专利名称：：三水合氨磷汀结晶冻干制剂及其制备方法
技术领域：
：本发明属于药物制剂领域，更具体而言，涉及一种无菌的三水合氨磷汀结晶冻干制剂及其制备方法。
背景技术：
：氨磷汀化学名称为S-2-(3-氨基丙基胺)乙基硫代磷酸，也称为WR-2721。1996年美国FDA(食品药品监督管理局)批准美国Bioscience公司的Ethyol(氨磷汀)冻干注射粉针，2001年中国SFDA(食品药品监督管理局)首家批准我国大连美罗大药厂注射用氨磷汀(商品名阿米福汀)冻干粉针上市。氨磷汀化学结构式为H2N-(CH2)3-NH-(CH2)2-SP03H2，是一种有机硫化磷酸化合物。它在组织中被与细胞膜结合的碱性磷酸酶水解脱磷酸后，成为具有活性的代谢产物WR-1065,其化学结构式为H2N-(CH2)rNH-(CH2)2-SH。因巯基具有清除组织中自由基的作用，故能减低顺铂、环磷酰胺及丝裂霉素等的毒性。氨磷汀为正常细胞保护剂，主要用于各种癌症的辅助治疗。在对肺癌、卵巢癌、乳腺癌、鼻咽癌、骨肿瘤、消化道肺瘤、血液系统肿瘤等多种癌症患者进行化疗前应用氨磷汀，可明显减轻化疗药物所产生的肾脏、骨髓、心脏、耳及神经系统的毒性，而不降低化疗药物的药效。放疗前应用氨磷汀可显著减少口腔干燥和粘膜炎的发生。氨磷汀用于保护HIV受感染病人应用核苷类逆转录酶抑制剂齐多福汀(AZT)免受有害副作用。氨磷汀的水溶液或失水状态下是不稳定的，目前研究稳定的、含三水合结晶氨磷汀制剂报道有1.中国专利ZL00119038.5公开了无需冻干，在无菌条件下通过调节pH,冷冻，得到含三个结晶水的氨磷汀晶体，结晶出的氨磷汀必须过筛后才能分装成粉针剂，但不需经过冻干过程。2.中国专利ZL93117436.8公开了含氨磷汀的CrC5醇和水的溶液进行冻干结晶，而制备稳定的结晶氨磷汀组合物。该方法虽然公开使用含C1-C5醇和水的溶液，冷冻干燥的过程需进行退火，温度范围宽，实施例中只有乙醇作为溶剂的实施例，冷冻干燥时间长超过50小时。3.中国专利ZL200410037763,X公开了氨磷汀的丙酮和水的溶液进行冻干结晶，制备稳定的结晶氨磷汀制剂，该方法公开使用丙酮溶剂，冷冻干燥的过程需进行退火，温度范围宽，冷冻干燥时间超过50小时。虽然前述专利公开了三种制备稳定结晶氨磷汀的方法，由于氨磷汀市场需求量大，人们需要研究出更加便利、节能、高效制备稳定氨磷汀制剂的方法。
发明内容因此，本发明的目的在于提供一种改进无菌的三水合氨磷汀结晶冻干制剂。本发明人采用冷冻干燥工艺制备无菌的三水合氨磷汀结晶冻干制剂，对其制备过程工艺条件和制剂稳定性进行大量的研究，得到制备过程便利，工艺时间短、节能、高效，适合规模化生产，同时该制剂性能稳定，易于运输和储存。本发明提供一种无菌的三水合氨磷汀结晶冻干制剂，其特征是，由含有氨磷汀、丙酮与乙醇混合溶剂和水组成的混合溶液，经除去热原、0.22pm膜过滤除菌，冻干后制得。所述氨磷汀为按照本领域常规或已知的方法制备的氨磷汀或其水合物，并优选为三水合氨磷汀晶体，最优选按如下方法得到的三水合氨磷汀晶体步骤1:将反应物N-(2-溴乙基)-l,3-丙二胺双氢溴酸盐与硫代磷酸钠按1.01-1.2:1.0的摩尔比例溶解于水中，加入极性非质子溶剂作为促进剂，在1040。C反应；反应后，反应物溶液不用醇析，直接冷却析出粗产品三水合氨磷汀粗品；步骤2:将步骤l得到的三水合氨磷汀粗品进行第一次重结晶提纯，即将三水合氨磷汀粗品溶解于水中，然后用曱醇析出，得到无结晶水氨磷汀；步骤3:将步骤2得到的无结晶水氨磷汀进行第二次重结晶提纯，即将无结晶水氨磷汀溶解于水中，并用无结晶水氨磷汀重量的0.11.50%的活性炭脱色，然后用乙醇析出三水合氨磷汀晶体，其纯度^99.5%,硫醇含量^0.1%,其他有关物质含量^0.1%(按美国USP29)。