专利名称：：蔗糖酶活性抑制剂、葡糖淀粉酶活性抑制剂以及含有这些抑制剂的食品和饲料的制作方法
技术领域：
：本发明涉及含有选自帕拉金糖(palatinose)、trehalulose和还原帕拉金糖的1种以上糖类的蔗糖酶活性抑制剂以及葡糖淀粉酶活性抑制剂。另外，本发明还涉及含有该蔗糖酶活性抑制剂和任意蔗糖的食品以及飼料。本发明进一步还涉及含有该葡糖淀粉酶活性抑制剂和任意淀粉和/或糊精的食品以及饲料。近年来为了预防生活习性病，各种糖类分解酶抑制剂受到关注。特别是以(l)通过抑制糖类的消化吸收来防止血糖值升高，以及防止脂肪堆积和肥胖；(2)通过使糖类緩慢消化，而使糖类转移到大肠，来降低摄取热量；(3)利用肠内的有用菌，获得调整肠胃效果为目的，对蔗糖酶和麦芽糖酶活性抑制剂的效果进行了研究。哺乳类主要摄取淀粉作为糖质(糖类)。哺乳类一旦摄取淀粉，所摄取的淀粉就被唾液淀粉酶和胰淀粉酶随机分解。这时几乎不生成葡萄糖，主要分解物是麦芽糖、麦芽三糖以及cc-极限糊精等28糖类。来源于这些食物或糖类的二糖类或低糖类被定位在小肠中的糖类分解酶(异麦芽糖酶、乳糖酶、麦芽糖酶、蔗糖酶、海藻糖酶和葡糖淀粉酶)分解成单糖而被吸收。以往将分解麦芽糖的麦芽糖酶和分解代表性糖质甜味剂蔗糖的蔗糖酶定位于典型的糖类分解酶。但是现在具有麦芽糖酶活性的酶，主要是蔗糖酶-异麦芽糖酶复合物，该复合体显示8成麦芽糖酶活性，这一点是很明确的(参照非专利文献l)。蔗糖酶-异麦芽糖酶复合物，除了显示麦芽糖酶活性以外，还显示全部蔗糖酶活性和几乎全部(99%)的异麦芽糖酶活性。另一方面，麦芽糖酶-葡糖淀粉酶复合物显示剩余的2成麦芽糖酶活性，该复合物显示其它肠内的全部中性葡糖淀粉酶活性和1%的异麦芽糖酶活性。所谓麦芽糖酶活性，是指对二糖的麦芽糖进行分解生成2分子葡萄糖的活性；所谓葡糖淀粉酶活性是指将葡萄糖从主要由oc-1,4键连接，部分由a-1,6键连接的淀粉部分分解物(直链淀粉和支链淀粉)的末端进行分解，使之生成单分子葡萄糖的活性。有报导指出蔗糖酶-异麦芽糖酶复合物显示以麦芽糖作为底物的麦芽糖酶活性，但是不显示以直链淀粉和支链淀粉作为底物的葡糖淀粉酶活性。另外，所谓蔗糖酶活性，是指识别蔗糖的葡萄糖部位，分解成葡萄糖和果糖的活性。该活性在哺乳类中只存在于蔗糖酶-异麦芽糖酶的复合物中，在微生物所具有的转化酶，在将蔗糖水解成葡萄糖和果糖这一点上与蔗糖酶相同。但是转化酶是识别并分解蔗糖果糖部分的P-呋喃果糖苷酶(P-7，夕卜7，乂、二夕'一七、)，从与蔗糖酶活性和识别部位不同这一点上而言，两者是不同的酶，因此显示不同的活性。在此之前报导了以下所示糖类分解酶的活性抑制剂。有报导提出了D-木糖和L-阿拉伯糖具有蔗糖酶活性抑制效果(参照专利文献1)。还有报导提出了L-岩藻糖、2-脱氧-D-半乳糖、L-木糖、D-核糖、D-塔格糖、D-核酮糖、D-来苏糖和D-木酮糖具有oc-糖普酶抑制效果(参照专利文献2)。还报导了与此相关的以木糖醇和木糖作为组成糖的寡糖、木糖的衍生物、阿拉伯糖醇、赤藓糖、赤藓糖醇和甘油醛等糖类具有a-糖苷酶抑制效果(参照专利文献3和4)。以上的糖类主要是单糖类或单糖醇，另外，即使是二糖类以上，也可以以木糖作为组成成分。这些作为酶活性抑制剂所使用的糖类，其本身几乎不会被消化吸收，只表达对酶活性的抑制效果。所谓的oc-糖苷酶从广义上讲是识别底物的cc-糖苷键进行水解的酶的总称，包括蔗糖酶、麦芽糖酶、葡糖淀粉酶等多种酶。但是从狭意讲，oc-糖苷酶表示麦芽糖酶和蔗糖酶。oc-糖苷酶所包含的各种酶以及酶活性，如上所述具有不同的底物特异性。作为来源于植物的糖类消化酶抑制剂，报导了核桃科核桃属的植物提取物抑制a-糖苷酶和淀粉酶活性的情况(参照专利文献5)、"大Z(桃金娘目千曲菜科植物)热水提取物抑制麦芽糖酶、蔗糖酶、葡糖淀粉酶和异麦芽糖酶活性的情况(参照专利文献6)以及从玉米茎叶部分或咖啡豆分离纯化的咖啡油抑制麦芽糖酶活性的情况(参照专利文献7)。另外，有报导提出通过对蔗糖和蔗糖抑制剂进行组合，可以作为肠内双歧菌增殖促进剂使用，作为所用的蔗糖抑制剂，可以列举上述的L-阿拉伯糖、D-木糖、D-核糖和D-塔格糖等糖类(参照专利文献8)。作为其它糖类分解酶抑制剂，已知的有放线菌链霉菌属产生的新型氨基糖类抑制淀粉酶活性的情况(参照专利文献9和专利文献10)。以往有报导指出帕拉金糖和trehalulose与异麦芽糖一样通过异麦芽糖酶分解，不会抑制蔗糖酶活性(参照非专利文献2和非专利文献3)。关于帕拉金糖的蔗糖酶活性抑制效果，有关记载说明了作为底物，使用4.3~56mM(约0.15~1.9重量％)蔗糖；作为抑制剂，使用14mM(约0.48重量％)帕拉金糖进行确认时，帕拉金糖不存在抑制效果的情况。另外，关于trehalulose的蔗糖酶活性抑制效果，有关记载说明了作为底物，使用5~75mM(约0.17-2.6重量％)的庶糖；作为抑制剂，使用5mM(约0.17重量％)的trehalulose进4亍确iL时，trehalulose没有抑制效果的情况。另一方面，有报导指出帕拉金糖和还原帕拉金糖具有抑制以麦芽糖作为底物反应的麦芽糖酶活性抑制效果(参照非专利文献4)。但是非专利文献4中，由于没有使用提纯的酶，所以关于是抑制蔗糖酶的活性，还是抑制麦芽糖酶-葡糖淀粉酶复合物的活性，还没有确定。另外，关于糊精和淀粉的分解抑制，也尚不明确。专利文献1专利文献2专利文献3专利文献4专利文献5专利文南大6专利文献7专利文献8专利文献9WO94/12057A;特开平6-65080号公报；特开平8-23973号公报；特开平11-286449号公报；特开2004-352649号公报；特开2002-12547号/>报；特开2002-255806号公报；特开2004-113068号7>报；特开昭56-125398号公报；专利文献10:特开昭54-92909号公报；非专利文献1:B丄.Nichols,S.Avery,P.Sen,D.M.Swallow,D.HahnandE.Sterchi,ProceedingsoftheNationalAcademyofSciencesUSA,第100巻第3号，第1432~1437页，2003年。非专利文献2:合田敏尚，细谷宪政，日本营养.粮食学会志，第36巻，第3号，第169173页，1983年。非专利文南史3:K.Yamada,H.Shinohara,andN.Hosoya,NutritionReportsInternational,第32巻，第5号，第121卜1200页，1995年。非专利文献4:S.C.Ziesenitz，ZeitschriftfurErnahrungswissenschaft,第25巻，第253-258页，1986年。发明公开发明要解决的课题以往的糖类分解酶抑制剂，只是作为抑制剂起作用，其本身不容易被消化吸收，所以不能以作为营养源为目的。因此，相对于作为分解抑制对象底物的淀粉、麦芽糖、蔗糖等糖类，其发挥效果的添加量必需是微量的。另外对抑制剂和构成底物的糖类进行组合，加入到食品或食品材料中时，必需设定微妙的适宜摄取量。如果摄取多于适宜摄取量的抑制剂和糖类，则多量的糖类在未被消化的状态下就达到大肠，存在引起下泻作用和腹胀感等消化道不适的问题。另外，在以往的糖类分解酶抑制剂中植物提取物，一般是茶褐色提取物。因此从通过把植物提取物添加到食品中进行着色的角度考虑，其使用量存在限制。以往的糖类分解酶抑制剂，多数具有如苦味和涩味的特有味道和气味。因此很难直接摄取，另外当用于食品中时，在施予食品味道和气味变化方面，也存在其使用量的限制。