包含活性染料的角蛋白结合效应分子的制作方法

文档序号:1127758阅读:924来源:国知局

专利名称::包含活性染料的角蛋白结合效应分子的制作方法
技术领域
:本发明涉及包含活性染料和角蛋白结合多肽的角蛋白结合效应分子、其在染发制品中的用途以及所述染发制品。本发明还涉及染发方法。现有技术根据染发组合物(染发剂)耐退色性(colorresistance)情况的不同将其分成三类仅持续l-2次洗发的暂时性染发剂;需要在8-10次洗发后续染的半永久性染发剂;和不能洗掉的永久性染发剂。暂时性和半永久性染发剂称作非氧化型染发剂。在这种情况下,染料本身定位在毛发的角蛋白上或透入毛发纤维。使用永久性染发剂,即迄今为止最广泛应用的染发剂,在用作氧化剂的过氧化氢的存在下,无色前体由于化学反应而直接在毛发上或毛发中形成颜料。在这种情况下,毛发被完全彻底地染色,颜料不能被洗掉。这些染发剂称作氧化型染发剂。永久性染发对洗发、光效应和其它毛发处理方法极为耐受。它得到了最广泛的应用并且在染发剂的市场份额中约占80%。仅需要大约每个月因毛发生长而补染发根。使用该染色系统,经本色中间体或前体的化学反应,染料直接形成在毛发上和毛发中。此处在氨或单乙醇胺的存在下,通过过氧化氢而发生氧化反应、偶联过程以及缩合反应。由此需要应用过氧化氢作为氧化剂,因为它不仅启动染料形成,而且同时还破坏了毛发中的黑色素,从而引起漂白,有鉴于此,染色过程也称作淡染。永久性染发剂原则上还包括所谓的自氧化染料,甚至空气氧都能使之氧化。染发剂通常为水性溶液或乳剂的形式,优选为增稠的水性溶液或乳剂,且除染料外还包含,例如脂肪醇和/或其它油组分、软化剂和表面活性剂,且适宜的情况下还包含醇类。氧化型染发剂一般包括两类组分,即(A)包含染料的染料载体物质;和(B)氧化剂制品。在施用前即刻混合这些组分,然后施用于染色的纤维。常用的这类永久性或氧化型染发剂的施用形式为染发霜和染发胶。据研究,在工业化国家35%的女性和10%的男性定期染发。然而,化学染发剂长久以来一直存有争议,因为健康风险尚未排除。因此,每次染发的同时还发生毛发损伤。色素必须通过保护性(predective)鳞状层掺入毛发的皮质层。如上所述,染发剂包含两类组分氧化剂和染色霜。存在于染发剂中的芳族胺特别是在目前受到了批评。认为它们在染色过程中,通过头部进入体内并在肝脏中分解。随后在膀胱中,降解产物有时被转化成致癌物质。达特茅斯医学院(DartmouthMedicalSchool)在"国际癌症杂志(InternationalJournalofCancer)"(A.Andres:IntJCancer2004;109:581-586)中的近期研究发现染发与膀胱癌之间存在可能的相关性与不染发的女性相比,定期使用永久性染发剂的女性患膀胱癌的风险平均提高1.5國2.3倍。尚未在可接受性方面接受测试的永久性染发剂即将在欧盟(EU)禁用。目前,这可能影响半数所有的染发剂。本发明的一个目的在于提供施用于皮肤或毛发,特别是染色皮肤、毛发或指甲的新型皮肤美容活性成分化合物及其生产方法。最好鉴定这样的活性成分化合物,它们具有角蛋白结合特性并且还适合于生产化妆品组合物和/或染发剂。此外,本发明的目的在于鉴定能够通过共价键与具有角蛋白结合特性的多肽偶联的适宜化合物。特别地,本发明的目的在于提供染发、优选可逆染色的创新性方法,其中对毛发的损伤尽可能减小。令人惊讶的是,这些目的可以如下所述通过使化学染料与角蛋白结合多肽偶联实现。发明概述本发明的第一个实施方案涉及角蛋白结合效应分子,其包含(a)至少一种活性染料(i)和(b)至少一种角蛋白结合多肽(ii)。在一个优选的实施方案中,具体的角蛋白结合效应分子包含至少一种角蛋白结合多肽(ii),它对人皮肤角蛋白、毛发角蛋白或指曱角蛋白具有结合亲和力。优选(b)中指定的角蛋白结合多肽(ii)包含(a)至少一种具有SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170中所示序列之一的多肽;或(b)与至少一种SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、卯、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示的序列具有至少40。/。同一性且能够结合角蛋白的多肽。优选本发明使用的角蛋白结合多肽(ii)由这样的核酸分子编码,所述核酸分子包含至少一种选自如下的核酸分子(a)编码多肽的核酸分子,所述的多肽包含SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示的序列;(b)包含至少一种SEQIDNo.:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、145、149、152、159、161、163、165、167或169所示序列的多核苷酸的核酸分子;(c)编码SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示序列的多肽的核酸分子;(d)具有这样的核酸序列的核酸分子,所述核酸序列对应于至少一种SEQIDNo.:l、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、145、149、152、159、161、163、165、167或169所示的序列;或为通过取代、缺失或插入从中衍生的核酸分子,其编码的多肽与至少一种SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、卯、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示的序列具有至少40%的同一性并且能够结合角蛋白;(e)编码单克隆抗体识别的多肽的核酸分子,所述单克隆抗体抗如(a)至(c)中所示核酸分子编码的多肽;(f)编码角蛋白结合蛋白的核酸分子,所述核酸分子在严格条件下与如(a)至(c)中所示的核酸分子杂交;(g)编码角蛋白结合蛋白的核酸分子,在严格杂交条件下,利用如(a)至(c)中所示的核酸分子或其包含至少15个核苷酸(nt)、优选20nt、30nt、50nt、100nt、200nt或500nt的部分片段作为探针,能够从DNA库中分离所述核酸分子;(h)能够通过序列SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、卯、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示氨基酸序列之一的反向翻译产生的核酸分子。在本发明的另一个优选的实施方案中,具体的角蛋白结合效应分子包含至少一种活性染料(i),所述活性染料(i)具有至少一个选自如下的活性固着点(a)在碱性条件下可活化的式l的基团,(X)式l<formula>formulaseeoriginaldocumentpage15</formula>其中—…表示与染料分子(D)连接的价键;X为吸电子基团或为烷基、-O-烷基、氰基、羟基、卣素基团或H,k为l、2或3,n为0或l,且B为基团-CH=CH2或基团-CH2-CH2-Q或-NH-CH2-CH2Q或-NH-CBNCH2,其中Q为能够在碱性条件下裂解的基团;和(b)式2的丙烯酰氨基固着点式2<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>其中…-表示与染料分子(D)连接的价键;和(c)式3、4或5的化合物之一式3<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>式4<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>式5<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>其中---表示与染料分子(D)连接的价键;V为氟或氯;UpU2彼此独立为氟、氯或氢;且Q、Q2彼此独立地为氯、氟、氰氨基(cyanamido)、羟基、(C广C6)-烷氧基、苯氧基、磺基苯氧基、巯基、(d-C6)-烷基巯基、吡啶并、羧基吡啶并、氨基曱酰基吡啶并或通式6或7的基团,R2<formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula>R4其中I^为氢或(C厂C6)-烷基、磺基-(C广C6)-烷基,或者未被取代或被(c,-C4)-烷基、(d-co-烷氧基、磺基、卣素、羧基、乙酰氨基、脲基取代的苯基;R"和R"彼此独立地具有I^的含义之一,或为通式8的基团,式8或形成式-(CH2)j-的环系,其中j为4或5;或可选地为-(CH2)2-E-(CH2)r,其中E为氧、硫、磺基、-NR5-,其中R^(C广C6)-烷基;W为亚苯基,其未被取代或被一个或两个诸如(C广C4)-烷基、(crc4)-烷氧基、羧基、磺基、氯、溴的取代基取代;或为(c,-C4)-亚烷基-亚芳基或(CrC6)-亚烷基,其可以被氧、硫、磺基、氨基、羰基、羰氨基(carbonamido)中断;或为亚苯基-CONH-亚苯基,其未被取代或被(OC4)-烷基、(d-C4)-烷氧基、羟基、磺基、羧基、酰氨基、脲基或卤素取代;或为亚萘基,其未被取代或被一个或两个磺基取代;且Z为基团-CH=CH2或基团-CH2-CH2-Q或-NH-CH2-CH2-Q或-NH-CH-CH2,其中Q为能够在碱性条件下裂解的基团;R24、R25和R26为(d-C4)-烷基或(d-C0-羟基烷基;B-为阴离子的等效物,如硫酸氢盐、硫酸盐、氟化物、氯化物、溴化物、磷酸二氢盐、磷酸氢盐、磷酸盐、氢氧化物或乙酸盐。在本发明更优选的实施方案中,所述角蛋白结合效应分子包含的活性染料含有式l的活性固着点,其中存在的至少一个基团为基团S03H。此外,本发明优选涉及包含这样的活性染料的角蛋白结合效应分子,所述活性染料含有式l的活性固着点,并且其中式1中的B为CHNCH2、基团CH2-CH2-0-S03H或CH2-CH2CL。本发明优选这样的角蛋白结合效应分子,其中在碱性条件下可活化的式I的基团与染料分子(D)通过基团-NH-、-N=N-、-NH-C(O)-、-NH-S02-或-N(R)-键合,其中R为烷基。在特别优选的实施方案中,它们为包含选自如下染料的角蛋白结合效应分子酞胥系列染料、蒽醌染料、偶氮染料、甲月赏染料、二恶、秦染料、吖啶(actidine)染料、^p屯染料、聚曱炔染料、芪染料、硫化染料、三芳基曱烷染料、苯并吡喃染料、二苯并蒽酮(dibenzanthrone)染料和这些染料的金属络合物。本发明还优选包含至少一种这样的活性染料的角蛋白结合效应分子,所述活性染料包括选自如下基团(l-l)至(l-43)的活性固着点<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>,ls02-CH2-CH2-0-S03H<f~y~S02-CH2-CH2-CI^"^~S02-CH=CH2(1-7)(1-8)(1-9)HO,SHO,SHO,SHO,SH03S,S02-CH2-CH2-0-S03H(1-10)S02-CH2-CH2-0-S03H(1-13)S03HS02-CHrCH2-0-S03H(1-16)H03S,HO,SHO,SHO,SS02-CH2-CH2-CI(1-11)S02-CH=CH2(1-14)S。3HS。2-CH=CH2(1-17)S02-CH=CH2(1-12)H03S,S02-CH2-CH2-0-S03H(1-15)-SO,-CH,-CH,-O-SO,HH03S.、(1-18)CH,MeOCH,O-S02-CH2-CH2-0-S03H(1-19)OMeH03S,HOS02-CH2-CH2-0-S03H(1-20)-S。2-CH2-CH2-0-S03HHO~^))~S02-CH2-CH2-0-S03H(1-22)(1-23)S02-CH=CH2(1-21)。MeS02-CH2-CH2-0-S03H/O(1-25)HO,SHO,SHO~^^~S02-CH2-CH2-0-S03H(1-26)//\(1-24)H03S-0-CH2-CH2-S02\-S。3H(1-27)HO,SS02-CH2-CH2-0-S03HK^S02-CH2-CH2-0-S03H-S02-CH2-CH2-0-S03H(1-28)(1-29)(1-30)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage20</formula>其中"n"为0-40的整数。本发明还提供上述角蛋白结合效应分子在皮肤染色剂、染发剂或修饰用化妆品中的应用。此外,本发明涉及皮肤染色剂,指甲染色剂和/或染发剂,优选染发剂,其包含至少一种本发明上述的角蛋白结合效应分子。本发明还提供了使用包含(a)至少一种角蛋白结合多肽(ii)和(b)染料或活性染料(i)的角蛋白结合效应分子染色毛发、皮肤或指曱的方法。在本发明特别优选的实施方案中,使用本发明上述定义的角蛋白结合效应分子。上述染色毛发、皮肤或指曱的方法的特别优选的实施方案为可逆的方法,其中通过置换反应用(i)角蛋白结合多肽或(ii)含角蛋白的溶液处理而从毛发角蛋白,皮肤角蛋白或指甲角蛋白中置换角蛋白结合效应分子或用高含量去污剂(例如SDS)溶液从皮肤,毛发或指甲中除去角蛋白结合效应分子。定义与表述"带氨基官能团的效应分子"相关的"氨基官能团"表示氨基能够使所述带氨基官能团的分子与其它分子通过酰胺键共价连接。就本发明的目的而言,"氨基官能团,,也指那些能够通过化学方式转化成氨基官能团的基团。本文的本发明效应分子具有至少一个氨基官能团。然而,还有可能使用具有两个、三个或三个以上氨基官能团和/或仲氨基的效应分子。就本发明的目的而言,"抗体"为人和有颌脊推动物产生的抵抗抗原的蛋白质(感染性病原体或对机体而言外来的生物物质)。它们为高等真核生物免疫系统的关键成分并且由白血球类即B细胞分泌。它们出现在血液或组织的胞外液中。"修饰用化妆品"表示并非主要用于护理,而是用于美容或改善皮肤、毛发和/或指甲和趾甲外观的化妆品配件。这类配件为本领域技术人员公知,并且包括,例如眼线笔(kohlpencil)、睫毛骨、眼影骨、熏色日霜(tinteddaycream)、脂粉、遮瑕膏、腮红、唇膏、唇线笔、美容品、指曱油、啫哩胶(glamourgel)等。就本发明的目的而言,它们特别为适合于染色皮肤,指曱和/或毛发的组合物。"染发剂"为染色毛发的组合物或制品(i)。就本发明的目的而言,将"染发剂"分成直接颜料和真正染发颜料(turehaircolors)。就直接颜料而言,一次或多次洗发足以再次除去颜料(色泽)。染料仅位于毛发物质的表面上,无化学反应发生。就毛发自身而言,该方法无风险。真正(永久)染发颜料使用氧化染色(参见"现有技术"部分)。染发剂包含在化妆品相容性介质中的合适的助剂和添加剂,它们为本领域技术人员熟知并且可以在化妆品手册中找到,例如,Schrader,GrundlagenundRezepturenderKosmetika[化妆品lo5出和配制],HtithigVerlag,Heidelberg,1989,ISBN3画7785陽1491-1或Umbach,Kosmetik:Entwicklung,HerstdlungundAnwendungkosmetischerMittel[Cosmetics:development,manufacture和useofcosmeticcompositions],第二版增订本,1995,GeorgThiemeVerlag,ISBN3137126029。就本发明的目的而言,"效应分子"表示具有一定可预见效应的分子,优选改变颜色和/或护理效应或对于皮肤、毛发或指甲的美容修饰效应。优选效应分子为例如表3、5和6所示的染料。就本发明的目的而言,"角蛋白"表示由索样蛋白质复合物构成的中间丝。中间丝由许多同型(单体)蛋白质构成,其自身平行排列从而形成管状结构。中间丝结合在一起成相对大的束(张力原纤维)。中间丝与微管(micredubules)和肌动蛋白丝形成细胞的细胞骨架。在5类中间丝之间存在差别酸性角蛋白与碱性角蛋白、结蛋白、神经丝和核纤层蛋白。就本发明目的而言特别优选上皮(覆盖多细胞动物生物体的全部外体表的单层或多层细胞)中出现的酸性和碱性角蛋白。"角蛋白"(还称作角质物质、硬蛋白)表示负责细胞稳定性和形状的蛋白质。所述蛋白质为哺乳动物皮肤、毛发和指曱的成分。角蛋白的强度通过纤维形成而得以增加各氨基酸链形成右手a-螺旋,并且这些螺旋中每三个形成左手超螺旋(=原纤丝)。11条原纤丝组合形成微纤丝-它们又依次组合成束并形成例如围绕在毛发细胞周围的大纤丝。"角蛋白结合多肽"表示具有结合角蛋白特性的多肽或蛋白质。因此角蛋白结合多肽也是中间丝締合的蛋白质。这些角蛋白结合多肽对角蛋白或包括角蛋白如原纤丝、微纤丝或大纤丝的宏观结构具有结合亲和力。此外,角蛋白结合多肽应理解为那些对哺乳动物皮肤、毛发和/或指甲或趾甲具有结合亲和力的多肽。"角蛋白结合多肽"还为哺乳动物生物体内具有与角蛋白、角蛋白纤维、皮肤或毛发结合相关的生物功能的多肽。角蛋白结合多肽同样表示实际结合角蛋白、角蛋白纤维、皮肤、指甲或趾曱所必需的结合基序或蛋白质结构域。可以在实施例8、9和10所述条件下测试角蛋白结合多肽(ii)与角蛋白的结合。角蛋白结合多肽为这样的多肽,它们在上述定量角蛋白结合测试中具有桥粒斑蛋白(SEQIDNo.:2)、优选桥粒斑蛋白角蛋白结合结构域B(SEQIDNo.:4)的角蛋白结合能力的约10%、20%、30%、40%或50%,优选50%、60%、70%、80%或卯%,特别优选100%、125%、150%,极为伊乙选200%、300%或400%,最优选500%、600%、700%或1000%或1000%以上。就连接分子与效应分子或角蛋白结合蛋白的结合而言的"偶联"表示所述分子的共价连接。应在广义上理解"化妆品相容介质"并且它表示适合于生产化妆品或皮肤美容制品及其混合物的物质。它们优选为蛋白质相容介质。"化妆品相容性物质"在接触人和/或动物皮肤组织或毛发时,不会造成刺激或损伤并且不会与其它物质不相容。此外,这些物质具有轻度过敏反应的可能性并且由国家注册机构批准应用于化妆制品。这些物质为本领域技术人员熟知,并且可以在例如化妆品手册中找到,例如Schrader,GrundlagenundRezepturenderKosmetika[4匕妆品基石出和酉己制],HtithigVerlag,Heidelberg,1989,ISBN3-7785-1491-1。"核酸,,或"核酸分子"表示单链或双链形式的、有义或反义取向的脱氧核糖核苷酸、核糖核苷酸或其聚合物或杂合体。术语核酸或核酸分子可以用于描述基因、DNA、cDNA、mRNA、寡核苷酸或多核苷酸。"核酸序列"表示上述指定定义的核酸分子的脱氧核糖核苷酸或核糖核苷酸的连续和彼此连接的序列,正如可以使用可利用的DNA/RNA测序技术确定或缩写表中,在代表核苷酸的字母或字符所示的。就本发明的目的而言,"多肽"表示由氨基酸分子构成的大分子,其中氨基酸通过肽键线性连接在一起。多肽可以由几个氨基酸(约10-100个)构成,而且还包括蛋白质。蛋白质一般由至少100个氨基酸构成,而且可以包含数千个氨基酸。优选多肽包含至少20、30、40或50,特别优选至少60、70、80或90,才及为特别优选至少IOO、125、150、175或200,最优选至少200个以上氨基酸,就上限而言可能为数千个氨基酸。应将两种核酸序列之间的"同源性"或"同一性,,理解为表示整个序列长度范围内核酸序列的同一性,它通过借助于程序算法GAP(威斯康星软件包10.0版,威斯康星大学遗传计算机组(UniversityofWisconsin,GeneticsComputerGroup,GCG),Madison,USA;Altschul等(1997)NucleicAcidsRes.25:3389ff)以下列参数设置进行比较计算空位加权50长度加权3平均匹配10平均错配0作为举例,基于核酸与SEQIDNO:1的序列具有至少80%同源性的序列应理解为表示按照上述程序算法以上述参数设置与序列SEQIDNO:1比较时具有至少80%同源性的序列。两多肽之间的同源性应理解为表示整个序列长度范围内氨基^列的同一性,它通过借助于程序算法GAP(威斯康星软件包10.0版,威斯康星大学遗传计算机组(GCG),Madison,USA)以下列参数设置进行比较计算空位加权8长度加权2平均匹配2.912平均错配-2.003作为举例,基于多肽与SEQIDNO:2的序列具有至少80°/。同源性的序列应理解为表示按照上述程序算法以上述参数设置与序列SEQIDNO:2比较时具有至少80%同源性的序列。"杂交条件”在广义上应理解,表示依赖于应用的严格或较低严格杂交条件。这类杂交条件特别描述于SambrookJ,FritschEF,ManiatisT等的《分子克隆实验室指南》(MolecularCloning(ALaboratoryManual)),第二版,ColdSpringHarborLaboratoryPress,1989,9.31曙9.57)或CurrentPredocolsinMolecularBiology,JohnWiley&Sons,N.Y.(1989),6.3.1-6.3.6。本领域技术人员将会选择能够区分特异性杂交与非特异性杂交的杂交条件。例如,洗涤步骤期间的条件可以选自低严格条件(50。C约2xSSC)和高严格条件(50。C约0,2xSSC,优选65'C)(20xSSC:0.3M柠檬酸钠,3MNaCl,pH7.0)。此外,洗涤步骤期间的温度可以从低严格条件下的室温约22。C升至较高严格条件下的约65。C。盐浓度和温度两种参数可以同时改变,或者单独改变,而使另一参数在每种情况中恒定不变。杂交期间还有可能使用变性剂,例如像甲酰胺或SDS。在50%曱酰胺的存在下,优选在42。C进行杂交。某些用于杂交和洗涤步骤的例示性条件如下所示1.杂交条件可以选自例如下列条件a)4xSSC,65°C,b)6xSSC,45°C,c)6xSSC,100ing/ml变性片段化的鱼精DNA,68°C,d)6xSSC,0.5。/。SDS,100照/ml变性鲑精DNA,68°C,e)6xSSC,0.5%SDS,100照/ml变性片段化鲑精DNA,50%甲酰胺,42°C,f)50%曱酰胺,4xSSC,42°C,或g)50%(vol/vol)曱酰胺,0.1%牛血清白蛋白,0.1%Ficoll,0.1%聚乙烯吡咯烷酮,50mM磷酸钠緩冲液pH6.5,750mMNaCl,75mM柠檬酸钠,42°C;或h)2x或4xSSC,50°C(低严格条件),i)30-40%甲酰胺,2x或4xSSC,42。C(低严格条件)。500mN磷酸钠緩沖液pH7.2,7%SDS(g/V),lmMEDTA,10照/ml单链DNA,0.5%BSA(g/V)(Church和Gilbert,Genomicsequencing.Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.81:1991.1984)。2.洗涤步骤可以选自例如下列条件a)0.015MNaCI/0.0015M柠檬酸钠/0.1。/oSDS,50"C。b)0.1xSSC,65。C。c)O.lxSSC,0.5%SDS,68。C。d)O.lxSSC,0.5。/。SDS,50%甲酰胺,42°C。e)0.2xSSC,0.1%SDS,42。C。f)2xSSC,65'C(低严格条件)。在一个实施方案中,严格杂交条件如下选择选择包含甲酰胺、NaCl和PEG6000的杂交緩冲液。在杂交緩冲液中存在曱酰胺使双链核酸分子不稳定,其结果是可以使杂交温度降至42'C而不会降低严格性条件。盐在杂交緩冲液中的应用增加双链体的复性率或杂交效率。尽管PEG增加溶液的粘度,这对复性率具有负面效应,但是作为溶液中此聚合物存在的结果,所得介质中的探针浓度增加,这就提高了杂交率。緩冲液的组成如下表l:杂交緩冲液_杂交緩冲液_250mM磷酸钠緩沖液pH7.21mMEDTA7%SDS(g/v)250mMNaCl10ing/mlssDNA5。/。聚乙二醇(PEG)600040%曱酰胺42。C进行杂交过夜。使用2xSSC+0.1。/。SDS将滤膜在第二天早晨洗涤3次,每次约10分钟。与表述"带羟基官能团的效应分子"相关的"羟基官能团"表示游离OH基团或能够使这些带OH基团的分子通过酯化反应与其它分子共价连接的羟基。就本发明的目的而言,"羟基官能团,,还为那些能够以化学方式转化成OH官能团的基团(例如,衍生物如甲氧基、乙氧基)。文中本发明的效应分子具有至少一个羟基。然而,还有可能使用带有两个、三个或三个以上羟基的效应分子。"偶联官能团"为可以进入与效应分子或角蛋白结合蛋白的官能团的共价键的连接分子的官能团。可提及的非限制性实例为羟基、羧基、硫代基团和氨基。"偶联官能团"和"固着点基团"可作为同义词使用。就本发明的目的而言,"活性染料,,表示包含至少一个可以通过共价键与角蛋白结合多肽偶联的活性固着点的染料。就本发明的目的而言,"活性固着点"表示化学官能团或基团,通过它们活性染料分子的碳原子与磷原子与另一分子的羟基、氨基或巯基的氧、氮或硫原子之间形成共价键。"能够在碱性条件下裂解的基团Q"应理解为在碱性条件下,即在pH为7或7以上,优选7.5或7.5以上裂解的基团,伴有乙烯基砜基团的消除和形成。这类基团的实例为卤素,例如氯、溴或碘;还有-0-S03H、-S-S03H;二烷基氨基;季铵基团,如三-d-CV烷基铵、苄基二-CrCV烷基铵或N-键合的吡啶;以及式R3S(0)2-、R4S(0)2-0-、R5c(0)-0-的基团。此处的R3、!^和R5彼此独立地为烷基、卣代烷基或任选取代的苯基,其中RS还可以为氢。优选Q为基团-0-(CO)CH3,特别是-0-S03H。就本发明的目的而言,"可逆染色,,表示使用可以反向进行的本发明方法实现的皮肤角蛋白、毛发角蛋白或指曱角蛋白颜色的改变。就本发明的目的而言,"反向翻译"表示将蛋白质序列翻译成编码该蛋白质的核酸序列。反向翻译由此为将氨基酸解码为与之相应的核酸序列的过程。常用的方法基于各类由计算机辅助的序列对比生成的密码子使用表。使用密码子使用表有可能确定最常用于某些具体类型氨基酸的密码子。可以使用本领域技术人员公知且特别为该目的生成的计算机算法进行蛋白质反向翻译(Andr6sMoreira和AlejandroMaass.TIP:Porteinbacktranslationaidedbygeneticalgorithms.Bioinformatics,20巻,13期,2148-2149页(2004);GPesole,MAttimonelli和SLiuni.Abacktranslationmethodbasedoncodonusagestrategy.NucleicAcidsRes.1988年3月11日;16(5PtA):1715—1728)。发明详述本发明提供了包含(a)至少一种活性染料(i)和(b)至少一种角蛋白结合多肽(ii)的角蛋白结合效应分子。在优选的实施方案中,具体的角蛋白结合效应分子包含至少一种对人皮肤角蛋白、毛发角蛋白或指曱角蛋白具有结合亲和力的角蛋白结合多肽(ii)。例如,在桥粒斑蛋白、斑菲素蛋白(plakophilin)、桥粒斑珠蛋白(plakoglobin)、网蛋白(plectin)、周斑蛋白(periplakin)、包斑蛋白(envoplakin)、毛透明蛋白(trichohyalin)、表斑蛋白(epiplakin)或毛嚢蛋白质的多肽序列中存在适合于本发明的角蛋白结合多肽。优选(b)中定义的角蛋白结合多肽(ii)包含(a)至少一种具有SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、卯、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示序列之一的多肽;或(b)与至少一种SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、卯、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示的序列具有至少40%同一性并且能够结合角蛋白的多肽。优选具体的角蛋白结合效应分子包含至少一种由核酸分子编码的角蛋白结合多肽(ii),所述核酸分子包含至少一种选自如下的核酸分子(a)编码多肽的核酸分子,所述多肽包含SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示的序列;(b)包含至少一种SEQIDNo.:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、145、149、152、159、161、163、165、167或169所示序列多核苷酸的核酸分子;(c)编码SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、卯、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示序列多肽的核酸分子;(d)具有这样的核酸序列的核酸分子,所述核酸序列对应于至少一种SE(JIDNo.:l、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、145、149、152、159、161、163、165、167或169所示的序列;或为通过取代、缺失或插入从中4汙生的核酸分子,其编码的多肽与至少一种SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示的序列具有至少40%的同一性并且能够结合角蛋白;(e)编码单克隆抗体识别的多肽的核酸分子,所述单克隆抗体抗如(a)至(c)中所示核酸分子编码的多肽;(f)编码角蛋白结合蛋白的核酸分子,所述核酸分子在严格条件下与如(a)至(c)中所示的核酸分子杂交;(g)编码角蛋白结合蛋白的核酸分子,在严格杂交条件下,利用如(a)至(c)中所示的核酸分子或其包含至少15nt、优选20nt、30nt、50nt、100nt、200nt或500nt的部分片段作为探针,能够从DNA库中分离所述核酸分子;和(h)能够通过序列SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、卯、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示氨基酸序列之一的反向翻译产生的核酸分子。在本发明优选的实施方案中,所述角蛋白结合效应分子包含作为角蛋白结合多肽的SEQIDNo.:2、42、44、46、48、146、150、153、156、157、158、160、162、164或166所示序列的桥粒斑蛋白或其部分片段;和/或SEQIDNo.:18、20、26、28、32、34、36、168、170所示序列的斑菲素蛋白或其部分序列;和/或SEQIDNo.:50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70所示序列的桥粒斑珠蛋白或其部分序列;和/或SEQIDNo.:86所示序列的周斑蛋白;和/或SEQIDNo.:卯、92、94、96、98、102、104、105所示序列的包斑蛋白或其部分序列;和/或SEQIDNo.:138和140的序列。优选的角蛋白结合结构域为序列SEQIDNOs:4、6、8、10、12、14、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示的桥粒斑蛋白多肽及其功能等同物。在本发明极为优选的实施方案中,本发明的方法使用序列SEQIDNo.:156、157、158、160、162、164、168和/或170所示的角蛋白结合多肽。在本发明最为优选的实施方案中,使用序列SEQIDNo.:168所示的角蛋白结合蛋白。毋庸多言,该蛋白质可以与SEQIDNo.:168中存在的组氨酸固着点一起使用或不与之一起使用。因此,组氨酸固着点(或类似使用的纯化/检测系统)也可以存在于C-末端。在所述角蛋白结合蛋白的实际应用中(例如在化妆品中),组氨酸固着点(或类似使用的纯化/检测系统)不是必要的。由此优选使用所述不含额外氨基酸序列的蛋白质。本发明同样包括具体披露的角蛋白结合多肽(ii)的"功能等同物"及其在本发明方法中的应用。就本发明的目的而言,具体披露的角蛋白结合多肽(ii)的"功能等同物"或类似物为与之不同的多肽,它们也具有期望的生物活性,例如角蛋白结合。因此,例如,角蛋白结合多肽的"功能等同物"应理解为表示这样的多肽,在其他相当条件下,在实施例所述的定量角蛋白结合测试中,它们具有SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170,优选SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、40、42、44、46、48、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170,特别优选166和168,最优选168所示多肽角蛋白的结合能力的约10%、20%、30%、40%或50%,优选50%、60%、70%、80%或90%,特别优选100。/。、125%、150%,极为优选200%、300%或400%,最优选500%、600%、700%或1000%或1000%以上。本发明的"功能等同物"尤其应理解为还表示突变蛋白质,它们在上述氨基酸序列的至少一个序列位置上具有不同于具体所示的氨基酸,但是尽管如此,它们仍然具有上述生物活性之一。"功能等同物"由此包括可通过突变获得的突变蛋白质,其中定义的改变可以在任何序列位置上产生,只要它们产生具有本发明特性谱的突变蛋白质即可。就本发明的目的而言,"突变"表示质粒或生物体基因组中基因变体核酸序列的改变。例如,突变可以作为复制过程中错误的结果产生或由诱变剂所致。虽然本领域技术人员已知大量生物、化学或物理诱变剂,但是生物体细胞基因组中的自发突变率极低。突变包括一个或多个核酸基团的取代、插入、缺失。取代应理解为表示独立核酸碱基的替换,此处需要区分转换(用嘌呤碱基取代嘌呤碱基或用嘧咬碱基取代嘧咬碱基)和颠换(用噤呤碱基取代嘧咬碱基(或反之亦然))。添加或插入应理解为表示将额外的核酸基团掺入DNA,这可能导致读框移码。由于这类读框移码,需要区分"同读框"插入/添加与"异读框"插入。就"同读框"插入/添加而言,读框得以保留,从而产生的多肽由于插入核酸编码的氨基酸数目而扩大。就"异读框"插入/添加而言,原始读框丧失,并且不再可能形成完整的功能性多肽。缺失用以描述一个或多个碱基对的丧失,同样导致读框的"同读框"或"异读框"移码,以及与之相关的是否形成完整蛋白的结果。技术人员公知。例如,这类方法和谦变剂描述于A.M.vanHarten[(1998),"Mutationbreeding:theoryandpracticalapplications",CambridgeUniversityPress,Cambridge,UK,EFriedberg,GWalker,WSiede或K.Sankaranarayanan,J.M.Gentile,LR.Ferguson[(2000)"PredocolsinMutagenesis",ElsevierHealthSciences]。为了引入靶向突变,例如,可以使用常用的分子生物学方法和过程,诸如体外MutagenEse试剂盒、LAPCR体外诱变试剂盒(日本京都宝酒造林式会社(TakaraShuzo,Kyoto))或来自Stratagene的QuikChange⑧试剂盒或使用合适引物的PCR诱变。如上所述,存在大量化学/物理和生物诱变剂。下列诱变剂作为实例给出,但不限于此。