在上述制备方法中，所用水为纯水或去离子水。更具体而言在所述步骤1中，反应物N-(2-溴乙基)-1,3-丙二胺双氢溴酸盐与硫代磷酸钠按1.01~1.20:1.0的摩尔比例置于水中搅拌溶解，并优选L031.10:1.0;溶解所用的水重量是N-(2-溴乙基)-1，3-丙二胺双氢溴酸盐加入量的1.3~3.8倍，并优选1.72.5倍；溶解温度范围10~40°C;所述的极性非质子溶剂为二甲基亚砜，二曱基亚砜的加入量是N-(2-溴乙基)-1，3-丙二胺双氢溴酸盐加入重量的1.02.8倍；反应温度控制在1040°C，并优选15~25°C;反应过程中用硝酸银溶液检验反应溶液，至无黑色沉淀析出；反应结束后，将反应产物溶液直接降温冷却至-15。Cl(TC,优选-10°C5°C，维持224小时，过滤得三水合3-氨基丙基胺乙基硫代磷酸(氨磷汀)结晶粗品。在所述步骤2中，即第一次重结晶提纯用纯水溶解步骤l制备的三水合氨磷汀粗品，纯水用量是三水合氨磷汀粗品重量的1.06.0倍，并优选2.54.5倍；溶解温度1545。C;溶解后，加入曱醇，曱醇加入重量是加纯水量的0.10.8倍，并优选0.2~0.6倍；降温至20°C-15°C，优选降温温度范围为8。C-5。C，析出无结晶水氨磷汀。在所述步骤3中，即第二次重结晶提纯用纯水溶解步骤2制备的无结晶水氨磷汀，用水量是加入无结晶水氨磷汀重量的1.06.0倍，并优选2.5~4.5倍；溶解温度1545。C;并优选加入无结晶水氨磷汀重量的0.1-1.5%的活性炭进行脱色，搅拌15分钟以上，然后过滤；向所得滤液中加入乙醇，乙醇加入重量是所加入纯水量的0.050.4倍，并优选0.10.3倍；降温至20°C-15°C，优选降温温度范围为8°C~-5°C,析出含三个结晶水的氨磷汀晶体。然后按常规方法进行过滤、干燥。过滤后，用乙醇溶液洗涤晶体，真空干燥，得高纯稳定的三水合3-氨基丙基胺乙基硫代磷酸(氨磷汀)结晶化合物。按上述方法得到的三水合3-氨基丙基胺乙基硫代磷酸(氨磷汀)晶体，收率大于65%,纯度^99.5%，^i醇含量S0.1。/。，其它杂质^).1%,其稳定性大大提高，从而副作用大大减少，可用于制备药物制剂用。在本发明提供的三水合氨磷汀结晶冻千制剂中，所述的丙酮与乙醇的混合溶剂，丙酮与乙醇配比为0.2~4.0:1(按体积比)，优选丙酮与乙醇的配比为0.52.0:1(按体积比)。本发明所述含有氨磷汀、丙酮与乙醇混合溶剂和水组成的混合溶液中，含有氨磷汀50~400mg/ml，优选含有氨磷汀80~200mg/ml;1~30%(体积百分比)丙酮和乙醇混合溶剂，优选6~15%(体积百分比)的丙酮与乙醇混合溶剂；65~99%(体积百分比)的水，优选85~94%(体积百分比)的水。更具体而言，本发明提供的无菌的三水合氨磷汀结晶冻干制剂按如下方法制得，该方法包括以下步骤(1)制备含有氨磷汀、丙酮与乙醇混合溶剂和水组成的混合溶液按上述比例关系配制含有氨磷汀、药学上可接受的丙酮与乙醇混合溶剂和水的混合溶液；(2)除热原、除菌对(1)步骤配制好的溶液用活性炭脱色，除去热原，过滤除菌；(3)灌装在IOO级洁净区条件下，灌装(2)步骤处理后的溶液到冻干管制注射剂瓶中，灌装含氨磷汀80~900mg/瓶，其溶液量0.5~6.0m1/瓶，优选含氨磷汀100700mg/瓶，其溶液量1.06.0ml/瓶；(4)预冻把灌装含有无菌氨磷汀溶液的管制注射剂瓶放置到冻干机的板层上，通过设置板层温度进行冷冻，板层温度达-16t:~-45°C，优选-20°C~-30°C，降温速度20分钟/。