专利名称：：一种头孢米诺钠脂质体制剂的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种脂质体制剂，尤其是涉及头孢米诺钠脂质体制剂及其制法，属于医药
技术领域：
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背景技术：
：头孢米诺钠，其化学名称为(6R，7S)-7-[(S)-2-(2-氨基-2-羧基乙巯基)乙酰胺基]-7-甲氧基-3-[[(l-甲基lH-四唑-5-基)硫]甲基]-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂二环[4.2.0]辛-2-烯-2-羧酸钠，分子式C16H2()N7Na07S3,分子量519.56，结构式为<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>为第三代头孢菌素类抗生素，对革兰氏阴性和阳性菌均具有较好的抗菌作用，特别对大肠杆菌、克雷白杆菌属、流感嗜血杆菌、变形杆菌属及脆弱拟杆菌有很强的抗菌作用。其作用机理是对/3-内酰胺类抗生素通常作用点的青霉素结合蛋白显示很强亲和性，可抑制细胞壁合成，并与肽聚糖结合，抑制肽聚糖与脂蛋白结合以促进溶菌，在短时间内显示很强杀菌力。可用于由以上细菌引起的呼吸、泌尿及腹腔和盆腔等的感染及败血症。目前上市的头孢米诺钠为无菌粉针剂，稳定性差，对温度和光的不稳定，复溶后出现混浊现象，而且需阴凉处保存。中国专利CN101279980A公开了一种头孢米诺钠粉针剂的制备方法，先将头孢米诺钠经高速逆流色谱纯化，再冷冻干燥，无菌分装制得粉针剂。该方法只是对头孢米诺钠进行了纯化，并没有对其进行特殊保护，在水溶液中会很快水解氧化，不能改变不稳定的缺点，和普通的上市制剂比较没有明显的区别，而且纯化步骤采用大量有机溶剂，安全性得不到保障。
发明内容针对目前的头孢米诺钠制剂稳定性差的问题，本发明的目的在于提供一种稳定的头孢米诺钠制剂，具体地说，提供一种头孢米诺钠脂质体制剂，其具有良好的制剂稳定性、冻干过程中脂质体不会因脱水、融合、冰晶生成等发生破裂，水化复溶之后，脂质体同样保持良好的包封率。本发明的目的还在于提供一种头孢米诺钠脂质体制剂的制备方法，采用特殊的溶剂系统，获得优于现有技术的产品。本发明采用的技术方案如下本发明提供了一种头孢米诺钠脂质体制剂，其特征在于，其为粉针剂，头孢米诺钠被包裹于脂质体内以脂质体的形式，并且是由如下重量份的组分制成头孢米诺钠0.1-15份，大豆卵磷脂1-50份，胆固醇0.1-40份，抗氧剂0.1-20份，支持剂l-60份。作为优选，上述所述的头孢米诺钠脂质体制剂，其特征在于是由如下重量份的组分制成头孢米诺钠0.5-5份，大豆卵磷脂5-40份，胆固醇1-20份，抗氧剂0.5-10份，支持剂l-50份。本发明上述所述的头孢米诺钠脂质体制剂，其中所述的支持剂选自甘露醇、乳糖、葡萄糖、海藻糖、蔗糖、右旋糖酐、山梨醇、氯化钠、甘氨酸、水解明胶中的一种或多种。作为本发明优选方案，上述所述的头孢米诺钠脂质体制剂，其中所述的支持剂为山梨醇和海藻糖，二者重量比为4:1。本发明上述所述的头孢米诺钠脂质体制剂，其中所述的抗氧剂选自亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、硫脲、L-半胱氨酸、甲醛合亚硫酸氢钠、谷胱甘肽、没食子酸丙酯、维生素E、抗坏血酸棕榈酸酯、叔丁基对羟基茴香醚中的一种或多种。作为本发明的另一目的，提供一种上述所述的头孢米诺钠脂质体制剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤(1)将大豆卵磷脂、胆固醇、抗氧剂溶于有机溶剂中，除去有机溶剂，制得磷脂膜；(2)加入缓冲盐溶液，使磷脂膜水化，高速匀质乳化，微孔滤膜过滤，制得空白脂质体混悬液；(3)将头孢米诺钠溶于水，微孔滤膜过滤，滤液加入空白脂质体混悬液中，再加入支持剂，搅拌溶解，得头孢米诺钠脂质体溶液；(4)将上述头孢米诺钠脂质体溶液冷冻干燥或喷雾干燥，在无菌条件下分装即得；或者将上述头孢米诺钠脂质体溶液灌装于西林瓶中，冷冻干燥后即得。