可以按照化学诱变剂的作用机理对其进行细分。因此,存在碱基类似物(例如5-溴尿嘧啶,2-氨基嘌呤),单-和双官能烷化剂(例如单官能烷化剂如曱基磺酸酯乙酯、硫酸二甲酯;或双官能团烷化剂如亚硫酸二氯乙酯、丝裂霉素、亚硝基胍类-二烷基亚硝胺、N-亚硝基胍衍生物)或嵌入物质(例如吖啶、溴乙锭)。因此,例如,在本发明的角蛋白结合效应分子中,还有可能存在那些作为本发明多肽例如SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168和/或170所示多肽突变的结果而获得的多肽。合适的M酸取代的实例如下表所示表4:合适的M酸取代原始基团取代实例AlaSerArgLys<table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table>已知在SEQIDNO:2中,例如,2849位天然存在的丝氨酸可以,皮甘氨酸取代以避免该位置上的磷酸化(FontaoL,FavreB,RiouS,GeertsD,JauninF,SauratJH,GreenKJ,SoimenbergA,BoiradoriL.,Interactionofthebullouspemphigoidantigen1(BP230)anddesmoplakinwithintermediatefilamentsismediatedbydistinctsequcencewithintheirCOOHterminus.,MolBiolCell.2003年5月;14(5):1978-92.电子出版2003年1月26日)。在上述含义中,"功能等同物"也为所述多肽的"前体"和这些多肽的"功能衍生物"和"盐"。在本文中"前体,,为具有或不具有期望生物活性的多肽的天然或合成前体。表达"盐"应理解为表示本发明蛋白质分子的羧基盐或氨基酸加成盐。羧基盐可以按照本身公知的方式制备并且包括无机盐,例如钠、钙盐、铵盐、铁盐和锌盐;还有与有机碱成的盐,例如胺如三乙胺、精氨酸、赖氨酸、哌啶等。本发明同样提供了酸加成盐,例如与无机酸如盐酸或硫酸成的盐;以及与有才几酸如乙酸和草酸成的盐。"功能等同物"自然也包括可从其它生物体中获得的多肽和天然存在的变体(等位基因)。例如,通过序列比较,可确定同源序列区或保守区的区域。使用这些序列,可以使用生物信息学比较程序检查DNA数据库(例如基因组或cDNA数据库)中的等同酶。公众可利用的合适的计算机程序和数据库为本领域技术人员充分了解。例如,可以使用计算机程序,诸如来自英孚美有P艮公司(InforMaxInc.)此外,"功能等同物"为这样的融合蛋白,其具有上述多肽序列之一或由其衍生的功能等同物,并且具有至少一种功能与之不同的、呈N-或C-末端功能性连接的(即融合蛋白各部分不会相互造成实质性的功能削弱)其他异源序列。这类异源序列的非限制性实例为,例如信号肽或酶。本发明包括的"功能等同物"为具体披露蛋白质的同源物。它们与具体披露的氨基酸序列之一具有至少40%、45%或50%,优选至少55%、60%、65%或70%,特别优选至少75%、80%、85%、卯%、91%、92%、93%或94%,才及其优选至少95%或96%的同源性,所述同源性4吏用定义部分拔^露的计算机程序和计算机算法计算。就可能的蛋白质糖基化而言,本发明的"功能等同物"包括去糖基化或糖基化形式的上述蛋白质类型,并且还包括可通过改变糖基化模式获得的修饰形式。就可能的蛋白质磷酸化而言,本发明的"功能等同物,,包括去磷酸化和磷酸化形式的上述蛋白质类型,并且还包括可通过改变磷酸化模式获得的修饰形式。可以通过筛选突变体例如截短突变体的组合库鉴定本发明多肽的同源物。例如,可以通过在核酸水平上的组合诱变,例如通过酶连接合成寡核苷酸的混合物产生蛋白质变体库。存在大量可以用于由简并寡核苷酸序列产生可能的同源物库的方法。可以在自动化DNA合成仪器中进行简并基因序列的化学合成,然后可以将合成的基因连入合适的表达载体。简并基因集合的应用使得能够在一种混合物中提供所有编码期望的可能蛋白质序列集合的序列。用于合成简并寡核苷酸的方法为本领域技术人员公知(例如Narang,S.A.(1983)Tetrahedron39:3;Itakura等(1984)Annu.Rev.Biochem.53:323;Itakura等(1984)Science198:1056;Ike等(1983)NucleicAcidsRes.11:477)。在现有技术中,已知用于筛选通过点突变或截短产生的组合库基因产物和用于筛选具有选择的特性的基因产物cDNA库的大量技术。用于篩选欲进行高通量分析的大基因库的最常用的技术包括在可复制的表达载体中克隆基因库,用所得载体库转化合适的细胞,并在检测期望活性、利于分离载体的条件下表达组合基因,所述载体编码其产物经检测的基因。递归整体诱变(recursiveensemblemutagenesis,REM),—种增力p库中功能性突变体频率的寺支术,可以与筛选测试组合使用以鉴定同源物(Arkin和Yourvan(1992)PNAS89:7811-7815;Delgrave等(1993)ProteinEngineering6(3):327陽331)。使用SEQIDNo.:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、145、149、152、159、161、163、165、167和/或169,特别优选165和167,最优选167所示的核酸序列或其部分作为探针检查其它生物体物理上可得的cDNA或基因组DNA文库,为本领域技术人员公知的以其它方式鉴定同源物的方法。在本文中,^t生自SEQIDNo.:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、145、149、152、159、161、165、167和/或169,特别优选165和167,最优选167所示核酸序列的探针长度为至少20bp,优选至少50bp,特别优选至少100bp,极为优选至少200bp,最优选至少400bp。探针长度还可以为l或l以上的千碱基对,例如lKb,1.5Kb或3Kb。为了检查文库,还有可能使用序列SEQIDNo.:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、145、149、152、159、161、165、167和/或169,特别优选165和167,最优选167所示序列的互补DNA链序列之一或其20bp至几千碱基长度的片段。使用的杂交条件如上所述。在本发明的方法中,还有可能使用这样的DNA分子,在标准条件下,它们与SEQIDNo.:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、145、149、152、159、161、165、167和/或169,特别优选165和167,最优选167所示的核酸分子杂交且编码角蛋白结合多肽;它们与上述这些互补核酸分子或部分杂交并且作为完整序列编码的多肽与SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、卯、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所述的多肽具有相同特性。在本发明特别有利的实施方案中,角蛋白结合效应分子包含这样的多肽作为角蛋白结合多肽(ii):所述多肽包含至少一种SEQIDNo.No.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、卯、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示的多肽序列,条件是所述多肽的角蛋白结合值按照实施例9或10的测试为SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示相应多肽序列的至少10%、20%、30%、40%或50%,优选60%、70%、80%或卯%,特别优选100%。优选使用的角蛋白结合多肽(ii)对期望生物体具有高特异性亲和力。因此,为了在人染发中应用,优选使用那些对人毛发角蛋白具有特别高的亲和力的角蛋白结合多肽(ii)。然而,还能够使用一种以上与本发明的效应分子(i)偶联的角蛋白结合多肽(ii),例如可以将对人皮肤角蛋白具有高结合亲和力的角蛋白结合多肽(ii)与对人毛发角蛋白具有高亲和力的其他角蛋白结合多肽(ii)组合,进而与效应分子组合。还有可能使用嵌合多肽,它们包含相同(也可以是不同)角蛋白结合多肽(ii)或其角蛋白结合结构域的两个或多个拷贝。例如,由此能够获得特别有效的角蛋白结合。合适的角蛋白结合多肽(ii)是公知的。例如,包含角蛋白结合结构域的桥粒^蛋白和网蛋白(FontaoL,FavreB,RiouS,GeertsD,JauninF,SauratJH,GreenKJ,SonnenbergA,BorradoriL,Interactionofthebullouspemphigoidantigen1(BP230)anddesmoplakinwithintermediatefilamentsismediatedbydistinctsequencewithintheirCOOHterminus.,MolBiolCell.2003年5月;14(5):1978-92:2003年1月26日电子出版;HopkinsonSB,JonesJC.,TheN-terminusofthetransmembraneproteinBP180interactswiththeN-terminaldomainofBP230,therebymediatingkeratincytoskeletonanchoragetothecellsurfaceatthesiteofthehemidesmosome,MolBiolCell.2000年1月;ll(l):277-86)。优选本发明的角蛋白结合效应分子用于发用化妆品,优选染发。它们允许使用高浓度或长作用时间的护理性、保护性或变色性效应分子。在本发明特别优选的实施方案中,使用对人皮肤角蛋白、毛发角蛋白或指曱角蛋白具有结合亲和力的角蛋白结合多肽。在本发明另一优选的实施方案中,具体的角蛋白结合效应分子包含至少一种活性染料(i),其具有选自如下的至少一个活性固着点(a)在碱性条件下可活化的式l的基团,<formula>formulaseeoriginaldocumentpage39</formula>(X)式l其中…-表示与染料分子(D)连接的价键,X为吸电子基团或为烷基、-O-烷基、氰基、羟基、卣素基团或H,k为l、2或3,n为0或l,且B为基团-CH=CH2或基团-CH2-CH2-Q或—NH-CH2-CH2-Q或-NH-CENCH2,其中Q为能够在碱性条件下裂解的基团;和(b)式2的丙烯酰氨基固着点,Br式20其中…束示与染料分子(D)连接的价键;和(c)式3、4或5的化合物之一,式3式4式5其中…-表示与染料分子(D)连接的价键,V为氟或氯;U,、U2彼此独立为氟、氯或氢;且Q!、Q2彼此独立为氯、氟、氰氨基、羟基、(C广C6)-烷氧基、苯氧基、磺基苯氧基、巯基、(d-CO-烷基巯基、吡啶并、羧基吡啶并、氨基甲酰基p比咬并或通式6或7的基团,式6<formula>formulaseeoriginaldocumentpage41</formula>式7<formula>formulaseeoriginaldocumentpage41</formula>其中I^为氢或(d-C6)-烷基、磺基-(d-C6)-烷基,或者未被取代或寻皮(d-C4)-烷基、(d-C4)-烷氧基、磺基、卣素、羧基、乙酰氨基、脲基取代的苯基;113和114彼此独立地具有112的含义之一,或为通式8的基团,式8<formula>formulaseeoriginaldocumentpage41</formula>或形成式-(CH2)r的环系,其中j为4或5;或可选地》-(CH2)2-E-(CH2)2-,其中E为氧、硫、磺基、-NRs-,其中R^(C广C6)画烷基;W为亚苯基,其未被取代或被l或2个诸如(d-C4)-烷基、(CVQ)-烷氧基、羧基、磺基、氯、溴的取代基取代;或为(d-C4)-亚烷基-亚芳基或(C2-C6)-亚烷基,其可以被氧、硫、磺基、氨基、羰基、羰氨基中断;或为亚苯基-CONH-亚苯基,其未被取代或被(C广C4)-烷基、(d-CO-烷氧基、羟基、磺基、羧基、酰氨基、脲基或卣素取代;或为亚萘基,其未被取代或被一个或两个磺基取代;且Z为基团CH=CH2或基团CH2-CH2-Q或—NH-CH2-CH2-Q或-NH-CH=CH2,其中Q为能够在碱性条件下裂解的基团;R24、R25和R26为(d-C4)-烷基或(d-C0-羟基烷基;B-为阴离子的等效物,如硫酸氢盐、硫酸盐、氟化物、氯化物、溴化物、磷酸二氢盐、磷酸氢盐、磷酸盐、氢氧化物或乙酸盐。因此,在优选的实施方案中,本发明涉及包含至少一种活性染料(i)作为效应分子的角蛋白结合效应分子,所述活性染料(i)具有至少一种在碱性条件下可活化的式l的基团,(X)式l其中-…为与染料分子(D)连接的价键;X为吸电子基团,k为l、2或3,n为0或l,且B为基团CH=CH2或基团CH2-CH2-Q或-NH-CH2-CH2-Q或-NH-CH=CH2,其中Q为能够在碱性条件下裂解的基团。在上下文中,表述烷基通常为具有l-6个、优选l-4个碳原子的直链或支链烃基(d-C6-或C广Cr烷基),如甲基、乙基、丙基、异丙基等。卣代烷基为如上所述的烷基,其中氢原子部分或全部被卣原子、特别是氟原子取代,如三氟甲基、三氯甲基、五氟乙基等。烷氧基为如上所述通过氧原子键合的烷基。任选取代的苯基表示苯基可以具有一个或多个,例如l、2、3或4个取代基,它们选自例如囟素、烷基、烷氧基、硝基、氰基、COOH、S03H等。卤素特别为氟、氯或溴。吸电子基团X为对与之键合的芳族基团发挥-M和/或-I作用的那些基团。这些基团包括例如氟或氯,CN,N02以及式-C(0)-Ri和S(0)2I^的基团,其中Ri和I^彼此独立地为OH、烷基、卣代烷基、烷氧基或任选取代的苯基。如果式l具有多个基团(k〉1),那么基团X可以相同或不同。优选至少一种X基团为羟基磺酰基(S03H)。变量k优选为l或2,即式l具有l个或2个吸电子基团X。优选式l中的"n"为O,即式l衍生自苯。如果"n"为l,那么式l衍生自萘。在这些情况下,基团S02-B可以位于与基团X相同的苯环上。此外,本发明涉及包含活性染料的角蛋白结合效应分子,所述的活性染料包含式1的活性固着点并且其中式1中的B为CH=CH2,基团CH2-CH2-OS03I^CH2-CH2-a。本发明优选这样的角蛋白结合效应分子,其中能够在碱性条件下活化的式l的基团通过基团-NH-、-N=N-、-NH-C(O)-、-NH-SOr或一N(R)-与染料分子键合,其中R为烷基(如上文定义)。有利的是,本发明的角蛋白结合效应分子具有l、2或3种,优选1或2种上述活性染料。能够在碱性条件下活化的式l的基团可以(但不必需)为染料发色团的成分。活性染料通常每个染料分子带有一个或多个,例如1-10个,特别是2-8个赋予染料水溶性的官能团。它们一般为阴离子或酸性官能团,它们在弱酸性或碱性pH,一般在pH高于4的含水性介质中离解成阴离子基团。这类基团的实例为羟基磺酰基(-S03H)、羧基(COOH)和羟基磺酰氧基(-0-S03H)和这些基团的阴离子。这些阴离子/酸性基团可以与式l的基团和/或染料分子的其它部分键合。如果这些基团作为阴离子基团存在于染料中,那么理所当然地染料还包含中和所需的反离子。合适的反离子特别为碱金属离子,特别是钠、钾和锂离子以及铵离子,例如来源于单-、二-或三乙醇胺的铵离子。本发明特别优选的主题为包含染料("D")的角蛋白结合效应分子,所述染料选自酞菁系列染料、蒽醌染料、偶氮染料、甲膪染料、二唾、嗪染料、吖啶染料、卩占吨染料、聚甲炔染料、芪染料、硫化染料、三芳基甲烷染料、苯并吡喃染料、二苯并蒽酮染料以及这些染料的金属络合物。已知这类染料D部分地来自现有技术并且可以在例如专利申请WO94/18381、EP画A356931、EP-A559617、EP曙A201868、DE國A19523245、DE画A19731166、EP745640、EP-A889098、EP-A1097971、EP國A880098中找到,或类似地按照公知制备结构类似染料的方法制备,例如文献EP602562、EP-A597411、EP-A592105或DE4319674。为了制备包含式l的活性固着点的活性染料,一般使式lb的氨基化合物与具有亲核可置换基团的染料前体按照本身公知的方式反应。亲核可置换基团的实例为卤素,特别是氯或溴,其与芳族化合物(如卤代三嗪基团)键合,或为闺4戈磺酰基或囟代羰基的形式。其制备方法已知来自本文引述的现有技术并且可以类似地用于制备染料D。可选地,还可以首先使氨基化合物lb重氮化,然后与相应的染料前体偶联。在氨基化合物lb或其重氮盐与染料前体反应中获得的反应产物可以已经为染料D或部分代表染料D的前体,其进一步按照与公知方法类似的方式加工成染料D。式lb式lb所示的基团对应于式l中给出的定义。应考虑到作为制备结果,染料可以包含无机盐和增充剂。这类成分在下文还称作非染色成分,含量一般不会超过60%重量,且通常占染料中染色和非染色成分重量的10%-50%。染料(D)的发色团系统可以具有不同的结构,无论它们是否为活性染料还是非活性染料。如下所示的发色团(1至7)在每种情况中均为代表某些结构类型的化合物。不应将此列表理解为限制性的。本领域技术人员当然理解原则上属于这些类型物质的所有染料能够作为活性染料与角蛋白结合多肽直接键合或通过连接分子键合。染料可以为不含金属的染料,而且可以为金属络合物,优选过渡金属络合物,特别是元素周期表中VI-X族过渡金属,特别是其中的Cu、Cr、Fe、M、Co和Mn。在这些金属络合物中过渡金属与染料分子的摩尔比通常在2:1至1:2的范围。通常,这些染料中金属离子的络合通过脱质子化(depredonated)羟基、通过氨基、亚氨基、掺入芳族;r-电子系统的氮原子或通过偶氮基团进行。1.偶氮染料单-、双-、三-、四-和聚偶氮染料取决于染料包含多少个偶氮桥(-N-N-)。与la、lb和lc中活性固着点的价键当然也为偶氮桥。a)单偶氮<formula>formulaseeoriginaldocumentpage45</formula>b)双偶氮ii3.三苯基二喻秦(Triphendioxazine)染料<formula>formulaseeoriginaldocumentpage45</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage46</formula>4.酞菁染举-<formula>formulaseeoriginaldocumentpage46</formula>5.苯并吡喃染料<formula>formulaseeoriginaldocumentpage46</formula>6.二苯并蒽酮染料<formula>formulaseeoriginaldocumentpage46</formula>7.曱月f染料<formula>formulaseeoriginaldocumentpage47</formula>本发明还优选包含活性染料(i)的角蛋白结合效应分子,所述活性染料包含选自下列基团(l-l)至(l-43)的活性固着点<formula>formulaseeoriginaldocumentpage47</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage48</formula>特别优选的活性染料包含至少一种式l的活性固着点,其中该基团具有至少一种式(1-1)至(1-12)和(1-16)、(1-17),优选(l画l)、(1-3)、(l國4)、(1-6)、(1-7)、(1-9)、(1-10)、(1-12)、(1-16)、(1-17),更优选(l画l)、(l画4)、(1-7)、(1-10)、(l-17)所示的基团。在染料(D)与角蛋白结合多肽的反应中,应维持实际生理条件,否则多肽或蛋白质解折叠,导致沉淀。这实质上意味着不能使用纯有机溶剂,并且应选择接近中性的pH。此外,重要的是偶联的反应温度不超过45。C。因此,在理论上能够使用可以在温和条件下与角蛋白结合多肽的SH基团反应的所有活性染料。温和条件应理解为表示角蛋白结合多肽保持或不会不可逆地失去其物理和化学特性的温度、pH和浓度范围。合适的活性染料包含至少一种活性固着点,而且还可以包含两种或多种活性固着点,其中它们可以对应于不同类型的活性固着点。通常将包含乙烯基砜固着点(参见式l)的染料制备成硫酸酯化合物。硫酸酯化合物的活化(消除反应,转化为活性乙烯基砜形式)在织物和皮革应用的染色过程原位进行,即在用前染料无需经预消除反应转化为乙烯基砜。如果适用,也可以将染料分离为乙烯基砜并且仅在随后与底物反应。KBD)这一事实的结果,选择接近中性的pH并且与染料偶联的反应温度不应超过45。C,染料必须经预消除反应转化为活性乙烯基砜形式,之后才能与例如KBD偶联。例如,与KBD的反应可以在相同液体中经消除反应后直接进行(不分离乙烯基砜形式的染料),或者也可以分离染料。为了进行活化,需要pH范围5-14,特别是7-12,且温度范围0-8(TC,特别是15-50。C,优选25-45'C。在活化后,确立pH5-9,特别是7-8的pH范围以及20-50。C,特别是25-45。C的温度范围,其中染料快速(通常在几分钟内)与底物(在本案中与角蛋白结合多肽/KBD)反应。硫酸酯转化成乙烯砜的活化(消除反应)按照图1中所示的方案进行。在活化(消除反应)后,发生图2中所示的反应。具有丙烯氨基固着点(式2)的染料可以在不经预消除反应(活化)的情况下与例如KBD直接反应。反应条件对应于活化乙烯基砜固着点选择的条件。在此情况中,加成和取代均可以发生(J.Soc.DyersandColourist,1982,98,165画175)(参见图3)。染料与杂芳族固着点(式3、4、5)可以直接在不经预消除反应(活化)的情况下与例如KBD反应(图4)。反应条件对应于活化乙烯基砜固着点选择的条件。本文使用的活性染料可以包含0-20%重量,通常0-10%重量,通常0-5%重量的非活性次要组分。不具有活性固着点的次要组分自然不与角蛋白结合多肽反应。可以在合成或染色过程中将它们除去。一种选择是对毛发施用与活性染料反应的角蛋白结合多肽,并从毛发中洗掉未结合的染料级分。此外,例如,存在通过柱层析纯化与活性染料反应的角蛋白结合多肽的选择。还有可能使角蛋白结合多肽与活性染料在"柱式反应器"类型中进行反应。此处可以将角蛋白结合多肽偶联至镍亲和柱,使染料与角蛋白结合多肽键合,然后直接洗掉与未固定的染料基团。然后从柱上洗脱角蛋白结合多肽染料(角蛋白结合效应分子)。在本发明特别优选的实施方案中,角蛋白结合效应分子包含适合于化妆品目的并且照此批准的染料。例如,在来自FarbstoffkommissionderDeutschenForschungsgemeinschaft德国研究学会染料委员会I的"KosmetischeFarbemittel"[化妆品染色剂,VerlagChemie,Weinheim出版,1984或自1991年以来的第三版完全修订版公开文献中列出了这类染料。料特另廿描述在下歹寸文献中E.Sagarin,"Cosmetics,ScienceandTechnology",IntersciencePublishersInc.,NewYork(1957),503页及其后的内容;和H.Janistyn,"HandbuchderKosmetikaundRiechstoffe"[化妆品和香料手册],第3巻(1973),388页及其后的内容;和K.Schrader,"GrundlagenundRezepturenderKosmetika"[化妆品基础和配制,第二片反(1989),782画815页。本发明还优选这样的角蛋白结合效应分子,其中活性染料(i)通过连接分子与角蛋白结合多肽(ii)间接偶联。可以通过使用带有至少两个偶联官能团的连接分子将携带至少一个羟基、氨基或羧基官能团的效应分子(i)(例如选自上述活性染料)偶联在上述角蛋白结合多肽(ii)上来制备这类角蛋白结合效应分子,并且a)在第一偶联步骤中,首先使效应分子(i)与连接分子(iii)键合,和b)在另一偶联步骤中,使来自(a)的反应产物与角蛋白结合多肽(ii)通过连接分子(iii)上仍然游离的偶联官能团偶联。在本发明特别优选的实施方案中,连接分子(iii)带有至少两个不同的偶联官能团,极为特别优选带有马来酰亚胺基团的连接分子(iii)。所用的连接分子(Hi)特别优选携带式9所示羧酸基团的马来酰亚胺,式9其中"n,,为0-40或0-20之间的整数,优选0-15,特别优选O-IO,极为特别优选l-9,或2-8,或3-7,最优选均为5。马来酰亚胺基己酸的应用是其中最为优选的。此外,马来酰亚胺基己酸氯化物的应用是极为特别优选的。在另一个特别优选的实施方案中,连接分子(iii)带有至少两个不同的偶联官能团和额外的增加亲水性的模块。这种优选的连接分子如式9b所示,<formula>formulaseeoriginaldocumentpage51</formula>式9b其中"n"为0-40或0-20之间的整数,优选0-15,特别优选O-IO,极为特别优选1-9,或2画8,或3-7,且X为基团O、S、N、CH2、-0-C=0、O-C画O-、-NR、-NR-C=0、0=C-NR-,且R为H,C广C,2支链或非支链烷基,如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、新戊基、叔戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基或环烷基;苯曱酰基;爷基;CVd。芳基,如苯基和萘基;杂芳基;优选H、甲基和乙基;且"模块"为乙二醇或具有2-40,优选2-20,特别优选2-10个重复单元的聚乙二醇基团;或为氨基酸,优选选自甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、精氨酸和半胱氨酸;或为具有2-40,优选2-20,特别优选2-10个氨基酸的多肽,其中所述氨基酸优选为极性氨基酸,特別优选选自甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、精氨酸和半胱氨酸;或为具有2-100,优选2-80,特别优选2-50,最优选2-20个单体单元的聚丙烯酸基团;或为了增加亲脂性,"模块"为具有2-40个碳的烷基;或具有2-40,优选2-20,特别优选2-10个重复单元的聚烯烃;或为氨基酸,优选选自甘氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、脯氨酸、甲硫氨酸;或为具有2-40,优选2-20,特别优选2-10个氨基酸的多肽,其中所述氨基酸优选选自非极性氨基酸,特别优选自甘氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、脯氨酸、曱硫氨酸;或为具有2-100,优选2-80,特别优选2-50,最优选2-20个单体单元的聚酯、聚酰胺或聚氨酯。在更优选的实施方案中,连接分子为式9c的分子,式9c其中邻位、间位或对位上的X为COOH或R-COOH,且R为d-d2直链烷基,如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、新戊基、叔戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基;或环烷基,如Cs-d2环烷基,任选被一个或多个d-C4烷基取代;或定位于邻位、间位或对位的芳基、千基或苯曱酰基单元;优选环己基、苯基和萘基。在另一优选的实施方案中,R还可以为式lb中所述的"模块"。在本发明另一实施方案中,使用式10所示的连接分子(iii),其中"n"为0-20之间的整数,优选0-15,特别优选1-10,极为特别优选l-8,且Y为羟基或氨基。氨基可以为伯氨基或仲氨基。连接分子(iii)极为特别优选马来酰亚胺基烷醇。马来酰亚胺基烷醇优选马来酰亚胺基乙醇,最优选所有的马来酰亚胺基戊醇。在另一优选的实施方案中,式10的连接分子(iii)具有至少两个不同的偶联官能团和额外的增加亲水性或亲脂性的模块。这种优选的连接分子如式10b所示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage53</formula>式10b其中"n"为0-40或0-20之间的整数,优选0-15,特别优选O-IO,极为特别优选l-9,或2-8,或3画7,且X为基团O、S、N、CH2、-OOO、0=C-0-、-NR、-NR-C-O、O-C-NR-,且R为H、d-Cu支链或非支链烷基,如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、新戊基、叔戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基;或环烷基;苯曱酰基,节基;C6-d。芳基,如苯基和萘基;杂芳基;优选H、甲基和乙基;且"模块"为乙二醇或具有2-40,优选2-20,特别优选2-10个重复单元的聚乙二醇基团;或氨基酸,优选选自甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、精氨酸和半胱氨酸;或具有2-40,优选2-20,特别优选2-10个氨基酸的多肽,其中所述氨基酸优选为极性氨基酸,特别优选选自甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、精氨酸和半胱氨酸;或具有2-100,优选2-80,特别优选2-50,最优选2-20个单体单元的聚丙烯酸基团;或为了增加亲脂性,"模块,,为具有2-40个碳原子的烷基;或带有2-40,优选2-20,特别优选2-10个重复单元的聚烯烃;或氨基酸,优选选自甘氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、脯氨酸、甲硫氨酸;或具有2-40,优选2-20,特别优选2-10个氨基酸的多肽,其中所述氨基酸优选选自非极性氨基酸,特别优选选自甘氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、脯氨酸、曱硫氨酸;或具有2-100,优选2-80,特别优选2-50,最优选2-20个单体单元的聚酯、聚酰胺或聚氨酯,且Y为来自羟基或氨基的官能团。在另一优选的实施方案中,连接分子(iii)与效应分子(i)(例如如上所述的活性染料)的偶联为碳二亚胺、酸酐或酰基氯(acidchloride)介导的酯化反应或酰胺形成反应,其中特别优选连接分子(iii)的酰基氯的应用。碳二亚胺、酸酐或酰基氯介导的反应意味着连接分子(iii)的羧基活化是连接分子(iii)与效应分子(i)之间形成酯或酰胺所必需的。可提及的碳二亚胺优选为二环己基碳二亚胺(DCC)、二异丙基碳二亚胺(DIC)、N,-(3-二甲氨基丙基)-N-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC),其中特别优选二异丙基碳二亚胺或EDC。此外,有可能使用羰基二咪唑(CDI)进行活化。这些酯化反应在O.l-lOOmol。/o的N,N-二曱氨基吡P定(DMAP),优选0.5-10%,特别优选1-6%的存在下进行。可以通过使用碳二亚胺活化的化合物与胺反应形成酰胺。任选可以在加成剂(additive),例如像N-羟基琥珀酰亚胺、五氟苯酚或N-羟基苯并三唑的存在下进行酰胺形成反应。这类加成剂为本领域技术人员公知。如果获得可通过这些加成剂可分离的活性酯,这些分离的活性酯与效应分子的反应还可按照本发明理解为碳二亚胺介导的酯化反应。连接分子(iii)反应得到酸酐通过如本领域技术人员公知的一般方法进行。优选混合酸酐的应用,例如通过与乙酐、新戊酸酐(pivaloylanhydride)、乙酰氯、新戊酰氯或氯甲酸酯反应实现。特别优选新戊酸酐和具有碳酸的酸酐。当使用酰基氯时,有利的是在叔碱如吡啶、三乙胺的存在下进行酸酐形成反应。优选可以在上述连接分子(iii)活化之后,在碱的存在下进行(a)中所述连接分子(iii)与效应分子(i)的偶联而得到酸酐。优选提及的碱为芳族和叔烷基胺类,例如吡啶、三乙胺、三丁胺、三辛胺、乙基二异丙胺等。在特别优选的实施方案中,所用的碱为三乙胺。为了使连接分子(iii)与酰基氯反应,所用的氯化剂为本领域技术人员公知的常用氯化剂,例如亚硫酰氯、三氯化磷、五氯化磷、草酰氯、碳酰氯或三氯氧化磷。极为特别优选亚硫酰氯(SOCl2)的应用。使用亚硫酰氯有可能例如将马来酰亚胺基己酸转化成酰基氯。在此处合适的溶剂为芳族和脂族烃,例如苯、曱苯、二曱苯类、己烷、庚烷等;卣代烃,例如二氯甲烷;醚,例如二乙醚、THF等;以及过量的氯化剂自身。在优选的实施方案中,使用曱苯。可以使用或不使用催化剂进行氯化反应。DMF为特别优选用于氯化反应的催化剂。任选地,可以进一步纯化来自步骤(a)的反应产物(下文称作连接效应分子(iv))以便分离可能的反应产物异构体。本文中可以使用纯化化学物质的所有常用方法,例如蒸馏、提纯、结晶、提取和层析纯化方法。优选进行柱层析。除上述活性染料外,还可以使其它染料通过连接分子与角蛋白结合多肽偶联并用于本发明的方法。本文特别有利的染料为下表中给出的那些。颜色指数编号(CIN)摘自RoweColourIndex,第3版,SocietyofDyersandColourists,Bradford,<table>tableseeoriginaldocumentpage56</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage57</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage58</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage59</column></row><table>发明方法而言,使用通过连接分子偶联的、包含表3中所示染料分子之一的角蛋白结合效应分子。上述染料还可以用作皮肤-或指甲-结合多肽序列(ii)的效应分子(i),以用于染色染色皮肤或指曱,如文身。特别适合使用包含荧光染料(例如表3中包括的荧光染料)的角蛋白结合效应分子,以便在施用于皮肤后实现更为健康的发光样皮肤色度以及光学增亮皮肤("皮肤增白,,)。例如,使用的荧光色素描述在US6753002中。用于生产更健康皮肤色度的荧光染料描述在"FillingtheFluorescentPalette,Cosmetics&Toiletries,26-34,121,No.5,2006"中。例如,优选来自DayGlo的荧光染料。此外,这些包含荧光染料的角蛋白结合效应分子还可以用于增亮毛发并用于产生毛发上的特殊反射或闪光。这描述在例如"Hairlighteningbyfluorescentdyes,Cosmetics&Toiletries,56-57,120,No.7,2005"和其中引述的US2004/0258641说明书中。上述步骤(a)所产生的反应产物与角蛋白结合多肽(ii)的结合通过连接分子上仍然游离的第二个固着基团进行。例如,这类固着基团可以为巯基,通过它连接分子可以与角蛋白结合多肽(ii)的半胱氨酸基团构成二硫键。接精确匹配。此外,结果有可能使两个或多个效应分子与角蛋白结合多肽(ii)连接。所用的连接分子受欲偶联官能团的控制。适用的有例如通过硫氢基反应性基团键合角蛋白而与多肽(ii)偶联的分子(例如马来酰亚胺、吡啶二硫化物、a-卣代乙酖基、乙烯砜、磺化烷基砜(优选磺化乙基砜))。