C~1分钟/。C,优选15分钟/。C~3分钟〃C,维持时间2~16小时，优选4~8小时；(5)升华干燥在-45。C-l(TC范围进行升华干燥，将在(4)步骤基础上，开动冻干机冷凝室制冷温度低于-47。C，开动真空泵使冻干机内真空度升至300mTorr以上，緩慢通过板层加温，使板层温度升至-25~-10匸范围内进行升华干燥，时间16-48小时;(6)解析干燥在(5)步骤结束后，升温至-5。C25。C进行解析干燥，时间2~10小时；(7)充气、压塞在(6)步骤结束，在2°C25。C范围内引入无菌的惰性气体，再压塞，得到无菌的三水合氨磷汀结晶冻干制剂；且上述整个冻干过程时间可控制在35小时内完成，时间短，节能。在所述的(1)步骤中，还可在所得溶液中加入常规药学上可接受的辅剂中的一种或一种以上的物质，如赋形剂、镇痛剂和緩沖剂等。在所述的(2)步骤中，所述活性炭用量可以是氨磷汀用量的0.05%~5%(重量百分比)，优选0.1%~2.0%。加入活性炭后，在20。C25。C下搅拌15~30分钟，过滤脱碳。所述过滤除菌可以用0.22(im微孔滤膜过滤。所述的(4)步骤冷冻温度达-25t:，冷冻2~10小时，优选3~5小时。所述的(5)步骤升华干燥，优选温度冷冻在-25r时，将冻干机真空度升至300mTorr以上，緩慢加热，板层温度由-25。C緩慢升至-20-10。C，范围进行升华干燥16~24小时。所述的(6)解析干燥步骤，控制冻干机得板层温度在-5。C~25°C，优选-5。C~15°C,保持5-10小时。本发明无菌的三水合氨磷汀结晶冻干制剂为正常细胞保护剂，主要用于各种癌症的辅助治疗，减轻放、化疗对人体正常组织的毒副作用。使用本发明的冻干粉针一般每次使用剂量在200~900mg范围，把冻干粉针溶解于注射用水或其它注射液，所述注射液是常规注射液，如5%葡萄糖注射液或0.9%氯化钠注射液。给药方式可静脉内、肌内、皮下、腔内和鞘内给药。本发明的无菌含三水合氨磷汀结晶冻干制剂性能稳定，使用时溶解充分迅速，其制备过程便利，工艺时间短、节能、高效，适合规模化生产，易于运输和储存。图1A和图1B是本发明制备实施例1得到的三水合氨磷汀晶体的XRPD语图和数据。图2是本发明制备实施例1得到的三水合氨磷汀晶体的X射线单晶衍射图。图3是本发明制备实施例1得到的三水合氨磷汀晶体的电子显微镜照片，从图中清楚表明三水合氨磷汀是以晶体形式存在，并且是扁平状晶体。具体实施例方式下面实施例是对本发明进一步说明和描述，这些说明和描述并不是对本
发明内容的进一步限制。一.高纯稳定的三水合氨磷汀晶体的制备制备实施例1步骤1:合成在50L不锈钢反应釜中加入纯水13.6kg，十二水硫代磷酸钠19.2mol(7,6kg),搅拌下加入N陽(2-溴乙基)-l，3-丙二胺双氢溴酸盐19.8mol(6.8kg,3%过量)，緩慢加入ll.OkgDMSO，同时维持反应温度不超过25°C。滴加完DMSO后，用硝酸银溶液监测反应溶液，至无黑色沉淀析出，反应结束，将反应溶液降温至0。C,每小时搅拌5分钟，维持18小时。离心过滤，得三水合3-氨基丙基胺乙基硫代磷酸粗品6.1kg。步骤2:第一次重结晶提纯在50L不锈钢结晶釜中加入22.0kg纯水，加入上步制备的3-氨基丙基胺乙基硫代磷酸粗品6.1kg，在室温下溶解，加入活性炭95.0g，室温下搅拌15分钟，过滤，母液中加入曱醇8.7kg,通冷却水降温至0。C，维持18小时，离心过滤，得一次重结晶精制无结晶水3-氨基丙基胺乙基硫代磷酸4.8kg。