专利名称：：用于治疗神经变性疾病的氨基甲酸酯化合物的制作方法本专利申请主张2004年10月15日提交的美国临时专利申请序号60/619,402和2005年7月12日提交的美国临时专利申请序号60/698,403的权益。这两项临时专利申请列为本文参考文献。
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：发明领域本发明一般地涉及药理学、神经病学和精神病学的领域，还涉及保护哺乳动物中枢神经系统的细胞免受损害或损伤的方法。更具体地说，本发明提供某些氨基甲酸酯化合物用于神经保护的方法。相关技术的描述对中枢神经系统(CNS)或末梢神经系统(PNS)的各种损害或创伤会产生深刻的和持久的神经病学和/或精神病学症状和障碍。这种情况的一种表现形式是中枢神经系统(CNS)的神经元或其它细胞的渐进性死亡，即神经变性或神经元变性。作为诸如阿尔茨海默病、多发性硬化、脑血管事故(CVAs)性中风、创伤性脑损伤、脊髓损伤、视神经变性例如局部缺血性视神经病或视网膜变性及其它中枢神经系统障碍的结果的神经元变性，由于其高发病率和长期后遗症的频率，已成为一个巨大的医疗和公共健康问题。动物研究和临床试验已经显示，氨基酸传递物质(尤其谷氨酸)、氧化性应力和炎症反应对这些病症中的细胞死亡有强烈贡献。当损伤时或当局部缺血性伤害时，受损害的神经元释放放出庞大数量的神经传递物质谷氨酸，后者对周围神经元有兴奋毒性(Choietal.，(1988)，Neuron1623-634；Rothmanetal.，(1984)，J.Neurosci.41884-1891；ChoiendRothman，(1990)，Ann.Rev.Neurosci.13171-182；Davidetal.，(1988)，Exp.EyeRes.46657-662；Drejeretal.，(1985)，J.Neurosci.45145-151。谷氨酸是一种带负电荷的氨基酸，即哺乳动物神经系统中的一种兴奋型突触传素。尽管谷氨酸的浓度在神经末梢会达到毫摩尔范围，但其细胞外浓度维持在一个低水平，以防止神经毒性。人们已经注意到，谷氨酸当以高浓度存在时对神经元会有毒性。“激感毒性”这一术语用来描述谷氨酸(及其它这样的激感氨基酸)当以高剂量施用时会对神经元产生的细胞毒性效应。在生理学上，过度释放，摄取抑制、或两者兼而有之，会达到高的谷氨酸水平。通常，细胞外谷氨酸的低浓度是由神经元和显形细胞共同维持的。神经元将谷氨酸贮藏在胞内贮藏所并调节其释放。见Reagan，R.F.，ExcitotoxicityandCentralNervousSystemTrauma，inTheNeurobiologyofCentralNervousTrauma，NewYork，OxfordUniversityPress，1994，pp.173-181(SalzmanSK，FadenAl，eds)。星形细胞经由特定输送剂摄取细胞外谷氨酸并将该谷氨酸转化成谷氨酰胺，然后将其释放供神经元摄取。见Robinson，M，B.&DowdLA，AdvPharmacol，1997；3769-115。在兴奋毒性过程中，谷氨酸是以一种自持方式由神经元释放的，导致谷氨酸受体的过度活化或长期活化。能源枯竭的神经元上这样过度的谷氨酸刺激与神经支持性星形细胞螯合毒性水平的细胞外谷氨酸的能力受损配合，导致经由坏死和程序死亡的神经元死亡。目前正在考察各种干预，以减少与中枢神经系统损伤和疾病相联系的神经元死亡。见Kermeretal.，CellTissueRes298383-395，1999。这样的疗法包括谷氨酸释放抑制剂、谷氨酸受体拮抗剂、Ca2+通道阻断剂、GABA受体兴奋剂、神经节苷脂、神经营养性因子、calpain抑制剂、caspase抑制剂、自由基清除剂、免疫和细胞代谢调节剂。例如，若干研究已经显示谷氨酸涉嫌下列的病理生理学1)享延顿病(HD)(Coyle和Schwartz，(1976)，Nature263244-246)；2)阿尔茨海默病(AD)(Maragos等，(1987)，TINS1065-68)；3)癫病(Nadler等，(1978)，Nature271676-677)；4)山黧豆中毒(Spencer等，(1986)，Lancet2391066-1067)；5)肌萎缩性侧索硬化(ALS)和Guam氏帕金森痴呆(Caine等，(1986)，Lancet21067-1070)，以及与中风、局部缺血和再输注相联系的神经病理学(见Dykeus等，(1987)，J，Neurochem.491222-1228)。因此，神经元损伤可能是包括谷氨酸和天冬氨酸在内的激感氨基酸对受体的过度刺激引起的(见Lipton等，(1994)NewEngl.J.Med.330613-621)。的确，有人认为谷氨酸受体的N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)亚型在正常大脑功能包括突触传递、学习和记忆、以及神经元发育方面有很多重要作用(见Lipstonetal.(1994)supra；Meldrumetal.(1990)TrendsPharm.Sci.11379-387)。然而，谷氨酸受体的NMDA亚型的过度刺激导致增加自由基产生和神经元细胞死亡，而这可以由抗氧剂调节(见Herinetal.(2001)J.Neurochem.781307-1314；Rossatoetal.(2002)Neurosci.Lett.318137-140)。此外，在很多慢性神经变性病症中，炎症和氧化性应力是病理学的关键组成部分。这些病症包括阿尔茨海默病(AD)。阿尔茨海默病(AD)的特征在于神经原纤维昆布和老年斑的积累，以及大脑中神经元的广泛、渐进性变性。老年斑富存由位于染色体21上的APP基因编码的淀粉样前体蛋白质(APP)。奠定AD的发病机理的一个公认假设是，APP的异常蛋白水解断裂导致一种β淀粉样(Aβ)肽的过度细胞外积累，已经有人显示这对神经元是有毒的(见Selkoeetal.，1996)，J.Biol.Chem.271487-498；Quinnetal.，(2001)，Exp.Neurol.168203-212；Mattsonetal.，(1997)，A/zheimer1sDis.Rev.121-14；Fakuyamaetal.，(1994)，BrainRes.667269-272)。帕金森病(PD)是一种渐进性神经变性异常，其特征在于由运动不能、强直、震颤、姿势异常组成的运动机能障碍。这种疾病是与黑色纹状多巴胺能神经元完整性和机能性的丧失相联系的，如密实黑质对(SNpc)中多巴胺神经元的实质上丧失所证实的(见Pakkenbergetal.(1991)J.Neurol.Neurosurg.Psychiat.5430-33)，andadecreaseincontent，synapticandvesiculartransportersofdopamineinthestriatum(see，forexample，Guttnanetal.(1997)Neurology481578-1583)。包括人类在内的哺乳动物的中枢神经系统(CNS)或末梢神经系统(PNS)中的神经元和支持性细胞作为创伤、多种损伤、局部缺血、代谢紊乱例如低氧糖尿病、毒素或外科干预的结果而死亡，引起急性、慢性和渐进性的机能丧失和残废。因此，目前需要发展能保护哺乳动物神经系统免于这种变性即神经保护性的方法和化合物。发明概要本发明一般地涉及神经保护方法，更具体地涉及防止损伤、创伤、外科、或者急性或慢性疾病过程造成的对哺乳动物中枢神经系统和末梢神经系统的细胞的损害的方法和化合物。本发明部分地基于如下发现氨基甲酸酯化合物家族的一个或多成员要么单独要么与一种或多种其它神经保护性药剂组合的给药，提供了对哺乳动物神经系统的神经保护效应。本发明提供的神经保护包括防止神经损伤或伤害所造成的和神经毒性包括激感毒性所造成的损害。因此，本发明提供的神经保护可用于治疗可能涉及激感毒性例如谷氨酸激感毒性的急性和慢性神经变性障碍，包括中风/局部缺血，外科创伤，创伤性脑损伤(TBI)，钝的、封闭的或穿透性的脑创伤，癫痫，享廷顿病，肌萎缩性侧索硬化(ALS)，糖尿病性神经病和低血糖脑病。本发明提供的神经保护可以是在可望导致神经损伤的事件期间或之前、针对受伤或患病的组织或以一种预防方式进行。本发明提供了通过对有其需要的患者给药要么单独要么与另一种药剂组合、连同一种医药上可接受的赋形剂一起的、有效量的本发明化合物或其医药上可接受的盐或酯，在该患者中提供神经保护的方法；抑制细胞变性或细胞死亡的方法；治疗或预防神经变性疾病的方法；或改善一种化合物(例如一种激感氨基酸如谷氨酸、一种毒素、或一种有细胞毒性副作用的预防化合物或治疗化合物)的细胞毒性作用的方法。在各种实施方案中，本发明的方法都包括对激感毒性例如谷氨酸激感毒性的防护。在各种实施方案中，该患者例如人可以正在蒙受神经损伤或伤害；也可以正在患一种选自物质滥用、创伤、中风、局部缺血、亨廷顿病、阿尔茨海默病、帕金森病、prion病、变异的Creutzfeld-Jakob病、肌萎缩或低血糖脑病的病症；还可以正在遭遇外科手术或其它干预。该患者可以有一种会因神经保护而受益的事先存在疾病，该患者也可以在接受治疗以降低伴发或继发神经损伤的有害作用，例如可以在外科手术或其它干预期间进行。因此，本发明提供了提供神经保护的方法，包含对有其需要的患者给药治疗有效量的一种组合物，该组合物包含至少一种有式1或式2的化合物式1式2式中R1、R2、R3、和R4独立地是氢或C1-C4烷基；且X1、X2、X3、X4、和X5独立地是氢、氟、氯、溴或碘。式1或式2的所述C1-C4烷基可以是有取代的或无取代的。在本发明的一个方面，该C1-C4烷基是有苯基取代的。该苯基可以是无取代的或有取代的。在某些实施方案中，该苯基是无取代的或有卤素、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、氨基、硝基、或氰基取代。在本发明中，X1、X2、X3、X4、和X5可以是氢、氟、氯、溴和碘。在某些实施方案中，X1、X2、X3、X4、和X5独立地是氢或氯。在本发明的一种较好实施方案中，X1是氟、氯、溴或碘。在一个方面，X1是氯，而X2、X3、X4、和X5独立地是氢。在另一种较好的实施方案中，R1、R2、R3、和R4独立地是氢。本发明提供了在患者中提供神经保护的式1或式2的对映体。在某些实施方案中，式1或式2的化合物将呈其单一对映体的形式，在其它实施方案中，式1或式2的化合物将呈对映体混合物的形式，其中一种对映体相对于另一种对映体而言占主导。在一个方面，该对映体将在90％或更高的程度或在98％或更高的程度上占主导。本发明也提供一些方法，包含对患者给药神经保护量的一种组合物，该组合物包含至少一种有式1或式2的化合物，其中R1、R2、R3、和R4独立地是氢或C1-C4烷基；且X1、X2、X3、X4、和X5独立地是氢、氟、氯、溴或碘。在一种实施方案中，在对该患者给药该组合物之前，要确定该患者是否患有某种形式的急性或慢性神经变性或神经系统损伤。本发明也提供一些方法，包含识别有发展急性或慢性神经变性或神经系统损伤的风险的患者或者需要用以下定义的神经保护药物(NPD)治疗的患者，和对该患者给药一种包含至少一种有式1或式2的化合物的组合物。在本发明的某些实施方案中，用于提供神经保护的式1或式2的化合物的治疗有效量是约1.0mg/kg/剂量～约150mg/kg剂量。在一位70kg人中，这会对应于日剂量为约70mg/日～约10,500mg/日。在某些实施方案中，包含一种或多种本发明对映体或其医药上可接受盐或酯和医药上可接受载体或赋形剂的、用于提供神经保护的医药组合物的治疗有效量，是对需要用神经保护药物或NPD治疗的对象或患者给药的。包含至少一种有式1或式2的化合物的医药组合物是对有其需要的对象给药的。在某些实施方案中，需要用神经保护药物或NDP治疗的对象或患者可以是经历过某种形式的对中枢神经或末梢神经的细胞的急性创伤或损伤者，也可以是有某种形式的急性或慢性神经变性异常者。在一个方面，将会确定该对象或患者在给药时有发展急性或慢性神经变性异常的风险，即一位需要用神经保护药物治疗的患者。在其它实施方案中，有其需要的对象是在给药时有对其神经系统的细胞的急性损伤或创伤者。附图简要描述图1是一幅显示增大TC剂量对li-piloSE之后14天计数的海马的不同区域中神经元数目的影响的图。数值表达为每个有兴趣的区域中神经元细胞体的数目±S.E.M.。图2是一幅显示增大TC剂量对li-piloSE之后14天计数的扁桃体的不同核中神经元数目的影响的图。数值表达为每个有兴趣的区域中神经元细胞体的数目±S.E.M.。图3是一幅显示增大TC剂量对li-piloSE之后14天计数的丘脑的不同核中神经元数目的影响的图。数值表达为每个有兴趣的区域中神经元细胞体的数目±S.E.M.。图4是一幅显示增大TC剂量对li-piloSE之后14天计数的皮质的不同区域中神经元数目的影响的图。数值表达为每个有兴趣的区域中神经元细胞体的数目±S.E.M。图5是一幅显示增大TC剂量对第一次自发发作的潜伏期的影响的图。数值表达为每一组的平均潜伏期天数±S.E.M.。图6是一幅增大TC剂量对为期4周内视频记录的自发发作频率的影响的图。数值表达为平均发作次数±S.E.M.。总数代表为期4周视频记录期间观察到的总发作次数，而平均值代表每周平均发作次数。Anova试验证实了治疗对总发作次数的影响(p＝0.045)和对每周平均发作次数的影响(p＝0.045)。图7显示按照第一次自发发作的潜伏期作图的为期4周内视频记录的总发作次数(SL＝短潜伏期，LL＝长潜伏期)。数值表达为每个小组的平均分作次数±S.E.M.。ANOVA试验没有显示治疗的任何显著效果。图8显示第一次自发发作的潜伏期与随后4周期间观察到的总发作次数之间的相关性。发明详细描述本发明的氨基甲酸酯化合物本发明提供使用某些2-苯基-1，2-乙二醇一氨基甲酸酯和二氨基甲酸酯对有其需要的哺乳动物提供神经保护的方法。本发明的方法中使用的氨基甲酸酯化合物—包括氨基甲酸酯对映体—的合成与精制的适用方法是业内技术人员众所周知的。例如，其公开文书全文列为本文参考文献的美国专利No.5,854,283和No.5,698,588和No.6,103,759中描述了2-苯基-1，2-乙二醇一氨基甲酸酯和二氨基甲酸酯的纯粹对映体形式和对映体混合物。按照本发明的代表性氨基甲酸酯化合物包括那些有式1或式2的化合物式1式2式中R1、R2、R3、和R4独立地是氢或C1-C4烷基，且X1、X2、X3、X4、和X5独立地是氢、氟、氯、溴或碘。本文中使用的“C1-C4烷基”系指有1～4个碳原子的、有取代或无取代的脂肪族烃。这个“烷基”定义内具体地包括的是那些任选地有取代的脂肪族烃。在本发明的一种较好的实施方案中，该C1-C4烷基是要么无取代的要么有苯基取代的。