优选连接分子(iii)与角蛋白结合多肽(ii)的共价连接。例如,这可以通过角蛋白结合多肽(ii)的侧链,特别是通过氨基官能团、羟基官能团、羧酸酯官能团或巯基官能团进行。优选通过一个或多个赖氨酸基团的氨基官能团、半胱氨酸基团的一个或多个巯基、丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸基团的一个或多个羟基、天冬氨酸或谷氨酸的一个或多个羧基或通过角蛋白结合多肽(ii)的N-末端或C-末端官能团连接。除在角蛋白结合多肽(ii)的一级序列中出现的氨基酸官能团外,还有可能向该序列中添加具有适当官能团的氨基酸(例如半胱氨酸、赖氨酸、天冬氨酸、谷氨酸)或用这类氨基酸官能团取代多肽序列的氨基酸。用于诱变或操纵核酸分子的方法为本领域技术人员充分公知。几种选择的方法如下所述。特别优选利用所定义的本发明优选的马来酰亚胺基己酸制备的连接效应分子(iv)的应用。就这类连接效应分子(iv)而言,存在于角蛋白结合多肽中的半胱氨酸基团用于偶联。可以通过三种不同的测试监测效应分子偶联的成功(i)Ellmaim测试,其中可以在效应分子偶联之前和之后测定蛋白质中游离Cys-SH基团的数量。在偶联后游离SH基团的大量减少表明反应进展良好(参见实施例ll)。(ii)活性测试,其中可以测量含有和不含偶联效应分子的KBD-B(SEQIDNO.:166)与毛发的结合。良好的反应控制不应降低KBD-效应分子相对于非偶联KBD-B(SEQIDNo.:166)的活性(参见实施例12)。(iii)由于染料成功偶联在KBD-B(SEQIDNo.:166)上,毛发或皮肤的可见染色(参见实施例14)。在本发明的另一实施方案中,发生效应分子的结合,从而由于内源性酶(例如酯酶、脂肪酶或葡萄糖苷酶)的作用,或随时间推移环境条件(例如湿度、酸性pH)对皮肤的作用的结果,效应分子能够在"緩释"或"控释,,的意义上从角蛋白结合多肽(ii)中除去并释放。角蛋白结合多肽(ii)由此可以用作施用系统,通过单次或重复施用该系统,可以实现皮肤上存在少量游离效应分子。一般而言,本领域技术人员公知效应分子可以从皮肤中其相应衍生物,例如从生育酚醋酸酯、抗坏血酸棕榈酸酯或抗坏血酸葡萄糖苷中释放(例示性的文献Redoul6s,D.等J.Invest.Dermatol.125,2005,270,BeijersbegenvanHenegouwen,G.M.J.等,J.Photochem.Photobiol.29,1995,45)。本发明另一优选的实施方案中,就本发明的方法而言,使用携带羧基、羟基或氨基的染料。本文所用的效应分子可以具有一个或多个羧基、羟基或氨基。本发明还提供了上述角蛋白结合效应分子在适合于染色角蛋白纤维,优选毛发、皮肤或指甲,特别优选人毛发的化妆品组合物中的应用。在另一优选的实施方案中,本发明的上述角蛋白结合效应分子的应用为适合于与化妆品合适的助剂和常用于染发剂的添加剂组合用于染发的组合物形式。这里,可以使用上述染料,优选批准用于化妆品目的的染料。这些染料通常的添加浓度占组合物总重的0.001-1重量百分比,优选0.01-0.9%重量,特别优选0.01-0.8%重量或0.01-0.7%重量,极为特别优选0.01-0.6%重量或0.01-0.5%重量,最优选0.01-0.4%重量或0.01-0.3°/。重量。在另一实施方案中,组合物可以包含占组合物总重1-10%重量,优选2-8%重量,3-7%重量,4-6%重量浓度的本发明的角蛋白结合效应分子。此外,这些组合物可以包含占组合物总重10-20%重量,优选11-19%重量,12-18%重量,13-17%重量,14-16%重量浓度的本发明的角蛋白结合效应分子。为了确保染发组合物的活性成分在施用后保留在毛发上一定时间并且不会进入不期望的部位,如面部,组合物应具有一定的最低粘度。通常通过使用增稠剂获得这种粘度,这些增稠剂由此为大多数染发剂的另一组分。所用的增稠剂通常为交联的聚丙烯酸(例如Carbopol)、羟乙基纤维素、蜡,特别是具有一定HLB值(亲水亲油平衡值)的非离子型表面活性剂、阴离子型、阳离子型或非离子型締合聚合物的混合物。两性共聚物作为增稠剂在化妆品组合物中的应用早已公知。如果聚合物既具有致阴离子/阴离子基团,又具有致阳离子/阳离子基团,那么它们称作两性或两亲的。具有足够数量可离解基团的两性聚合物为水溶性的或水可分散的,并已经在制药和化妆品领域找到了多种应用。合适的增稠剂或聚合物描述在专利申请WO00/039176、WO04/058837、EP-A-0982021、WO01/62809、WO05/004821、DE20207896Ul和WO02/000181中。为了建立某些特性,制品还可以额外包含基于硅化合物的调理物质。合适的硅化合物例如为聚烷基硅氧烷、聚芳基硅氧烷、聚芳基烷基硅氧烷、聚醚硅氧烷、硅树脂或聚二甲基硅氧烷共聚醇(CTFA)和氨基官能团硅化合物,如氨基封端聚二曱基硅氧烷(CTFA)。抛射剂为常用于喷发剂或气溶胶泡沫的抛射剂。优选丙烷/丁烷混合物、戊烷、二曱醚、1,l-二氟乙烷(HFC-152a)、二氧化碳、氮或压缩空气。可以使用的乳化剂为常用于毛发泡沫的所有乳化剂。合适的乳化剂可以为非离子型、阳离子型或阴离子型或两性的。非离子型乳化剂的实例(INCI命名法)为聚乙二醇月桂基醚(laureth),例如聚乙二醇月桂基醚-4;鲸蜡醇聚醚,例如鯨蜡醇聚醚-1、聚乙二醇鲸蜡基醚;鲸蜡硬脂醇聚醚,例如鲸蜡硬脂醇聚醚-25;聚乙二醇脂肪酸甘油酯、羟基化卵磷脂、脂肪酸的乳酰基酯、烷基聚糖普。阳离子型乳化剂的实例为十六烷基二甲基-2-羟乙基磷酸二氢铵(cetyldimethyl-2-hydroxyethylammoniumdihydrogenphosphate)、十六烷基三甲基氯化铵(cetyltrimoniumchloride)、十六烷基三甲基溴化铵(cetyltrimoniumbromide)、椰油基三曱基甲基石危酸铵(cocotrimoniummethylsulfate)、季铵盐-l至x(INCI)。例如,阴离子型乳化剂可以选自烷基硫酸盐、烷基醚硫酸盐、烷基磺酸盐、烷基芳基磺酸盐、烷基琥珀酸盐、烷基磺基琥珀酸盐、N-烷酰基肌氨酸盐、酰基牛磺酸盐、酰基羟乙基磺酸盐、烷基磷酸盐、烷基醚磷酸盐、烷基醚羧酸盐、a-烯烃磺酸盐、特别是碱金属和碱土金属盐、例如钠、钾、镁、钙和铵盐以及三乙醇胺盐。烷基醚磺酸盐、烷基醚磷酸盐和烷基醚羧酸盐分子可以具有1-10个环氧乙烷或环氧丙烷单元,优选l-3个环氧乙烷单元。可以使用的凝胶形成剂为常用于化妆品的所有凝胶形成剂。它们包括轻度交联的聚丙烯酸,例如卡波姆(INCI);纤维素衍生物,例如羟丙基纤维素、羟乙基纤维素、阳离子修饰的纤维素;多糖,例如黄原胶;辛酸/癸酸甘油三酯;丙烯酸钠共聚物、聚季铵盐-32(和)液体石蜡(INCI),丙烯酸钠共聚物(和)液体石蜡(和)PPG-l十三烷醇聚醚-6,丙烯酰胺基丙基三甲基氯化铵/丙埽酰胺共聚物,硬脂醇聚醚-10烯丙基醚,丙烯酸酯共聚物、聚季铵盐-37(和)液体石蜡(和)PPG-l十三烷醇聚醚-6,聚季铵盐-37(和)丙二醇二癸酸酯二辛酸西旨(和)PPG-l十三烷醇聚醚-6,聚季铵盐-7,聚季铵盐-44。在香波制品中,可以使用常用于香波的所有阴离子型、中性、两性或阳离子型表面活性剂。合适的阴离子型表面活性剂例如为烷基硫酸盐、烷基醚硫酸盐、烷基磺酸盐、烷基芳基磺酸盐、烷基琥珀酸盐、烷基磺基琥珀酸盐、N-烷酰基肌氨酸盐、酰基牛磺酸盐、酰基羟乙基磺酸盐、烷基磷酸盐、烷基醚磷酸盐、烷基醚羧酸盐、a-烯烃磺酸盐、特别是碱金属和碱土金属盐、例如钠、钾、镁、钙和铵盐以及三乙醇胺盐。烷基醚磺酸盐、烷基醚磷酸盐和烷基醚羧酸盐分子可以具有1-10个环氧乙烷或环氧丙烷单元,优选l-3个环氧乙烷单元。适用的有,例如十二烷基硫酸钠、十二烷基硫酸铵、十二烷基醚硫酸钠、十二烷基醚桥u酸铵、月桂酰基肌氨酸钠、油酰基琥珀酸钠、月桂基磺基琥珀酸铵、十二烷基苯磺酸钠、三乙醇胺十二烷基苯磺酸盐。合适的两性表面活性剂为,例如,烷基甜菜碱、烷基酰氨基丙基甜茱碱、烷基磺基甜茱碱、烷基甘氨酸盐、烷基羧基甘氨酸盐、烷基两性乙酸盐或-丙酸盐、烷基两性二乙酸盐或-二丙酸盐。例如,可以使用椰油基二甲基磺基丙基甜茱碱、月桂基甜菜碱、椰油基酰氨基丙基甜菜碱或椰油两性丙酸钠(sodiumcocamphopropionate)。合适的非离子型表面活性剂为,例如,在烷基链上具有6-20个碳原子的可以为直链或支链的脂族醇或烷基酚与环氧乙烷和/或环氧丙烷的反应产物。烯化氧的含量约为6-60mol/mole醇。此外,烷基胺氧化物、单-或二烷基烷醇酰胺、聚乙二醇的脂肪酸酯、烷基聚糖苦或山梨聚糖醚酯是合适的。此外,香波制品可以包含常用的阳离子型表面活性剂,例如,季铵化合物,例如十六烷基三甲基氯化铵。在香波制品中,为了获得某些效果,可以将常用的调理剂与本发明的角蛋白结合效应分子组合使用。它们包括,例如,INCI命名为聚季铵盐的上述阳离子聚合物,特别是乙烯基吡咯烷酮/N-乙烯基咪唑错盐的共聚物(LuviquatFC,Luviquat&commat,HM,LuviquatMS,LuviquatCare),使用硫酸二乙酯季铵化的、N-乙烯基吡咯烷酮/甲基丙烯酸二甲氨基乙酯的共聚物(LuviquatDPQ11),N-乙烯基己内酰胺/N-乙烯^吡咯烷酮/N-乙烯基咪唑错盐的共聚物(LuviquatDHold),阳离子纤维素衍生物(聚季铵盐-4和-10),丙蜂酰胺共聚物(聚季铵盐-7)。此外,可以使用蛋白质水解产物且还有基于硅化合物的调理物质,例如聚烷基硅氧烷、聚芳基硅氧烷、聚芳基烷基硅氧烷、聚醚硅氧烷或硅树脂。其它合适的硅化合物为聚二甲基硅氧烷共聚醇(CTFA)和氨基官能团硅化合物,如氨基封端聚二甲基硅氧烷(CTFA)。此外,可以使用阳离子瓜尔胶衍生物,诸如瓜尔胶羟丙基三甲基氯化铵(INCI)。美发或皮肤美容制品通常用于施用于皮肤(局部)或毛发上。局部用制品在本文应理解为表示那些适合于将活性成分以精细分布的形式施用于皮肤或毛发的制品。例如,适用于该目的的有水性溶液和水醇溶液、喷雾剂、泡沫、泡沫气雾剂、软膏、水性凝胶、0/W或W/0型乳剂、微乳或化妆棒制品。按照本发明化妆品组合物的优选实施方案,所述组合物包含栽体。优选的载体为水、气体、基于水的液体、油、凝胶、乳剂或微乳、分散体或其混合物。所述的载体表现出良好的皮肤相容性。具有特别优点的局部用制品为水性凝胶、乳剂或微乳。可以使用的乳化剂为非离子表面活性剂、两性离子表面活性剂、两性表面活性剂或阴离子乳化剂。乳化剂可以存在于本发明组合物中的量占组合物的0.1-10%重量,优选1-5%重量。例如,非离子表面活性剂可以为选自如下的至少一种表面活性剂2-30mol环氧乙烷和/或0-5mol环氧丙烷与具有8-22个碳原子的直链脂肪醇、具有12-22个碳原子的脂肪酸以及烷基具有8-15个碳原子的烷基酚的力口成产物;1-30mol环氧乙烷与甘油加成产物的dM8脂肪酸单酯和二酯;具有6-22个碳原子的饱和和不饱和脂肪酸的甘油单酯和二酯及山梨聚糖单酯和二酯及其环氧乙烷加成产物;烷基具有8-22个碳原子的烷基单糖苷和寡糖苷及其乙氧基化类似物;15-60mol环氧乙烷与蓖麻油和/或氬化蓖麻油的加成产物;多元醇且特别是聚甘油酯,例如聚甘油聚蓖麻油酸酯、聚甘油聚-12-羟基硬脂酸酯或聚甘油二聚酸酯(polyglycero1dimerate)。同样合适的是来自这些物质类别中的两种或多种化合物的混合物;2-15mol环氧乙烷与荒麻油和/或氩化蓖麻油的加成产物;基于直链、支链、不饱和或饱和<:6/22脂肪酸、蓖麻油酸及12-羟基硬脂酸和甘油、聚甘油、季戊四醇、二季戊四醇、糖醇(例如山梨糖醇)、烷基糖苷(例如甲基糖苷、丁基糖苷、月桂基糖苷)和聚糖苷(例如纤维素)的偏酯;单-、二-和三烷基磷酸酯和单-,二-和/或三-PEG烷基砩酸酯类及其盐;羊毛蜡醇;聚硅氧烷-聚烷基聚醚共聚物和相应的衍生物;如在德国专利说明书1165574中的季戊四醇、脂肪酸、柠檬酸和脂肪醇的混合酯和/或具有6-22个碳原子的脂肪酸、曱基葡萄糖和多元醇,优选甘油或聚甘油和聚亚烷基二醇的混合酯。此外,两性离子表面活性剂可以用作乳化剂。两性离子表面活性剂为用于指那些在分子中携带至少一个季铵基团和至少一个羧酸酯基团或磺酸酯基团的表面活性化合物的术语。特别合适的两性离子表面活性剂为所谓的甜菜碱,如N-烷基-N,N-二曱基铵甘氨酸盐,例如椰油烷基二甲基铵甘氨酸盐,N-酰氨基丙基-N,N-二甲基铵甘氨酸盐,例如椰油酰氨基丙基二曱基铵甘氨酸盐和2-烷基-3-羧基甲基-3-羟乙基咪唑啉,它们各在烷基或酰基上均带有8-18个碳原子;以及椰油酰氨基乙基羟乙基羧甲基甘氨酸盐。特别优选已知CTFA命名为椰油酰胺基丙基甜菜碱的脂肪酸酰胺衍生物。同样合适的乳化剂为两性表面活性剂。两性表面活性剂应理解为表示除分子中的Cs,,8烷基或酰基外,包含至少一个游离氨基和至少一个《0011-或-80311基团并且能够形成内盐的表面活性化合物。合适的两性表面活性剂的实例为各在烷基上带有8-18个碳原子的N-烷基甘氨酸、N-烷基丙酸、N-烷氨基丁酸、N-烷基亚氨基二丙酸、N-羟乙基-N-烷基酰氨基丙基甘氨酸、N-烷基牛磺酸、N-烷基肌氨酸、2-烷基氨基丙酸和烷基氨基乙酸。特别优选的两性表面活性剂为N-椰油烷氨基丙酸酯、椰油酰氨基乙氨基丙酸酯和(:12/18酰基肌氨酸。除两性乳化剂外,季铵乳化剂也是合适的,其中特别优选季铵型酯,优选甲基季铵化二脂肪酸三乙醇胺酯盐。此外,可以使用的阴离子乳化剂为烷基醚硫酸盐、单酸甘油酯硫酸盐、脂肪酸硫酸盐、磺基琥珀酸盐和/或醚羧酸。合适的油体为基于具有6-18,优选8-10个碳原子的脂肪醇的格尔伯特(Guerbet)醇,直链(:6-0:22脂肪酸与直链(:6-(:22脂肪醇的酯;支链Q-d3羧酸与直链C6-C22脂肪醇的酯;直链CVC22脂肪酸与支链醇,特别是2-乙基己醇的酯;直链和/或支链脂肪酸与多元醇(例如,丙二醇,二聚体二醇或三聚体三醇)和/或格尔伯特醇的酯;基于C6-do脂肪酸的甘油三酯;基于CVd8脂肪酸的液体单-/二-、三甘油酯混合物;C6-C22脂肪醇和/或格尔伯特醇与芳族羧酸,特别是苯甲酸的酯;Crd2二羧酸与具有l-22个碳原子的直链或支链醇或具有2-10个碳原子和2-6个羟基的多元醇的酯;植物油;支链伯醇;取代的环己烷,直链CVC22脂肪醇碳酸酯,格尔伯特醇碳酸酯;苯甲酸与直链和/或支链CVC22醇的酯(例如FinsolV^TN);二烷基醚;环氧化脂肪酸酯与多元醇、硅油和/或脂族或环烷烃的开环产物。可以使用的油体还有硅化合物,例如二甲基聚硅氧烷、曱基苯基聚硅氧烷、环状硅化合物和氨基-、脂肪酸-、醇-、聚醚-、环氧-、氟-、烷基-和/或糖苷-修饰的硅化合物,它们于室温可以为液体形式或树脂形式。油体可以存在于本发明组合物的量占组合物的1-90%重量,优选5-80%重量且特别是10-50%重量。可与本发明角蛋白结合效应分子一起使用的所示成分目录当然不应视为穷尽或限制性的。这些成分可以单独使用或彼此任意组合地使用。此外,本发明涉及适合于染色皮肤、指甲和/或毛发的组合物,优选染发剂,它们包含至少一种上述本发明的角蛋白结合效应分子。本发明还提供了使用本发明的角蛋白结合效应分子染色毛发、皮肤和/或指曱的方法。在这种方法中,优选使用包含至少一种上述角蛋白结合多肽(ii)和至少一种表3、5和6所示染料或活性染料的角蛋白结合效应分子。当生产适合于染发的制品时,自然还可以将角蛋白结合效应分子与不同的染料彼此混合,以获得特定的色调。例如,可以如下生产具有特定色调的制品(a)在角蛋白结合效应分子生产期间混合选择的活性染料或染料,或(b)在生成染发剂时混合各角蛋白结合效应分子。在本发明特別优选的实施方案中,使用这样的角蛋白结合效应分子,其包含(a)角蛋白结合多肽,其包含SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示序列之一,优选SEQIDNO:2、4、6、8、10、12、14、40、42、44、46、48、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170,特别优选166和168,最优选168所示的序列;或对应于这样的多肽,所述多肽与至少一种SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示的序列,优选SEQIDNO:2、4、6、8、10、12、14、40、42、44、46、48、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170,特别优选166和168,最优选168所示的序列具有至少40%、45%或50%,优选至少55%、60%、65%或70%,特别优选至少75%、80%、85%、卯%、91%、92%、93%或94%,极为特别优选至少95%或96%的同一性,并且能够结合角蛋白,(b)马来酰亚胺基己酸或马来酰亚胺基烷醇,优选马来酰亚胺基戊醇作为连接分子(iii),和(c)选自表3所列的染料的效应分子(i),或(d)选自表6或7的活性染料。优选通过将包含本发明角蛋白结合效应分子的制品以足以产生所需颜色改变的量和时间施用于需染色的毛发而染色毛发。在本文中可以在极短时间(几分钟)后或在至少半小时内使用合适的角蛋白结合效应分子实现良好的染色(参见实施例20)。本领域技术人员理解染色所需的量和时间取决于需染色的毛发的长度和数量。在上述方法的特别优选的实施方案中,为一种可逆的染色方法,其中可以在置换反应中从皮肤、毛发或指甲上除去角蛋白结合效应分子。为此,例如,可以使用角蛋白沖洗,从而将角蛋白结合效应分子从其与角蛋白的既有价键中置换出来,并被冲洗用的角蛋白饱和。可选地,还有可能使用高比例的去污剂(例如SDS)冲洗(参见实施例20)。序列SEQID序列NO.:类型序列描述1核酸智人(Homt^印i'e附)桥粒斑蛋白一登录号NM一0044152蛋白质智人桥粒斑蛋白—登录号NM—0044153核酸智人桥粒斑蛋白一登录号NM一004415结构域B4蛋白质智人桥粒斑蛋白—登录号NM—004415结构域B5核酸智人桥粒斑蛋白—登录号NM一004415结构域B-16蛋白质智人桥粒斑蛋白—登录号NM—004415结构域B-17核酸智人桥粒斑蛋白—登录号NMJ)04415结构域B-28蛋白质智人桥粒斑蛋白—登录号NM—004415结构域B-29核酸智人桥粒斑蛋白—登录号NM一004415结构域C10蛋白质智人桥粒斑蛋白—登录号NM一004415结构域C11核酸智人桥粒斑蛋白一登录号NM—004415结构域C-112蛋白质智人桥粒斑蛋白_登录号~1\1—004415结构域C-113核酸智人桥粒斑蛋白—登录号NM_004415结构域C-214蛋白质智人桥粒斑蛋白—登录号NM—004415结构域C-215核酸智人丝聚蛋白—登录号CAI1959S16蛋白质智人丝聚蛋白—登录号CAI1959617核酸智人斑菲素蛋白l登录号NMJ)01005337,转录变体la18蛋白质智人斑菲素蛋白l登录号NM一001005337,转录变体la19核酸智人斑菲素蛋白l登录号NM一000299,转录变体lb20蛋白质智人斑菲素蛋白l登录号NM—000299,转录变体lb21核酸小家鼠(Mmswhwh/ks)斑菲素蛋白2登录号NM—026163NM—02789422蛋白质小家鼠斑菲素蛋白2登录号NMJ)26163NM—02789523核酸小家鼠斑菲素蛋白l登录号NM—01964524蛋白质小家鼠斑菲素蛋白l登录号NM一01964625核酸牛(JMtaHn^斑菲素蛋白l部分mRNA,登录号XM—86834826蛋白质牛斑菲素蛋白l部分mRNA,登录号XM—86834927核酸家犬(CflM,X/iimi7/an'力,与斑菲素蛋白l同工型la类似,登录号XM—85152828蛋白质家犬,与斑菲素蛋白l同工型la类似,登录号X1VL85152929核酸斑马鱼(Dflm》/w/0),与斑菲素蛋白l类似,登录号XM—69583230蛋白质斑马鱼,与斑菲素蛋白l类似,登录号XM—69583331核酸褐家鼠(iaff"sm7rveg/ctw),与斑菲素蛋白l类似,登录号XM—22266632蛋白质褐家鼠,与斑菲素蛋白l类似,登录号XM—22266733核酸黑猩猩(户训的gto办tey),与斑菲素蛋白l类似,登录号XM—51409134蛋白质黑猩猩,与斑菲素蛋白l类似,登录号XM—51409235核酸红原鸡(Ga/ftwgfl/ftw),与斑菲素蛋白l类似,登录号XM—41924036蛋白质红原鸡,与斑菲素蛋白l类似,登录号X1VL41924137核酸非洲爪蟾(Xe"印"s/aevis),与斑菲素蛋白4类似,登录号BI39049638蛋白质非洲爪蟾,与斑菲素蛋白4类似,登录号BI3卯49739核酸智人桥粒斑蛋白,转录变体2,登录号NMJ)0100884440蛋白质智人桥粒斑蛋白,转录变体2,登录号NM一00100884541核酸小家鼠桥粒斑蛋白,登录号XM—62131442蛋白质小家鼠桥粒斑蛋白,登录号XM—62131543核酸褐家鼠,与桥粒斑蛋白同工型II类似,登录号XM—22525944蛋白质褐家鼠,与桥粒斑蛋白同工型II类似,登录号XIV^22526045核酸黑猩猩桥粒斑蛋白,登录号XM—51822746蛋白质黑猩猩桥粒斑蛋白,登录号XM—51822847核酸红原鸡,与桥粒斑蛋白类似,登录号XM一41895748蛋白质红原鸡,与桥粒斑蛋白类似,登录号XM—41895849核酸智人连接桥粒斑珠蛋白(JUP),转录变体2,登录号NM—02199150蛋白质智人连接桥粒斑珠蛋白(JUP),转录变体2,登录号NM—02199251核酸小家鼠,桥粒斑珠蛋白;Y-连环蛋白,登录号NM—01059352蛋白质小家鼠,桥粒斑珠蛋白;Y-连环蛋白,登录号NM—01059453核酸褐家鼠y-连环蛋白(桥粒斑珠蛋白),登录号NMJ)3104754蛋白质褐家鼠Y-连环蛋白(桥粒斑珠蛋白),登录号NMJ)3104855核酸斑马鱼犰狳(armadillo)蛋白质家族;桥粒斑珠蛋白,登录号NM—13117756蛋白质斑马鱼犰狳蛋白质家族;桥粒斑珠蛋白,登录号NM一13117857核酸热带爪蟾(Xew叩HS^TO//cflfc)连接桥粒斑珠蛋白,登录号BC06471758蛋白质热带爪蟾连接桥粒斑珠蛋白,登录号BC06471859核酸家犬,与连接桥粒斑珠蛋白同工型10类似,登录号XM—85662560蛋白质家犬,与连接桥粒斑珠蛋白同工型10类似,登录号^_85662661核酸非洲爪蟾Jup蛋白,登录号BC09411662蛋白质非洲爪蟾Jup蛋白,登录号BC09411763核酸牛连接桥粒斑珠蛋白,登录号NM—00100402464蛋白质牛连接桥粒斑珠蛋白,登录号NMJ)0100402565核酸猪Cftw化ro/fl)桥粒斑珠蛋白,登录号NM一21432366蛋白质猪桥粒斑珠蛋白,登录号NM—21432467核酸斑马鱼连接桥粒斑珠蛋白,登录号BC05830568蛋白质斑马鱼连接桥粒斑珠蛋白,登录号BC05830669核酸酿酒酵母(5ViccAaTOmj;cescerevZw'ae),桥粒斑珠蛋白/犰狳/卩-连环蛋白,登录号AF00526770蛋白质酿酒酵母,桥粒斑珠蛋白/犰狳/p-连环蛋白,登录号AF00526871核酸智人网蛋白l,中间丝结合蛋白,登录号NM一20138072蛋白质智人网蛋白l,中间丝结合蛋白,登录号NM—20138173核酸小家鼠网蛋白l(Plecl),转录变体ll,mRNA,登录号NM—201394XM74蛋白质小家鼠网蛋白l(Plecl),转录变体ll,mRNA,登录号NM—201394XM75核酸牛,与网蛋白l同工型l(LOC510991)类似,登录号XM—58823276蛋白质牛,与网蛋白l同工型l(LOC510991)类似,登录号XM—58823377核酸家犬,与网蛋白l同工型类似,登录号XM—53920478蛋白质家犬,与网蛋白l同工型类似,登录号XM—53920579核酸克氏锥虫(7>y/m"osoTOicr"zi),网蛋白样蛋白,登录号XM—80984980蛋白质克氏锥虫,网蛋白样蛋白,登录号XM—80985081核酸褐家鼠网蛋白,登录号X5960182蛋白质褐家鼠网蛋白,登录号X5960283核酸黑线仓鼠(0/ce加/wsgrisetw)网蛋白,登录号AF26075384蛋白质黑线仓鼠网蛋白,登录号AF26075485核酸智人周斑蛋白,登录号NMJ)0270586蛋白质智人周斑蛋白,登录号NM—00270687核酸88蛋白质89核酸卯蛋白质91核酸92蛋白质93核酸94蛋白质95核酸96蛋白质97核酸98蛋白质99核酸100蛋白质101核酸102蛋白质103核酸104蛋白质105核酸106蛋白质107核酸108蛋白质109核酸110蛋白质111核酸112蛋白质113核酸小家鼠周斑蛋白,登录号NM一008卯9XM一358卯5小家鼠周斑蛋白,登录号NM—008卯9XM—358906智人包斑蛋白,登录号NM—001988智人包斑蛋白,登录号NM一001989小家鼠包斑蛋白,登录号NM—025276XM—283024小家鼠包斑蛋白,登录号NMJ)25276XM一283025牛,与包斑蛋白类似,登录号X1VL587641牛,与包斑蛋白类似,登录号XM—587642家犬,与包斑蛋白类似,登录号XM一540443家犬,与包斑蛋白类似,登录号XM540444斑马鱼,与包斑蛋白类似,登录号XM一687958斑马鱼,与包斑蛋白类似,登录号XM一687959褐家鼠,与包斑蛋白类似,db一xrefGenelD:303687褐家鼠,与包斑蛋白类似,db—xrefGenelD:303688黑猩猩,与包斑蛋白类似,登录号XM—511692黑猩猩,与包斑蛋白类似,登录号XM一511693人大疱性类天疱疮抗原,登录号M63618人大疱性类天疱疮抗原,登录号M63619小家鼠大疱性类天疱疮抗原l(Bpagl),登录号AF396877小家鼠大疱性类天疱痴抗原l(Bpagl),登录号AF396878小家鼠毛透明蛋白样l,登录号NM—027762小家鼠毛透明蛋白样l,登录号NM一027763牛,与毛透明蛋白样l类似,登录号XM—597026牛,与毛透明蛋白样l类似,登录号XM一597027智人毛透明蛋白样l,登录号NM—001008536XM—060104智人毛透明蛋白样l,登录号NM一001008536XM—060105紫海胆(5YTO"gy/ocew^mw/HOT"ratos),与毛透明蛋白类似,登录号XM—793822114蛋白质紫海胆,与毛透明蛋白类似,登录号XM一793823115核酸克氏锥虫毛透明蛋白,推定,登录号XM—809758116蛋白质克氏锥虫毛透明蛋白,推定,登录号XM一809759117核酸蓝氏贾第鞭毛虫(G!'flfrf/atonMa)ATCC50803,毛透明蛋白,登录号X1VL765825118蛋白质蓝氏贾第鞭毛虫ATCC50803,毛透明蛋白,登录号XM—765826119核酸烟曲霉(Asperg"/"s/"m/gfl加s)AG93,毛透明蛋白,登录号XMJ748643120蛋白质烟曲霉Af293,毛透明蛋白,登录号XM—748644121核酸家兔(ac"m'c"/HS)毛透明蛋白,登录号Z1卯92122蛋白质家兔毛透明蛋白,登录号Z1卯93123核酸黑猩猩,与毛透明蛋白类似,登录号XM—526770124蛋白质黑猩猩,与毛透明蛋白类似,登录号XM一526771125核酸人毛透明蛋白(TRHY),登录号L09190126蛋白质人毛透明蛋白(TRHY),登录号L09191127核酸小家鼠富含脯氨酸的小蛋白3,登录号NMJ)11478128蛋白质小家鼠富含脯氨酸的小蛋白3,登录号NMJ)11479129核酸智人富含脯氨酸的小蛋白2B(SPRR2B),登录号NMJ)01017418130蛋白质智人富含脯氨酸的小蛋白2B(SPRR2B),登录号NM—001017419131核酸小家鼠毛囊蛋白AHF,登录号XM—485271132蛋白质小家鼠毛嚢蛋白AHF,登录号XM一485272133核酸智人表斑蛋白1(EPPK1),登录号NM—031308XM—372063134蛋白质智人表斑蛋白1(EPPK1),登录号NM—031308XM—372064135核酸小家鼠表斑蛋白1,登录号NM—144848NM—173025136蛋白质小家鼠表斑蛋白1,登录号NMJ44848NM_173026137核酸小家鼠结构蛋白FBFl,登录号AF241249138蛋白质小家鼠结构蛋白FBFl,登录号AF241250139核酸变形链球菌(5^e/7tococcHS附Mta附)抗原I/II的spaP基因,登录号X17390140蛋白质变形链球菌抗原I/II的spaP基因,登录号X17391141核酸PCR引物Bag43的序列142核酸PCR引物Bag44的序列143核酸PCR引物Bag53的序列144核酸PCR引物Bag51的序列145核酸通过PCR引物Lib148(SEQIDNo.:147)和Libl49(SEQIDNo.:148)扩增的DNA片段146蛋白质核酸分子SEQIDNo.:145的翻译产物147核酸PCR引物Libl48的序列148核酸PCR引物Libl49的序列149核酸通过PCR引物Libl49(SEQIDNO.:148)和Libl50(SEQIDNO.:151)扩增的DNA片段150蛋白质核酸分子SEQIDNo.:149的翻译产物151核酸PCR引物Libl50的序列152核酸通过PCR引物Libl51(SEQIDNo.:156)和Libl52(SEQIDNo.:157)扩增的DNA片段153蛋白质核酸分子SEQIDNo.:152的翻译产物154核酸PCR引物Libl51的序列155核酸PCR引物Libl52的序列156蛋白质KBD-B一3智人桥粒斑蛋白一登录号NM一004415结构域B-3157蛋白质KBD-B_4智人桥粒斑蛋白—登录号NM—004415结构域B-4158蛋白质KBD-B—5智人桥粒斑蛋白一登录号NM—004415结构域B-5159核酸KBD-B一6智人桥粒斑蛋白—登录号NM—004415结构域B-5160蛋白质KBD-B—6智人桥粒斑蛋白—登录号NM—004415结构域B-5161核酸智人多毛蛋白(trichoplein),BC004285162蛋白质智人多毛蛋白,BC004285智人桥粒斑蛋白—登录号NM—004415,与SEQIDNo.:IDl相比在2715、8000和8000位附163核酸近具有核酸交换智人桥粒斑蛋白—登录号NM—004415,与SEQIDNo.:ID2相比在卯5、2687和2688位具有164蛋白质氨基酸交换165核酸KBD-B_7智人桥粒斑蛋白—登录号NM—004415结构域B-7166蛋白质KBD-B_7智人桥粒斑蛋白—登录号NM—004415结构域B-7167核酸具有N-末端组氨酸固着点的KBD-D,智人斑菲素蛋白la登录号NM.1005337168蛋白质具有N-末端组氨酸固着点的KBD-D,智人斑菲素蛋白la登录号NP.001005337具有C-末端组氨酸固着点的KBD-D氨基酸l-273,169核酸智人斑菲素蛋白la登录号NM.001005337具有C-末端组氨酸固着点的BD-D氨基酸l-273,170蛋白质智人斑菲素蛋白la登录号NP.001005337171核酸PCR引物HRe6的序列172核酸PCR引物HRe9的序列173核酸PCR引物HRe7的序列174核酸PCR引物HRe8的序列175核酸PCR引物HRe26的序列176核酸PCR引物HRe27的序列披露下列实施例的目的在于举例说明本发明的优选实施方案。这些实施例不应视为穷尽的或限制本发明的主题。在实验说明中,使用下列缩写(2陽氨基画2画甲基丙醇)AMP,(摄氏度)。C,(乙二胺四乙酸)EDTA,(1,1-二氟乙烷)HFC152,(化妆品成分国际命名法)INCI,(毫升)ml,(分钟)min,(油/水)0/W,(聚乙二醇)PEG-25,(对氨基苯曱酸)PABA,(百万分率)ppm,(适量)q.s.,(乙烯基吡咯烷酮)VP,(7J《/油)W/0,(活性成分)AI,(聚乙烯吡咯烷酮)PVP,角蛋白结合结构域(KBD),人桥粒斑蛋白角蛋白结合结构域B(KBD-B),人桥粒斑蛋白角蛋白结合结构域C(KBD-C)。实施例l:表达栽体和生产菌林测试多种表达载体的角蛋白结合结构域(KBD)表达。为此,使用多种启动子(例如IPTG诱导型、鼠李糖诱导型、阿拉伯糖(arabindose)诱导型、甲醇诱导型、组成型启动子等)。同样测试其中KBD作为融合蛋白表达的构建体(例如为与硫氧还蛋白或eGFP或YaaD[枯草芽孢杆菌(及s"&i'fc),SWISS-PROT:P37527,PDX1等的融合体)。文中使用多种表达系统表达所述的KBD-B(角蛋白结合结构域B,SEQIDNo.:4)和KBD-C(角蛋白结合结构域C,SEQIDNo.:IO)以及这两种结构域的组合。提及的栽体构建体并旨在限制权利要求。作为实例代表给出了IPTG诱导型载体pQE30-KBD-B(图1)、曱醇诱导型载体pLib15(图2)和pLib16(图3)以及诱导型载pLib19(图4)的载体图谱。用于KBD-C的方法也可以与所述载体构建和表达方法类似。为了表达KBD,使用多种生产宿主,例如,大肠杆菌(五."//)菌林(参见实施例2;例如XL10-Gold[Stratagene公司,BL21-CodonPlus[Stratagene^^司等等)。然而,也使用其它细菌生产宿主,例如,巨大芽孢杆菌(5""7/"s柳""ten'w/w)或枯草芽孢杆菌。就巨大芽孢杆菌中的KBD表达而言,按照与Barg,H.,Malten,M.&Jahn,D.(2005)Peoteinandvitaminproductionin5a"7/"51膨gflte/7'w附.IniVfe幼orf!s/"B/Cec/rw0/ogj;-Af/cn6iVi//Vodwcte必/Cnwi^J5/^尸附fl&Vw51(Barredo,J广L.编辑,205-224)中类似的方式实施所述方法。所用的真菌生产菌株为巴斯德毕赤氏酵母(尸/c/i/a/7^to&)(参见实施例3;例如GS11S和KM71[均来自英骏公司(Invitrogen)]等等)和构巢曲霉045/7ew/〃附mWw/""s)(参见实施例4;例如RMS011[Stringer,MA,Dean,RA,Sewall,TC,Timberlake,WE(1991)Rodletless,anew却,7/附developmentalmutantinducedbydirectgeneactivation.GenesDev5:1161-1171和SRF200[Karos,M,Fischer,R(1999)MolecularcharacterizationofHymA,anevolutionarilyhighlyconservedandhighlyexpressedproteinof^s/7Cg/〃MS1附V/w/a肌MolGenetGenomics260:510-5211等等)。然而,还有可能使用其它真菌生产宿主,例如,黑曲霉(Js/^/^7/附"/ger)(与EP0635574Al和/或WO98/46772类似的KBD表达)进行KBD表达。实施例2:使用IPTG诱导型启动子通过例如表达质粒pQE30-KBD-B在大肠杆菌菌抹中表达KBD为了表达,使用多种生产宿主,例如,多种大肠杆菌菌林(例如XL10-Gold[Stratagene公司,BL21-CodonPlus[Stratagene公司等等)、巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌等。本文所述的——作为实例的代表——是使用pQE30-KBD-B转化的大肠杆菌克隆和表达KBD-B:pQE30-KBD-B的克隆-由人角化细胞的cDNA文库(BD生物科学系统克隆技术y〉司(BDBioscience,Clontech),人角化细胞cDNA,包皮,对数期原代培养物,载体Xgtll)制备k-MaxiDNA(DNA-XMaxi试剂盒,Qiagen公司)。