对于以获得预防生活习性病、预防肥胖以及调整肠胃效果为目的的糖类分解酶抑制效果，主要以蔗糖酶抑制和麦芽糖酶抑制为对象进行研究。如果核实各种报告，则作为研究对象的蔗糖酶和麦芽糖酶并不是酶的名称，而是表示分别具有的蔗糖分解活性(蔗糖酶活性)和麦芽糖分解活性(麦芽糖酶活性)的酶。前述蔗糖酶-异麦芽糖酶复合物显示哺乳类的全部蔗糖酶活性或大部分麦芽糖酶活性，这一点是已知的，所以蔗糖酶活性抑制效果和麦芽糖酶活性抑制效果都主要表示蔗糖酶-异麦芽糖酶复合物的活性抑制效果。另外，该复合物不具备对于淀粉和糊精结构物的直链淀粉和支链淀粉的分解活性，所以在有关淀粉和糊精的分解抑制效果方面，实质上还没有得以证实。另外关于帕拉金糖和trehalulose不能抑制蔗糖酶活性的报告，是对底物蔗糖在2.6%以下的低浓度，以及作为抑制剂添加的帕拉金糖和trehalulose的浓度低于0.5重量％的低浓度下进行试验的结果。该浓度对于底物浓度为10%以上的高比率，但是对于表达糖类分解酶抑制效果却是低浓度。为了表达糖类分解酶抑制效果，必需要能够抑制存在于小肠中酶的浓度，所以作为抑制剂浓度，必需摄取更高浓度。解决课题的手段本发明者进行锐意研究的结果发现选自帕拉金糖、trehalulose和还原帕拉金糖的1种以上糖类能够抑制蔗糖酶活性和葡糖淀粉酶活性，从而完成了本发明。帕拉金糖、trehalulose和还原帕拉金糖，作为通常糖质甜味剂用于饮食品中。帕拉金糖和trehalulose是蔗糖的结构异构体，是以葡萄糖和果糖作为组成糖的二糖。帕拉金糖和trehalulose通过异麦芽糖酶完全分解，生成葡萄糖和果糖。这些单糖类与蔗糖通过酶分解即可被小肠吸收代谢，所以这些二糖类是安全的营养糖。因此当摄取帕拉金糖、trehalulose和蔗糖或淀粉或糊精的任意一种或它们的组合时，均被小肠消化吸收，不存在显示下泻作用与腹胀感的肠胃不适。也就是以帕拉金糖和trehalulose作为抑制剂使用时，对于摄取量没有特别限制。另外，还原帕拉金糖是一种糖醇，是与山梨糖醇和麦芽糖醇等同样难以消化的糖类。确认了还原帕拉金糖的最大无毒性作用量(最大作用量)(0.3g/kg体重)，使用量在该范围以下时，不存在问题。发明效果如果按照本发明，通过在摄取蔗糖的同时或者在其前后摄取以帕拉金糖、trehalulose和/或还原帕拉金糖为有效成分的蔗糖酶活性抑制剂，可以抑制蔗糖酶活性。另外，通过在摄取淀粉或糊精的同时或者在其前后摄取以帕拉金糖、trehalulose和/或还原帕拉金糖为有效成分的葡糖淀粉酶抑制剂，可以抑制葡糖淀粉酶的活性。帕拉金糖、trehalulose和还原帕拉金糖，其本身为糖质甜味剂，是食品。另外帕拉金糖和还原帕拉金糖是白色粉末，trehalulose是无色液体(浆状)，而且帕拉金糖和还原帕拉金糖具有接近蔗糖的甜味，没有苦味、涩味和酸味等异味。因此将帕拉金糖、trehalulose和还原帕拉金糖添加到食品中时，不会对食品施与着色和异味，可以放心使用。本发明的蔗糖酶抑制剂和葡糖淀粉酶抑制剂，当以帕拉金糖或trehalulose作为有效成分时，可以作为对帕拉金糖和trehalulose的摄取量没有特别限制的抑制剂使用。另外，当使用还原帕拉金糖时，通常可以在还原帕拉金糖的最大无毒性作用量以下使用。因此当组合选自帕拉金糖、trehalulose和还原帕拉金糖的l种以上使用时，对该抑制剂的才聂取量没有特别限制，另外，关于这些抑制剂和蔗糖以及淀粉的任意一种或对两种进行组合的食品，也不存在摄取量的限制。实施发明的最佳方案以下对本发明的优选实施方案进行详细说明。本发明中所谓"帕拉金糖(palatinose)"是通过葡萄糖在果糖上通过oc-l,6-葡糖苷键连接构成的二糖，又称为异麦芽酮糖(isomaltulose)。本发明中的"trehalulose"是由葡萄糖在果糖上通过cx-l，l-葡糖苷键连接构成的二糖。本发明中的"还原帕拉金糖"(商标为palatinit)是对帕拉金糖进行加氲得到的糖醇，是指与a-D-吡喃葡糖基-l,6-D-山梨糖醇(简称为GPS)和其异构体oc-D-吡喃葡糖基-l,l-D-甘露醇(简称为GPM)的混合物，GPM每一个分子带有2个分子结晶水。还原帕拉金糖又称为异麦芽糖醇(isomalt),还原帕拉金糖的最大无毒性作用量对日本人为0.3g/kg体重。本发明的"蔗糖酶活性"是指识别蔗糖的葡萄糖部位，并分解成葡萄糖和果糖的活性，所谓"蔗糖酶活性抑制"是指抑制蔗糖酶活性的一部分或全部。本发明中所谓"葡糖淀粉酶活性"是指将葡萄糖从主要由oc-l,4键连接的淀粉部分分解物(直链淀粉和支链淀粉)的末端进行分解，使之生成单分子葡萄糖的活性；所谓"葡糖淀粉酶活性抑制"是指抑制葡萄糖淀分酶活性的一部分或全部。一般将淀粉的部分分解物称为糊精，但生成分子量小于糊精的麦芽寡糖(4糖以上)的分解活性也属于葡糖淀粉酶活性。显示蔗糖酶活性的酶和显示葡糖淀粉酶活性的酶是不同的。显示蔗糖酶活性的酶，是蔗糖酶-异麦芽糖酶复合物，蔗糖酶-异麦芽糖酶复合物定位在小肠中。另一方面在小肠中只有葡糖淀粉酶显示葡糖淀粉酶活性。下述实施例的淀粉或糊精的分解，通过葡糖淀粉酶进行，后面叙述的确认试验将证实蔗糖酶-异麦芽糖酶复合物不存在或几乎不存在糊精分解活性。本发明的以帕拉金糖作为有效成分的酶活性抑制剂，例如可以使用结晶帕拉金糖、帕拉金糖浆、或trehalulose浆。结晶帕拉金糖(商品名，结晶帕拉金糖IC,三井制糖抹式会社制)，含99.0%以上的帕拉金糖(含结晶水)。帕拉金糖浆(商品名帕拉金糖糖浆-ISN或-TN,三井制糖抹式会社制)含有11~17%的帕拉金糖和53~59%的trehalulose。trehalulose浆(商品名；、/kr7-75或-85，三井制冲唐林式会一土制)含有8~13%的帕拉金糖和83~89%的trehalulose。作为本发明的以trehalulose作为有效成分的酶活性抑制剂，例如可以使用帕拉金糖浆或trehalulose浆。帕拉金糖浆和trehalulose浆的具体例子如上所述。作为本发明的以还原帕拉金糖作为有效成分的酶活性抑制剂，例如可以使用还原帕拉金糖(商品名，f二少卜PN:>>j—乂和GS、〉卩一X、，三井制糖抹式会社制)。—，f二'乂卜PN少卩一X含有50±5%的GPM和50±5%的GPS，作为粒度不同的制品，还有^，f二少卜PN、八，f-'_y卜PNS-2乂《，f二卜PNM-2、/《，f二卜PNP等。另外，」，f-7卜GS:>卩一乂含有20±5%的GPM和80±5%的GPS,有颗粒状的八，千二';/卜GS和粉末状的A，f二卜GSP。对于本发明的蔗糖酶活性抑制剂和葡糖淀粉酶活性抑制剂(以下称为本发明的抑制剂)的形态没有特别限定，除了以上叙述的以外，还可以列举含有帕拉金糖、trehalulose或还原帕4立金糖的方旦糖(7才>夕、'、颗粒、片剂(tablet)、(糖)浆剂、小瓶包装制剂和粉末混合剂等。下面叙述的实施例12和13表示使用帕拉金糖和还原帕拉金糖的本发明制剂(颗粒)。另外，本发明的抑制剂，可以配合能够用于食品、药品和药品以外的材料加工成功能性食品、保健食品、药品和药品以外的产口Oo下面叙述的实施例14至30表示含有帕拉金糖、trehalulose和还原帕拉金糖中至少l种的制剂或食品。当与构成蔗糖酶或葡糖淀粉酶的任意一种或2种底物的糖类，例如蔗糖、糊精、淀粉一起摄取该制剂和食品时，该制剂和食品，由于帕拉金糖、trehalulose或还原帕^立金糖产生的蔗糖酶活性抑制效果或葡糖淀粉酶活性抑制效果，会抑制底物糖在小肠中的分解。