专利名称：治疗阿尔茨海默病的新疗法的制作方法
技术领域：
本发明涉及治疗阿尔茨海默病(Alzheimer’ s disease, AD)和相关病症的组合物和方法。更具体而言，本发明涉及阿尔茨海默病和相关病症的新的组合疗法。本发明具体涉及单独或者组合起来可以有效地调节突触功能和/或血管生成和/或细胞应激反应的化合物。本发明还涉及选择治疗阿尔茨海默病的药物或药物组合的方法与治疗阿尔茨海默病或相关病症的方法。
背景技术：
AD为典型皮质性痴呆，其特征为皮质相关区域受累造成的记忆减退，并伴随言语困难(语言病症，其中存在说话和言语理解受损)、运动障碍(在没有运动或感觉损伤的情况下不能协调和执行某些有意的动作和姿势)和失认(认知物体、人、声音、形状或气味的能力)。还会涉及诸如痉挛性下肢轻瘫(影响下肢的虚弱症)等特殊症状(1-4)。阿尔茨海默病的发病随着年龄急剧增长。目前AD是痴呆症的最常见原因，它的临床特征在于认知功能总体下降，其发展缓慢并使晚期患者卧床、失禁且依赖于监护。平均来说，死亡发生在诊断后9年(5)。AD的发病率随着年龄急剧增长。据联合国人口规划项目估计，到2050年80岁以上的人数将达到3. 7亿。目前，据估计，50%的85岁以上老人患有AD。因此，50年内世界上将有超过I亿人患有痴呆症。需要长久护理和其他服务的巨额人数将严重影响医疗、财政和人力资源(6)。记忆损伤是该疾病的早期特点且涉及情景记忆(对于日常事件的记忆)。在该疾病的晚期涉及语义记忆(对于言语和视觉意义的记忆)。相反，直到晚期还保持工作记忆(涉及用于短期存储和处理信息的结构和过程的短期记忆)和程序记忆(无意识记忆，即技巧和程序的长期记忆)。随着疾病进展，显现出语言损伤、视觉感知和空间缺损、失认和失用的其他 特点。阿尔茨海默病的经典情况具有足够的特征性，允许鉴别约80%的病例(7)。然而，确实存在着临床异质性，这不仅对于临床管理来说是重要的，而且为不同的功能形式提供了进一步的特定药物治疗启示(8)。AD的病理标志物包括含有淀粉样蛋白(Αβ )的淀粉样斑块、含有τ的神经元纤维缠结(NFT)以及神经元和突触功能障碍和丧失(9-11)。最近十年，关于AD的病因已经提出了两种主要假说“淀粉样蛋白级联假说”，其认为神经退行性过程是由淀粉样蛋白前体蛋白(APP)的异常加工所触发的一系列事件(12)，以及“神经元细胞骨架退化假说”
(13)，其提出细胞骨架改变是触发事件。解释AD发展的最广为接受的理论仍然是淀粉样蛋白级联假说(14-16)，并且AD研究人员主要集中于确定潜藏在与Αβ蛋白质相关的毒性之后的机制。相反地，由于基础和实践两方面的考虑，τ蛋白所受到的制药工业的关注比淀粉样蛋白少得多。此外，与其它两者相比，突触密度改变是与认知受损最相关的病变。研究显示，淀粉样蛋白病变似乎以神经递质特异性方式发展，其中胆碱能末梢表现得最易受损，其次是谷氨酸能末梢，最后是GABA能末梢(11)。
发明概述本发明的目的是提供治疗AD和相关病症的新的治疗方法。发明人已经鉴定出若干药物，其单独或者组合起来可以有效地影响参与AD的途径，并且可以代表治疗AD和相关病症的新的有效的疗法。
因此，本发明提供治疗AD病和相关病症的新的组合物和方法。更具体而言，本发明涉及用于治疗阿尔茨海默病或相关病症的组合物，其包括选自下列至少两种化合物的组合氨基己酸、阿坎酸盐、氨氯地平、阿加曲班、巴氯芬、西洛他唑、西那卡塞、氯吡格雷、二羟丙茶碱、非诺多泮、来氟米特、米帕林、甲巯咪唑、苯乙双胍、丙胺卡因、利福布汀、磺胺异噁唑、他达拉非、特比萘芬、桂利嗪、环匹罗司、依普利酮、甘珀酸、舒洛地特、乙胺嗪(carbamazine)、异戊巴比妥、头孢替坦、丁四硝酯、甲氯噻嗪、利塞膦酸盐、恩丙茶碱、胆茶碱、甲乙双酮、头孢甲肟、安搏律定、依托咪酯、米格列奈、贝尼地平、左西孟旦和唑尼沙胺、或者其盐或药物前体或衍生物或缓释制剂。本发明的另一个目的涉及用于同时、分别或顺序给药的组合物，其包括选自下列至少两种化合物的组合氨基己酸、阿坎酸盐、氨氯地平、阿加曲班、巴氯芬、西洛他唑、西那卡塞、氯吡格雷、二羟丙茶碱、非诺多泮、来氟米特、米帕林、甲巯咪唑、苯乙双胍、丙胺卡因、利福布汀、磺胺异噁唑、他达拉非、特比萘芬、桂利嗪、环匹罗司、依普利酮、甘珀酸、舒洛地特、乙胺嗪、异戊巴比妥、头孢替坦、丁四硝酯、甲氯噻嗪、利塞膦酸盐、恩丙茶碱、胆茶碱、甲乙双酮、头孢甲肟、安搏律定、依托咪酯、米格列奈、贝尼地平、左西孟旦和唑尼沙胺、或者其盐或药物前体或衍生物或缓释制剂。最优选的药物组合包括2、3、4或5种不同的药物，进而更优选2或3种。此外，以上药物组合还可以用于与目前被用于AD的其他药物或治疗进一步组合。本发明还涉及治疗阿尔茨海默病或相关病症的方法，该方法包括对有需要的对象同时、分别或顺序施用上面所公开的药物组合。本发明的另一目的是治疗阿尔茨海默病或相关病症的方法，该方法包括对有需要的对象同时、分别或顺序施用调节突触功能的药物组合和/或调节血管生成的药物和/或调节细胞应激反应的药物。本发明的另一目的在于制备用于治疗阿尔茨海默病或相关病症的药物的方法，该方法包括检测候选药物对于突触功能和血管生成以及细胞应激反应的活性和选择改善突触功能、减轻血管生成调节异常和调节细胞应激反应的候选药物的步骤。