本文中使用的“苯基”这一术语，无论单独使用还是作为另一个基团的组成部分，都定义为一种有6个碳原子的有取代或无取代的芳香族烃环基。这个“苯基”定义内具体地包括的是那些任选地有取代的苯基。例如，在本发明的一种较好实施方案中，“苯基”基团是要么无取代的要么有卤素、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、氨基、硝基、或氰基取代的。在本发明的一种较好实施方案中，X1是氟、氯、溴或碘、而X2、X3、X4、X5是氢。在本发明的另一种较好实施方案中，X1、X2、X3、X4、和X5独立地是氯或氢。在本发明的另一种较好实施方案中，R1、R2、R3、和R4都是氢。要理解的是，本发明的化合物上的取代基和取代模式可以由业内普通技术人员选择，以提供化学上稳定的、而且可以容易地由业内已知的技术以及本文中提供的方法合成的化合物。代表性的2-苯基-1，2-乙二醇一氨基甲酸酯和二氨基甲酸酯包括例如下列化合物式3式4式5式6式7式8本发明包括式1或式2的分离对映体的使用。在一种较好实施方案中，使用一种包含式1的分离S对映体的医药组合物提供某一对象的神经保护。在另一种较好实施方案中，使用一种包含式2的分离R对映体的医药组合物提供某一对象的神经保护。在另一种实施方案中，可以使用一种包含式1的分离S对映体和式2的分离R对映体的医药组合物来提供某一对象的神经保护。本发明也包括式1或式2的对映体的混合物的使用。在本发明的一个方面，一种对映体将占主导。该混合物中占主导的对映体是以一种以大于该混合物中存在的其余任何一种对映体的数量例如以＞50％的数量存在于该混合物中的对映体。在一个方面，一种对映体将在90％的程度上或者在91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％或98％或更大的程度上占主导。在一种较好实施方案中，在一种包含式1化合物的组合物中占主导的对映体是式1的S对映体。在另一种较好实施方案中，在一种包含式2化合物的组合物中占主导的对映体是式2的R对映体。在本发明的一种较好实施方案中，在本发明的组合物中作为弧独对映体或作为占主导对映体存在的对映体是用式3或式5代表的，其中X1、X2、X3、X4、X5、R1、R2、R3、和R4同以上定义，或者由式7或式8定义。式3式5式7式8本发明提供式1和式2所代表的化合物的对映体和对映体混合物的使用方法。式1或式2的氨基甲酸酯对映体含有一个苄基位不对称手性碳，即与该苯环毗邻的脂肪族碳。一种分离的对映体是一种实质上没有相应对映体的对映体。因此，分离对映体系指一种经由分离技术分离或制备得没有相应对映体的化合物。本文中使用的“实质上没有”这一术语系指该化合物由显著较大比例的一种对映体构成。在较好的实施方案中，该化合物包括至少约90wt％的一种较好对映体。在本发明的其它实施方案中，该化合物包括至少约99wt％的一种较好对映体。较好的对映体可以用业内技术人员已知的任何方法—包括高性能液相色谱法(HPLC)和手性盐的生成与结晶—从外消旋混合物分离，或者较好的对映体可以用本文中所述的方法制备。较好对映体的制备方法会是业内技术人员已知的，而且描述了例如Jacques，etal.，Enantiomers，RacematesandResolutions(WileyInterscience，NewYork，1981)；Wilen，S.H.，etal.，Tetrahedron332725(1977)；Eliel，E.L.StereochemistryofCarbonCompounds(McGraw-Hill，NY，1962)；和Wilen，S.H.TablesofResolvingAgentsandOpticalResolutionsp.268(E.L.Eliel，Ed.，Univ.ofNotreDamePress，NotreDame，IN1972)。此外，本发明的化合物可以像下列文献中所述那样制备美国专利No3,265,728(其公开文书全文列为本文参考文献且用于所有目的)，No.3,313,692(其公开文书全文列为本文参考文献且用于所有目的)，和以上参照的美国专利No.5,854,283、No.5,698,588、和No.6,103,759(其公开文书全文列为本文参考文献且用于所有目的)。神经保护的种类有中枢神经系统(CNS)或包括视网膜在内的末梢神经系统(PNS)的任何一种损伤或损害的患者可以受益于这些神经保护方法。这种神经系统损伤可以呈神经系统的意外损害或急性损伤的形式，例如急性神经变性障碍，包括但不限于急性损伤、缺氧性局部缺血或其组合，从而导致神经元细胞死亡或损害。急性损伤包括但不限于创伤性脑损伤(TBI)，包括封闭性、钝性或穿透性脑创伤、病灶性脑创伤、扩散性脑损伤、脊髓损伤、颅内或脊柱内损伤(包括但不限于脊髓的挫伤、穿透、剪切、压缩或撕裂损伤，或鞭子式摇摆婴儿综合征。此外，一般性氧或血液供应不足会引起急性损伤，例如缺氧和/或局部缺血，包括但不限于脑血管机能不全、大脑局部缺血或大脑栓塞(包括源于栓塞性闭塞和血栓形成的大脑局部缺血或栓塞，视网膜局部缺血(糖尿病性的或其它病因的)，青光眼，视网膜变性，多发性硬化，毒性和局部缺血性视神经病，急性局部缺血后再灌注，产期缺氧局部缺血性损伤，任何类型的心博停止或颅内出血(包括但不限于硬膜外、硬膜下、蛛网膜下或大脑内出血)。神经系统的组织的创伤或损伤也可能呈更慢性和渐进性的神经变性障碍的形式，例如与一段时间内的渐进性神经元细胞死亡或损害相联系的那些，包括但不限于阿尔茨海默病、皮克病、弥漫性Lewy体病、渐进性核上麻痹(Steel-Richardson综合征)、多系统变性(Shy-Drager综合征)、与神经变性相联系的慢性癫痫病症、运动神经元疾病(肌萎缩性侧索硬化)、多发性硬化、变性运动失调、皮质基底变性、Guam氏ALS-帕金森-痴呆综合征、亚急性硬化性全脑炎、享廷顿病、帕金森病、synucleinopathies(包括多系统萎缩)、原发渐进性失语、黑色纹状体变性、神经系统亚速尔病(Machado-Joseph病)或脊髓小脑运动失调类型3和橄榄体脑桥小脑变性、延髓和假延髓麻痹、脊髓和脊髓延髓肌萎缩(Kennedy疾病)、原发性侧索硬化、家族的痉挛性截瘫、Werdnig-Hoffmann病、库-韦综合征(Kugelberg-Welander病)、泰-萨(Tay-Sach)病、桑霍夫(Sandhoff)病、家族性痉挛病、沃-库-韦综合征(Wohlfart-Kugelberg-Welander病)、痉挛性下身轻瘫、渐进性多病灶脑白质病、家族性自主神经机能异常(RileyDay综合征)或锯鹱病(包括但不限于Creutzfeld-Jakob病、Gerstmann-Strussler-Scheinker病、Kuru病或婴儿家族性失眠)。此外，神经系统的创伤和渐进性损伤也会呈各种精神病学异常，包括但不限于两极异常或情感分裂异常或精神分裂症的渐进性恶化形式，冲动控制异常，强迫观念与行为异常(OCD)，精神运动性癫痫行为变化和个性异常。在一种较好实施方案中，会使用本发明的化合物来提供涉及各种精神病学异常患者神经系统的创伤和渐进性损伤的病症的神经保护。这些病症会选自下列组成的一组情感分裂异常，精神分裂症，冲动控制异常，强迫观念与行为异常(OCD)和个性异常。此外，创伤和损伤还可能呈与明显的和广延的失忆相联的异常形式，包括但不限于与下列相联系的神经变性异常与年龄有关的痴呆，血管性痴呆，弥漫性脑白质病(Binswanger病)，内分泌源或代谢源痴呆，头部创伤和弥漫性脑损伤的痴呆，拳击员痴呆或前叶痴呆，包括但不限于皮克病。与神经元损伤相联系的其它异常包括但不限于与包括视网膜在内的神经系统的化学损伤、毒性损伤、感染损伤和辐射损伤、胎儿发育期间的损伤、出生时的早熟、缺氧性局部缺血、肝源性损伤、血糖源损伤、尿毒源损伤、电解质源损伤、内分泌源损伤、精神病学源损伤(包括但不限于精神病理学、抑郁症或焦滤症)、末梢疾病和丛病(包括丛麻痹)的损伤、或神经病(包括选自下列的神经病多病灶神经病、感觉神经病、运动神经病、感觉运动神经病、自主神经病、感觉-自主神经病或脱髓鞘神经病(包括但不限于Guillain-Barre综合征或慢性炎性脱髓鞘多神经根神经病)或源于下列的那些神经病感染、炎症、免疫异常、药物滥用、药理学处理、毒素、创伤(包括但不限于压缩性创伤、粉碎性创伤、撕裂性创伤或分割性创伤)、代谢异常(包括但不限于内分泌或准肿瘤)、Charcot-Marie-Tooth病(包括但不限于相关的类型1a、1b、2、4a或1-X)、Friedreich共济失调、异染性脑白质营养不良、Refsum病、肾上腺脊髓神经病、运动失调性毛细血管扩张症、Djerine-Sottas(包括但不限于A型或B型)、Lambert-Eaton综合征或颅神经异常)相联系的病症。因此，本文中使用的“神经保护”这一术语系指包括人在内的哺乳动物的中枢神经系统或末梢神经系统中神经细胞、轴索或其支持细胞的机能障碍、变性或死亡的严重性的抑制、预防、改善或减少。这包括有其需要的患者的神经变性疾病的治疗或预防；激感毒性的防护或者化合物(例如激感氨基酸如谷氨酸盐；毒素；或者会产生即时或延时细胞毒副作用包括但不限于即时或延时诱发程序死亡的预防性或治疗性化合物)细胞毒性效应的改善。因此，本文中使用的“需要用神经保护药物(NPD)治疗的患者”系指当前有或可能发展上述任何一种综合征或异常、或者患者的现有临床病情或预后可能受益于提供神经保护以防止任何一种神经病学或精神病学异常的发展、蔓延、恶化或增加治疗抗性的任何异常的任何患者。“抗癫痫药”(AED)这一术语将与“抗惊厥剂”这一术语互换地使用，而且如在本文中所使用的，这两个术语均系指一种当该药剂对某一对象或患者给药时能抑制(例如防止、减缓、停止、或逆转)发作活性或ictogenesis的药剂。本文中使用的“治疗”或“处理”这一术语系指成功地防止或改善损伤、病理学或病情的任何显著标志，包括任何客观的或主观的参数，例如症状的减轻、缓解、减少，或使该损伤、病理学、或病情更能被该患者忍受；降低变性或衰退速率；使变性终点变得不太衰弱；或改善某一对象的肌体或精神健康。症状的治疗或改善可以基于客观的或主观的参数；包括身体检查、神经病学检查、和/或精神病学评估的结果。因此，“治疗”或“处理”这一术语包括给药本发明的化合物或药剂来提供神经保护。在一些情况下，用本发明化合物的治疗将与其它神经保护化合物或AED组合进行，以预防、抑制、或阻止神经元死亡或损害或脑机能障碍或脑过度兴奋的进展。本文中使用的“疗效”这一术语系指神经保护效果的有效提供，以防止或最大限度减少患者中枢神经系统或末梢神经系统细胞的死亡或损害或机能障碍。本文中使用的“治疗有效量”系指足以在有此类神经保护治疗的需要的对象或患者中产生以上所定义的疗效的、一种或多种本发明化合物的数量。“对象”或“患者”这些术语在本文中是互换地使用的、而且如在本文中所使用的、系指可以给药本发明组合物的、包括但不限于人类的任何哺乳动物，包括人类患者或患者。哺乳动物这一术语包括人类患者和非人类灵长类动物，以及实验动物例如兔、大鼠、小鼠、及其它动物。在一些实施方案中，本发明的方法将有利地用来治疗目前未患或已知正在患一种业内已知能用氨基甲酸酯化合物或目前已知的神经保护化合物或AED有效地治疗的病症的患者。在这些情况下，使用本发明的方法和化合物的决定会在确定该患者是否是以上所定义的“需要用神经保护药物(NPD)治疗的患者”的基础上做出。在一些实施方案中，本发明提供神经保护方法。在某些实施方案中，这些方法包含对某患者给药治疗有效量的本发明氨基甲酸酯化合物，该患者尚未显现神经系统细胞损伤或损害的明显临床信号或症状，但由于神经系统的损伤或创伤或由于一些已知的要么生物化学的要么遗传的素因或者发现这些病症中一种或多种的经证实生物标记物而可能属于发展神经元损害的高风险人群。因此，在一些实施方案中，本发明的方法和组合物是针对目前有发展神经元损害的风险但尚未显现临床证据的对象中的神经保护的。这种患者当根据对某一对象或其家族的医学史、身体检查或测试表明有大于发展神经元损害的平均风险的任何因素的认识确定时可能只是有“较大风险”。因此，这种用任何目前可供利用手段确定某一患者可能有“较大风险”的方法可以用来确定该患者是否应当用本发明的方法治疗。因此，在例示性实施方案中，可能受益于用本发明方法和化合物的治疗的对象可以使用确定神经元损害的风险因素的公认筛查方法来识别。这些筛查方法包括，例如，确定风险因素的惯常检查，包括但不限于例如要么封闭性的要么贯穿性的头部创伤，细菌性的或病毒性的CNS感染，脑血管疾病包括但不限于中风、脑肿瘤、脑水肿、囊尾蚴病，叶啉症，代谢性脑病，药物戒除包括但不限于镇静药安眠药或酒精戒除，异常产期史包括出生时缺氧或任何种类的出生损伤，脑瘫，学习能力丧失，活动过强，儿童热性惊厥史，癫痫持续状态史，癫痫或任何一种与癫痫发作有关的异常的家族史，脑的炎性疾病包括lupis，要么直接要么经由胎盘转移的药物中毒包括但不限于可卡因中毒，父母亲同血缘，以及用对神经系统有毒的药剂包括影响精神的药剂的治疗。无临床信号或症状的患者中哪些患者可以受益于用NPD的治疗的确定可以根据各种各样的“替代物标记物”(surrogatemarkers)或“生物标记物”(biomarkers)进行。本文中所使用的“替代物标记物”或“生物标记的”是互换地使用的，而且系指可以与神经元损害的当前存在或未来发展可靠地关联起来的任何解剖学的、生物化学的、结构的、电的、遗传的、或化学的指示物或标记物。在一些情况下，脑成像技术例如计算机X线断层术(CT)、磁共振成像(MRI)或正电子发射断层术(PET)可以用来确定某一对象是否有神经元损害风险。适合于本发明方法的生物标记物包括但不限于用MRI、CT或其它成像技术确定海马中的硬化、萎缩或体积损失或者明显的正中短暂硬化(MTS)或类似的相关解剖病理学；患者血液、血清或组织中分子种例如蛋白质或其它生物化学的生物标记物的检测，例如高水平的睫状神经营养因子(CNTF)或血清中高水平的神经元变性产物；或者替代物标记物或生物标记物的其它证据表明该患者需要用神经保护药物治疗。预料将来还会发展很多这样的、利用种类繁多的检测技术的生物标记物。意图是，神经元损害的现有或将来可能发展的任何此类标记物或指示物—本文中使用后一个术语—都可以在本发明方法中用来确定是否需要用本发明化合物和方法治疗。某一对象有或可能有发展神经元损害的风险的确定也会包括例如医学评估，后者包括详尽病史、身体检查、和一系列相关血液试验。它也可以包括脑电图(EEG)、CT、MRI或PET扫描。发展神经元损害或损伤的风险增大的确定也可以借助于遗传学测试来进行，包括基因表达分布或proteomic技术(见Schmidt，D.Rogawski，M.A.EpilepsyResearch50；71-78(2002)，和Loscher，W，SchmidtD.EpilepsyResearch50；3-16(2002))。