生素是选自更昔洛韦(ganciclovir)，阿昔洛韦(acyclovir)，及泛昔洛韦(famciclovir)所组成的族群。
该药物组合物施用时可以与其它用于增加增生性恶性或非恶性疾病的放射治疗及/或化疗效果的化合物组成试剂盒，该试剂盒中的试剂可以同时或组合施用。
本发明包括HDAC抑制剂的药物组合物提供有效的治疗，不只是减低放射性及/或化疗引发黏膜/皮肤损伤，也促进抗肿瘤作用以强化放射治疗及/或化疗的治疗效果。
这类化合物的例子包括但不限于A、毛斯达丁(Trichostatin A)及其类似物，如毛斯达丁A(简称TSA)；毛斯达丁C(Trichostatin C)(Koghe et al.1998.Biochem.Pharmacol.561359-1364)(已分离出的毛斯达丁B(Trichostatin B)并未显示具有HDAC抑制剂作用)。
B、肽，如澳杉弗利廷(Oxamflatin)[(2E)-5-[3-[(苯基磺酰基)胺基苯基]-戊基-2-烯-4-异羟肟酸(Kim etal.Oncogene，182461-2470(1999))；穿普克辛A(Trapoxin A)(TPX)-环四肽 (环-(L-苯丙氨酰-L-苯丙氨酰-D-六氢啶羧酸-L-2-胺基-8-氧代-9，10-环氧-癸酰基))(Kijima et al.，J.Biol.Chem.268，22429-22435(1993))；FR901228，Depsipeptide(Nakajima etal.，Ex.Cell Res.241，126-133(1998))；FR225497，环四肽(H.Mori et al.，PCT Application WO 00/08048(Feb.17，2000))；艾皮斯汀(音译Apicidin)，环四肽[环(N-O-甲基-L-色胺酰-L-异白胺酸-D-六氢啶羧酸-L-2-胺基-8-氧代癸酰基)](Darkin-Rattray et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 93，13143-13147(1996))；艾皮斯汀1a，艾皮斯汀Ib，艾皮斯汀Ic，艾皮斯汀IIa，以及艾皮斯汀IIb(P.Dulski et al.，PCTApplication WO 97/11366)；HC-毒素，环四肽(Bosch et al.，PlantCell 7，1941-1950(1995))；WF27082，环四肽(PCT ApplicationWO 98/48825)；以及衣原体素(chlamydocin)(Bosch et al.，supra)。
C、异羟肟酸类杂合极性化合物(HPCs)，如柳酰基异羟肟酸(Salicylihydroxamic acid，SBHA)(Andrews et al.，International J.Parasitology 30，761-768(2000))；辛二烯胺苯异羟肟酸(Suberoylanilide Hydroxamic Acid，SAHA)(Richon et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 95，3003-3007(1998))；壬二双异羟肟酸(Azelaic Bishydroxamic Acid，ABHA)(Andrews et al.，supra)、壬二-1-异羟肟酸-9-胺苯(Azelaic-1-Hydroxamate-9-Anilide，AAHA)(Qiu et al.，Mol.Biol Cell 11，2069-2083(2000))；M-羧桂皮酸双异羟肟酸(M-Carboxycinnamic Acid Bishydroxamide，CBHA)(Ricon etal.，supra)；6-(3-氯苯尿基)卡玻酸异羟肟酸((6-(3-Chlorophenylureido)carpoic Hydroxamic Acid，3-Cl-UCHA)(Richon et al.，supra)；MW2796(Andrews et al.，supra)；以及MW2996(Andrews et al.，supra)。此外，此类类似物却不具有HDAC抑制剂的效果者有己甲烯双乙酰胺(Hexamethylene bisacetamide，HBMA)(Richon et al.1998，PNAS，953003-3007)以及二乙基双(戊甲烯-N，N-二甲基羧酰胺)丙二酸(Diethylbis(pentamethylene-N，N-dimethylcarboxamide)malonate，EMBA)(Richon et al.1998，PNAS，953003-3007)。
D、短链脂肪酸(Short Chain Fatty Acid，SCFA)化合物，如丁酸钠(Sodium Butyrate)(Cousens et al.，J.Biol.Chem.254，1716-1723(1979))；异戊酸(Isovalerate)(McBain et al.，Biochem.Pharm.531357-1368(1997))；丙戊酸(Valproicacid)；戊酸酯(Valerate)(McBain et al.，supra)；4-丁酸苯酯(4-Phenylbutyrate，4-PBA)(Lea and Tulsyan，AnticancerResearch，15，879-873(1995))；丁酸苯酯(Phenylbutyrate，PB)(Wang et al.，Cancer Research，59，2766-2799(1999))；丙酸(Propionate)(McBain et al.，supra)；丁亚酰胺(Butrymide)(Lea and Tulsyan，supra)；异丁酰胺(Isobutyramide)(Lea andTulsyan，supra)；乙酸苯酯(Phenylacetate)(Lea and Tulsyan，supra)；丙酸3溴(3-Bromopropionate)(Lea and Tulsyan，supra)；以及三丁酸甘油酯(Tributyrin)(Guan et al.，CancerResearch，60，749-755(2000)).
E、苯甲酰胺(Benzamide)衍生物，如MS-27-275[N-(2-aminophenyl)-4-[N-(pyridin-3-yl-methoxycarbonyl)aminomethyl]benzamide](Saito et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 96，4592-4597(1999))；以及其3′-胺基衍生物(Saito et al.，supra)。
F、其它抑制剂，如低朴第辛(depudecin)[其类似物(单-MTM-低朴第辛与低朴第辛-双乙醚)并不抑制HDAC](Kwon et al.1998.PNAS 953356-3361)；以及史奎普泰(Scriptaid)(Su et al.2000Cancer Research，603137-3142)。
