专利名称：一种注射用盐酸头孢唑兰及其制备方法
技术领域：
本发明属于医药制剂领域，涉及一种注射用盐酸头孢唑兰及其制备方法。
背景技术：
盐酸头孢唑兰(cefozopran hydrochloride)是日本武田药品工业公司研发的第 四代注射用头孢菌素，目前在日本已作为院外感染初期的首选药物被广泛应用于包括新生 儿感染在内的各科感染症的治疗。除了 MRSA外，它具有广谱活性，对革兰阳性菌的活性总 体上优于头孢他啶、头孢毗肟和氟氧头孢，而与头孢匹罗相当，对革兰阴性菌与上述对照药 具有同等的活性。它对内酰胺酶具有高度的稳定性，体内分布广泛，血浆和组织浓度较 高，大部分以原药形式从尿中排泄.24h尿排泄率80 % 90 %，无体内蓄积倾向。盐酸头孢唑兰的化学式为1-[ [ (6R，7R) _7_[ (Z) _2_ (5-氨基-I，2，4_噻二 唑-3-基)-2-甲氧亚氨基乙酰胺基]-2-羧基-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4. 2. 0] 辛-2-烯-3-基]甲基]咪唑并[l，2-b]哒嗪鐺内盐盐酸盐，其化学结构式如下 盐酸头孢唑兰属第四代注射用头孢菌素，它由13本武田药品工业公司于1985年 最先合成，并申请了化合物发明专利，随后对其进行了深入系统的药效学、药理毒理学、药 动学和临床研究。于1993年向13本厚生省提交上市申请，1995年6月获得13本厚生省的 上市许可，同年8月开始在13本上市，商品名为Firstcin。13本1995年上市当年原料药 产量即达708吨，制剂销售额约23亿13元。1997年本品的世界销售额为0. 74亿美元，较 1996年上升7.1%。有关专家预计13本的销售额峰值约200亿日元。本品已收载于13本 药局方第十四版。目前本品在13本已作为院外感染初期的首选药物被广泛应用。日本上 市的注射用盐酸头孢唑兰，主药是非无菌原料药，制备注射剂时需加入碳酸钠成钠盐后冻 干即得盐酸头孢唑兰。中国专利申请CN101265267A(
公开日2008年9月17日)公开了一种盐酸头孢唑 兰的制备方法和盐酸头孢唑兰粉针剂及其制备方法。该发明通过将500-1000重量份的盐 酸头孢唑兰晶体、103-206重量份的无水碳酸钠和60-120重量份的氯化钠混合分装得到粉 针剂。然而，利用该处方和工艺制备的盐酸头孢唑兰粉针剂需要每次注射IOOOmg主药才能 达到治疗效果，这间接地增加了该药不良反应的发生率。
发明内容
本发明的第一个目的是克服现行技术存在的不足，提供一种注射用盐酸头孢唑兰 脂质体制剂，其可在低剂量盐酸头孢唑兰使用的基础上达到与普通注射用头孢唑兰相同的 疗效，同时减少了不良反应的发生率，使得产品更加安全有效。本发明的注射用盐酸头孢唑兰脂质体制剂由处方量的盐酸头孢唑兰、大豆卵磷 脂、胆固醇、无水碳酸钠和葡萄糖组成，按重量份计算，各组分具体的含量如下盐酸头孢唑兰200-1000份大豆卵磷脂350-2000份胆固醇150-450 份无水碳酸钠45-100份葡萄糖25-85份优选地，本发明的注射用盐酸头孢唑兰脂质体制剂，按重量份计算，各组分具体的 含量如下盐酸头孢唑兰250-500 份 大豆卵磷脂 450-1200 份胆固醇 300-400 份无水碳酸钠 60-80 份葡萄糖 50-65 份在本发明的一个优选的实施例中，按重量份计算，所述注射用盐酸头孢唑兰脂质 体制剂的各组分具体含量如下
