专利名称：禽用转移因子可溶性粉剂及其制作工艺和质量检验方法
技术领域：
本发明涉及生物制药领域，特别是涉及一种禽用转移因子可溶性粉剂及其制作工艺和质量检验方法。
背景技术：
目前国内外关于转移因子进行着广泛研究，研究主要围绕转移因子的提取工艺改进、包被技术和免疫抑制性疾病防治效果等方面内容。通过大量实验研究，已经证明转移因子具有较高的免疫活性，因此被广泛应用于医药和兽药领域。医药领域中，口服液、冻干粉、 胶囊等剂型的转移因子免疫调节剂广泛应用于人类免疫失调疾病的防治，如红斑狼疮、乙型肝炎、过敏性鼻炎等。在兽药领域，口服液和冻干粉剂型的转移因子，作为免疫增强、抗病毒和抗应激药物，用于禽病毒性疾病的防治和减轻应激反应等。目前我国正处于由养殖大国跨越为养殖强国的阶段，在这过程中制约因素有许多方面，能否有效控制疾病是其中一个重要的环节。我国畜产品出口主要面临的挑战是产品质量较低，药物残留和生物污染。因此有效控制疾病，降低药物残留和消除生物污染成为我们畜牧业工作者努力的方向和工作的重点。其中病毒性疾病的有效控制已成为兽医工作者的工作重点。养殖过程中要想有效控制疾病，同时又必须减少抗生素的使用，养殖场(或小区)必须建立合理的综合疾病防控体系，在这防控体系中如何提高动物机体免疫力，减少或消除应激是重要环节之一。所以随着我国养殖业的发展，减少化学药品使用量的要求日益迫切，而高效又安全的生物药品将有很大的市场需求。综上所述，未来转移因子在这方面具有不可替代的作用，将有广阔的市场前景。现有的转移因子口服液、冻干粉等剂型不太适合动物畜禽使用。其中口服液剂型存在体积大、不易运输、有效期短、低温储存成本高、常温贮存容易丧失有效成分等缺点；而冻干粉剂型则成本过高。因此，如何能创设一种具有提高动物免疫力和抗应激效果，且易于储存、便于运输、使用方便、成本更低、更适合于畜禽使用，并适应我国畜牧养殖业发展实际情况的新的禽用转移因子可溶性粉剂及其制作工艺和质量检验方法，实属当前本领域的重要改进目标之一。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种禽用转移因子可溶性粉剂的制作工艺，使其成本更低，从而克服现有的转移因子冻干粉制作工艺的不足。为解决上述技术问题，本发明一种禽用转移因子可溶性粉剂的制作工艺，主要包括以下步骤选用健康动物脾脏，并依次进行预处理、捣碎和冻融；对脾脏冻融物解冻，并在加水搅拌后静置；先后用滤网和超滤设备过滤；冲洗过滤后的冻融物，并将获得的冲洗液调制为转移因子浓缩液；将载体与转移因子浓缩液混合、风干。作为本发明的一种改进，所述的先后用滤网和超滤设备过滤包括用200目滤网、 1000目滤网以及滤膜截留值为30000-50000道尔顿、10000-12000道尔顿、5000-8000道尔顿、3000道尔顿的超滤设备依次过滤。所述的载体与转移因子浓缩液的重量比为1 1.5 1 2。所述的风干为35_40°C风干箱内风干。所述的冲洗过滤后的冻融物，是每过滤出180_220kg冻融物即取出并冲洗。所述的冻融为-18°C冻融8 10次。所述的冻融以显微镜观察细胞破碎率达80%以上为准。所述的先后用滤网和超滤设备过滤包括用200目滤网、1000目滤网以及滤膜截留值为50000道尔顿、12000道尔顿、7000道尔顿、3000道尔顿的超滤设备依次过滤；载体与转移因子浓缩液的重量比为1 1.5;风干为40°C风干箱内风干。本发明还提供一种禽用转移因子可溶性粉剂，使其具有提高动物免疫力和抗应激的效果，且易于储存、便于运输、使用方便、更适合于畜禽使用，并适应我国畜牧养殖业发展实际情况，从而克服现有的禽用转移因子剂型的不足。为解决上述技术问题，本发明根据上述工艺制作的禽用转移因子可溶性粉剂，其中寡核苷酸和寡肽的含量> 40mg/g。