下面叙述的实施例31至37表示含有帕4i金糖、trehalulose和还原帕拉金糖中至少l种的食品，下面叙述的实施例38至40表示含有帕拉金糖、trehalulose和还原帕拉金糖中至少1种的詞料。该食品和饲料还含有构成蔗糖酶或葡糖淀粉酶的任意一种或2种的底物的糖类，例如蔗糖、糊精、淀粉。这些食品和饲料，在食品和祠料中所含底物在小肠中的分解，由于食品和伺料中的帕拉金糖、trehalulose或还原帕4立金糖的原因而受到抑制。本发明中当选自帕拉金糖、trehalulose和还原帕拉金糖的1种以上的糖类到达小肠时，构成蔗糖酶底物的蔗糖和构成葡糖淀粉酶底物的淀粉和/或糊精的部分分解物如果存在于小肠中，则蔗糖和/或淀粉和/或糊精的部分分解物的分解受到抑制，与不存在酶活性抑制剂时相比，这些底物和酶活性抑制剂总量的消化吸收得到抑制。对于本发明抑制剂的摄取量，没有特别限制，但是当与蔗糖和/或淀粉和/或糊精组合摄取帕拉金糖、trehalulose和/或还原帕拉金糖时，一般认为摄取时(经口摄取)的浓度，如果蔗糖为5~50重量％、淀粉和/或糊精为5~70重量％,则帕拉金糖的浓度在0.5重量°/。以上，以及帕拉金糖相对于蔗糖或淀粉和/或糊精和帕拉金糖之和的比率在10~90重量%的条件下，可以期待获得蔗糖酶活性和葡糖淀粉酶活性的抑制效果。含有葡萄糖或果糖作为组成糖的糖类，例如葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、糊精、淀粉以及果糖，从胃到小肠的排出速度受到限制。当大量摄取这些糖类，或高浓度摄取这些糖类时，在胃中被稀释的同时从胃向小肠的排出速度也得到调节，小肠中这些糖类的浓度可以被抑制在约10%以下。(高田和明，桥本仁，伊藤汎监修，"砂糖百科"；社団法人糖业协会及t/精糖工业会发行、第11~12页)。通过实施例可知，根据小肠内的环境设定条件，当底物蔗糖浓度在15%以下，底物糊精浓度在10%以下时，相对于底物添加10重量％以上的选自帕拉金糖、trehalulose和还原帕拉金糖的1种以上抑制剂时，可以确认本发明的效果。如果超过这一浓度，则可以认为底物不容易向小肠移动。因此即使摄取上述某种高浓度的蔗糖和/或淀粉和或糊精时，本发明的抑制剂也是有效的。本发明的一个方面是可以在饭前预先摄取相对于100重量要摄取或已摄取蔗糖和/或淀粉和/或糊精份为10重量份以上的本发明的抑制剂；或者可以在吃饭时同时摄取；或者是可以在饭后，蔗糖、淀粉或糊精在肠内分解之前(在肠胃内混合的时间之内)摄取。或者是使食品和饲料含有蔗糖、淀粉或糊精的同时含有本发明的抑制剂。本发明的另一个方面是含有本发明蔗糖酶活性抑制剂的食品或-祠料，含有蔗糖3重量％以上和相对于蔗糖重量为10重量％以上的蔗糖酶活性抑制剂(参照下面叙述的实施例8和9)。另外，当蔗糖酶抑制剂为还原帕拉金糖时，对于蔗糖在0.5重量以上时，相对于蔗糖重量含有10重量％以上的还原帕拉金糖，用这种方法可以确i人蔗糖酶抑制活性(参照下面叙述的实施例9)。另外，本发明的含有葡糖淀粉酶活性抑制剂的食品或饲料，含有淀粉和/或糊精2重量％以上和相对于淀粉和/或糊精重量为2重量％以上的葡糖淀粉酶活性抑制剂(参照下面叙述的实施例10和11)。另外，当葡糖淀粉酶活性抑制剂是还原帕拉金糖时，对于淀粉和/或糊精0.5重量份以上，含有相对于淀粉和/或糊精重量为10重量％以上的还原帕拉金糖，可以确认葡糖淀粉酶抑制活性(参照下面叙述的实施例11)。本发明的抑制剂还可以作为调整肠胃药剂、持续能量供给剂、饱腹感持续剂、脂肪堆积和肥胖的防止剂以及血糖稳定剂使用。本发明的其它实施方案是调整肠胃的方法、持续供给能量的方法、持续具有饱腹感的方法、抑制脂肪堆积的方法、防止肥胖的方法以及稳定血糖值的方法，这些方法的特征是含有选自帕拉金糖、trehalulose和还原帕拉金糖的1种以上的糖类。对于含有本发明抑制剂的食品形态没有特别限制，例如可以列举含糖质的饮料(运动饮料、果汁饮料、碳酸饮料)，加工食品，糖果(糖块)、面包，热蛋糕等。对于含有本发明抑制剂的伺料形态没有特别限制，例如可以列举固体饲料、液体饲料。使产业动物(猪、牛、鸡)以及宠物(猫、狗)摄取本发明的抑制剂，也可以期待调整肠胃的效果和稳定血糖值。含有本发明抑制剂食品或詞料的包装中可以附有说明该抑制剂效果的指导说明书。本发明的另一个方案涉及制造方法，其特征是在制造抑制脂肪堆积的制剂、防止肥胖的制剂、稳定血糖值的制剂、调整肠胃制剂中使用选自帕4立金糖、trehalulose和还原帕拉金糖的至少1种以上的糖类。[实施例]以下通过实施例对本发明进行i兌明，但本发明不受这些实施例的限定，实施例中的％,只要没有特别说明均表示重量/体积百分数w/v%。[确认实验]为了确认用下述实施例4、6和7以及试验例5进行的淀粉分解是通过葡糖淀粉酶进行的而不是通过蔗糖酶和异麦芽糖酶进行的，所以对蔗糖酶-异麦芽糖酶复合物对糊精的分解性进行了研究。1.{式-险方法A.提取蔗糖酶-异麦芽糖酶复合物(粗纯化酶)将20g大鼠小肠丙酮粉末(Sigma^^司制)溶解在180ml的50mM磷酸钾緩沖液(pH7.0)中在室温下慢慢搅拌，同时进行4小时提取。接着加入6.5ml的半胱氨酸溶液(100mg/10ml)和1.5ml的木瓜蛋白酶溶液(MPBiomedicals,LLC80mg/2ml)，在37°C下进行1小时孵育,进行木瓜蛋白酶处理。接着通过离心分离(8000rpmx15分钟)回收上清，进一步使用No.2东洋滤纸进行抽吸过滤，得到164ml的粗酶液。使用浓度为45%硫酸铵从该粗酶液中析出蛋白质，然后进行离心分离(8000rpmx15分钟)回收上清。接着在该上清中进一步添加硫酸铵使浓度达到65%，析出蛋白质后，进行离心分离(8000rpmx15分钟)并回收沉淀。把该沉淀溶解在10mM磷酸钾緩冲液(pH7.0)中，加入到透析管(UNIONCARBIDECORP公司制，透析膜)中，浸渍在2升的10mM磷酸钾緩沖液(pH7.0)中慢慢搅拌，并同时透析过夜、脱盐(回收50ml)。接着用DEAE-Cellulose(50ml体积)进行柱色谱分离，使用分段收集器按照12ml/根进行分级分离。色谱分离是逐步提高磷酸钾緩冲液(pH7.0)的盐浓度(10mM—50mM—100mM)进行溶出。测定各组分的活性，回收蔗糖酶-异麦芽糖酶复合物活性最高的组分，得到12ml粗纯化酶液。蔗糖酶-异麦芽糖酶复合物活性是对各组分测定蔗糖分解活性求出的。具体是把28mM蔗糖溶液和0.125ml的组分溶液分别加入到2.5ml容量的小试管中，在37。C下，以60次/分钟振荡20分钟，然后把小试管置于沸水中3分钟，使酶失活。对于这些溶液，使用下述D中所述的F-kit葡萄糖(ROCHE公司制)测定葡萄糖浓度。B.配制试才羊使用小试管配制下述3种试样，使最终体积达到2Jml，每种试样分别配制3个。试样1糊精2。/。(W/V)/粗纯化酶液0.125ml;试样2糊精2%(W/V)/粗纯化酶液0.25ml;试样3蔗糖26.6mM(0.91%(W/V)/粗纯化酶液0.125ml。糊精，使用Dextrinfromcorn(Type3)(Sigma公司，美国)。蔗糖，使用试剂特级Saccharose(和光纯药工业抹式会社)。各浓度表示糊精、蔗糖的最终浓度。C.反应条件将各试样在3(TC下，以60次/分钟振荡20分钟，然后将小试管置于沸水中3分钟，使酶失活。D.葡萄糖浓度测定使用F-kit葡萄糖(ROCHE公司制)测定反应后各试样中的葡萄糖浓度。