本发明的公开主要是针对丙戊酸、毛斯达丁A、以及丁酸苯酯对于增生恶性或非恶性疾病的放射治疗及化疗增加治疗效果，以产生肿瘤高控制率与低治疗后遗症发生率，上述化合物仅是用于说明与验证本发明，并非用于限制本发明的范畴。本发明亦公开化合物丙戊酸、毛斯达丁A、以及丁酸苯酯的药学配方与应用。
于实验过程中发现，作为组蛋白去乙酰化抑制剂的丙戊酸、毛斯达丁A、以及丁酸苯酯不只对于放射刺激组织/皮肤减轻皮肤水肿、促进黏膜炎与皮肤炎的脱皮修复、以及减低纤维化、与预防肿瘤发生具有强力效果，也会抑制肿瘤细胞生长、与增进肿瘤的放射敏感性。
本发明的组蛋白去乙酰化抑制剂可以药学上可接受盐的形式使用。此等药学上可接受盐可以长期使用却又不会有影响该药物作用的副作用。所需盐类形式的选择与生产可以由熟于此技艺人士所熟知的方法进行。药学上可接受盐的例子包括碱金属盐如钠盐或钾盐，碱土金属盐如钙盐或镁盐，含有机碱的盐如铵盐，或含有机碱的盐如三乙基胺盐或乙醇胺盐。
本发明的组蛋白去乙酰化抑制剂可以口服或非口服方式施用。在口服的情形下，可以软胶囊或硬胶囊、锭剂、颗粒、粉末、溶液、悬浮液等方式施用。在非口服的情形下，可以乳膏、油剂、凝胶、乳液、贴片、栓剂、脂肪体剂型、注射液、点滴注入剂型、灌肠剂等施用，而维持持续性膜吸收是以固体、黏液、或悬浮液形式施用。熟于此技艺人士可选择适合各种载剂、磨碎处理或悬浮剂的施用方式与施用剂型或配方。本发明的组蛋白去乙酰酵素抑制剂可以在丙戊酸、毛斯达丁A、以及丁酸苯酯、或其药学上可接受载体或盐类之外，更包括一成分，其具有抗炎症或抗肿瘤活性以及医药学上可接受的载或其盐。
熟于此技艺人士当可了解，有效剂量可依施用途径、赋形剂的使用、以及同时可能施行的治疗方法如其它细胞因子、白介素、抗癌剂或抗瘤剂、抗血管新生剂、化疗剂、抗体、共轭抗体、免疫刺激物、抗生素、视黄酸、酪胺酸激酶抑制剂、激素拮抗剂或生长刺激剂的使用等而有所不同。上述共轭抗体包括，但不限于，贺塞汀(Trastuzumab)、c225(cetuximab)、或美罗华(Rituximab)。上述化疗剂包括，但不限于，烷化剂(alkylating agent)，嘌呤类似物(purine analog)，嘧啶类似物(pyrimidine analog)，长春花生物碱(vinca alkaloid)，类长春花生物碱(vinca-likealkaloid)，鬼臼亚乙苷(etoposide)，类鬼臼亚乙苷药物(etoposide-like drug)，类固醇，亚硝基脲(nitrosourea)，抗代谢物(antimetabolite)，铂类细胞毒性药(platinum-basedcytotoxic drug)，抗雄性激素(anti-androgen)，或抗雌性激素(anti-estrogen)。上述抗血管新生剂包括，但不限于，沙利窦迈(thalidomide)，SU5416，SU6668，凝血栓蛋白-1(thrombospondin-1)，血管内皮抑制素(endostatin)，或血管阻断素(angiostatin)。上述抗生素包括，但不限于，更昔洛韦(ganciclovir)，阿昔洛韦(acyclovir)，或泛昔洛韦(famciclovir)。对于任何特定个体(如人类、狗、或猫)有效的剂量与治疗方法也依种种其它因子而异，其它因子包括所使用特定化合物的活性、个体年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食、施用时间、代谢速率、疾病严重程度与病程、以及病患对疾病的反应等；然而，一般而言，不论何种施用方式，剂量通常为0.001到100重量％，或者该组蛋白去乙酰化抑制剂的剂量为约0.01至100mg。本发明的活性化合物可与其它化合物共同施用，上述其它化合物是有用于增加增生性恶性或非恶性疾病的放射治疗及/或化疗的治疗效果。上述其它化合物可以适当地并存施用。如此处所述，「并存」是指时间上够接近以产生组合效果(即，并存可能为同时发生，或在一短时间中二或更多项互相前后发生)。如此处所述，二或更多种化合物「并存」或「组合」施用代表该二化合物施用时间上够接近，使其一的存在改变另一的生物效应。二化合物可能同时或连续施用。同时施用可以在施用前事先混合该化合物，或经由同一时间点施用该化合物，但在不同的解剖位置或采用不同施用途径。
如此处所述，增生恶性疾病包括黑色素瘤，卡波西氏肉瘤(Kaposi’s sarcoma)，骨肉瘤(osteosarcoma)，神经母细胞瘤(neuroblastoma)，横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcoma)，依文氏肉瘤(Ewing‘s sarcoma)，软组织肉瘤，皮肤癌，淋巴瘤，血癌，乳癌，生殖细胞肿瘤，原始性神经外胚瘤(primitiveneuroectodermal tumor)，脑胶质瘤(brain glioma)，脑脊髓膜瘤(brain meningioma)，头颈癌症，甲状腺癌，胸腺癌，子宫颈癌，肛门癌症，直肠癌，前列腺癌，肺癌，肝细胞癌，胆管癌(cholangiocarcinoma)，胃癌，胰腺癌，食道癌，病毒相关肿瘤，与接受骨髓移植所导致的疾病。
如此处所述，非恶性疾病包括角膜翼状胬肉(pterygium)，葛瑞夫兹氏眼病变(Graves’ophthalmopathy)，框假瘤(orbitalpseudotumor)，黄斑病变(macular degeneration)，瘢痕疙瘩(keloid)，疣，角化棘皮瘤(keratoacanthoma)，血管瘤(hemangioma)，房室异形，肌腱炎，纤维类瘤(desmoid tumor)，培洛尼氏病(Peyronie’s disease)，血管狭窄(vascularstenosis)，造釉细胞瘤(ameloblastoma)，动脉瘤样骨囊肿(aneurysmal bone cyst)，异位性骨化(heterotopic boneformation)，男性女乳化(gynecomastia)，卵巢去除(ovariancastration)，腮腺炎(parotitis)，湿疹，异位性皮肤炎，牛皮癣，肩周炎(periarthritis humeroscapularis)，上髁炎(epicondylitis)，膝关节病变，汗腺炎，瘭疽(panaritium)，自体免疫炎症性关节炎，组织细胞增生病X，及接受器官移植所引发的疾病。
根据本发明，发现上述包括组蛋白去乙酰化抑制剂的药物组合物会减低放射性引发正常组织的纤维化、改善放射性引发黏膜炎及皮肤炎的伤口复原、增进化疗引发组织坏死、预防放射性相关肿瘤生成、显示直接抗肿瘤效果、增进肿瘤放射敏感性、以及协同放射治疗与其它抗癌剂抑制肿瘤细胞生长。
该组蛋白过乙酰化剂增加的治疗效果是同时增进肿瘤的放射线敏感性或使肿瘤对于化学疗法敏感化，增加肿瘤生长抑制，增进黏膜炎与皮肤炎的伤口复原，预防/减缓跖-掌并发症，减低组织纤维化，避免正常组织发生细胞死亡，预防口干症，及抑制肿瘤生成。


图1A显示不同PB配方经皮递送的药物动力学研究结果。
图1B显示放射线照射过的皮肤(40Gy的单一级分)于6小时后经PB或未经PB处理的乙酰化H3蛋白质印迹分析结果。