盐酸头孢唑兰500g大豆卵磷脂800g胆固醇350g无水碳酸钠65g葡萄糖60g本发明的第二个目的是提供上述注射用盐酸头孢唑兰脂质体制剂的制备方法，包 括如下步骤1)称取处方量的大豆卵磷脂、胆固醇，用无水乙醇使其溶解，混合均勻；2)将1)步骤制备的脂质体液置于薄腊蒸发器上，减压除去乙醇，制备磷脂膜；3)将适量的pH为4. 8的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液浸入磷脂膜，待磷脂完全水化 后，用高压勻浆器制备脂质体，检查脂质体粒径合格后，微孔滤膜过滤除菌，用钼兰法测定 磷脂量，以无菌水调至磷脂量不低于30mg/ml ；4)按处方配置0. 3mol/L, pH为11. 4的无水碳酸钠溶液，经微孔膜过滤除菌后备 用；5)称取处方量的盐酸头孢唑兰，溶于注射用水，经微孔滤膜过滤除菌后，置于 50°C水浴中保温；6)将步骤4)制备的碳酸钠溶液与步骤3)制备的脂质体混合，获得脂质体混悬液， 然后加入预热的盐酸头孢唑兰溶液中，接着加入处方量的葡萄糖；
7)将步骤6)制备的混合液置于50°C水浴中保温lOmin，并不时振摇，检验合格后 分装，冻干即得。本发明相对于现有技术具有如下意想不到的技术效果1)通过大鼠肺炎模型的药效学实验研究得出，注射用盐酸头孢唑兰脂质体制剂的 两个剂量组与模型对照组相比，具有极显著性差异广P<0.01)，这说明本发明的注射用盐 酸头孢唑兰对大鼠肺炎具有很好的治疗作用。注射用盐酸头孢唑兰脂质体制剂低剂量组在 治疗大鼠肺炎疗效与粉针对照组相当，注射用盐酸头孢唑兰脂质体制剂高剂量组在治疗大 鼠肺炎的疗效优于对照粉针组，且二者有显著性差异(#ρ < 0. 05)，这说明将盐酸头孢唑兰 制备成脂质体后，用小剂量的盐酸头孢唑兰脂质体制剂即可达到大剂量的常规盐酸头孢唑 兰的疗效，减少了盐酸头孢唑兰的用量，降低了药物的不良反应，提高了产品的安全性。2)通过动物安全性试验结果显示，本发明的注射用盐酸头孢唑兰脂质体制剂经家 兔耳缘静脉给药对家兔血管及肌肉无明显刺激作用；静脉注射给药对豚鼠无致敏作用；对 家兔红细胞无体外溶血及致凝集左右，说明了本发明的注射用头孢唑兰安全可靠，符合注 射剂要求。本发明的注射用盐酸头孢唑兰脂质体制剂对大鼠肺炎模型的影响1.动物及分组健康雄性SPF级SD大鼠48只，体重180 200g，给予SPF级动物标准饲料，自由 取水。将大鼠以随机数字表法随机分为4组，分别为模型对照组、粉针对照组、脂质体低剂 量组、脂质体高剂量组，每组12只。各组体重、基础体温、白细胞总数及中性粒细胞的比值 差异均无统计学意义。2.菌悬液的制备冻存的肺炎克雷伯菌复苏后接种于MH培养基上，37°C恒温孵箱过夜培养24h，采 用麦氏标准管比浊计数，以无菌双蒸水配成2个麦氏浓度单位(6X 10CFU/ml)。3.建立肺炎模型用水合氯醛按300mg/kg体重腹腔注射麻醉大鼠，再用注射器将上述制备的菌 悬液缓慢滴人大鼠鼻内，左鼻滴入0. Iml后保持头高脚低并左侧卧位lOmin，再右鼻滴入 0. Iml后保持头高脚低并右侧卧位lOmin，使菌液均勻分布于两肺。4.抗茵药物治疗抗菌药物剂量分别如下模型对照组同体积的0. 9 %生理盐水粉针对照组100mg/kg的盐酸头孢唑兰(给予按中国专利申请CN101265267A实 施例2制备的盐酸头孢唑兰粉针剂)脂质体低剂量组50mg/kg的盐酸头孢唑兰(给予本发明实施例1制备的注射用 盐酸头孢唑兰脂质体制剂)脂质体高剂量组100mg/kg的盐酸头孢唑兰(给予本发明实施例2制备的注射用 盐酸头孢唑兰脂质体制剂)各组均采用肌内注射，1次/12h，在接种细菌24h后开始治疗，疗程均为72h。5.