上述所述的制备方法，其中所述的有机溶剂，可以为氯仿、二氯甲垸、乙醇、甲醇、叔丁醇、正丁醇、异丙醇、丙酮、乙醚、苯甲醇、正己垸中的一种或几种，作为优选，其中所述的有机溶剂为氯仿和正丁醇，二者体积比为1:5。上述所述的制备方法，其中所述的缓冲盐溶液，没有特别限制，例如可以为磷酸盐缓冲液、枸橼酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液中的一种或几种，pH值可以为5.3-5.6。作为本发明优选实施方式，所述的头孢米诺钠脂质体制剂，其特征在于是通过如上所述方法制备得到的。本发明提供的头孢米诺钠脂质体制剂，进行稳定性试验考察，在高温6(TC、光照4500Lx条件下放置10天，各项检测指标均无明显变化；在高温40°C、相对湿度75%±5%条件下加速试验6个月，各项检测指标没有明显变化；在高温25°C、相对湿度60%±10%条件下长期试验18个月，各项检测指标没有明显变化。本发明提供的头孢米诺钠脂质体制剂，进行急性毒性试验、异常毒性试验和热源检査，均符合规定，安全性得到证明。本发明提供的头孢米诺钠脂质体制剂，与现有技术相比，取得令人惊喜的发明效果，主要优点如下(1)头孢米诺钠被包裹于脂质体内，大大提高了稳定性，冻干过程中脂质体不会因脱水、融合、冰晶生成等发生破裂，水化复溶之后，脂质体同样保持良好的包封率，保证了产品质量；(2)药物载体脂质体体内降解、无毒性和无免疫原性，而且可以提高药物治疗指数、降低药物毒性和减少药物副作用；(3)采用常规的工艺设备，可工业规模、高效率生产，产品质量稳定，是一种独特和普遍适用的，低成本的工业化制备方法。具体实施例方式以下通过实施例进一步说明本发明，但不应理解为对本发明的限制c实施例1头孢米诺钠脂质体的制备处方:头孢米诺钠大豆卵磷脂胆固醇维生素E山梨醇海藻糖100g100g400g10g400g画g制备工艺(1)将100g大豆卵磷脂、400g胆固醇和10g维生素E溶于1000ml氯仿和正丁醇体积比为l:5的混合溶剂中，混合均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去氯仿和正丁醇，制得磷脂膜；(2)加入pH值5.6枸橼酸盐缓冲溶液1000ml，振摇，搅拌使磷脂膜完全水化，高速匀质乳化，微孔滤膜过滤，制得空白脂质体混悬液；(3)将100g头孢米诺钠溶于500ml水，微孔滤膜过滤，滤液加入空白脂质体混悬液中，保温50。C搅拌30分钟，再加入400g山梨醇和100g海藻糖，搅拌溶解，冷却到室温，得头孢米诺钠脂质体溶液；(4)将上述溶液喷雾干燥，在无菌条件下分装O.lg(头孢米诺计)/瓶，制得头孢米诺钠脂质体制剂，即头孢米诺钠粉针剂。实施例2处方头孢米诺钠脂质体的制备头孢米诺钠大豆卵磷脂胆固醇叔丁基对羟基茴香醚山梨醇50g400g100g50g240g60g制备工艺(1)将400g大豆卵磷脂、100g胆固醇和50g叔丁基对羟基茴香醚溶于1000ml氯仿和正丁醇体积比为1:5的混合溶剂中，混合均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去氯仿和正丁醇，制得磷脂膜；(2)加入pH值5.4醋酸盐缓冲溶液1000ml，振摇，搅拌使磷脂膜完全水化，高速匀质乳化，微孔滤膜过滤，制得空白脂质体混悬液；(3)将50g头孢米诺钠溶于300ml水，微孔滤膜过滤，滤液加入空白脂质体混悬液中，保温5(TC搅拌60分钟，再加入240g山梨醇和60g海藻糖，搅拌溶解，冷却到室温，得头孢米诺钠脂质体溶液；(4)将上述溶液冷冻干燥，在无菌条件下分装0.05g(头孢米诺计)/瓶，制得头孢米诺钠脂质体制剂，即头孢米诺钠粉针剂。