用于改善胃肠功能的材料和方法

专利名称：用于改善胃肠功能的材料和方法
用于改善胃肠功能的材料和方法
相关申请的交叉引用
本申请要求2010年9月24日提交的序列号为61/386，317之美国临时申请和2011年I月11日提交的序列号61/431，629之美国临时申请的优先权，其通过引用整体并入本文。
政府支持
本发明在由美国国立卫生研究院(NIH)授予的基金N。.RC2-A1-087580的政府支持下完成。政府享有本发明的某些权利。
背景技术：
辐射(radiation)是用于腹部和骨盆中恶性肿瘤的常用治疗，它可对由快速分裂的肠上皮细胞构成的胃肠(GI)道衬里(lining)造成严重损伤。辐射对胃肠系统的毒性作用引起症状如恶心、呕吐、腹湾、电解质失衡(electrolyte imbalance)和脱水,并且不利地影响患者在癌症治疗过程中的恢复。即便在低剂量下，辐照(irradiation)后数天内也观察到小肠绒毛和刷状缘的连续损失。虽然隐窝细胞(crypt cell)可在轻度至中度剂量的(辐照)IR之后快速地重新填充(repopulate)该区域，但是它们在高剂量的辐照后变得以对数速度损失。
辐照对发生营养物和电解质吸收的绒毛上皮特别有破坏性。绒毛上皮经历连续的细胞损失和再生过程，其中持续供应的未成熟肠细胞(源自位于利伯屈恩隐窝(crypts ofLieberkuhn)下极(lower pole)内的祖细胞)从隐窝基底部的增殖区室(proliferativecompartment)迁移到达绒毛的顶部。在它们短暂的寿命期间，这些肠细胞沿着隐窝-绒毛轴(crypt-villous axis)逐渐地成熟成为绒毛细胞。对腹部和骨盆区域进行的放射治疗不仅破坏现有的绒毛细胞，而且破坏形成新绒毛细胞的肠细胞，因此，即便在中等剂量下也可耗尽几乎整个绒毛上皮。
由于越来越多地使用高的总放射剂量和细胞毒性剂，放射治疗因其急性GI毒性而复杂化。对GI道的损伤不仅导致营养物和流体的吸收不良和损失，而且破坏肠屏障功能。肠漏(leaky gut)允许病原体容易穿过黏膜屏障而进入，引起炎症、菌血症和内毒素血症。例如，虽然GI毒性通常在较高剂量下发生，但是在辐照后数天内可发生急性放射性肠炎、腹泻和腹痛，即便在低至5 12Gy (辐射的常规分割过程使用每分割1.8 2Gy)的剂量下也是如此。慢性放射性肠炎可在放射治疗后的18个月至6年中发生，但它也可在甚至15年后发生27_29。
放射性肠炎的治疗选择是有限的。常规治疗方案包括:施用止泄剂以防止流体损失；施用蒙脱石(smectite)作为胆盐的吸附剂；施用阿片样物质以减轻胃痛或直肠痛，以及施用类固醇以减轻炎症。临床试验还 研究了嗜酸乳杆菌(L.acidophilus)、蒙脱石或硫糖铝(sucralfate)对腹泻预防的效力，但仅实现了急性GI症状的中度减轻3°。
治疗放射性肠炎的常用方法是使用全肠胃外营养(total parenteralnutrition,TPN)以提供肠休息。但是，仍然需要确定肠胃外营养是否满足患者的营养需求，或者实际上对放射性肠炎是否具有治疗效果。虽然TPN可纠正某些患者中的营养失衡，但是仍可发生严重的放射性肠炎37。TPN还引起肠萎缩，通常在施用的48小时之内。TPN还削弱机械屏障和免疫屏障38。认为在TPN过程中导致黏膜萎缩的准确生物学机制(尚未确立)涉及局部营养-感知细胞信号39和体液信号(例如胃肠激素)4°’41这二者。已显示TPN诱导肠血流量迅速(< 8h)降低(这先于绒毛萎缩)以及在24小时时抑制蛋白质合成和在48小时时抑制细胞增殖和存活42。相反，经口饲喂迅速地提高新生动物和成熟动物中的肠血流量43’44。类似地，在新生小猪中，肠内饲喂(enteral feeding)几乎立即(在I至3小时之内)使门静脉血流量(portal blood flow, PBF)提高至比食物剥夺小猪中的值高50% 45。