专利名称：尿促卵泡刺激素冻干粉针剂及其制备方法
技术领域：
本发明属于医药领域，涉及尿促卵泡刺激素冻干粉针剂及其制备方法。
背景技术：
排卵功能障碍是造成不育的主要原因之一，实验证明，通过补充外源性促性腺激 素可以有效诱导排卵。卵泡刺激素也称为促卵泡激素，是一种由垂体嗜碱性细胞合成和 分泌的糖蛋白，其分子量为33，000Dal。促卵泡激素由两个非共价α、β亚基组成，α亚 基含有92个氨基酸，与黄体生素(Luteinizing hormone, LH)及绒毛膜促性激素(Human Chorionic gona dotropin，HCG)的α亚基极其相似，β亚基由115个氨基酸组成，是决定 其特异性的组成部分。排卵功能障碍的不育妇女使用包含从绝经妇女尿液的提取尿促卵泡 刺激素的制剂，可以促使并维持卵泡的发育和成熟，使卵泡发育和受孕达到最佳效果。由于尿促卵泡刺激素是有生物活性的糖蛋白，所以为了保持其生物活性，需要非 常严格的工艺制备含有尿促卵泡刺激素的制剂。然而，现有技术中的尿促卵泡刺激素粉针 剂中普遍存在产品质量稳定性差，产品保存期短的缺点。
发明内容
除非另外说明，本文中的“尿促卵泡刺激素”又称“尿促卵泡素”，指的是尿源提取 的促卵泡刺激素，如可以从尿源的人绝经期促性腺激素HMG中纯化提取。除非另外说明，本文中的HCG是人绒毛膜促性腺激素(Human chorionic gonadotropin)的英文简称。除非另外说明，本文中的HMG是人绝经期促性腺激素(human menopausal gonadotropin)的英文简称。除非另外说明，本文中的FSH是促卵泡刺激素(R)Ilicle-Stimulating hormone) 的英文简称。因此，本发明的一个目的是提供一种尿促卵泡刺激素冻干粉针剂。本发明的另一目的是提供本发明的尿促卵泡刺激素冻干粉针剂的制备方法。本发明一方面提供了一种尿促卵泡刺激素冻干粉针剂，该冻干粉针剂包含57 102单位尿促卵泡刺激素、7. 8 22. 4mg甘露醇、1. 9 4. 2mg右旋糖酐、0. 07 0. 13mg Na2HPO4 和 0. 10 0. 20mg NaH2PO40优选地，所述冻干粉针剂包含67. 5 90. 0单位尿促卵泡刺激素。更优选地，所述冻干粉针剂包含为75单位尿促卵泡刺激素、9. 5 17. Omg甘露醇、 2. 4 3. 4mg 的右旋糖酐、0. 09 0. 12mgNa2HP04 和 0. 13 0. 17mg NaH2PO4。再优选地，所述冻干粉针剂包含75单位尿促卵泡刺激素、11. aiig甘露醇、2. 8mg右 旋糖酐、0. Ilmg Na2HPO4 和 0. 15mg NaH2PO4。优选地，所述的右旋糖酐为右旋糖酐40。本发明另一方面还提供了一种制备本发明冻干粉针剂的方法，该方法包括以下步骤a.将尿促卵泡刺激素、右旋糖酐、甘露醇、Na2HPO4和NaH2PO4分别用注射用水溶 解；b.将步骤a得到的各种溶液按比例混合；c.将步骤b得到的混合溶液冻干即可。在本发明中的尿促卵泡刺激素从合作研发单位上海天伟生物制药有限公司购买， 商品名称为尿促卵泡素(FSH)，纯度为按照生物检定法以干燥品计算，比活性应大于 8500单位/mg蛋白，卵泡刺激素与黄体生成素的效价比应大于100 1.优选地，在所述步骤a中，所述右旋糖酐或甘露醇用注射用水溶解后，右旋糖酐或 甘露醇的含量为溶液总重量的 18%，向溶液中加入溶液重量的0.5%的药用炭，煮沸 20 40分钟，过滤、冷却备用。优选地，在所述步骤a中，所述Na2HPO4和NaH2PO4用注射用水溶解后，Na2HPO4和 NaH2PO4含量为溶液总重量的10%，备用。