对于可以用精神保护药物稳定或改善的精神病学异常例如两极异常、情感分裂异常、精神分裂症、冲动控制异常等来说，上述试验也可以包括患者症状例如情绪异常症状和精神病症状的现状考察和随时间推移的详细病程史，以及与该患者随时间推移可能已经受到的其它治疗的关系例如生命图(lifechart)。这些及其它专门的方法和常规方法使临床医师能选择需要使用本发明方法和配方治疗的患者。在本发明的一些实施方案中，适用于本发明实施的氨基甲酸酯化合物将要么单独给药，要么与至少一种或多种其它化合物或治疗剂例如与其它神经保护药或抗癫痫药、抗惊厥药同时给药。在这些实施方案中，本发明提供患者中治疗或预防神经元损伤的方法。该方法包括下列步骤对需要治疗的患者给药与有效量的一种或多种其它化合物或治疗剂组合的、有效量的本文中公开的氨基甲酸酯化合物之一，该其它化合物或治疗剂有能力提供神经保护或者治疗或预防癫痫发作或癫痫形成，或有能力增强本发明化合物的神经保护效果。本文中使用的一种化合物、治疗剂或已知药物与本发明化合物的“同时给药”或“组合给药”这一术语系指该药物与该一种或多种化合物在该已知药物和该化合物两者都有疗效的这样一种时间的给药。在一些情况下，这种疗效是协同的。这样的同时给药可以涉及相对于本发明化合物的给药而言该药物的同时(即在同一时间)、事先、或随后给药。业内普通技术人员将不难确定特定药物和本发明化合物的给药的适当时机、顺序和剂量。所述一种或多种其它化合物或治疗剂可以选自有下列一种或多种性质的化合物抗氧剂活性；NMDA受体拮抗剂活性，内源GABA抑制的强化；NO合成酶抑制剂活性；铁结合能力，例如铁螯合剂；钙结合能力，例如Ca(II)螯合剂；锌结合能力，例如Zn(II)螯合剂；患者CNS中有效阻塞钠或钙离子通道或开通钾或氯离子通道的能力。在一些较好实施方案中，该一种或多种其它化合物或治疗剂会通过结合到NMDA受体上(例如通过结合到该NMDA受体的甘氨酸结合部位上)来拮抗NMDA受体，和/或该治疗剂会通过减少神经胶质GABA摄取来增强GABA抑制。此外，该所述一种或多种其它化合物或治疗剂可以是任何一种已知能抑制癫痫发作活性的药剂，即使该化合物并非已知能提供神经保护的。这样的药剂会包括但不限于业内技术人员已知的或将来发现的任何有效AED，例如适用的药剂包括但不限于卡马西平、氯巴占、氯硝西泮、乙琥胺、非尔氨酯、加巴喷丁、拉莫三嗪、左乙拉西坦、奥卡西平、苯巴比妥、苯妥英、pregabalin、扑米酮、retingabin、talampanel、噻加宾、托吡酯、丙戊酸酯(盐)、氨己烯酸、唑尼沙胺、苯并二氮杂、巴比妥酸盐和一般镇静催眠药。此外，在一些实施方案中，本发明的化合物将要么单独、要么彼此组合、要么与如上所述的一种或多种其它治疗药剂、或其盐或酯组合，用于制造一种旨在给有其需要的患者或对象提供神经保护的药剂。作为医药的氨基甲酸酯化合物本发明提供作为医药的式1和/或式2的对映体混合物和分离的对映体。该氨基甲酸酯化合物配制成为医药以提供某一对象中的神经保护。一般来说，本发明的氨基甲酸酯化合物可以作为医药组合物用治疗性药物给药业内已知的任何一种方法包括经口、经颊、经局部、经全身(例如经皮、经鼻、或用栓剂)、或非经肠(例如经肌内、经皮下、或经静脉内注射)给药。该化合物直接对神经系统的给药可以包括，例如，经由有或无泵送器具的颅内或椎骨内针或导管输送向脑内、心室内、脑室内、鞘内、脑池内、脊柱内或脊柱周给药途径给药。此外，在眼睛疾病或异常包括但不限于视网膜局部缺血(糖尿病性的或其它病因的)、青光眼、视网膜变性、黄斑变性、多发性硬化、毒性和缺血性视神经病的情况下，本发明的化合物包括化合物组合可以借助于对眼睛即对巩膜或其它部位的直接外原施用例如眼滴剂或由眼植入物或其它缓慢输送器具包括微球、包括向玻璃体液中的直接注射等给药。组合物可以呈片剂、丸剂、胶囊剂、半固体剂、散剂、缓释配方、溶液剂、悬浮液剂、乳液剂、糖浆剂、酏剂、气雾剂、或任何其它适用组合物的形式；而且包含与至少一种医药上可接受赋形剂组合的至少一种本发明化合物。适用的赋形剂是业内普通技术人员众所周知的，而且它们以及该组合物的配制方法可以在AlfonsoARRemington’sPharmaceuticalSciences，17thed.，MackPublishingCompany，EastonPA，1985，这样的标准参考文献中找到，其公开内容全文列为本文参考文献且用于所有目的。适用的液体载体—尤其对于可注射溶液来说—包括水、食盐水溶液、葡萄糖水溶液、和二醇类。该氨基甲酸酯化合物可以作为水性悬浮液剂提供。本发明的水性悬浮液剂可以含有与适合于水性悬浮液剂制造的赋形剂混合的氨基甲酸酯化合物。这样的赋形剂可以包括，例如，一种悬浮剂例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、藻酸钠、聚乙烯基吡咯烷酮、西黄蓍胶和阿拉伯胶，和分散剂或润湿剂例如天然存在磷脂(如卵磷脂)、烯化氧与脂肪酸的缩合产物(如聚氧乙烯硬脂酸酯)、环氧乙烷与长链脂肪醇的缩合产物(如十七(氧乙烯)鲸蜡醇)、环氧乙烷与从脂肪酸和己糖醇衍生的部分酯的缩合产物(如聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯)、或环氧乙烷与脂肪酸和己糖醇酐衍生的部分酯的缩合产物(如聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯)。该水性悬浮液剂也可以含有一种或多种防腐剂例如对羟基苯甲酸乙酯或正丙酯，一种或多种着色剂、一种或多种矫味矫臭剂、和一种或多种增甜剂例如蔗糖、天冬甜素、或糖精。各配方的容积渗克分子浓度可以调整。本发明方法中使用的油性悬浮液剂可以通过使氨基甲酸酯化合物悬浮在一种植物油例如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油中或在一种矿物油例如液体石蜡或这些的混合物中来配制。该油性悬浮液剂可以含有一种增稠剂例如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。可以添加增甜剂以提供适口的经口制剂，例如甘油、山梨糖醇或蔗糖。这些配方可以通过抗氧剂例如抗坏血酸的添加来防腐。作为可注射油载剂的实例，见Minto，J.Pharmacol.Exp.Ther.28193-102，1997。本发明的医药配方也可以呈水包油型乳状液的形式。该油相可以是以上所述的一种植物油或一种矿物油，或这些的混合物。适用的乳化剂包括天然存在的胶例如阿拉伯胶和西黄蓍胶，天然存在的磷脂例如大豆卵磷脂，从脂肪酸和己糖醇酐衍生的酯或部分酯例如脱水山梨糖醇单油酸酯，和这些部分酯与环氧乙烷的缩合产物例如聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。该乳状液也可以含有增甜剂和矫味矫臭剂，如同在糖浆剂和酏剂的配方中一样。这样的配方也可以含有粘滑剂、防腐剂、或着色剂。单独或与其它适用成分组合的所选择化合物可以制成要经由吸入给药的气雾剂配方(即它们可以被“喷雾”)。可以将气雾剂配方放进加压的可接受推进剂例如二氯二氟甲烷、丙烷、氮气等中。适合于诸如经由关节内、静脉内、肌内、皮内、腹膜内、和皮下途径的非经肠给药的本发明配方可以包括水性和非水性等渗无菌注射溶液，该溶液可以含有抗氧剂、缓冲剂、制菌剂、和能赋予该配方以与意向受药者的血液等渗的溶质，本发明配方还可以包括水性和非水性无菌悬浮液，该悬浮液可以包括悬浮剂，增溶剂，增稠剂、稳定剂、和防腐剂。在可以采用的可接受载剂和溶剂当中，有水和生理食盐水，即一种等渗氯化钠。此外，惯常地，可以采用无菌固定油作为一种溶剂或悬浮介质。为此目的，可以采用任何牌号固定油，包括合成的甘油单酯或甘油二酯。此外，脂肪酸例如油酸同样可以用于制备注射剂。这些溶液是无菌的，而且一般没有所不希望的物质。在该化合物充分可溶的情况下，它们可以直接溶于标准食盐中，且使用或不使用有机溶剂例如丙二醇或聚乙二醇。微细粉碎的化合物的分散液可以用水性淀粉或羧甲基纤维素钠溶液或用适用油例如花生油配制。这些配方可以用惯常、众所周知的灭菌技术灭菌。该配方可以含有达到适当生理条件所需要的、医药上可接受的辅助物质例如pH调节剂和缓冲剂，毒性调整剂，如乙酸钠、氯化钠、氯化钾、氯化钙、乳酸钠等。这些配方中氨基甲酸酯化合物的浓度可以有很大差异，而且将主要根据流体体积、粘度、体重等，按照所选择的特定给药方式和患者需要来选择。对于IV给药来说，该配方可以是无菌可注射制剂，例如无菌可注射水性或油脂性悬浮液剂。这种悬浮液剂可以按照已知技术使用那些适用的分散剂或润湿剂和悬浮剂配制。该无菌可注射制剂也可以是一种无毒、非经肠可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或悬浮液，例如1，3-丁二醇溶液。所推荐的配方可以以单元剂量或多剂量密封容器例如安瓿和管形瓶提供。注射溶液和悬浮液可以从以上所述种类的无菌粉末、颗粒、和片剂制备。适合用于本发明实施的氨基甲酸酯化合物可以是且较好是经口给药的。该组合物中本发明化合物的数量可以有很大差异，这取决于组合物类型、单元剂量大小、赋形剂种类、和业内普通技术人员众所周知的其它因素。一般来说，最终浓度可以包含例如0.000001wt％～10wt％氨基甲酸酯化合物，较好0.00001wt％～1wt％，其余是一种或多种赋形剂。经口给药的医药配方可以使用业内众所周知的医药上可接受载体以适合于经口给药的剂量配制。这样的载体使该医药配方能配制成适合于患者摄入的单元剂型如片剂、丸剂、散剂、糖衣丸、胶囊剂、液剂、锭剂、凝胶剂、糖浆剂、淤浆剂、悬浮液剂等。适合于经口给药的配方可以由下列组成(a)液体溶液剂，例如悬浮于稀释剂例如水、食盐水或PEG400中的有效量医药配方；(b)胶囊剂、香囊剂或片剂，每一种都含有作为液体、固体、颗粒或明胶的预定量有效成分，(c)适当液体中的悬浮液剂；和(d)适用的乳液剂。口服用途的医药制剂可以这样得到将本发明化合物与固体赋形剂合并，任选地在添加为得到片剂或糖锭剂芯而所希望的适用附加化合物之后研磨所得到的混合物、和加工颗粒混合物。适用的固体赋形剂是碳水化合物或蛋白质填料，而且包括但不限于糖类，包括乳糖、蔗糖、甘露糖醇、或山梨糖醇；来自玉米、小麦、大米、马铃薯、或其它植物的淀粉；纤维素例如甲基纤维素、羟甲基纤维素、羟丙基甲基纤维基或羧甲基纤维素钠；和胶，包括阿拉伯胶和西黄蓍胶；以及蛋白质例如明胶和胶原蛋白。当希望时，可以添加崩解剂或增溶剂，例如交联聚乙烯基吡咯烷酮、琼脂、藻酸或其盐如藻酸钠。片剂剂型可以包括下列一种或多种乳糖、蔗糖、甘露糖醇、山梨糖醇、磷酸钙、玉米淀粉、马铃薯淀粉、微晶纤维素、明胶、胶体状二氧化硅、滑石、硬脂酸镁、硬脂酸、和其它赋形剂、着色剂、填料、粘结剂、稀释剂、缓冲剂、增湿剂、防腐剂、矫味矫臭剂、染料、崩解剂、和医药上可兼容载体。锭剂剂型可以将有效成分包含在一种芳香剂例如蔗糖中，以及将有效成分包含在一种惰性基剂例如明胶和甘油或蔗糖中的锭剂，和除有效成分外还含有业内已知的载体的阿拉伯胶乳状液剂、凝胶剂等。本发明的化合物也可以以该药物经直肠给药用栓剂的剂型给药。这些配方可以通过使药物与一种在常温下是固体但在直肠温度下是液体的适用非刺激性赋形剂混合来制备，因而在直肠中会熔融而释放出该药物。这样的材料是可可脂和聚乙二醇。本发明的化合物也可以通过包括栓剂、吹入配方、散剂和气雾剂配方的经鼻内、经眼内、经阴道内、和经直肠内途径给药(关于类固醇吹入剂的实例，见Rohatagi，J.Clin.Pharmacol.351187-1193，1995；Tjwa，Ann.AllergyAsthmaImmunol.75107-111，1995)。本发明的化合物可以经由局部途径透皮输送，并配制成施用棒、溶液、悬浮液、乳状液、凝胶、霜剂、软膏剂、糊剂、胶冻、涂布剂、散剂、和气雾剂。也可以采用有本发明化合物的胶囊化材料，而且“组合物”这一术语可以包括与一种胶囊化材料组合成一种配方、有或无其它载体的有效成分。例如，本发明化合物也可以作为能在体内缓释的微球输送。在一种实施方案中，微球可以经由能在皮下缓慢释放的含药物(如米非司酮)微球的皮内注射给药(见Rao，J.BiomaterSci.Polym.Ed.7623-645，1995；作为可生物降解和可注射凝胶配方给药(见例如Gao，Pharm.Res.12857-863，1995)；或作为经口给药用微球给药(见例如Eyles，J.Pharm.Pharmacol.49669-674，1997)。透皮途径和皮内途径使得能在数周或数月内恒定输送药物。扁囊剂也可以用于输送本发明化合物。在另一种实施方案中，本发明化合物可以通过使用能与细胞膜并合或能被(细胞)内吞的脂质体输送，即采用能附着到该脂质体上的配体，该脂质体与细胞的表面膜蛋白质受体结合，从而导致内吞。通过使用脂质体，尤其在脂质体表面带有对靶细胞专一的配体、要不然优先指向专门器官的情况下，人们可以将氨基甲酸酯化合物的输送集中到活体内的靶细胞上。(见例如Al-Muhammed，J.Microencapsul.13293-306，1996；Chonn，Curr.Opin.Biotechnol.6698-708，1995；Ostro，Am.J.Hosp.Pharm.461576-1587，1989)。本发明的医药配方可以作为一种盐提供，而且可以与很多酸—包括但不限于盐酸、硫酸、乙酸、乳酸、酒石酸、苹果酸、琥珀酸等—生成盐。盐倾向于更可溶于水性溶剂或其它质子溶剂中，即相应的游离碱形式。在其它情况下，较好的制剂是一种冻干粉末，该粉末可以含有下列任何一种或全部1mM-50mM组氨酸，0.1％-2％蔗糖，2％-7％甘露糖醇，在pH4.5～5.5范围内，即使用前与缓冲剂组合。医药上可接受盐和酯系指是医药上可接受的而且有所希望的药理学性质的盐和酯。这样的盐包括在该化合物中存在的酸性质子能与无机碱或有机碱反应的情况下可以生成的盐。适用的无机盐包括与碱金属例如钠和钾以及镁、钙、和铝生成的那些。适用的有机盐包括与有机碱例如胺碱如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、tromethamine、N-甲基葡糖胺等生成的那些，医药上可接受盐也可以包括从母体化合物中的胺片断与无机酸(如盐酸和氢溴酸)和有机酸(如乙酸、柠檬酸、马来酸、以及烷磺酸和芳磺酸如甲磺酸和苯磺酸)的反应生成的酸加成盐。医药上可接受酯包括从该化合物中存在的羧基、磺酰氧基、和膦酰氧基生成的酯。当有2个酸性基团存在时，医药上可接受盐或酯可以是一种单酸单盐或酯或一种二盐或酯；且类似地在有不止2个酸性基团存在的情况下这样的基团的一部或全部可以盐化或酯化。本发明中称谓的化合物可以以无盐化或无酯化形式或者以盐化和/或酯化形式存在，而且这样的化合物的称谓意图既包括原来(无盐化和无酯化)化合物，也包括其医药上可接受盐和酯。本发明包括式1和式2的医药上可接受盐和酯形式。式1或式2的对映体的不止一种晶体形式可以存在，因此，也将其包括在本发明中。