专利名称：氨磷汀微球的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种微球的制备方法，特别是氨磷汀微球的制各方法。
背景技术：
氨磷汀(WR-2721， amifostine) 1999年被美国FDA批准用于对抗化疗药肾毒性以及减轻 肿瘤患者因放疗引起的口干症，也是一种效果良好的辐射防护及细胞保护剂，在缓解肿瘤化 疗的损伤中有显著的效果，但其临床使用存在先天不足。首先，血浆清除速度很快，静脉注 射后6min血中药物残留不足10。/。，药物作用时间短；其次，口服无效且有恶心、呕吐以及急 性低血压等副反应。
文献"公开号为CN1291475的中国专利"公开了一种氨磷汀冻干粉制剂及其制备方法，无 菌条件下通过调节pH，冷冻得到晶型大小合适单一成分固体，过筛分装制成冻干粉制剂。
文献"公开号为CN1695626的中国专利"公开了一种氨磷汀冻干制剂及其制备方法，通过 溶液预冻、升华干燥、再干燥等步骤制得氨磷汀冻干制剂。文献所述的氨磷汀冻干制剂，静 脉注射后，血浆清除速度很快，6min血中药物残留不足1015/。，药物作用时间短。
发明内容
为了克服现有技术氨磷汀冻干粉剂药物作用时间短的问题，本发明提供一种氨磷汀微球 的制备方法，将氨磷汀包埋于生物可降解高分子材料中，制备成氨磷汀微球，可以延长药物 作用吋间。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案 一种氨磷汀微球的制备方法，其特点是包括 下述步骤
(a) 将生物可降解高分子溶于有机溶剂中，配成浓度为2 5%的溶液，加入浓度为0.05
0.3%的表面活性剂，形成聚合物有机溶液油相0;
(b) 将氨磷汀溶于蒸馏水中，制成50 100mg/ml的氨磷汀水溶液，形成第一水相W,;
(c) 将聚乙烯醇溶于蒸馏水中，配制成1 4%聚乙烯醇水溶液，形成第二水相W2:
(d) 将步骤(b)制成的氨磷汀水溶液加入到步骤(a)形成的油相O中，超声乳化器 乳化，形成油包水型乳化液/ 0;
(e) 将步骤(d)制成的油包水型乳化液W！ / O分散于步骤(c)制成的聚乙烯醇水溶 液中，超声乳化器乳化，制成W,/0/W2型乳化液；
(f) 将W,/0/W2型乳化液在冰浴条件下磁力搅拌，搅拌速度为200 2000rpm，搅拌5 12h后，在4。C高速离心机上离心，转速为5000 10000 rpm，离心15 30min，收集后溶于蒸馏水中，经涡旋分散后4'C高速离心，转速为5000 10000 rpm，离心15 30 min后收集， 重复洗涤3 5次后，收集于干燥瓶中置-2(TC冰箱中过夜，后转入-80。C低温冰箱中冷冻20 25h以上，后冷冻干燥20 30h，制成氨磷汀微球；
所述生物可降解高分子材料是聚乳酸-羟基乙酸共聚物、聚乳酸、聚羟基乙酸、聚己内 酯、左旋聚乳酸-羟基乙酸共聚物、聚酸酐、聚原酸酯、聚磷腈、聚磷酸酯、聚酰胺、壳聚 糖、葡聚糖、海藻酸盐、玻璃酸、骨胶或者明胶的任一种；
所述有机溶剂是二氯甲垸、丙酮或者乙酸乙酯任一种，或者两种的混合物；
所述表面活性剂是卵磷脂、吐温-80或者司班-80任一种，或者两种的混合物。
所述油包水型乳化液Wi / O的体积比Wt :0=1:15 1:5。
所述W"0/W2型乳化液的体积比W!/0: W2=l: 15 1:10。
所述微球粒径为400 900nm。
本发明的有益效果是由于采用乳化-溶剂挥发法，将可降解高分子材料溶于有机溶媒中， 加入一定量的表面活性剂，与氨磷汀水溶液混合，乳化后分散于聚乙烯醇(PVA)水溶液中， 进一步超声乳化，形成w/o/w型乳化液，后低温条件下磁力挽拌挥去有机溶剂形成固化微球， 然后离心、洗涤、冷冻干燥，得氨磷汀微球。这种微球体外释放时间长达75 100h。
下面结合具体实施方式
对本发明作详细说明。
具体实施例方式