实施例3头孢米诺钠脂质体的制备处方头孢米诺钠150g大豆卵磷脂500g胆固醇200g抗坏血酸棕榈酸酯80g山梨醇640g海藻糖160g制备工艺(1)将500g大豆卵磷脂、200g胆固醇和80g抗坏血酸棕榈酸酯溶于1500ml氯仿和正丁醇体积比为1:5的混合溶剂中，混合均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去氯仿和正丁醇，制得磷脂膜；(2)加入卩11值5.3磷酸盐缓冲溶液12001111，振摇，搅拌使磷脂膜完全水化，高速匀质乳化，微孔滤膜过滤，制得空白脂质体混悬液；(3)将150g头孢米诺钠溶于1000ml水，微孔滤膜过滤，滤液加入空白脂质体混悬液中，保温5(TC搅拌40分钟，再加入640g山梨醇和160g海藻糖，搅拌溶解，冷却到室温，得头孢米诺钠脂质体溶液；(4)将上述溶液灌装于西林瓶中，0.15g(头孢诺计)/瓶，冷冻干燥，制得头孢米诺钠脂质体制剂，即头孢米诺钠粉针剂。实施例4头孢米诺钠脂质体的制备处方头孢米诺钠200g大豆卵磷脂800g胆固醇300g亚硫酸氢钠100g山梨醇720g海藻糖180g制备工艺(1)将800g大豆卵磷脂、300g胆固醇和100g亚硫酸氢钠溶于3000ml氯仿和正丁醇体积比为1:5的混合溶剂中，混合均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去氯仿和正丁醇，制得磷脂膜；(2)加入pH值5.4枸橼酸盐缓冲溶液2000ml，振摇，搅拌使磷脂膜完全水化，高速匀质乳化，微孔滤膜过滤，制得空白脂质体混悬液；(3)将200g头孢米诺钠溶于1500ml水，微孔滤膜过滤，滤液加入空白脂质体混悬液中，保温50'C搅拌60分钟，再加入720g山梨醇和180g海藻糖，搅拌溶解，冷却到室温，得头孢米诺钠脂质体溶液；(4)将上述溶液冷冻干燥，制得头孢米诺钠脂质体，在无菌条件下分装0.2§(头孢米诺计)/瓶，制得头孢米诺钠脂质体制剂，即头孢米诺钠粉针剂。对比例l头孢米诺钠脂质体的制备处方头孢米诺钠100g蛋黄卵磷脂100g甘氨胆酸钠400g维生素E10g氯化钠400g甘露醇100g制备工艺同实施例1，在无菌条件下分装0.1g(头孢米诺计)/瓶，制得头孢米诺钠脂质体制剂，即头孢米诺钠粉针剂。对比例2头孢米诺钠脂质体的制备处方头孢米诺钠50g大豆卵磷脂30g胆固醇800g叔丁基对羟基茴香醚4g山梨醇100g海藻糖400g制备工艺同实施例l，在无菌条件下分装0.05g(头孢米诺计)/瓶，制得头孢米诺钠脂质体制剂，即头孢米诺钠粉针剂。试验例l包封率的测定取实施例和对比例制备的脂质体制剂，高效液相色谱法检测头孢米诺的总含量为M，选用柱色谱法分离脂质体。取1.5g葡聚糖凝胶G-50，用pH6.8磷酸盐缓冲液浸泡溶胀12h以上，装入层析柱内(200xl0mm)，用上述磷酸盐缓冲液冲洗平衡，分别取实施例1-3和对比例l-2得到的头孢米诺钠脂质体制剂加水溶解，制成每lml含有头孢米诺约15mg的溶液，分别取各溶液0.8ml，加入层析住顶部，用磷酸盐缓冲液50ml洗脱，流速1.4ml/min，收集的洗脱液加入破膜剂(乙醇苯甲醇=6:1)50ml，混匀，高效液相色谱法检测头孢米诺的含量M1。包封率y。-Ml/Mx100。/。。表1^M,啶结果<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>由以上结果可知，本发明范围内的实施例处方配比制得的脂质体包封率很高，符合实际生产要求；而本发明范围外的对比例处方配比制得的脂质体包封率很低，和实施例相比有明显的差距，不适合生产要求。试验例2粒径的检测取实施例1-3和对比例1-2制备的脂质体制剂，采用显微图像分析仪测定脂质体的粒径分布，结果如表2:表2粒径检测结果<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>由以上结果可知，实施例1-3制得的脂质体显球状，粒径均匀，范围为100-200nm;对比例1-2制得的脂质体形状不定，杂乱无章，大小不一，粒径不均匀，范围为400-800nm。