本发明还涉及制备用于治疗阿尔茨海默病或相关病症的组合物的方法，该方法包括制备调节突触功能的药物和/或减轻血管生成调节异常的药物和/或调节细胞应激反应的药物的组合，用于向有需要的对象同时、分别或顺序给药。附图简述图I:在β -淀粉样蛋白中毒的大鼠原代皮质神经元培养物中所选药物对轴突生长的影响。令令P〈0. 01 ;令令令令:ρ〈0. 00001 :与介质差异显著。* ρ<0. 05 ;林林ρ<0. 0001 与A β 25-35差异显著。双侧student’st检验。20 μ M A β 25_35产生显著中毒，比用介质处理的神经元高25%。阿坎酸盐(
图1Α)或唑尼沙胺(图1Β)显著阻止这种中毒。图2:在β -淀粉样蛋白中毒的大鼠原代皮质神经元培养物中苯乙双胍对轴突生长的影响Hp〈0. 01 :与介质差异显著。** :p〈0. 001 :与Αβ 25-35差异显著。双侧student’st检验。20μΜ A β25_35产生显著中毒，比用介质处理的神经元高25%。苯乙双胍显著阻止这种中毒。图3 :所选药物对于β -淀粉样肽对从大鼠脑内皮细胞释放LDH的毒性的保护作用。Φ: Ρ〈0· 05:与介质差异显著。** p<0. 01 ;*** ρ<0. 0001 ;林林ρ<0. 00001 与Αβ25_35差异显著。双侧student’ s t检验。30 μ M A β 25_35产生中度但显著的中毒(图3Α至D)。来氟米特(图3Α)、特比萘芬(图3Β)、磺胺异噁唑(图3C)或巴氯芬(-)(图3D)显著阻止这种中毒。此外，来氟米特和特比萘芬不仅阻止淀粉样损害作用，而且也减少培养基中的自发性细胞死亡。图4 :在β -淀粉样蛋白中毒的中毒后，所选药物对NGF所分化的PC12的存活率的影响。令令令φ:Ρ〈0. 00001 :与介质差异显著。**巾〈0.01;***: 〈0.0001:与六3 25-35差异显著。双侧student’ s t检验。10 μ MA β 25_35产生显著中毒，比用介质处理的神经兀 高25% (图4Α和4Β)。丙胺卡因(Prilocain) (Fig4A)或氨氯地平(Fig4B)显著阻止这种中毒。图5:在β -淀粉样蛋白中毒的大鼠原代皮质神经元培养物中，所选药物对于LDH释放的影响。⑩w:p〈0. 000001 :与介质差异显著。* p<0. 05 p<0. 001 :与八325_35差异显著。双侧student’s t检验。20 μ M A β 25_35产生显著中毒，比用介质处理的神经兀高25%。(图5Α和B)。唑尼沙胺(图5Α)或磺胺异噁唑(图5Β)或来氟米特(图5C)显著阻止这种中毒。图6 :在HBMEC中所选药物预处理对人A β ^42损伤的影响。Α)用于药物筛选的实验模型的验证10nm VEGF预处理I小时显著保护毛细血管网免受这种淀粉样损伤(与淀粉样中毒相比+78%毛细血管网)。* :ρ〈0. 05 :与对照(没有中毒)差异显著。令ρ〈0· 05 :与淀粉样中毒差异显著(ANOVA+Dunett Post-Hoc检验)。如图6B、图6C、图6D、图6E、图6F、图6G、图6H中的剂量-响应实验分别所示，磺胺异噁唑、左西孟旦、特比萘芬、巴氯芬、氨基己酸、舒洛地特或非诺多泮显著阻止该中毒。φΡ<0. 05 :与下一剂量差异显著。* ρ<0. 05 与淀粉样中毒差异显著(ANOVA+Dunett Post-Hoc检验)。图7 :在人Αβ卜42对大鼠原代皮质细胞的毒性中，所选药物预处理对LDH释放的影响。A)用于药物筛选的实验模型的验证BDNF (50ng/ml)预处理I小时显著保护神经元免受该淀粉样损伤(-62%)，其被作为神经保护的阳性对照。* p<0. 05 :与对照(没有中毒)差异显著。 : p〈0. 05 :与淀粉样中毒差异显著(ANOVA+Dunett Post-Hoc检验)。对于所有实验，与用介质处理的神经元相比，八^_42产生显著中毒。巴氯芬(-86%) (B)、磺胺异噁唑(-42%) (C)、左西孟旦(-133%) (D)、依托咪酯(-50%) (E)、甘珀酸(-39%) (F)和桂利嗪(-50%) (G)显著阻止这种中毒。对于所有实验，Φ:ρ〈0.05 :与Ai^_42中毒差异显著(ANOVA+Dunett Post-Hoc 检验)。图8 :在β -淀粉样蛋白中毒的HBMEC培养物中，磺胺异噁唑和左西孟旦组合治疗对毛细血管网总长度的影响。φ: ρ〈0. 05,与Αβ卜42差异显著。* :ρ〈0. 05与介质差异显著。ANOVA+Dunett Post-Hoc检验。聚集的人淀粉样肽(2. 5 μ M Αβ卜42)产生显著中毒，比用介质处理的神经元高40%。磺胺异噁唑和左西孟旦的组合显著阻止这种中毒(Α)，而在那些浓度下，左西孟旦(B)和磺胺异噁唑(C)单独使用对中毒没有显著影响。图9 :在β -淀粉样蛋白中毒的HBMEC培养物中，磺胺异噁唑和特比萘芬组合治疗对毛细血管网总长度的影响。#:p〈0. 05,与Αβ卜42差异显著。