从各葡萄糖浓度的测定值中减去空白溶液(只有O.IM磷酸緩冲液(pH6.8))的值以及试验试样(糊精和蔗糖)中最初所含的葡萄糖浓度的植，求出游离的葡萄糖浓度(g/1)。E.糊精中二糖类含量的确认糊精是葡萄糖聚合的高分子。糊纯化品中，一般含有单糖(葡萄糖)、二糖(麦芽糖和异麦芽糖)和三糖类以上的寡糖。在上述酶反应试验中，糊纯化品中最初所含的葡萄糖(单糖)的量可以通过F-kit测定，进行扣除计算。但是没有扣除作为蔗糖酶底物的麦芽糖和作为异麦芽糖酶底物的异麦芽糖。因此如果麦芽糖和异麦芽糖存在于反应液中，则由于蔗糖酶-异麦芽糖酶复合物的作用会分解，使葡萄糖游离。于是可以使用液相色i普测定糊纯化品中的二糖类含量。测定条件如下。柱连接SugarKS-801和SugarKS-802(昭和电工抹式会社制)；移动层水；流速lml/min;柱温度60°C。结果表明所用糊精中平均每制品固体组分含有1.3重量％的二糖类。2.结果试样1~3的平均葡萄糖生成量(g/l)为0.057、0.088、0.474。试样1的糊精浓度(2重量％)高于试样3的蔗糖浓度(0.91重量)，尽管如此，试样1的葡萄糖糖生成量与试样3的葡萄糖糖生成量相比是其1/10水平。因此，蔗糖酶-异麦芽糖酶复合物(粗纯化酶)，由于并没有完全被纯化，但是葡糖淀粉酶的存在(量)很少，所以糊纯化品中所含的麦芽糖和异麦芽糖比高分子的糊精更容易分解。可以认为所用的糊纯化品中含有1.3重量％的二糖类，生成的葡萄糖即来源于该二糖。因此可以认为蔗糖酶-异麦芽糖酶复合物(粗纯化酶)几乎不含葡萄淀粉酶。通过本确认试-险，可以确认实施例中所用的大鼠小肠粉末中所谓显示蔗糖酶活性的酶和显示糊精或淀粉分解活性的酶如非专利文献1所述，是不同的酶。实施例1(由帕拉金糖引起的麦芽糖酶活性抑制效果和蔗糖酶活性抑制效果的确认)试-验溶液的配制作为研究各种酶活性抑制效果的试样(试验试样)，使用帕拉金糖(商品名帕拉金糖IC，新三井制糖抹式会社制)。作为麦芽糖酶和蔗糖酶的底物，分别使用麦芽糖和蔗糖。将试验试样和底物溶解在0.1M磷酸緩沖液(pH6.8)中并达到下面叙述的表1所示的浓度，配制试验溶液(溶液4~5)。另外，将试验试样和底物分别溶解在O.IM磷酸緩冲液(pH6.8)中并达到下面叙述的表1所示的浓度，配制对照溶液(对于试验试样为溶液l,对于底物为溶液23)。小肠酶液的配制将2g大鼠小肠丙酮粉末(Sigma公司制)溶解在20ml0.1M磷酸緩沖液(pH6.8)中，在5。C下放置一昼夜。然后进行离心分离(8000rpmx15分钟)，用0.8ym的膜过滤器对上清液进行过滤，得到小肠酶液。该液是小肠中酶的混合物，含有蔗糖酶、葡糖淀粉酶、麦芽糖酶、异麦芽糖酶等。活性测定方法在溶液1~5各5ml中分别添加小肠酶液0.25ml，然后i文入到37°C的水浴中振荡(60次/分钟)，并同时使其反应60分钟。反应结束后为了使酶失活，在沸腾热水浴中加热3分钟。使用F-kit葡萄糖(ROCHE么^司制)测定反应后各溶液中的葡萄糖浓度。从各浓度的测定值中扣除空白溶液(只有O.IM磷酸緩冲液)的值和试验试样中开始所含的葡萄糖浓度的值，求出游离葡萄糖浓度(g/1)。把结果出示在表1中。接着将各游离葡萄糖浓度的值代入到下面的计算式中，计算出对于麦芽糖酶的分解抑制率和对于蔗糖酶的分解抑制率。本试验中无论是底物，还是抑制剂都会被小肠酶溶液中的酶分解。但是分解底物的酶和分解抑制剂的酶不同。作为抑制效果的指标求出分解抑制率。当添加抑制剂时，葡萄糖浓度低于只使底物反应时的浓度，可以说分解抑制率高的抑制效果强。把结果出示在表l中。[数学式1]分解抑制率(。/q)-((A+B)-(AB)}+(A+B)x100式中，(A+B)表示只有试验试样(A)或只有底物(B)的对照溶液各自在反应后的游离葡萄糖浓度之和，(AB)表示试验试样(A)和底物(B)同时存在下的试验溶液在反应后的游离葡萄糖浓度。[表l]<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>表1表明帕拉金糖分别具有对麦芽糖酶的分解抑制和对蔗糖酶的分解抑制，所以帕拉金糖具有麦芽糖酶活性抑制效果和蔗糖酶活性抑制效果。通过文献可以了解帕拉金糖具有麦芽糖酶活性抑制效果的情况，但是其具有蔗糖酶活性抑制效果的情况是通过本试验才首次得以确认的。[试验例1]作为试验试样使用2种难消化性糊精(商品名Fiberso1(7:r4"一V》)2和Pinefiber(—4>77JA—)Bi,均为松谷化学工业抹式会社制)，除此之外，按照与实施例1相同的顺序进行试验。把试验试样和底物溶解在O.IM磷酸緩冲液(pH6.8)中并达到下面叙述的表2所示的浓度，配制试验溶液(溶液8~11)。另外，将试验试样和底物分别溶解在0.1M磷酸緩冲液(pH6.8)中并达到下面叙述的表2所示的浓度，配制对照溶液(对于试l企试样为溶液6-7，对于底物为溶液23)。使用上述试验溶液和对照溶液各5ml，按照与实施例1相同的顺序进行酶反应，求出反应后各溶液中的游离葡萄糖浓度、对麦芽糖酶的分解抑制率和对蔗糖酶的分解抑制率。把结果出示在下面所述的表2中。[表2]试样游离葡萄糖浓度对麦芽糖酶的分解抑制率(％)对蔗糖酶的分解抑制率(％)溶液65%FibersoL2U76±0093溶液75%Pinefiber-Bi_7.7!1±0.130溶液25%麦芽糖4-。56土0.423溶液35%蔗糖0,959土0022溶液85。/。差芽糖+5。/。Fiberso124.823土0.35921溶液95。/。麦芽糖+5。/。Pinefiber-Bi10.563±0,929溶液IO5。/。蔗糖+5。/。Fiberso121.683±0.10321溶液ll5。/。蔗糖+5。/。Pinefiber-Bift.275土03855表2表明Fiberso12和PinefiberBi的分解速度比蔗糖的分解速度高得多。可以认为这是由于难消化性糊精的Fiberso12和PinefiberBi各自的消化成分(食物纤维以外的成分)分别为5~15%以及45~55%,它们的分解速度可以与麦芽糖或糊精相比敌的原因。由表1和表2可知，如果对在底物麦芽糖中添加帕拉金糖、Fiberso12和PinefiberBi的任意一种的溶液(溶液4、溶液8、溶液9)的结果进行比较，添加帕拉金糖的试验溶液(溶液4)的游离葡萄糖浓度在这几种溶液中是最低的，该值比只有底物麦芽糖的对照溶液(溶液2)的游离葡萄糖浓度还低。由此表明实质上帕拉金糖的效果最高。但是关于麦芽糖酶活性抑制效果，虽然帕拉金糖显示出麦芽糖酶活性抑制效果，但是所有难消化性糊精显示比帕拉金糖还高的麦芽糖酶活性抑制率。由表1和表2可知，如果对在底物蔗糖中添加帕拉金糖、Fiberso12和PinefiberBi任意一种的溶液(溶液5、溶液10、溶液ll)的结果进行比较，添加帕拉金糖的试验溶液(溶液5)的游离葡萄糖浓度在这几种溶液中是最低的，该值比只有底物蔗糖的对照溶液(溶液3)的游离葡萄糖浓度还低。由此表明，关于蔗糖酶活性抑制效果，在表1和表2的试验试样中帕拉金糖显示最高的效果。实施例2(由帕拉金糖产生的蔗糖酶活性抑制强度的确认)作为试验试样使用含有5%蔗糖和帕拉金糖分别为0.5%，1.0、3.0、5.0%.的试验溶液，除此之外，按照与实施例l相同的顺序，进行蔗糖酶活性抑制强度试验。另外，以5%蔗糖作为对照溶液(0.1M磷酸缓沖液(pH6.8))。把结果出示在图1中。图1表明尽管抑制剂帕拉金糖本身通过小肠酶液中的酶(异麦芽糖酶)分解，但游离葡萄糖的生成量随着帕拉金糖的添加浓度增加而减少。