使用下列寡核苷酸进行PCR:Bag43(5,画GGTCAGTTACGTGCAGCTGAAGG-3,)(SEQIDNo.:141)和Bag44(5,GCTGAGGCTGCCGGATCG画3,)(SEQIDNo.:142)50piPCR混合物Pfu超高保真lOxPCR緩冲液XDNA(744ng/pl)dNTP混合物(10mM)寡Bag43(192ng/^d)寡Bag44(181ng/pl)Pfu超高保真聚合酶H205pi1pl(l:30稀释液)0.5^10.5pi1pi41pi温度程序2min-95。C「30sec-95°C30x乂30sec-梯度50C->60"C、2min30sec-72。C10min-72。C-在琼脂糖凝胶上切下所得约1102bp大小的PCR产物并纯化之,-使用纯化的PCR产物作为模板,然后进行二次PCR:所用的寡核苷酸Bag53:(5,-CGCGCCTCGAGCCACATACTGGTCTGC-3,)(SEQIDNo.:143)和Bag51(5,-GCTTAGCTGAGGCTGCCGGATCG-3,)(SEQIDNo.:144)50plPCR混合物10xPCR緩沖液TAQ:5jnl来自上述PCR的模板3.5pidNTP混合物(10mM)1pi寡Bag53(345ng/|nl)0.5|nl寡Bag51(157ng/|iil)0.5piTA聚合酶1piH2039pi温度程序:2mill-95。C"30sec-95°C30x<30sec-58。CL3min-72°C10min-72。C-在琼脂糖凝胶上切下所得约1073bp大小的PCR产物,纯化并在下列载体中克隆pCR2.1-TOPO(英骏公司)。-然后转化所得载体pCR2.1-TOPO+KBD-B(5027bp),在大肠杆菌中扩增,然后用XhoI和EcoRI切割,并在pBAD/HisA(英骏公司;同样用XhoI和EcoRI切割)中克隆所得KBD-B片段。-再次用SacI和StuI切割新形成的pBAD/HisA+KBD-B(5171bp),并在pQE30(Qiagen公司;用SacI和SmaI切割)中克隆所得KBD-B片段。利用所得的表达载体pQE30-KBD-B(4321bp;参见图1)进行下列KBD-B表达。大肠杆菌中的载体pQE30-KBD-B表达的KBD-B(SEQIDNo.:4)额外包括N-末端的氨基酸MRGSHHHHHHGSACEL和C-末端的氨基酸GVDLQPSLIS(SEQIDNo.:166)。大肠杆菌中pQE30-KBD-B表达的KBD-B-以pQE30-KBD-B转化的大肠杆菌菌林(例如XL10-Gold[Stratagene公司])的平板或甘油培养物接种预培养物。根据主培养物大小的不同,在试管或小烧瓶中使用LB培养基进行接种(约1:100)。画根据所用的菌林使用抗生素(就pQE30-KBD-B而言使用氨节西林100jig/ml)。-在250rpm和37。C进行孵育。-使用预培养物按照大约1:100接种主培养物,主培养物LB培养基或合适的含有相应抗生素的基本培养基。在250rpm和37'C孵育。-对高于0.5的OD(600mn)进行lmMIPTG诱导。-在诱导4小时后,离心除去细胞。在发酵罐中,方法类似,不过,有可能在高得多的OD单位下进行诱导且由此显著增加细胞和蛋白质产率。实施例3:通过使用甲醇诱导型启动子通过例如表达质粒pLib15和pLib16(摇瓶)在巴斯德毕赤氏酵母菌抹中进行KBD的胞内和分泌表达为了进行KBD表达,使用多种巴斯德毕赤氏酵母菌林,例如,GS115和KM71(毕赤氏酵母表达试剂盒,M版;英骏生命技术公司(InvitrogenLifeTechnologies))。本文所述的是一一作为实例的代表一一使用pLibl5(胞内表达载体,参见图6)或pLib16(分泌表达载体,参见图7)转化的巴斯德毕赤氏酵母表达KBD-B。-为了构建pLib15,通过PCR扩增948bp大小的KBD-B编码DNA片段(SEQIDNo,:145),使用寡核苷酸Libl48(5,-GCTAAGGAATTCACCATGCATCACCATCACCATCACGAGCCACATACTGGTCTGCT-3,(SEQIDNo.:147))和Libl49(5,-GCTGGAGAATTCTCAGCTAATTAAGCTTGGCTGCA画3,(SEQIDNo.:148)),以载体pQE30-KBD-B(实施例2,图5)作为模板。此处在PCR产物的两端引入EcoRI限制位点。-为了构建pLib16,通过PCR扩增942bp大小的KBD-B编码DNA片段(SEQIDNo.:149),4吏用寡核苷酸Libl49(5,-GCTGGAGAATTCTCAGCTAATTAAGCTTGGCTGCA-3,(SEQIDNo.:148))和Libl50(5,國GCTAAGGAATTCCATCACCATCACCATCACGAGCCACATACTGGTCTGCT-3,(SEQIDNo.:151)),以载体pQE30-KBD-B(实施例2,图5)作为模板。此处在PCR产物的两端引入EcoRI限制位点。-在具有如下组成的50nl反应混合物中进行PCR:1nl质粒DNApQE30-KBD-B1pldNTP混合物(各10mM;艾本德股份公司(Eppendorf))5pi10xPCR緩冲液十MgCl2(罗氏(Roche))1nlLibl48或Lib1505,引物(相当于50pmol)1jilLibl493,引物(相当于50pmol)5UPwo聚合酶(罗氏(Roche))在下列循环条件下进行PCR良应:步骤l:5分钟,95。C(变性)步骤2:45秒,95。C步骤3:45秒,50。C(退火)步骤4:2分钟,72'C(延伸)步骤2-4的30个循环步骤5:IO分钟,72°C(延伸后)步骤6:4'C(停止)-用EcoRI消化使用寡核苷酸Libl48/Libl49扩增的PCR产物(SEQIDNo.:145)并连入EcoRI切割的载体pPIC3.5(毕赤氏酵母表达试剂盒,M版,英骏公司)中。通过对连接产生的载体pLib15(图6)进行测序来检验正确的KBD-B扩增。-用EcoRI消化使用寡核苷酸Libl49/Libl50扩增的PCR产物(SEQIDNo.:149)并连入EcoRI切割的载体pPIC9(毕赤氏酵母表达试剂盒,M版,英骏公司)中。通过对连接产生的载体pLibl6(图7)进行测序来检验正确的KBD-B扩增。-按照制造商的说明(毕赤氏酵母表达试剂盒,M版,英骏公司)用环状和StuI线性化的载体pLibl5和pLibl6转化巴斯德毕赤氏酵母的电感受态细胞和球状体。-通过PCR和Southern(DNA)印迹使用染色体DNA分析转化体。-就预培养物而言,从平板或甘油培养物中接种表达KBD-B的巴斯德毕赤氏酵母转化体。根据主培养物的大小,在试管或小烧瓶中使用MGY/BMG或BMGY培养基(毕赤氏酵母表达试剂盒,M版,英骏公司)(约1:100)进行接种。_培养物在250-300rpm和30X:孵育至OD6(Mr2-6。-室温1500國3000xg5min收集细胞。-就主培养物而言,将收集的细胞沉淀以OD6。(Tl溶于含甲醇的MM、BMM或BMMY培养基(毕赤氏酵母表达试剂盒,M版,英骏公司)中,以诱导表达。-主培养物在250-300rpm和30。C孵育l-96小时。-每隔24小时添加100%甲醇至0.5%的甲醇终浓度而维持诱导。-就胞内表达而言,在主培养结束后收集细胞并通过Menton-Gaulin匀浆枳J皮碎。-就分泌表达而言,收集培养物上清液并且从中直接纯化KBD-B。画巴斯德毕赤氏酵母胞内表达的KBD誦B(SEQIDNo.:145)(pLibl5)除多肽序列SEQIDNo.:4外,还额外包括N-末端的氨基酸MHHHHHH和C-末端的氨基酸GVDLQPSLIS。-巴斯德毕赤氏酵母分泌表达的KBD-B(SEQIDNo.:149)(pLibl6)在加工前除多肽序列SEQIDNo.:4外,还额外包括N-末端的氨基酸VAVLPFSNST丽GLLFINTTIASIAAKEEGVSLEKREAEAYVEFHHHHHH和C-末端的氨基酸GVDLQPSLIS。-由巴斯德毕赤氏酵母加工并分泌的KBD-B(SEQIDNo.:149)(pLibl6)除多肽序列SEQIDNo.:4外,还额外包括N-末端的氨基酸YVEFHHHHHH和C-末端的氨基酸GVDLQPSLIS。实施例4:通过使用诱导型alcA启动子通过例如表达质粒pLib19(摇瓶)在构巢曲霉菌4朱中表达KBD为了进行表达,使用构巢曲霉野生型菌抹,例如,RMS011或SRF200。本文描述的是一一作为实例的代表一一使用pLibl9(图8)转化的构巢曲霉表达KBD-B。-为了构建pLib19,通过PCR扩增922bp大小的KBD-B编码DNA片段(SEQIDNo.:152),使用寡核苷酸Libl51(5'画CACCATGCATCACCATCACCATCACGAGCCACATACTGGTCTGCT國3,(SEQIDNo.:154))和Libl52(5,-GCTAATTAAGCTTGGCTGCA3,(SEQIDNo.:155)),以载体pQE30-KBD-B(实施例2,图5)作为模板(使用上述PCR条件,其中PCR程序的退火温度为与引物Libl51和Libl52的Tm值相适应的53。C)。将PCR产物连入载体pENTR/D(pENTRTM定向TOPO⑧克隆试剂盒,E版,英骏公司)。通过测序检验正确的KBD-B扩增。-使用"GatewayLRclonaseTM酶混合物"(英骏公司)使KBD-B编码DNA片段重组到栽体pMT-OvE(ToewsMW,WarmboldJ,KonzackS,RischitorP,VdthD,VienkenK,VinuesaC,WeiH,FischerR;EstablishmentofmRFPlasafluorescentmarkerin/15/7erg,7/附mV/"/fl朋andconstructionofexpressionvectorsforhigh-throughputproteintaggingusingrecombinationinvitro(GATEWAY).(2004)CurrGenet45:383-389)中。该过程产生载体pLibl9(图8)。-使用环状载体pLibl9转化构巢曲霉野生型菌抹的原生质体(YeltonMM,HamerJE,TimberlakeWE;TransformationofA/wg,7/附wiV/w/a附byusingatrpCplasmid(1984)ProcNatlAcadSciUSA81:1479-1474)。通过PCR和Southern印迹,使用染色体DNA分析转化体。画为了预培养表达KBD-B的构巢曲霉转化体,在500ml烧瓶内的100ml基本培养基(0.6。/0NaN03;0.152%KH2P04;0.052%KC1[pH6.5;0.8%葡萄糖;0.05%MgS04;1ml微量元素溶液[lg/1FeS04x7H20;8.8g/1ZnS04x7H20;0.4g/1CuS04x5H20;0.15gAMnS04x4H20;0.1g/1Na2B407x10H20;0.05g/l(NH4)6Mo7024x4H20;+菌林特异性补充剂)或100ml完全培养基(2。/。麦芽精;0,1%蛋白胨;2%葡萄糖;十菌林特异性补充剂)上接种106-107个孢子并在200-250rpm和37°C孵育16-24小时。-在预培养后,过滤收集真菌菌丝体,用蒸馏水洗涤,并转入含有100-500ml新鲜基本培养基的烧瓶。在这种主培养基中,使用0.1%的果糖替代葡萄糖作为碳源。为了诱导KBD表达,另外向培养基中加入乙醇(1%终浓度)或甘油(50mM)或乙酸钠(50mM)或乙胺或苏氨酸。所述用于诱导表达的添加剂并非旨在限制权利要求。主培养物在200-250rpm和"'C再孵育5-48小时。_在培养结束后,于室温以1500-3000xg5min收集真菌菌丝体,并通过Menton-Gaulin匀浆机破碎。-除多肽序列SEQIDNo.:4外,在构巢曲霉中表达的KBD-B(SEQIDNo.:152)(pLibl9)还包括N-末端的氨基酸MHHHHHH和C-末端的氨基酸FPLVRVNCALGVIMVIAVSCVKLLSAHNSTQHTSRKHKV,实施例5:细胞破碎和包涵体纯化(pQE30-KBD-B)可溶性表达的KBD可在细胞破碎(例如通过Menton-Gaulin匀浆机)后直接使用,或通过层析纯化(参见实施例6)。不溶性表达的KBD(例如在包涵体中)如下纯化-离心发酵罐内含物,将沉淀悬浮于pH=7.5的20mM磷酸盐緩冲液中,并通过Menton-Gaulin匀浆机破碎。-再次离心破碎的细胞(15000g),使用20mM磷酸盐、500mMNaCl和8M尿素处理沉淀,随后搅拌(溶解包涵体)。-将上清液的pH调整至7.5。-然后再次离心,将上清液进样到Ni螯合琼脂糖凝胶柱上,并如实施例6所述进行纯化。实施例6:Ni螯合琼脂糖凝胶柱上角蛋白结合结构域B的纯化KBD可以通过附着在Ni柱上的His标签进行层析纯化。柱材料高效Ni-琼脂糖凝胶安玛西亚生物科学(AmershamBiosciences)目录号17-5268-02将材料填充入柱(例如直径2.6cm,高1011)并用緩冲液八+4%緩沖液B(相当于20mMn米唑)平衡。蛋白质提取物(例如,参见细胞破碎和包涵体纯化)以pH7.5经超容量杯(Superloop)(AKTA系统)(流速约5ml/min)进样到柱上。在上柱后,<吏用緩冲液A+20mM咪唑进行洗涤。使用緩冲液B(溶于緩沖液A中的500mM咪唑)进行洗脱。使用级分收集器收集级分的洗脱液。然后使洗脱液脱盐(有利于待浓缩的样品)。为此,用例如葡聚糖(Sephadex)G25介质柱(安玛西亚(Amersham))对洗脱液进行脱盐。然后,为了进行浓缩,可以使用例如Amicon超滤装置(搅拌的超滤池,密理博公司(Millipore))。緩冲液A:20mM磷酸二氢钠500mMNaCl(若需要,还有可能使用更低NaCl浓度的緩冲液)8M尿素(若层析可溶性表达的"活性"KBD,则无需使用尿素;不用尿素时无需随后的蛋白质复性)pH=7.50緩冲液B:20mM磷酸二氢钠500mMNaCl(若需要,还有可能使用更低NaCl浓度的緩冲液)8M尿素500mM咪哇pH=7.50实施例7:角蛋白结合结构域B的复性不溶性表达的角蛋白结合结构域(例如来自包涵体)可以如下复性并由此活化方法l:不连续透析将6.5mlCellyticIB(希格玛(Sigma),目录号C5236)和5mMDTT加入到在8M尿素中的6.5mlKBD-B包涵体(Ni螯合柱洗脱液,HiTrap)中。然后将复性的溶液倾入透析管(型谱SpectraPorMWCO:12-14kD)。在4。C在116M尿素溶液中进行约12小时透析,同时小心搅拌。加入500ml25mMTris/HClpH=7.50并在4。C照此进行9小时透析。随后再添加250mlTris緩冲液(同上)并再透析12小时。然后再加入500ml25mMTris/HClpH=7.50并在4。C照此进行9小时透析。随后再添加250mlTris緩沖液(同上)并再透析12小时。然后再加入500ml25mMTris/HClpH=7.50并在4。C照此进行9小时透析。然后将含透析液的透析管放入21:25mMTris+150mMNaClpH=7.50中。然后在4。C再进行12小时透析。然后取出透析管内含物。方法2:连续透析用10mlCellyticIB(希格玛,目录号C5236)和5mMDTT处理在8M尿素中的20mlKBD-B包涵体(Ni螯合柱洗脱液,HiTrap)。然后将溶液倾入透析室Slide-A-Lyzer透析盒PIERCE,MWCO:10kD.目录号66830。然后在4'C在116M尿素溶液中进行约l小时透析。然后在48小时期限内,通过蠕动泵连续计量供给2l如下緩沖液25mMTris/HClpH=7.5。然后将含透析液的透析管加入到2l的终緩沖液中25mMTris+150mMNaClpH=7.50并在4。C进行约12小时透析。然后取出透析管内含物。实施例8:与皮肤的结合l(定性)研发了视觉定性试验以研究KBD是否结合皮肤。所用的溶液封闭溶液罗氏Western封闭试剂1921673(10x溶液)的TBS稀释液。TBS:20mMTris;150mMNaClpH7.5TTBS:TBS+0.05%Tween20第一步为将皮肤的外角蛋白层转移至稳定的支持物上。为此,将透明胶带牢固地施用于脱毛的人皮肤上并再次取下。所述试验可以直接在透明胶带上进行,或可以将粘附的角蛋白层通过再度粘附而转移至载玻片上。如下证实结合-为了与多种试剂一起孵育,转至Falcon管中;-适用的情况下添加乙醇以便脱脂,然后除去乙醇并干燥载玻片;-与封闭緩冲液于室温一起孵育l小时;画4吏用TTBS'冼'涤2x5min;國使用TBS洗涤1x5min;-与在TBS/0.05。/0Tween20中的待测KBD(与标签——例如His6、HA等偶联)或对照蛋白质于室温一起孵育2-4小时;-除去上清液;-用TBS洗潦3次-与在TBS+0.01%封闭緩冲液中按照1:2000稀释的单克隆抗聚组氨酸(或特异性KBD家兔)抗体于室温一起孵育1小时;-用TTBS洗涤2x5min;-用TBS洗涤1x5min;-与在TBS+0.01。/。封闭緩冲液中按照l:5000稀释的抗小鼠IgG碱性磷酸酶缀合物于室温一起孵育1小时;-用TTBS洗涤2x5min;-用TBS洗涤lx5min;-添加磷酸酶底物(NBT-BCIP;勃林格殷格翰公司(Boehringer)MA1片/40ml7K,2.5min;反应用水终止);-用棵眼或使用显微镜对有色沉淀进行视觉检测。沉淀显蓝色表示KBD与皮肤结合。实施例9:与皮肤的结合2(定量)研发了定量试验,可以将KBD的毛发/皮肤结合强度与非特异性蛋白质进行比较。利用5mm木塞钻孔器在无毛发的解冻干燥皮肤块(人或猪)上钻下切片(或就表面试验而言,将皮肤切片插入Falcon盖中)。然后将皮肤样品转换成2-3mm厚度,以除去任何存在的组织。然后将皮肤样品转至Eppendorf管(蛋白质低度结合)中,以进行结合验证(参见图9;可选地还可以使用来自欧莱雅(L,Oreal)的Episkin系统[重构的人皮肤-用PBS/0.05。/oTween20洗涤2次;-添加溶于PBS的1ml1%BSA,并于室温轻摇(900rpm)孵育l小时;-除去上清液;画添加溶于含有0.05。/oTween20的PBS中的100照KBD;于室温轻摇(900rpm)孵育2小时;-除去上清液;-用PBS/0.05。/oTween20洗涤3次;画与lml单克隆小鼠抗标签(His6或HA或特异性KBD)抗体的过氧化物酶的缀合物(在含有0.05%Tween20的PBS中按照1:2000稀释)[单克隆抗聚组氨酸过氧化物酶缀合物,在小鼠中生产,冻千粉,希格玛于室温轻摇(900rpm)孵育2-4小时;画用PBS/0.05。/oTween20洗涤3次;-添加过氧化物酶底物(lml/Eppendorf管;组成参见下文);-进4亍反应至显蓝色(约90秒);-使用100pl2MH2S04终止反应;-在405nm处测量吸收值。过氧化物酶底物(预先现配)0.1mlTMB溶液(溶于DMSO中的42mMTMB)+101111底物緩沖液(0.1]\1乙酸钠,pH4.9)+14.7H2023%浓度实施例10:与毛发的结合(定量)为了还能够证实KBD相对于其它蛋白质而言与毛发的结合强度,研发了定量测定法(参见图9)。在本试验中,首先将毛发与KBD—起孵育并洗掉过量的KBD。然后通过KBD的His标签偶联抗体-过氧化物酶缀合物。再次洗掉未结合的抗体-过氧化物酶缀合物。结合的抗体-过氧化物酶缀合物[单克隆抗聚组氨酸过氧化物酶缀合物,在小鼠中生产,冻干粉,希格玛可以将无色底物(TMB)转化成有色产物,可以在405nm处通过光度测定法测量。光吸收强度表示结合的KBD或对比蛋白质的量。例如,选择的对比蛋白质为来自枯草芽孢杆菌的YaaD,同样具有一一本试验所必需的一一用于检测的His标签。作为对His标签的替代,还可以使用与过氧化物酶缀合的其它非特异性抗体。将5mg毛发(人)切成长5mm的区段并转移至Eppendorf管(蛋白质低度结合),以进行结合验证-添加lml乙醇以进行脱脂;-离心,除去乙醇并用1120洗涤毛发;-添加lml溶于PBS的lo/。BSA并于室温轻摇孵育l小时;-离心,除去上清液;-添加处于lmlPBS/0.05%Tween20中的待测角蛋白结合结构域(与标签一一如His。HA等偶联)或对照蛋白质;在4。C轻摇孵育16小时(或于室温至少2小时);-离心,除去上清液;-用PBS/0.05Q/oTween20洗涤3次;-与lml单克隆小鼠抗标签(His6或HA)抗体的过氧化物酶缀合物(在PBS/0.05%Tween20中按照1:2000稀释)[单克隆抗聚组氨酸过氧化物酶缀合物,在小鼠中生产,冻千粉,希格玛l于室温轻摇孵育2-4小时;-用PBS/0.05o/oTween20洗涤3次;-添加过IU匕物酶底物(lml/Eppendorf管);-进行反应直至显蓝色(约2分钟);-使用100pl2MH2S04终止反应;-在405nm处测定光吸收。过氧化物酶底物(用前现配)0.1mlTMB溶液(溶于DMSO的42mMTMB)+10ml底物緩冲液(O.lM乙酸钠pH4.9)+14.7ilU112023%浓度BSA=牛血清白蛋白PBS=磷酸盐緩沖溶液Tween20=聚氧乙烯山梨聚糖单月桂酸酯,n约为20TMB=3,5,3,,5,画四曱基联苯胺作为实例,毛发上KBD-B的结合试验证实了KBD-B(SEQIDNo.:166)与毛发的结合明显优于对比蛋白质YaaD明显较差的结合表4.:毛发定量KBD活性试验1)緩冲液;2)对比蛋白质YaaD;3)变性KBD-B;4)复性KBD-B。该表显示了405nm处测量的吸收值。<table>tableseeoriginaldocumentpage92</column></row><table>实施例ll:使用具有IPTG诱导型启动子的表达质粒pRee024(图8)通过大肠杆菌菌林表达KBD-D(SEQIDNo.:167)为了进行表达,使用大肠杆菌菌林XLIOGold[Stratagene公司。本文作为实例描述了KBD-D(SEQIDNo.:167)的克隆和随后KBD-D蛋白质(SEQIDNo.:168)在pRee024(图8)转化的大肠杆菌中的表达pRee024的克隆-由人角化细胞cDNA文库(BD生物科学系统克隆技术公司,人角化细胞cDNA,包皮,对数期原代培养物,载体kgtll)制备X-MaxiDNA(DNA-kMaxi试剂盒,Qiagen公司)。扩增KBD-D基因的PCR分两步进行。首先独立低扩增5,端和3,端。这些片段为扩增完整KBD-D基因的基质。如下进行扩增5,端的PCR:引物具有如下序列HRe6:5,-ATGAACCACTCGCCGCTCAAGACCGCCTTG-3,(SEQIDNo.:171)HRe9:5,-CGTTCCCGGTTCTCCTCAGGAGGCTGACTG-3,(SEQIDNo.:172)100pIPCR混合物Pfu超高保真lOxPCR緩冲液10pi入DNA(744ng/pl)1pi(1:IO稀释)dNTP混合物(10mM)10HRe6(196ng/|iU)1^HRe9(201ng/pl)1jilPfu超高保真聚合酶1^双蒸水76pi温度程序2min95。C30sec95°C《30x30sec63。C1min30sec72°C訓在琼脂糖凝胶中检测到约lkb大小的片段。纯化反应产物并在下面用作扩增KBD-D基因的5,端模板。如下进4于3,端扩增的PCR:引物具有如下序列HRe7:5,國TTAGAATCGGGAGGTGAAGTTCCTGAGGCT-3,(SEQIDNo.:173)HRe8:5,-CACCACCAACAAGCTGGAGACCCGGAG-3,(SEQIDNo.:174)100piPCR混合物Pfu超高保真lOxPCR緩冲液10piiDNA(744ng>l)1jul(1:10稀释)dNTP混合物(10mM)10HRe7(201ng/pl)1plHRe8(209ng/pl)1|tilPfu超高保真聚合酶1^双蒸水76温度程序2min95°C30sec95。C3030sec63°CL1min30sec72°C-在琼脂糖凝胶中检测到约1.2kb大小的片段。纯化反应产物并在下面用作扩增KBD-D基因的3,端模板。-为了扩增KBD-D基因,将5,端模板和3,端模板用作基质。PCR如下进行100piPCR混合物Pfu超高保真lOxPCR緩冲液10dNTP混合物(10mM)10jul双蒸水75jil5,端模板1^tl3,端模板1piPfu超高保真聚合酶1^ilH2076pi温度程序f60sec94。C10xt300sec72"C一在10个循环后,加入lpl引物HRe6(196照/ml)和HRe7(206jng/ml)和1jlUPfu超高保真聚合酶并按照如下温度程序进行反应温度程序2min95。C30sec95°C30x30sec63nL1min30sec72。C然后加入lplTaq聚合酶并将混合物在72'C孵育10分钟。-在琼脂糖凝胶上切下约2150bp大小的所得PCR产物,纯化并在下列载体中克隆pCR2.1-TOPO(英骏)。-然后转化所得载体pRee019(6112bp),在大肠杆菌中扩增并通过测序检验KBD-D基因。随后将KBD-D基因克隆入表达载体。为此,使用载体pRee019作为模板再进行PCR:所用的寡核苷酸HRe26:5-CTCGGTACCAACCACTCGCCGCTCAAGACCGCCTTGGCG-3,(SEQIDNo.:175)HRe27:5-ATTAAGCTTTTAGAATCGGGAGGTGAAGTTCCTGAGGCT画3'(SEQIDNo.:176)100plPCR混合物Pfu超高保真lOxPCR緩冲液10jUpRee019(25ng/|Lil)1jtldNTP混合物(10mM)10plHRe26(287ng/pl)1|nlHRe27(354ng/jd)1plPfll超高保真聚合酶1]Ld双蒸水76pi温度程序「2min95。C30sec95°C3030sec79。C、lmin30sec72。C-在琼脂糖凝胶中检测到约2.2kb大小的片段。纯化反应产物,然后使用限制性内切核酸酶KpnI和HindIII切割;将所得片段克隆入表达载体。该步骤得到载体pRee024,随后将其用于KBD-D表达。大肠杆菌中pRee024的KBD-D(SEQIDNo.:167)表达-由pRee024转化的大肠杆菌菌林(例如TG10)的平板或甘油培养物接种预培养物。根据主培养物大小的不同,在试管或小烧瓶中使用LB培养基进行接种(约I:IOO)。画根据所用的菌林使用抗生素(就使用pRee024转化的大肠杆菌TGIO而言使用氨千西林IOOpg/ml)。画在250rpm和37。C进行孵育。-主培养物按照约1:100接种预培养物,主培养物LB培养基或含有相应抗生素的合适的基本培养基。在250rpm和37'C孵育。-在高于l的ODs78nm时以lmMIPTG进行诱导。然后使孵育温度降至室温(约加。C)。细胞在诱导后离心2小时(参见图9)。实施例12:细胞破碎和包涵体纯化(pRee024)不溶性表达的KBD-D(SEQIDNo.:168)(例如在包涵体中)如下纯化将来自实施例2的细胞沉淀重悬于含有100mMNaClpH=7.5的20mM磷酸盐緩冲液中,并通过超声处理破碎。再次离心石皮碎的细胞(4。C,12000g,20分钟)。弃去上清液。将沉淀溶于緩冲液A(10mMNaH2P04,2mMKH2P04,100mMNaCl,8M尿素,5mMDTT)中。然后再次离心混合物,并将上清液上样到Ni螯合琼脂糖凝胶柱上。在上样后,使用緩冲液A和20mM咪唑进行洗涤。使用緩冲液B(10mMNaH2P04,2mMKH2P04,100mMNaCl,8M尿素,5mMDTT,500mM咪唑)进行柱洗脱。收集级分洗洗脱液,并通过SDS-PAGE分析。如实施例13所述复性含纯化KBD-D的级分。实施例13:角蛋白结合结构域D(SEQIDNo.:168)的复性不溶性表达的角蛋白结合结构域D(例如来自包涵体)可以通过透析复性并由此活化。方法如下将来自实施例12包含纯化KBD-D的级分倾入透析管(MWCO12-14KD)。然后在118M尿素溶液中进行透析约1小时。然后在12小时期限内,通过蠕动泵连续计量提供21去离子水。然后取出透析管内含物。将按照这种方式活化的KBD-D用于下列活性试验。实施例14:与皮肤的定性结合利用视觉定性试验来研究KBD-D(SEQIDNo.:168)是否结合皮肤。所用的溶液封闭溶液罗氏Western封闭试剂1921673(10x溶液)的TBS稀释液TBS:20mMTris;150mMNaClpH7.5TTBS:TBS+0.05%Tween20第一步为将皮肤的外角蛋白层转移至稳定的支持物上。为此,将透明胶带牢固地施用于脱毛的人皮肤上并再次取下。所述试验可以直接在透明胶带上进行,或可以将粘附的角蛋白层通过再度粘附而转移至载玻片上。如下证实结合-为了与多种试剂一起孵育,转至Falcon管中;-适用的情况下添加乙醇以便脱脂,然后除去乙醇并干燥载玻片;-与封闭緩沖液于室温一起孵育l小时;-使用TTBS洗涤2x5min;-使用TBS洗涤lx5min;-与在TBS/0.05%Tween20中的测试KBD(与标签——例如His6、HA等偶联)或对照蛋白质于室温一起孵育2-4小时;-除去上清液;-用TBS洗涤3次;陽与单克隆小鼠抗标签(His6或HA)抗体的过氧化物酶缀合物(在TBS+0.01%封闭中按照1:2000稀释)[单克隆抗聚组氨酸过氧化物酶缀合物,在小鼠中生产,冻干粉,希格玛I于室温一起孵育1小时;-用TTBS洗涤2x5min;-用TBS洗涤lx5min;曙添加磷酸酶底物(NBT-BCIP;勃林格殷格翰公司MAl片"Oml水,2.5min;反应用7片终止);用棵眼或使用显微镜对有色沉淀进行视觉检测。在使用KBD-D处理的透明胶带上可见蓝色沉淀,其为抗聚组氨酸-AP缀合物与KBD-D相互作用的反应。作为阴性对照,仅用緩冲液处理透明胶带。此时未观察到明显蓝色。这些结果表明KBD-D与透明胶带上的皮肤角蛋白结合。实施例15:与皮肤和毛发的定量结合为了研究KBD-D(SEQIDNo.:168)与KBD-B(SEQIDNo.:166)相比与皮肤和毛发的结合强度,进行定量试验。在本试验中,首先将毛发与KBD-B或KBD-D—起孵育并洗掉过量的KBD-B或KBD-D。然后通过KBD-B或KBD-D的His标签偶联抗体-过氧化物酶缀合物。再次洗掉未结合的抗体-过氧化物酶缀合物。结合的抗体-过氧化物酶缀合物可以将无色底物(TMB)转化成可以在405nm处通过光度法测量的有色产物。吸收强度表示结合的KBD-B或KBD-D的量。如下在微量滴定板中使用人角化细胞进行结合皮肤的试验。-使用PBS/0.05%Tween20洗涤2次;-添加溶于PBS的1mll%BSA,并于室温轻摇(卯Orpm)孵育l小时;-除去上清液;-添加溶于含0.05%Tween20的PBS中的IOOpgKBD;于室温轻摇(卯0rpm)孵育2小时;-除去上清液;-用PBS/0.05%Tween20洗涤3次;-与lml单克隆小鼠抗-标签-His6抗体于室轻摇(900rpm)孵育2-4小时-用PBS/0.05%Tween20洗涤3次;-添加过氧化物酶底物(lml/Eppendorf管;组成参见下文);-进行反应直至显蓝色(约卯秒);-使用100pl2MH2S04终止反应;-在405nm处测量吸收值。过氧化物酶底物(预先现配)0.1mlTMB溶液(溶于DMSO的42mMTMB)+101111底物緩沖液(0.1]\1乙酸钠pH4.9)+14.7^1112023%浓度为了表征KBD-D与KBD-B相比的毛发结合,如下进行结合测定将5mg毛发(人)切成5mm长的区段并且转移至Eppendorf管(蛋白质滴度结合)。-添加lml乙醇以进行脱脂;-离心,除去乙醇并用1120洗涤毛发;画离心,除去上清液;画添加处于lmlPBS/0.05%Tween20中的待测角蛋白结合结构域(与标签一一例如His。HA等偶联);于室温轻摇孵育2小时;-离心,除去上清液;-用PBS/0.05%Tween20洗涤3次;-与lml单克隆小鼠抗标签(His6或HA)抗体的过氧化物酶缀合物(在PBS/0.05%Tween20中按照1:2000稀释)[单克隆抗聚组氨酸过氧化物酶缀合物,在小鼠中生产,冻干粉,希格玛I于室温轻摇孵育2-4小时;-用PBS/0.05%Tween20洗涤3次;-添加过氧化物酶底物(lml/Eppendorf管);-进行反应直至显蓝色(卯秒);-使用100jul2M112804终止反应。-在405nm处测定吸收度。过氧化物酶底物(用前现配)0.1mlTMB溶液(溶于DMSO的42mMTMB)+10ml底物緩冲液(O.lM乙酸钠pH4.9)+14.7|^1112023%浓度BSA=牛血清白蛋白PBS=磷酸盐緩冲溶液Tween20=聚氧乙烯山梨聚糖单月桂酸酯,n约为20TMB=3,5,3,,5,-四甲基联苯胺表5a:KBD-D或KBD-B与皮肤的定量结合。所示的吸收值标准化为(皮肤或毛发)表面吸收值角蛋白结合结构域_405nm处的吸收值KBD-D与皮肤3.69在10。/o浓度SDS处理后的KBD-D与皮肤3.15KBD-B与皮肤0.93在10。/。浓度SDS处理后的KBD-B与皮肤0.185表5b:KBD-D与毛发的定量结合。所示的吸收值标准化为表面吸收值。角蛋白结合结构域_405nm处的吸收值KBD-D与毛发0.88在10。/。浓度SDS处理后的KBD-D与毛发0.62表5c:相对于未处理的KBD-D和KBD-B毛发或皮肤结合而言以。/。计的10。/。浓度SDS处理后的KBD-D和KBD-B与皮肤和毛发的定量结合以%计的10V。浓度SDS处理角蛋白结合结构域^k_后的相对吸收损失_10。/。浓度SDS处理后的KBD-D与皮肤1510。/。浓度SDS处理后的KBD-B与皮肤8010。/。浓度SDS处理后的KBD-D与毛发3010。/o浓度SDS处理后的KBD-B与毛发86这些结果表明蛋白质KBD-D能够结合毛发,并且更强烈地结合皮肤(参见表5)。与KBD-B(SEQIDNo.:166)形成对照,KBD-D(SEQIDNo.:168)仅受高达10。/。浓度SDS溶液洗涤的较弱影响(参见表5a)。实施例16:偶联成功测试(Ellmann试验)通过三种不同试验监测效应分子偶联的成功(i)Ellmann试验,能够测定效应分子偶联前后蛋白质中游离Cys-SH的数量。在本文中偶联后游离SH基团的数量明显减少表明反应进行良好。(ii)活性试验,能够测定含和不含偶联的效应分子的KBD-B(SEQIDNo.:166)与毛发的结合。良好的反应控制与未偶联KBD-B(SEQIDNo.:166)相比不应降低KBD-效应分子的活性(参见实施例17)。(m)由于染料与KBD-B(SEQIDNo.:166)成功偶联所致的毛发或皮肤的可见染色(参见实施例20)。关于(iii):如下使用EHmann试验测试效应分子偶联的成功所需的物质画EHmann试剂5,5,隱二硫代双(2-硝基苯甲酸)(DTNB);溶于O.lM磷酸钠緩沖液,4mg/lml画0.1M磷酸钠緩冲液pH8.0誦半胱氨酸溶液(26.3mg半胱氨酸盐酸盐一7K合物/100ml磷酸钠緩冲液)。所述溶液在并且必须在用前现配。1.在每种情况中,用移液管将25jtl、50pl、100pl、150pl、200和250jU半胱氨酸溶液吸入试管(13x100mm)构建校准曲线。将测定的蛋白质样品倾入另外的试管(体积<=250jnl)。对于待测的KBD,分配的量至少为lmg/反应混合物。就试管而言,随之在每种情况下使用磷酸钠緩冲液将总体积调至250pl。