* :ρ〈0. 05,与介质差异显著。ANOVA+Dunett Post-Hoc检验。聚集的人淀粉样肽(2. 5 μ M Αβ卜42)产生显著中毒，比用介质处理的神经元高40%。磺胺异噁唑和左西孟旦的组合显著阻止这种中毒(Α)，而在那些浓度下，磺胺异噁唑(B)和特比萘芬(C)单独使用对中毒没有显著影响。图10 :在β -淀粉 样蛋白中毒的HBMEC培养物中，巴氯芬和左西孟旦组合治疗对毛细血管网总长度的影响。ρ〈0. 05,与Αβ卜42差异显著。* :ρ〈0. 05,与介质差异显著。ANOVA+Dunett Post-Hoc检验。聚集的人淀粉样肽(2. 5 μ M Αβ卜42)产生显著中毒，比用介质处理的神经元高40%。巴氯芬和左西孟旦的组合显著阻止这种中毒(Α)，而在那些浓度下，左西孟旦(B)和巴氯芬(C)单独使用对中毒没有显著影响。图11 :在β-淀粉样蛋白中毒的HBMEC培养物中，特比萘芬和氨基己酸组合治疗对毛细血管网总长度的影响。φ Ρ〈0. 05,与Αβ卜42差异显著。* :ρ〈0. 05,与介质差异显著。ANOVA+Dunett Post-Hoc检验。聚集的人淀粉样肽(2. 5 μ M Αβ卜42)产生显著中毒，比用介质处理的神经元高40%。特比萘芬和氨基己酸的组合显著阻止这种中毒(Α)，而在那些浓度下，氨基己酸(B)和特比萘芬(C)单独使用对中毒没有显著影响。图12 :在β -淀粉样蛋白中毒的HBMEC培养物中，氨基己酸和左西孟旦组合治疗对毛细血管网总长度的影响。# Ρ〈0. 05,与Αβ卜42差异显著。* :ρ〈0. 05,与介质差异显著。ANOVA+Dunett Post-Hoc检验。聚集的人淀粉样肽(2. 5 μ M Αβ卜42)产生显著中毒，比用介质处理的神经元高40%。左西孟旦和氨基己酸的组合显著阻止这种中毒(Α)，而在那些浓度下，氨基己酸(B)和左西孟旦(C)单独使用对中毒没有显著影响。图13 :在β -淀粉样蛋白中毒的HBMEC培养物中，特比萘芬和左西孟旦组合治疗对毛细血管网总长度的影响。#:ρ〈0. 05,与Αβ卜42差异显著。* :ρ〈0. 05,与介质差异显著。ANOVA+Dunett Post-Hoc检验。聚集的人淀粉样肽(2. 5 μ M Αβ卜42)产生显著中毒，比用介质处理的神经元高40%。特比萘芬和氨基己酸的组合显著阻止这种中毒(Α)，而在那些浓度下，特比萘芬(B)和左西孟旦(C)单独使用对中毒没有显著影响。发明详述本发明提供治疗AD和相关病症的新疗法。本发明公开了药物或药物组合的新用途，其允许有效矫治这些疾病并可以用于患者治疗。术语“AD相关病症”包括AD型老年痴呆(SDAT)、帕金森病、路易体痴呆、血管性痴呆、轻度认知损伤(MCI)、年龄相关记忆损伤(AAMI)和与衰老有关的问题、脑炎后帕金森综合症、肌萎缩性侧索硬化(ALS)、多发性硬化(MS)和唐氏综合症。如本文所用，病症的“治疗”包括由病症引发的症状的治疗、阻止、预防、延迟或减少。术语治疗具体包括控制疾病发展和相关症状。术语“改善”，当涉及突触功能时，包括与对象的现有功能相比突触功能的任何提高。这样的改善可以包括恢复、即达到正常水平，或者较低的但仍足以改善患者状况的提高。如在实验部分中所描述的，这样的改善可以使用已知的生物学检验评估或验证。术语“增加”，当涉及血管生成时，包括与对象的现有水平相比血管生成的任何增力口。这样的改善可以包括包括恢复、即达到正常水平，或者较低的但仍足以改善患者状况的增加。如在实验部分中所描述的，这样的改善可以使用已知的生物学检验评估或验证。术语“抑制”，当涉及细胞应激反应(“CSR”)时，包括与对象的现有活性相比CSR的任何减少。这样的减少包括足以改善患者状况的部分减少、如5-20%,以及更大量的减少，如20-50%或更完全的抑制，如50%以上。如在实验部分中所描述的，这样的抑制可以使用已知的生物学检验评估或验证。此外，在本发明的情形中，具体化合物的指定意在不仅包括具体指出的分子，而且也包括其任何纯度的药用可接受的盐、水合物、酯、醚、异构体、外消旋体、结合物或前体药物。
术语“组合或组合治疗/疗法”指向对象共同施用至少两种或更多种药物以产生生物学效应的治疗。在根据本发明的组合治疗中，所述至少两种药物可以一起或分别、同时或顺序施用。此外，所述至少两种药物可以通过不同途径或方案施用。因此，虽然其可以配制在一起，但组合的药物也可以分别配制。如上所述，本发明涉及使用改善突触功能和/或增加血管生成和/或抑制细胞应激反应的特定药物或药物组合，对于有需要的对象治疗阿尔茨海默病和相关病症的组合物和方法。通过全面整合包括描述阿尔茨海默病的不同方面的细胞生物学研究、表达谱实验和遗传关联性研究结果的实验数据，以及细胞信号转导和功能途径中存在的联系，发明人已经发现，突触功能、血管生成和细胞应激反应代表在患有AD的对象中发生改变的重要机制。通过进一步的实验研究，如实施例中所述，发明人已经选出有效改变这些途径且有效改善AD的药物或药物组合。因而这些药物和组合代表治疗AD和相关病症的新方法。