专利名称：一种防治人病毒感染的新颖的复方干扰素阴道喷雾剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种预防和治疗妇女人乳头瘤病毒(HPV)、单纯疱疹病毒II型(HSV-2)，巨细胞病毒(CMV)感染的YC复方干扰素阴道喷雾剂的新颖组方及装置，属于具有针对性治疗适应症的药物制剂领域。
背景技术：
1.乳头瘤病毒(HPV)感染乳头瘤病毒病是全世界最常见的性传播疾病。最近报道，全球一半以上的成人被乳头瘤病毒所感染。人乳头瘤病毒(HPV)有许多型别，目前已鉴定的已达100个型别以上，它感染特定部位或引起特定临床症状，约有30％通过性传播。有报道指出，77％HIV阳性妇女同时也是HPV阳性。与其它性传播疾病不同，HPV很易通过与感染的皮肤或与污染的物品直接接触而传播。美国资料表明，大约有1000万美国妇女具有活动性HPV感染，其中大多数是10多岁和20多岁。
目前，从不同的人的病灶组织中，已克隆的HPV达100个型别以上。HPV病毒颗粒的形态如说明书附
图1所示。HPV与人类疾病的关系见下表表1 HPV与疾病关系一览表
2.慢性宫颈炎的主要病原是人乳头瘤病毒(HPV)、人单纯疱疹病毒II型(HSV-1)和人巨细胞病毒(CMV)等在上述HPV引起的人类疾病中，妇女宫颈的HPV感染最为常见，危害性也最大。在宫颈粘膜柱状上皮和鳞状上皮转变的区带处，是嗜粘膜性乳头瘤病毒繁殖的部位，也是慢性宫颈炎的好发部位。HPV是慢性宫颈炎的主要病原。
1989年中国病毒基因工程国家重点实验室和北京天坛医院合作研究发现，慢性宫颈炎(宫颈糜烂)与乳头瘤病毒(HPV)，单纯疱疹病毒(HSV)，巨细胞病毒(CMV)和衣原体感染关系极为密切。从慢性宫颈炎患者的宫颈中，三种病毒的检出率均明显地高于正常宫颈，说明这三种病毒与慢性宫颈炎的发生，特别是与乳头瘤病毒16型(HPV16)感染有关。因而是干扰素治疗的对象。
1987年钱止维等采用重组人干扰素α治疗宫颈糜烂，发现干扰素对此常见病有十分明显的疗效。146例宫颈糜烂患者用人干扰素α治疗的总有效率达93.8％，其中显效率为60％，与同剂量的自然白细胞干扰素相当；用常规药妇炎灵治疗的显效率为37.7％，干扰素治疗12个月后仍保持明显疗效。干扰素治疗后病毒的检出率也明显下降。
3.宫颈HPV感染与宫颈癌关系密切目前所知，人乳头瘤病毒是人类肿瘤病毒病因中最为重要的一类病毒。它与人类皮肤与粘膜的良性与恶性肿瘤关系最为密切。
宫颈HPV感染不仅是慢性宫颈炎的主要病因，还是宫颈癌的原始病因。目前，大量的研究表明，宫颈癌发生以前有一系列的不正常的细胞改变，这些不正常的细胞改变(dysplasia)称为CIN I，II，III(cervical intraepithelial neoplasia)，其中CIN III即是原位癌。过去就认为HPV感染与CIN I，II，III关系密切，称为HPV-associated CIN I，II，III。
检查宫颈HPV感染和宫颈癌的癌前变化的常规方法为Pap涂片检查。近年来有许多证据，说明HPV可以引起CIN，在辅助因子的作用下，可以发展成宫颈癌1.组织的癌前变化有规律地与某些型别的乳头瘤病毒有关，如肛门生殖器的Bowen氏病，子宫颈上皮内肿瘤形成(CIN)等。
宫颈Pap涂片检查将CIN分为3度主要是依据不正常细胞进入宫颈上皮层的深度，有丝分裂的活跃程度和不典型的核CIN 1仅侵犯宫颈表层的1/3厚度；CIN 2侵犯宫颈表层的2/3厚度；CIN 3侵犯宫颈表层的全厚度。