因此，如多个研究所示，肠内饲喂远优于肠胃外饲喂7’8。目前，缺少可有效地缓解放射性肠炎的营养治疗。虽然早期研究表明，要素饮食(elemental diet)或特定排除饮食(specific exclusion diet)可在选定的情况下有益2’31’32，但是后来，该方法的效力并未得到证实。现有饮食治疗仅为患有慢性放射性肠炎的营养不良患者提供营养支持方法。动物研究证实，谷氨酰胺保护上GI道和下GI道二者的黏膜不受由化学治疗或放射治疗(RT)引起的损伤33_35。但是，临床试验未能示出经口谷氨酰胺饲喂可在接受了骨盆放射治疗的患者中预防或缓解急性腹泻36。因此，需要开发用于治疗辐照诱导之GI损伤的改进的饲喂组合物。如将通过以下公开内容而显而易见的那样，本发明提供了这些和另一些益处。发明概述本发明提供了用于改善小肠功能的治疗组合物和方法。本发明组合物可用于治疗或改善与小肠上皮细胞(特别是在绒毛区和刷状缘中)损失相关的胃肠损伤，和/或用于治疗或改善与小肠的吸收能力改变相关的疾病或病症。有利地，可将本发明治疗组合物定制为适于由小肠上皮细胞的损失和小肠中转运蛋白功能的改变引起的胃肠系统的失衡吸收状态。在一个优选实施方案中，将本发明组合物配制为用于经口施用。在一个实施方案中，治疗组合物包含以下、基本由以下组成或者由以下组成:选自赖氨酸、甘氨酸、苏氨酸、缬氨酸、酪氨酸、天冬氨酸、异亮氨酸、色氨酸、天冬酰胺和丝氨酸中一种或更多种的游离氨基酸；以及任选的可药用载体、电解质、维生素、缓冲剂和矫味剂(flavoring agent)。治疗组合物通过肠内途径施用。在一个实施方案中，组合物的总摩尔渗透压浓度(osmolarity)为约230mosm至280mosm,或者优选为约250mosm至260mosm。在一个实施方案中，组合物的pH为约7.1至7.9，优选为约7.4。在一个具体的实施方案中，本发明的组合物不包含葡萄糖、谷氨酰胺、甲硫氨酸和/或乳糖。还提供了用于治疗或改善与小肠上皮细胞(特别是绒毛区和刷状缘中)损失相关之疾病或症状，和与小肠上皮中转运蛋白功能改变相关之疾病或症状的方法。所述方法包括通过肠内途径向有此治疗需要的对象施用有效量的本发明组合物。优选地，本发明组合物经口施用并且到达对象的肠。本发明还提供了用于制备治疗组合物的方法，和用于通过选择在小肠上皮细胞破坏之后保持或获得相当大吸收能力的营养物或电解质来筛选用于包含到本发明治疗/饮食组合物中的营养物或电解质的方法。这些方法可适用于个体患者，从而有助于开发特别设计以满足个体患者之需要的组合物和方法。
附图简述


图1示出福照(IR)对净阴离子分泌(net anion secretion) (A)和电导(B)的影响。(A).在第1、3和4天研究12Gy IR组织。在第2天见到Is。的最大升高。箭头表示添加毛喉素(forskolin)时的时间点。(B).提高剂量的IR对净阴离子分泌的影响。在第6天研究所有这些组织，且η = 12。结果示出电导的IR剂量依赖性升高。
图2示出随着辐照剂量提高，Is。的变化。所有这些值得自η = 24个组织。在辐照后第4天于常规林格液(Ringer solution)中进行实验，室两侧的总摩尔渗透压浓度为296mosm0组织病理学切片示出，与OGy相比，3Gy时最小的绒毛和隐窝损伤和7Gy时广泛的绒毛和隐窝损伤。
图3A示出以3Gy辐照后，小鼠上皮细胞中的Is。随时间推移的变化。值表示平均值土S.E.Μ，η = 6个组织。在放射后第6天见到Is。的最大升高。第5、6与7天之间未见到显著性差异。随着时间>辐照后7天，与第5、6或7天相比，Is。稍微降低。第5、6和7天的Is。值类似。图3B示出小肠上皮细胞的离子转运。图3C示出布美他尼(bumetanide)对未经辐照的组织和经3Gy辐照的组织中的基础的Is。和cAMP-刺激的Is。的影响。图3D示出HC03_对净阴离子分泌的贡献。其通过用等摩尔量的羟乙基磺酸盐(isethionate)来替换林格液中的Cl—来确定。毛喉素刺激了 OGy ( *:p < 0.02)组织中Is。的升高，但在3Gy组织中并非如此。图3E示出浴(bath)Na+对HC03_分泌的影响。图3所示的所有结果来自η = 6个组织。误差线表示SEM。