用下述标准选择位于所述功能网络中并且牵涉阿尔茨海默病的基因(I)-与作为病因造成阿尔茨海默病的家族性病例的基因(APP、ApoE、早老素、τ蛋白)直接相互作用，(2)-用标准(I)选出的基因的功能性配偶体，(3)-用标准(2)选出的基因的最接近的功能性配偶体。通过该方法，发明人已经确定，负责突触功能、血管生成和细胞应激反应的网络是影响阿尔茨海默病的主要功能性网络。发明人已经更具体地确定，突触丧失是阿尔茨海默病的功能相关标志，其最终导致进行性认知衰退、记忆丧失和痴呆症。重要的是，与在神经原纤维缠结的形成或淀粉样斑块的沉积中所出现的其他AD特异性细胞病变标志相比，突触丧失与阿尔茨海默病状的特征性认知缺损的相关性更好。因此，突触组织和突触塑性代表了在阿尔茨海默病情况下的治疗干预的重要靶点。APP蛋白是由轴突转运并在突触前末梢中加工的，其导致Αβ在突触中高度积累。A β 42的寡聚体以及淀粉样斑块本身对于抑制长期加深来说是重要的，并且是造成AD患者的记忆损伤的主要原因。我们的数据整合过程揭示出一组基因，其牵涉AD中的突触变形，并且在形式上可以分为三个主要的功能组参与突触后致密物(“PSD”)的组织和突触后膜处神经信号正确传递的蛋白质；确保神经递质释放的蛋白质；以及参与轴突生长和突触结构发育成熟的蛋白质。因此，在具体实施方案中，本发明认识到，对于AD的有效治疗，重要的是改善参与突触后致密物的蛋白质的活性。
在我们的分析所鉴别出的基因中，DLG2基因代表特别的目标，其编码MAGUK家族的蛋白质且在成簇的膜结合受体、细胞粘合分子和基于肌动蛋白的细胞骨架之间产生界面(17-18)。发明人已经鉴别出一大族离子型/代谢型谷氨酸和生长因子受体，其与在兴奋性突触处的DLG2蛋白或DLG2/PSD95蛋白复合体直接相互作用，并且因此可以被作为治疗阿尔茨海默病的治疗靶点。·因此，在另一个具体实施方案中，本发明还认识到，对于AD的有效治疗，重要的是改善参与调节突触前膜处神经递质释放的蛋白质的活性。神经递质在突触前质膜的受限的且高度特化的活性区域处的释放由动作电位触发，并且受到电压依赖性钙Cav通道、Maxik/BK通道(大电导钙激活钾通道)和cGMP依赖性PRKG蛋白激酶的组合作用的控制，如我们的分析所表明的，所述因素全部与阿尔茨海默病的发展密切相关。除了这些涉及神经递质释放的功能模块外，发明人已经确定了另外一组蛋白质，其与阿尔茨海默病进程中的突触神经递质失调有关，负责突触小泡(例如，STX2、STXBP6、BIN1、RAB3B、UNC13C和RMS 1/2骨架蛋白)的成熟、停靠和融合。因此，这些功能途径被优先列为治疗阿尔茨海默病的合适的治疗靶点。在另一种具体实施方案中，本发明进一步认识到，对于AD的有效治疗，重要的是改善参与调节轴突生长和导向的蛋白质的活性。参与调节轴突生长和导向的蛋白质允许神经元前体细胞和轴突向适合的目的地迁移，从而确保正确的定位和连接；它们也参与新形成的突触的发育成熟以及AD病中轴突和突触的降解。这些过程对于认知功能的执行发挥了重要作用，并且似乎对Αβ沉积的毒性效应极为易感。轴突生长和导向的连续步骤受到细胞外或膜连接的导蛋白、脑信号蛋白、肝配蛋白、DLL和Slit分子与其各自的功能受体的组合作用的紧密控制，它们中大多数是通过我们的数据挖掘过程揭示出来的。大部分轴突生长受体的激活的功能性结果与其差异性调节小GTPase RhoA, Racl和Cdc42的活性的能力、与主要负责轴突退缩和生长锥萎陷的RhoAGTPase密切相关(19)。这些信号途径已经被认为是治疗阿尔茨海默病的合适的治疗靶点。因此，本发明认识到，对于AD的有效治疗，重要的是通过调节上述靶基因和蛋白质，改善在阿尔茨海默病和其他神经发生障碍中所改变的突触功能。通过数据挖掘过程，发明人也已经确定，负责血管生成的网络代表在阿尔茨海默病中被影响的另一主要功能网络。血管生成在确保组织稳态和对环境和生理挑战、如缺氧或伤口愈合的适应性响应中发挥了重要作用；其功能障碍促成从心血管并发症到肿瘤生长和转移的众多和不同病变的发病机理。虽然阿尔茨海默病传统上被认为是伴随侧枝血管病变的神经退行性病症，但我们的分析允许重新评定血管失调的发病机理影响，并认为血管生成途径在这种疾病的病因中有重要的且可能为病因性的作用。发明人已经发现调节血管生成的基因在牵涉阿尔茨海默病的信号网络中极度富集。这一结论对于预防和治疗阿尔茨海默病具有深远意义，并为这种复杂的神经退行性疾病的组合治疗提供了新的指导方针。在密切牵涉与阿尔茨海默病有关的血管重塑的信号途径中，已经鉴别出由VEGFR1、ErbB4、Notch、DCC, CD44、肝配蛋白受体和钙粘蛋白所介导的若干功能模块。