但是所有CIN I，II，III常侵犯宫颈的一小部分。CIN I，II相当于轻，中度的发育异常(dysplasia)；CIN III相当于严重的发育异常，或称为原位癌(carcinoma-in-situ)；但不是宫颈癌。宫颈涂片能说明是否存在CIN，但是有时不能肯定不正常细胞侵犯的深度，必要时需进行宫颈活体检查。
2.在子宫癌、阴颈癌、外阴和肛门周围癌组织中可以有规律地检出HPV DNA序列。有97.9％的宫颈癌组织中可以发现HPV DNA序列，主要是HPV16或HPV18，但有地区性的差异。世界卫生组织报导全世界宫颈癌的年发病数为45万人。
钱止维等(1986)发现，慢性宫颈炎患者的宫颈组织和洗液中，HPV16的检出率可高达20-50％。
3.不仅是宫颈癌组织而且来自宫颈癌的细胞株如HeLa、SIHA和CASKI均含有HPV16、HPV18或其它型别的HPV DNA，后者于染色体上一个位点或多个位点处整合并有转录。
4.人类生殖器的癌前组织学病理改变，与动物乳头瘤病毒感染时所引起的病理改变是相一致的，如常有凹空细胞(Koilocytosis)。
5.HPV DNA的存在方式与癌变过程有一定联系。在癌前病灶中，HPV DNA呈游离状态，在浸润癌组织细胞中则呈整合状态，而且有一定的整合部位，即在E1-E2之间。
6.宫颈癌的高发区，阴茎癌的发生也较高。
据此，诊断为CIN后，有足够的时间进行治疗干预，及时治疗宫颈的HPV感染也可以认为是预防宫颈癌的一种措施。
近年来研究者鉴定了有18个型别的HPV与宫颈癌有关。大部分型别过去是知道的，其中有3个型别列为″可能″的名单中。资料发表在2月6日出版的″The New England Journal ofMedicine″杂志上。
事实上所有的宫颈癌都是由HPV引起的，后者是性传播的。目前已经鉴定的型别已超过80个，其中仅有30个左右与癌变有关。由Columbia大学内科和外科研究所的Dr.Thomas Wright同时发表的文章指出，绝大部分宫颈癌都含有18个型别的HPV DNA中的一种。
宫颈癌是世界上妇女第二位最常见的癌症，在发达国家多见。
1995年癌症研究国际机构(IARC)指出，有足够的证据将HPV 16和18列为致癌物质。去年11月，研究者宣称已开发一种疫苗对抑制HPV 16高度有效，对50％的宫颈癌均有效。
现在，研究的作者，除过去的4篇外(IARC的1995年公告的基础)，又收集了7篇研究论文，加以归纳分析。这11份研究报告来自9个国家和1,918名确证的宫颈癌妇女以及1,928名宫颈癌妇女。结果表明，91％的宫颈癌患者可检出HPV DNA，而对照妇女为13％。
癌症患者最常见的型别依次为16，18，45，31，33，52，58和35.对照组妇女最常见的检出型别是16，18，45，31，6，58，35和33。
根据这些资料，有15个型别的HPV划归为高危。这些是16，18，31，33，35，39，45，51，52，56，58，59，68，73和82。另3个型别26，53和66列为可能高危的型别。12个型别划分为低危型别。
4.人干扰素根据干扰素(interferons，IFNs)的定义，干扰素是一类至少在同种细胞上具有广谱抗病毒、抗细胞分裂、免疫调节活性和在不同途径上影响细胞的代谢、生长和分化的蛋白质，其活性的发挥需新合成RNA和蛋白质。它是一类重要的细胞素。经过近半个世纪的基础和临床研究，说明它是一种重要的广谱抗病毒、抗肿瘤治疗药物。