优选地，在所述步骤a中，所述尿促卵泡刺激素在4 10°C下用注射用水溶解后备 用。在混合物中加入注射用水的温度控制在4 10°C的原因是注射用水在4°C 10°C时， 可以防止微生物的滋生，且4°C为水密度最大的临界温度，小于4°C则影响产品的均一性和 溶解性；高于10°C时，微生物生长活性增强，降低了经过验证的13个小时生产周期内无菌 保证度，因此注射用水的温度控制在4 10°C。优选地，在所述步骤b中，先将右旋糖酐溶液、甘露醇溶液以及Na2HPO4和NaH2PO4 溶液混合，加入4 10°C的注射用水总重量的50%，搅拌后加入尿促卵泡刺激素溶液，补加 4 10°C的注射用水的总重量，搅拌。优选地，在所述步骤b中，还包括将混合溶液的pH值调节到6. 5 7. 0。优选地，在所述步骤c中，包括首先将步骤b得到的混合溶液在-35°C下预冻，然后 在-35 _45°C下保温1 3小时。优选地，在所述步骤c中，还包括在将冻干产物在30 40°C下干燥2 4小时的步 骤。当冻干产物的干燥温度低于30°C时，易导致产品干燥不彻底，产品水分不合格，或由水 蒸汽压力引起的瓶内失真空塌陷，或产品稳定性下降等不良后果；当冻干产物的干燥温度 高于40°C，或干燥时间超过4小时，对产品的活性成分效价产生不利影响，这种影响与温度 升高的度数及高温度情况下干燥时间成负相关，温度越高且干燥时间越长，则产品效价下 降越多。因此，发明人经过多次试验，将冻干去除水分的制品的干燥温度控制在30 40°C， 干燥时间为2 4小时。本发明的有益效果在于本申请的发明人经过多次试验，确定了本发明中的辅料 以及辅料的用量。采用本发明处方得到的本发明的冻干粉针剂具有合适的酸碱度，即溶于 水后，PH值为6. 0-8. 0 ；干燥失重为取25mg本发明的冻干粉针剂，置于P2O5干燥器中，减 压干燥4小时，减失重量低于5. 0% ；本发明的冻干粉针剂加氯化钠注射液制成每Iml中含 100单位的尿促卵泡刺激素溶液，按静脉注射法给药，每只小鼠注射0. 5ml，异常毒性符合 药典要求；本发明的冻干粉针剂加入灭菌水2ml溶解，无菌；本发明的可见异物和不溶性微 粒符合规定。取本发明的冻干粉针剂进行纯度检验，得到的供试品溶液按照高效液相色谱 试验，尿促卵泡素主峰与相邻杂质风峰的分离度大于1.0。本发明的尿促卵泡刺激素冻干粉针剂具有质量稳定，保存期长的优点，本发明的冻干粉针剂的保存期可以达到36个月，现 有的尿促卵泡刺激素粉针剂的保存期为M个月时间。同时本发明的尿促卵泡刺激素冻干 粉针剂的也具有同现有制剂相同的药学效果。本发明尿促卵泡刺激素冻干粉针剂的制备方法不同于现有技术的制备方法。在 该制备方法中，严格控制了冻干温度、冻干时间和冻干中各个操作步骤持续的时间，这是为 了不破坏尿促卵泡刺激素这种糖蛋白的生物活性，同时保证尿促卵泡刺激素和辅料相结合 后，并冻干得到的冻干粉针剂的产品外观均一，性质稳定，保存期长，每1单位的尿促卵泡 刺激素冻干粉针剂中的细菌内毒素的量小于0. OlEU0除此之外，经过多批次的实验发现得 到的各个批次的尿促卵泡刺激素冻干粉针剂的操作误差低。
以下，结合附图来详细说明本发明的实施例，其中图1表示注射用尿促卵泡刺激素冻干粉针剂的冻干曲线。图2表示060402批注射用尿促卵泡刺激素阴凉条件下贮存36个月的高效液相色 谱图。图3表示051101批注射用尿促卵泡刺激素贮存0个月的高效液相色谱图。图4表示051101批注射用尿促卵泡刺激素贮存3个月的高效液相色谱图。
具体实施例方式实施例11.注射用尿促卵泡刺激素的制备1.冻干1. 1原料的预处理处方(以10000瓶计)原珊名称(網)75秘尿促卵泡素(1086)97.5万剩立“行)甘露醇(2107)112g
权利要求