因此帕拉金糖对蔗糖酶活性的抑制与其浓度存在依赖关系。实施例3(由还原帕拉金糖、帕拉金糖和异麦芽糖引起的蔗糖酶活性抑制效果的确认)。作为试验试样使用还原帕拉金糖或帕拉金糖，作为底物使用蔗糖，除此之外，按照与实施例1相同的顺序，进行试验。将试验试样和底物溶解在0.1M磷酸緩冲液(pH6.8)中并达到下面叙述的表3所示的浓度，配制2种试验溶液。另外，将试验试样和底物分别溶解在0.1M磷酸緩冲液(pH6.8)中并使其达到下面叙述的表3所示的浓度，配制对照溶液。使用上述试验溶液和对照溶液各5ml，按照与实施例1相同的顺序进4亍酶反应，测定葡萄糖浓度和果糖浓度。关于果糖浓度，使用F-kit果糖(ROCHE公司制)测定。从果糖浓度测定值中扣除空白溶液(只有0.1M磷酸緩冲液)的值，求出游离果糖浓度(g/1)。把结果出示在下面所述的表3中。[表3]<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>当在蔗糖中添加还原帕拉金糖或帕拉金糖时，游离葡萄糖浓度和游离果糖浓度均低于只有蔗糖的对照溶液中的游离葡萄糖浓度和游离果糖浓度。这表明还原帕拉金糖和帕拉金糖具有蔗糖酶抑制效果。[试验例2](由异麦芽糖引起的蔗糖酶活性抑制效果的确认)作为试验试样使用异麦芽糖，除此之外，按照与实施例l相同的顺序进行试验。所谓异麦芽糖是指D-葡萄糖的2个分子通过oc-l,6-葡糖苦键构成的二糖。将试验试样和底物溶解在0.1M磷酸緩冲液(pH6.8)中并达到下面叙述的表4所示的浓度，配制试验溶液。另外将试验试样和底物分别溶解在O.IM磷酸緩冲液(pH6.8)中并达到下面叙述的表4所示的浓度，配制对照溶液。使用上述试-险溶液和对照溶液各5ml，按照与实施例l相同的顺序进行酶反应，求出反应后各溶液中的游离葡萄糖浓度、游离果糖浓度、对蔗糖酶的分解抑制率。把结果出示在下面所述的表4中。[表4]试样游离葡萄糖浓度(g/D游离果糖浓度(g/1)对蔗糖酶的分解抑制率(w5%异麦芽糖2.140.02___""^^5%蔗糖1.011.09____----一5%蔗糖+5%异麦芽糖2.180.7031在蔗糖中添加异麦芽糖的试验溶液中可以看到由于异麦芽糖分解而引起游离葡萄糖浓度(2.18g/l)增加。但是，在蔗糖中添加异麦芽糖的试验溶液，其游离果糖浓度(0.70g/l)低于只有蔗糖的对照溶液的游离果糖浓度(1.09g/1)。因此异麦芽糖具有蔗糖酶活性抑制效果。但是异麦芽糖由异麦芽酶引起分解的速度比蔗糖因蔗糖酶引起的分解速度要快，所以游离单糖类的总浓度(2.18+0.70=2.88g/1)与只有蔗糖的对照溶液的总浓度(1.01+1.09=2.10)要高一些。[试验例3](由还原帕拉金糖、帕拉金糖和异麦芽糖引起的乳糖酶活性抑制效果的确认)作为试验试样使用还原帕拉金糖、帕拉金糖或异麦芽糖，作为底物使用乳糖，除此之外，按照与实施例1相同的顺序进行试验。把试验试样和底物溶解在O.IM磷酸緩冲液(pH6.8)中并达到下面叙述的表5所示的浓度，配制3种试验溶液。另外，将试验试样和底物分别溶解在0.1M磷酸緩沖液(pH6.8)中并达到下面叙述的表5所示的浓度，配制对照溶液。使用上述试马全溶液和对照溶液各5ml，按照与实施例l相同的顺序进行酶反应，测定葡萄糖浓度、果糖浓度和半乳糖浓度。关于半乳糖浓度，使用F-kit半乳糖(ROCHE公司制)测定。从半乳糖浓度的测定值中扣除空白溶液(只有O.IM磷酸緩冲液)的值，求出游离半乳糖的浓度(g/1)。把结果出示在下面所述的表5中。<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>在乳糖中添加还原帕拉金糖、帕拉金糖和异麦芽糖的试验溶液，无论在哪一个体系中，都可以看到游离半乳糖的浓度(分别为0.13、0.12、0.06g/l)降低。但是只有底物乳糖的对照溶液的情况其游离糖浓度也低(0.16g/l)，由此看不到太大区别。另外试验溶液中游离葡萄糖浓度也没有降低，由此可以判断所用3种试验试样中没有观察到乳糖酶活性抑制效果。(实施例4)(由帕拉金糖以及还原帕拉金糖引起的葡糖淀粉酶活性抑制效果的确认)作为试验试样使用帕拉金糖或还原帕拉金糖，作为底物使用可溶性淀粉，除此之外，按照与实施例1相同的顺序进行试验。将试验试样和底物溶解在O.IM磷酸緩沖液(pH6.8)中并达到下面叙述的表6所示的浓度，配制2种试验溶液。另外，将试验试样和底物分别溶解在0.1M磷酸緩沖液(pH6.8)中并达到下面叙述的表6所示的浓度，配制对照溶液。使用上述试验溶液和对照溶液各5ml，按照与实施例l相同的顺序进行酶反应，求出游离葡萄糖浓度和分解抑制率。把结果出示在表6中。[表6]<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>表6表明如果作为试验试样添加帕拉金糖和还原帕拉金糖，则从可溶性淀粉游离的葡萄糖量降低。因此这些试验试样具有葡糖淀粉酶活性抑制效果。实施例5(由trehalulose引起的蔗糖酶活性抑制效果的确认)作为试验试样使用trehalulose,作为底物使用蔗糖，除此之外，按照与实施例l相同的顺序进行试验。把试验试样和底物溶解在O.IM磷酸緩沖液(pH6.8)中并达到下面叙述的表7所示的浓度，配制试验溶液。另外，将试验试样和底物分别溶解在O.IM磷酸緩沖液(pH6.8)中并达到下面叙述的表7所示的浓度，配制对照溶液。使用上述试-验溶液和对照溶液各5ml，按照与实施例1相同的顺序进行酶反应，测定游离葡萄糖浓度。把结果出示在表7中。[表7]<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>表7表明如果作为试验试样添加trehalulose,则从蔗糖游离的葡萄糖量从1.628g/l降低至1.403g/l。因此trehalulose具有蔗糖酶活性抑制效果。[试验例4](由海藻糖引起的蔗糖酶活性抑制效果的确认)作为试验试样使用海藻糖，作为底物使用蔗糖，除此之外，按照与实施例1相同的顺序进行试验。海藻糖是2个分子的D-葡萄糖通过其还原基结合的二糖类。把试验试样和底物溶解在0.1M磷酸緩冲液(pH6.8)中并达到下面叙述的表8所示的浓度，配制试验溶液。另外，将试验试样和底物分别溶解在0.1M磷酸緩冲液(pH6.8)中并达到下面叙述的表8所示的浓度，配制对照溶液。使用上述试验溶液和对照溶液各5ml，按照与实施例1相同的顺序进行酶反应，测定游离葡萄糖浓度。把结果出示在表8中。<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>表8表明如果作为试验试样添加海藻糖，则其葡萄糖浓度为1.683g/l，比只有蔗糖的对照溶液的蔗糖浓度(1.628g/l)要高。因此不能确认海藻糖具有实质上的蔗糖酶活性抑制效果。实施例6(由trehalulose引起的葡糖淀粉酶活性抑制效果的确认)作为试验试样使用trehalulose,作为底物使用可溶性淀粉，除此之外，按照与实施例1相同的顺序进行试-险。4巴试验试样和底物溶解在O.IM磷酸緩冲液(pH6.8)中并达到下面叙述的表9所示的浓度，配制试验溶液。另外，将试验试样和底物分别溶解在0.1M磷酸緩冲液(pH6.8)中并达到下面叙述的表9所示的浓度，配制对照溶液。使用上述试验溶液和对照溶液各5ml，按照与实施例l相同的顺序进行酶反应，求出游离葡萄糖浓度和分解抑制率。把结果出示在表9中。