干扰素首先与特异性细胞受体结合，通过信号传递，激活细胞基因表达，从而发挥干扰素的生物学活性1.抗病毒活性抑制病毒基因的复制。
2.抗细胞增殖活性细胞膜的改变；细胞骨架的改变；刺激细胞分化；调节生长因子的表达；抑制癌基因的表达；逆转恶化细胞的表型；激活p53基因的表达。
3.免疫调节活性诱导其它细胞素的表达；激活巨噬细胞，NK细胞；上调HLA I和II的表达；调节肿瘤相关抗原的表达。
迄今所知，人干扰素存在多个型别干扰素-α，β，δ，γ，ε，κ，λ，τ，ω，limitin等型别，它们的主要特点和可能的临床应用各异。
目前，研究较多并用于临床治疗的有α，β，γ；其它型别干扰素是否有临床应用价值尚在研究之中。
5.人白细胞介素-2(IL-2)IL-2由TH1细胞产生，能促进T细胞生长，增强NK细胞活性，诱导或促进多种细胞毒性的活性，协同刺激B细胞增殖及分泌Ig等。美国FDA批准IL-2/125S突变体治疗晚期肾癌和黑色素瘤。中国SDA批准远策欣(IL-2/125C)治疗晚期肾癌，黑色素瘤，癌性腹水和结核病。基因定位人4q26-28；鼠3B-C。
6.胸腺素β4(Thymosin-beta-4，TB4)TB4由43个氨基酸组成，N端乙酰化，最早是从牛胸腺提取的。某些细胞系也可产生TB4，包括成肌细胞，成纤维细胞；某些人髓质甲状腺癌也可产生。由GM-CSF诱导的骨髓细胞的分化过程中可诱生TB4。人TB4与人干扰素诱生的6-26同源，也与涉及肌动蛋白聚合的Fx同源。
TB4与TNF的融合蛋白注入带有实验肿瘤的动物后，观察到明显的抗肿瘤作用。融合蛋白在血清中的半衰期比TNF要长，在TNF无活性的浓度下还能引起肿瘤的缩小。
TB4可以明显地促进表皮创伤愈合，机制不同于表皮生长因子，不引起癌变。
7.干扰素治疗性传播的HPV感染迄今为止，国内外已发表诸多文献报道，证明干扰素对治疗慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤形成和预防宫颈癌具有一定效果。
申请者发表的文献1.钱止维，…侯云德人rαD型干扰素治疗慢性宫颈炎的疗效 中华妇产科杂志22335，19872.钱止维，…侯云德人重组αD型干扰素与黄芪联合应用治疗宫颈糜烂 中西医结合杂志7268，19873.钱止维，…侯云德慢性宫颈炎的病毒病因 病毒学报318，19874.Qian Zhiwei，Hou Yunde et alA study on the efficacy of a recombinant human alphaD type interferon in treatment of chronic cervicitis J.Interferon Res.6suppl.134，19865.钱止维，…侯云德宫颈HPV病毒感染对黄芪干扰素的治疗反应 中华实验与临床病毒学杂志160，19876.Qian Zhiwei…Hou Yunde et alViral Etiology of Chronic Cervicitis and itsTherapeutic Response to A Recombinant Interferon Chinese Medical Journal103(8)647-651，19907.干扰素协作组外用人α1型基因工程干扰素治疗慢性宫颈炎673例疗效观察中国免疫学杂志1990，6218.