1.一种尿促卵泡刺激素冻干粉针剂，该冻干粉针剂包含57 102单位尿促卵泡刺激 素、7. 8 22. 4mg 甘露醇、1. 9 4. 2mg 右旋糖酐、0. 07 0. 13mgNa2HP04 和 0. 10 0. 20mg ■2P04。
2.根据权利要求1所述的冻干粉针剂，其特征在于，所述冻干粉针剂包含67.5 90单 位，优选为75单位尿促卵泡刺激素、9. 5 17. Omg甘露醇、2. 4 3. ^ig的右旋糖酐、0. 09 0. 12mg Na2HPO4 和 0. 13 0. 17mg NaH2PO4。
3.根据权利要求1或2所述的冻干粉针剂，其特征在于，所述冻干粉针剂包含75单位 尿促卵泡刺激素、11. 2mg甘露醇、2. 8mg右旋糖酐、0. IlmgNa2HPO4和0. 15mg NaH2PO40
4.根据权利要求1至3中任一项所述的冻干粉针剂，其特征在于，所述右旋糖酐为右旋 糖酐40。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的冻干粉针剂的制备方法，该制备方法包括以下 步骤a.将尿促卵泡刺激素、右旋糖酐、甘露醇、Na2HPO4和NaH2PO4分别用注射用水溶解；b.将步骤a得到的各种溶液按比例混合；c.将步骤b得到的混合溶液冻干即可。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，在所述步骤a中，所述右旋糖酐或甘 露醇用注射用水溶解后，右旋糖酐或甘露醇的含量为溶液总重量的 18%，向溶液中 加入溶液重量0. 5%的药用炭，煮沸20 40分钟，过滤、冷却备用。
7.根据权利要求5或6所述的制备方法，其特征在于，在所述步骤a中，所述Na2HPO4和 NaH2PO4用注射用水溶解后，Na2HPO4和NaH2PO4含量为溶液总重量的10%，备用。
8.根据权利要求5至7中任一项所述的制备方法，其特征在于，在所述步骤a中，所述 尿促卵泡刺激素在4 10°C下用注射用水溶解后备用。
9.根据权利要求5至8中任一项所述的制备方法，其特征在于，在所述步骤b中，先将 右旋糖酐溶液、甘露醇溶液以及Na2HPO4和NaH2PO4溶液混合，加入4 10°C的注射用水总 重量的50%，搅拌后加入尿促卵泡刺激素溶液，补加4 10°C的注射用水至总重量，搅拌。
10.根据权利要求5至9中任一项所述的制备方法，其特征在于，在所述步骤b中，还包 括将混合溶液的PH值调节到6. 5 7. 0。
11.根据权利要求5至10中任一项所述的制备方法，其特征在于，在所述步骤c中，包 括首先将步骤b得到的混合溶液在_35°C下预冻，然后在-35 _45°C下保温1 3小时。
12.根据权利要求5至11中任一项所述的制备方法，其特征在于，在所述步骤c中，还 包括在将冻干产物在30 40°C下干燥2 4小时的步骤。
全文摘要
本发明提供一种尿促卵泡刺激素冻干粉针剂，该冻干粉针剂包含有57～102单位的尿促卵泡刺激素、7.8～22.4mg的甘露醇、1.9～4.2mg的右旋糖酐、0.07～0.13mg的Na2HPO4和0.10～0.20mg的NaH2PO4。本发明还提供了这种冻干粉针剂的制备方法，本发明的尿促卵泡刺激素冻干粉针剂具有质量稳定，保存期长的优点。经过多批次的实验发现得到的各个批次的尿促卵泡刺激素冻干粉针剂的操作误差低。
文档编号A61K9/19GK102038649SQ200910180568
公开日2011年5月4日 申请日期2009年10月20日 优先权日2009年10月20日
发明者刘彩霞, 扈会平, 敖卓列, 赵淑媛, 郭国领, 陈晓勤 申请人:丽珠医药集团股份有限公司, 丽珠集团丽珠制药厂