步骤3:第二次重结晶提纯在50L不锈钢结晶釜中加入20.0kg纯水，加入第一次重结晶得到的无结晶水3-氨基丙基胺乙基硫代磷酸4.8kg,在室温下搅拌溶解，加入活性炭75.0g,室温下搅拌15分钟，过滤，母液中加入乙醇3.2kg,通冷却水降温至0。C，维持18小时，离心过滤，30。C真空干燥，得三水合3-氨基丙基胺乙基硫代磷酸3.6kg。采用HPLC法(按美国29版药典方法)分析，纯度99.81%,硫醇含量0.021%，其他有关物质0.078%。表1给出了上述制备的三水合3-氨基丙基胺乙基硫代磷酸晶体与市场上氨磷汀含量和有关物质含量的对比序含量碗寧二磁^它1市场(07301)99.010.550.190.23市场(07313)98.990.550.220.243本制备实施例99.810.0210.00.078从表1中可以看出，本发明制备的三水合氨磷汀晶体的含量要高于市场购置的三水合氨磷汀，同时有关物质硫醇、二硫化合物及其它有关物质都大大低于目前市场购置的产品。采用D/MAX-2400X射线衍射仪，在管压40KV,管流100mA,Cu耙Aa，测试角度4-60°，6。/min，防扩散狭缝1°,防漫反射狭缝1°,接收狭缝0.15mm,测得该晶体X-射线粉末衍射图如图1A和图1B所示。图3为该晶体的电子显微镜照片，从图中清楚表明三水合氨磷汀以晶体形式存在，并且是扁平片状晶体。三水合氨磷汀晶体结构测定三水合氨磷汀晶体的晶体结构已被测定。在室温下用钼辐射完成晶体测量，单位晶胞的测定和数据的收集。结构由直接方法求解并经全矩阵最小二乘法和傅立叶差分法精确。所有非氢原子各向异性地准确，连接至氮和水的氧原子的氢原子由傅立叶差分图定位并各向同性地精确。化合物的手性空间群P2:2:2中晶化，三水合3-氨基丙基胺乙基硫代磷酸晶体结构图如附图2所示。所用仪器CCDX射线单晶衍射仪，型号BrukerSmartAPEXII型。表2.三水合3-氨基丙基胺乙基硫代磷酸晶体X-单晶衍射数据12<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>0(3)635(2)6190(2)880(1)34(1)N(2)2646(2)-1329(3)-13(1)28(1)0(2)1914(2)3360(2)969(1)29(1)0(1)3863(2)5403(2)385(1)33(1)N(l)5491(2)2031(3)1292(1)25(1)C(l)6162(3)4709(3)1721(1)33(1)C(2)6046(3)2961(3)1851(1)32(1)C(3)5365(3)304(3)1413(1)30(1)C(4)5009(3)-610(3)818(1)29(1)C(5)2983(3)-304(3)538(1)29(1)0(3W)-1449(2)2254(3)443(1)43(1)0(2W)950(4)1630(3)2058(1)51(1)O(IW)-281(4)8430(3)1827(1)56(1)表4.DSl的键长和键角P(l)-0(1)1.5115(17)P(l)-0(3)1.5134(16)P(l)-0(2)1.519(2)P(l)-S(l)2.1109(7)S(l)-C(l)1.828(2)N(2)_C(5)1.485(3)N(2)-H(2A)0.8600N(2)-H(2B)0,86000(2)-H(2C)0.82000(1)-H(IA)0.8200N(l)_C(3)1.485(3)N(l)_C(2)1.487(3)N(l)-H(