如我们的数据挖掘过程所揭示的，可能参与形成在阿尔茨海默病中所出现的血管缺陷的其他靶蛋白包括IL20R、LEPTR、NRP1与NRP2、以及内皮素EDNRA受体、参与胞外基质的组织和重塑的蛋白质(THBS2、LAMAl、C0L4A2、ADAMTS12和ADAMlO )或者在诸如催乳素、生长激素和胎盘催乳素等公知的血管生成调节因子的功能加工中发挥重要作用的蛋白质(例如 TLL2) (20)。此外，我们还发现了，与阿尔茨海默病有关的若干基因代表被AMP激活的激酶的上游调节因子和下游效应子、血管系统的重要调节子(例如，瘦素和CNTF受体、凝血酶信号途径、CAMKK2 0和LKBl激酶)(21-24)。这一发现允许我们将AMPK介导的信号网络确定为治疗阿尔茨海默病的合理治疗靶点。磷脂酸(PA)、溶血磷脂酸(LPA)和鞘氨醇1_磷酸(SlP)是具有强信号特点的天然磷脂。值得注意的是，这些磷脂生长因子对于内皮细胞的血管生成潜力显示出不同作用 (25)。利用我们的数据挖掘过程，我们鉴别出了参与LPA代谢或通过LPA信号进行调节并且与阿尔茨海默病的发展潜在相关的许多基因(MTR、MAT2B、CUBN、ATP10A、THEM2、PITPNC1、ENPPG、SGPP2、AGPAT、DGKH、DGKB、MGST2、PLD2和DRD2)。因此，我们推断该信号网络代表治疗阿尔茨海默病的合适的治疗靶点。本发明还强调了通过调节上述靶基因和蛋白质，增强在阿尔茨海默病和其他神经退行性疾病中被改变的血管生成的重要性。最后，我们已经确定，负责细胞应激反应的网络是在阿尔茨海默病中被影响的第三主要功能网络。我们已经更具体确定，细胞应激反应是阿尔茨海默病的功能相关标志。如上所述，发明人已经在细胞应激反应网络中鉴别出三个蛋白质家族，其与阿尔茨海默病的发生和控制在功能上相关，并且代表组合治疗的有价值的靶点。更具体而言，这些蛋白质组是参与钙稳态、蛋白质折置和执行细胞凋亡的蛋白质。在具体实施方案中，本发明更具体涉及利用调节参与钙稳态的蛋白质的活性的药物组合的组合物和方法。钙是最重要的胞内信使之一，其在神经元和内皮细胞中介导细胞过程的多效性，包括突触可塑性、血管生成和细胞凋亡。胞内钙水平是由质膜和内质网中的一系列钙通透性通道、钙泵和钙交换体的协同作用精确调节的(26-27)。我们已经鉴别出牵涉钙稳态途径的基因网络，其功能可以被突变的早老蛋白或阿尔茨海默病进程中的毒性淀粉样蛋白改变。其中，IP3R (ITPRl)和RYR3受体、在ER水平调节钙稳态的ΑΤΡ2Α3 (SERCA3 Ca2+ATPase)、从真核细胞中逆浓度梯度驱出钙离子的质膜ATPase ATP2B1和电压门控Na+通道代表治疗阿尔茨海默病的潜在治疗靶点的特别目标。在另一个具体实施方案中，本发明更具体涉及利用调节参与蛋白质折叠或聚集的蛋白质的活性的药物组合的组合物和方法。蛋白质聚集是AD的主要细胞病理现象。阿尔茨海默病的两个主要细胞标志出现在神经原纤维缠结(NFTs)的形成和淀粉样斑块的沉积中，其分别由聚集的超磷酸化τ蛋白和APP蛋白的Αβ片段构成。容易聚集的另一个蛋白质——α-突触核蛋白更被认为是帕金森病的特殊标志物，但是，在散发性或家族性形式的阿尔茨海默病的大多数病例中，其可以在淀粉样斑块中被检测出来。我们已经确定牵涉调节折叠、翻译后修饰和阿尔茨海默病相关蛋白聚集体的每个主要成分的加工的若干基因，作为治疗阿尔茨海默病的适当的治疗靶点，一例如与APP相互作用并调节其稳定性和功能的APBAl和APBA2BP蛋白，或者牵涉α -突触核蛋白的清除的PARK2泛素-蛋白连接酶(28)。同样地，在阿尔茨海默病的进程中GSK-3 0激酶可能在蛋白质错折叠的病变中发挥尤其重要的作用。我们的发现，即调节GSK-3 0激酶活性的一些信号模块及其与τ蛋白-WffOX (29)、透明质酸(hyaluronan)CD44受体、Wnt受体Fz2/R0R2和胰岛素受体/PTPRG磷酸酶复合体(30)的相互作用与阿尔茨海默病的进展有关，增强了这一结论。在另一个具体实施方案中，本发明涉及利用抑制细胞凋亡的药物组合的组合物和方法，在阿尔茨海默病中所述细胞凋亡被认为是负责细胞丧失的主要细胞机制。如我们的分析所鉴别出的，阿尔茨海默病情况下的细胞凋亡最有可能是通过典型 的p53依赖性途径而进行的。可以通过翻译后修饰和通过与正和负调节因子的相互作用调控p53蛋白。我们已经鉴别出了若干这样的调节蛋白-WW0X、MDM1、HIPK2和PML，这证实了关于在阿尔茨海默病中P53蛋白在执行细胞死亡中的关键作用的提议(31-33)。在可能直接并具体涉及诱导阿尔茨海默病情况下的细胞凋亡的受体系统中，参与轴突导向和血管生成的UNC5C (Unc-5同系物C)和DCC (在结肠癌中缺失)导蛋白受体代表具体目标。这些受体被认为是推定的条件性肿瘤抑制子，因为，在不存在其配体时，它们作为诱导细胞凋亡的导蛋白依赖性受体起作用(34)。导蛋白-I与这些受体的结合抑制依赖P53的细胞凋亡，而p53直接参与导蛋白-I与其受体的转录调节(33)。此外，已知DCC受体是由早老素加工，这表明了其在阿尔茨海默病发展中的重要作用(35)。因此，我们的数据挖掘表明，除了由被破坏的钙稳态和过量ROS生产所激发的更为非特异性的促凋亡程序夕卜，导蛋白受体依赖性和P53介导的程序性细胞死亡也可能是牵涉阿尔茨海默病情况下的病理性细胞丧失的特异性促凋亡途径之一。在具体实施方案中，本发明更具体涉及利用抑制参与钙稳态、蛋白质折叠和执行细胞凋亡的至少两种不同蛋白质的活性的药物组合的组合物和方法。在优选的实施方案中，本发明提出了新的组合物，其通过调节上述靶基因和蛋白质，可以用于抑制阿尔茨海默病和其他神经退行性疾病中所引发的细胞应激反应。如上所述，本发明涉及对于有需要的对象治疗阿尔茨海默病或相关病症的组合物和方法，其利用改善突触功能和/或增加血管生成和/或抑制细胞应激反应的药物的组合。更具体地，发明人已经选出并检验了许多改变一种或者优选全部上述途径的药物或药物组合。如实施例中所公开的，这些药物组合对于阿尔茨海默病具有强烈作用，并且代表该病的新疗法。这些药物组合尤其有利，因为它们影响不同的途径并因而更加有效。此夕卜，由于其有效性和作用模式，可以低剂量使用该药物组合，这是另一个非常重要的优势。以下表I中列出了最优选的药物。表I