实施例1:取摩尔比为75:25，分子量为50000的生物可降解高分子聚乳酸-聚乙醇酸共聚 物100mg，溶于3ml含0.1%卵磷脂的二氯甲烷溶液中，形成油相0，向此油相加入第一水 相W,、 0.4 ml浓度为50mg/ml的氨磷汀水溶液中，超声乳化器进行乳化，得W!/0乳化液， 再将所得乳化液加入到第二水相W2、 2°/。聚乙烯醇水溶液中，超声乳化器再次进行乳化，制 得W,/0/W2型乳化液后，冰浴条件下进行磁力搅拌，搅拌速度为1000rpm，搅拌挥发6h后， 于6000 rpm速度下4。C低温离心30min，收集微球，10ml蒸馏水重复洗涤4次，后经预冻后， -50^条件下冷冻干燥2411。所得微球的包埋率为22%，微球粒径为400 700 nm， 24h累计释 放70%~80%，体外释药达80h。
实施例2:取摩尔比为75:25，分子量15000的生物可降解高分子聚乳酸-聚乙醇酸共聚物 100mg，溶于3ml含0.1%卵磷脂的二氯甲烷溶液中，形成油相O，加入第一水相W卜0.4 ml 浓度为50mg/ml氨磷汀水溶液，超声乳化器进行乳化，得W"O乳化液，所得乳化液加入到 第二水相W2、 2%聚乙烯醇水溶液中，超声乳化器再次进行乳化，制得W,/0/W2型乳化液后， 冰浴条件下进行磁力搅拌，搅拌速度为1000 rpm，搅拌挥发6h后，于6000 rpm速度下4°C 低温离心30min，收集微球，10ml蒸馏水重复洗涤4次，后经预冻后，-5(TC条件下冷冻干燥24h。所得微球的包埋率为20%，微球粒径为500-800 nm， 24 h累计释放65%~75%，体 外释药达90 h。
实施例3:制备方法同实施例1，其中生物可降解高分子为摩尔比50:50，分子量15000 的聚乳酸-聚乙醇酸共聚物，经检测，微球的包埋率为25%，微球粒径为400-800 nm， 24h累 计释放68%~80%，体外释药达80 h。
实施例4:制备方法同实施例l，其中氨磷汀水溶液浓度为75mg/ml，经检测，微球的包 埋率为19%,微球粒径为400 800nm， 24h累计释放70%~78%，体外释药达80h。
实施例5:制备方法同实施例1，其中氨磷汀水溶液浓度为100mg/ml，经检测，微球的 包埋率为16%，微球粒径为400~800nm， 24h累计释放65%~75%，体外释药达85h。
实施例6:制备方法同实施例1，其中表面活性剂由卵磷脂换为吐温-80，经检测，微球 的包埋率为25%，微球粒径为500 800nm， 24h累计释放60% 70%，体外释药达88h。
实施例7:制备方法同实施例1，其中表面活性剂由卵磷脂换为司班-80，经检测，微球 的包埋率为19%，微球粒径为500 900nm， 24h累计释放60%~72%，体外释药达86h。
实施例8:制备方法同实施例l，其中二氯甲烷溶液换为丙酮溶液，经检测，微球的包埋
率为22%，微球粒径为400 800nm， 24h累计释放58°/。~70°/。，体外释药达100h。
实施例9:制备方法同实施例1，其中有机溶剂二氯甲烷溶液换为乙酸乙酯溶液，经检测，
微球的包埋率为17%，微球粒径为400 750nm， 24h累计释放60%~74%，体外释药达95h。
实施例10:制备方法同实施例l，其中2%聚乙烯醇水溶液换为1%聚乙烯醇水溶液，经 检测，微球的包埋率为15%,微球粒径为500 850nm， 24h累计释放66%~76%，体外释药达 85h。
实施例ll:制备方法同实施例l，其中2%聚乙烯醇水溶液换为3%聚乙烯醇水溶液，经
检测，微球的包埋率为16%，微球粒径为550~900nm， 24h累计释放70%~78%，体外释药达 80h。
实施例12:制备方法同实施例l，其中聚乳酸-聚乙醇酸共聚物换为聚乳酸，经检测，微
球的包埋率为14%，微球粒径为450~800nm， 24h累计释放72%~81%，体外释药达83 h。
实施例13:制备方法同实施例1，其中聚乳酸-聚乙醇酸共聚物换为聚羟基乙酸，经检测，