图1C-1F显示放射线照射过的皮肤于6小时后经PB或未经PB处理的乙酰化H3的免疫荧光染色结果。
图2为急性皮肤反应评分结果图。
图3A-3L为H&E组织学染色照片。
图4A-4D显示放射线照射厚局部HDAC抑制剂处理或未处理时的TGF-β与TNF-α表现量。
图5A-5D为以抗TGF-β1、2抗体进行免疫荧光染色的照片。
图6A-6D为以抗TNF-α抗体免疫组织化学染色的照片。
图7显示放射线照射后皮肤肿瘤生成会受HDAC抑制剂抑制。
图8A-8F显示局部PB直接抑制了肿瘤生长。
图9为RNA印迹分析结果。
图10显示丙戊酸会增强肿瘤的放射线敏感性。
图11A-11B显示EB病毒阳性的岛氏淋巴瘤(Daudi’s lymphoma)细胞会选择性地被HDAC抑制剂、抗生素与放射疗法的低剂量组合所破坏，但EB病毒阴性的HL-60血癌细胞不会。
具体实施例方式
为使本发明更令人了解，以下将以实施例具体说明本发明。这些实施例仅是提供说明目的，并非用以限定本发明的范畴。此处所列示的所有参考数据包含其整体皆可作为本发明的参考。
制备实施例制备多种局部用组合物-油质软膏、乳剂、及凝胶。该药物组合物的制备方法包括按重量比例取组蛋白过乙酰化剂∶药学可接受的载体为1∶100-10∶100，将其混合加热形成糊状物，搅拌混匀后冷却。
依照本方法还可以制备包括组蛋白去乙酰化抑制剂在药学上可接受盐形式的药物组合物；药学上可接受盐的例子包括碱金属盐如钠盐或钾盐，碱土金属盐如钙盐或镁盐，含有机碱的盐如铵盐，或含有机碱的盐如三乙基胺盐或乙醇胺盐。
制备实施例1丁酸苯酯油质软膏的制备将470克白色矿脂(Riedel-de Haen)(购于Merck公司)、25克石蜡50/52(购于Merck公司)、以及5克4-丁酸本酯(默克公司)置于一烧杯中混合并加热至70℃形成一糊状物。将该糊状物于电动搅拌器400rpm搅拌1小时，并冷却至室温。
制备实施例2、丁酸苯酯油质软膏的制备将65克白色矿脂(Riedel-de Haen)、15克十八烷醇(Riedel-de Haen)、260克软石蜡(默克公司)、155克液态石蜡(默克公司)、以及5克4-丁酸苯酯(默克公司)置于烧杯中混合并加热至70℃形成糊状物。将该糊状物于400rpm搅拌1小时，并冷却至室温。
制备实施例3、丁酸苯酯乳剂的制备第一成分70克Tefose 63、20克Superpolystate、10克Coster 5000、15克Myriyl 318、15克Coster 5088以及15克GMS SE(购于Merck公司)于烧杯中混合并加热至70℃。
第二成份5.739克4-丁酸苯酯化钠(Triple Crown America，Inc.)、0.125克羟苯甲酸甲酯(methylparaben)(默克公司)、0.075克对羟苯甲酸丙酯(propylparaben)(默克公司)、以及149.061克去离子水于一烧杯中混合并加热至70℃。
将第二成份缓慢地加入第一成分中并继续以400rpm搅拌5分钟直到形成一混合物。将2％Stabileze QM(将2克StabilezeQM溶于98克去离子水，并于70℃加热搅拌形成一糊状物，并冷却至室温而制备得)加入该混合物并搅拌5分钟。以0.85％磷酸(默克公司)调整混合物的pH值到5.34，并以600rpm搅拌20分钟。混合物冷却至室温。
制备实施例4、丁酸苯酯凝胶的制备第一成分10克Stabileze QM、232.035克去离子水于一烧杯中混合并加热至70℃。
第二成份5.739克4-丁酸苯酯化钠(Triple Crown America，Inc.)、0.125克对羟基苯甲酸甲酯(methylparaben)(默克公司)、0.075克对羟苯甲酸丙酯(propylparaben)(默克公司)、232.035克去离子水、以及20克10％NaOH于一烧杯中混合并加热至70℃。
将第二成份缓慢地加入第一成分中并继续以400rpm搅拌20分钟直到形成混合物。将混合物冷却至室温。
制备实施例5、丁酸苯酯凝胶的制备第一成分10克Stabileze QM、380.561克去离子水于烧杯中混合并加热至70℃。
第二成份5.739克4-丁酸苯酯化钠(Triple Crown America，Inc.)、0.125克对羟基苯甲酸甲酯(methylparaben)(默克公司)、0.075克对羟苯甲酸丙酯(propylparaben)(默克公司)、83.5克1，2-丙二醇、以及20克10％NaOH于一烧杯中混合并加热至70℃。
将第二成份缓慢地加入第一成分中并继续以400rpm搅拌20分钟直到形成一混合物。将混合物冷却至室温。
制备实施例6、丁酸丙酯缓释配方的制备两种配方是如下表1的组合物。
表1两种缓释配方的组合物


*PF-127是组合物的基质，而羧甲基纤维素钠是增厚剂。
制备实施例7、丁酸苯酯脂肪体配方的制备于此种脂肪体配方，蛋黄卵磷脂(egg phosphatidylcholine，EPC)及胆固醇是作为等同-或不同-摩尔浓度的初级脂质份。以不同脂肪丁酸苯酯比例可获得多种含有4-丁酸苯酯的脂肪体。脂肪体是经由薄膜水合作用制备、并以膜挤压成形、并且根据实际去评估形状。
制备实施例8、毛斯达丁A软膏的制备将472.5克白色矿脂(Riedel-de Haen)、27克石蜡50/52(由本地供货商获得)、以及0.5克毛斯达丁A(Sigma公司)置于烧杯中混合并加热至70℃形成糊状物。将该糊状物于400rpm搅拌1小时，并冷却至室温。
制备实施例9、毛斯达丁A软膏的制备将67.5克白色矿脂(Riedel-de Haen)、16克十八烷醇(Riedel-de Haen)、260.5克软石蜡(默克公司)、155.5克液态石蜡(默克公司)、以及0.5克毛斯达丁A(Sigma公司)置于烧杯中混合并加热至70℃形成糊状物。将该糊状物于400rpm搅拌1小时，并冷却至室温。
制备实施例10、丙戊酸乳剂的制备第一成分70克Tefose 63、20克Superpolystate、10克Coster 5000、15克Myriyol 318、15克Coster 5088、以及15克GMS SE(皆可由本地供货商获取)于烧杯中混合并加热至70℃。
第二成份5.739克丙戊酸(Sigma公司)、0.125克对羟基苯甲酸甲酯(methylparaben)(默克公司)、0.075克对羟苯甲酸丙酯(propylparaben)(默克公司)、以及149.061克去离子水于烧杯中混合并加热至70℃。
将第二成份缓慢地加入第一成分中并继续以400rpm搅拌5分钟直到形成混合物。将2％Stabileze QM(将2克Stabileze QM溶于98克去离子水，并于70℃加热搅拌形成糊状物，并冷却至室温而制备得)加入该混合物并搅拌5分钟。以0.85％磷酸(默克公司)调整混合物的pH值到5.34，并以600rpm搅拌20分钟。将混合物冷却至室温。
制剂实施例制剂实施例1局部丁酸苯酯(PB)处理可于活体内引发组蛋白过乙酰化表2显示上述种种丁酸苯酯(PB)配方的特性。
表2配方特性与药物动力学参数