本发明的医药组合物，除含有氨基甲酸酯外，还可以任选地含有至少一种可用于治疗与提供神经保护相联系的疾病或病情的其它治疗剂。医药组合物的配制方法已描述于许多出版物中，例如PharmaceuticalDosageFormsTablets，第二版、修订版和扩编版，卷1～3，Lieberman等编；PharmaceuticalDosageFormsParenteralmedications，卷1～2，Avis等编；和PharmaceuticalDosageFormsDisperseSystems，卷1～2，Lieberman等编，MarcelDekker公司出版，其公开内容全部列为本文参考文献和用于所有目的。这些医药组合物一般配制成无菌的、实质上等渗的，而且完全符合美国食品与药品管理局(USFDA)的《良好制造实践》(GMP)规定的所有要求。剂量方案本发明提供使用本发明的氨基甲酸酯化合物或组合物在包括人类对象或患者在内的哺乳动物中提供神经保护的方法。提供神经保护所需要的氨基甲酸酯化合物的数量定义为治疗有效剂量或医药有效剂量。剂量时间安排和这种用途的有效数量，即给药方案或剂量方案，将取决于各种各样的因素，包括疾病阶段、患者的身体状态、年龄等。在计算患者的剂量方案时，也要考虑给药方式。为了达到这一目的，本发明的化合物或组合物必须以正确的活有效数量或剂量使用，如以下所述。剂量时间安排和这种用途的有效数量，即给药方案或剂量方案，将取决于各种各样的因素，包括疾病或损伤的准确性质、患者的身体状态、体重、年龄等。在计算患者的剂量方案时，也要考虑给药方式。在类似于实施例1和2中锂-毛果芸香碱大鼠模型和以下实施例4中瞬间脑局部缺血中脑动脉闭塞(MCAO)大鼠模型的、处于严重的和急性的临床状况的人体中，预期能有效地产生神经保护效果的剂量范围是通过比较大鼠和人体中已知有效量和血液水平来确定的。药物动力学在人体中，已知的是，本文中简称为“试验化合物(TC)即式7的本发明化合物之一的药物动力学，在健康成年男人中单一和重复经口给药后是线性的”(见实施例5)。人体中血液水平在人体毒理学研究中，试验化合物(TC)在为期7天内以各种不同剂量经口给药产生了下列Cmax和AUC(0～24)1)100mg每日2次(70kg人体中24小时内200mg或2.85mg/kg/日)，Cmax是3.6μg/mL，且AUC是42.2μg-小时/mL；2)250mg每日2次(70kg人体中24小时内500mg或7.14mg/kg/日)，Cmax是8.2μg/mL，且AUC是102.3μg-小时/mL；3)500mg每日2次(70kg人体中24小时内1000mg或14.28mg/kg/日)，Cmax是17.2μg/mL，且AUC是204.1μg-小时/mL；4)750mg每日2次(70kg人体中24小时内1500mg或21.4mg/kg/日)，Cmax是28.2μg/mL，且AUC是322.7μg-小时/mL。大鼠血液水平在大鼠毒理学研究中，试验化合物(TC)在为期8天内经口给药产生了下列Cmax和AUC1)30mg/kg/日，Cmax是9.33μg/mL，且AUC是97.32μg-小时/mL；2)100mg/kg/日，Cmax是20.63μg/mL，且AUC是230μg-小时/mL；3)300mg/kg/日，Cmax是70.34μg/mL，且AUC是525.95μg-小时/mL。在实施例2中用大鼠进行抗癫痫发生效果和神经保护效果试验的剂量范围是30mg/kg/日～120mg/kg/日。在这个实施例中试验的最低剂量即30mg/kg产生了一些可测量保护效果，而在实施例1中试验的最低剂量是10mg/kg/日，并产生了最低限度保护效果(见以下实施例1和2)。然而，在实施例4中瞬间脑局部缺血中脑动脉闭塞(MCAO)大鼠模型中，大鼠中10mg/kg的剂量显示栓塞尺寸轻微但显著减小。在大鼠中，试验化合物(TC)的30mg/kg/日剂量预期会产生下列血液水平Cmax为933μg/mL，且AUC为97.32μg-小时/mL。在人体中，这些血液水平预期会是，在70kg人体中，约500mg/日～约600mg/日或约7.1～约8.6mg/kg/日的剂量。然而，在实施例1和2中，由于所使用的急性的和非常严重的动物模型和需要产生所证实的神经保护和抗癫痫发生效果，需要相对高的剂量和血液水平。此外，在这种严重的急性动物模型中，该化合物是在创伤事件或损伤已经发生即通过给药Li-毛果芸香碱诱发癫痫状态之后给予的。在实施例4的瞬间脑局部缺血中脑动脉闭塞(MCAO)大鼠模型中，该化合物也是在中脑动脉闭塞之后1小时给药的。这种类型的后损伤模型可能与人类患者中类似急性和严重临床状况相关联，例如直至严重CNS损伤已经发生之后才开始治疗。在这样的状况下，预期的是，达到神经保护和抗癫痫发生效果所需要的剂量将高于在较小急性或严重性的情况下或在慢性状况下、尤其在预防性地使用药剂的情况下可能会需要的剂量。在一个初步预防或预处理范例中预防性地使用药剂的情况下，产生临床上重要的神经保护效果所需要的剂量和血液水平预期会稍低于实施例4中使用的10mg/kg剂量的人体等效量，而且显著低于实施例2中发现有效的30mg/kg/日剂量。因此，在人体临床实践中预期治疗有效的剂量在大多数情况下会低于在这些严重动物模型中确认的剂量。试验化合物在大鼠中防止发作的ED50是约4mg/kg～约30mg/kg(因时间和实验类型而异)，因此，神经保护大鼠模型中10mg/kg的最低有效剂量并非意外。根据这个数据，预期的人体有效神经保护剂量会类似于人体中抗惊厥药效所需要的最低剂量。在一个在引发任何损害或病理学过程之前就充分给药的初步预防范例中，人体中的有效剂量和血液水平预期会稍低于在实施例4的瞬间脑局部缺血中脑动脉闭塞(MCAO)大鼠模型中发现最低限度有效的10mg/kg剂量的人体等效剂量。在人类患者中，在对人体神经系统的任何损伤或损害之前就开始用药的初步预防范例中，神经保护有效剂量的下限预期会是在70kg人体中约100mg/日～约200mg/日或约1.43mg/kg/日～约2.85mg/kg/日，产生约3.6μg/mL的预期Cmax(在200mg/日剂量时)和约42.2μg-小时/mL的AUC。在持久损伤之后开始用药的情况下，该剂量范围预期会稍高，例如在70kg人体中约200mg/日～约400mg/日或约2.85～约5.71mg/kg/日。本发明的化合物和组合物，就其临床有效剂量范围而言，没有理论上限。因此，治疗有效范围的上限会决定于患者可以忍受的最大数量。然而，根据以上数据，在大鼠中试验的、显示出非常显著神经保护和抗癫痫发生效果的最高剂量即120mg/kg预期会有类似于或低于在人体中750mg一日2次(1500mg/日或大约21.4mg/kg/日)的剂量时产生的那些的Cmax和AUC。750mg一日2次的剂量(总日剂量为1500mg)已在人体中使用，而且已经发现是容易忍受的。据此可以预期，对于很多患者来说，最大可忍受剂量会颇高于这个剂量，也许，在70kg人体中为2500mg/日～3000mg/日或约35.7mg/kg/日～约42.9mg/kg/日。因此，为了给人体对象或患者提供神经保护之目的，本发明的医药化合物和组合物可以以下列剂量给药约1.4mg/kg/日～43.0mg/kg/日(70kg人体中100mg/日～3000mg/日)，较好约2.9mg/kg/日～约35.7mg/kg/日(70kg人体中200mg/日～2500mg/日)，更好约3.6mg/kg/日～约28.6mg/kg/日(70kg人体中250mg/日～2000mg/日)，或甚至更好约4.3mg/kg/日～约21.4mg/kg/日(70kg人体中300mg/日～1500mg/日)，或最好约5.0mg/kg/日～约17.1mg/kg/日(70kg人体中350mg/日～1200mg/日)。然而，因对象的个体特征和忍受度以及所治疗的病情的准确性质而异，这些剂量可以改变。根据本公开文书，业内普通技术人员，不必有关于该技能的过多实验，就能确定本发明的一种特定有取代氨基甲酸酯化合物用于治疗癫痫和用于产生临床上显著的神经保护效果的治疗有效剂量或数量(见例如Lieberman，PharmaceuticalDosageForms(Vols.1-3，1992)；Lloyd，1999，Theart，ScienceandTechnologyofPharmaceuticalCompounding；和Pickar，1999，DosageCalculations)。治疗有效剂量也是就临床而言治疗上有益的效果超过该有效药剂的任何毒性或有害副作用的一种剂量。要进一步说明的是，对于每一个特定对象来说，都应当随着时间推移按照个体需要和给药该化合物或监督该化合物给药的人的专业判断评估和调整具体的剂量方案。也预期的是，本发明的组合物可以以一种低的或温和的剂量启动，然后在一段时间内增加到全治疗有效剂量和血液水平。对于治疗目的来说，本文中公开的组合物或化合物可以以一种单一团状输送、在一段延长的时间内经由连续输送、或以一种重复给药方案(例如每小时一次、每日一次或每周一次重复给药方案)对该对象给药。本发明的医药配方可以是，例如，每日一次、2次或多次、每周3次、或每周一次给药。在本发明的一种实施方案中，本发明的医药配方是每日一次或2次经口给药的。在一些实施方案中，用本发明的化合物的治疗方案可以诸如在某一对象受到脑损害性损伤或其它初始损害例如中风之后开始。在又另一些实施方案中，用本发明的化合物的治疗方案可以在对神经系统的任何损害或损伤发生之前但在这样的损害或损伤可以预期或可能发生的时候开始。例如，这样的治疗方案可以在某一对象遭遇神经外科程序或可能遭受其它形式或头部或脑创伤例如搏斗、剧烈运动或竞赛、重复中风、TIA’s等之前开始。在某些实施方案中，本发明的氨基甲酸酯化合物可以在脑损害性损伤或初始损害发生之后一段设定时间(周、月、年)内每日一次给药。护理医师将知道如何确定该氨基甲酸酯化合物已经达到某一治疗有效水平，例如患者的临床检查，或测定血液或脑脊髓液中药物水平。业内技术人员将能借助于身体检查来确定最大可忍受剂量，从而确定副作用的存在和严重性，例如说话含糊、昏睡、或协调受损。在这个范畴内，该生物学活性剂的治疗有效剂量可以包括在一种会产生临床显著结果从而提供神经保护效果的长期治疗方案内的重复剂量。在这个范畴内有效剂量的确定典型地以动物模型研究为依据，随后进行人体临床试验，并通过确定能显著减少该对象中所针对暴露症状或病情的发生或严重性的有效剂量和给药方案予以引导。这一方面的适用模型包括，例如，鼠、大鼠、猪、猫、非人灵长类动物、及业内已知的其它公认动物模型对象。替而代之，有效剂量可以使用离体模型(例如免疫学试验和病理组织学试验)确定。使用这样的模型，典型地只需要普通计算和调整就能确定一个适当浓度和剂量来给药治疗有效量的该生物学活性剂(例如，能引起所希望的反应的经鼻内有效量、透皮有效量、经静脉内有效量、或经肌内有效量)。在本发明的一种例示性实施方案中，为标准给药方案制备了该化合物的单元剂型。这样，该组合物可以在医师指导下容易地细分成较小的剂量。例如，单元剂量可以制成小袋装散剂、管形瓶或安瓿，较好制成胶囊剂或片剂。该组合物的这些单元剂型中存在的活性化合物可以以例如约25mg～约800mg的数量存在，或较好以约50、100、200、250、400、450、500、和600mg一种或多种本发明活性氨基甲酸酯化合物的单元剂型数量存在，以便于按照患者的特定需要的每日一次或多次给药。本发明的方法也提供用于提供神经保护的药剂盒。在以一种适用载体配制一种包含本发明的一种或多种氨基甲酸酯化合物而且可以添加一种或多种有治疗效益的其它化合物的医药组合物之后，可以将其放进一种适当容器中并贴上提供神经保护的标签。此外，也可以在该容器中放进一另一种包含至少一种其它治疗剂的医药，该治疗剂可用于提供神经保护和致癫痫作用、癫痫或与神经元损伤相联系的另一种异常或病情的治疗，并贴上所指出疾病的治疗的标签。这样的标签可以包括，例如，关于每一种医药的数量、给药频率和方法的说明。尽管以上的发明已经诸如为了清晰地理解之目的而详细地加以描述，但对于技术人员来说显而易见的是，某些改变和修饰是本公开文书所涵盖的而且无需过多实验就可以在所附权利要求书范围实施，它们是以说明而非限制的方式提供的。以下实施例是为说明本发明的具体方面而提供的，而不意味着限制。实验实施例在以下实验实施例中评估了式(I)和式(II)的化合物用于提供神经保护的活性。在以下实验中评估了以下简称为“试验化合物”或“TC”的式1的分离S-对映体(例如以上所示的式7)的活性，以确定该化合物对于神经保护和在致癫痫作用的治疗方面的药效，所采用的是实施例1和2的大鼠中由锂和毛果芸香碱(li-pilo)诱发的暂时脑叶癫痫模型和可用于神经保护效果预测的其它动物模型。这些实施例意在说明本发明的各种不同实施方案，而无意以任何方式限制本发明。实施例1暂时脑叶癫痫的锂-毛果芸香碱模型在大鼠中由与锂缔合的毛果芸香碱(Li-Pilo)诱发的模型再现了人体暂时脑叶癫痫的大多数临床的和神经生理学的特征(Turskietal.，1989，Synapse3154-171；Cavalheiro，1995，ltalJNeurolSci1633-37)。在成年大鼠中，毛果芸香碱的全身性给药导致癫痫持续状态(SE)。致死率在头几天期间达到30～50％。在存活的动物中，神经无损害主要发生在海马结构、梨形的和entorhinal皮质、丘脑、杏仁状复合体、新皮质和黑质内。这个急性发作期之后是平均持续14～25天的“静默”无发作阶段，此后所有动物都显示出通常频率为每周2～5次的自发性复发的惊厥发作(Turskietal.，1989，Synapse3154-171；Cavalheiro，1995，ltalJNeurolSci1633-37；Dubeetal.，2001，ExpNeurol167227-241)。锂-毛果芸香碱和用试验化合物的治疗由Janvier繁育中心(法国LeGenest-st-1ste)提供的、重225-250g的雄性Wistar大鼠在受控标准条件(亮/暗周期，7.00a.m.～7.00p.m.亮)下圈养，食物和水可随意获取。所有动物实验都按照1986年11月24日欧洲共同体理事会指令(86/609/EEC)和法国农业部(LicenseN°67-97)的规定进行。为了植入电极，通过腹膜内注射2.5mg/kg地西泮(DZP，Valium，Roche，France)和1mg/kg氯胺酮盐酸盐(Imalgene1000，RhoneMerrieux，France)使大鼠麻醉。将4个单点接触记录电极放在顶骨皮层上方的颅骨上，每侧2个。诱发癫痫持续状态用试验化合物的治疗和自发性复发癫痫发作(SRS)的发生所有大鼠都接受氯化锂(3meq/kg，腹膜内注射，Sigma公司，美国密苏里州圣路易斯)；约20h后，将动物放进有机玻璃箱中，以期记录基线皮质EEG。溴化甲基东莨菪碱(1mg/kg，s.c.，Sigma公司)给药，以限制惊厥的周边效应。