IB)0.8600C(l)-C(2)1.506(4)C(l)-H(IC)0,9700C(l)-H(ID)0.9700C(2)-H咖0.9700C(2)-H(2E)0.9700C(3)-C(4)1.514(4)C(3)-H(3B)0.9700C(3)-H(3C)0.9700C(4)-C(5)1.518(3)C(4)-H(4A)0.9700C(4)-H(4B)0.9700C(5)-H(5A)0.9700C(5)-H(5B)0.97000(1)-P(l)-0(3)112.63(11)0(1)-P(1)-0(2)111.82(11)0(3)-P(1)-0(2)114.50(10)0(1)-P(1)-S(l)107.54(7)0(3)-P(l)-S(l)103.03(7)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>N(1)-C(3)-H(3C)肌4C(4)-C(3)-H(3C)109.4H(犯)-C(3)-H(3C)108.0C(3)-C(4)-C(5)113.11(19)C(3)-C(4)-H(4A)109.0C(5)-C(4)-H(4A)109.0C(3)-C(4)-H(4B)109.0C(5)-C(4)-H(4B)109.0H(4A)-C(4)-H(4B)107.8N(2)-C(5)-C(4)110.87(19)N(2)-C(5)-H(5A)109.5C(4)-C(5)-H(5A)109.5N(2)-C(5)-H(5B)109.5C(4)-C(5)-H(5B)109.5H(5A)-C(5)-H(5B)]08.1二、三水合氨磷汀结晶冻干制剂的制备实施例1溶液配制用100.0g三水合结晶氨磷汀(大连美罗大药厂)，加入600ml注射用水，室温搅拌溶解后，搅拌状态下加入42.1ml的95%乙醇和40ml丙酮的混合溶剂，加注射用水定容至800ml;除热原、除菌室温下加入O.lg的针用活性炭，搅拌15分钟，脱碳过滤，滤液通过0.22[mi微孔滤膜过滤至澄清；灌装在100级洁净区条件下，将上述澄清溶液灌装于洁净无菌的管制注射剂瓶中，每瓶4.0ml(以无水物计含氨磷汀400mg);预冻把灌装含有无菌氨磷汀溶液的管制注射剂瓶放置到冻干机的板层上，通过设置板层温度进行冷冻，达温度-25t:，维持4小时；升华干燥预冻结束后，开动冻干机冷凝室制冷温度低于-47。C，开动真空泵使冻干机内真空度升至300mTorr以上，緩慢通过板层加温，使板层温度从-25。C升至-16。C进行升华干燥，升华干燥24小时；解析干燥在升华干燥后，通过设置板层温度从-16。C升温至4°C，维持4小时；充气、压塞在解析干燥步骤结束，在4。C引入无菌的氮气，再压塞，即得到无菌的三水合氨磷汀结晶冻干制剂A。实施例2按照实施例1的方法制备本发明三水合氨磷汀结晶冻干制剂B，只是采用本发明上述制备的三水合氨磷汀晶体120.0g;加入95%的乙醇33.7ml和40ml丙酮的混合溶剂。实施例3按照实施例1的方法制备本发明三水合氨磷汀结晶冻干制剂C,只是采用本发明上述制备的三水合氨磷汀晶体60.0g,加入95%的乙醇63.2ml和60ml丙酮的混合;容剂。实施例4按照实施例1的方法制备本发明三水合氨磷汀结晶冻干制剂D,只是溶液配制中加入赋形剂甘露醇80.0g;预冻把灌装含有无菌氨磷汀溶液的管制注射剂瓶放置到冻千机的板层上，通过设置板层温度进行冷冻，达温度-30°C,维持4小时；升华干燥预冻结束后，开动冻干机冷凝室制冷温度低于-47。C,开动真空泵使冻干机内真空度升至300mTorr以上，緩慢通过板层加温，使板层温度从-30。