试验例3稳定性考察将以上各实施例制备的样品与上市的头孢米诺钠粉针剂(海南斯达制药有限公司生产，批号20071115，规格1.0g/瓶)在高温6(TC、光照4500Lx条件下放置10天进行影响因素试验考察，结果见表3;在高温40°C、相对湿度75%±5%条件下6个月，进行加速试验考察，结果见表4;在高温25'C、相对湿度60%±10%条件下18个月，进行长期试验考察，检测各项质量指标的变化，结果见表5。表3影响因素结果时间样品性状酸度澄明度有关物质(%)含量(%)实施例i白色粉末5.5符合规定1.4499.8实施例2白色粉末5.4符合规定1.4799.6o天实施例3白色块状物5.3符合规定1.4399.5实施例4白色粉末5.4符合规定1.4599.9上市制剂白色粉末5.2符合规定1.5899.410天实施例1白色粉末5.4符合规定1.4699.7咼温实施例2白色粉末5.3符合规定1.4799.660。C实施例3白色块状物5.3符合规定1.4499.4实施例4白色粉末5.3符合规定1.4599.8上市制剂白色粉末5.0符合规定1.6699.1实施例1白色粉末5.4符合规定1.4599.810天实施例2白色粉末5.4符合规定1.4899.5光照实施例3白色块状物5.3符合规定1.4599.54500Lx实施例4白色粉末5.4符合规定1.4799.7上市制剂白色粉末4.9符合规定1.6999.0表4加速试验结果时间样品性状酸度澄明度有关物质(%)含量(%)实施例1白色粉末5.4符合规定1.4699.7实施例2白色粉末5.4符合规定1.4799.6l月实施例3白色块状物5.3符合规定1.4499.5实施例4白色粉末5.4符合规定1.4699.8上市制剂白色粉末5.1符合规定1.6299.2实施例1白色粉末5.5符合规定1.4799.7实施例2白色粉末5.3符合规定1.4899.32月实施例3白色块状物5.3符合规定1.4699.4实施例4白色粉末5.3符合规定1.4699.7上市制剂白色粉末5.0符合规定1.6699.0实施例1白色粉末5.4符合规定1.4899.6实施例2白色粉末5.4符合规定1.4899.53月实施例3白色块状物5.2符合规定1.4799.3实施例4白色粉末5.3符合规定1.4799.6上市制剂白色粉末4.8不符合规定1.7198.76月实施例1白色粉末5.4符合规定1.4999.6实施例2白色粉末5.3符合规定1.4899.4实施例3白色块状物5.2符合规定1.4699.3实施例4白色粉末5.2符合规定1.4899.5上市制剂白色粉末4.4不符合规定1.7798.2表5长期试验结果时间样品性状酸度澄明度有关物质(%)含量(%)实施例l白色粉末5.4符合规定1.4599.7实施例2白色粉末5.4符合规定1.4799.53月实施例3白色块状物5.3符合规定1.4499.5实施例4白色粉末5.3符合规定1.4699.8上市制剂白色粉末5.0符合规定1.6199.2实施例1白色粉末5.4符合规定1.4699.7实施例2白色粉末5.3符合规定1.4899.46月实施例3白色块状物5.3符合规定1.4599.4实施例4白色粉末5.4符合规定1.4799.8上市制剂白色粉末4.8符合规定1.6499.0实施例1白色粉末5.5符合规定1.4699.6实施例2白色粉末5.3符合规定1.4899.49月实施例3白色块状物5.2符合规定1.4699.3实施例4白色粉末5.2符合规定1.4899.7上市制剂白色粉末4.5符合规定1.6898.6实施例1白色粉末5.4符合规定1.4899.4实施例2白色粉末5.3符合规定1.4999.512月实施例3白色块状物5.2符合规定1.4799.6实施例4白色粉末5.3符合规定1.4999.5上市制剂白色粉末4.3不符合规定1.7298.318月实施例1白色粉末5.4符合规定1.4999.3实施例2白色粉末5.2符合规定1.4999.3实施例3白色块状物5.2符合规定1.4899.4实施例4白色粉末5.3符合规定1.5099.3上市制剂白色粉末4.1不符合规定1.7897.9由以上结果发现加速3月、6月，长期12月、18月时上市的头孢米诺钠粉针澄明度不符合规定，pH值下降较大，含量降低明显，有关物质升高；而本发明制备的样品外观性状没有明显变化，复溶良好，澄明度、pH值、含量和有关物质也没有明显的变化。