*c乳剂；g凝胶；o软膏；1斜率，代表每药物于每小时经单位皮肤面积渗透的量(μg/cm2/hr)；2Y截率(intercept)(μg/cm2)一负数代表每药物经单位皮肤面积的潜在渗透量，一正数代表取样时间过长无法得到正确值；3滞留时间，代表药物渗透皮肤的平均时间(小时)；4系数(×10-5cm2/s)，该药物的扩散系数；5Cs(×105mg/cm3)，该药物在皮肤表面的浓度；6μg/cm2，每药物经每平方厘米皮肤的平均渗透量；7mg/cm3，皮肤上的平均浓度。
于不同配方中，PB乳剂(Tri-c-02-3)显示具有良好稳定性，低皮肤刺激性，长半衰期，以及高皮肤渗透性，故选择作为试验药品(图1A)。为测定何种剂量的局部PB适于治疗受刺激的皮肤，用细胞核组蛋白过乙酰化的量作为指标以呈现药物渗透广度并显示是否局部药物浓度足以发挥生物效能。对于经放射刺激(40Gy单一级分)后6小时的皮肤进行乙酰化组蛋白的蛋白质印迹分析显示组蛋白H3的乙酰化形式在对照组与载体处理组有稍微增加，但在受刺激后立刻以1％PB乳剂局部处理、并以每受刺激皮肤表面200mg(活性成分的重量)的剂量处理组有显著增加(图1B)。考马斯蓝染色胶体切片显示蛋白质测量是等量。免疫荧光染色更显示受刺激皮肤的组蛋白过乙酰化在药物处理后6小时观察到显著深的皮下层(即，与皮肤试验时药物浓度高峰相符)(图1A以及图1C-1F)。细胞核中乙酰化H3是作为药物渗透广度的指标。
以上述实施例同样的方式也可验证包括组蛋白去乙酰化抑制剂在药学上可接受盐形式的药物组合物具有类似的特性；药学上可接受盐的例子包括碱金属盐如钠盐或钾盐，碱土金属盐如钙盐或镁盐，含有机碱的盐如铵盐，或含有机碱的盐如三乙基胺盐或乙醇胺盐。
制剂实施例2组蛋白去乙酰化抑制剂对于降低急性放射治疗引发正常组织损伤的效果由台湾国科会动物中心购得成年母Sprague-Dawley(SD)大鼠，且于放射处理时秤重为250-300克(3-7周龄)。每只大鼠皆单独饲养，并供给充足的食物与水。在放射处理前将大鼠以戊巴比妥50mg/kg腹腔注射而麻醉。且事先替大鼠臀部区域剃毛，并于2厘米见方的放射区域外缘标记。放射处理是采用由线性加速器产生的6MeV能量的电子束。在第0天的剂量是对该区域照射4Gy/分钟至40Gy/分钟。以组蛋白去乙酰化抑制剂治疗组又可分成三个小组(每群5只)一小组以载体处理放射线照射后的皮肤，一小组以组蛋白去乙酰化抑制剂处理放射线照射后的皮肤，以及一小组仅接受皮肤放射照射。接着，于放射处理后第1至90天，以凡士林(阴性对照)、满德寿软膏(Madecassol)(阳性对照)(购于台湾泰凯有限公司)、或由载体或1％丁酸苯酯乳剂、1％丙戊酸乳剂、或0.1％毛斯达丁A软膏一天两次局部施用于放射线照射后的皮肤。各处理组的各平均剂量分别为每平方厘米皮肤16mg凡士林、每平方厘米皮肤16mg满德寿、每平方厘米皮肤50mg丁酸苯酯、每平方厘米皮肤50mg丙戊酸、每平方厘米5mg毛斯达丁A、以及相对于对照组为等量的载体基质。评估每只大鼠大体皮肤反应情形。以修改过的皮肤评比系统(Abe Y及Urano M的论文Fractionsize-dependent acute skin reaction of mice after multipletwice-a-day doses.International Journal of RadiationOncology，Biology，Physics.18(2)359-64，1990)，每隔一天评估急性皮肤反应并评分纪录直到第90天。上述评比系统为0＝正常，0.5＝轻微脱毛，1.0＝约50％照射区域脱毛，1.5＝大于50％区域脱毛，2.0＝完全脱毛，2.5＝完全脱毛且超过50％区域局限性水肿或干脱屑，3.0＝小区域湿脱屑，3.5＝大部分区域湿脱屑。
皮肤评分数值随着皮肤反应的严重程度增加。每组的平均皮肤反应评比显示于图2。于第11天时，以满德寿处理的阳性对照组或以组蛋白去乙酰化抑制剂处理的实验组较阴性对照组或载体对照组的皮肤反应有减轻的情形。第21天时，阴性对照组或载体对照组的脱毛有进展成为大部份区域湿脱屑的现象，而以满德寿处理的阳性对照组或以组蛋白去乙酰化抑制剂处理的实验组有改善的现象，且表皮修复也较快。
以上述实施例同样的方式也可验证包括组蛋白去乙酰化抑制剂在药学上可接受盐形式的药物组合物具有类似的特性；药学上可接受盐的例子包括碱金属盐如钠盐或钾盐，碱土金属盐如钙盐或镁盐，含有机碱的盐如铵盐，或含有机碱的盐如三乙基胺盐或乙醇胺盐。
制剂实施例3以组蛋白去乙酰化抑制剂处理增进损伤修复的放射照射后皮肤反应的H&E染色组织学特征丙戊酸、毛斯达丁A、以及丁酸苯酯是构造上不相关的组蛋白去乙酰化抑制剂，且对于抑制包括急性皮肤炎与脱屑、及后续纤维化、溃疡与坏死的放射性引发的皮肤损伤都具有相似的效果。第3A-3L图为H&E组织学染色照片，结果显示组蛋白去乙酰化抑制剂具有抑制放射性皮肤并发症的作用，且丙戊酸、毛斯达丁A与丁酸苯酯具有相似的效果。图中显示治疗组中第180天的一个样品，并与正常皮肤、第7天急性皮肤炎、以及载体处理组比较。图3A-3C为正常皮肤；图3D-3F为放射处理后第7天的急性皮肤炎，显示皮下水肿的现象；图3G-3I为载体处理组第180天的样品，显示变薄的表皮、皮下水肿、血管与皮肤附属物密度增加、以及由于胶原蛋白沉积而变厚的真皮(测量由表皮至皮下脂肪层之间厚度)；图3J-3L为组蛋白去乙酰化抑制剂治疗组第180天的样品，显示变厚的表皮、没有胶原蛋白沉积，且无血管及皮肤附属物的增生。图3A、3D、3G及3J为40倍视野下；图3B、3E、3H及3K为100倍视野下；图3C、3F、3I及3L为200倍视野下。
以上述实施例同样的方式也可验证包括组蛋白去乙酰化抑制剂在药学上可接受盐形式的药物组合物具有类似的特性；药学上可接受盐的例子包括碱金属盐如钠盐或钾盐，碱土金属盐如钙盐或镁盐，含有机碱的盐如铵盐，或含有机碱的盐如三乙基胺盐或乙醇胺盐。
制剂实施例4以组蛋白去乙酰化抑制剂处理会改变与炎症与纤维原细胞因子表现抑制相关的放射线引发的组织学变化由于放射线引发损伤的演变包括放射线引发的暂时变化与持续性前炎症细胞因子的向上调控，上述细胞因子为如肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与纤维原生长因子如TGF-β1与β2，组蛋白去乙酰化抑制剂对于放射线引发损伤的抑制亦显示出对于TNF-α与TGF-β表现的抑制。
由放射线引发的TGF-β1，TGF-β2，及TNF-α表现程度的高峰期与放射线引发的损伤具有相关性(图4A-4D)。采用多重细胞因子RNAase保护试剂盒(Riboquant；Pharmingen，San Diego，CA)分析TGF-β1，TGF-β2，TGF-β3，and TNF-αmRNA的含量。上述套组包括一模板组以便产生一32P-标记反式RNA探针组，而可与TGF-β1，TGF-β2，TGF-β3，TNF-α，与内源性对照的GAPDH探针的标第mRNA杂交。标记探针与标第RNA杂交后，未受保护的RNA经核糖核酸酵素(ribonuclease，简称RNase)消化，而受保护的RNA片段以6％聚丙烯酰胺胶体分析，并以磷影像(phosphorimaging)(Molecular Dynamics Corp.，Sunnyvale，CA)纪录。以密度测定法(Densitometry)定量每种mRNA的含量，并以内源性对照的GAPDH将的标准化。