[表9]<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>表9表明如果作为试验试样添加trehalulose,则从可溶性淀粉游离的葡萄糖量降低。因此trehalulose具有葡糖淀粉酶活性抑制效果。[试验例5](由海藻糖引起的葡糖淀粉酶活性抑制效果的确认)作为试验试样使用海藻糖，作为底物使用可溶性淀粉，除此之外，按照与实施例1相同的顺序进行试验。把试验试样和底物溶解在0.1M磷酸緩沖液(pH6.8)中并达到下面叙述的表10所示的浓度，配制试验溶液。另外，将试验试样和底物分别溶解在0.1M磷酸緩冲液(pH6.8)中并达到下面叙述的表10所示的浓度，配制对照溶液。使用上述试验液和对照溶液各5ml，按照与实施例1相同的顺序进行酶反应，求出游离葡萄糖浓度和分解抑制率。把结果出示在表10中。[表io]<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>表10表明如果作为试验试样添加海藻糖，则生成的游离葡萄糖浓度(2.349g/l)比只有可溶性淀粉的对照溶液的游离葡萄糖浓度(2.400g/l)还要低若干。因此海藻糖具有葡糖淀粉酶活性抑制效果，但是该效果非常弱，这一点是非常明确的。实施例7(由组合试验试样引起的蔗糖酶活性抑制效果和葡糖淀粉酶活性抑制效果的确认)作为试验试样使用帕拉金糖、trehalulose或还原帕拉金糖的组合，作为底物使用蔗糖和可溶性淀粉，除此之外，按照与实施例l相同的顺序进行试验。关于蔗糖酶活性，把试验试样和底物的组合溶解在0.1M磷酸緩冲液(pH6.8)中并达到图2所示的浓度，配制4种试验溶液。同样关于葡糖淀粉酶的活性，把试验试样和底物的组合溶解在O.IM磷酸緩沖液(pH6.8)中并达到图3所示的浓度，配制4种试验溶液。另外，作为对照溶液，配制5%蔗糖和5%可溶性淀粉(0.1M磷酸緩冲液(pH6.8))。使用上述试验溶液和对照溶液各5ml，按照与实施例l相同的顺序进行酶反应，求出游离葡萄糖浓度。把结果出示在图2和图3中。图2和图3表明作为试验试样不仅添加帕拉金糖、trehalulose或还原帕拉金糖的单独任意一种，而且对它们进行组合添加时对蔗糖酶活性和葡糖淀粉酶活性都具有抑制效果。实施例8帕拉金糖(Pal)相对于作为底物蔗糖(Suc)浓度的添加比率的关系1.试验方法A.配制试才羊将表11所示浓度的20种试样(A-1~20)溶解在O.IM磷酸緩冲液(pH6.8)中配制使其最终体积达到2.5ml。[表ll]A<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>*[]内的数值表示以蔗糖重量为ioo时的帕拉金糖的重量％。B.小肠酶液的配制与实施例1的小肠酶液的配制方法相同。C.活性测定法在上述20种试样各2.5ml中分别加入小肠酶液0.15ml后置于37°C的水浴中，振荡(60次/分钟)，并同时使其反应10分钟。反应结束后，为了使酶失活，在沸腾的热水浴中加热3分钟。关于空白试样(O.IM磷酸緩沖液(pH6.8))，添加小肠酶液0.15ml后直接使酶失活。与实施例1一样，使用F-kit葡萄糖(ROCHE公司制)测定反应后各溶液中的葡萄糖浓度。2.结果把结果出示在图4和图5中。当蔗糖浓度为0.5%时，蔗糖的分解抑制效果不明显(图5)。但是当蔗糖浓度为3%、5%、10%和15%时，帕拉金糖相对于蔗糖相对重量的添加比率在10%以上的情况下，蔗糖分解受到抑制(图4)。因此，当蔗糖浓度在3%以上时，帕拉金糖相对于蔗糖相对重量的添加比率在10%以上时可以确认蔗糖酶的活性抑制。实施例9还原帕拉金糖(Nit)相对于作为底物蔗糖(Suc)浓度的添加比率的关系1.试一验方法将表12所示浓度的20种试样(B-1~20)溶解在0.1M磷酸緩沖液(pH6.8)中配制使其最终体积达到2.5ml。除此之外，按照实施例8的^式-险方法进4亍。[表12]<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>*[]内的数值表示以蔗糖重量为ioo时的还原帕拉金糖的重量％。2.结果把结果出示在图6和图7中。在所有蔗糖浓度(0.5%、3%、5%、10%以及15%)的情况下，均显示蔗糖的分解抑制效果。另外，蔗糖的分解抑制与还原帕拉金糖添加比率成正比例。因此，与实施例8的帕4立金糖相比，可以推测还原帕拉金糖的蔗糖分解抑制效果更高。实施例10帕拉金糖(Pal)相对于作为底物糊精(Dex)浓度的添加比率的关系1.i式-验方法将表13所示浓度的16种试样(C-1~20)溶解在O.IM磷酸緩冲液(pH6.8)中配制使其最终体积达到2.5ml。除此之外，按照实施例8的试马企方法进4亍。[表13]<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>*[]内的数值表示以糊精重量为ioo时的帕拉金糖的重量％。2.结果把结果出示在图8中。当帕拉金糖的添加比率为5%时，在糊精浓度为10%的情况下没有显示糊精的分解抑制效果。但是当帕拉金糖的添加比率在10%以上时，在所有糊精浓度(0.5%、2%、5%以及10%)的情况下，均显示糊精的分解抑制效果。实施例11还原帕拉金糖(Pal)相对于作为底物糊精(Dex)的添加比率的关系1.试验方法将表14所示浓度的16种试样(D-1~20)溶解在O.IM磷酸緩沖液(pH6.8)中配制使其最终体积达到2.5ml。除此之外，按照实施例8的试-险方法进4亍。[表14]<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>*[]内的数值表示以糊精重量为ioo时的还原帕拉金糖的重量％。2.结果把结果出示在图9中。当还原帕拉金糖的添加比率为5%以上时，在所有糊精浓度(0.5%、2%、5%和10%)的情况下，均显示糊精的分解抑制效果。实施例12(使用帕拉金糖的本发明制剂，颗粒)使用结晶帕拉金糖(粉末)制造本发明的制剂(颗粒)。以40kg/小时的速度从双螺杆挤塑机的进料口投入结晶帕拉金糖(商品名结晶帕拉金糖IC,新三井制糖抹式会社制)，在160~180。C下使其熔化。接着以2kg/小时的速度添加水，冷却.析出得到粉末。对该粉末进行筛选，得到颗粒(10~40目。99%以上)。实施例13(使用还原帕拉金糖的本发明制剂，颗粒)使用还原帕拉金糖粉末(商品名八，千二'7卜PNM-2,新三井制糖林式会社制)替代结晶帕拉金糖，除此之外，按照与实施例12相同的顺序制造颗粒。实施例14(使用帕拉金糖的本发明制剂，粉末混合制剂)按照以下配方，用常规方法，使用万能混合机制造本发明的制剂(粉末混合制剂)。结晶帕拉金糖85.7重量％(商品名结晶帕拉金糖IC,新三井制糖林式会社制)粉末果汁10重量％柠檬酸酐3重量％种檬酸钠0.4重量％L-抗坏血酸0.5重量％抗坏血酸钠0.3重量％核黄素(含量为10重量％)0.1重量％实施例15(使用还原帕拉金糖的本发明制剂，粉末混合制剂)使用还原帕拉金糖粉末(商品名，f二';/卜PNM-2,新三井制糖林式会社制)替代结晶帕拉金糖，除此之外，按照与实施例14相同的顺序制造粉末混合制剂。实施例16(使用帕拉金糖的食品，软糖料(7才乂夕'^))使用以下配方，制造含有本发明制剂的软糖料。以120kg/小时的速度从双螺杆挤塑机的进料口投入结晶帕拉金糖，在16020(TC下使其熔化。接着以5.6kg/小时添加水，冷却、使其微结晶。最后以100kg/小时注入帕拉金糖浆，冷却并同时进行混合。