观察指标最后1次给药之后4h，将大鼠以颈椎脱白法处死，迅速打开胸腔分离出右肺，放入 组织研磨器中，研磨成肺组织勻浆，加入Iml灭菌生理盐水制成组织悬液，再做10倍系列稀释至1000倍，取各稀释度标本10 μ 1接种于血琼脂平板，37°C温箱中过夜培养24h，进行菌 落计数，换算肺组织中有多少个菌落形成单位(CFU/g)。每个右肺组织中CFU数=菌落数X 稀释倍数X 100。各组大鼠肺组织勻浆菌落计数，结果见表1。表1各组肺组织勻浆菌落计数 与模型对照组比较，*Ρ < 0. 05，**Ρ < 0. 01与粉针对照组比较，#Ρ< 0.05结论注射用盐酸头孢唑兰脂质体制剂的两个剂量组与模型对照组相比，具有极 显著性差异广P < 0. 01)，这说明本发明的注射用盐酸头孢唑兰对大鼠肺炎具有很好的治 疗作用。注射用盐酸头孢唑兰脂质体制剂低剂量组在治疗大鼠肺炎疗效与粉针对照组相 当，注射用盐酸头孢唑兰脂质体制剂高剂量组在治疗大鼠肺炎的疗效优于对照粉针组，且 二者有显著性差异(#Ρ < 0. 05)，这说明将盐酸头孢唑兰制备成脂质体后，用小剂量的盐酸 头孢唑兰脂质体制剂即可达到大剂量的常规盐酸头孢唑兰的疗效，减少了盐酸头孢唑兰的 用量，降低了药物的不良反应，提高了产品的安全性。本发明的注射用盐酸头孢唑兰脂质体制剂的安全性试验以实施例1制备的注射用头孢唑兰脂质体制剂，按《化学药物刺激性、过敏性和溶 血性研究技术指导原则》进行试验(1)豚鼠分别每只隔日肌肉注射实施例1制备的注射用头孢唑兰生理盐水溶液 (60mg/ml)0. 5ml/只致敏，共3次，首次致敏后第14和21天分别每只单剂量静脉注射实施 例1制备的注射用头孢唑兰生理盐水溶液(120mg/ml)0. 5ml/只，进行攻击后，豚鼠未出现 竖毛、呼吸困难、喷嚏、死亡等过敏反应症状。(2)注射用头孢唑兰在临床最大给药浓度时(200mg/ml)对兔红信报无溶血和凝
集作用。(3)家兔耳缘静脉连续5天缓慢注射注射用头孢唑兰的生理盐水稀释液(150mg/ ml，2ml/kg，1次/天)，肉眼观察血管未见异常变化；病理组织学检查结果显示，给药组耳缘 静脉血管及周围组织与对照组比较无明显差异。结果显示，本发明的注射用盐酸头孢唑兰脂质体制剂经家兔耳缘静脉给药对家兔 血管及肌肉无明显刺激作用；静脉注射给药对肝鼠无致敏作用；对家兔红细胞无体外溶血 及致凝集左右，说明了本发明的注射用头孢唑兰安全可靠，符合注射剂要求。
具体实施例方式需要理解的是，对于本领域中的普通技术人员而言，在本发明的实施中，很明显并 且可以很容易作出而不背离上述本发明的范围和宗旨的其它实施方案和修改，均包含在本 发明的保护范围之中。因此，不应理解为权利要求书的范围被限制在以下实施例。实施例1注射用盐酸头孢唑兰的制备处方盐酸头孢唑兰500g大豆卵磷脂800g胆固醇350g无水碳酸钠65g葡萄糖60g制备工艺1)称取处方量的大豆卵磷脂、胆固醇，用无水乙醇使其溶解，混合均勻；2)将1)步骤制备的脂质体液置于薄腊蒸发器上，减压除去乙醇，制备磷脂膜；3)将适量的pH为4. 8的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液浸入磷脂膜，待磷脂完全水化 后，用高压勻浆器制备脂质体，检查脂质体粒径合格后，微孔滤膜过滤除菌，用钼兰法测定 磷脂量，以无菌水调至磷脂量不低于30mg/ml ；4)按处方配置0.3!1101/1^!1为11.4的无水碳酸钠溶液，经微孔膜过滤除菌后备用；5)称取处方量的盐酸头孢唑兰，溶于注射用水，经微孔滤膜过滤除菌后，置于 50°C水浴中保温；6)将步骤4)制备的碳酸钠溶液与步骤3)制备的脂质体混合，获得脂质体混悬液， 然后加入预热的盐酸头孢唑兰溶液中，接着加入处方量的葡萄糖；7)将步骤6)制备的混合液置于50°C水浴中保温lOmin，并不时振摇，检验合格后 分装，冻干即得。实施例2注射用盐酸头孢唑兰的制备处方盐酸头孢唑兰 IOOOg大豆卵磷脂2000g胆固醇400g无水碳酸钠IOOg葡萄糖80g制备工艺同实施例1实施例3注射用盐酸头孢唑兰的制备处方盐酸头孢唑兰200g大豆卵磷脂425g大豆卵磷脂800g胆固醇350g无水碳酸钠65g