此外，本发明还提供一种上述禽用转移因子可溶性粉剂的质量检验方法，包括以下步骤取IOg禽用转移因子可溶性粉剂溶解于PH 5的IOOmL蒸馏水中；等待充分溶解后， 2000r/min离心15分钟；取上清液检测有效成分含量。采用这样的设计后，本发明在保留了现有转移因子剂型可提高动物免疫力和抗应激效果的基础上，更具备了以下优点1、可常温储存，比口服液储存时间更长，效价损失更少，使用效果更确切；2、比口服液包装体积小、运输方便；3、在畜禽使用时，比口服液更方便，混饲、饮水使用都可以；4、比冻干粉成本低，适合于畜牧养殖业自身的需要，适应我国畜牧养殖业发展实际情况，适于广泛推广使用。
上述仅是本发明技术方案的概述，为了能够更清楚了解本发明的技术手段，以下结合附图与具体实施方式
对本发明作进一步的详细说明。图1是本发明禽用转移因子可溶性粉剂的制作工艺流程示意图。
具体实施例方式本发明的理论依据为从动物脾脏提取的转移因子，是小分子量(仅3000 5000 道尔顿左右)寡肽和寡核苷酸的混合物，没有致热原性，空间结构简单，性能相对稳定，已实验证实不受消化酶的影响，为肠道吸收良好，因此内服对动物免疫增强作用良好，所以可以制作可溶性粉生产应用。并经实验证实，转移因子对温度不是十分敏感，40°C以下(避光，防腐)长期存放对有效成分的含量无显著影响，所以通过控制温度进行干燥。本发明转移因子研究根据上述理论研制而成，研制特殊的工艺过程需要解决的技术问题有转移因子最佳干燥温度，转移因子冲洗液的浓缩技术，转移因子浓缩液和载体最佳混合比例等三项独特工艺问题。本研究小组通过实验室研究到田间试验，进行了多方面的探索研究，成功获得本发明禽用转移因子可溶性粉的制作工艺。请参阅图1所示，本发明一种禽用转移因子可溶性粉剂的制作工艺主要包括以下步骤。步骤一，选用健康动物脾脏，例如猪脾脏，并依次进行预处理、捣碎和冻融。预处理具体包括仔细分离周围结缔组织和脂肪，包括脾脏的被膜；捣碎是先加等重量的蒸馏水，用组织捣碎机捣碎，并进行分装；冻融通常可在_18°C下冻融8 10次，冻融效果用显微镜观察判定，组织捣碎物载玻片涂片，光学显微镜观察，以细胞破碎率达80%以上为准。步骤二，对脾脏冻融物解冻，加2倍重量的蒸馏水，搅拌机搅勻后，静置30分钟。步骤三，先后用滤网和超滤设备过滤。较佳的，具体包括用200目滤网过滤， 滤液再用1000目的滤网过滤，滤液再用超滤设备过滤，超滤设备要求为滤膜截留值为 30000-50000道尔顿(优选50000道尔顿)、10000-12000道尔顿(优选12000道尔顿)、 5000-8000道尔顿(优选7000道尔顿)、3000道尔顿，依次过滤。步骤四，每过滤出180_220kg(优选200kg)冻融物，即将其取出3000道尔顿超滤膜，用蒸馏水冲洗，冲洗液中含有较高含量的转移因子，并将获得的转移因子冲洗液调制成有效成分(寡核苷酸+寡肽)>40mg/mL的转移因子浓缩液。具体的调制和测定可采用现有技术，直接用蒸馏水稀释，先测出冲洗液中有效成分含量，再计算出稀释比例，以达到本步骤的要求。步骤五，将载体与转移因子浓缩液按重量比1 1.5 1 2混合，分装，35_40°C 风干箱内风干，充分干燥后，粉碎、包装、防潮、防紫外线。其中，可选用各种中性载体，例如价位较低的蜂窝状载体环糊精，经多次实验证实，载体与转移因子浓缩液的重量比 1 1.5、风干温度40°C为最佳条件，此条件下，产品的质量较高，成本控制也较为合理。制备完成后，称取IOg产物溶解于pH 5的IOOmL蒸馏水中，等待充分溶解后 2000r/min离心15分钟，取上清液检测有效成分含量，以有效成分含量彡40mg/g为产品质量标准。根据上述工艺制作的禽用转移因子可溶性粉剂，其中寡核苷酸和寡肽的含量 ^ 40mg/g,呈微黄色或白色，略有腥味，粉末状，水溶性好。