钱止维…侯云德等子宫颈常见病毒及沙眼衣原体感染的研究 中华妇产科杂志25(5)266，19909.钱止维，李玉英，侯云德等宫颈病毒及沙眼衣原体感染的病原研究性医学与性传播疾病研究进展，p.1-2，199010.钱止维，李玉英，杨新科，侯云德等慢性宫颈炎的病毒病因及其对重组干扰素的治疗反应性医学与性传播疾病研究进展，p.3-6，1990年11.钱止维，张景华，吴广芹，…侯云德子宫颈人乳头瘤病毒16型感染的母婴传播中华妇产科杂志，28(45)242-212.张秀龙钱止维子宫颈糜烂面积测算方法的研究成果中华妇产科杂志32(1)，199713.舒利利，侯云德等在妇女宫颈湿疣中发现一种HPV相关序列 病毒学报5268，198918.王大婉等外用α1型基因工程干扰素治疗慢性宫颈炎的疗效观察 中国生物制品学杂志6(专辑1)，24，199319.胡敏华，张景华，钱止维…侯云德等重组人α1b干扰素对宫颈人乳头瘤病毒16型母婴传播的阻断作用。北京医学20(4)276-278，199820.李玉英，杨新科，侯云德等慢性宫颈炎的病毒病因及其对重组干扰素的治疗反应 性医学与性传播疾病研究进展，p.3-6，1990年21.段淑敏，杨新科，郭津津等人乳头瘤病毒16型和巨细胞病毒在母婴间的感染与传播 中华实验和临床病毒学杂志，10(4)389，199622杨新科，段淑敏，侯云德孕妇-新生儿HPV-16产道传播研究中华实验和临床病毒学杂志，6(4)334-336，199223.杨新科，段淑敏，郭津津等干扰素对孕妇产道病毒的抑制作用中华实验和临床病毒学杂志，10(2)122-123，199624.段淑敏 杨新科，#郭津津干扰素治疗对足月孕妇宫颈人乳头瘤病毒16型经产道传播的影响 中华实验和临床病毒学杂志10，2189，199625.张丽兰#刘永清，#俞志爱等黄芪和干扰素合剂抗单纯疱疹病毒的作用中华实验和临床病毒学杂志12，3269-271，19988.当前干扰素治疗宫颈HPV感染存在的问题在80年代发明人的临床试验中，鉴于嗜粘膜性HPV感染主要发生在宫颈的柱状上皮和磷状上皮的交接处(也是宫颈癌的好发部位)，为了准确地判断疗效，采用医院医生给药的方式，在阴道扩张器的帮助下，将浸润有1毫升干扰素液(100万单位)的纱布直接贴敷在宫颈上，用一根棉线露出在阴道外，次日由病人自己拉出。但是，这一给药方式，不成为药物的一种剂型。所以，我们一直在考虑要开发合适的剂型，能将干扰素直接投放到宫颈局部。
在我们的工作发表之后，90年代以来，我国有许多厂家，相继开发了干扰素治疗慢性宫颈炎的多种剂型，包括栓剂，凝胶剂，泡腾剂等。但是上述剂型不很理想，根据我们在80年代进行的一系列研究工作(另见文献)，还存在如下问题①阴道从前庭到前穹隆约为7-9厘米；从前庭到后穹隆约为10-12厘米；上述剂型用手指推入阴道时，大部分在阴道的中部，由于阴道上端的面积最大，给药的大部分不易直接到达宫颈。
②患者自己用手指推进给药，如果病人不用消毒手套或指套，易于发生污染。
③目前的剂型中，干扰素剂量偏低一次剂量所含干扰素大多在50万单位以下；而我们在80年代所进行的研究表明，一次50万单位干扰素全部贴敷在宫颈的效果仅为100万单位的一半。
④干扰素与其他细胞因子的作用机理类同，它不是直接阻断病毒的复制；而是通过与细胞受体结合，经过信号传递，激活一系列基因，使细胞再产生一系列所谓抗病毒蛋白质，发挥抗病毒复制的作用；栓剂、凝胶剂型缓慢释放小量干扰素，就有可能产生生理性的低反应期，不利于治疗。