计量各组5只大鼠的皮肤反应平均皮肤评比。将每组中三皮肤样品的平均细胞因子/生长因子mRNA量以内源性对照GAPDH标准化，并表现为相对于时间相符的对照组的平均值比率。以曼-惠特曼试验(Mann-Whitney test，Stata Statistical Software，College Station，TX)测得处理与对照大鼠间平均皮肤评比与平均mRNA含量分别的p＜0.05统计显著差异性。
于丁酸苯酯(PB)处理组，TGF-β1，TGF-β2，及TNF-α的最高峰出现在放射线照射后6小时，但第14天后上述含量随后受到抑制。该抑制持续12个月，即使局部PB处理已在第90天中断。于凡士林与载体对照组中，TGF-β1，TGF-β2，及TNF-α的mRNA含量在受放射线照射的皮肤中的增加与变动皆高于未受放射线照射对照组的量超过1年，并在照射后6小时达到第一高峰，为未受照射组的2到3倍高，而照射后约第14-28天达到第二高峰，为未受照射组的10.5至16倍高，以及在照射后第9个月达到第三高峰，为未受照射组的13至14倍；照射后12个月，该增加降低到正常值的2至3倍。虽然TGF-β1，TGF-β2，及TNF-α的mRNA含量在PB处理组第6小时时的第一高峰高于凡士林组与载体对照组，PB处理组者在第14天就低于凡士林组与载体对照组者，且在第28-35天时就回复到未受照射组的对照量。
TGF-β1与TGF-β2具有类似的细胞作用，其可抑制上皮细胞生长与增进真皮成纤维细胞增生，但TGF-β3具有相反的作用。在第14天的所有照射组皆发现TGF-β3mRNA的含量轻微暂时增加为2倍，接着进展到减低至未照射的对照组或比其更低的变化。然而不论在凡士林、载体或PB处理组皆没有观察到TGF-β3mRNA含量显著的差异性。
以上述实施例同样的方式也可验证包括组蛋白去乙酰化抑制剂在药学上可接受盐形式的药物组合物具有类似的特性；药学上可接受盐的例子包括碱金属盐如钠盐或钾盐，碱土金属盐如钙盐或镁盐，含有机碱的盐如铵盐，或含有机碱的盐如三乙基胺盐或乙醇胺盐。
制剂实施例5对于放射线照射的皮肤以组蛋白去乙酰化抑制剂处理组的TGF-β(一种纤维原生长因子)表现的免疫荧光染色将同于实施例4的病理切片以抗TGF-β1、β2抗体进行免疫荧光染色处理。结果如图5A-5D，显示实施例4中TGF-β的表现受到组蛋白去乙酰化抑制剂的抑制。图5A为正常皮肤(第0天)；图5B是第7天急性皮肤炎的样品，显示具有强纤维原生长因子活性的TGF-β在放射处理后有向上调控的现象；图5C是第180天载体组的样品，显示在放射处理后的TGF-β表现会依时增加，并且在表皮角质细胞与真皮肌成纤维细胞的纤维生成细胞有持续且高表现；图5D为PB组第180天的样品，显示组蛋白去乙酰化抑制剂有效地抑制TGF-β表现，并因此使真皮层较少胶原纤维累积，且表皮层有较多细胞层，其原因为TGF-β会引发成纤维细胞增生，但会抑制表皮细胞生长。
以上述实施例同样的方式也可验证包括组蛋白去乙酰化抑制剂在药学上可接受盐形式的药物组合物具有类似的特性；药学上可接受盐的例子包括碱金属盐如钠盐或钾盐，碱土金属盐如钙盐或镁盐，含有机碱的盐如铵盐，或含有机碱的盐如三乙基胺盐或乙醇胺盐。
制剂实施例6组蛋白去乙酰化抑制剂可抑制放射线处理的皮肤的TNF-α(一种前炎症细胞因子)表现的免疫组织化学染色结果在第270天，凡士林处理组的5只大鼠中的三只以及载体处理组的5只大鼠中的四只，与PB处理组5只大鼠比较，前二者显示慢性溃疡、坏死、水泡形成、以及炎症细胞浸润。局部PB处理所减轻放射线照射引发的后期皮肤损伤，是与TNF-α表现抑制相符。
将以组蛋白去乙酰化抑制剂处理或未处理组大鼠第270天取得的病理切片，以抗TNF-α抗体进行免疫组织化学染色，结果如图6A-6D所示，显示TNF-α的表现受到组蛋白去乙酰化抑制剂的抑制。图6A为正常皮肤的TNF-α染色；图6B为PB处理组在放射线照射后第270天的结果，显示组蛋白去乙酰化抑制剂有效地抑制了TNF-α的表现，同时显示较少的炎症细胞浸润与无慢性溃疡；图6C为放射照射皮肤以凡士林处理的结果，显示在第270天时，带有溃疡的皮下组织中TNF-α受到向上调控；图6D为放射照射皮肤以载体处理的结果，显示在第270天时，带有严重炎症细胞浸润的皮下组织中TNF-α受到向上调控。
以上述实施例同样的方式也可验证包括组蛋白去乙酰化抑制剂在药学上可接受盐形式的药物组合物具有类似的特性；药学上可接受盐的例子包括碱金属盐如钠盐或钾盐，碱土金属盐如钙盐或镁盐，含有机碱的盐如铵盐，或含有机碱的盐如三乙基胺盐或乙醇胺盐。
制剂实施例7局部PB处理可预防放射线照射引发的后期皮肤肿瘤的形成许多研究显示慢性的TGF-β大量表现会刺激肿瘤新生。PB处理造成的TGF-β表现衰减可能减低放射线照射引发的后期皮肤肿瘤生成的发生率。本发明发现新发展的皮肤肿瘤在放射照射50周后的对照组有随时间增加的趋势，但是PB处理组没有观察到肿瘤(图7)。在第90周，无PB处理的放射线照射组可观察到累积肿瘤发生率为15％(39个中有6个)，相较之下，PB处理的放射线照射组发生率为0％(42个中无一发生)。放射线照射引发肿瘤的组织学特征包括纤维瘤(fibroma)，梭状细胞肉瘤(spindle cell sarcoma)，基底细胞癌(basal cell carcinoma)，以及扁平细胞癌(squamouscell carcinoma)。
以上述实施例同样的方式也可验证包括组蛋白去乙酰化抑制剂在药学上可接受盐形式的药物组合物具有类似的特性；药学上可接受盐的例子包括碱金属盐如钠盐或钾盐，碱土金属盐如钙盐或镁盐，含有机碱的盐如铵盐，或含有机碱的盐如三乙基胺盐或乙醇胺盐。
制剂实施例8局部PB处理对于皮肤肿瘤生长显示具有直接抗肿瘤效果将先天性癌细胞1MEA7R.1与CT-26(购自美国菌种保存中心，麻萨诸塞州，VA)皮下注射至雌性BALB/c小鼠的腹协部。使肿瘤长至0.5厘米的最大尺寸。以每只小鼠200mg的剂量，将HDAC抑制剂或载体局部施予而包覆整个肿瘤表面与附近皮肤，一日两次，处置4周。每周以卡尺量测肿瘤大小，并按照方程式ab2/2计量，其中a与b分别为最大与最小直径(单位为厘米)。
局部PB的配方显示具有抗肿瘤效果。BNL 1MEA7R.1与CT-26癌细胞在体外试验显示受到PB抑制，而会上调p21Cip1(图8A)，故将之培养于同源小鼠的背部。皮肤肿瘤长至0.5厘米的最大尺寸是如图8D所示。在第4周时，1MEA7R.1与CT-26癌细胞的肿瘤大小分别比较，在安慰剂组几乎分别为6倍与1.6倍大于PB处理组者(图8B-8C)。PB处理组的皮肤肿瘤生长缓慢且没有发生皮肤溃疡的情形(图8F)，然而，对照组或安慰剂组的肿瘤会生长迅速且显示坏死的外观与皮肤溃疡(图8E)。在5周处理后，停用局部PB会失去肿瘤生长抑制作用，且该些肿瘤会在2周内生长到与对照组或安慰剂组同样大小。