如果超过了250jil样品体积(因必需的lmgKBD所致),那么在下面第2点使用2.5ml磷酸钠注满时要考虑到这种情况。2.在每种情况下添加50plEllmann试剂和2.5ml磷酸钠緩冲液。快速混合并于室温(RT)孵育15min。3.测量412nm处的吸收值。4.构建校准曲线,绘图并读出待测蛋白质样品的值。在与多种效应分子偶联反应后评价EUmann试验,证实如果KBD-B:染料的混合比为1:2,则2/3的游离巯基都能够与活化的活性染料(参见实施例19)或具有马来酰亚胺基己酸连接分子的染料相偶联。实施例17:KBD-B-染料的毛发结合活性为了测试KBD-B(SEQIDNo.:166)带着偶联的染料是否还可以结合毛发,进行了定量结合测定(参见图9):在本试验中,首先将毛发与KBD-B-染料一起孵育,并洗掉未结合的KBD-B-染料。然后通过KBD-B的His标签偶联过氧化物酶。再次洗掉未结合的过氧化物酶。结合的过氧化物酶可以将无色底物(TMB)转化成可以在405nm处通过光度测定法测量的有色产物。吸收强度表示键合的KBD-B-泛醇的量。作为对比样品,选择不含染料的KBD-B。就确切的操作方法而言,参见实施例IO。实施例18:活性染料存在下的乙烯基砜活性固着点的活化将0.075mol染料(14-264,参见表6)溶于800ml水,并添加25%重量浓度的NaOH溶液将pH调整至10.5。将反应溶液于室温搅拌15分钟,在此过程中将pH保持在10.5,直到它保持稳定不变。然后添加21。/。重量浓度的HC1溶液将pH调整至4.5,并减压蒸发反应混合物(参见图IO)。实施例19:活性染料与KBD-B(SEQIDNo.:166)的偶联在染料与KBD-B反应的过程中,应维持实际的生理条件,否则蛋白质就解折叠而导致沉淀。这实质上意味着不能使用纯有机溶剂,并且应选择接近中性的pH。此外,重要的是偶联的反应温度不超过45。C。关于活性染料的偶联,利用的是KBD(SEQIDNo.:166)中的半胱氨酸。因此,KBD-B(SEQIDNo.:166)具有四个半胱氨酸。其中,两个半胱氨酸位于结构内,对于效应分子偶联而言是不可及的(可根据晶体结构识别)。接近N末端的两个剩余的半胱氨酸(14和83位氨基酸;参见序列KBD-B(SEQIDNo.:166))是效应分子偶联可及的。能够偶联的活性染料与KBD-B(SEQIDNo.:166)通过半胱氨酸的两个游离SH中的至少一个偶联。因此KBD-B与活化染料之间的反应理想地按照1:2的摩尔比进行。实施例19a:活性染料与KBD-D(SEQIDNo.:168)的偶联为了按照与KBD-B类似的方式偶联活化染料,也可以利用KBD-D(SEQIDNo.:168)中的半胱氨酸。因此,KBD-D(SEQIDNo.:168)具有24个半胱氨酸。此外,可以通过定向诱变按照靼向方式引入能够偶联的半胱氨酸基团。因此,染料与KBD-D(SEQIDNo.:168)的偶联可以使用KBD-D按照与实施例19中所述方法以及实施例19b)中所述用于KBD-B的染料(14—1-14-366)类似的方式进行(参见实施例65)。染料14_153、14—154、14-155、14—156、14—181、14_182、14—183、14—276和14—289已经为乙烯基砜的形式,即它们无需活化(预消除反应),而可以与KBD-D直接反应(相当于图ll)。染料而用在实施例66-108的化妆品中实施例19b)KBD-B(SEQIDNo.:166)与如下染料的偶联a)乙烯基砜染料(式l):KBD-B与活化染料之间的反应按照1:2的摩尔比进行,因为KBD-B具有两个用于效应分子偶联的游离半胱氨酸。选择用以偶联的乙烯基砜染料通常以硫酸酯的形式合成,且由此必须在与KBD-B反应前活化成乙烯基砜形式,因为这类染料仅能以其乙烯基砜形式与亲核基团反应。活化反应在碱性条件下进行,于室温将在水性溶液中的染料调整至pH112分钟。然后在添加蛋白质前,使用盐酸将pH调整至7-8(另外参见实施例18)。将反应溶液在30。C,pH7-8緩慢振摇30min。在此过程中,活化的乙烯基砜染料(例如14-264,参见表6)与KBD游离半胱氨酸的巯基反应(参见图2)。可以按照类似方式使下列染料(14一1至14-291)与KBD反应。染料14153、14154、14-155、14—156、14一181、14182、14—183、14_276和14289已经为乙烯基砜形式,即它们无需活化(预消除反应),而可以与KBD直接反应(相当于图ll)。给出了相应产物的颜色。表6<table>complextableseeoriginaldocumentpage105</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage106</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage107</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage108</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage109</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage110</column></row><table>14—32蓝色1433OHOHN丄Ch^、.S^、夕N、/k/k呤一0/^义"ZYY■、OHOH蓝色14—34蓝色14—350、、八^ff0'6>=i[=\。<Ni>>NN《。、、q""^9jtO0:-s-0^^~吞《^"N—~\YnY,olb\=lK0卞00绿色14—36o在。、Z、CO"O3、、z&O蓝色14—37。f°:):夸:蓝色111<table>tableseeoriginaldocumentpage112</column></row><table>4<formula>formulaseeoriginaldocumentpage113</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage114</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage115</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage116</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage117</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage118</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage119</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage120</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage121</column></row><table><image>imageseeoriginaldocumentpage122</image><table>tableseeoriginaldocumentpage123</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage124</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage125</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage126</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage127</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage128</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage129</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage130</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage131</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage132</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage133</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage134</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage135</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage136</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage137</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage138</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage139</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage140</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage141</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage142</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage143</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage144</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage145</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage146</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage147</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage148</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage149</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage150</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage151</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage152</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage153</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage154</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage155</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage156</column></row><table><table>complextableseeoriginaldocumentpage157</column></row><table>b)式3、4、5的染料可选地,还可以使用在其活性固着点上具有可取代的卤原子的染料(例如染料14_354,图12)。这些染料能够在无需活化的情况下与KBD-B的SH反应。KBD与染料14—354之间的反应按照1:2的摩尔比进行,因为KBD-B具有用于效应分子偶联的两个游离半胱氨酸。将反应溶液在30'C、<table>tableseeoriginaldocumentpage158</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage159</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage160</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage161</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage162</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage163</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage164</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage165</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage166</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage167</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage168</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage169</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage170</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage171</column></row><table>胱氨酸),以侵使未反应的染料失活。如果此处应用的染料在合成后不经纯化,它们既包含活性组分又包含非活性副组分。不具有活性固着点或例如在实际KBD偶联反应后游离半胱氨酸键合其活性固着点上的副组分不与KBD-B分子反应。在偶联反应后,或例如在染发过程中可以除去这类副组分。一种选择在于,通过例如柱层析纯化与染料反应的KBD-B。还有可能在"柱反应器"类型中进行KBD-B与活性染料之间的反应。在这方面,KBD-B可以与镍亲和柱偶联,染料与KBD-B键合,而未固定的染料基团可以直接洗掉。然后可以从柱中洗脱KBD-B-染料。另一个选择在于在毛发上一起施用与染料反应的KBD-B以及非活性副组分,并从毛发中洗掉未键合的染料级分。为此,例如,15%浓度的Tween20水溶液是适合用于洗涤的。实施例20.借助KBD-B-染料偶联分子的染发首先使红色活性染料14—264与KBD-B(SEQIDNo.:166)按照上述方法偶联。为了证实KBD-B-染料偶联分子与毛发的结合是由蛋白质介导的,而非游离染料自身,相同的染料在每种情况下仅用半胱氨酸而非KBD-B处理。然后将KBD-B-14—264和14—264分别置于5mg毛发上,短暂孵育并使用15%浓度的Tween20溶液洗掉未结合的KBD-B-染料或纯染料。结果清楚地表明与毛发的结合由KBD-B介导并发生对毛发的染色。另一方面,如果需要使毛发再次脱色,那么使用15%的SDS级分洗涤或使用含角蛋白的溶液处理是合适的。本发明的皮肤美容制品在下文予以说明,其包含根据实施例19制备的角蛋白结合效应分子(与染料14_264偶联的SEQIDNo.:ID166的角蛋白结合结构域)。所述的角蛋白结合效应分子在下文实施例中称作角蛋白结合结构域一活性染料14_264。本领域技术人员能够理解表6和7中所述的所有其它染料可以与KBD按照实施例19、19a或19b偶联并用于下述制品。实施例21:香波(不含角蛋白结合结构域一活性染料的基础配方)<table>tableseeoriginaldocumentpage173</column></row><table>q.s.芳香油q.s.防腐剂1.25聚季铵盐-162.00聚乙二醇月桂基醚-3q.s.柠檬酸1.00角蛋白结合结构域一活性染料14—26457.75软化水B3.00PEG-150二硬脂i3曰变化形式2%A15.0010.005.005.00q.s.q.s.1.252.00q.s.5.0053.75成分(INCI)椰油酰胺丙基甜菜碱椰油两性二乙酸二钠聚山梨醇酯20癸基糖苷芳香油防腐剂聚季铵盐-16聚乙二醇月桂基醚-3柠檬酸角蛋白结合结构域一活性染料14—264软化水B3.00PEG-150二硬脂酸酯制备称重A相组分并溶解。将pH调整至6-7。添加B相并加热至约40'C。快速冷却至室温,同时搅拌。实施例23:染发定型摩丝变化形式1%成分(INCI)A2.00椰油基三甲基甲基硫酸铵(cocotrimoniummethosulfate)q.s.芳香油B6.70丙烯酸酯共聚物0.60氨曱基丙醇0.20鲸蜡硬脂醇聚醚-250.20泛醇0.20羟乙基纤维素10.00醇69.97软化水1.0角蛋白结合结构域一活性染料14—264C10.00丙烷/丁烷变化形式2%成分(INCI)A2.00椰油基三甲基甲基硫酸铵q.s.芳香油B6.70丙烯酸酯共聚物0.60氨甲基丙醇0.20鲸蜡硬脂醇聚醚-250.20泛醇0.20羟乙基纤维素10.00醇69.97软化水0.5角蛋白结合结构域一活性染料14264C10.00丙坑/丁坑制备混合A相组分。称重B相并溶解而得到澄清溶液,然后搅拌入A相。与C相一起装瓶。实施例24:染发定型摩丝变化形式1%A2.00q.s.成分(匿I)椰油基三曱基曱基硫酸铵芳香油B7.00聚季铵盐-462.00聚季铵盐-1178.87软化水2.0角蛋白结合结构域一活性染料14264C10.00丙坑/丁坑变化形式2%A2.00q.s.成分(INCI)椰油基三曱基曱基硫酸铵芳香油B7.00聚季铵盐-462.00聚季铵盐-1178.87软化水1.0角蛋白结合结构域一活性染料14—264C10.00丙烷/丁烷制备混合A相组分。称重B相并溶解而得到澄清溶液,然后搅拌入A相。与C相一起装瓶。实施例25:两束未漂白的金发用实施例22/变化形式1的0.5g染发香波处理欧洲人天然的颜色9/0的金发(2g),并使染发香波在毛发上留置15min。然后用水洗涤发束,使用实施例21的香波清洁,并干燥。毛发完全呈红色。不能再察觉到金发。一束留作对比。然后用实施例21的香波将第二束发洗涤5次并干燥。在第5次洗涤后,将发束与留存的样品进行比较。洗涤5次的发束仍然完全呈红色。两发束具有相同的红色色度。从^f见觉上来看,未能观察到颜色深度上存在差异。实施例26:两束白发用实施例22/变化形式1的0.5g染发香波处理选择的欧洲人天然的白发(2g),并使染发香波在毛发上留置15min。然后用水洗涤发束,使用实施例21的香波清洁,并干燥。毛发完全呈红色。不能再察觉到白发。一束留作对比。然后用实施例21的香波将第二束发洗涤5次并干燥。在第5次洗涤后,将发束与留存的样品进行比较。洗涤5次的发束仍然完全呈红色。两发束具有相同的红色色度。从3见觉上来看,未能观察到颜色深度上存在差异。实施例27两束未漂白的金发用实施例23/变化形式2的0.5g染发定型摩丝处理欧洲人天然的颜色9/0的金发(2g),并使染发定型摩丝在毛发上留置15min。然后用水洗涤发束,使用实施例21的香波清洁,并干燥。毛发完全呈红色。不能再察觉到金发。一束留作对比。然后用实施例21的香波将第二束发洗涤5次并干燥。在笫5次洗涤后,将发束与留存的样品进行比较。洗涤5次的发束仍然完全呈红色。两发束具有相同的红色色度。从视觉上来看,未能观察到颜色深度上存在差异。实施例28:两束白发用实施例23/变化形式2的0.5g染发定型摩丝处理选择的欧洲人天然的白发(2g),并使染发定型摩丝在毛发上留置15min。然后用水洗涤发束,使用实施例21的香波清洁,并干燥。毛发完全呈红色。不能再察觉到白发。一束留作对比。然后用实施例21的香波将第二束发洗涤5次并干燥。在第5次洗涤后,将发束与留存的样品进行比较。洗涤5次的发束仍然完全呈红色。两发束具有相同的红色色度。从视觉上来看,未能观察到颜色深度上存在差异。实施例29:两束未漂白的金发用实施例24/变化形式1的0.5g染发定型摩丝处理欧洲人天然的颜色9/0的金发(2g),并使染发定型摩丝在毛发上留置15min。然后用水洗涤发束,使用实施例21的香波清洁,并干燥。毛发完全呈红色。不能再察觉到金发。一束留作对比。然后用实施例21的香波将第二束发洗涤5次并干燥。在第5次洗涤后,将发束与留存的样品进行比较。洗涤5次的发束仍然完全呈红色。两发束具有相同的红色色度。AM见觉上来看,未能观察到颜色深度上存在差异。实施例30:两束白发用实施例23/变化形式1的0.5g染发定型摩丝处理选择的欧洲人天然的白发(2g),并使染发定型摩丝在毛发上留置15min。然后用水洗涤发束,使用实施例21的香波清洁,并干燥。毛发完全呈红色。不能再察觉到白发。一束留作对比。然后用实施例21的香波将第二束发洗涤5次并干燥。在第5次洗涤后,将发束与留存的样品进行比较。洗涤5次的发束仍然完全呈红色。两发束具有相同的红色色度。从视觉上来看,未能观察到颜色深度上存在差异。实施例31:KBD在日用护理乳剂中的应用——O/W型AI1%:%成分(INCI)A1.7鯨蜡硬脂醇聚醚-6,十八烷醇0.7鯨蜡硬脂醇聚醚-252,0PEG-14聚二甲基硅氧烷3.6鲸蜡硬脂醇6.0甲氧基肉桂酸乙基己酯2.0己二酸二丁酯B5.0甘油0.2EDTA二钠1.0泛醇q.s.防腐剂69.8软化水C4.0辛酸/癸酸甘油三酯,丙烯酸钠共聚物D0.2抗坏血酸磷酸钠1.0生育酚醋酸酯0.2没药醇1.0辛酸/癸酸甘油三酯,抗坏血酸钠,生育酚,视黄醇1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液Eq.s.氢氧化钠<formula>formulaseeoriginaldocumentpage180</formula>制备分别将A和B相加热至约80'C。将B相搅拌入A相并匀化。将C相搅拌入混合的A和B相并再次匀化。搅拌冷却至约40°C,添加D相,使用E相调节pH至约6.5,匀化并搅拌冷却至室温。注意不使用保护气体制备制品。必须在不透氧的包装,例如铝管中装瓶。实施例32:KBD在保护性日霜中的应用——OAV型AI1%:%成分(INCI)A1.7鲸蜡硬脂醇聚醚-6,十八烷醇0.7鲸蜡硬脂醇聚醚-252.0PEG-14聚二甲基硅氧烷3.6鲸蜡硬脂醇6.0甲氧基肉桂酸乙基己酯2.0己二酸二丁酯B5.0甘油0.2EDTA二钠1.0泛醇q.s.防腐剂70.6软化水C4.0辛酸/癸酸甘油三酯,丙烯酸钠共聚物D1.0抗坏血酸磷酸钠1.0生育酚醋酸酯0.2没药醇1.0含有约5。/。角蛋白结合结构域一活性染料14_264的水性溶液Eq.s.氬氧化钠AI5%:%成分(INCI)A1.7鲸蜡硬脂醇聚醚-6,十八烷醇0.7鲸蜡硬脂醇聚醚-252.0PEG-14聚二甲基硅氧烷3.6鲸蜡硬脂醇6.0曱氧基肉桂酸乙基己酯2.0己二酸二丁酯B5.0甘油0.2EDTA二钠1.0泛醇q.s.防腐剂66.6软化水C4.0辛酸/癸酸甘油三酯,丙烯酸钠共聚物D1.0抗坏血酸磷酸钠1.0生育酚醋酸酯0.2没药醇5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液Eq.s.氢氧化钠制备分别将A和B相加热至约80°C。将B相搅拌入A相并匀化。将C相掺入混合的A和B相并再次匀化。搅拌冷却至约40°C,添加D相,使用E相调节pH至约6.5,匀化并搅拌冷却至室温。实施例33:KBD在洁面乳液中的应用——O/W型AI1%:%成分(INCI)A10.0鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯10.0辛酸/癸酸甘油三酯1.5环戊硅氧烷,环己硅氧烷2.0PEG-40氢化蓖麻油B3.5辛酸/癸酸甘油三酯,丙烯酸钠共聚物C1.0生育酚醋酸酯0.2没药醇q.s.防腐剂q.s.D3.00.50.52.04.00.11.060.7AI5%:%A腸訓1.52.0B3.5C1.00.2q.s.q.s.D3.00.50.52.04.00.15.0芳香油聚季铵盐-44椰油基三甲基曱基硫酸铵鲸蜡硬脂醇聚醚-25泛醇,丙二醇丙二醇EDTA二钠含有约5%角蛋白结合结构域_活性染料14—264的水性溶液软化水成分(匿I)鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯辛^7癸酸甘油三酯环戊硅氧烷,环己硅氧烷PEG-40氩化蓖麻油辛^/癸酸甘油三酯,丙烯酸钠共聚物生育酚醋酸酯没药醇防腐剂芳香油聚季铵盐-44椰油基三甲基曱基硫酸铵鲸蜡硬脂醇聚醚-25泛醇,丙二醇丙二醇EDTA二钠含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液56.7软化水制备溶解A相。将B相搅拌入A相。将C相掺入混合的A和B相。溶解D相,搅拌入混合的A、B和C相并勾化。之后搅拌15min。实施例34:KBD在日用护体喷雾剂中的应用AI1%:%成分(INCI)A3.0甲氧基肉桂酸乙基己酯2.0二乙氨基羟基苯甲酰基己基苯曱酸酯1.0聚季铵盐-443.0丙二醇2.0泛醇,丙二醇1.0环戊硅氧烷,环己珪氧烷10.0辛基十二烷醇0.5PVP10.0辛酸/癸酸甘油三酯3.0C12-15烷基苯甲酸酯3.0甘油1.0生育酚醋酸酯0.3没药醇1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液59.2醇AI5%:%成分(INCI)A3.0甲氧基肉桂酸乙基己酯2.0二乙氨基羟基苯甲酰基己基苯甲酸酯200680052113.X说明书第175/474页1.0聚季铵盐-443.0丙二醇2.0泛醇,丙二醇l,O环戊硅氧烷,环己硅氧烷10.0辛基十二烷醇0.5PVP10.0辛酸/癸酸甘油三酯3.0C12-15烷基苯甲酸酯3.0甘油1.0生育酚醋酸酯0.3没药醇5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液55.2醇制备称重A相组分并溶解至澄清。实施例35:KBD在皮肤护肤凝胶中的应用AI1%:%成分(INCI)A3.6PEG-40氬化蓖麻油15.0醇0.1没药醇0.5生育酚醋酸酯q,s.芳香油B3.0泛醇0.6卡波姆1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液75.4软化水C0.8三乙醇胺AI5%:%成分(匿I)A3.6PEG-40氬化蓖麻油15.0醇0.1没药醇0.5生育酚醋酸酯q.s.芳香油B3.0泛醇0.6卡波姆5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液71.4软化水C0.8三乙醇胺制备溶解A相至澄清。使B相溶胀并用C相中和。将A相搅拌入匀化的B相并匀化。实施例36:KBD在剃须后洗液中的应用AI1%:%成分(INCI)A10.0鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯5.0生育酚醋酸酯1.0没药醇0.1芳香油0.3丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交联聚合物B15.0醇1.0泛醇3.0甘油1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液0.1三乙醇胺63.5软化水AI5%:%成分(匿I)A10.0鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯5.0生育酚醋酸酯1.0没药醇0.1芳香油0.3丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交联聚合物B15.0醇1.0泛醇3.0甘油5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液0.1三乙醇胺59.5软化水制备混合A相组分。溶解B相,掺入A相并匀化。实施例37:KBD在日晒后洗液中的应用AI1%:%成分(INCI)A0.4丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交联聚合物15.0鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯0.2没药醇1.0生育盼醋酸酯q.s.芳香油B1.0泛醇15.0醇3.0甘油1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14一264的水性溶液63.2软化水C0.2三乙醇胺AI5%'.%成分(匿I)A0.4丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交联聚合物15.0鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯0.2没药醇1.0生育酚醋酸酯q.s.芳香油B1.0泛醇15.0醇3.0甘油5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液59.2软化水C0.2三乙醇胺制备混合A相组分。将B相搅拌入A相并匀化。用C相中和并再次匀化。实施例38:KBD在防晒露中的应用AI1%:%成分(INCI)A4,5甲氧基肉桂酸乙基己酯3.0氰双苯丙烯酸辛酯2.5二-C12-13烷基苹果酸酯0.5生育酚醋酸酯4.0聚甘油基-3甲基葡萄糖二硬脂酸酯B3.5鯨蜡硬脂醇异壬酸酯1.0VP/二十碳烯共聚物5.0异十六垸2.5二-C12-13烷基苹果酸酯3.0二氧化钛,三曱氧基辛酰基硅烷(trimethoxycaprylylsilane)C5.0甘油1.0鲸蜡硬脂醇硫酸酯钠0.5黄原胶61.7软化水D1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14_264的水性溶液1.0苯氧基乙醇,对羟基苯曱酸甲酯,对羟基苯甲酸乙酯,对羟基苯曱酸丁酯,对羟基苯曱酸丙酯,对羟基苯曱酸异丁酯0.3没药醇AI5%:%成分(INCI)A4.5甲氧基肉桂酸乙基己酯3.0氰双苯丙烯酸辛酯2.5二-C12-13烷基苹果酸酯0.5生育酚醋酸酯4.0聚甘油基-3曱基葡萄糖二硬脂酸酯B3.5鲸蜡硬脂醇异壬酸酯1.0VP/二十碳烯共聚物5.0异十六烷2.5二-C12-13烷基苹果酸酯3.0二氧化钛,三曱氧基辛酰基硅烷C5.0甘油1.0鲸蜡硬脂醇硫酸酯钠0.5黄原胶57.7软化水D5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液1.0苯氧基乙醇,对羟基苯甲酸曱酯,对羟基苯甲酸乙酯,对羟基苯甲酸丁酯,对羟基苯甲酸丙酯,对羟基苯甲酸异丁酯0.3没药醇制备分别将A和B相加热至约80°C。将B相搅拌入A相并匀化。将C相加热至约80。C并搅拌入混合的A和B相,同时匀化。搅拌冷却至约40。C,添加D相并再次匀化。实施例39:KBD在防晒露中的应用——OAV型AI1%:%成分(INCI)A2.0鲸蜡硬脂醇聚醚-6,十八烷醇2.0鲸蜡硬脂醇聚醚-253.0三山裔精2.0鲸蜡硬脂醇2.0鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯5.0甲氧基肉桂酸乙基己酯1.0乙基己基三漆酮1.0VP/二十碳烯共聚物7.0肉豆蔻酸异丙酯B5.0氧化锌,三乙氧基辛酰基珪烷(triethoxycaprylylsilane)C0.2黄原胶0.5丙烯酸羟乙酯/丙烯酰基二甲基牛磺酸钠共聚物,角鲨烷,聚山梨醇酯600.25.00.560.9D1.00.51.00.2AI5%:%A2.02.03.02.02.05.01.01.07.0B5.0C0.20.50.25.00.5EDTA二钠丙二醇泛醇软化水含有约5%角蛋白结合结构域_活性染料14—264的水性溶液苯氧基乙醇,对羟基苯甲酸曱酯,对羟基苯曱酸丁酯,对羟基苯甲酸乙酯,对幾基苯甲酸丙酯,对羟基苯甲酸异丁酯生育酚醋酸酯没药醇成分(INCI)鲸蜡硬脂醇聚醚-6,十八烷醇鯨蜡硬脂醇聚醚-25三山脊精鲸蜡硬脂醇鯨蜡硬脂醇乙基己酸酯甲氧基肉桂酸乙基己酯乙基己基三噪酮VP/二十碳烯共聚物肉豆蔻酸异丙酯氧化锌,三乙氧基辛酰基硅烷黄原胶丙烯酸羟乙酯/丙烯酰基二甲基牛磺酸钠共聚物,角鲨烷,聚山梨醇酯60EDTA二钠丙二醇泛醇56.9软化水D5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14一264的水性溶液0.5苯氧基乙醇,对羟基苯曱酸甲酯,对羟基苯甲酸丁酯,对羟基苯曱酸乙酯,对羟基苯曱酸丙酯,对羟基苯曱酸异丁酯1.0生育酚醋酸酯0.2没药醇制备加热A相至约80°C,搅拌入B相并勻化3min。同冲羊力口热C相至80。C并搅拌入混合的A和B相,同时匀化。冷却至约40。C,搅拌入D相并再次匀化。实施例40:KBD在防晒露中的应用——O/W型AI1%:%成分(INCI)A3.5鲸蜡硬脂醇聚醚-6,十八烷醇1.5鲸蜡硬脂醇聚醚-257.5甲氧基肉桂酸乙基己酯2.0环戊硅氧烷,环己硅氧烷0.5蜂蜡3.0鲸蜡硬脂醇10.0辛酸/癸酸甘油三酯B5.0二氧化钛,二氧化硅,聚甲基硅氧烷(Methicone),氧化铝C3.0甘油0.2EDTA二钠0.3黄原胶1.0癸基糖苷2.0泛醇,丙二醇56.3软化水D1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14一264的水性溶液1.0生育酚醋酸酯0.2没药醇q.s.芳香油q.s.防腐剂AI5%:%成分(INCI)A3.5鲸蜡硬脂醇聚醚-6,十八烷醇1.5鯨蜡硬脂醇聚醚-257.5曱氧基肉桂酸乙基己酯2.0环戊珪氧烷,环己硅氧烷0.5蜂蜡3.0鲸蜡硬脂醇10.0辛酸/癸酸甘油三酯B5.0二氧化钛,二氧化硅,聚甲基硅氧烷,氧化铝C3.0甘油0.2EDTA二钠0.3黄原胶1.0癸基糖苷2.0泛醇,丙二醇52.3软化水D5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液1.0生育酚醋酸酯0.2没药醇q.s.芳香油q.s.防腐剂制备加热A相至约80'C,搅拌入B相并匀化3min。同样加热C相至80。C并搅拌入混合的A和B相,同时匀化。冷却至约40。C,搅拌入D相并再次匀化。实施例41:KBD在足用香脂中的应用AI1%:%成分(匿I)A2.0鲸蜡硬脂醇聚醚-6,十八烷醇2.0鲸蜡硬脂醇聚醚-255.0鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯4.0鲸蜡醇4.0硬脂酸甘油酯5.0》广物油0.2薄荷醇0.5樟脑B69.3软化水q.s.