在国际文献中虽有作者报道干扰素治疗宫颈HPV感染有一定效果，但是效果并不很理想，主要是给药方式不理想。
本
发明内容
1.一种YC复方干扰素阴道喷雾剂的组方本发明为克服当前干扰素治疗宫颈乳头瘤病毒感染存在的问题提供了一种新颖的YC复方干扰素阴道喷雾剂组方、产品的制备方法及装置，用于治疗慢性宫颈炎，宫颈上皮发育不良，包括宫颈上皮内瘤形成I、II、III度(原位癌)，抑制HPV、单纯疱疹病毒II型(HSV-2)，巨细胞病毒(CMV)等的繁殖，预防宫颈癌。所述的新颖YC复方干扰素阴道喷雾剂含有以下组分人干扰素，人白蛋白质，天然多糖等，可含有或不含有其它人细胞因子和缓冲液。
1.1.如发明内容1所述的YC阴道喷雾剂组分，其特征在于，所述的人干扰素为天然和重组的各型干扰素及其亚型，如α1b，α2a，α2b，β1a，β1b，γ等。
1.2.如发明内容1.1.所述的天然人干扰素，其特征在于，所述的天然人干扰素为在人细胞培养上(人血白细胞或原代细胞培养或二倍体细胞株培养或永生化的细胞系培养等)由任何病毒或双链RNA等其它所有干扰素诱生剂所诱导的人干扰素。
1.3.如发明内容1.1.所述的重组人干扰素，其特征在于，所述的重组人干扰素为由细菌(如大肠杆菌)，真菌(如酵母)或由哺乳动物细胞所生产的各型重组人干扰素。
1.4.如发明内容1.所述的YC阴道喷雾剂组分，其特征在于，所述的人白蛋白为从人周围血提取纯化的人白蛋白或由重组技术生产的人白蛋白。
1.5.如发明内容1.所述的YC阴道喷雾剂组分，其特征在于，所述的天然多糖包括羟丙甲纤维素、透明质酸、纤维素、淀粉、几丁质、壳聚糖及其衍生物，可为其中一种，或者是这些天然多糖的任意组合。
1.6.如发明内容1.所述的YC阴道喷雾剂组分，其特征在于还以可含有其它细胞因子，包括能促进局部免疫反应和促进创伤愈合的各类细胞因子，包括天然的或重组的人白细胞介素-2，12，天然的或重组的胸腺肽-β4，天然的或重组的乳铁蛋白等。
1.7.如发明内容1.6.所述的YC复方干扰素阴道喷雾剂，其特征在于还以可以含有一定浓度的雌激素，如雌二醇、炔雌醇、己烯雌酚等。
1.8.如发明内容1.所述的YC复方干扰素阴道喷雾剂，其特征在于还以可含有一定浓度的缓冲溶液，这些包括醋酸缓冲液、柠檬酸缓冲液、磷酸缓冲液等，pH为3.5~5.5，与阴道的酸性环境相匹配。
1.9.如发明内容1.所述的阴道喷雾剂，其特征在于该产品为无菌产品，其中含有人血白蛋白，而不含任何对阴道粘膜有刺激性的防腐剂。
2.由于本发明中的人干扰素，其它细胞因子和人白蛋白及天然多糖在药物的组方中存在着十分有效的协同作用，再加之采用的特殊的药物递送方式，增加了干扰素在宫颈和阴道上皮的停留时间，从而显著的增加了干扰素抗病毒的有效性。揭示了本发明YC复方干扰素组成方案能够很好的应用于阴道递送生物大分子药物，对人乳头瘤病毒感染具有很好的防治效果。
3.本发明所述的YC复方干扰素阴道喷雾剂的适应症，其特征为预防和治疗女性生殖器的人乳头瘤病毒、人单纯疱疹病毒、人巨细胞病毒感染。
3.1.内容3所述的YC复方干扰素阴道喷雾剂的适应症，其特征为包含所有型别的HPV，特别是与宫颈癌和尖锐湿疣相关的6，11，16，18，26，31，33，35，39，40，42，43，44，45，51，52，53，54，55，56，58，59，62，66，68等型别。
3.2.如发明内容3.1.所述的HPV感染，其特征为HPV感染的部位在女性宫颈、阴道壁、前庭、阴唇、会阴等部位。