在甲基东莨菪碱之后30min，通过注射盐酸毛果芸香碱(25mg/kg，s.c.，Sigma公司)诱发SE。在数个SE持续期间记录两侧EEG皮质活性，并注意行为变化。研究了增加试验化合物剂量对3组大鼠的影响。第一组动物在SE开始后1h经腹内注射10mg/kg试验化合物(pilo-TC10)，而第二组和第三组动物分别注射30和60mg/kg试验化合物(pilo-TC30和pilo-TC60)。另一组在SE开始后1h注射2mg/kg地西泮(DZP，i.m.)，这是我们改善SE之后的动物存活的标准处理(pilo-DZP)。对照组接受食盐水而不是毛果芸香碱和试验化合物(食盐水-食盐水)。然后，在第一试验化合物注射之后约10h给SE存活的pilo-试验化合物大鼠进行相同剂量试验化合物的第二次腹膜内注射，并在随后6天内保持每日2次的试验化合物处理。pilo-DZP在第一次注射之后约10h的SE日接受第二次1mg/kgDZP注射。然后，pilo-DZP和食盐水-食盐水大鼠每日2次接受等效体积的食盐水。试验化合物对EEG的影响和对SRS的发生的潜伏期的影响是通过该动物每日10h的每日1次视频记录和1周2次的8小时电描记图活性记录来研究的。细胞密度的量化在SE之后6天，对8只pilo-DZP大鼠、8次pilo-TC10大鼠、7只pilo-TC30大鼠、7只pilo-TC60大鼠、和6只食盐水-食盐水大鼠进行细胞密度的量化。在SE之后14天，用1.8g/kg戊巴比妥(Dolethal，Vetoquinol，Lure，France)使动物深度麻醉。然后将脑髓取出、冷冻。在恒冷箱中切割系列的20μm切片、风干若干天、然后进行硫堇染色。*细胞密度的量化是按照大鼠脑图的定向坐标在冠部上以10×10方格1cm2显微格栅进行的。(见PaxinosG，WatsonC(1986)TheRatBraininStereotaxicCoordinates，2nded.AcademicPress，SanDiego)*细胞计数以盲的方式进行2次，而且是每一只动物个体中2个相邻断面的至少3个值的平均值。计数只涉及＞10μm的细胞，更小的细胞视为神经胶质细胞。Timm染色在自发性复发癫痫发作开始后2个月，对暴露于试验化合物或DZP的慢性期大鼠和3只食盐水-食盐水大鼠进行苔藓状纤维芽考察。使动物深度麻醉，并经心脏输注食盐水、随后输注100mL1.15％(w/v)Na2S/0.1M磷酸盐缓冲剂溶液和100mL4％(v/v)甲醛/0.1M磷酸盐缓冲剂溶液。将脑从颅中取出、用4％甲醛后固定3～5h，在一台切片机(slidingvibratome)上切成40μm薄片并装在有明胶涂层的载玻片上。次日，这些薄片在黑暗下在50％(w/v)阿拉伯胶(160mL)、柠檬酸钠缓冲剂(30mL)、5.7％(w/v)氢醌(80mL)和10％(w/v)硝酸银(2.5mL)的26℃溶液中显影40～45min。然后，这些薄片用40℃自来水漂洗至少45min，用蒸馏水迅速漂洗，并使之干燥。用乙醇使其脱水，加盖盖玻片。苔藓状纤维芽是按照以上在背海马中所述的基准(Cavazosetal.，1991，JNeurosci112795-2803.)评估的，该基准如下0-在DG的顶芽与脊突之间没有粒；1-在DG的顶芽与脊突之间的贴皮芽分布的上粒区中有稀疏粒；2-在DG的顶芽与脊突之间有连续分布的、数目更多的粒；3-在顶芽与脊突之间有呈连续图案的凸出粒，且在顶芽与脊突之间偶尔有汇合粒贴皮芽；4-有在顶芽与脊突之间形成汇合密集层带的凸出粒；和5-有延伸到内分子层中的粒的汇合密集层带。数据分析为了比较pilo-食盐水和pilo-试验化合物动物中SE的特征，使用了一种非配对学生t-试验。这两组中发作大鼠的数目之间的比较是借助于Chi平方试验进行的。对于神经无损害来说，各组之间的统计分析是使用ANOVA进行的，随后使用Statview软件进行多因子比较的Fisher试验(FisherRA，1946a，StatisticalMethodsforResearchWorkers(10thedition)Oliver&Boyd，Edinburgh；FisherRA，1946b，TheDesignofExperiments(4thedition)Oliver&Boyd，Edinburgh)。锂-毛果芸香碱癫痫持续状态的行为特征和EEG特征重量250-330g的Sprague-Dawley大鼠全部遭遇Li-pilo诱发的SE。SE的行为特征在pilo-食盐水组和pilo-试验化合物组中都是一样的。在毛果芸香碱注射后5min内，大鼠显现腹泻、立毛和胆碱能药刺激的其它信号。在随后15～20min期间，大鼠显示出头部摆动、抓、咀嚼和探察行为。复发性发作始于毛果芸香碱给药后15～20min左右。这些将头和两前肢肌阵挛的事件与后退和倒下相联系的发作在毛果芸香碱(给药)后约35～40min发展成SE，如以上所述(Turskietal.，1983，BehavBrainRes9315-335.)SE期间的EEG在SE的第一小时期间，在药理学处理不存在下，EEG的幅度渐进式增大，而频率减少。在毛果芸香碱注射后5min内，正常背景EEG活性代之以皮质中的低电压快速活性，而在海马中出现θ节律(5～7Hz)。到15～20min，高电压快速活性迭加在海马θ节律上，而且只在海马中记录到分离的高电压波峰，而皮质的活性实质上没有变化。到毛果芸香碱注射后35～40min，各动物显现出在海马和皮质中都存在的高电压快速活性的典型电图分析发作，这首先作为癫痫发作前活性的突然爆发发生，随后是连续的高电压波峰和多波峰系列，持续直至DZP和试验化合物给药为止。在SE的约3～4小时，海马EEG的特征是pilo-DZP组和pilo-10组的海马和皮质中都发生的周期性电图分析放电(PED，约1/秒)。EEG背景活性的幅度在pilo-TC60动物中是低的。到SE的6～7h，在DZP处理和TC10处理大鼠的皮质和海马中仍然存在波峰活性，而在TC30大鼠的海马中和TC60处理大鼠的2种结构中EEG的幅度减小并回到底线水平。TC10、TC30、和TC60组之间没有差异。到SE的9h，在试验化合物处理大鼠的海马中、偶尔在皮质中仍记录到分离的波峰。在2种结构中，背景活性在当时有非常低的幅度。SE诱发的死亡率在SE之后头48h期间，死亡率程度在pilo-DZP大鼠(23％，5/22)、pilo-TC10大鼠(26％，6/23)、和pilo-TC30大鼠(20％，5/25)中是类似的。在pilo-TC60大鼠中死亡率大大降低，其中它只达到4％(1/23)。差异是统计上显著的(p＜0.01)。静默期的EEG特征和自发性复发发作的发生静默期期间的EEG模式在pilo-DZP和pilo-TC10、30或60大鼠中是类似的。在SE之后24和48h，基线EEG的特征仍然是可以迭加大波形或波峰的PED发生。在试验化合物或载剂注射后1～8h之间，在pilo-DZP或pilo-TC10组中没有变化。在TC30和TC60大鼠中，PED的频率和幅度在注射后10min立即降低，并代之以TC30组的大幅度波峰和TC60组的低幅度波峰。到注射后4h，EEG在后2组中返回基线水平。到SE之后6天，EEG仍有比毛果芸香碱注射前低的波幅，而且在大多数组中、偶尔在pilo-DZP、pilo-TC10和pilo-TC30组大鼠中仍可记录到波峰。在pilo-TC60组中，大幅度波峰的频率比所有其它组的高。在试验化合物或载剂注射之后，EEG记录在pilo-DZP和pilo-TC10组中不受该注射影响。在pilo-TC30大鼠中，该注射诱发了海马和皮质这两部位的EEG慢波的发生，并诱发pilo-TC60大鼠中波峰频率降低。所有大鼠都暴露于DZP、TC10和TC30并进行研究，直至慢性阶段显现有类似潜伏期的自发性复发发作(SRS)。潜伏期是在pilo-DZP大鼠中为18.2±6.9日(n＝9)，在pilo-TC10大鼠中为15.4±5.1日(n＝7)，在pilo-TC30大鼠中为18.9±9.0日(n＝10)。在遭遇TC60的那组大鼠中，一小组大鼠的癫痫潜伏期类似于其它组的潜伏期，即17.6±8.7日(n＝7)，而另一组大鼠的癫痫潜伏期大大延迟至SE之后109～191日范围内(149.8±36.0日，n＝4)，而且一只大鼠在SE之后9个月延迟中没有癫痫发作。pilo-DZP、pilo-TC10、pilo-TC30和pilo-TMP60第一小组大鼠之间的SRS潜伏期差异实质上是不显著的。食盐水-食盐水大鼠(n＝5)无一显现SRS。为了计算毛果芸香碱暴露大鼠中自发性复发发作(SRS)的频率，测定了发作严重性和所区分的阶段III(面部肌肉和前肢的阵挛性发作)以及阶段IV-V发作(后退和倒下)。Pilo-DZP大鼠和pilo-试验化合物大鼠中每周阶段IIISRS的频率在这些组之间是可变的。在最初3周期间在pilo-DZP组和pilo-TC60组(有早期SRS发作)中该频率是低而恒定的，在第4周期间在pilo-DZP组中消失。阶段IIISRS的频率在pilo-TC10组中是较高的，其中它在第3周和第4周期间显著增大到pilo-DZP值以上。更严重阶段IV-VSRS的频率在第一周期间在大多数组中是最高的，例外的是稍后发作开始的pilo-TC30和TC60，其中SRS频率在TC30组中在整个4周内和在SRS稍后发生的pilo-TC60组中在最初2周内是恒定的，其中没有阶段IV-V发作，在这种情况下在第2周之后没有记录到发作。阶段IV-VSRS的频率在第一周期间，与pilo-DZP组(11.3SRS/周)相比，TC10组、TC30组和TC60组(有早期SRS发作)(2.3～6.1SRS/周)是显著降低的。在第2～4周期间，阶段IV-VSRS的频率与达到2～6次发作/周的值的第1周相比在所有组中都降低了，例外的是有早期SRS发作的pilo-TC60组，其中，与其SRS频率范围为3.3～5.8的pilo-DZP组相比，发作频率显著降低到0.6～0.9次发作/周。海马、丘脑和皮质中的细胞密度与食盐水-食盐水大鼠相比，在pilo-DZP大鼠中，海马CA1区域的细胞数目大幅减少(锥体细胞层中细胞损失70％)，而CAS区域受损害不太广泛(CA3a区域细胞损失54％，CA3b区域细胞损失31％)。在齿状回中，pilo-DZP大鼠经历门区广泛细胞损失(73％)，而粒细胞层没有显示可见的损害。类似的损害在下海马中观察到，但没有进行这一区域的细胞计数。在侧丘脑核中也记录到广泛损害(91％细胞损失)，而中背丘脑核是更中度受损害的(56％)。在梨形皮质中，就pilo-DZP大鼠而言，细胞损失全部出现在再也看不见的层III-IV中，并在层II中达到53％。在背entorhinal皮质中，层II和III-IV遭到轻微损害(分别为9％和15％)。腹entorhinal皮质的层II完好无损，而层III-IV有44％细胞损失。在pilo-试验化合物动物的海马中，与pilo-DZP大鼠相比，CA1锥体层的细胞损失减少了，其中细胞损失在pilo-DZP中达到75％，而在pilo-TC30或pilo-TC60动物中分别达到35％和16％。这种差异在这两个试验化合物剂量上是统计学上显著的。在CAS锥体层中，试验化合物在CA3a区域中没有提供任何保护，而60mg/kg试验化合物剂量在CA3b中是显著神经保护的。在齿状回中，门区细胞损失类似于pilo-试验化合物动物(69～72％)和pilo-DZP动物(73％)。在这两个丘脑核中，60mg/kg剂量也是保护性，能使侧核和中背核的神经元损害分别降低65％和42％。在脑皮质中，与只在最高剂量60mg/kg的DZP相比，用试验化合物的处理提供了神经元保护。在2个最低剂量即10和30mg/kg时，在梨形皮质的层III-IV中观察到的细胞总损失和组织瓦解在pilo-DZP大鼠和pilo-试验化合物大鼠中是相同的，而且无法进行其中任何一组的任何计数。在梨形皮质的层II和III-IV中，TC60处理使pilo-DZP大鼠中记录到的神经元损害分别降低41％和44％。在腹entorhinal皮质中，TC60给药在层III-IV中诱发了神经保护，而且与pilo-DZP大鼠相比达到31％。在entorhinal皮质中，与pilo-DZP大鼠相比，pilo-TC10大鼠在背entorhinal皮质的层III-IV(多损害28％)中和腹entorhinal皮质的层III-IV(多损害35％)中细胞损失稍有恶化。在试验化合物的其它剂量时，enlorhinal皮质的细胞损失类似于在pilo-DZP大鼠中记录到的细胞损失。海马中苔藓状纤维芽在pilo-DZP组和pilo-TPM组中显示出SRS的所有大鼠都显示齿状回内分子层Timm染色的类似强度(2～4分)。Timm染色既存在于该齿状回的上叶片上也存在于其下叶片上。上叶片中Timm分的平均值达到pilo-DZP大鼠(n＝9)中2.8±0.8，pilo-TC10大鼠(n＝7)中1.5±0.6，pilo-TC30大鼠(n＝10)中2.6±1.0，且pilo-TC60大鼠(n＝11)全组中1.5±0.7。当pilo-试验化合物60mg/kg组按照SRS的潜伏期细分时，有早期SRS发生的小组显示出Timm分为1.8±0.6(n＝6)，而SRS稍后发生或不存在的大鼠小组的Timm分为1.2±0.6(n＝5)。在pilo-DZP大鼠中记录到的值在统计学上显著不同于pilo-TC10组(p＝0.032)和有稍后发作或无发作的pilo-TC60小组(p＝0.016)的值。讨论和结论本研究的结果显示，在SE发作之后1h开始用试验化合物进行的7天处理能保护一些脑区域免于神经元损害，例如CA1和CA3b区域的锥体细胞层、中背丘脑、梨形皮质的层II和IIMV以及腹entorhinal皮质的层III-IV，但只在该试验化合物的最高剂量即60mg/kg时才发生。该试验化合物的后一个剂量也能延缓SRS的发生，至少在比其它动物组长约9倍的平均癫痫发作延时的动物小组中如此，而且一只动物在SE之后9个月延时中没有癫痫发作。这些结果显示，有抗发作性能-大多数市售抗癫痫药物的经典性能-的一种化合物也能延缓癫痫发生，即是抗癫痫发生药。本研究的数据也显示，该试验化合物处理无论所使用的剂量有多大都能减轻癫痫的严重性，因为它减少阶段IV-V发作的次数，主要在发作发生的第一周期间和在用60mg/kg试验化合物处理观察的整个4周期间。进而，在TC10组，转向不太严重的阶段III发作的发生次数增加-其次数比pilo-DZP组的多。实施例2该研究的这个扩展部分的目的是对以上实施例1所报告的研究继续探讨同一试验化合物(TC)在锂-毛果芸香碱(Li-Pilo)暂时脑叶癫痫模型中的潜在神经保护和抗致癫痫性能。在第一研究中，所显示的是，TC能保护海马的CA1和CA3区域、梨形皮质和腹entorhinal皮质免于Li-Pilo癫痫持续状态(SE)所诱发的神经元损害。这些神经保护性能大多数发生于所研究的最高剂量60mg/kg，而且该处理能延缓该大鼠的30％(11只中的4只)中自发性发作的发生。