结晶帕拉金糖120重量份(商品名结晶帕拉金糖IC，新三井制糖抹式会社)帕拉金糖浆100重量份(商品名结晶帕拉金糖糖浆-ISN,新三井制糖抹式会社)按照上述方法制造的软糖料，可以用作软糖果的原料和烤制糕点、面包糕点的装饰原料。实施例17(使用还原帕拉金糖的食品，软糖料)使用还原帕拉金糖(商品名川，f-少卜PNM-2,新三井制糖抹式会社制)替代结晶帕拉金糖；使用还原麦芽糖糖稀(商品名7匕'7卜，林原商事)替代帕拉金糖浆，除此之外，按照与实施例16相同的顺序制造软糖料。实施例18(同时使用帕拉金糖和trehalulose的食品，软糖料)按照以下配方制造含有本发明制剂的软糖料。以230kg/小时的速度从双螺杆挤塑机的进料口投入结晶帕拉金糖，在机筒温度160~200。C下使其熔化。接着以21.0kg/小时注入水、并且冷却，使其微结晶。最后以100kg/小时注入含有本申请发明制剂的trehalulose浆，冷却并同时进行混合。trehalulose浆100重量4分结晶帕拉金糖230重量份(商品名结晶帕拉金糖-IC,新三井制糖抹式会社制)按照上述方法制造的软糖料可用于软糖果的原料、烤制糕点或面包糕点的装饰原料。实施例19(同时使用还原帕拉金糖和trehalulose的食品，软糖料)使用还原帕拉金糖(商品名八，f二7卜PNM-2,新三井制糖抹式会社)替代结晶帕拉金糖，除此之外，按照与实施例18相同的顺序制造软糖料。实施例20(利用帕拉金糖的食品，片状糖果)按照以下配方制造含有本发明制剂的片状糖果。制造是通过用300kg/cm2压力对下述所示配方的混合粉末进行压片，成型直径为18mm、厚为5mm、重量为1.5g的片状糖果。粉末帕拉金糖55重量份(商品名帕拉金糖粉末-ICP，新三井制糖林式会社制)柠檬酸1重量份糖酯1重量份糖精0.05重量份维生素P水柠檬香料0.0002重量份0.6重量份适量实施例21(利用还原帕拉金糖的食品，片状糖果)按照以下配方制造含有本发明制剂的片状糖果。制造是通过用300kg/cm2压力对下述所示配方的混合粉末进行压片，成型直径为18mm、厚为5mm、重量为1.5g的片状糖果。还原帕拉金糖78.0重量％(商品名，f-卜PNM-2,新三井制糖株式会社)维生素C颗粒19.5重量％粉末香料0.4重量％糖精0.2重量％滑爽光泽剂1.9重量％实施例22(同时使用帕拉金糖和还原帕拉金糖的食品，糖衣片状糖果)使用实施例21制造的制剂(片状糖果)，制造含有本发明制剂的糖衣片状糖果。制造是通过在包被盘中加入用实施例17制造的制剂(片剂)，进行软包被，以1:2(重量比)的比率交替包被配方(a)的浆和粉末还原帕拉金糖，接着用配方(b)的浆，进行硬包被。包被后使用常温空气进行风干。(a)4欠包^皮用粉末还原帕拉金糖62重量％(商品名还原帕拉金糖(typeGS)，新三井制糖抹式会社制)阿拉伯胶6.5重量％水31.5重量％(b)石更包^皮用粉末还原帕拉金糖65重量％(商品名还原帕拉金糖(typeGS),新三井制糖林式会社制)阿拉伯胶3.5重量％水31.5重量％柠檬香料适量实施例23(利用帕拉金糖的食品，饮料)使用实施例14制造的制剂(粉末混合剂)，制造含有本发明制剂的饮料。制造是通过将实施例10制造的25g制剂溶解在热水200mL中进行的。实施例24(利用trehalulose的食品，饮料)用以下的比率制造含有本发明制剂的清凉饮料。制造是通过将以下原料溶解在热水250mL中后，填充到饮料罐(250mL)用中进行的。trehalulose浆70.0重量份(商品名；、^，、、47-75，新三井制糖林式会社制)柠檬酸0.67重量份柠檬酸钠0.34重量份哈密瓜香料0.25重量份柠檬香料0.014重量份实施例25(同时使用帕拉金糖和trehalulose的食品，饮料)用以下的比率制造含有本发明制剂的清凉饮料水。制造是通过将以下原料，按以下浓度溶解在热水中并达到250g后，填充到饮料罐(250mL)用中进行的。结晶帕拉金糖4重量份(商品名结晶帕拉金糖IC,新三井制糖抹式会社制)trehalulose浆6.0重量份(商品名；、/Ur<T-75，新三井制糖抹式会社制)柠檬酸0.15重量份维生素C0.03重量份氯化钠0.05重量份氯化钾0.04重量份氯化4丐0.012重量份碳酸镁0.002重量份谷氨酸钠0.006重量4分斯特维亚菊甜味素0.01重量份0細4重量份适量维生素P香料实施例26(使用trehalulose的食品，运动饮料)用以下的比率制造含有本发明制剂的运动饮料。制造是通过将以下原料溶解在热水215mL中后，填充到饮料罐(250mL)用中进行的。50.0重量份trehalulose83~89%，新三井制糖抹式会0.075重量份0.005重量伤、0.255重量份0.03重量份0.03重量份0.36重量份0.03重量份trehalulose浆(商品名；、/krT*-"社制)维生素C维生素B1盐酸盐柠檬酸钠氯化镁乳酸4丐柠檬酸酐香料实施例27(使用trehalulose的食品，糖果)用以下配方制造含有本发明制剂的硬糖果。制造是通过将trehalulose浆添加到溶解槽中进行加热搅拌。接着在86.7KPaGauge(真空度650mmHg)的压力下，进行减压加热至120°C，与柠檬酸、糖精、酒石酸、红色添加剂、蓝色添加剂和葡萄香料进行混合。冷却到约70~80。C后进行成型使1粒达到4g,然后分别对每粒进行包装。trehalulose浆100重量份(商品名、；》r4T-75,trehalulose83~89%，新三井制糖才朱式会社制)葡萄香料0.025重量份(No.6-6240,长谷川香料抹式会社制)红色添加剂0.10重量份(TH-L，长谷川香料抹式会社制)蓝色添加剂0.05重量份(TH-3L,长谷川香料株式会社制)柠檬酸1.00重量份0.30重量份0.12重量份酒石酸糖精实施例28(同时使用帕拉金糖和trehalulose的食品，糖果)用以下配方制造含有本发明制剂的硬糖果。制造是通过首先将结晶帕拉金糖、trehalulose浆和水添加到溶解槽中进行加热搅拌溶解。接着在700mmHg的压力下，进行减压加热至120。C温度，与柠檬酸、糖精、维生素P、柠檬香料进行混合。冷却到约7080。C后进行成型使1粒达到4g，然后分别对每粒进行包装。70重量份新三井制糖林式会社制)40重量份井制糖抹式会社制)2重量份0.07重量份0.003重量4分15重量份结晶帕拉金糖(商品名结晶帕拉金糖ICtrehalulose浆(商品名；、八r4T*-75,新三柠檬酸糖精维生素P水柠檬香料实施例29(使用trehalulose的食品，果汁饮料)用以下配方制造含有本发明制剂的果汁饮料(甜橙味)。制造是首先通过将帕拉金糖浆和水混合后，接着加热至90。C，并同进逐渐添加凝胶剂，使其溶化。接着冷却到约7(TC后添加其它剩余的原料，搅拌溶解。把该溶解物填充到利乐包装袋中，密封后在9CTC下进行20分钟灭菌处理，并进4于冷却。帕拉金糖浆(Bx.75)15重量份(商品名帕拉金糖糖浆-TN,新三井制糖抹式会社制)凝胶剂1重量份1/5浓缩橙汁4重量份水80重量份柠檬酸0.35重量份柠檬酸钠维生素CP隱胡萝卜素斯特维亚菊甜味素维生素P橙味香料0.2重量份0.6重量份0.01重量份0.01重量份0.0004重量4分适量实施例30(同时使用帕拉金糖和trehalulose的食品，果汁饮料)用以下配方制造含有本发明制剂的果汁饮料(甜橙味)。制造是首先通过将帕拉金糖、trehalulose浆和水混合后，加热至90。C,并同时逐渐添加凝胶剂，使其溶化。接着冷却到约7(TC后添加其它剩余的原料，搅拌溶解。