3.3.如发明内容3.1.所述的适应症，其特征还在于与HPV密切相关的宫颈上皮内瘤形成(Cervical Intraepithelial Neoplasia，I、II、III)。
3.4.如发明内容3所述的适应症，其特征还在于由HPV、HSV、CMV等引起的宫颈慢性感染或称慢性宫颈炎或宫颈糜烂。
4、如发明内容1.所述的YC阴道喷雾装置，其特征在于是一种特制的、适合于宫颈解剖结构的、一次性、定量的长喷嘴型阴道喷雾装置，可由患者自己将药物直接递送到病变局部。
5、YC复方干扰素阴道喷雾剂治疗生殖器病毒感染，预防宫颈癌系国际首创。
本发明特点1.阴道喷雾剂组方的特点为(1)干扰素的剂量有科学依据根据1985-89年我们的临床试验；在宫颈直接贴敷，每次至少为100万单位。
(2)喷雾剂中含有一定浓度IL-2，其作用有2①扩张毛细血管，利于药物的作用；②刺激机体细胞免疫反应，后者与病毒感染密切有关。
(3)喷雾剂含有0.1％的壳聚糖或其它多糖，增加了喷雾剂的粘稠度，延长了喷雾剂在粘膜表面停留的时间，同时可以扩展上皮细胞层的细胞间隙，使干扰素进入粘膜上皮内，充分发挥干扰素的作用。
(4)喷雾剂中含有一定浓度的TB4，可以促进宫颈上皮的修复。
(5)喷雾剂为酸性，不破坏阴道的酸性环境；(6)喷雾剂中不含任何可能对阴道黏膜有刺激性的防腐剂；(7)喷雾剂在无菌条件下生产包装，每瓶一次性使用，排除了因反复使用而发生污染的可能。
2.YC阴道喷雾剂阴道给药的特点(1)YC阴道喷雾剂根据阴道和子宫解剖学的特点，可以将干扰素直接喷雾到宫颈，即病毒繁殖的部位。
(2)一次性药瓶，不仅安全，而且投药剂量准确。
(3)如果在阴唇和会阴部同时有HPV感染时，易于扩展新适应症。
(4)YC阴道喷雾剂的喷雾嘴长度为7厘米，病人自己在截石位给药，可以保证药物到达宫颈口和宫颈周围的穹隆区。
具体实施例方式实施例1根据女性阴道解剖学特点设计的喷雾剂女性内生殖器是由阴道、子宫颈、子宫、输卵管和卵巢所组成。
阴道阴道呈园柱形，是一个具有高度扩张性的、肌肉的管腔，分前后壁，上下两端；前壁较短，约为7-9厘米；后壁较长，约10-12厘米。上端较宽，包围宫颈。围绕宫颈的部分称为阴道穹隆，分前、后、左、右4部分，子宫颈阴道部凸出于阴道上端。下端开口于阴道前庭后部。较上端窄。平时阴道前后壁相贴，使阴道下部横断面呈H形。从前庭直到子宫。阴道管腔覆盖的粘膜，色淡红，由复层鳞状上皮所覆盖。
子宫腔与子宫颈宫腔为一上宽下窄的三角形。在子宫体与子宫颈之间形成最狭窄的部分称为子宫峡部，在非孕期长约1厘米，其下端与宫颈内腔相连。子宫峡部的上端，因在解剖学上较狭窄，又称为解剖学内口；峡部的下端组织在此由子宫颈内膜转变为子宫颈粘膜，又称组织学内口。宫颈内腔呈梭形，称子宫颈管，成年妇女长约为3厘米，其下端称为子宫颈外口，连接阴道顶端，所以宫颈以阴道附着部为界，分为两部分，即阴道上部和阴道部。是子宫的下部分突出于阴道管腔中，中间有口，经血可以流出，精子可以进入子宫。宫颈的柱状上皮与鳞状上皮交接处是HPV繁殖的所在地。
当人体卧床，处于截石位时，宫颈与后穹隆最为接近，处于这一体位时，喷雾器喷雾物可达宫颈周围。
根据宫颈以上的解剖特点，我们开发了阴道喷雾剂装置，见说明书附图8。共由3部分组成药品瓶，喷雾泵和喷雾臂。
实施例2我们发明的阴道喷雾剂每瓶装量标示量1.0ml，处方如下重组人干扰素α2b(大肠杆菌)300万IU/ml人血白蛋白0.5％