C升至-2(TC进行升华干燥，升华干燥24小时；解析干燥在升华干燥后，通过设置板层温度从-20。C升温至5°C,维持6小时。实施例5将本发明的三水合氨磷汀结晶冻干制剂A,B,C，D置于温度为25°C±2°C，相对湿度为60%±50/0条件，分别在O,1,3,6,12个月时取样分析其性状、pH值、溶液澄清度与颜色、水分、有关物质和含量测定(按USP29方法)。结果见表5。同时与中国专利ZL200410037763.X的实施例IO数据对比，见表5。表5本发明制备注射用三水合氨磷汀结晶冻干制剂与现有技术对比室温稳定性试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>注1:中国专利ZL200410037763.X中数据，中国专利ZL200410037763.X中的氨磷汀含量和相关物质含量的测定方法未公开。注2:中国专利ZL200410037763.X水分含量是用干燥失重法测定。从表5中发现本发明提供高纯三水合氨磷汀结晶制剂的有关物质含量(<0.10%)低于中国ZL200410037763.X公开的(0.35~0.39%)水平，本发明三水合氨磷汀结晶冻干制剂在室温状态一年，其它有关物质没有改变，但硫醇和二硫化合物略有增加，符合USP29版要求。将本发明的制剂A,B，C，D置于温度为40°C±2°C，相对湿度为75%±5%条件，分别在O,1,2，3，6个月时取样分析其性状、pH值、溶液澄清度与颜色、水分、有关物质和含量测定。结果见表6。表6本发明制备注射用三水合氨磷汀结晶冻干制剂加速试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>表7中国专利ZL93117436.8的加速试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>从表6、表7看出，本发明的三水合氨磷汀结晶冻干制剂的稳定性比中国专利ZL93117436.8中公开方法制备的三水氨磷汀结晶更稳定。且本发明的冻干过程时间短、节能。权利要求1、一种无菌的三水合氨磷汀结晶冻干制剂，其特征是，由含有氨磷汀、丙酮与乙醇混合溶剂和水组成的混合溶液，经除去热原、过滤除菌，冻干后制得。2、根据权利要求1所述的三水合氨磷汀结晶冻干制剂，其特征是，所述含有氨磷汀、丙酮与乙醇混合溶剂和水组成的混合溶液中，含有氨磷汀50~400mg/ml,1~30%体积百分比的丙酮和乙醇混合溶剂，和65~99%体积百分比的水。3、根据权利要求2所述的三水合氨磷汀结晶冻干制剂，其特征是，所述含有氨磷汀、丙酮与乙醇混合溶剂和水组成的混合溶液中，含有氨磷汀氨磷汀80~200mg/ml,6~15%体积百分比的丙酮与乙醇混合溶剂，和85~94%体积百分比的水。4、根据权利要求1、2或3所述的三水合氨磷汀结晶冻干制剂，其特征是，所述的丙酮与乙醇的混合溶剂，丙酮与乙醇配比为0.2~4.0:1,按体积、百分比i十。5、根据权利要求4所述的三水合氨磷汀结晶冻干制剂，其特征是，所述的丙酮与乙醇的混合溶剂，丙酮与乙醇配比为0.52.0:1,4要体积百分比计。6、根据权利要求1所述的三水合氨磷汀结晶冻干制剂，其特征是，所述氨磷汀来自三水合氨磷汀晶体。