在本实施例中，研究了用较高剂量TC处理对神元损害和致癫痫作用的后果。锂-毛果芸香碱暂时脑癫痫模型用与锂缔合的毛果芸香碱(Li-Pilo)在大鼠中诱发的癫痫模型再现了人体暂时脑叶癫痫的大多数临床特征和神经生理学特征(见TurskiL，lkonomidouC，TurskiWA，BortolottoZA，CavalheiroEA(1989)ReviewCholinergicmechanismsandepileptogenesis.Theseizuresinducedbypilocarpineanovelexperimentalmodelofintractableepilepsy，Synapse3154-171；CavalheiroEA(1995)Thepilocarpinemodelofepilepsy.ltalJNeurolSci1633-37)。在成年大鼠中，毛果芸香碱的全身性给药导致可持续可长达24h的SE。在最初几日期间死亡率达到30～50％。在存活大鼠中，神经元损害主要发生在海马构造、梨形皮质和entorhinal皮质、丘脑、扁桃样复合体、新皮质和黑质内。这个急性发作期之后是一个平均持续期为14～25天的“静默”无发作阶段，此后所有动物都显示出通常频率为2～5次/周的自发生复发惊厥发作(见TurskiL，lkonomidouC，TurskiWA，BortolottoZA，CavalheiroEA(1989)ReviewCholinergicmechanismsandepileptogenesis，TheseizuresinducedbypilocarpineanovelexperimentalmodelofintractableepilepsySynapse3154-171；CavalheiroEA(1995)Thepilocarpinemodelofepilepsy.ltalJNeurolSci1633-37；DubéC，BoyetS，MarescauxC，NehligA(2001)Relationshipbetweenneuronallossandinterictalglucosemetabolismduringthechronicphaseofthelithium-pilocarpinemodelofepilepsyintheimmatureandadultrat.ExpNeurol167227-241))。当前抗癫痫药(AED’s)不能防止致癫痫作用，而且对复发发作只是瞬间有效的。在我们前面的研究中，我们研究了在单一疗法中给出的增加试验化合物(TC)剂量的潜在神经保护和抗致癫痫效果，并与大多数为防止高死亡率而给出的我们的标准地西泮(DZP)治疗。这些数据显示，在SE发作后1h开始的10、30或60mg/kgTC的7日治疗能保护一些脑区免于神经元损害。这种效果在CA1和CA3b区域的锥体细胞层、中背丘脑、梨形皮质的层II和III-IV、和腹entorhinal皮质的层III-IV中是统计学上显著的，但只在TC的最高剂量即60mg/kg时如此。进而，显然，TC的后一个剂量也是能延缓自发性复发发作(SRS)的发生的唯一剂量，至少在比其它动物组长约9倍的平均延缓癫痫发作的动物小组中如此，而且一只动物在SE之后9个月的延缓中没有癫痫发作。在本研究中，试验化合物(TC)不同剂量即30、60、90和120mg/kg(TC30、TC60、TC90和TC120)的效果是使用与以上研究中相同的设计试验的。该处理始于SE发作后1小时，而且该动物是以该药物的相同剂量的第二次注射处理的。SE的这种早期处理之后是一个6日TC处理。本报告涉及TC的4个不同剂量在SE之后14日对以海马、副海马皮质、丘脑和扁桃体评价的神元损害的影响和对自发性癫痫发作的潜伏期和频率的影响。方法动物将Janvier繁育中心(法国LeGenest-St-Isle)提供的成年雄性Spragud-Dawley大鼠在20～22℃受控、不拥挤的标准条件(亮/暗周期，7.00a.m.-7.00p.m.亮)下圈养，食物和水可随意获取。所有动物实验都按照1986年11月24日的欧洲共同体理事会指令(86/609/EEC)和法国农业部(LicenseN°67-97)的规定进行。癫痫持续状态诱发、试验化合物(TC)处理和SRS发生所有大鼠都接受氯化锂(3meq/kg，腹膜内，Sigma公司，美国密苏里州圣路易斯)并在20h后所有动物也都接受溴化甲基东茛菪碱(1mg/kg，s.c.，Sigma公司)，后者是为限制惊厥的周边效应而给药的。SE是通过在甲基东茛菪碱之后30min注射盐酸毛果芸香碱(25mg/kg，s.c.，Sigma公司)诱发的。增大TC剂量的影响是用5组大鼠研究的。这些动物在SE发作后1h要么接受2.5mg/kgDZP(i.m.)要么接受30、60、90或120mg/kgTC(TC30、TC60、TC90和TC120)(腹膜内)。对照组接受载剂而不是毛果芸香碱和TC。然后，SE存活大鼠在第一次TC注射后约10h第二次给DZP组经腹膜内注射1.25mg/kgDZP或像在早上那样第二次经腹膜内注射相同剂量TC，并在随后6日内保持每日2次TC处理(s.c.)而DZP大鼠则接受载剂注射。DZP和4TC剂量对致癫痫作用的影响是通过这些动物每日一次每日10h的视频记录来研究的。视频记录进行了4周，在此期间注意到第一次发作的发生以及在这整段时间内发作的总次数。然后让动物脱离视频记录系统并在我们的动物设施中保持另外4周，然后8周癫痫的总时期之后将其宰杀。没有显示出发作的大鼠在视频记录5个月后宰杀。细胞密度的量化细胞密度的量化是在SE之后2次进行的第一组是在SE之后14天研究的，而且由7只DZP大鼠、8只TC30大鼠、11只TC60大鼠、10只TC90大鼠、8只TCl20大鼠、和8只未遭遇SE的对照大鼠组成。用于SRS潜伏期研究的第二组是要么在第一次SRS之后8周要么在该延缓期中没有能看到SRS的5个月时宰杀的，而且由14只DZP大鼠、8只TC30大鼠、10只TC60大鼠、11只TC90大鼠、9只TC120大鼠组成。此时，在用于致癫痫作用研究的第二组动物中神经元计数仍在进行中，长期计数和关于该研究的这一部分的数据未包括在本报告中。为神经元计数，动物用1.8g/kg戊巴比妥(Dolethal，Vétoquinol，Lure，France)深度麻醉。然后将脑取出并冷冻。在恒冷下切割系列20μm切片，风干若干日，然后用硫堇染色。细胞密度的量化是按照大鼠脑图谱的立体定位坐标在脑冠部分以10×10方格1cm2显微镜格栅进行的(PaxinosG，WatsonC(1986)TheRatBraininStereotaxicCoordinates，2nded.AcademicPress，SanDiego)。将计数格栅置于有兴趣的脑结构的充分界定区域上，计数是以为每个单一脑结构定义的200倍或400倍显微镜放大进行的。细胞计数由一位不知道动物处理的单一观察员对每个区域的三个相邻切片的每一侧进行2次。将每种脑结构中12个计数领域得到的细胞数的平均值。利用这种程度使导致细胞数估计过高的双计数可以产生的潜在误差降到最低限度。触及该格栅下边和右边的神经元没有计数。计数只包括有大于10μm的细胞体的神经元。细胞体小的细胞视为神经胶质细胞且未予以计数。数据分析对于神经元损害和致癫痫作用来说，各组之间的统计分析是借助于变异率单向分析随后使用statistica软件进行post-hocDunnett或Fisher试验进行的。结果锂-毛果芸香碱癫痫持续状态的行为特征总数143只Sprague-Dawley大鼠(各重250～330g)遭遇锂-毛果芸香碱(Li-pilo)诱发的SE。在这个数目中，10只没有显现SE，而133只大鼠显现充分特征的Li-piloSE。SE的行为特征在Li-pilo-DZP组和Li-pilo-TC组中都是相同的。在毛果芸香碱注射后5min内，大鼠显现出腹泻、立毛和胆碱能药刺激的其它征兆。在随后15～20min期间，大鼠显示出头摆动、抓、咀嚼、和探索行为。复发发作始于毛果芸香碱给药后15～20min左右。这些将头和两侧前肢肌阵挛的事件与后退和倒下相联系的发作，如以上所述，在毛果芸香碱之后约35～40min发展成SE(TurskiL，IkonomidouC，TurskiWA，BortolottoZA，CavalheiroEA(1989)ReviewCholinergicmechanismsandepileptogenesis.Theseizuresinducedbypilocarpineanovelexperimentalmodelofintractableepilepsy.Synapse3154-171；DubéC，BoyetS，MarescauxC，NehligA(2001)Relationshipbetweenneuronallossandinterictalglucosemetabolismduringthechronicphaseofthelithium-pilocarpinemodelofepilepsyintheimmatureandadultrat.ExpNeurol167227-241；AndréV，RigoulotMA，KoningE，FerrandonA，NehligA(2003)Long-termpregabalintreatmentprotectsbasalcorticesanddelaystheoccurrenceofspontaneousseizuresinthelithium-pilocarpinemodelintherat.Epilepsia44893-903)。没有遭遇SE并接受锂和食盐水的对照组由20只大鼠组成。在SE之后14日用于细胞计数的57只动物这一组中，总数13只大鼠在SE之后头48h内死亡。死亡率程度因处理而异DZP大鼠36％(4/11)，TC30大鼠33％(4/12)，TC60大鼠8％(1/12)，TC90大鼠0％(0/10)，TC120大鼠33％(4/12)死亡。在DZP组中，4只大鼠在SE之后头24h死亡。在TC30大鼠这一组中，一只大鼠在SE当日死亡，一只大鼠到SE之后24h死亡，而两只大鼠到48h死亡。在TC60大鼠这一组中，一只大鼠在SE之后48h死亡。在TC120大鼠这一组中，2只大鼠到SE之后24h死亡，2只大鼠到48h死亡。在用于SRS潜伏期研究和稍后细胞计数的55只动物这一组中，SE之后头48h内死亡率程度如下DZP大鼠7％(1/14)，TC30大鼠27％(3/11)，TC60大鼠0％(0/10)，TC90大鼠0％(0/11)，且TC120大鼠0％(0/9)死亡。在DZP大鼠这一组中，一只大鼠在SE之后头24h期间死亡。在TC30这一组中，2只大鼠到SE之后24h、1只大鼠到48h死亡。早期阶段(SE之后14日)海马和皮质中的细胞密度与对照组相比，在DZP大鼠中，海马CA1区域的神经元数目大大减少(锥体细胞层中降低85％)，而CA3区域受损害不太广泛(损失40％)(表1和图1)。在齿状回中，DZP大鼠经历了广泛的门区神经元损失(65％)，而粒细胞层没有显示出明显损害。相同的损害分布在腹海马中观察到，但没有进行这个区域的细胞计数。在丘脑中，在中背中央部和侧部、背侧中背部和中央中部核的神经元损失是轻度的(分别降低18％、24％、40％和34％)，中背核的神经元损失更显著(49％)，而背侧核的腹侧部分的神经元损失重大(90％)(表1和图2)。在扁桃体中，神经元损失在中腹后核中是轻度的(38％)，在背侧和中背的前核中更显著(分别降低73和53％)。在中央核中没有神经元损失(表1和图3)。与对照组食盐水处理的大鼠相比，DZP大鼠的梨形皮质中，神经元损失几乎全部在再也不能真正看到的层III中(94％)，而在背层II和腹层II中分别达到66％和89％。在背entorhinal皮质中，层II和III-IV受到轻微损害(分别为18％和24％)，而在腹层II和III/IV中，损害分别达到22％和74％(以下表1和图4)。表1增大试验化合物(TC)剂量对遭遇到li-piloSE的大鼠的海马、丘脑、扁桃体和脑皮质中神经元细胞体数目的影响*p＜0.05，**p＜0.01，pilo-TC大鼠与对照li-食盐水大鼠之间统计学上显著差异°p＜0.05，°°p＜0.01，pilo-TC大鼠与pilo-DZP大鼠之间统计学上显著差异在TC处理的动物的海马中，与DZP大鼠相比，CA1锥体细胞层的细胞损失显著减少。这种减少在TC30、60或90大鼠中是显著(36～47％细胞损失)，而在TC120组中是突出的(12％细胞损失)。在所有TC剂量上差异都是统计学上显著的(表1和图1)。在CA3锥体层中，只在120mg/kg剂量时才有试验化合物诱发的轻微神经保护的趋势，但与DZP组的差异并不显著。在齿状回中，门区细胞损失在DZP组和TC30、60和90组中是类似的(61～66％降低)，而且与DZP动物(66％降低)相比，在TC120组(53％神经元损失)中有减少损害的轻微趋势。这些差异无一是统计学上显著的。在丘脑中，DZP大鼠和TC30大鼠与TC60大鼠的神经元损失是类似的。TC在60mg/kg剂量时在背侧中背核以及在2个最高剂量即90和120mg/kg时在所有丘脑核中是显著保护性的，尽管在TC90大鼠中在中背中央和中央中核中差异没有达到显著。其范围为4～19％，而且神经元数目与对照组动物相比不再是显著差异的，例外的是背侧中背核(表1和图2)。在扁桃体中，TC为30mg/kg剂量时在背侧核中且为60mg/kg剂量时也在中背前核中有显著保护作用。在最高剂量时，TC的神经保护作用大，神经元数目不再显著区别于对照水平，而且在所有扁桃体核中都达到该对照水平的86～99％(表1和图3)。在脑皮质中，与DZP处理相比，TC处理在30mg/kg剂量时没有显著保护任何皮质区域。在60mg/kg时，TC只在背梨形皮质的层II显著减少神经元损失(与DZP组的66％相比，降低25％)。在90和120mg/kg时，与DZP处理相比，TC显著保护了梨形皮质的所有3个区域，而在TC的最高剂量即120mg/kg时，神经元密度达到了对照水平的78～96％，即使在梨形皮质背层II和层III中也如此，而在DZP组中这些部位的神经元种群几乎完全涸竭。在背和腹entorhinal皮质的所有层中，TC的2个最低剂即30和60mg/kg没有提供任何神经保护。TC的90mg/kg剂量显著保护了腹entorhinal皮质的层II和III/IV(背部的层II和III/IV中以及腹部的层中仍有4％和17％损害，相比之下，在DZP组中这些部位仍有19％和73％损害)。在TC的最高剂量即120mg/kg时，entorhinal皮质的所有部分即背部和腹部这两部分都受到保护，而且这些区域的神经元数目不再显著区别于对照组中的水平(85～94％神经元存活，相比之下在DZP组中27～81％神经元存在)。