防腐剂C1.0没药醇1.0生育酚醋酸酯D1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液5.0金缕梅提取物(witchhazelextract)AI5%:%成分(INCI)A2.0鯨蜡硬脂醇聚醚-6,十八烷醇2.0鲸蜡硬脂醇聚醚-255.0鯨蜡硬脂醇乙基己酸酯4.0鲸蜡醇4.0硬脂酸甘油酯5.0矿物油0.2薄荷醇0.5樟脑B65.3软化水q.s.防腐剂C1.0没药醇1.0生育酚醋酸酯D5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液5.0金缕梅提取物制备分別将A和B相的组分加热至约80。C。将B相搅拌入A相并匀化。搅拌冷却至约4CTC,添加C和D相之后快速勻化。搅拌冷却至室温。实施例42:KBD在含有没药醇的W/O乳剂中的应用%:%成分(INCI)6.0PEG-7氢化蓖麻油8.0鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯5.0肉豆蔻酸异丙酯15.0》广物油0.3硬脂酸镁0.3硬脂酸铝2.0PEG-45/十二烷基乙二醇共聚物5.0甘油0.7硫酸镁55.6软化水C1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液0.5生育酚醋酸酯0.6没药醇AI5%:%成分(匿I)A6.0PEG-7氩化蓖麻油8.0鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯5.0肉豆蔻酸异丙酯15.0,广物油0.3硬脂酸镁0.3硬脂酸铝2.0PEG-45/十二烷基乙二醇共聚物B5.0甘油0.7硫酸镁51.6软化水C5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14_264的水性溶液0.5生育酚醋酸酯0.6没药醇制备分别将A和B相的组分加热至约85°C。将B相搅拌入A相并匀化。搅拌冷却至约40'C,添加C相并再次快速匀化。搅拌冷却至室温。本专利角蛋白结合结构域的制品目录一一护发用品实施例43:含有定型剂的泡沫调理剂AI1%%成分(INCI)A10.0PVP/VA共聚物0.2羟基乙基十六烷基二甲基磷酸铵0.2鲸蜡硬脂醇聚醚-250.5聚二甲基硅氧烷共聚醇q.s.芳香油10.0醇1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14一264的水性溶液68.1软化水10.0丙烷/丁烷AI5%%成分(匿I)A10.0PVP/VA共聚物0.2羟基乙基十六烷基二曱基磷酸铵0.2鲸蜡硬脂醇聚醚-250.5聚二曱基硅氧烷共聚醇q.s,芳香油10.0醇5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液64.1软化水B10.0丙烷/丁烷制备一起称重A相组分,搅拌至全部物质溶解并与B相一起装瓶。实施例44:染发泡沫调理剂AI1%%成分(INCI)A1.0聚季铵盐-40.5羟基乙基十六烷基二曱基磷酸铵1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液q.s.芳香油q.s.防腐剂91.5软化水B6.0丙烷/丁烷AI5%%成分(INCI)A1.0聚季铵盐-40.5羟基乙基十六烷基二曱基磷酸铵5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液q.s,芳香油q.s.防腐剂87.5软化水B6.0丙烷/丁烷制备一起称重A相组分,搅拌至全部物质溶解而得到澄清溶液,并与B相一起装瓶。实施例45:染发泡沫调理剂AI1%%成分(INCI)A1.0聚季铵盐-110.5羟基乙基十六烷基二曱基磷酸铵1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14_264的水性溶液q.s.芳香油q.s.防腐剂91.5软化水B6.0丙烷/丁烷AI5%%成分(匿I)A1.0聚季铵盐-110.5羟基乙基十六烷基二甲基磷酸铵5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14一264的水性溶液q.s.芳香油q.s.防腐剂87.5软化水B6.0丙烷/丁烷制备一起称重A相组分,搅拌至全部物质溶解而得到澄清溶液,并与B相一起装瓶。实施例46:染发定型泡沫AI1%%成分(INCI)A0.5聚乙二醇月桂基醚-4q.s.芳香油B77.3软化水10.0聚季铵盐-281.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液0.5聚二甲基硅氧烷共聚醇0.2鯨蜡硬脂醇聚醚-250.2泛醇0.1PEG-25PABA<table>tableseeoriginaldocumentpage200</column></row><table>制备混合A相组分。依次添加B相的组分并溶解。与C相装一起瓶。实施例47:染发定型泡沫AI1%%成分(INCI)A2.0椰油基三甲基曱基硫酸铵q.s.芳香油B78.5软化水6.7丙烯酸酯共聚物0.6AMP1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14一264的水性溶液0.5聚二甲基硅氧烷共聚醇0.2鲸蜡硬脂醇聚醚-250.2泛醇0.1PEG-25PABA0.2羟乙基纤维素C腦HFC152AAI5%%成分(INCI)A2.0椰油基三甲基甲基硫酸铵q.s.芳香油B74.5软化水6.7丙烯酸酯共聚物0.6AMP5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液0.5聚二曱基硅氧烷共聚醇0.2鲸蜡硬脂醇聚醚-250.2泛醇0.1PEG-25PABA0.2羟乙基纤维素C10.0HFC152A制备混合A相组分。依次添加B相的组分并溶解。与C相一起装瓶。实施例48:染发定型泡沫AI1%%成分(INCI)A2,0椰油基三曱基曱基硫酸铵q.s.芳香油B7.70聚季铵盐-441.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14_264的水性溶液q.s.防腐剂79.3软化水C10.0丙烷/丁烷AI5%%成分(INCI)A2.0椰油基三曱基甲基硫酸铵q.s.芳香油B7.70聚季铵盐-445.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液q.s.防腐剂75.3软化水C10.0丙烷/丁烷制备混合A相组分。溶解B相的组分至澄清,然后将B相搅拌入A相。将pH调节至6-7,与C相一起装瓶。实施例49:染发定型泡沫AI1%%成分(INCI)A2.00椰油基三甲基曱基硫酸铵q.s.芳香油B72.32软化水2.00VP/丙烯酸酯/曱基丙烯酸月桂醇酯共聚物0.53AMP1.00含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液0.20鲸蜡硬脂醇聚醚-250.50泛醇0.05二苯酮-40.20氨基封端的聚二甲基珪氧烷,西曲氯铵(cetrimoniumchloride),十三烷醇聚醚-12(trideceth-12)15.00醇C0.20羟乙基纤维素D6.00丙烷/丁烷AI5%%成分(INCI)A2.00椰油基三曱基甲基硫酸铵q.s.芳香油B68.32软化水2.00VP/丙烯酸酉旨7甲基丙烯酸月桂醇酯共聚物0.53AMP5.00含有约5%角蛋白结合结构域活性染料14_26的水溶液40.20鲸蜡硬脂醇聚醚-250.50泛醇0.05二苯酮-40.20氨基封端的聚二甲基硅氧烷,西曲氯铵,十三烷醇聚醚-1215.00醇C0.20羟乙基纤维素D6.00丙烷/丁烷制备混合A相组分。依次添加B相的组分并溶解。使C相在A和B的混合物中溶胀,然后将pH调节至6-7。与D相一起装瓶。实施例50:染发定型泡沫AI1%%成分(匿I)A2.00西曲氯铵q.s.芳香油B67.85软化水7.00聚季铵盐-461.00含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液0.20鲸蜡硬脂醇聚醚-250.50泛醇0.05二苯酮-40.20氨基封端的聚二甲基硅氧烷,西曲氯铵,十三烷醇聚醚-1215.00醇C0.20羟乙基纤维素D6.00丙烷/丁烷AI5%%成分(INCI)A2.00西曲氯铵q.s.芳香油B63.85软化水7.00聚季铵盐-465.00含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14_264的水性溶液0.20鲸蜡硬脂醇聚醚-250.50泛醇0.05二苯酮-40.20氨基封端的聚二甲基硅氧烷,西曲氯铵,十三烷醇聚醚-1215.00醇C0.20羟乙基纤维素D6.00丙烷/丁烷制备混合A相组分。依次添加B相的组分并溶解。使C相在A和B的混合物中溶胀,然后将pH调节至6-7。与D相一起装瓶。实施例51:染发定型泡沫AI1%%成分(匿I)Aq.s.PEG-40氢化蓖麻油q.s.芳香油85.5软化水B7.0聚苯乙烯磺酸钠1.0含有约5。/。角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液0.5西曲溴按(cetrimoniumbromide)q.s.防腐剂%成分(INCI)Aq.s.PEG-40氢化蓖麻油q.s.芳香油81.5软化水B7.0聚苯乙烯磺酸钠5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液0.5西曲溴铵q.s.防腐剂206C6.0丙烷/丁烷制备增溶A相。将B相称入A相并溶解至澄清。将pH调节至6-7,与C相一起装瓶。实施例52:染发定型泡沫AI1%%成分(INCI)Aq.s.PEG-40氢化蓖麻油q.s.芳香油92.0软化水B0.5聚季铵盐-101.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14一264的水性溶液0.5西曲溴铵q.s.防腐剂C6.0丙烷/丁烷AI5%%成分(INCI)Aq.s.PEG-40氢化蓖麻油q.s.芳香油88.0软化水B0.5聚季铵盐-105.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液0.5西曲溴铵q.s.防腐剂C6.0丙烷/丁烷制备增溶A相。将B相称入A相并溶解至澄清。将pH调节至6-7,与C相一起装瓶。实施例53:染发定型泡沫AI1%%成分(INCI)Aq.s.PEG-40氢化蓖麻油q.s.芳香油82.5软化水B10.0聚季铵盐-161.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液0.5羟基乙基十六烷基二曱基磷酸铵q.s.防腐剂C6.0丙烷/丁烷AI5%%成分(INCI)Aq.s.PEG-40氢化蓖麻油q.s.芳香油78.5软化水B10.0聚季铵盐-165.0含有约5%角蛋白结合结构域活性染料14—26的水溶液40.5羟基乙基十六烷基二曱基磷酸铵q.s.防腐剂C6.0丙烷/丁烷制备增溶A相。将B相称入A相并溶解至澄清。将pH调节至6-7,与C相一起装瓶。实施例54:染发定型泡沫AI1%%成分(INCI)A2.0椰油基三曱基曱基硫酸铵q.s.芳香油B84.0软化水2.0壳聚糖1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液0.5聚二曱基硅氧烷共聚醇0.2鲸蜡硬脂醇聚醚-250.2泛醇0.1PEG-25PABAC10.0HFC152AAI5%%成分(INCI)A2.0椰油基三曱基甲基硫酸铵q.s.芳香油B80.0软化水2.0壳聚糖5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14_264的水性溶液0.5聚二甲基硅氧烷共聚醇0.2鲸蜡硬脂醇聚醚-250.2泛醇0.1PEG-25PABAC10.0HFC152A制备增溶A相。依次添加B相的组分并溶解。与C相一起装瓶。实施例55:护理香波AI1%%成分(INCI)A30.0十二烷基桥u酸钠6.0椰5由两'l"生乙酸4内(SodiumCocoamphoacetate)6.0椰油酰胺丙基甜菜碱3.0十二烷基硫酸钠,二硬脂酸乙二醇酯,椰油酰胺MEA,聚乙二醇月桂基醚-101.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液7.7聚季铵盐-442.0氨基封端的聚二甲基硅氧烷q.s.芳香油q.s.防腐剂1.0氯化钠43.3软化水Bq.s.柠檬酸AI5%%成分(INCI)A30.0十二烷基硫酸钠6.0椰油两性乙酸钠6.0椰油酰胺丙基甜菜碱3.0十二烷基石克酸钠,二》更脂酸乙二醇酯,椰油酰胺MEA,聚乙二醇月桂基醚-105.0含有约5%角蛋白结合结构域活性染料14—264的水性溶液7.7聚季铵盐-442.0氨基封端的聚二甲基硅氧烷q.s.芳香油q.s.防腐剂1.0氯化钠39.3软化水Bq.s.柠檬酸制备混合A相组分并溶解。用柠檬酸将pH调节至6-7。实施例56:淋浴凝胶AI1%%成分(INCI)A40.0十二烷基石克酸钠5.0癸基糖苷5.0椰油酰胺丙基甜菜碱1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液1.0泛醇q.s.芳香油q.s.防腐剂2.0氯化钠46.0软化水Bq.s.柠檬酸AI5%%成分(INCI)A40.0十二烷基石克酸钠5.0癸基糖苷5.0椰油酰胺丙基甜菜碱5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14_264的水性溶液1.0泛醇q.s.芳香油q.s.防腐剂2.0氯化钠42.0软化水Bq.s.柠檬酸制备混合A相组分并溶解。用柠檬酸将pH调节至6-7。实施例57:香波AI1%%成分(INCI)A40.0十二烷基石克酸钠5.0C12-15链烷醇聚醚(Pareth)-15磺酸钠5.0癸基糖苷q.s.芳香油0.1植烷三醇(Phytantriol)44.6软化水1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液0.3聚季铵盐-101.0泛醇q.s.防腐剂1.0聚乙二醇月桂基醚-32.0氯化钠AI5%%成分(INCI)A40.0十二烷基硫酸钠5.0C12-15链烷醇聚醚-15磺酸钠5.0癸基糖苷q.s.芳香油0.1植烷三醇40.6软化水5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14一264的水性溶液0.3聚季铵盐-101.0泛醇q.s.防腐剂1.0聚乙二醇月桂基醚-32.0氯化钠制备混合A相组分并溶解。用柠檬酸将pH调节至6-7。实施例58:染发香波AI1%%成分(INCI)A15.00椰油酰胺丙基甜菜碱10.00椰油两性二乙酸二钠5.00聚山梨醇酯205.00癸基糖苷q.s.芳香油q.s.防腐剂1.00含有约5%角蛋白结合结构域_活性染料14—264的水性溶液0.15瓜尔胶羟丙基三甲基氯化铵2.00聚乙二醇月桂基醚-358.00软化水q.s.柠檬酸B3.00PEG-150二石更脂酸酯AI5%%成分(INCI)A15.00椰油酰胺丙基甜菜碱10.00椰油两性二乙酸二钠5.00聚山梨醇酯205.00癸基糖苷q.s.芳香油q.s.防腐剂5.00含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14_264的水性溶液0.15瓜尔胶羟丙基三甲基氯化铵2.00聚乙二醇月桂基醚-354.00软化水q.s.柠檬酸B3.00PEG-150二硬脂酸酯制备称重A相组分并溶解。将pH调节至6-7。添加B相并加热至约40'C。搅拌冷却至室温。实施例59:润肤护体膏霜AI1%%成分(INCI)A2.0鲸蜡硬脂醇聚醚-252.0鲸蜡硬脂醇聚醚-6,十八烷醇3.0鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯1.0聚二甲基硅氧烷4.0鲸蜡硬脂醇3.0硬脂酸甘油酯SE5.0》广物油4.0西蒙得木(霍霍巴)(SimmondsiaChinensis(Jojoba))种子油3.0矿物油,羊毛脂醇B5.0丙二醇1.0泛醇0.5硅酸镁铝q.s防腐剂65.5软化水Cq.s.芳香油1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14264的水性溶液Dq.s.柠檬酸AI5%%成分(INCI)A2.0鲸蜡硬脂醇聚醚-252.0鯨蜡^J旨醇聚醚-6,十八烷醇3.0鯨蜡硬脂醇乙基己酸酯1.0聚二曱基硅氧烷4.0鲸蜡硬脂醇3.0硬脂酸甘油酯SE5.0》广物油4.0西蒙得木(霍霍巴)种子油3.0矿物油,羊毛脂醇B5.01.00.5q.s61.5丙二醇泛醇硅酸镁铝防腐剂软化水Cq.s.芳香油5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液Dq.s.柠檬酸制备分别加热A和B相至约80。C。短暂预匀化B相,然后将B相搅拌入A相并再次匀化。冷却至约40'C,添加C相并再次充分匀化。用拧檬酸将pH调节至6-7。实施例60:润肤护体膏霜AI1%%成分(INCI)A6.0PEG-7氬化荒麻油10.0鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯5.0肉豆蔻酸异丙酯7.0,广物油0.5乳木果油(SheaButter)(牛油树(ButyrospermumParkii))0.5硬脂酸铝0.5硬脂酸镁0.2没药醇0.7季铵盐-18水辉石(Quaternium-18-Hectorite)B5.0二丙二醇0.7硫酸镁q.s.防腐剂62.9软化水Cq.s.芳香油1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14_264的水性溶液AI5%%成分(INCI)A6.0PEG-7氢化蓖麻油10.0鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯5.0肉豆蔻酸异丙酯7.0^户物油0.5乳木果油(牛油树)0.5硬脂酸铝0.5硬脂酸镁0.2没药醇0.7季铵盐-18水辉石B5.0二丙二醇0.7硫酸镁q.s.防腐剂58.9软化水Cq.s.芳香油5.0含有约的水溶液5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264制备分别加热A和B相至约80'C。将B相搅拌入A相并匀化。搅拌冷却至约40。C,添加C相并再次匀化。搅拌冷却至室温。实施例61:液体化妆品——OAV型AI1%%成分(INCI)A2.0鲸蜡硬脂醇聚醚-6,十八烷醇2.0鲸蜡硬脂醇聚醚-256.0硬脂酸甘油酯1.0鲸蜡醇8.0矿物油7.0鯨蜡硬脂醇乙基己酸酯0.2聚二曱基硅氧烷B3.0丙二醇1.0泛醇q.s.防腐剂61.9软化水C0.1没药醇1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液q.s.芳香油D5.7C.1.77891,二氧化钛1.1氧化铁AI5%%成分(INCI)A2.0鯨蜡硬脂醇聚醚-6,十八烷醇2.0鯨蜡硬脂醇聚醚-256.0硬脂酸甘油酯1.0鲸蜡醇8.0》广物油7.0鯨蜡硬脂醇乙基己酸酯0.2聚二甲基硅氧烷B3.0丙二醇1.0泛醇q.s.防腐剂57.9软化水C0.1没药醇5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液q.s.芳香油D5.7C.I.77891,二氧化钛1.1氧化铁制备分别加热A和B相至约80°C。将B相搅拌入A相并匀化。搅拌冷却至约40'C,添加C和D相并再次充分匀化。搅拌冷却至室温。实施例62:将所示的角蛋白结合结构域一活性染料14_264作为约5%重量浓度的水性溶液使用。下列数据为重量份。透明染发香波<table>tableseeoriginaldocumentpage220</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage221</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage222</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage223</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage224</column></row><table>调节pH至6.0具有染发膨胀作用的透明调理香波<table>tableseeoriginaldocumentpage224</column></row><table>调节pH至6.0熏发胶霜<table>tableseeoriginaldocumentpage225</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage226</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage227</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage228</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage229</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage230</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage231</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage232</column></row><table>棒状物<table>tableseeoriginaldocumentpage232</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage233</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage234</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage235</column></row><table><table>complextableseeoriginaldocumentpage236</column></row><table>皮肤或毛发熏色胶霜<table>complextableseeoriginaldocumentpage236</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage237</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage238</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage239</column></row><table>具有熏黑效果的自助美黑水分散体<table>tableseeoriginaldocumentpage240</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage241</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage242</column></row><table>wo乳剂<table>tableseeoriginaldocumentpage242</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage243</column></row><table>固体稳定的乳剂(Pickeriiig乳液)<table>tableseeoriginaldocumentpage243</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage244</column></row><table>棒状物<table>tableseeoriginaldocumentpage245</column></row><table>自助美黑PIT乳剂<table>tableseeoriginaldocumentpage246</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage247</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage248</column></row><table>实施例63:在下列制品中,描述了包含至少一种无机色素,优选氧化锌和/或氧化钛,UvinulAPlus和其他UV-A和UV-B有才几过滤剂的组合的美容防晒霜制品。本文的无机色素可以以包衣形式存在,即对它们进行表面处理。例如,这种表面处理可以通过本身公知的方法,如DE-A-3314742中所述的方法为色素提供疏水薄层。按照本领域技术人员公知的常规方式制备下述制品。下文描述了本发明的皮肤美容制品,它包含按照实施例19制备的角蛋白结合效应分子(与染料14—264偶联的SEQIDNo.:ID166的角蛋白结合结构域)。所述角蛋白结合效应分子在下文的实施例中称作角蛋白结合结构域一活性染料14—264。对本领域技术人员而言,理所当然地,可以使表6和7中所述的所有其它染料与KBD按照实施例19、19a或19b偶联并用于下述制品。角蛋白结合结构域一活性染料14—264的含量是指100%的活性成分。本发明的活性成分可以以纯的形式或作为水性溶液〗吏用。就水性溶液而言,在特定制品中的软化水含量必须予以调适。<table>tableseeoriginaldocumentpage248</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage249</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage250</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage251</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage251</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage252</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage253</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage254</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage255</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage256</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage257</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage258</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage259</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage260</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage261</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage262</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage263</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage264</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage265</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage265</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage266</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage267</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage268</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage269</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage270</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage271</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage272</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage273</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage274</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage275</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage276</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage277</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage278</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage279</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage280</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage281</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage282</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage283</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage284</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage285</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage286</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage287</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage288</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage289</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage290</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage291</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage292</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage293</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage294</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage295</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage296</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage297</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage298</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage299</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage300</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage301</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage302</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage303</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage304</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage305</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage306</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage307</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage308</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage309</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage310</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage311</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage312</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage313</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage314</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage315</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage316</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage317</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage318</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage319</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage320</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage321</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage322</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage323</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage324</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage325</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage326</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage327</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage328</column></row><table>首先使红色活性染料14—264与KBD-D(SEQIDNo.:168)按照上述方法偶联(实施例19)。