氯化钠 0.7％壳聚糖 0.1％醋酸盐缓冲液(pH4.5) 50mM将壳聚糖溶解，配制成1％的母液，并配制1M的醋酸盐缓冲液(pH4.5)，然后根据处方浓度将各组分混合，搅匀，除菌过滤后，分装至已灭菌的上述喷雾装置中。
实施例3阴道喷雾剂每瓶装量标示量1.0ml，处方可以如下重组人干扰素β 100万IU/ml人血白蛋白 0.5％重组人白介素-220万IU/ml氯化钠 0.6％羟丙基甲基纤维素0.5％柠檬酸盐缓冲液(pH5.0) 50mM将羟丙基甲基纤维素溶解，配制成2％的母液，并配制1M的柠檬酸盐缓冲液(pH5.0)，然后根据处方浓度将各组分混合，搅匀，除菌过滤后，分装至已灭菌的上述喷雾装置中。实施例4阴道喷雾剂每瓶装量标示量1.0ml，处方可以如下重组人干扰素α1b 10μg/ml人血白蛋白 0.5％胸腺素β420μg/ml氯化钠 0.6％几丁质 0.5％磷酸盐缓冲液(pH5.5)50mM将几丁质溶解，配制成母液，并配制1M的磷酸盐缓冲液(pH5.5)，然后根据处方浓度将各组分混合，搅匀，除菌过滤后，分装至已灭菌的上述喷雾装置中。
实施例5阴道喷雾剂每瓶装量标示量1.0ml，处方可以如下重组人干扰素α2b(CHO细胞)300万IU/ml人血白蛋白 0.5％氯化钠 0.7％天然乳铁蛋白 20μg壳聚糖 0.05％纤维素 0.1％醋酸盐缓冲液(pH4.0) 50mM将壳聚糖和纤维素溶解，配制成母液，并配制1M的醋酸盐缓冲液(pH4.0)，然后根据处方浓度将各组分混合，搅匀，除菌过滤后，分装至已灭菌的上述喷雾装置中。
实施例6阴道喷雾剂每瓶装量标示量1.0ml，处方可以如下重组人干扰素α2a 300万IU/ml人血白蛋白 0.5％胸腺素β420μg/ml人IL-2 20万IU/ml氯化钠 0.6％透明质酸 0.1％醋酸盐缓冲液(pH3.8)50mM将各固体成分分别溶解，配制成母液，并配制1M的醋盐缓冲液(pH3.8)，然后根据处方浓度将各组分混合，搅匀，除菌过滤后，分装至已灭菌的上述喷雾装置中。
实施例7本喷雾剂的使用方法为每周2-3次；每次1.0毫升；连续2-3周为一疗程。病人自己给药，每晚在睡前，采取截石位将喷雾嘴直接指向宫颈。将药品喷入；每瓶药品均为一次性使用。一个疗程使用6瓶。
实施例8本喷雾剂疗效判断标准宫颈糜烂病例痊愈子宫颈光滑，糜烂面缩小2度(即由III度好转为I度)或以上。
显效糜烂面积缩小1度(即由II度好转为I度，III度好转为II度)；有效糜烂面积缩小或好转不足I度。或糜烂面积无缩小而颗粒变为单纯型，乳头型变为颗粒型。
无效糜烂面积未缩小或扩大；计算两组痊愈率，显效率。
CIN病例痊愈HPV阴转，Pap涂片阴转。
显效HPV阴转，Pap涂片CIN级别降低I度；或HPV未阴转，CIN级别降低II度有效HPV阴转，Pap涂片CIN级别无改变；或HPV未阴转，但Pap涂片CIN级别降低I级。
无效HPV持续阳性和Pap涂片检查，CIN级别无变化或加重。
兼有宫颈糜烂和CIN患者，两种情况分别统计。
权利要求
1.一种复方干扰素阴道喷雾剂，含有以下组分人干扰素、人白蛋白、天然多糖等，其包装采用一种独特的、适合于宫颈解剖结构的、一次性、定量的长喷嘴型阴道喷雾装置，可由患者自己将药物直接递送到病变局部。用以治疗由于性传播的人乳头瘤病毒(HPV)感染引起的宫颈上皮发育不良，包括宫颈上皮内瘤形成I、II、III度(原位癌)，以及HPV、单纯疱疹病毒II型(HSV-2)，巨细胞病毒(CMV)引起的宫颈慢性感染(慢性宫颈炎或宫颈糜烂)，预防宫颈癌.