复发发作的潜伏期和频率自发性发作的潜伏期在DZP组(14只大鼠)中达到了15.5±2.3日的平均值，而在TC30组(8只大鼠)中是类似的(11.6±2.5日)。在较高的TC浓度时，可以将动物细分成短潜伏期和长潜伏期的小组。短潜伏期视为SE之后不到40日的任何持续时间。一些大鼠显示出与DZP组和TC组中记录到的相似的第一次自发性发作的潜伏期，但显示出这种短潜伏期值的大鼠数目随TC浓度的增大而逐渐减少。因此，在30mg/kg时，大鼠的70％(7/10)有短发作潜伏期，而在90和120mg/kg时，这个百分率分别达到36％(4/11)和11％(1/9)(以下表2和图5)。表2增大TC剂量对自发性发作潜伏期的影响**p＜0.01，*p＜0.05，与pilo-DZP组相比有统计学上显著差异°°p＜0.01，°p＜0.05，与短潜伏期组相比有统计学上显著差异在TC60、90和120组中，有长潜伏期的大鼠的平均值是类似的且范围为52～85日。最后，在2个最高TC剂量时，我们能识别在SE之后150日的持续时间内不显现任何发作的大鼠的百分率。在这2个TC剂量时无癫痫大鼠的百分率达到45％。自发性发作的频率在有记录的4周内是类似的。它显示在DZP组和TC30组中较高的趋势，而它在TC60、90和120组中较低(图6)。这些差异在每一个单一周频率的水平上没有达到统计学显著性，但对于在这4周内的总发作次数或平均次数来说达到了显著性。发作次数也按照第一次自发性发作的潜伏期的持续时间作图。有短潜伏期的动物，与有长潜伏期的大鼠相比，显示出在有记录的4周内多显示2～3次发作的趋势。统计学分析无法进行，因为ANOVA没有显示出任何显著性，很可能是由于在TC120动物的短潜伏期小组中只有1只动物的缘故(图7)。然而，当所有潜伏期值对发作次数作图时，就有显著的逆相关，导致一条相关系数为-0.4的直线(图8)。为了敲定这个分析，还将再进行2项测定。第一项是对有视频记录并在第一次自发性发作之后跟踪2个月或在5个月时宰杀的动物进行细胞计数，以研究脑损害的程度和部位与自发性发作的发生和/或潜伏期之间的潜在相关性。第二项是要在一组大鼠中进行发作发生的一年跟踪，以研究我们在5个月时声称为“无癫痫”的动物是否会仍无发作。本研究的结果显示，在Li-pilo诱发的SE发作之后1h开始用TC的处理在海马的CA1锥体细胞层以及在腹和背梨形皮质与entorhinal皮质的所有层中有神经保护性能。TC也保护丘脑和扁桃体核。然而，除在CA1、一个丘脑核和一个扁桃体核中外，TC在30mg/kg剂量时是没有保护性的。在60mg/kg剂量时，背梨形皮质的层II和第二扁桃体核也受到保护。在90和120mg/kg时，该药物保护除海马CA3和齿状回门区外的大多数所研究脑区域。后2种结构加上背侧腹背丘脑核是在120mg/kgTC剂量时神经元数目仍然显著区别于对照组的唯一区域。从这些数据，TC的极端强有力神经保护性能显而易见。该分子看来能防止属于Li-pilo诱发的肢性癫痫的回路的大多数区域即海马、丘脑、扁桃体和副海马皮质中的神经元死亡。这些是我们在Li-pilo处理的大鼠的致癫痫作用进程中检测到MRI信号的所有区域(RochC，LeroyC，NehligA，NamerIJ(2002a)Contributionofmagneticresonanceimagingtothestudyofthelithium-pilocarpinemodeloftemporallobeepilepsyinadultrats.Epilepsia43325-335)。没有有效地受到TC保护的仅有2个区域是CA3锥体细胞层和齿状回的门区。后一个区域遭遇迅速而巨大的细胞损害(AndrV，MarescauxC，NehligA，FritschyJM(2001)AlterationsofthehippocampalGABAergicsystemcontributetothedevelopmentofspontaneousrecurrentseizuresinthelithium-pilocarpinemodeloftemporallobeepilepsy.Hippocampus11452-468.；RochC，LeroyC，NehligA，NamerlJ(2002a)Contributionofmagneticresonanceimagingtothestudyofthelithium-pilocarpinemodeloftemporallobeepilepsyinadultrats.Epilepsia43325-335)且我们在以上研究中所使用的神经保护无一能保护这种结构。我们也已经根据早期研究确认这种结构为Li-pilo模型中癫痫发作的启动和维持的一个关键区域(DubéC，MarescauxC，NehligA(2000)Ametabolicandneuropathologicalapproachtotheunderstandingofplastic.changesoccurringintheimmatureandadultratbrainduringlithium-pilocarpineinducedepileptogenesis.Epilepsia41(Suppl6)S36-S43)显然，本数据证实，致癫痫作用可以预防，尽管损害在这个区域仍然十分显著。对有视频记录的那一组动物的长期细胞计数将能显示这个区域中损害的程度对这一模型中的致癫痫作用是否至关重要。该处理在30mg/kg剂量时没有影响第一次自发性发作的潜伏期。在3个更高剂量时，某一百分率的动物像DZP或TC30大鼠那样快地显现癫痫，但这一小组的相对重要性与所使用的TC剂成反比。规模恒定的另一个小组(每组2～4只动物)在4～6倍长潜伏期之后显现癫痫，而在该药物的2个最高剂量，4～5只大鼠在5个月-即短潜伏期持续时间的约10倍而长潜伏期持续时间的2～3倍-之后尚未发生癫痫。癫痫发生的这种延缓可能与这些动物基底皮质中受保护的神经元数目相关。这个假设依据的事实是，我们在SE之后14日进行短期神经元计数的动物的基底皮质中注意到神经保护程度的某种异质性。然而，这一时刻，我们并没有进行用于致癫痫作用研究的动物中的神经元计数，因此，无法得出关于基底皮质中存活的神经元数目与致癫痫作用速率或甚至发生之间的潜在关系的结论。本研究中得到的数据与以前从这一组的研究相一致，该研究报告，试验化合物(TC)的60mg/kg剂量保护海马和基底皮质免于神经元损害和延缓了复发发作的发生(见实施例1)。它们证实，基底皮质的保护可能是锂-毛果芸香碱癫痫模型中诱发一种疾病修饰效应的一个关键因素。该基底皮质作为癫痫过程的引发剂的关键作用是以前由我们小组用锂-毛果芸香碱模型证实的(AndréV，RigoulotMA，KoningE，FerrandonA，NehligA(2003)Long-termpregabalintreatmentprotectsbasalcorticesanddelaystheoccurrenceofspontaneousseizuresinthelithium-pilocarpinemodelintherat.Epilepsia44893-903；RochC，LeroyC，NehligA，NamerIJ(2002a)ContributionofmagneticresonanceimagingtothestudyoftheIithium-pilocarpinemodeloftemporallobeepilepsyinadultrats.Epilepsia43325-335；RochC，LeroyC，NehligA，NamerIJ(2002b)PredictivevalueofcorticalinjuryforthedevelopmentoftemporallobeepliepsyinP21-day-oldratsaMRIapproachusingthelithium-pilocarpinemodel.Epliepsia431129-1136。实施例2的参考文献AndrV，MarescauxC，NehligA，FritschyJM(2001)AlterationsofthehippocampalGABAergicsystemcontributetothedevelopmentofspontaneousrecurrentseizuresinthelithium-pilocarpinemodeloftemporallobeepilepsy.Hippocampus11452-468.■AndréV，RigoulotMA，KoningE，FerrandonA，NehligA(2003)Long-termpregabalintreatmentprotectsbasalcorticesanddelaystheoccurrenceofspontaneousseizuresinthelithium-pilocarpinemodelintherat.Epilepsia44893-903.■CavalheiroEA(1995)Thepilocarpinemodelofepilepsy.ItalJNeurolSci1633-37.■DubéC，MarescauxC，NehligA(2000)Ametabolicandneuropathologicalapproachtotheunderstandingofplasticchangesoccurringintheimmatureandadultratbrainduringlithium-pilocarpineinducedepileptogenesis.Epilepsia41(Suppl6)S36-S43.■DubéC，BoyetS，MarescauxC，NehligA(2001)Relationshipbetweenneuronallossandinterictalglucosemetabolismduringthechronicphaseofthelithium-pilocarpinemodelofepilepsyintheimmatureandadultrat.ExpNeurol167227-241.■PaxinosG，WatsonC(1986)TheRatBraininStereotaxicCoordinates，2nded.AcademicPress，SanDiego.■RochC，LeroyC，NehligA，NamerIJ(2002a)Contributionofmagneticresonanceimagingtothestudyofthelithium-pilocarpinemodeloftemporallobeepilepsyinadultrats.Epilepsia43325-335.■RochC，LeroyC，NehligA，NamerIJ(2002b)PredictivevalueofcorticalinjuryforthedevelopmentoftemporallobeepilepsyinP21-day-oldratsaMRIapproachusingthelithium-pilocarpinemodel.Epilepsia431129-1136.■TurskiL，lkonomidouC，TurskiWA，BortolottoZA，CavalheiroEA(1989)ReviewCholinergicmechanismsandepileptogenesis.Theseizuresinducedbypilocarpineanovelexperimentalmodelofintractableepilepsy.Synapse3154-171.实施例3PC12细胞血清提取模型血清提取是一种导致所培养的细胞系以各种不同组织源的初级细胞包括神经细胞中细胞死亡的细胞毒性环境挑战。具体地说，嗜铬细胞瘤(PC)12细胞已经广泛地用来作为种类繁多的神经变性和细胞死亡相关病症的离体神经元细胞模型(Muriel，etal，Mitochondrialfreecalciumlevels(Rhod-2fluorescence)andultrastructuralalterationsinneuronallydifferentiatedPC12cellsduringceramide-dependentcelldeath，J.Comp.Neurol.，2000，426(2)，297-315；Dermitzaki，etal，Opioidstransientlypreventactivationofapoptoticmechanismsfollowingshortperiodsofserumwithdrawal，J.Neurochem.，2000，74(3)，960-969；Carlile，etal，Reducedapoptosisafternervegrowthfactorandserumwithdrawalconversionoftetramericglyceraldehyde-3-phosphatedehydrogenasetoadimer，MolPharmacol.，2000，57(1)，2-12)。PC12细胞是用补充了10％热灭活马血清和5％胎牛血清(FBS)的无菌培养基(RPMI1640)培养的。该培养基也含有青霉素-链霉素-新霉素抗生素(分别为50μg，50μg，100μg)。培养基每隔一天更换一次，让细胞经过对数斯近合生。对照细胞是用无任何处理的常规培养基培养的。式7或式8的一种对映体(10μM)在该培养基中充分混合，然后作用于该细胞上。对于2日试验来说，式7或式8的对映体(10μM)只在血清提取时作用于该细胞一次。对于7日试验来说，式7或式8的对映体(10μM)是在血清提取时和此后每48h作用于该细胞的，此时细胞换成无新血清新鲜培养基。在血清提取组中，细胞是用无附加式7或式8对映体的无血清培养基培养的。细胞存活率是在血清提取后2日或7日用3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺基苯基)-2H-四唑内盐(MTS)试验确定的。实验结束时，细胞用新鲜培养基洗涤、用MTS溶液在一台有5％CO2、加湿的37℃恒温箱中培养1.5h。该培养期之后，该细胞立即用Softmax程序(MolecularDevices)分析。MTS试验是一种用于测定某一给定实验集合中活细胞数目的量热方法。该试验是以四唑盐MTS由细胞转化成一种可溶于组织培养基的甲腊为依据的，而且是在96孔试验板上在490nm直接测定的。吸光度正比于培养物中活细胞的数目。在对照细胞中读出的任意吸光度表达为100％存活率。表3列出了证实在PC12细胞血清提取模型中经口给药式7和式8的对映体对细胞存活率的影响的数据。表3(％细胞存活率)实施例4瞬间脑局部缺血大鼠模型式7的对映体(试验化合物)用瞬间脑局部缺血中脑动脉闭塞(MCAO)大鼠模型(如NagasawaH.andKogureK.，Stroke，1989，20，1037；和，ZeaLongaE.