为了证实KBD-D-染料偶联fenzi与毛发的结合由蛋白质介导,而非游离染料自身,相同的染料在每种情况下仅用半胱氨酸而非KBD-D处理。然后将KBD-D-14_264和14—264分别置于5mg毛发上,短暂孵育并使用15%浓度的Tween20溶液洗掉未结合的KBD-B-染料或纯染料。结果清楚地表明与毛发结合由KBD-D介导并发生对毛发的染色。另一方面,如果需要使毛发再次脱色,那么使用15%的SDS级分洗涤或使用含角蛋白的溶液处理是合适的。下文描述了本发明的皮肤化妆品,它包含按照实施例20制备的的角蛋白结合效应分子(与染料14—264偶联的SEQIDNo.:ID168的角蛋白结合结构域)。所述的角蛋白结合效应分子在下文的实施例中称作角蛋白结合结构域一活性染料14_264。对本领域技术人员而言,理所当然地,可以使表6和7中所述的所有其它染料与KBD按照实施例21偶联并用于下述制品。实施例66:香波(不含角蛋白结合结构域-活性染料的基础配方)%成分(INCI)A15.00椰油酰胺丙基甜菜碱10.00椰油两性二乙酸二钠5.00聚山梨醇酯205.00癸基糖苷q.s.芳香油q.s.防腐剂1.25聚季铵盐-162.00聚乙二醇月桂基醚-3q.s.柠檬酸57.75软化水B3.00PEG-150二硬脂酸酯制备称重A相组分并溶解。调节pH至6-7。添加B相并加热至约50°C。搅拌冷却至室温。下文实施例中角蛋白结合结构域一活性染料14_264KBD-D(SEQIDNo.:168)的含量是指100%角蛋白结合结构域一活性染料14—264。本发明的活性成分可以以纯的形式或作为水性溶液^f吏用。就水性溶液而言,在相应制品中的软化水含量必须予以调适。实施例67:染发香波变化形式1%成分(INCI)A15.00椰油酰胺丙基甜菜碱10.00椰油两性二乙酸二钠5.00聚山梨醇酯205.00癸基糖苷q.s.芳香油q.s.防腐剂1.25聚季铵盐-162.00聚乙二醇月桂基醚-3q.s.柠檬酸1.00角蛋白结合结构域一活性染料14_26457.75软化水B3.00PEG-150二硬脂酸酯变化形式2%成分(INCI)A15.00椰油酰胺丙基甜菜碱<formula>formulaseeoriginaldocumentpage331</formula>69.97软化水1.0角蛋白结合结构域一活性染料14_264C10.00丙烷/丁烷变化形式2%成分(INCI)A2.00椰油基三曱基甲基硫酸铵q.s.芳香油B6.70丙烯酸酯共聚物0.60氨甲基丙醇0.20鲸蜡硬脂醇聚醚-250.20泛醇0.20羟乙基纤维素10.00醇69.97软化水0.5角蛋白结合结构域一活性染料14—264C10.00丙烷/丁烷制备混合A相组分。称重B相并溶解至得到澄清溶液,然后搅拌入A相。与C相一起装瓶。实施例69:染发定型摩丝变化形式1%成分(INCI)A2.00椰油基三曱基甲基硫酸铵q.s.芳香油B7.00聚季铵盐-462.00聚季铵盐-1178.87IU匕水2.0角蛋白结合结构域一活性染料14—264C10.00丙烷/丁烷变化形式2%成分(INCI)A2.00椰油基三曱基曱基硫酸铵q.s.芳香油B7.00聚季铵盐-462.00聚季铵盐-1178.87软化水1.0角蛋白结合结构域一活性染料14—264C10.00丙烷/丁烷制备混合A相组分。称重B相并溶解至得到澄清溶液,然后搅拌入A相。与C相一起装瓶。实施例70:两束未漂白的金发用实施例67/变化形式1的0.5g染发香波处理欧洲人天然的颜色9/0的金发(2g),并使染发香波在毛发上留置15min。然后用水洗涤发束,使用实施例66的香波清洁,并干燥。毛发完全呈红色。不能再察觉到金发。一束留作对比。然后用实施例66的香波将第二束发洗涤5次并干燥。在第5次洗涤后,将发束与留存的样品进行比较。洗涤5次的发束仍然完全呈红色。两发束具有相同的红色色度。从视觉上来看,未能观察到颜色深度上存在差异。实施例71:两束白发用实施例67/变化形式1的0.5g染发香波处理选择的欧洲人天然的白发(2g),并使染发香波在毛发上留置15min。然后用水洗涤发束,使用实施例66的香波清洁,并干燥。毛发完全呈红色。不能再察觉到白发。一束留作对比。然后用实施例66的香波将第二束发洗涤5次并干燥。在第5次洗涤后,将发束与留存的样品进行比较。洗涤5次的发束仍然完全呈红色。两发束具有相同的红色色度。从视觉上来看,未能观察到颜色深度上存在差异。实施例72两束未漂白的金发用实施例68/变化形式2的0.5g染发定型摩丝处理欧洲人天然的颜色9/0的金发(2g),并使染发定型摩丝在毛发上留置15min。然后用水洗涤发束,使用实施例66的香波清洁,并干燥。毛发完全呈红色。不能再察觉到金发。一束留作对比。然后用实施例66的香波将第二束发洗涤5次并干燥。在第5次洗涤后,将发束与留存的样品进行比较。洗涤5次的发束仍然完全呈红色。两发束具有相同的红色色度。从视觉上来看,未能观察到颜色深度上存在差异。实施例73:两束白发用实施例68/变化形式2的0.5g染发定型摩丝处理选择的欧洲人天然的白发(2g),并使染发定型摩丝在毛发上留置15min。然后用水洗涤发束,使用实施例66的香波清洁,并干燥。毛发完全呈红色。不能再察觉到白发。一束留作对比。然后用实施例66的香波将第二束发洗涤5次并千燥。在第5次洗涤后,将发束与留存的样品进行比较。洗涤5次的发束仍然完全呈红色。两发束具有相同的红色色度。从视觉上来看,未能观察到颜色深度上存在差异。实施例74:两束未漂白的金发用实施例69/变化形式l的0.5g染发定型摩丝处理欧洲人天然的颜色9/0的金发(2g),并使染发定型摩丝在毛发上留置15min。然后用水洗涤发束,使用实施例66的香波清洁,并干燥。毛发完全呈红色。不能再察觉到金发。一束留作对比。然后用实施例66的香波将第二束发洗涤5次并干燥。在第5次洗涤后,将发束与留存的样品进行比较。洗涤5次的发束仍然完全呈红色。两发束具有相同的红色色度。从视觉上来看,未能观察到颜色深度上存在差异。实施例75:两束白发用实施例69/变化形式1的0.5g染发定型摩丝处理选择的欧洲人天然的白发(2g),并使染发定型摩丝在毛发上留置15min。然后用水洗涤发束,使用实施例66的香波清洁,并千燥。毛发完全呈红色。不能再察觉到白发。一束留作对比。然后用实施例66的香波将第二束发洗涤5次并干燥。在第5次洗涤后,将发束与留存的样品进行比较。洗涤5次的发束仍然完全呈红色。两发束具有相同的红色色度。从视觉上来看,未能观察到颜色深度上存在差异。实施例76:KBD在日用护理用乳剂中的应用——OAV型AI1%:%成分(INCI)A1.7鲸蜡硬脂醇聚醚-6,十八烷醇0.7鲸蜡硬脂醇聚醚-252.0PEG-14聚二甲基硅氧烷3.6鲸蜡硬脂醇6.0曱氧基肉桂酸乙基己酯2.0己二酸二丁酯B5.0甘油0.2EDTA二钠1.0泛醇q.s.防腐剂69.8软化水C4.0辛酸/癸酸甘油三酯,丙烯酸钠共聚物D0.2抗坏血酸磷酸钠1.0生育酚醋酸酯0.2没药醇1.0辛酸/癸酸甘油三酯,抗坏血酸钠,生育酚.视黄醇1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液Eq.s.氢氧化钠AI5%:%成分(INCI)A1.7鲸蜡硬脂醇聚醚-6,十八烷醇0.7鲸蜡硬脂醇聚醚-252.0PEG-14聚二曱基硅氧烷3.6鲸蜡硬脂醇6.0甲氧基肉桂酸乙基己酯2.0己二酸二丁酯B5.0甘油0.2EDTA二钠1.0泛醇q.s.防腐剂65.8软化水C4.0辛酸/癸酸甘油三酯,丙烯酸钠共聚物D0.2抗坏血酸磷酸钠1.0生育酚醋酸酯0.2没药醇1.0辛酸/癸酸甘油三酯,抗坏血酸钠,生育酚,视黄醇5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14_264的水性溶液Eq.s.氢氧4匕钠制备分别加热A和B相至约80'C。将B相搅拌入A相并匀化。将C相掺入入混合的A和B相并匀化。搅拌冷却至约40。C,添加D相,使用E相调节pH至约6.5,匀化并搅拌冷却至室温。注意不使用保护气体制备制品。必须在不透氧的包装,例如铝管中装瓶。实施例77:KBD在保护性日霜中的应用——O/W型AI1%:%成分(INCI)A1.7鲸蜡硬脂醇聚醚-6,十八烷醇0.7鲸蜡硬脂醇聚醚-252.0PEG-14聚二曱基硅氧烷3.6鲸蜡硬脂醇6.0甲氧基肉桂酸乙基己酯2.0己二酸二丁酯B5.0甘油0.2EDTA二钠1.0泛醇q.s.防腐剂70.6软化水C4.0辛酸/癸酸甘油三酯,丙烯酸钠共聚物D1.0抗坏血酸磷酸钠1.0生育酚醋酸酯0.2没药醇1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14_264的水性溶液Eq.s.氢氧化钠AI5%:%成分(INCI)A1.7鯨蜡硬脂醇聚醚-6,十八烷醇0.7鲸蜡硬脂醇聚醚-252.0PEG-14聚二甲基硅氧烷3.6鲸蜡硬脂醇6.0甲氧基肉桂酸乙基己酯2.0己二酸二丁酯B5.0甘油0.2EDTA二钠1.0泛醇q.s.防腐剂66.6软化水C4.0辛酸/癸酸甘油三酯,丙烯酸钠共聚物D1.0抗坏血酸磷酸钠1.0生育酚醋酸酯0.2没药醇5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液Eq.s.氢氧化钠制备分别将A和B相加热至约80°C。将B相搅拌入A相并匀化。将C相掺入入混合的A和B相并匀化。搅拌冷却至约40'C,添加D相,使用E相调节pH至约6.5并匀化。搅拌冷却至室温。实施例78:KBD在清面乳液中的应用——OAV型AI1%:%成分(INCI)A10.0鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯10.0辛酸/癸酸甘油三酯1.5环戊硅氧烷,环己硅氧烷2.0PEG-40氩化茺麻油B3.5辛酸/癸酸甘油三酯,丙烯酸钠共聚物C1.0生育酚醋酸酯0.2没药醇q.s.防腐剂q.s.芳香油D3.0聚季铵盐-440.5椰油基三曱基曱基硫酸铵0.5鲸蜡硬脂醇聚醚-252.0泛醇,丙二醇4.0丙二醇0.1EDTA二钠1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液60.7软4匕水AI5%:%成分(INCI)A10.0鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯10.0辛^/癸酸甘油三酯1.5环戊硅氧烷,环己硅氧烷2.0PEG-40氢化茺麻油B3.5辛酸/癸酸甘油三酯.丙烯酸钠共聚物C1.0生育酚醋酸酯0,2没药醇q.s.防腐剂q.s.芳香油D3.0聚季铵盐-440.5椰油基三甲基甲基硫酸铵0.5鲸蜡硬脂醇聚醚-252.0泛醇,丙二醇4.0丙二醇0.1EDTA二钠5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液56.7软化水制备溶解A相。将B相搅拌入A相。将C相掺入混合的A和B相。溶解D相,搅拌入混合的A、B和C相并匀化。此后搅拌15min。实施例79:KBD在日用护体喷雾剂中的应用AI1%:%成分(INCI)A3.0甲氧基肉桂酸乙基己酯2.0二乙氨基羟基苯甲酰基己基苯甲酸酯1.0聚季铵盐-443.0丙二醇2.0泛醇,丙二醇1.0环戊硅氧烷,环己硅氧烷10.0辛基十二烷醇0.5PVP10.0辛酸/癸酸甘油三酯3.0C12-15烷基苯曱酸酯3.0甘油1.0生育酚醋酸酯0.3没药醇1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液59.2醇AI5%:%成分(INCI)A3.0曱氧基肉桂酸乙基己酯2.0二乙氨基羟基苯甲酰基己基苯甲酸酯1.0聚季铵盐-443.0丙二醇2.0泛醇,丙二醇1.0环戊石圭氧烷,环己硅氧烷10.0辛基十二烷醇0.5PVP10.0辛酸/癸酸甘油三酯3.0C12-15烷基苯甲酸酯3.0甘油1.0生育酚醋酸酯0.3没药醇5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液55.2醇制备称重A相组分并溶解至澄清。实施例80:KBD在护肤凝胶中的应用AI1%:%成分(INCI)A3.6PEG-40氢化蓖麻油15.0醇0.1没药醇0.5生育酚醋酸酯q.s.芳香油B3.0泛醇0.6卡波姆1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液75.4软化水C0.8三乙醇胺AI5%:%成分(INCI)A3.6PEG-40氬化荛麻油15.0醇0.1没药醇0.5生育酚醋酸酯q.s.芳香油B3.0泛醇0.6卡波姆5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液71.4软化水C0.8三乙醇胺制备溶解A相至澄清。使B相溶胀并使用C相中和。将A相搅拌入匀化的B相并匀化。实施例81:KBD剃须后洗液中的应用AI1%:%成分(INCI)A10.0鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯5.0生育酚醋酸酯1.0没药醇0.1芳香油0.3丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交联聚合物B15.0醇1.0泛醇3.0甘油1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14_264的水性溶液0.1三乙醇胺63.5软化水AI5%:%成分(匿I)A10.0鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯5.0生育酚醋酸酯1.0没药醇0.1芳香油0.3丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交联聚合物1.0泛醇3.0甘油5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14_264的水性溶液0.1三乙醇胺59.5软化水制备混合A相组分。溶解B相,掺入A相并匀化。实施例82:KBD在日晒后用洗液中的应用AI1%:%成分(INCI)A0.4丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交联聚合物15.0鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯0.2没药醇1.0生育酚醋酸酯q.s.芳香油B1.0泛醇15.0醇3.0甘油1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液63.2软化水C0.2三乙醇胺AI5%:%成分(INCI)A0.4丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交联聚合物15.0鯨蜡硬脂醇乙基己酸酯0.2没药醇1.0生育酚醋酸酯q.s.芳香油B1.0泛醇15.0醇3.0甘油5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14_264的水性溶液59.2軟化水C0.2三乙醇胺制备混合A相组分。将B相搅拌入A相,同时匀化。使用C相中和并再次匀化。实施例83:KBD在防晒露中的应用AI1%:%成分(INCI)A4.5甲氧基肉桂酸乙基己酯3.0氰双苯丙烯酸辛酯2.5二-C12-13烷基苹果酸酯0.5生育酚醋酸酯4.0聚甘油基-3甲基葡萄糖二硬脂酸酯B3.5鲸蜡硬脂醇异壬酸酯1.0VP/二十碳烯共聚物5.0异十六烷2.5二-C12-13烷基苹果酸酯3.0二氧化钛,三甲氧基辛酰基硅烷C5.0甘油1.0鲸蜡硬脂醇硫酸酯钠0.5黄原胶61.7软化水D1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液1.0苯氧基乙醇,对羟基苯甲酸甲酯,对羟基苯甲酸乙酯,对羟基苯甲酸丁酯,对羟基苯曱酸丙酯,对羟基苯甲酸异丁酯0.3没药醇AI5%:%成分(INCI)A4.5甲氧基肉桂酸乙基己酯3.0氰双苯丙烯酸辛酯2.5二-C12-13烷基苹果酸酯0.5生育盼醋酸酯4.0聚甘油基-3甲基葡萄糖二硬脂酸酯B3.5鲸蜡硬脂醇异壬酸酯1.0VP/二十碳烯共聚物5.0异十六烷2.5二-C12-13烷基苹果酸酯3.0二氧化钛,三曱氧基辛酰基硅烷C5,0甘油1.0鲸蜡硬脂醇硫酸酯钠0.5黄原胶57.7软化水D5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液1.0苯氧基乙醇,对羟基苯甲酸曱酯,对羟基苯甲酸乙酯,对羟基苯曱酸丁酯,对羟基苯甲酸丙酯,对羟基苯曱酸异丁酯0.3没药醇制备分别将A和B相的组分加热至约80X:。将B相搅拌入A相并匀化。加热C相至约80。C并搅拌入混合的A和B相,同时匀化。搅拌冷却至约40。C,加入D相并再次匀化。实施例84:KBD在防晒露中的应用——O/W型AI1%:%成分(INCI)A2.0鲸蜡硬脂醇聚醚-6,十八烷醇2.0鯨蜡硬脂醇聚醚-253.0三山脊精2.0鲸蜡硬脂醇2.0鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯5.0甲氧基肉桂酸乙基己酯1.0乙基己基三溱酮1.0VP/二十碳烯共聚物7.0肉豆蔻酸异丙酯B5.0氧化锌,三乙氧基辛酰基硅烷C0.2黄原胶0.5丙烯酸羟乙酯/丙烯酰基二甲基牛磺酸钠共聚物,角鲨烷,聚山梨醇酯600.2EDTA二钠5.0丙二醇0.5泛醇60.9软化水D1.0含有约5%角蛋白结合结构域_活性染料14一264的水性溶液0.5苯氧基乙醇,对羟基苯甲酸甲酯,对羟基苯曱酸丁酯,对羟基苯曱酸乙酯,对羟基苯曱酸丙酯,对羟基苯甲酸异丙酯1.0生育酚醋酸酯0.2没药醇AI5%:%成分(INCI)A2.0鲸蜡硬脂醇聚醚-6,十八烷醇2.0鲸蜡硬脂醇聚醚-253.0三山脊精2.0鲸蜡硬脂醇2.0鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯5.0曱氧基肉桂酸乙基己酯1.0乙基己基三溱酮1.0VP/二十碳烯共聚物7.0肉豆蔻酸异丙酯B5.0氧化锌,三乙氧基辛酰基硅烷C0.2黄原胶0.5丙烯酸羟乙酯/丙烯酰基二曱基牛磺酸钠共聚物,角鲨烷,聚山梨醇酯600.2EDTA二钠5.0丙二醇0.5泛醇56.9软化水D5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液0.5苯氧基乙醇,对羟基苯甲酸曱酯,对羟基苯甲酸丁酯,对羟基苯甲酸乙酯,对羟基苯甲酸丙酯,对羟基苯甲酸异丙酯1.0生育酚醋酸酯0.2没药醇制备加热A相至约80。C,搅拌B相并匀化3min。同样加热C相至80。C并搅拌入混合的A和B相,同时勻化。冷却至约40C搅拌加入D相并再次匀化。实施例85:KBD在防晒露中的应用——OAV型\AI1%:%A3.51.57.52.00.53.010.0B5.0C3.00.20.31.02.056.3D1.01.00.2q.s.q.s.AI5%:%A3.51.57.52.0成分(INCI)鯨蜡硬脂醇聚醚-6,十八烷醇鲸蜡硬脂醇聚醚-25曱氧基肉桂酸乙基己酯环戊硅氧烷,环己硅氧烷蜂蜡鲸蜡硬脂醇辛酸/癸酸甘油三酯二氧化钛,二氧化硅,聚甲基硅氧烷,氧化铝甘油EDTA二钠黄原胶癸基糖苷泛醇,丙二醇软化氷含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液生育酚醋酸酯没药醇芳香油防腐剂成分(INCI)鲸蜡硬脂醇聚醚-6,十八烷醇鲸蜡硬脂醇聚醚-25曱氧基肉桂酸乙基己酯环戊硅氧烷,环己硅氧烷0.5蜂蜡3.0鲸蜡硬脂醇10.0辛酸/癸酸甘油三酯B5.0二氧化钛,二氧化硅,聚甲基硅氧烷,氧化铝C3.0甘油0.2EDTA二钠0.3黄原胶1.0癸基糖苷2.0泛醇,丙二醇52.3软化水D5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液1.0生育酚醋酸酯0.2没药醇q.s.芳香油q.s.防腐剂制备加热A相至约80'C,搅拌B相并匀化3min。同样加热C相至80。C并搅拌入混合的A和B相,同时匀化。冷却至约40。C,搅拌加入D相并再次匀化。实施例86:KBD在足用香脂中的应用AI1%:%成分(INCI)A2.0鲸蜡硬脂醇聚醚-6,十八烷醇2.0鲸蜡硬脂醇聚醚-255.0鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯4.0鲸蜡硬脂醇4.0硬脂酸甘油酯5.0》广物油0.2薄荷醇0.5樟脑B69.3软化水q.s.防腐剂C1.0没药醇1.0生育酚醋酸酯D1.0含有约5%角蛋白结合结构域_活性染料14—264的水性溶液5.0金缕梅提取物AI5%:%成分(INCI)A2.0鯨蜡硬脂醇聚醚-6,十八烷醇2.0鲸蜡硬脂醇聚醚-255.0鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯4.0鲸蜡硬脂醇4.0硬脂酸甘油酯5.0》广物油0.2薄荷醇0.5樟脑B65.3软化水q.s.防腐剂C1.0没药醇1.0生育酚醋酸酯D5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液5.0金缕梅提取物制备分别加热A和B相的组分至约80'C。将B相搅拌入A相,同时匀化。搅拌冷却至约40'C,加入C和D相之后短暂匀化。搅拌冷却至室温。实施例87:KBD在含有没药醇的W/O乳剂中的应用AI1%:%成分(INCI)A6.0PEG-7氬化蓖麻油8.0鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯5.0肉豆蔻酸异丙酯15.0矿物油0.3硬脂酸镁0.3硬脂酸铝2.0PEG-45/十二烷基乙二醇共聚物B5.0甘油0.7硫酸镁55.6软化水C1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14_264的水性溶液0.5生育酚醋酸酯0.6没药醇AI5%:%成分(INCI)A6.0PEG-7氢化蓖麻油8.0鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯5.0肉豆蔻酸异丙酯15.0》广物油0.3硬脂酸镁0.3硬脂酸铝2.0PEG-45/十二烷基乙二醇共聚物B5.0甘油0.7硫酸镁51.6软化水C5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14一264的水性溶液0.5生育酚醋酸酯0.6没药醇制备分别加热A和B相至约80。C。将B相搅拌入A相并匀化。搅拌冷却至约40'C,加入C和D相并再次短暂匀化。搅拌冷却至室温。本专利角蛋白结合结构域制品的目录一一护发实施例88:具有定型剂的泡沫调理剂AI1%%成分(INCI)A10.0PVP/VA共聚物0.2羟基乙基十六烷基二甲基磷酸铵0.2鲸蜡硬脂醇聚醚-250.5聚二甲基硅氧烷共聚醇q.s.芳香油10.0醇1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液68.1软化水10.0丙烷/丁烷AI5%%成分(INCI)A10.0PVP/VA共聚物0.2羟基乙基十六烷基二甲基磷酸铵0.2鲸蜡硬脂醇聚醚-250.5聚二曱基硅氧烷共聚醇q,s.芳香油10.0醇5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液64.1软化水B10.0丙烷/丁烷制备共同称重A相组分,搅拌至所有物质溶解并与B相一起装瓶。实施例89:染发泡沫调理剂AI1%%成分(INCI)A1.0聚季铵盐-40.5羟基乙基十六烷基二曱基磷酸铵1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液q.s.芳香油q.s,防腐剂91.5软化水B6.0丙烷/丁烷AI5%%成分(INCI)A1.0聚季铵盐-40.5羟基乙基十六烷基二甲基磷酸铵5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液q.s.芳香油q.s.防腐剂87.5软化水B6.0丙烷/丁烷制备共同称重A相组分,搅拌至每种物质溶解而得到澄清溶液并与B相一起装瓶。实施例卯染发泡沫调理剂AI1%%成分(INCI)A1.0聚季铵盐-110.5羟基乙基十六烷基二甲基磷酸铵1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液q.s.芳香油q.s.防腐剂91.5软化水B6.0丙烷/丁烷AI5%%成分(INCI)A1.0聚季铵盐-110.5羟基乙基十六烷基二甲基磷酸铵5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液q.s.芳香油q,s.防腐剂87.5软化水B6.0丙烷/丁烷制备共同称重A相组分,搅拌至每种物质溶解而得到澄清溶液并与B相一起装瓶。实施例91:染发定型泡沫AI1%%成分(INCI)A0.5聚乙二醇月桂基醚-4q.s.芳香油B77.3软化水10.0聚季铵盐-281.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14一264的水性溶液0.5聚二曱基硅氧烷共聚醇0.2鲸蜡硬脂醇聚醚-250.2泛醇0.1PEG-25PABA0.2羟乙基纤维素C10.0HFC152AAI5%%成分(INCI)A0.5聚乙二醇月桂基醚-4q.s.芳香油B73.3软化水10.0聚季铵盐-285.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液0.5聚二甲基硅氧烷共聚醇0.2鲸蜡硬脂醇聚醚-250.2泛醇0.1PEG-25PABA0.2羟乙基纤维素C10.0HFC152A制备混合A相组分。依次添加B相的组分并溶解。与C相一起装瓶。实施例92:染发定型泡沫AI1%%成分(匿I)A2.0椰油基三甲基曱基硫酸铵q.s.芳香油B78.5软化水6.7丙烯酸酯共聚物0.6AMP1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液0.5聚二甲基硅氧烷共聚醇0.2鲸蜡硬脂醇聚醚-250.2泛醇0.1PEG-25PABA0.2羟乙基纤维素C10.0HFC152AAI5%%成分(匿I)A2.0椰油基三甲基甲基硫酸铵q.s.芳香油B74.5软化水6.7丙烯酸酯共聚物0.6AMP5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液0.5聚二甲基硅氧烷共聚醇0.2鲸蜡硬脂醇聚醚-250.2泛醇0.1PEG-25PABA0.2羟乙基纤维素C10.0HFC152A制备混合A相组分。依次添加B相的组分并溶解。与C相一起装瓶。实施例93:染发定型泡沫AI1%%成分(INCI)A2.0椰油基三甲基甲基硫酸铵q.s.芳香油B7.70聚季铵盐-441.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14_264的水性溶液q.s.防腐剂79.3软化水C10.0丙烷/丁烷AI5%%成分(INCI)A2.0椰油基三甲基甲基硫酸铵q.s.芳香油B7.70聚季铵盐-445.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液q.s.防腐剂75,3软化水C10.0丙烷/丁烷制备混合A相组分。溶解B相的组分至澄清,然后将B相搅拌入A相。调节pH至6-7,与C相一起装瓶。实施例94:染发定型泡沫AI1%%成分(INCI)A2.00椰油基三甲基曱基硫酸铵q.s.芳香油B7232软化水2.00VP/丙烯酸酯/甲基丙烯酸月桂醇酯共聚物0.53AMP1.00含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14_264的水性溶液0.20鲸蜡硬脂醇聚醚-250.50泛醇0.05二苯酮画40.20氨基封端的聚二甲基硅氧烷,西曲氯铵,十三烷醇聚醚-1215.00醇C0.20鋒乙基纤维素D6.00丙烷/丁烷AI5%%成分(匿I)A2.00椰油基三曱基甲基硫酸铵q.s.芳香油B68.32软化水2.00VP/丙烯酸酯/甲基丙烯酸月桂醇酯共聚物0.53AMP5.00含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14_264的水性溶液0.20鲸蜡硬脂醇聚醚-250.50泛醇0.05二苯酮-40.20氨基封端的聚二曱基硅氧烷,西曲氯铵,十三烷醇聚醚-1215.00醇C0.20羟乙基纤维素D6.00丙烷/丁烷制备混合A相组分。依次添加B相的组分并溶解。使C相在A和B的混合物中溶胀,然后调节pH至6-7。与D相一起装瓶。实施例95:染发定型泡沫AI1%%成分(INCI)A2.00西曲氯铵q.s.芳香油B67.85软化水7.00聚季铵盐-461.00含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14_264的水性溶液0.20鲸蜡硬脂醇聚醚-250.50泛醇0.05二苯酮-40.20氨基封端的聚二曱基硅氧烷,西曲氯铵,十三烷醇聚醚-1215.00醇C0.20羟乙基纤维素I)6.00丙烷/丁烷AI5%%成分(INCI)A2.00西曲氯铵q.s.芳香油B63.85软化水7.00聚季铵盐-465.00含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液0.20鲸蜡硬脂醇聚醚-250.50泛醇0.05二苯酮-40.20氨基封端的聚二甲基硅氧烷,西曲氯铵,十三烷醇聚醚-1215.00醇C0.20羟乙基纤维素D6.00丙烷/丁烷制备混合A相组分。依次添加B相的组分并溶解。使C相在A和B的混合物中溶胀,然后调节pH至6-7。与D相一起装瓶。实施例96:染发定型泡沫AI1%%成分(INCI)Aq.s.PEG-40氩化蓖麻油q.s.芳香油85.5软化水B7.0聚苯乙烯磺酸钠1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14_264的水性溶液0.5西曲溴铵q.s.防腐剂C6.0丙烷/丁烷AI5%%成分(INCI)Aq.s.PEG-40氢化蓖麻油q.s.芳香油81.5软化水B7.0聚苯乙烯磺酸钠5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液0.5西曲溴铵q.s.防腐剂C6.0丙烷/丁烷制备增溶A相。称重B相入A相并溶解至澄清。调节pH至6-7,与C相一起装瓶。实施例97:染发定型泡沫AI1%%成分(INCI)Aq.s.PEG-40氩化蓖麻油q.s.芳香油92.0软化水B0.5聚季铵盐-101.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14_264的水性溶液0.5西曲溴铵q.s.防腐剂C6.0丙烷/丁烷AI5%%成分(INCI)Aq.s.PEG-40氩化蓖麻油q.s.芳香油88.0软化水B0.5聚季铵盐-105.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14_264的水性溶液0.5西曲溴铵q.s.防腐剂C6.0丙烷/丁烷制备增溶A相。称重B相入A相并溶解至澄清。调节pH至6-7,与C相一起装瓶。实施例98:染发定型泡沫AI1%%成分(INCI)Aq.s.PEG-40氬4匕蓖麻油q.s.芳香油82.5软化水B10.0聚季铵盐-161.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液0.5羟基乙基十六烷基二曱基磷酸铵q.s.防腐剂C6.0丙烷/丁烷AI5%%成分(INCI)Aq.s.PEG-40氩化蓖麻油q.s.芳香油78.5软化水B10.0聚季铵盐-165.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14_264的水性溶液0.5羟基乙基十六烷基二甲基磷酸铵q.s.防腐剂C6.0丙烷/丁烷制备增溶A相。称重B相入A相并溶解至澄清。调节pH至6-7,与C相一起装瓶。实施例99:染发定型泡沫AI1%%成分(INCI)A2.0椰油基三甲基甲基硫酸铵q.s.芳香油B84.0软化水2.0壳聚糖1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14一264的水性溶液0.5聚二曱基硅氧烷共聚醇0.2鲸蜡硬脂醇聚醚-250.2泛醇0.1PEG-25PABAC10.0HFC152AAI5%%成分(INCI)A2.0椰油基三甲基甲基硫酸铵q.s.芳香油B80.0软化水2.0壳聚糖5.0含有约5。/。角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液0.5聚二甲基硅氧烷共聚醇0.2鲸蜡硬脂醇聚醚-250.2泛醇0.1PEG-25PABAC訓HFC152A制备混合A相组分。依次加入B相的组分并溶解。与C相一起装瓶。实施例100:护理香波AI1%%成分(INCI)A30.0十二烷基硫酸钠6.0椰油两性乙酸钠6.0椰油酰胺丙基甜菜碱3.0十二烷基石克酸钠,二石更脂酸乙二醇酯,椰油酰胺MEA,聚乙二醇月桂基醚-101.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液7.7聚季铵盐-442.0氨基封端的聚二曱基硅氧烷q.s.