把该溶解物填充到利乐包装袋中，密封后在9(TC下进行20分钟灭菌处理，并进^f于冷却。5重量份新三井制糖林式会社制)IO重量份新三井制糖抹式会社制)1重量份结晶帕拉金糖(商品名:结晶帕拉金糖-IC,trehalulose浆(商品名帕拉金糖糖浆-TN,凝胶剂1/5浓缩橙汁水柠檬酸柠檬酸钠维生素Ce-胡萝卜素斯特维亚菊甜味素维生素P橙味香料4重量份80重量份0.35重量份0.20重量份0.6重量份0.01重量份0.01重量份0.0004重量份适量实施例31(使用帕拉金糖的食品，热蛋糕)用以下配方制造含有本发明制剂的热蛋糕。首先将小麦粉、发酵粉和粉末帕4立金糖混合过筛。将牛奶和鸡蛋充分混溶，并向其中加入过筛的粉类，用起泡器进行粗混合至均匀，作为生坯料。将生坯料放入到加热至20(TC的烤盘中，待呈黄褐色，上面起泡后，翻面，待反面也呈黄褐色后取出。加上奶(黄)油和枫糖浆，即制造完毕。实施例32(使用trehalulose的食品，热蛋糕)用以下配方制造含有本发明制剂的热蛋糕。首先将小麦粉、发酵粉混合过筛。将鸡蛋和trehalulose浆混溶，向其中加入牛奶混合并充分搅拌，并向其中加入过筛的粉类，用起泡器进行粗混合至均匀，作为生坯料。将生坯料放入到加热至20(TC的烤盘中，待呈黄褐色，上面起泡后翻面，待反面也呈黄褐色后取出。加上奶(黄)油和枫糖浆，即制造完毕。小麦粉200g发酵粉6g牛奶150ml鸡蛋50gtrehalulose浆90g(商品名；、47-75,新三井制糖抹式会社制)水45ml奶(黄)油10g楓糖浆15g实施例33(含有帕拉金糖或还原帕拉金糖的蔗糖基材的方便装袋砂糖)在蔗糖1000g中混合帕拉金糖(商品名结晶帕拉金糖IC，三井制糖抹式会社制)或还原帕拉金糖(商品名川，f-7卜PN,三井(商品名粉末帕拉金糖ICP,新三井制糖林式会社制)制糖林式会社制)lOOg混合，将混合物填充到方便装包装中使每1个包装为5g。如果将所得方便装袋砂糖溶解在咖啡或红茶150ml中就会得到含蔗糖3.0%、帕拉金糖或还原帕拉金糖0.3%的饮料。实施例34(含有蔗糖和trehalulose的一份量包装糖浆)在蔗糖5oog中混合;、4T-85(三井制糖抹式会社制)6Sg(作为trehalulose为50g)和水l"g,制造每1个包装为7.4g的一份量包装糖浆。如果将所得一份量包装糖浆溶解在水咖啡或冰茶165ml中就会得到含蔗糖3.0%、trehalulose0.3。/o的饮料。实施例35(含有帕拉金糖、trehalulose或还原帕拉金糖的蔗糖基材的々欠料)用下面叙述的表15所示配方配制饮料。[表15]<table>tableseeoriginaldocumentpage36</column></row><table>[表16]<table>tableseeoriginaldocumentpage37</column></row><table>[表17]1<table>tableseeoriginaldocumentpage38</column></row><table>实施例38(使用帕拉金糖的饲料)按照下面叙述的表18所示配方，制造含有本发明制剂的饲料。标准配方作为参考，其它配方也属于本发明的实施例配方。配方用重量％表示。[表18]<table>tableseeoriginaldocumentpage40</column></row><table>实施例39(混合蔗糖基材的饲料原料)用下面叙述的表19所示配方制造混合祠料原料。[表19]i.使用帕拉金糖<table>tableseeoriginaldocumentpage41</column></row><table>2.使用trehalulose<table>tableseeoriginaldocumentpage41</column></row><table>3.使用还原帕拉金糖<table>tableseeoriginaldocumentpage41</column></row><table>三井制糖林式会社制该蔗糖基材的混合饲料原料为浆状，与其它饲料原料混合使用。其它伺料原料，可以使用干燥植物和干燥蛋白质等不含蔗糖、淀粉、糊精的祠料。通过对于其它祠料原料1000g混合该含蔗糖基材的混合饲料原料47.1g,可以构成含蔗糖3%和本发明抑制剂0.3%的詞料。实施例40(混合糊精基材的饲料)用下面叙述的表20所示配方对原料进行混合，并且用流动层干燥机进行干燥，配制颗粒状饲料。[表20]i.使用帕拉金糖<table>tableseeoriginaldocumentpage42</column></row><table>2.使用trehalulose<table>tableseeoriginaldocumentpage42</column></row><table>3.使用还原帕拉金糖<table>tableseeoriginaldocumentpage42</column></row><table>三丼制糖林式会社制该颗粒饲料与其它饲料原料混合使用。其它饲料原料，可以使用干燥植物和干燥蛋白质等不含蔗糖、淀粉、糊精的詞料。通过对于其它词料原料1000g混合该颗粒状饲料22Jg,可以构成含糊精2%和本发明抑制剂0.2%的伺料。附图的简单说明[图1]是表示由帕拉金糖引起的蔗糖酶活性抑制强度的图表。[图2]是表示由试验试样组合引起的蔗糖酶活性抑制效果的图表。[图3]是表示由试验试样组合引起的葡糖淀粉酶活性抑制效果的图表。[图4]是表示由蔗糖浓度和相对于该蔗糖浓度的帕拉金糖添加比率引起的蔗糖酶活性抑制效果的曲线图。[图5]是表示由蔗糖浓度和相对于该蔗糖浓度的帕拉金糖添加比率引起的蔗糖酶活性抑制效果的曲线图。[图6]是表示由蔗糖浓度和相对于该蔗糖浓度的还原帕拉金糖添加比率引起的蔗糖酶活性抑制效果的曲线图。[图7]是表示由蔗糖浓度和相对于该蔗糖浓度的还原帕拉金糖添加比率引起的蔗糖酶活性抑制效果的曲线图。[图8]是表示由糊精浓度和相对于该糊精浓度的帕拉金糖添加比率引起的葡糖淀粉酶活性抑制效果的曲线图。[图9]是表示由糊精浓度和相对于该糊精浓度的还原帕拉金糖添加比率引起的葡糖淀粉酶活性抑制效果的曲线图。权利要求1.蔗糖酶活性抑制剂，其含有选自帕拉金糖、trehalulose和还原帕拉金糖的1种以上的糖类。2.葡糖淀粉酶活性抑制剂，其含有选自帕拉金糖、trehalulose和还原帕拉金糖的1种以上的糖类。3.—种食品，其含有权利要求1和/或2中所述的抑制剂。4.一种饲料，其含有权利要求1和/或2中所述的抑制剂。5.食品或者饲料，其含有权利要求1中所述的抑制剂和蔗糖。6.食品或者饲料，其含有权利要求2中所述的抑制剂和淀粉。7.食品或者飼料，其含有权利要求2中所述的抑制剂、淀粉和/或糊精。8.食品或者饲料，其含有3重量％以上的蔗糖，以及相对于蔗糖重量为10重量％以上的、权利要求1中所述的蔗糖酶活性抑制剂。9.食品或者饲料，其含有2重量％以上的淀粉和/或糊精，以及相对于淀粉和/或糊精重量为10重量％以上的、权利要求2中所述的葡糖淀粉酶活性抑制剂。全文摘要本发明提供蔗糖酶活性抑制剂和葡糖淀粉酶活性抑制剂，它们含有选自帕拉金糖、trehalulose和还原帕拉金糖的1种以上的糖类。另外，本发明还提供含有该蔗糖酶活性抑制剂和/或葡糖淀粉酶活性抑制剂的食品和饲料。文档编号A61K31/7016GK101151036SQ20068001029公开日2008年3月26日申请日期2006年3月28日优先权日2005年3月29日发明者合田敏尚,樫村淳,永井幸枝,江桥正申请人:三井制糖株式会社