，WeinsteinP.R.，CarlsonS.andCumminsR.，Stroke，1989，20，84中所述)、采用雄性Wistar大鼠以10和100mg/kg(i.v.)进行研究。使用MK801(马来酸地佐环平；CAS登录号77086-22-7，一种市售神经保护药化合物)作为阳性对照(3mg/kg，i.p.)。大鼠(n＝12)随机分配到4个实验组之一，并进行麻醉。血液从内颈动脉、前脑动脉和后脑动脉向中脑动脉的流动用这种程序阻断。阻断后1小时，动物在为期1小时内用载剂处理(在为期1小时内经i.v.给药)，对照处理(在该为期1小时的一开始就作为单一i.p.剂量给药)和式7的对映体的2个剂量处理(在该为期1小时内经i.v.给药)。阻断后2小时，进行再灌注。将这些动物宰杀，制备每个大脑的20mm厚冠状切片。从前皮质到枕骨皮质的每40个切片之一(即每800nM)用来量化脑损害程度。载玻片是使用以甲苯基紫(按照Nissl程序)染色的切片制备的，并在光学显微镜下考察。各大鼠的冠状切片中区域性局部缺血表面面积是按照有形态学变化的细胞的存在确定的。测定神经元损伤或栓塞的面积，然后把这些面积加起来。计算每只动物的皮质和纹状体体积(总局部缺血表面面积乘以0.8mm(厚度))。MCAO模型分析随机分配给这4个实验组的每只动物的平均体积(±S.E.M.)是使用单向ANOVA(单向ANOVA是一种能比较3个或更多个不匹配组的统计学方法)随后进行Dunnett’st-试验(这两种方法都收入Statview512+软件(BarinPower公司，Calabasas，Calif.，USA)中)比较的。如以下表4中所示，当p值与载剂组相比＜0.05时认为结果是统计学上显著的(1p＜0.01；2p＜0.05)。表4实施例5以下实施例中所指的试验化合物是式7的化合物，而且是与以上的其它实施例1和2中相同的化合物。本研究的目的是要评价健康成年人中以临床相关剂量单一和重复经口给药之后试验化合物(TC)的药物动力学(PK)。方法在≥18岁而≤45岁的健康人中进行2项单一中心、安慰剂对照、双盲、递增剂量研究。在研究1中(N＝70)，将对象随机分配给试验化合物(TC)单一剂量或安慰剂组。递增剂量是作为100、250、400、750、1000、1250和1500mg接受的。PK参数是从给药后可长达3日收集的血浆样品和尿样估计的。研究2(N＝53)评估了4个剂量组(100、250、500、或750mg)中试验化合物(TC)的重复剂量的PK。每一组内都有12位对象分配给为期一周用药物或安慰剂的q12h处理，并在14E洗出期之后互换。PK参数是从第1日和第7日的血浆样品和尿样评估的。结果单一剂量试验化合物(TC)在经口给药后迅速吸收。Cmax和AUC0-∞在在100～1500mg范围内与剂量成比例增大。平均tmax范围为1.3～2.7h。平均t1/2(11.5～13.9h)、CL/F(2.87～3.67L/h)和Vd/F(52.1～66.3L/h)值对所有7个剂量组来说是类似的。重复剂量试验化合物(TC)的血浆浓度在3～4日后达到稳态，如同从其单一剂量半衰期所预测的。平均tmax在给药后1.3～1.8h出现。平均t1/2(11.9～12.8h)和CL/F(3.40～3.78L/h)值在稳态时是与研究1中第1日单一剂量给药后的PK参数可比的。稳态Cmax和AUC0-12与该剂量成比例增大。如所预期的，有轻微程度的试验化合物(TC)积累；Cmax和AUC0-12是第7日比第1日高约2倍(p＜0.001)。试验化合物(TC)的平均CLR估计值是平均经口廓清率的＜5％，表明非肾廓清作为试验化合物(TC)消除的主要机理。结论试验化合物(TC)显示出单一剂量(100～1500mg)和重复剂量(100～750mg每日2次)后线性PK。它是迅速吸收的，且平均消除半衰期为11.5～13.9h，这使得能每日2次给药。q12h给药之后，试验化合物(TC)积累2倍而且主要通过非肾途径廓清。引用的参考文献本文中引用的所有参考文献均以其全文列为本文参考文献，并在这样的程度上用于所有目的，犹如具体地和个别地指出每份单独出版物或专利或专利申请要为所有目的而全文列为本文参考文献一样。本文中参考文献的讨论意图只在概述其作者所做的主张而不是对任何参考文献构成先有技术的认可。申请者们有权挑战所引用参考文献的准确性和恰当性。本发明不受本申请中所述具体实施方案限制，这些实施方案意在作为本发明个别方面的单独说明。只要不背离本发明的精神和范围，就可以做很多修饰和改变，如同对于业内技术人员显而易见的。除本文中列举的那些外，本发明范围内功能上等效的方法和装置，业内技术人员将从以上描述和附图显而易见。这样的修饰和改变意图落入所附权利要求书的范围。本发明只受所附各项权利要求限制，连同要赋予其这样的权利要求的全范围等效物一起。权利要求1.一种提供神经保护的方法，包含对需要用神经保护药物(NPD)治疗的患者给药治疗有效量的、选自式(I)和式(II)组成的一组的一种化合物或其医药上可接受盐或酯式中苯基是在X上有1～5个选自氟、氯、溴和碘组成的一组的卤素原子取代的；且R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地选自氢和C1-C4烷基组成的一组，其中C1-C4烷基任选地有苯基取代(其中苯基任选地有独立地选自卤素、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、氨基、硝基和氰基组成的一组的取代基取代)。2.权利要求1的方法，其中X是氯。3.权利要求1的方法，其中X是在苯基环的邻位上取代的。4.权利要求1的方法，其中R1、R2、R3、R4、R5和R6选自氢。5.一种提供神经保护的方法，包含对需要用神经保护药物(NPD)治疗的患者给药治疗有效量的、选自式(I)和式(II)组成的一组的对映体或其医药上可接受盐或酯或对映体混合物，其中一种选自式(I)和式(II)组成的一组的对映体占主导式中苯基是在X上有1～5个选自氟、氯、溴和碘组成的一组的卤素原子取代的；且R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地选自氢和C1-C4烷基组成的一组，其中C1-C4烷基任选地有苯基取代(其中苯基任选地有独立地选自卤素、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、氨基、硝基和氰基组成的一组的取代基取代)。6.权利要求5的方法，其中X是氯。7.权利要求5的方法，其中X是在苯基环的邻位上取代的。8.权利要求5的方法，其中R1、R2、R3、R4、R5和R6选自氢。9.权利要求5的方法，其中一种选自式(I)和式(II)组成的一组的对映体在约90％或更大的程度上占主导。10.权利要求5的方法，其中一种选自式(I)和式(II)组成的一组的对映体在约98％或更大的程度上占主导。11.权利要求5的方法，其中选自式(I)和式(II)组成的一组的对映体是一种选自式(Ia)和式(IIa)组成的一组的对映体式中苯基是在X上有1～5个选自氟、氯、溴和碘组成的一组的卤素原子取代的；且R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地选自氢和C1-C4烷基组成的一组，其中C1-C4烷基任选地有苯基取代(其中苯基任选地有独立地选自卤素、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、氨基、硝基和氰基组成的一组的取代基取代)。12.权利要求11的方法，其中X是氯。13.权利要求11的方法，其中X是在苯基环的邻位上取代的。14.权利要求11的方法，其中R1、R2、R3、R4、R5和R6选自氢。15.权利要求11的方法，其中选自式(Ia)和式(IIa)组成的一组的一种对映体在约90％或更大的程度上占主导。16.权利要求11的方法，其中选自式(Ia)和式(IIa)组成的一组的一种对映体在约98％或更大的程度上占主导。17.权利要求5的方法，其中选自式(I)和式(II)组成的一组的对映体是一种选自式(Ib)和式(IIb)组成的一组的对映体18.权利要求17的方法，其中选自式(Ib)和式(IIb)组成的一组的一种对映体在约90％或更大的程度上占主导。19.权利要求17的方法，其中选自式(Ib)和式(IIb)组成的一组的一种对映体在约98％或更大的程度上占主导。20.按照权利要求1或5的方法，其中给需要神经保护的患者造成的神经元损害的可能原因选自下列组成的一组创伤性脑损伤(TBI)，对CNS或PNS的任何种类的损伤或创伤包括钝性和穿透性头部创伤；CNS感染；缺氧；中风(CVAs)；对CNS有影响的自免疫疾病例如狼疮；出生损伤例如产期窒息；心动停止；治疗性或诊断性血管外科程序例如颈动脉动脉内膜切除术或脑血管造影术；脊髓创伤；高血压；栓子、过多或过少灌注对CNS的损伤；代谢失调，例如糖尿病、缺氧症；对已知能对NPD做出反应的异常的已知遗传素因；CNS的空间占有性损伤；脑肿瘤，例如成胶质细胞瘤；CNS中或周围渗血或出血，例如大脑内出血或硬膜下血肿；脑水肿；热性惊厥；高温；物质滥用、创伤、中风、局部缺血、亨廷顿病、阿尔茨海默病、帕金森病、蛋白病毒病变种克罗伊茨费尔特-雅各(Creutzfeld-Jakob)病、肌萎缩侧索硬化(ALS)、糖尿病性神经病、橄榄体脑桥小脑萎缩、癫痫、发作、低血糖、外科或其它干预、视网膜局部缺血(糖尿病的或其它病因的)、青光眼、视网膜变性、多发性硬化、毒性和局部缺血性视神经病、黄斑变性、CNS或PNS对毒性剂或有毒剂的暴露；药物中毒或戒除，例如可卡因或酒精；家族病史；神经变性异常或相关病情，癫痫状态史；来自替代物标记物或生物标记物表明该患者需要用神经保护药物(NPD)治疗的证据，例如显示结构性或功能性病理学的MRI，血清中高水平神经元变性产物、高水平睫状神经营养因子(CNTF)。21.权利要求20的方法，其中赋予需要神经保护的患者的素因性因素选自下列组成的一组创伤性脑损伤(TBI)，钝性、封闭性和穿透性头部创伤；外科、中风或其它脑血管事故(CVA)；癫痫状态和CNS的空间占有性损伤。22.权利要求21的方法，其中所述素因性因素是创伤性脑损伤(TBI)，包括钝性、封闭性或穿透性头部创伤和外科干预。23.权利要求21的方法，其中所述素因性因素是中风或其它脑血管事故(CVA)。24.权利要求23的方法，其中所述素因性因素是一种神经变性疾病。25.权利要求1或5的方法，其中所述化合物(或对映体)或其医药上可接受盐或酯是与一种或多种其它化合物或治疗剂组合给药的。26.权利要求25的方法，其中所述一种或多种其它化合物或治疗剂选自有下列一种或多种性质的化合物组成的一组抗氧剂活性；NMDA受体拮抗作用；增大内原GABA抑制作用的能力；NO合成酶抑制剂活性；铁结合能力例如铁螯合剂；钙结合能力，例如Ca(II)螯合剂；锌结合能力，例如Zn(II)螯合剂；钠或钙离子通道阻塞能力；钾或氯离子通道开通能力；从而能向该患者提供神经保护效果。27.权利要求26的方法，其中所述一种或多种化合物还可以选自抗癫痫药物(AEDs)组成的一组。28.权利要求27的方法，其中所述抗癫痫药物(AED)选自下列组成的一组卡马西平、氯巴占、氯硝西泮、乙琥胺、非尔氨酯、加巴喷丁、拉莫三嗪、左乙拉西坦、奥卡西平、苯巴比妥、苯妥英、pregabalin、扑米酮、retigabine、talampanel、噻加宾、托吡酯、丙戊酸酯(盐)、氨己烯酸、唑尼沙胺、苯并二氮杂、巴比妥酸盐或一般镇静催眠药。29.一种用于提供神经保护的医药组合物，包含医药上有效量的、选自式(I)和式(II)组成的一组的对映体或其医药上可接受盐或酯或对映体混合物和药物上可接受的载体或赋形剂，其中选自式(I)和式(II)组成的一组的一种对映体占主导式中苯基是在X上有1～5个选自氟、氯、溴和碘组成的一组的卤素原子取代的；且R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地选自氢和C1-C4烷基组成的一组，其中C1-C4烷基任选地有苯基取代(其中苯基任选地有独立地选自卤素、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、氨基、硝基和氰基组成的一组的取代基取代)。30.一种药剂盒，包含按照权利要求29的医药组合物的治疗有效剂型，该剂型有适当包装或容器，同时还有关于其用来向有其需要的患者提供神经保护的恰当使用的信息或说明。31.按照权利要求1或5的方法，其中该治疗有效量是约1.0mg/kg/日～约150mg/kg/日。32.按照权利要求1或5的方法，其中所述患者在所述给药时尚未显现神经元损伤或机能障碍的临床信号或症状。33.按照权利要求1或5的方法，其中所述患者在所述给药时有显现神经元损伤或机能障碍的风险。34.按照权利要求1或5的方法，其中所述患者在所述给药时已经显现神经变性异常或神经元损伤的临床证据。35.按照权利要求1或5的方法，其中该治疗有效量是约1.4mg/kg/日～约43.0mg/kg/日。36.按照权利要求1或5的方法，其中该治疗有效量是约2.9mg/kg/日～约35.7mg/kg/日。37.按照权利要求1或5的方法，其中该治疗有效量是约3.6mg/kg/日～约28.6mg/kg/日。38.按照权利要求1或5的方法，其中该治疗有效量是约4.3mg/kg/日～约21.4mg/kg/日。39.按照权利要求1或5的方法，其中该治疗有效量是约5.0mg/kg/日～约17.1mg/kg/日。40.按照权利要求1或5的方法，其中该治疗有效量是约100mg/日～约3000mg/日。41.按照权利要求1或5的方法，其中该治疗有效量是约200mg/日～约2500mg/日。42.按照权利要求1或5的方法，其中该治疗有效量是约250mg/日～约2000mg/日。43.按照权利要求1或5的方法，其中该治疗有效量是约300mg/日～约1500mg/日。44.按照权利要求1或5的方法，其中该治疗有效量是约350mg/日～约1200mg/日。45.按照权利要求1或5的方法，其中所述治疗量是随着时间推移渐进性减少的。44.按照权利要求25、26、27或28的方法，其中与所述化合物(或对映体)或其医药上可接受盐或酯组合给药的所述一种或多种其它化合物或治疗剂的数量是随着时间推移渐进性减少的。全文摘要本发明涉及提供神经保护的方法，包含对有其需要的患者给药治疗有效量的一种选自下列组成的一组的化合物式(I)和式(II)，或其医药上可接受的盐或酯；式(I)式(II)中苯基是在X上有1～5个选自氟、氯、溴和碘组成的一组卤素原子取代的；且R文档编号A61P25/28GK101076327SQ200580042469公开日2007年11月21日申请日期2005年10月14日优先权日2004年10月15日发明者R·E·特怀曼,B·赵申请人:詹森药业有限公司