本发明在原料处理和提取过程中固定成本，与冻干粉的制备过程大概相同，不同的是干燥过程冻干粉干燥50kg与载体混合物需要20小时左右，大概用电1000度，出冻干粉大概52kg左右，干燥效率低，费用大概1000元，每公斤20元左右；而本工艺干燥50kg与载体混合物需要6小时左右，大概用电100度，出干燥粉52kg左右，干燥效率高，费用大概 100元，每公斤仅需要2元左右，因此明显降低了产品的制备成本，更符合经济效益。以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，本领域技术人员利用上述揭示的技术内容做出些许简单修改、等同变化或修饰，均落在本发明的保护范围内。
权利要求
1.一种禽用转移因子可溶性粉剂的制作工艺，其特征在于主要包括以下步骤选用健康动物脾脏，并依次进行预处理、捣碎和冻融；对脾脏冻融物解冻，并在加水搅拌后静置；先后用滤网和超滤设备过滤；冲洗过滤后的冻融物，并将获得的冲洗液调制为转移因子浓缩液；将载体与转移因子浓缩液混合、风干。
2.根据权利要求1所述的禽用转移因子可溶性粉剂的制作工艺，其特征在于所述的先后用滤网和超滤设备过滤包括用200目滤网、1000目滤网以及滤膜截留值为30000-50000 道尔顿、10000-12000道尔顿、5000-8000道尔顿、3000道尔顿的超滤设备依次过滤。
3.根据权利要求1所述的禽用转移因子可溶性粉剂的制作工艺，其特征在于所述的载体与转移因子浓缩液的重量比为1 1.5 1 2。
4.根据权利要求1所述的禽用转移因子可溶性粉剂的制作工艺，其特征在于所述的风干为35-40°C风干箱内风干。
5.根据权利要求1所述的禽用转移因子可溶性粉剂的制作工艺，其特征在于所述的冲洗过滤后的冻融物，是每过滤出180-220kg冻融物即取出并冲洗。
6.根据权利要求1所述的禽用转移因子可溶性粉剂的制作工艺，其特征在于所述的冻融为-18°C冻融8 10次。
7.根据权利要求1所述的禽用转移因子可溶性粉剂的制作工艺，其特征在于所述的冻融以显微镜观察细胞破碎率达80%以上为准。
8.根据权利要求1所述的禽用转移因子可溶性粉剂的制作工艺，其特征在于所述的先后用滤网和超滤设备过滤包括用200目滤网、1000目滤网以及滤膜截留值为50000道尔顿、12000道尔顿、7000道尔顿、3000道尔顿的超滤设备依次过滤；载体与转移因子浓缩液的重量比为1 1.5;风干为40°C风干箱内风干。
9.根据权利要求1-8中任一项所述工艺制作的禽用转移因子可溶性粉剂，其特征在于其中寡核苷酸和寡肽的含量> 40mg/g。
10.一种权利要求9所述的禽用转移因子可溶性粉剂的质量检验方法，其特征在于包括以下步骤取IOg禽用转移因子可溶性粉剂溶解于pH 5的IOOmL蒸馏水中；等待充分溶解后，2000r/min离心15分钟；取上清液检测有效成分含量。
全文摘要
本发明是有关于一种禽用转移因子可溶性粉剂及其制作工艺和质量检验方法，该工艺主要包括以下步骤选用健康动物脾脏进行预处理、捣碎和冻融；冻融物解冻、加水搅拌、静置；用滤网和超滤设备过滤；冲洗过滤后的冻融物，将冲洗液调制为转移因子浓缩液；将载体与转移因子浓缩液混合、风干。本发明产品禽用转移因子可溶性粉剂中，寡核苷酸和寡肽的含量≥40mg/g。该质量检验方法包括取10g产品溶解于pH 5的100mL蒸馏水中；2000r/min离心15分钟；取上清液检测有效成分含量。本发明可提高动物免疫力和抗应激效果，且易于储存、便于运输、使用方便、成本更低、更适合于畜禽使用，并适应我国畜牧养殖业发展实际情况。
文档编号A61P43/00GK102475718SQ20101055414
公开日2012年5月30日 申请日期2010年11月23日 优先权日2010年11月23日
发明者何孟莲, 赵满达 申请人:赵满达