说明本发明制备的样品长期贮存质量稳定性更好。而且，通过进一步的常规试验获得，本发明的前体脂质体粉针水化复溶之后，包封率没有发生变化，远远优于现有技术的产品。试验例4安全性试验异常毒性检査依据2005年版药典附录XIC异常毒性检査法，将本发明实施例制备的样品用氯化钠溶液稀释成一定浓度的供试品溶液，注入符合试验要求的小鼠体内，结果小鼠在48小时内均没有死亡现象，说明本品异常毒性符合规定。热源检査依据2005版药典附录XID热源法进行检査，结果符合规定。权利要求1、一种头孢米诺钠脂质体制剂，其特征在于，其为粉针剂，头孢米诺钠被包裹于脂质体内以脂质体的形式，并且是由如下重量份的组分制成头孢米诺钠0.1-15份，大豆卵磷脂1-50份，胆固醇0.1-40份，抗氧剂0.1-20份，支持剂1-60份。2、根据权利要求l所述的头孢米诺钠脂质体制剂，其特征在于是由如下重量份的组分制成头孢米诺钠0.5-5份，大豆卵磷脂5-40份，胆固醇l-20份，抗氧剂0.5-10份，支持剂l-50份。3、根据权利要求l-2所述的头孢米诺钠脂质体制剂，其特征在于所述的支持剂选自甘露醇、乳糖、葡萄糖、海藻糖、蔗糖、右旋糖酐、山梨醇、氯化钠、甘氨酸、水解明胶中的一种或多种。4、根据权利要求l-3所述的头孢米诺钠脂质体制剂，其特征在于所述的支持剂为山梨醇和海藻糖，二者重量比为4:1。5、根据权利要求l-4所述的头孢米诺钠脂质体制剂，其特征在于所述的抗氧剂选自亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、硫脲、L-半胱氨酸、甲酸合亚硫酸氢钠、谷胱甘肽、没食子酸丙酯、维生素E、抗坏血酸棕榈酸酯、叔丁基对羟基茴香醚中的一种或多种。6、权利要求l-5所述的头孢米诺钠脂质体制剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤(1)将大豆卵磷脂、胆固醇、抗氧剂溶于有机溶剂中，除去有机溶剂，制得磷脂膜；(2)加入缓冲盐溶液，使磷脂膜水化，高速匀质乳化，微孔滤膜过滤，制得空白脂质体混悬液；(3)将头孢米诺钠溶于水，微孔滤膜过滤，滤液加入空白脂质体混悬液中，再加入支持剂，搅拌溶解，得头孢米诺钠脂质体溶液；(4)将上述头孢米诺钠脂质体溶液冷冻干燥或喷雾干燥，在无菌条件下分装即得；或者将上述头孢米诺钠脂质体溶液灌装于西林瓶中，冷冻干燥后即得。7、根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于所述的有机溶剂可以为氯仿、二氯甲烷、乙醇、甲醇、叔丁醇、正丁醇、异丙醇、丙酮、乙醚、苯甲醇、正己垸中的一种或几种。8、根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于所述的有机溶剂为氯仿和正丁醇，二者体积比为l:5。9、根据权利要求6-8所述的制备方法，其特征在于所述的缓冲盐溶液可以为磷酸盐缓冲液、枸橡酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液中的一种或几种，pH值可以为5.3-5.6。10、根据权利要求6-9任一项所述方法制备得到的头孢米诺钠脂质体制剂。全文摘要本发明提供一种头孢米诺钠脂质体制剂。所述的头孢米诺钠脂质体制剂，其为粉针剂，头孢米诺钠被包裹于脂质体内以脂质体的形式，并且是由如下重量份的组分制成头孢米诺钠0.1-15份，大豆卵磷脂1-50份，胆固醇0.1-40份，抗氧剂0.1-20份，支持剂1-60份。本发明的头孢米诺钠制剂具有良好的制剂稳定性、冻干过程中脂质体不会因脱水、融合、冰晶生成等发生破裂，水化复溶之后，脂质体同样保持良好的包封率。文档编号A61K9/127GK101623263SQ20091016923公开日2010年1月13日申请日期2009年8月24日优先权日2009年8月24日发明者民邱申请人:海南美大制药有限公司