权利要求
1.用于治疗阿尔茨海默病(AD)或相关病症的组合物，其至少包括氨基己酸或左西孟旦、或者其盐或药物前体或衍生物或缓释制剂。
2.权利要求I的组合物，其包括氨基己酸和选自阿坎酸盐、氨氯地平、阿加曲班、巴氯芬、西洛他唑、西那卡塞、氯吡格雷、二羟丙茶碱、非诺多泮、来氟米特、米帕林、甲巯咪唑、苯乙双胍、丙胺卡因、利福布汀、磺胺异噁唑、他达拉非、特比萘芬、桂利嗪、环匹罗司、依普利酮、甘珀酸、舒洛地特、乙胺嗪、异戊巴比妥、头孢替坦、丁四硝酯、甲氯噻嗪、利塞膦酸盐、恩丙茶碱、胆茶碱、甲乙双酮、头孢甲肟、安搏律定、依托咪酯、米格列奈、贝尼地平、左西孟旦和唑尼沙胺的至少一种其它化合物、或者其盐或药物前体或衍生物或缓释制剂，用于合并、分别或顺序给药。
3.权利要求2的组合物，其中所述组合物包括氨基己酸、或者其盐或药物前体或衍生物或缓释制剂，和选自巴氯芬、磺胺异噁唑、特比萘芬和左西孟旦的至少一种其它化合物、或者其盐或药物前体或衍生物或缓释制剂，用于合并、分别或顺序给药。
4.权利要求I的组合物，其包括左西孟旦、或者其盐或药物前体或衍生物或缓释制剂。在具体的实施方案中，以及选自氨基己酸、阿坎酸盐、氨氯地平、阿加曲班、巴氯芬、西洛他唑、西那卡塞、氯吡格雷、二羟丙茶碱、非诺多泮、来氟米特、米帕林、甲巯咪唑、苯乙双胍、丙胺卡因、利福布汀、磺胺异噁唑、他达拉非、特比萘芬、桂利嗪、依普利酮、甘珀酸、舒洛地特、乙胺嗪、环匹罗司、异戊巴比妥、头孢替坦、丁四硝酯、甲氯噻嗪、利塞膦酸盐、恩丙茶碱、胆茶碱、甲乙双酮、头孢甲肟、安搏律定、依托咪酯、米格列奈、贝尼地平和唑尼沙胺的至少一种其它化合物、或者其盐或药物前体或衍生物或缓释制剂，用于合并、分别或顺序给药。
5.权利要求4的组合物，其中所述组合物包括左西孟旦、或者其盐或药物前体或衍生物或缓释制剂，和选自氨基己酸、巴氯芬、磺胺异噁唑、特比萘芬的至少一种其它化合物、和、或者其盐或药物前体或衍生物或缓释制剂，用于合并、分别或顺序给药。
6.用于治疗阿尔茨海默病(AD)或相关病症的组合物，其至少包括依普利酮、甘珀酸、舒洛地特、桂利嗪或乙胺嗪、或者其盐或药物前体或衍生物或缓释制剂。
7.一种组合物，其包括选自阿坎酸盐、氨基己酸、氨氯地平、阿加曲班、巴氯芬、西洛他唑、西那卡塞、氯吡格雷、二羟丙茶碱、非诺多泮、来氟米特、米帕林、甲巯咪唑、苯乙双胍、丙胺卡因、利福布汀、磺胺异噁唑、他达拉非、特比萘芬、桂利嗪、环匹罗司、依普利酮、甘珀酸、舒洛地特、乙胺嗪、异戊巴比妥、头孢替坦、丁四硝酯、甲氯噻嗪、利塞膦酸盐、恩丙茶碱、胆茶碱、甲乙双酮、头孢甲肟、安搏律定、依托咪酯、米格列奈、贝尼地平、左西孟旦和唑尼沙胺的至少两种化合物、或者其盐或药物前体或衍生物或缓释制剂的组合，供用于治疗阿尔茨海默病(AD)或相关病症。
8.权利要求7的组合物，其包括选自氨基己酸、桂利嗪、环匹罗司、依普利酮、甘珀酸、舒洛地特、乙胺嗪、异戊巴比妥、头孢替坦、丁四硝酯、甲氯噻嗪、利塞膦酸盐、恩丙茶碱、胆茶碱、甲乙双酮、头孢甲肟、安搏律定、依托咪酯、米格列奈、贝尼地平和左西孟旦的至少一种化合物、或者其盐或药物前体或衍生物或缓释制剂，与选自阿坎酸盐、氨氯地平、阿加曲班、巴氯芬、西洛他唑、西那卡塞、氯吡格雷、二羟丙茶碱、非诺多泮、来氟米特、米帕林、甲巯咪唑、苯乙双胍、丙胺卡因、利福布汀、磺胺异噁唑、他达拉非、特比萘芬和唑尼沙胺的至少一种化合物、或者其盐或药物前体或衍生物或缓释制剂的组合，供用于治疗阿尔茨海默病或相关病症。
9.一种组合物，其包括选自氨基己酸、阿坎酸盐、氨氯地平、阿加曲班、巴氯芬、西洛他唑、西那卡塞、氯吡格雷、二羟丙茶碱、非诺多泮、来氟米特、米帕林、甲巯咪唑、苯乙双胍、丙胺卡因、利福布汀、磺胺异噁唑、他达拉非、特比萘芬、桂利嗪、环匹罗司、依普利酮、甘珀酸、舒洛地特、乙胺嗪、异戊巴比妥、头孢替坦、丁四硝酯、甲氯噻嗪、利塞膦酸盐、恩丙茶碱、胆茶碱、甲乙双酮、头孢甲肟、安搏律定、依托咪酯、米格列奈、贝尼地平、左西孟旦和唑尼沙胺的至少两种化合物、或者其盐或药物前体或衍生物或缓释制剂的组合，用于同时、分别或顺序给药。
10.权利要求9的组合物，其包括选自氨基己酸、桂利嗪、环匹罗司、依普利酮、甘珀酸、舒洛地特、乙胺嗪、异戊巴比妥、头孢替坦、丁四硝酯、甲氯噻嗪、利塞膦酸盐、恩丙茶碱、胆茶碱、甲乙双酮、头孢甲肟、安搏律定、依托咪酯、米格列奈、贝尼地平、托拉塞米和左西孟旦的至少一种化合物、或者其盐或药物前体或衍生物或缓释制剂，与选自阿坎酸盐、氨氯地平、阿加曲班、巴氯芬、西洛他唑、西那卡塞、氯吡格雷、二羟丙茶碱、非诺多泮、来氟米特、米帕林、甲巯咪唑、苯乙双胍、丙胺卡因、利福布汀、磺胺异噁唑、他达拉非、特比萘芬和唑尼沙胺的至少一种化合物、或者其盐或药物前体或衍生物或缓释制剂的组合，用于同时、分别或顺序给药。