以上述实施例同样的方式也可验证包括组蛋白去乙酰化抑制剂在药学上可接受盐形式的药物组合物具有类似的特性；药学上可接受盐的例子包括碱金属盐如钠盐或钾盐，碱土金属盐如钙盐或镁盐，含有机碱的盐如铵盐，或含有机碱的盐如三乙基胺盐或乙醇胺盐。
制剂实施例9在构造上不相关的抗肿瘤HDAC抑制剂在治疗放射性引发正常组的损伤与预防后期放射性引发肿瘤生成具有类似效果除了PB，其它构造不相关的抗肿瘤HDAC抑制剂，如毛斯达丁A(一种抗霉菌剂)以及丙戊酸(一种抗癫痫药)，也可以减轻放射线照射所引发的损伤与肿瘤生成，并减低放射线引发的TGF-β1，TGF-β2，与TNF-α的表现(图9及表3)。
采用Trigent(Molecular Research Center Inc.，Cincinnati，OH)，由冷冻皮肤样本萃取总RNA。于一甲醛变性凝胶电泳分析总RNA(30μg)，转移至Hybond N(Amersham，Amersham，UK)，并以紫外光(UV)照射固定。将转移膜以32P标记探针培养于快速杂交缓冲液(Rapid-hyb buffer，Amersham)，如下述。为制备大鼠TGF-β1及TGF-β2的探针，以反转录聚合酶链反应扩增其全长编码序列(变性100℃，30秒，退火和延伸37℃，30秒)，上述反应是采用专一性顺向(TGF-β1，5’-CGGGTGGCAGGCGAGAGC-3’与TGF-β2，5’-CATGCACTACTGTGTGCT-3’)及反向(TGF-β1，5’-GGAATTGTTGCTATATTTCTGC-3’与TGF-β2，5’-CCGAGGACTTTAGCTGCA-3’)引子。采用由RNase保护试剂盒(Riboquant；Pharmingen)取得的TNF-α与GAPDH模板以生产32P标记反义RNA探针，而得以与TNF-α与GAPDH的mRNA杂交。
表3摘要说明以不同HDAC抑制剂处理的放射损伤皮肤的组织学发现

由每组中5只放射线照射大鼠的皮肤样品的组织学观察结果，是以下述方式表示A，皮下水肿；B，约50％照射区域干脱屑；C，超过50％照射区域湿脱屑；D，大部分区域萎缩；E，大部分区域皮肤附属器官萎缩；F，表皮增厚，且有更多细胞层；G，增加胶原蛋白沉积、更多血管密度、及真皮厚度增加；H，慢性溃疡、坏死、水泡形成、及更多炎症细胞浸润；I，TGF-β1，2，及TNF-α的向下条控；J，预防放射线照射引发之后期肿瘤生成；K，对于皮肤肿瘤生长的直接抗肿瘤作用证明。“+”至“+++++”代表有一至五只大鼠样品显示所指定的反应。
以上述实施例同样的方式也可验证包括组蛋白去乙酰化抑制剂在药学上可接受盐形式的药物组合物具有类似的特性；药学上可接受盐的例子包括碱金属盐如钠盐或钾盐，碱土金属盐如钙盐或镁盐，含有机碱的盐如铵盐，或含有机碱的盐如三乙基胺盐或乙醇胺盐。
制剂实施例10丙戊酸增进肿瘤的放射敏感性利用放射线增强比率(Radiation enhancement ratio，简称RER)计算可造成同样效果的放射线剂量的比率。RER＝(无药物处理的放射线剂量的10％存活级分)/(有药物处理的放射线剂量的10％存活级分)。
在放射线照射前60分钟将丙戊酸(0.1mM或0.5mM)加入CNE2鼻咽癌细胞，再清洗之，上述放射线照射是以2至16Gy的剂量进行。一周后，计数具有超过50个细胞的细胞群落。对于对照组与PB处理组的平板效率相当。0.1mM或0.5mM丙戊酸的放射线增强比率(RER)分别增加为10％存活级分的1.2与1.7(图10)。
以上述实施例同样的方式也可验证包括组蛋白去乙酰化抑制剂在药学上可接受盐形式的药物组合物具有类似的特性；药学上可接受盐的例子包括碱金属盐如钠盐或钾盐，碱土金属盐如钙盐或镁盐，含有机碱的盐如铵盐，或含有机碱的盐如三乙基胺盐或乙醇胺盐。
制剂实施例11同时给予毛斯达丁A(TSA)、更昔洛韦(ganciclovir，简称GCV)、与放射照射(RT)可选择性杀死EB病毒(Epstein-Barr virus)感染的癌细胞HDAC抑制剂是一基因调控物，可上调EBV胸腺嘧啶激酶活性，而可使EBV相关肿瘤能被更昔洛韦(GCV)杀灭，上述更昔洛韦可以受EBV胸腺嘧啶激酶磷酸化，而抑制细胞DNA聚合酶造成细胞周期的S期的细胞死亡。由于HDAC抑制剂也作用为抗增生剂与放射敏感剂，以TSA，GCV与放射线(RT)的组合疗法可能对于EBV相关肿瘤，如鼻咽癌、霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkin’s lymphoma)、X染色体联结淋巴增生性疾病、AIDS相关非霍奇金氏淋巴瘤、及免疫抑制孩童的平滑肌肿瘤，具有治疗效果。
EBV胸腺嘧啶激酶活性试验的步骤为，将等量细胞质级分与反应缓冲液(50mM的Tris-HCl pH7.4，1mg/ml的BSA，3mM的磷酸肌酸(creatine phosphate)，11.2U/ml的肌酸磷酸，0.1μM的[3H-8]-GCV(专一性活性为13.5Ci/mmol)，2.5mM的ATP，2.5mM的MgCl2，10mM的NaF，10mM的DTT)于37℃孵育30分钟。将反应混合物加入Whatman R DE-81离子交换色层分析试纸，再以1.5mM的NH4COOH清洗三次以除去未磷酸化形式的[3H-8]-GCV。经风干后，将这些试纸孵育于液态闪烁鸡尾酒(liquid scintillation cocktail)过夜。磷酸化形式的[3H-8]-GCV结合至WhatmanR DE-81离子交换色层分析试纸者可以LS6500闪烁技术器(Beckman)测量。
如图11A所示，EBV胸腺嘧啶激酶活性可受TSA 1nM处理48小时的向上调控。组合TSA，GCV与放射线治疗可以产生选择性最大EBV阳性细胞死亡，但EBV阴性细胞仍存活(图11B)。Daudi细胞(EBV+)与HL-60(EBV-)皆以GCV(10μg/ml)及/或毛斯达丁A(TSA)(1nM)处理48小时，之后经1Gy剂量的放射线照射或不照射。一周后计数存活细胞。
以上述实施例同样的方式也可验证包括组蛋白去乙酰化抑制剂在药学上可接受盐形式的药物组合物具有类似的特性；药学上可接受盐的例子包括碱金属盐如钠盐或钾盐，碱土金属盐如钙盐或镁盐，含有机碱的盐如铵盐，或含有机碱的盐如三乙基胺盐或乙醇胺盐。
制剂实施例12局部丁酸苯酯治疗放射线引发黏膜炎的动物模型建立化疗引发黏膜炎与放射线引发黏膜炎的仓鼠模型。并证实该模型是属可再制者，在放射线照射后第12与15天具有一致性地外观，包括溃疡性黏膜炎。采用此模型，测试局部丁酸苯酯凝胶与溶液对于缓和放射线引发黏膜炎的进程的效力。于第0天施与急性放射线照射剂量40Gy，以便于第15天左右产生严重黏膜炎。所采用的急性放射线照射以引发黏膜炎，较佳地是采用级分放射线照射或化疗进行起始研究。急性模型具有轻微全身性毒性，造成较少动物死亡。此事实允许采用较小族群进行起始研究。急性模型已成功地用于展现多种化合物存在或不存在时的效用。因此，急性放射线步骤适合于作为筛选各种化合物家族的起始研究。
黏膜炎是采用急性放射线步骤诱发。于第0天以单一剂量的放射线照射(40Gy/dose)施与所有动物。放射线是由一250千伏电压(15mA)源，于一50cm的聚焦距离，并以一0.35mm的铜过滤系统强化而产生。放射线照射标的至左颊黏膜，且采用121.5cGy/分钟的速率。在放射线照射前，动物事先腹腔注射戊巴比妥钠(80mg/kg)以麻醉。以铅板将左颊囊外翻、固定、并隔离。