微球的包埋率为16%,微球粒径为400 760nm， 24h累计释放71%~78%，体外释药达82h。
实施例14:制备方法同实施例l，其中聚乳酸-聚乙醇酸共聚物换为聚酸酐，经检测，微 球的包埋率为13%,微球粒径为600~900nm， 24h累计释放73% 82%，体外释药达75h。
实施例15:制备方法同实施例l，其中聚乳酸-聚乙醇酸共聚物换为海藻酸盐。 实施例16:制备方法同实施例l，其中聚乳酸-聚乙醇酸共聚物换为聚己内酯。实施例17;制备方法同实施例l，其中聚乳酸-聚乙醇酸共聚物换为壳聚糖。 实施例18:制备方法同实施例1，其中聚乳酸-聚乙醇酸共聚物换为左旋聚乳酸-羟基乙 酸共聚物。
实施例19:制备方法同实施例l，其中聚乳酸-聚乙醇酸共聚物换为葡聚糖。 实施例20:制备方法同实施例l，其中聚乳酸-聚乙醇酸共聚物换为海藻酸盐。 实施例21:制备方法同实施例l，其中聚乳酸-聚乙醇酸共聚物换为玻璃酸。 实施例22:制备方法同实施例l，其中聚乳酸-聚乙醇酸共聚物换为骨胶。 实施例23:制备方法同实施例l，其中聚乳酸-聚乙醇酸共聚物换为明胶。
权利要求
1、一种氨磷汀微球的制备方法，其特征在于包括以下步骤(a)将生物可降解高分子溶于有机溶剂中，配成浓度为2～5％的溶液，加入浓度为0.05～0.3％的表面活性剂，形成聚合物有机溶液油相O；(b)将氨磷汀溶于蒸馏水中，制成50～100mg/ml的氨磷汀水溶液，形成第一水相W1；(c)将聚乙烯醇溶于蒸馏水中，配制成1～4％聚乙烯醇水溶液，形成第二水相W2；(d)将步骤(b)制成的氨磷汀水溶液加入到步骤(a)形成的油相O中，超声乳化器乳化，形成油包水型乳化液W1/O；(e)将步骤(d)制成的油包水型乳化液W1/O分散于步骤(c)制成的聚乙烯醇水溶液中，超声乳化器乳化，制成W1/O/W2型乳化液；(f)将W1/O/W2型乳化液在冰浴条件下磁力搅拌，搅拌速度为200～2000rpm，搅拌5～12h后，在4℃高速离心机上离心，转速为5000～10000rpm，离心15～30min，收集后溶于蒸馏水中，经涡旋分散后4℃高速离心，转速为5000～10000rpm，离心15～30min后收集，重复洗涤3～5次后，收集于干燥瓶中置-20℃冰箱中过夜，后转入-80℃低温冰箱中冷冻20～25h以上，后冷冻干燥20～30h，制成氨磷汀微球；所述生物可降解高分子材料是聚乳酸-羟基乙酸共聚物、聚乳酸、聚羟基乙酸、聚己内酯、左旋聚乳酸-羟基乙酸共聚物、聚酸酐、聚原酸酯、聚磷腈、聚磷酸酯、聚酰胺、壳聚糖、葡聚糖、海藻酸盐、玻璃酸、骨胶或者明胶的任一种；所述有机溶剂是二氯甲烷、丙酮或者乙酸乙酯任一种，或者两种的混合物；所述表面活性剂是卵磷脂、吐温-80或者司班-80任一种，或者两种的混合物。
2、 根据权利要求l所述氨磷汀微球的制备方法，其特征在于所述油包水型乳化液W, / 0 的体积比W^01:15 1:5。
3、 根据权利要求l所述氨磷汀微球的制备方法，其特征在于所述Wi/0/W2型乳化液的 体积比Wi/0:W^l: 15 1:10。
4、 根据权利要求l所述氨磷汀微球的制备方法，其特征在于所述微球粒径为400 900nm。
全文摘要
本发明公开了一种氨磷汀微球的制备方法，包括下述步骤采用乳化-溶剂挥发法，将生物降解高分子材料溶于有机溶剂中，加入表面活性剂，再与氨磷汀水溶液混合，超声乳化器乳化后，分散于聚乙烯醇水溶液中，进一步超声乳化，形成w/o/w型乳化液，后于低温条件下，磁力搅拌挥去有机溶剂，然后离心、洗涤、冷冻干燥，即得氨磷汀微球。本发明氨磷汀载药微球的制备方法，有机溶剂使用量小，制备时间短，微球粒径控制在400～900nm，这种微球体外释放时间长达75～100h。
文档编号A61K9/16GK101637453SQ200910023588
公开日2010年2月3日 申请日期2009年8月14日 优先权日2009年8月14日
发明者洋 于, 卢婷利, 孙伟光, 涛 陈 申请人:西北工业大学