11.以上权利要求中任一项的组合物,其中所述组合物包括以下药物组合中的至少一种，每个组合中的药物用于合并、分别或顺序给药 -苯乙双胍和唑尼沙胺， -苯乙双胍和阿坎酸盐， -苯乙双胍和磺胺异噁唑， -巴氯芬和氨基己酸， -巴氯芬和左西孟旦， -巴氯芬和特比萘芬， -巴氯芬和磺胺异噁唑， -巴氯芬和唑尼沙胺， -巴氯芬和磺胺异噁唑， -巴氯芬和来氟米特， -氨基己酸和磺胺异噁唑， -氨基己酸和特比萘芬， -氨基己酸和左西孟旦， -左西孟旦和磺胺异噁唑， -左西孟旦和特比萘芬， -唑尼沙胺和二羟丙茶碱， -唑尼沙胺和丙胺卡因， -唑尼沙胺和磺胺异噁唑， -特比萘芬和磺胺异噁唑， -特比萘芬和米帕林， -阿坎酸盐和特比萘芬， -特比萘芬和利福布汀，-苯乙双胍和他达拉非， -唑尼沙胺和阿加曲班， -苯乙双胍和氯吡格雷， -阿坎酸盐和西那卡塞， -磺胺异噁唑和西那卡塞， -特比萘芬和阿加曲班， -巴氯芬和氯吡格雷， -特比萘芬和氯吡格雷， -唑尼沙胺和桂利嗪， -阿坎酸盐和桂利嗪， -唑尼沙胺和环匹罗司， -阿坎酸盐和环匹罗司， -磺胺异噁唑和异戊巴比妥， -唑尼沙胺和异戊巴比妥， -磺胺异噁唑和头孢替坦， -唑尼沙胺和头孢替坦， -阿坎酸盐和丁四硝酯， -唑尼沙胺和丁四硝酯， -磺胺异噁唑和丁四硝酯， -米格列奈或左西孟旦和丁四硝酯， -米格列奈或左西孟旦和唑尼沙胺， -米格列奈或左西孟旦和特比萘芬。
12.权利要求11的方法,其包括以下药物组合中的至少一种,每个组合中的药物用于合并、分别或顺序给药 -巴氯芬和氨基己酸， -巴氯芬和左西孟旦， -氨基己酸和磺胺异噁唑， -氨基己酸和特比萘芬， -氨基己酸和左西孟旦， -左西孟旦和磺胺异噁唑，或 -左西孟旦和特比萘芬。
13.以上权利要求中任一项的组合物，其还包括选自以下的至少一种药物抑制剂ABAT,(优选氨己烯酸)，和/或抑制剂ABLl (优选伊马替尼)，和/或ACAT的抑制剂(优选橙皮素)，和/或ADCY2的调节剂(优选阿糖腺苷)，和/或腺苷AD0RA1/2A/3受体的调节剂(优选自氯法拉滨和去纤苷酸)，和/或肾上腺素能ADRA受体的调节剂(优选自哌氰嗪、甲氧异丁嗪、美芬丁胺和地匹福林)，和/或肾上腺素能ADRB受体的调节剂(优选自胍乙啶、苄二甲胍、比托特罗和丙卡特罗)，和/或AL0X5/12的抑制剂(优选自二乙基乙胺嗪和马索罗酚)，和/或ATPlAl的抑制剂(优选去乙酰毛花苷和奥美拉唑)，和/或自噬作用的激活剂(优选海藻糖)，和/或CAlO的抑制剂(优选醋甲唑胺)，和/或钙化作用的调节剂(优选自膦甲酸钠、硝酸镓、钙二醇、降钙素、钙三醇、氯瞵酸、二氢速留醇、依降钙素、依替膦酸、伊普黄酮和醋酸特立帕肽)，和/或CALMl的调节剂(钙调素)(优选安搏律定)，和/或CD44的调节剂(优选自依氟鸟氨酸和苯溴马隆)，和/或化学伴侣(优选自阿拉伯糖醇和甘露醇)，和/或毒蕈碱CHRM受体的调节剂(优选自环喷托酯、羟苯环喃、曲司胺和异氟磷)，和/或不能穿过血脑屏障的烟碱乙酰胆碱CHRNA受体的拮抗剂(优选自泮库溴铵、哌库溴铵、瑞库溴铵、罗库溴铵、琥珀胆碱、维库溴胺、阿曲库铵、顺阿曲库铵、杜什库铵、美加明、美多寇林、美维库铵和新霉素)，和/或CNGB3的抑制剂(优选阿米洛利)，和/或CYSLTR1/2、PTGERl、PTGFR和TBXA2R类十二烷酸受体的调节剂(优选自曲伏前列素、孟鲁司特、西路斯特、氨来咕诺、卡前列素氨基丁三醇、比马前列素和利多瑞尔)，和/或DHFR的抑制剂(优选乙胺嘧啶和三氨蝶呤)，和/或多巴胺DRD2受体的调节剂(优选选自双氢麦角胺和卡麦角林)，和/或多巴胺受体DRD5的激动剂(优选非诺多泮)，和/或EDNRA的抑制剂(优选自磺胺甲恶唑和庆大霉素)，和/或ENPP2 (自分泌运动因子)的调节剂(优选L-组氨酸)，和/或ERBB2的抑制剂(优选 拉帕替尼)，和/或F2凝血酶的调节剂(优选自舒洛地特、希美加曲、华法林、苯丙香豆醇、依诺肝素、阿他肝素、磺达肝癸、拉氧头孢、杆菌肽、噻氯匹定和厄多司坦)，和/或FDPS的抑制剂(优选阿仑唑奈)，和/或GABRA2的调节剂(优选自苯巴比妥、美索比妥、头孢替安、氯美噻唑、硫喷妥、鲁比前列酮和氨曲南)，和/或GRIKl的拮抗剂(优选托吡酯)，和/或GSK3B活性的调节剂(优选自沙丁胺醇和间羟胺)，和/或HIFlA信号的调节剂(优选自美洛昔康、托泊替康、去铁胺、地衣酸、肼苯哒嗪、去铁酮、二苯甲酰甲烷、阿伏苯宗、地诺前列酮、依前列醇、2_酮戊二酸和含羞草碱)，和/或HK2 (己糖激酶II)的抑制剂(优选自奎宁、加贝酯、联苯苄唑和克霉唑)，和/或HMOXl的调节剂(优选自金诺芬、血色素/血晶质和精氨酸血红素)，和/或HTR1B/1D受体的调节剂(优选自麦角胺和依立曲坦)，和/或MPDHl和MPDH2的抑制剂(优选硫鸟嘌呤)，和/或整合素ITGA/B的调节剂(优选雷贝拉唑)，和/或KCND2钾通道的抑制剂(优选利多卡因)，和/或KCNH2钾通道的抑制剂(优选伊布利特)，和/或KCNMAl的调节剂(优选自色甘酸盐、炔己蚁胺、托康唑、氯唑沙宗、乌诺前列酮、橙皮素、苄氟噻嗪、苯噻嗪、氯噻嗪、环噻嗪、氯甲苯噻嗪、氢氟甲噻、喹乙宗和三氯甲噻嗪)，和/或MGST2的调节剂(优选巴柳氮)，和/或MMP2和MMP9的调节剂(优选坎沙曲)，和/或线粒体通透性转换孔形成的调节剂(优选自甘珀酸和环丙沙星)，和/或MTOR的抑制剂(优选雷帕霉素)，和/或N0S1/2A/3的调节剂(优选自丙基硫尿嘧啶、硫乙拉嗪和酮替芬)，和/或NR3C1受体信号的调节剂(优选自甲吡酮和莫米松)，和/或NR3C2受体的调节剂(优选自依普利酮和氟氢可的松)，和/或NRP2的抑制剂(优选哌加他尼)，和/或OPCML的调节剂(优选阿芬太尼)，和/或OPRKl和OPRSl的调节剂(优选自丁丙诺啡和戊唑辛)，和/或OPRM (优选烯丙左吗喃)，和/或氧化磷酸化作用的调节剂(优选自阿米三嗪、红霉素、卡那霉素和浅蓝菌素)，和/或P2RY1和/或P2RY12受体的抑制剂(优选替罗非班)，和/或I3DEl 1A、PDE4A和PDE5A磷酸二酯酶的抑制剂(优选自松叶菊碱、米利酮和阿那格雷)，和/或TOE3A/3B和PDE4A/4B磷酸二酯酶的抑制剂和BK通道的激活剂(优选西洛他唑)，和/或H)GFRA/B受体的调节剂(优选自贝卡普勒明、链霉素、花翠素、花青素和烟曲霉素)，和/或PLA2的调节剂(优选自尼氟酸、氢可他酯和奈替米星)，和/或PLAT的调节剂(优选苯丁酸钠)，和/或PLD2的调节剂(优选安立生坦)，和/或PLG的抑制剂(优选氨基己酸)，和/或PPARD的调节剂(优选二十碳五烯酸)，和/或PPARG的调节剂(优选丁酸苯酯)，和/或PRKGl的调节剂(优选自硝普盐、硝化甘油和帕立骨化醇)，和/或PTPlB的抑制剂(优选替鲁膦酸盐)，和/或RHOA/RAC的调节剂(优选自氯噻酮、氢氯噻嗪、氯莫环素、赖甲环素、游霉素、两性霉素B、头孢氨苄、头孢噻啶、头孢呋辛、双氯西林)，和/或RXR/RAR的调节剂(优选他佐罗汀)，和/或SCN1A/B钠通道的拮抗剂(优选磷苯妥英)，和/或SLC12A1的抑制剂(优选布美他尼)，和/或SLC6A1的抑制剂(优选噻加宾)，和/或SLC9A1的调节剂(优选布克利嗪)，和/或SRD5A1的抑制剂(优选度他雄胺)，和/或TACRl的拮抗剂(优选自阿瑞吡坦和伐普肽)，和/或TGFB信号的调节剂(优选阿利吉仑)，和/或THRA/B的调节剂(优选自碘塞罗宁)，和/或T0P2A的抑制剂(优选硫蒽酮)，和/或TSPO的调节剂(优选自氟硝基安定和羟基安定)，和/或VDACl的调节剂(优选二羟基铝)，和/或VEGFRl的抑制剂(优选苏尼替尼)，和/或维生素K代谢的调节剂(优选自头孢美唑、头孢孟多和头孢哌酮)，和/或VMAT的抑制剂(优选选自四苯喹嗪、地舍平和尼替西农)，和/或电压门控钙通道(CACNA)的抑制剂(优选自乐卡地平、普加巴林、米拉地尔、阿雷地平、巴米地平、苄环烷、苄普地尔、克仑硫卓、依福地平、依高地平、依他苯酮、芬地林、氟桂嗪、加洛帕米、依拉地平、拉西地平、利多氟嗪、洛美利嗪、马尼地平、尼卡地平、尼伐地平、尼莫地平、尼索地平、尼群地平、哌克昔林、普尼拉明、司莫第尔和特罗地林)，和/或YES I、SRC和EPHA3的抑制剂(优选达沙替尼)。
14.以上权利要求中任一项的组合物，其包括可药用的载体或赋形剂。
15.以上权利要求中任一项的组合物，其中所述组合物反复向患者给药。
16.制备用于治疗阿尔茨海默病或相关病症的药物的方法，所述方法包括以下步骤检测候选药物对于突触功能和血管生成以及细胞应激反应的活性，并且选择改善突触功能、减轻血管生成调节异常和调节细胞应激反应的候选药物。
17.制备用于治疗阿尔茨海默病或相关病症的组合物的方法，所述方法包括制备调节突触功能的药物和减轻血管生成调节异常的药物以及调节细胞应激反应的药物的组合，用于向有需要的对象同时、分别或顺序给药。
18.治疗阿尔茨海默病或相关病症的方法，所述方法包括向有需要的对象同时、分别或顺序施用调节突触功能的药物和调节血管生成的药物以及调节细胞应激反应的药物。
19.对有需要的哺乳动物对象治疗阿尔茨海默病的方法，所述方法包括向所述对象施用有效量的氨基己酸或左西孟旦、其盐、前体药物、衍生物或缓释制剂。
全文摘要
本发明涉及用于治疗阿尔茨海默病及相关病症的组合物和方法。更具体地，本发明涉及阿尔茨海默病及相关病症的新的组合疗法。本发明具体涉及单独或者组合起来可以有效调节突触功能和/或血管生成和/或细胞应激反应的化合物。本发明还涉及制备用于治疗阿尔茨海默病的药物或药物组合的方法和治疗阿尔茨海默病或其相关病症的方法。
文档编号A61K31/4985GK102834095SQ201080060454
公开日2012年12月19日 申请日期2010年10月29日 优先权日2009年11月3日
发明者丹尼尔·科亨, 伊亚·楚马科夫, 谢尔盖·纳比罗钦 申请人:法奈科斯公司