本研究采用的二十只仓鼠是随机分配为5只一组共四组。每组采用不同处理第1组动物20μl的PBS/每个仓鼠；第2组动物200μg的丁酸苯酯钠/20μl的PBS/每个仓鼠；第3组动物20mg的安慰剂(凝胶基质)/每个仓鼠；第4组动物20mg的丁酸苯酯凝胶/每个仓鼠。药剂是局部施予至测试仓鼠的放射线引发黏膜炎的位置，一天一次，由第15天持续使用10天。采用影像分析器(LifeScience Resources VISTA，Version 30)计量黏膜炎伤口区域，于第15，17，19，21，23及25天留在干净塑料板上。黏膜炎伤口区域的半闭口时间(CT50)是采用GraphPad Prism(Graph PadSoftware USA)的线性回归与不成对史氏t试验(unpairedStudent’s t test)以测定，并可应用于在每一测量时间点比较处理组与安慰剂组。差异性是以p＜0.05决定统计上显著差异。
如表4所示，黏膜炎伤口封口的显著增加(p＜0.01)可在第2组(200μg的丁酸苯酯钠/20μl的PBS/每个仓鼠)的第21、23及25天，以及第4组(20mg的丁酸苯酯凝胶/仓鼠)的第17、19、21、23及25天观察到。CT50也有显著减低(p＜0.01)，于第2组达到6.5±0.2天(相对于第1组的7.7±0.2天)，于第4组达到8.9±0.2天(相对于第3组的10.5±1.3天)。
表4以丁酸苯酯(PB)治疗黏膜伤口复原

差异性是以*P＜0.05，**P＜0.01决定显著差异。
以上述实施例同样的方式也可验证包括组蛋白去乙酰化抑制剂在药学上可接受盐形式的药物组合物具有类似的特性；药学上可接受盐的例子包括碱金属盐如钠盐或钾盐，碱土金属盐如钙盐或镁盐，含有机碱的盐如铵盐，或含有机碱的盐如三乙基胺盐或乙醇胺盐。
其它实施例本说明书所公开的所有特征可组合其它形成任何形式的组合。本说明书所公开的每一特征可以具有相同、等同、或类似目的的替代品取代。因此，除非特别限定，所公开的每一特征仅作为等同或类似特征的上位系列中的一个实施例。
由上述公开，熟于本技术领域者可轻易了解本发明的主要特征，且在不脱离本发明的精神和范围内，当可作各种的更动与润饰。例如，上述组蛋白去乙酰化抑制剂的化合物构造与功能的类似物也可以用于施行本发明。因此，其它实施例也包括在本发明的权利要求内。
图式的简单说明图1A显示不同PB配方经皮递送的药物动力学研究结果。
图1B显示放射线照射过的皮肤(40Gy的单一级分)于6小时后经PB或未经PB处理的乙酰化H3蛋白质印迹分析结果。1，未经放射线照射的正常皮肤；2，放射线照射过，但无任何处置的皮肤；3，放射线照射过，经载体处理的皮肤；4，放射线照射过，以1％的PB乳剂处理的皮肤。
图1C-1F显示放射线照射过的皮肤于6小时后经PB或未经PB处理的乙酰化H3的免疫荧光染色结果。图1C显示未经放射线照射的正常皮肤；图1D显示放射线照射过，但无任何处置的皮肤；图1E显示放射线照射过，经载体处理的皮肤；图1F显示放射线照射过，以1％的PB乳剂处理的皮肤。
图2为急性皮肤反应评分结果图，显示以40Gy放射处理后的时间进程的平均皮肤评比。
图3A-3L为H&E组织学染色照片，显示局部组蛋白去乙酰化抑制剂具有抑制放射线引发皮肤损伤的作用。图3A、3D、3G、及3J为H&E组织学染色40×视野下；图3B、3E、3H、及3K为H&E组织学染色100×视野下；图3C、3F、3I、及3L为H&E组织学染色200×视野下。图3A-3C为正常皮肤，a表皮，b真皮，c皮下组织；图3D-3F为放射线照射后第7天的急性反应，显示皮下水肿(白色箭头)；图3G-3I为载体处理组第180天，显示较薄的上皮，皮下水肿，增加血管与皮肤附属器官的密度，与带有多量胶原蛋白沉积的厚真皮层。图3J-3L为组蛋白去乙酰化抑制剂处理组第180天，显示较厚的上皮有10-30细胞层厚(黑色箭头)，较少皮下水肿，带有较少胶原蛋白沉积的变薄的真皮，以及较少皮肤附属器官。
图4A-4D显示放射线照射厚局部HDAC抑制剂处理或未处理时的TGF-β与TNF-α表现量。放射线照射后皮肤中TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3、及TNF-α的mRNA含量的差异是以内源性对照GAPDH标准化，且表现为对于未受放射线照射对照样品的比率。每一点代表凡士林、载体、或PB各组中5样品的mRNA平均量。箭头代表药物处理在第90天后停用(*p＜0.05，**p＜0.001是与PB处理组及载体组比较结果)。图4A显示放射线照射后，以局部PB处理或未处理的TGF-β1含量变化；图4B显示放射线照射后，以局部PB处理或未处理的TGF-β2含量变化；图4C显示放射线照射后，以局部PB处理或未处理的TGF-β3含量变化；图4D显示放射线照射后，以局部PB处理或未处理的TNF-α含量变化。
图5A-5D为以抗TGF-β1、2抗体进行免疫荧光染色的照片，显示实施例4中TGF-β的表现受组蛋白去乙酰化抑制剂的抑制。图5A为正常皮肤以TGF-β染色；图5B为放射线照射后第7天、不经任何药物处理的急性皮肤炎照片，显示TGF-β向上调控；图5C为放射线照射后第180天、载体处理组的照片，显示TGF-β随时间增加，持续并高度表现于纤维原性皮肤，包括表皮的角质细胞与真皮的肌成纤维细胞；图5D为放射线照射后第180天、PB处理组的照片，显示局部PB有效地抑制了TGF-β的表现，并因TGF-β启动成纤维细胞增生但抑制上皮细胞生长，真皮有较少的胶原蛋白累积与上皮有较多细胞层。
图6A-6D为以抗TNF-α抗体免疫组织化学染色的照片，显示TNF-α的表现会受组蛋白去乙酰化抑制剂的抑制。图6A为正常皮肤的TNF-α染色；图6B为放射线照射后第270天、PB处理组，显示组蛋白去乙酰化抑制剂有效地抑制了TGF-β的表现，与较少炎症细胞浸润与无慢性溃疡相符；图6C为放射线照射后的皮肤以凡士林处理第270天，显示皮下组织中TNF-α受向上调控，并带有溃疡(箭头代表坏死伤口)；图6D为放射线照射后的皮肤以载体处理第270天，显示皮下组织中TNF-α受向上调控，带有严重炎症细胞浸润。
图7显示放射线照射后皮肤肿瘤生成会受HDAC抑制剂抑制。在对照组中放射线照射后50周新发展的皮肤肿瘤随着时间增大，但PB处理组并未发现肿瘤图8A-8F显示局部PB直接抑制了肿瘤生长。图8A显示以4mM的PB处理后的BNL 1MEA7R.1与CT-26癌细胞中，作用为细胞周期抑制剂的p21Cip1蛋白会随时间向上调控；图8B-8C显示生长抑制曲线；图8D-8F显示活体内肿瘤中长抑制作用。图8D显示处置前，皮下的起始1MEA7R.1肿瘤大小为约0.5厘米直径；图8E为第4周时安慰剂或载体处理组织肿瘤；图8F为第4周时PB处理组的肿瘤。
图9为一RNA印迹分析结果，显示放射线照射后皮肤中TGF-β1、2、及TNF-α表现的向上调控是受构造不相关的HDAC抑制剂(毛斯达丁A与丙戊酸)所抑制。