2.如权利要求1所述的YC复方阴道喷雾剂组分，其特征在于，所述的人干扰素为天然人干扰素各型和亚型或通过基因重组技术构建的重组人干扰素各型和亚型，如α1b，α2a，α2b，β1a，β1b，γ等。
3.如权利要求2所述的天然的人各型和亚型干扰素，其特征在于，所述的天然的人干扰素为在人细胞培养上(人白细胞或原代细胞培养或二倍体细胞株培养或永生化的细胞系培养等)由任何病毒或双链RNA等其它所有干扰素诱生剂所诱导的人各型和亚型干扰素。
4.如权利要求2所述的重组人各型和亚型干扰素，其特征在于，所述的重组人干扰素为由细菌(如大肠杆菌)或真菌(如酵母)等所生产的或由哺乳动物细胞所生产的重组人各型和亚型干扰素。
5.如权利要求1所述的YC阴道喷雾剂组分，其特征在于，所述的人白蛋白为从人周围血提取纯化的人白蛋白或由重组技术生产的人白蛋白。
6.如权利要求1所述的YC阴道喷雾剂组分，其特征在于，所述的天然多糖包括羟丙甲纤维素、透明质酸、纤维素、淀粉、几丁质、壳聚糖及其衍生物，可为其中一种，或者是这些天然多糖的任意组合。
7.如权利要求1所述的YC阴道喷雾剂组分，其特征在于还可以含有其它细胞因子，包括能促进局部免疫反应和促进创伤愈合的各类细胞因子，包括天然的或重组的人白细胞介素-2，12，天然的或重组的胸腺肽-β4，天然的或重组的乳铁蛋白等。
8.如权利要求7所述的YC复方干扰素阴道喷雾剂，其特征在于还以可以含有一定浓度的雌激素，如雌二醇、炔雌醇、己烯雌酚等。
9.如权利要求8所述的YC复方干扰素阴道喷雾剂，其特征在于还以可含有一定浓度的缓冲溶液，包括醋酸缓冲液、柠檬酸缓冲液、磷酸缓冲液等，pH为3.5~5.5，与阴道的酸性环境相匹配。
10.如权利要求9所述的YC复方干扰素阴道喷雾剂，其特征在于该产品为无菌产品，其中含有人血白蛋白，而不含任何对阴道粘膜有刺激性的防腐剂。
11.如权利要求10所述的阴道喷雾剂，其特征在于，其药物的递送装置为适合于宫颈解剖结构的、一次性、定量的长喷嘴型阴道喷雾装置，可由患者自行将药物直接递送到宫颈病变局部。
12.如权利要求10所述的YC复方干扰素阴道喷雾剂，特征为其适应症是预防和治疗女性生殖器的人病毒感染，包括HPV、HSV、CMV等。
13.如权利要求12所述的人乳头瘤病毒(HPV)感染，其特征为包含所有型别的HPV，特别是与宫颈癌和尖锐湿疣相关的6，11，16，18，26，31，33，35，39，40，42，43，44，45，51，52，53，54，55，56，58，59，62，66，68等型别。
14.如权利要求12所述的HPV感染，其特征为HPV感染的部位在女性宫颈、阴道壁、前庭、阴唇、会阴等部位。
15.如权利要求12所述的适应症，其特征还在于与HPV密切相关的宫颈上皮内瘤形成(Cervical Intraepitheliai Neoplasia，I、II、III)和慢性宫颈炎。
16.如权利要求12所述的适应症，其特征还在于由HPV、HSV、CMV等引起的宫颈慢性感染或称慢性宫颈炎或宫颈糜烂。
全文摘要
本发明提供了一种新颖的复方干扰素阴道喷雾剂的组方及该产品的制备方法、包装装置，用于治疗性传播的人乳头瘤病毒(HPV)、单纯疱疹病毒II型(HSV－2)，巨细胞病毒(CMV)等感染引起的慢性宫颈炎或宫颈上皮发育不良，包括宫颈上皮内瘤形成I、II、III度(原位癌)，它具有抑制病毒繁殖，预防宫颈癌的作用。所述的新颖复方干扰素阴道喷雾剂含有以下组分(总称为YC)人干扰素，人白蛋白，天然多糖及其它人细胞因子，缓冲液和盐类。通过特制的、适合于宫颈解剖结构的、一次性、定量的长喷嘴型阴道喷雾装置，可由患者自己将药物直接递送到病变局部。由于本发明中的人干扰素和组方中的其它成份存在着十分有效的协同作用，特殊的药物递送方式，增加了YC在阴道和宫颈上皮的停留时间，从而显著地增加了干扰素的抗病毒效果。揭示了本发明YC组成方案能够很好地应用于阴道递送生物大分子药物，对性传播的病毒感染具有很好的防治效果。
文档编号A61P15/00GK1927390SQ20051009845
公开日2007年3月14日 申请日期2005年9月8日 优先权日2005年9月8日
发明者侯云德, 张丽兰, 张利萍 申请人:北京远策药业有限责任公司