芳香油q.s.防腐剂1.0氯化钠43.3软化水Bq.s.柠檬酸AI5%%成分(INCI)A30.0十二烷基石克酸钠6.0椰油两4生乙酸钠6.0椰油酰胺丙基甜菜碱3.0十二烷基硫酸钠,二硬脂酸乙二醇酯,椰油酰胺MEA,聚乙二醇月桂基醚-105.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液7.7聚季铵盐-442.0氨基封端的聚二甲基硅氧烷q.s.芳香油q.s.防腐剂1.0氯化钠39.3软化水Bq.s.柠檬酸制备混合A相组分并溶解。用柠檬酸调节pH至6-7。实施例101:淋浴凝胶AI1%%成分(INCI)A40.0十二烷基石克酸钠5.0癸基糖苷5.0椰油酰胺丙基甜菜碱1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液1.0泛醇q.s.芳香油q.s.防腐剂2.0氯化钠46.0软化水Bq.s.柠檬酸AI5%%成分(INCI)A40.0十二烷基硫酸钠5.0癸基糖苷5.0椰油酰胺丙基甜菜碱5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液1.0泛醇q.s.芳香油q.s.防腐剂2.0氯化钠42.0软化水Bq.s.柠檬酸制备混合A相组分并溶解。用柠檬酸调节pH至6-7。实施例102:香波AI1%%成分(INCI)A40.0十二烷基硫酸钠5.0C12-15链烷醇聚醚-15磺酸钠5.0癸基糖苷q.s.芳香油0.1植烷三醇44.6软化水1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14_264的水性溶液0.3聚季铵盐-101.0泛醇q.s.防腐剂1.0聚乙二醇月桂基醚-32.0氯化钠AI5%%成分(INCI)A40.0十二烷基石克酸钠5.0C12-15链烷醇聚醚-15磺酸钠5.0癸基糖苷q.s.芳香油0.1植烷三醇40.6软化水5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14一264的水性溶液0.3聚季铵盐-101.0泛醇q.s.防腐剂1.0聚乙二醇月桂基醚-32.0氯化钠制备混合A相组分并溶解。用柠檬酸调节pH至6-7。实施例103:染发香波AI1%%成分(匿I)A15.00椰油酰胺丙基甜茱碱10.00椰油两性二乙酸二钠5.00聚山梨醇酯205.00癸基糖苷q.s.芳香油q.s.防腐剂1.00含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液0.15瓜尔胶羟丙基三曱基氯化铵2.00聚乙二醇月桂基醚-358.00软化水q.s.柠檬酸B3.00PEG-150二硬脂酸酯AI5%%成分(INCI)A15.00椰油酰胺丙基甜茱碱10.00椰油两性二乙酸二钠5.00聚山梨醇酯205.00癸基糖苷q.s.芳香油q.s.防腐剂5.00含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液0.15瓜尔胶羟丙基三甲基氯化铵2.00聚乙二醇月桂基醚-354.00软化水q.s.柠檬酸B3.00PEG-150二硬脂酸酯制备称重A相中的组分并溶解。调节pH至6-7。加入B相并加热至约40。C。搅拌冷却至室温。实施例104:润肤护体膏霜AI1%%成分(INCI)A2.0鲸蜡硬脂醇聚醚-252.0鲸蜡硬脂醇聚醚-6,十八烷醇3.0鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯1.0聚二曱基硅氧烷4.0鲸蜡硬脂醇3.0硬脂酸甘油酯SE5.0;户物油4.0西蒙得木(霍霍巴)种子油3.0矿物油,羊毛脂醇B5.0丙二醇1.0泛醇0.5硅酸镁铝q.s防腐剂65.5软化水Cq.s.芳香油1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液Dq.s.柠檬酸AI5%%成分(INCI)A2.0鯨蜡硬脂醇聚醚-252.0鲸蜡硬脂醇聚醚-6,十八烷醇3.0鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯1.0聚二曱基硅氧烷4.0鲸蜡硬脂醇3.0硬脂酸甘油酯SE5.0;户物油4.0西蒙得木(霍霍巴)种子油3.0矿物油,羊毛脂醇B5.0丙二醇1.0泛醇0.5硅酸镁铝q.s防腐剂61.5软化水Cq.s.芳香油5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液Dq.s.柠檬酸制备分别加热A和B相至约80'C。短暂预匀化B相,然后将B相搅拌入A相并再次匀化。冷却至约40'C,加入C相并再次充分匀化。用柠檬酸调节pH至6-7。实施例105:润肤护体膏霜AI1%%成分(INCI)A6.0PEG-7氢化蓖麻油10.0鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯5.0肉豆蔻酸异丙酯7.0》广物油0.5乳木果油(牛油树)0.5硬脂酸铝0.5硬脂酸镁0.2没药醇0.7季铵盐-18水辉石B5.0二丙二醇0.7硫酸镁q.s.防腐剂62.9软化水Cq.s.芳香油1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14_264的水性溶液AI5%%成分(INCI)A6.0PEG-7氢化蓖麻油10.0鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯5.0肉豆蔻酸异丙酯7.0》户物油0.5乳木果油(牛油树)0.5硬脂酸铝0.5硬脂酸镁0.2没药醇0.7季铵盐-18水辉石B5.0二丙二醇0.7硫酸镁q.s.防腐剂58.9软化水Cq,s.芳香油5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14—264的水性溶液制备分别加热A和B相至约80。C。将B相搅拌入A相并匀化。冷却至约40。C,同时搅拌。搅拌冷却至约40。C,加入C相并再次匀化。搅拌冷却至室温。实施例106:液体化妆品——OAV型AI1%%成分(INCI)A2.0鲸蜡硬脂醇聚醚-6,十八烷醇2.0鲸蜡硬脂醇聚醚-256.0硬脂酸甘油酯l,O鲸蜡醇8.0,广物油7.0鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯0.2聚二曱基硅氧烷B3.0丙二醇1.0泛醇q.s.防腐剂61.9软化水C0.1没药醇1.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14_264的水性溶液q.s.芳香油D5.7C.1.77891,二氧化钬1.1氧化铁AI5%%成分(INCI)A2.0鯨蜡硬脂醇聚醚-6,十八烷醇2.0鲸蜡硬脂醇聚醚-256.0硬脂酸甘油酯1.0鲸蜡醇8,0矿物油7.0鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯0.2聚二甲基硅氧烷B3.0丙二醇1.0泛醇q.s.防腐剂57.9软化水C0.1没药醇5.0含有约5%角蛋白结合结构域一活性染料14一264的水性溶液q.s.芳香油D5.7C.1.77891,二氧化钛1.1氧化铁制备分别加热A和B相至约80°C。将B相搅拌入A相并匀化。冷却至约40。C,同时搅拌。搅拌冷却至约40'C,加入C和D相并再次充分匀化。搅拌冷却至室温。实施例107:下文描述了本发明的皮肤化妆品,它包含按照实施例19制备的角蛋白结合效应分子(与染料14—264偶联的SEQIDNo.:ID168的角蛋白结合结构域)。所述角蛋白结合效应分子在下文的实施例中称作角蛋白结合结构域—活性染料14—264。对本领域技术人员而言,理所当然地,可以使表6和7中所述的所有其它染料与KBD按照实施例19、19a和19b偶联并用于下述制品。将所示的角蛋白结合结构域一活性染料14一264KBD-D(SEQIDNo.:168)作为约5%重量浓度的水性溶液使用。下列数据为重量份透明染发香波<table>tableseeoriginaldocumentpage377</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage378</column></row><table><table>complextableseeoriginaldocumentpage379</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage380</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage381</column></row><table>调节pH至6.0熏发胶霜<table>tableseeoriginaldocumentpage381</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage382</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage383</column></row><table>ow防晒制品<table>tableseeoriginaldocumentpage383</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage384</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage385</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage386</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage387</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage388</column></row><table>棒状物<table>tableseeoriginaldocumentpage389</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage390</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage391</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage392</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage393</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage394</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage395</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage396</column></row><table>具有熏色效果的自助美黑水分散体<table>tableseeoriginaldocumentpage396</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage397</column></row><table>日晒后用水分散体<table>tableseeoriginaldocumentpage397</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage398</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage399</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage400</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage401</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage402</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage403</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage404</column></row><table>实施例108:在下列制品中,描述了包含至少一种无机色素,优选氧化锌和/或氧化钛,UvinulAPlus和其他UV-A和UV-B有机过滤剂的組合的美容防晒制品。本文的无机色素可以以包衣形式存在,即对它们进行表面处理。例如,这种表面处理可以通过本身公知的方法,如DE-A-3314742中所述的方法为色素提供疏水薄层。按照本领域技术人员公知的常规方式制备下述制品。下文描述了本发明的皮肤美容制品,它包含按照实施例19制备的角蛋白结合效应分子(与染料14—264偶联的SEQIDNo.:ID168的角蛋白结合结构域)。所述角蛋白结合效应分子在下文的实施例中称作角蛋白结合结构域一活性染料l4—264。对本领域技术人员而言,理所当然地,可以使表6和7中所述的所有其它染料与KBD按照实施例19、19a或19b偶联并用于下述制品。角蛋白结合结构域一活性染料14_264KBD-D(SEQIDNo.:168)的含量是指100%的活性成分。本发明的活性成分可以以纯的形式或作为水性溶液使用。就水性溶液而言,在特定制品中的软化水含量必须予以调适。<table>tableseeoriginaldocumentpage405</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage406</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage407</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage408</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage409</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage410</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage411</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage412</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage413</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage414</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage415</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage416</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage417</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage418</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage419</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage420</column></row><table><table>complextableseeoriginaldocumentpage421</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage422</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage423</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage424</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage425</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage426</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage427</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage428</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage429</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage430</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage431</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage432</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage433</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage434</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage434</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage434</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage435</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage436</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage437</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage438</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage439</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage440</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage441</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage442</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage443</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage444</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage445</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage446</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage447</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage448</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage449</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage450</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage451</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage452</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage453</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage454</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage455</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage456</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage457</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage458</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage459</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage460</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage461</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage462</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage463</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage464</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage465</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage466</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage467</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage468</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage469</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage470</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage471</column></row><table><table>complextableseeoriginaldocumentpage472</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage473</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage474</column></row><table>200680052113.X说明书第465/474页2.00UvinulAPlus二乙氨基羟基苯甲酰基己基苯甲酸酯3.00UvinulN539T氰双笨丙烯酸辛酯3.00Z-COTEMAX氧化锌,二苯基癸酰基聚曱基硅氧烷2.00AbilB8843PEG-14聚二曱基硅氧烷3.60LanetteO鲸蜡硬脂醇4.00UvinulMC80曱氧基肉桂酸乙基己酯2.00CetiolB己二酸二丁酯B4.00甘油87%甘油0.20EdetaBDEDTA二钠71.00软化水泛醇C楊LuvigelEM辛酸/癸酸甘油三酯,丙烯酸钠共聚物D1.00维生素E醋酸酯生育酚醋酸酯1.00角蛋白结合结构域一活性染料14_2640.20外消旋没药醇没药醇q.s,防腐剂<table>tableseeoriginaldocumentpage475</column></row><table>A7.50UvinulMC80甲氧基肉桂酸乙基己酯5.00UvinulN539T氰双苯丙烯酸辛酯3.00EmulgadePL68/50鲸蜡硬脂基糖苷,鲸蜡硬脂醇2.00Dracorin100SE硬脂酸甘油酯,PEG-100硬脂酸酯1.00Fitoderm角鲨烷0.50CremophorWO7PEG-7氢化蓖麻油0.50CremophorPS20聚山梨醇酯202.00DryFloPure辛烯基琥珀酸淀粉铝B5.00Z-COTEMAX氧化锌,二苯基癸酰基聚甲基硅氧烷0.03Sicomet蓝色P77007C.I.77007,群青475<table>tableseeoriginaldocumentpage476</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage477</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage478</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage479</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage480</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage481</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage482</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage483</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage484</column></row><table>权利要求1.角蛋白结合效应分子,包含(a)至少一种活性染料(i);和(b)至少一种角蛋白结合多肽(ii)。2.权利要求l所述的角蛋白结合效应分子,其中所述角蛋白结合多肽(ii)对人毛发角蛋白,指曱角蛋白或皮肤角蛋白具有结合亲和力。3.权利要求l-2中任一项所述的角蛋白结合效应分子,其中所用的角蛋白结合多肽(ii):(a)包含至少一种SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、卯、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示的序列;或(b)对应于这样的多肽,所述多肽与至少一种SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示的序列具有至少40%的同一性并且能够结合角蛋白。4.权利要求l-3中任一项所迷的角蛋白结合效应分子,其中所用的角蛋白结合多肽(ii)由这样的核酸分子编码,所迷核酸分子包含至少一种选自如下的核酸分子(a)编码多肽的核酸分子,所述多肽包含SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示的序列;(b)包含至少一种SEQIDNo.:1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、145、149、152、159、161、163、165、167或169所示多核普酸的核酸分子;(c)编码SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示序列的多肽的核酸分子;(d)具有这样的核酸序列的核酸分子,所述核酸序列对应于至少一种SEQIDNo.:l、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101、103、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、145、149、152、159、161、163、165、167或169所示的序列;或为通过取代、缺失或插入从中衍生的核酸分子,其编码的多肽与至少一种SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、卯、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示的序列具有至少40%的同一性并且能够结合角蛋白;(e)编码单克隆抗体识别的多肽的核酸分子,所述单克隆抗体抗如(a)至(c)中所示核酸分子编码的多肽;(f)编码角蛋白结合蛋白的核酸分子,所述核酸分子在严格条件下与如(a)至(c)中所示的核酸分子杂交;(g)编码角蛋白结合蛋白的核酸分子,在严格杂交条件下,利用如(a)月b够从DNA库中分离所述核酸分子;和h)能够通过序列SEQIDNo.:2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、卯、92、94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、146、150、153、156、157、158、160、162、164、166、168或170所示氨基酸序列之一的反向翻译产生的核酸分子。5.权利要求l-4中任一项所述的角蛋白结合效应分子,其中所述活性染料(i)具有至少一种选自如下的活性固着点(a)在碱性条件下可活化的式l的基团<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>式l其中表示与染料分子(D)连接的价键,X为吸电子基团或烷基、-O-烷基、氰基、羟基、卣素基团或H,k为l、2或3,n为0或l,且B为基团CH=CH2或基团CH2-CH2-Q或-NH-CH2-CH2-Q或-NH-CH-CH2,其中Q为能够在碱性条件下裂解的基团,(b)式2的丙烯酰氨基固着点<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>式2<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>其中一一表示与染料分子D连接的价键;和(c)式3、4或5的化合物之一其中…—表示与染料分子(D)连接的价键,V为氟或氯;U,、U2彼此独立地为氟、氯或氢;且Q,、Q2彼此独立地为氯、氟、氰氨基、羟基、(d-C6)-烷氧基、苯氧基、磺基苯氧基、巯基、(d-C6)-烷基巯基、吡啶并、羧基吡啶并、氨基曱酰基吡啶并或通式6或7的基团R2式6—N、W—SO,Z式7R3一NR4其中R^为氢或(d-C6)-烷基、磺基-(d-C6)-烷基,或者未被取代或被(d-C4)-烷基、(C,-C4)-烷氧基、磺基、自素、羧基、乙酰氨基、脲基取代的苯基;113和114彼此独立地具有112的含义之一,或为通式8的基团,R24/R25N+—R26式8V或形成式-(CH2)r的环系,其中j为4或5;或可选地为-(CH2)2-E-(CH2)2-,其中E为氧、硫、磺基、-NR5-,其中R^(C广C6)-烷基;W为亚苯基,其未蜂皮取代或被l或2个诸如(C,-C4)-烷基、(d-C4)-烷氧基、羧基、磺基、氯、溴的取代基取代;或为(d-C4)-亚烷基-亚芳基或(C2-C6)-亚烷基,其可以被氧、硫、磺基、氨基、羰基、羧氨基中断;或为亚苯基-CONH-亚苯基,其未被取代或被(d-C4)-烷基、(C厂C4)-烷氧基、羟基、磺基、羧基、酰氨基、脲基或g素取代;或为亚萘基,其未被取代或被一个或两个磺基取代;Z为基团CH=CH2或基团CH2-CH2-Q或—NH-CH2-CH2-Q或-NH-CH-CH2,其中Q为能够在碱性条件下裂解的基团;R24、R25和R26为(d-C4)-烷基或(CrC4)-羟基烷基;且B-为阴离子的等效物,如硫酸氢盐、硫酸盐、氟化物、氯化物、溴化物、磷酸二氢盐、踌酸氢盐、磷酸盐、氢氧化物或乙酸盐。6.权利要求5所述的角蛋白结合效应分子,其中式1中至少一个X基团为基团S03H。7.权利要求4-6中任一项所述的角蛋白结合效应分子,其中式1中的B为-CH:CH2、基团-CH2-CH2-0-S03H,i^》CH2-CH2Cl。8.权利要求4-7中任一项所述的角蛋白结合效应分子,其中式l的可活化基团与染料分子(D)通过基团-NH-、-N=N-、-NH-C(O)-、-NH-S(V或-N(R)-键合,其中R为烷基。9.权利要求8所述的角蛋白结合效应分子,其中染料(D)选自酞菁系列染料、蒽醌染料、偶氮染料、甲膽染料、二噁嗪染料、吖啶染料、^吨染料、聚甲炔染料、芪染料、硫化染料、三芳基甲烷染料、苯并吡喃染料、二苯并蒽酮染料以及这些染料的金属络合物。10.权利要求4-9中任一项所述的角蛋白结合效应分子,其中式l中的"n"为0。11.权利要求5-10中任一项所述的角蛋白结合效应分子,包含至少一种这样的活性染料,其中式l-5的活性固着点选自下列基团(l-l)至(l-43):<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>12.权利要求l-ll中任一项所述的角蛋白结合效应分子,其中所述的活性染料(i)与所述的角蛋白结合多肽(ii)通过连接分子间接偶联。13.权利要求12所述的角蛋白结合效应分子,其中使用式9或10的连接分子(iii),<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>式9其中"n"为0-40的整数。14.权利要求1-13所述的角蛋白结合效应分子在染发剂中的用途用。15.染发剂,包含权利要求1-13所述的角蛋白结合效应分子。16.使用至少一种角蛋白结合效应分子染色毛发或皮肤的方法,所述角蛋白结合效应分子包含(a)至少一种角蛋白结合多肽(ii);和(b)活性染料(i)或染料。17.权利要求16所述的方法,其中使用至少一种权利要求1-13中定义的角蛋白结合效应分子。18.权利要求16-17所述的方法,其中所述的染色是可逆的,其中通过置换反应用溶液处理而从皮肤或毛发中除去角蛋白结合效应分子,所述溶液包含i.角蛋白结合多肽类,或ii.皮肤或毛发角蛋白,或iii.去污剂。全文摘要本发明涉及包含活性染料和角蛋白结合多肽的角蛋白结合效应分子及其在染发制品中的用途。本发明还涉及染发方法。文档编号A61K8/64GK101370822SQ200680052113公开日2009年2月18日申请日期2006年11月23日优先权日2005年12月1日发明者A·普托克,B·利布曼,H·巴尔格,H·里恩茨,L·索莫吉,M·弗尔克特申请人:巴斯夫欧洲公司
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