葡萄糖60g制备工艺1)称取处方量的大豆卵磷脂、胆固醇，用无水乙醇使其溶解，混合均勻；2)将1)步骤制备的脂质体液置于薄腊蒸发器上，减压除去乙醇，制备磷脂膜；3)将适量的pH为4. 8的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液浸入磷脂膜，待磷脂完全水化 后，用高压勻浆器制备脂质体，检查脂质体粒径合格后，微孔滤膜过滤除菌，用钼兰法测定 磷脂量，以无菌水调至磷脂量不低于30mg/ml ；4)按处方配置0. 3mol/L, pH为11. 4的无水碳酸钠溶液，经微孔膜过滤除菌后备 用；5)称取处方量的盐酸头孢唑兰，溶于注射用水，经微孔滤膜过滤除菌后，置于 50°C水浴中保温；6)将步骤4)制备的碳酸钠溶液与步骤3)制备的脂质体混合，获得脂质体混悬液， 然后加入预热的盐酸头孢唑兰溶液中，接着加入处方量的葡萄糖；7)将步骤6)制备的混合液置于50°C水浴中保温lOmin，并不时振摇，检验合格后 分装，冻干即得。实施例2注射用盐酸头孢唑兰的制备处方盐酸头孢唑兰 IOOOg大豆卵磷脂2000g胆固醇400g无水碳酸钠IOOg葡萄糖80g制备工艺同实施例1实施例3注射用盐酸头孢唑兰的制备处方盐酸头孢唑兰200g大豆卵磷脂425g实施例7注射用盐酸头孢唑兰的制备处方盐酸头孢唑兰 400g大豆卵磷脂IOOOg胆固醇280g无水碳酸钠50g葡萄糖85g制备工艺同实施例1实施例8注射用盐酸头孢唑兰的制备处方盐酸头孢唑兰 500g大豆卵磷脂1200g
8
胆固醇350g无水碳酸钠80g葡萄糖65g制备工艺同实施例权利要求
一种注射用盐酸头孢唑兰，其特征在于按重量份计算，所述注射用盐酸头孢唑兰的各组分具体含量如下盐酸头孢唑兰200 1000份大豆卵磷脂 350 2000份胆固醇 150 450份无水碳酸钠 45 100份葡萄糖 25 85份。
2.如权利要求1所述的注射用盐酸头孢唑: 的含量如下盐酸头孢唑: 大豆卵磷脂 胆固醇 无水碳酸钠 葡萄糖，其特征在于按重量份计算，各组分具体盐酸头孢唑: 大豆卵磷脂 胆固醇 无水碳酸钠 葡萄糖250-500 份 450-1200 份 300-400 份 60-80 份 50-65 份。
3.如权利要求1所述的注射用盐酸头孢唑: 的含量如下，其特征在于按重量份汁算，各组分具体盐酸头孢唑兰500g大豆卵磷脂800g胆固醇350g无水碳酸钠65g葡萄糖60g。
全文摘要
本发明属于医药制剂领域，涉及一种注射用盐酸头孢唑兰及其制备方法。本发明的注射用盐酸头孢唑兰按重量份计算，含有盐酸头孢唑兰200-1000份、大豆卵磷脂350-2000份、胆固醇150-450份、无水碳酸钠45-100份和葡萄糖25-85份，本发明的注射用盐酸头孢唑兰在主药含有量很低的基础上同样能达到较好的疗效，同时减少了不良反应的发生率，使得产品更加安全有效。
文档编号A61P31/04GK101890021SQ20101023629
公开日2010年11月24日 申请日期2010年7月26日 优先权日2010年7月26日
发明者王艳 申请人:王艳