7、根据权利要求6所述的三水合氨磷汀结晶冻干制剂，其特征是，所述三水合氨磷汀晶体为按如下方法得到的三水合氨磷汀晶体步骤1:将反应物N-(2-溴乙基)-l，3-丙二胺双氢溴酸盐与硫代磷酸钠按1.01-1.2:1.0的摩尔比例溶解于水中，加入极性非质子溶剂二曱基亚砜作为促进剂，在104(TC反应；反应后，反应物溶液不用醇析，直接冷却析出粗产品三水合氨磷汀粗品；步骤2:将步骤l得到的三水合氨磷汀粗品进行第一次重结晶提纯，将三水合氨磷汀粗品溶解于水中，然后用曱醇析出，得到无结晶水氨磷汀；步骤3:将步骤2得到的无结晶水氨磷汀进行第二次重结晶提纯，将无结晶水氨磷汀溶解于水中，并用无结晶水氨磷汀重量的0.11.50%的活性炭脱色，然后用乙醇析出三水合氨磷汀晶体，其纯度299.5%,硫醇含量^).1%,其他有关物质含量^0.1%;在上述制备方法中，所用水为纯水或去离子水。8、根据权利要求1-7中任一项所述的三水合氨磷汀结晶冻干制剂，其特征是，所述三水合氨磷汀结晶冻干制剂按如下方法制得，该方法包括以下步骤(1)制备含有氨磷汀、丙酮与乙醇混合溶剂和水组成的混合溶液配制含有氨磷汀、丙酮与乙醇混合溶剂和水的混合溶液；(2)除热原、除菌对(1)步骤配制好的溶液用活性炭脱色，除去热原，过滤除菌；(3)灌装在100级洁净区条件下，灌装(2)步骤处理后的溶液到冻干管制注射剂瓶中，灌装含氨磷汀80~900mg/瓶，其溶液量0.5~6.0m1/瓶；(4)预冻把灌装含有无菌氨磷汀溶液的管制注射剂瓶放置到冻干机的板层上，通过设置板层温度进行冷冻，板层温度达-16。C~-45°C,降温速度20分钟〃C~1分钟/。C,维持时间2~16小时；(5)升华干燥在-45。C-10。C范围进行升华干燥，将在(4)步骤基础上，开动冻干机冷凝室制冷温度低于-47。C,开动真空泵使冻干机内真空度升至300mTorr以上，緩慢通过板层加温，使板层温度升至-25-10。C范围内进行升华干燥，时间16~48小时；(6)解析干燥在(5)步骤结束后，升温至-5。C25。C进行解析干燥，时间2~10小时；(7)充气、压塞在(6)步骤结束，在2°C25。C范围内引入无菌的惰性气体，再压塞，得到无菌的三水合氨磷汀结晶冻干制剂。9、根据权利要求8所述的三水合氨磷汀结.晶冻干制剂，其特征是，在所述(l)步骤中，向三水合结晶氨磷汀加入注射用水，室温搅拌溶解后，搅拌状态下加入丙酮与乙醇的混合溶剂，加注射用水定容，得到含有氨磷汀、丙酮与乙醇混合溶剂和水的混合溶液；在所述(3)步骤灌装中，在100级洁净区条件下，灌装(2)步骤处理后的溶液到冻干管制注射剂瓶中，含氨磷汀100700mg/瓶，其溶液量1.06.0ml/瓶;在所述(4)步骤预冻中，把灌装含有无菌氨磷汀溶液的管制注射剂瓶放置到冻干机的板层上，通过设置板层温度进行冷冻，板层温度达-20。C-30°C，降温速度15分钟厂C~3分钟厂C,维持时间48小时；且整个冻干过程时间控制在35小时内完成。10、根据权利要求1所述的三水合氨磷汀结晶冻干制剂，其特征是，所述含有氨磷汀、丙酮与乙醇混合溶剂和水组成的混合溶液中进一步包括赋形剂甘露醇。全文摘要本发明属于药物制剂领域，公开了一种无菌的三水合氨磷汀结晶冻干制剂及其制备方法。本发明的三水合氨磷汀结晶冻干制剂，由含有氨磷汀、丙酮与乙醇混合溶剂和水组成的混合溶液，经除去热原、0.22μm膜过滤除菌，灌装，再经预冻、升华干燥、解析干燥、充气、压塞，而制得。本发明的三水合氨磷汀结晶冻干制剂性能稳定，其制备过程便利，工艺时间短，冻干工艺时间小于35小时，节能、高效，适合规模化生产，易于运输和贮存。文档编号A61K9/19GK101347412SQ200810146538公开日2009年1月21日申请日期2008年9月2日优先权日2008年9月2日发明者孟庆伟,张成海,李红梅,苗蔚荣,董述祥,郝雅男,健都,陈祥麟申请人:大连美罗药业股份有限公司;大连理工大学