图10显示丙戊酸会增强肿瘤的放射线敏感性。点代表平均两不同实验的三重复；SD小于10％。
图11A-11B显示EB病毒阳性的岛氏淋巴瘤(Daudi’s lymphoma)细胞会选择性地被HDAC抑制剂、抗生素与放射疗法的低剂量组合所破坏，但EB病毒阴性的HL-60血癌细胞不会。图11A显示1nM的TSA处理48小时会在EB病毒阳性的岛氏淋巴瘤向上调控EB病毒胸腺嘧啶激酶活性；图11B显示TSA、GCV、及放射线的组合会产生最大量EBV阳性细胞死亡。棒状物代表平均三次不同实验的三次重复。
权利要求
1.一种药学组合物在制备增加放射治疗与化学治疗效果的药剂中的用途，其特征在于该药物组合物包括治疗上有效量的组蛋白过乙酰化剂以及药学上可接受的载体或有效量的组蛋白过乙酰化剂在药学上可接受盐。
2.根据权利要求1的所述用途，其特征在于该组蛋白过乙酰化剂为组蛋白去乙酰化抑制剂。
3.根据权利要求2的所述用途，其特征在于该组蛋白去乙酰化抑制剂在药学上可接受盐包括碱金属盐、碱土金属盐、含有机碱的盐、含有机碱的盐。
4.根据权利要求3的所述用途，其特征在于该可接受盐包括钙盐、镁盐、铵盐、三乙基胺盐、乙醇胺盐。
5.根据权利要求1的所述用途，其特征在于该药物组合物的制备方法包括按重量比例取组蛋白过乙酰化剂∶药学可接受的载体为1∶100-10∶100，将其混合加热形成糊状物，搅拌混匀后冷却。
6.根据权利要求5的所述用途，其特征在于该加热温度为30℃-100℃。
7.根据权利要求5的所述用途，其特征在于该载体可为矿脂、软石蜡、液态石蜡等。
8.根据权利要求5的所述用途，其特征在于可将一种或两种以上的载体加热作为第一成分，将一种或两种以上的组蛋白过乙酰化剂加热溶于离子水作为第二成分，将第二成分加入第一成分搅拌混匀，冷却。
9.根据权利要求5的所述用途，其特征在于该药物组合物混匀后PH值调整为3-6。
10.根据权利要求9的所述用途，其特征在于该药物组合物PH值调整可使用体积重量比为0.10％-10.00％的磷酸。
11.根据权利要求1的所述用途，其特征在于该组蛋白过乙酰化剂为毛斯达丁A或毛斯达丁C。
12.根据权利要求1的所述用途，其特征在于该组蛋白过乙酰化剂为选自澳杉弗利廷，穿普克辛A，FR901228，艾皮斯汀，HC-毒素，WF27082，以及衣原体素所组成的族群。
13.根据权利要求1的所述用途，其特征在于该组蛋白过乙酰化剂为选自柳酰基异羟肟酸，辛二烯胺苯异羟肟酸，及壬二双异羟肟酸所组成的族群。
14.根据权利要求1的所述用途，其特征在于该组蛋白过乙酰化剂为选自壬二-1-异羟肟酸-9-胺苯，M-羧桂皮酸双氢氧胺，6-(3-氯苯尿基)卡玻酸异羟肟酸，MW2796，以及MW2996所组成的族群。
15.根据权利要求1的所述用途，其特征在于该组蛋白过乙酰化剂为选自丁酸钠，异戊酸，丙戊酸，戊酸酯，4-丁酸苯酯，丁酸苯酯钠，丙酸，丁亚酰胺，异丁酰胺，乙酸苯酯，丙酸3溴，以及丁酸甘油酯所组成的族群。
16.根据权利要求1的所述用途，其特征在于该组蛋白过乙酰化剂为MS-27-275或其3′-胺基衍生物。
17.根据权利要求1的所述用途，其特征在于该组蛋白过乙酰化剂为低朴第辛或史奎普泰。
18.根据权利要求1的所述用途，其特征在于该增加的治疗效果是同时增进肿瘤的放射线敏感性或使肿瘤对于化学疗法敏感化，增加肿瘤生长抑制，增进黏膜炎与皮肤炎的伤口复原，预防/减缓跖-掌症候群，减低组织纤维化，避免正常组织发生细胞死亡，预防口干症，及抑制肿瘤生成。
19.根据权利要求1的所述用途，其特征在于该放射疗法是体外照射放射治疗法、腔内近接放射治疗法、或游离辐射法。
20.根据权利要求1的所述用途，其特征在于该增生性恶性疾病是选自黑色素瘤，卡波西氏肉瘤，骨肉瘤，神经母细胞瘤，横纹肌肉瘤，依文氏肉瘤，软组织肉瘤，皮肤癌，淋巴瘤，血癌，乳癌，生殖细胞肿瘤，原始性神经外胚瘤，脑胶质瘤，脑脊髓膜瘤，头颈癌症，甲状腺癌，胸腺癌，子宫颈癌，肛门癌症，直肠癌，前列腺癌，肺癌，肝细胞癌，胆管癌，胃癌，胰腺癌，食道癌，病毒相关肿瘤，及接受骨髓移植所导致的疾病所组成的族群。
21.根据权利要求1的所述用途，其特征在于该增生性非恶性疾病是选自角膜翼状努肉，葛瑞夫兹氏眼病变，框假瘤，黄斑病变，瘢痕疙瘩，疣，角化棘皮瘤，血管瘤，房室异形，肌腱炎，纤维类瘤，培洛尼氏病，血管狭窄，造釉细胞瘤，动脉瘤样骨囊肿，异位性骨化，男性女乳化，卵巢去除，腮腺炎，湿疹，异位性皮肤炎，牛皮癣，肩周炎，上髁炎，膝关节病变，汗腺炎，瘭疽，自体免疫炎症性关节炎，组织细胞增生病X，及接受器官移植所引发的疾病所组成的族群。
22.根据权利要求1的所述用途，其特征在于该药剂经口服或非口服方式施用。
23.根据权利要求22的所述用途，其特征在于该药剂经静脉注射、胃肠道、非胃肠道、肌肉内、鼻内、皮下、局部施用。
24.根据权利要求1的所述用途，其特征在于该药剂是乳剂，油剂，凝胶，糊状物，粉末，乳液，贴片，栓剂，脂肪体剂型，悬浮液，漱口剂、灌肠剂，注射溶液，或点滴注射剂。
25.根据权利要求1的所述用途，其特征在于该组合物中存在有0.001％至100％重量百分比的组蛋白过乙酰化剂。
26.根据权利要求1的所述用途，其特征在于该药剂更包括第二药剂，是选自细胞因子，白介素，抗癌症剂或抗瘤剂，抗血管新生剂，化疗剂，抗体，共轭抗体，免疫刺激物，抗生素，视黄酸，酪胺酸激酶抑制剂，激素拮抗剂及生长刺激物所组成的族群。
27.根据权利要求26的所述用途，其特征在于该共轭抗体是择自贺塞汀，c225，及美罗华所组成的族群。
28.根据权利要求26的所述用途，其特征在于该化疗剂是选自烷化剂，嘌呤类似物，嘧啶类似物，长春花生物碱，类长春花生物碱，鬼臼亚乙苷，类鬼臼亚乙苷药，类固醇，亚硝基脲，抗代谢物，铂类细胞毒性药，抗雄性激素及抗雌性激素所组成的族群。
29.根据权利要求26的所述用途，其特征在于该抗血管新生剂是择自沙利窦迈，SU5416，SU6668，凝血栓蛋白-1，血管内皮抑制素，及血管阻断素所组成的族群。
30.根据权利要求26的所述用途，其特征在于该抗生素是择自更昔洛韦，阿昔洛韦，及泛昔洛韦所组成的族群。
31.根据权利要求1的所述用途，其特征在于该药物组合物施用时可以与其它用于增加增生性恶性或非恶性疾病的放射治疗及/或化疗效果的化合物组成试剂盒，该试剂盒中的试剂可以同时或组合施用。
全文摘要
本发明提供一种药物组合物在制备增加放射治疗与化学治疗效果的药剂中的用途，该药物组合物包括治疗上有效量的组蛋白过乙酰化剂以及药学上可接受的载体或有效量的组蛋白过乙酰化剂在药学上可接受盐；该用途包括施用该药学组合物至一所需个体。该药物组合物的制备方法包括取组蛋白过乙酰化剂与药学可接受的载体将其混合加热形成糊状物，搅拌混匀后冷却。该化合物可同时刺激上皮再生，抑制成纤维细胞增生，减低胶原蛋白沉积，抑制纤维原生长因子，减低前炎症细胞因子以及调节细胞周期基因、肿瘤抑制子与肿瘤基因子表现，且有用于增加放射治疗与化学治疗的治疗效果以及增加肿瘤生长抑制与肿瘤治疗效果。
文档编号A61K45/00GK1689648SQ200410037398
公开日2005年11月2日 申请日期2004年4月30日 优先权日2004年4月30日
发明者钟邑林 申请人:钟邑林