图4Α示出IR后血浆内毒素水平的变化。在IR后第6天，测量血浆内毒素水平。图4Β示出针对膜电压变化(稀释电势，dilution potential)绘出的Cl_与Na+之间渗透性比值(permeability ratio)的变化。以7Gy福照导致选择性的完全丧失。
图5示出辐照使炎性介质(包括IL-1 β、TNF α和MIP- α )的水平升高。
图6示出由辐照引起的HC03_分泌的变化和HC03_分泌机制的免疫染色。㈧示出辐照对浴Na+对HCO3-分泌的影响。实验在A)具有140mM Na+的含Cl溶液或B)没有Na+的含Cl溶液中进行。用毛喉素刺激组织。比较经OGy辐照的小鼠和经3Gy辐照的小鼠的HCO3-分泌。与经3Gy辐照的小鼠相比，在经OGy辐照的小鼠中观察到了显著更高的浴Na+依赖性HC03_分泌(P < 0.001)。结果得自η = 6个组织。误差线表示S.Ε.M。(B-E)示出使用NBCela/b抗体，接受了 OGy辐照和3Gy辐照的小鼠的空肠组织的免疫染色。
图7示出葡萄糖转运和动力学的IR剂量依赖性变化。(A)示出辐照导致在尤斯室(Ussing chamber)中测量的葡萄糖刺激的Na+Is。剂量依赖性地降低。(B)示出随着福照剂量提高，葡萄糖的SGLTl亲和力降低。
图8示出从以IGy辐照开始，辐照以剂量依赖的方式降低葡萄糖刺激的电流。以7Gy辐照几乎使葡萄糖转运完全失活。
图9显示短路电流，示出随着葡萄糖浓度之升高的饱和动力学。特别地，葡萄糖转运在浓度为4mM时饱和。图9B示出Km值的辐照剂量依赖性升高。在7Gy时观察到Km的最大升高。这表明辐照引起SGLT-1与葡萄糖的亲和力降低。
图10示出Vmax随辐照剂量升高而降低。在7Gy时观察到Vmax的最小降低。这表明辐照引起用于葡萄糖转运的功能性SGLT-1减少。图11示出Km随辐照后时间推移的变化。Km在辐照后立即升高并在辐照后约14天恢复至正常(对照值)。图12A和B示出9Gy和15.6Gy辐照之后，鼠存活研究的结果。经葡萄糖处理的小鼠在第5和第7天开始发生死亡，而对照小鼠直至辐照后第10天才死亡。在第20天，30%的对照小鼠活着，而经葡萄糖处理的小鼠在第20天均未存活。图13示出全细胞裂解物中SGLT-1蛋白水平的Western印迹分析。结果示出辐照提高了 SGLT-1表达。图14示出空肠组织的刷状缘膜囊中SGLT-1蛋白水平的W6St6rn印迹分析。辐照以剂量依赖的方式提高了 SGLT-1蛋白水平。在结肠组织中未检测到SGLT-1蛋白。图15示出辐照引起谷氨酰胺刺激的Is。剂量依赖性地升高。图16示出辐照引起赖氨酸刺激的Is。剂量依赖性地降低。图17A和B示出IR后赖氨酸(A)或葡萄糖⑶处理之后的小鼠存活率。施用赖氨酸导致升高的存活，而施用葡萄糖导致降低的存活。图18示出多种转运蛋白的Western印迹分析。Western印迹分析示出小鼠空肠中的 NKCCl (A)、CFTR(C)和 NBCel-A/B(B)蛋白水平。从左到右，泳道表示 OGy、lGy、3Gy、5Gy和7Gy。从IGy至5Gy，辐照使NKCCl蛋白水平升高，这样的升高在7Gy时减小(A)。辐照后，NBCel-A/B蛋白水平显著降低。与OGy相比，以3Gy辐照后，空肠组织中CFTR蛋白水平显著升高(C)。与十二指肠、回肠或结肠相比，空肠具有最高的NBCel-A/B蛋白水平(D)。在辐照后第6天收获组织用于Western印迹。图19A和B是cAMP-刺激的⑷和辐照诱导的⑶阴离子分泌的图解模式。图20示出经5-氟尿嘧啶(5-FU)(图20A)和顺钼(图20B)处理的小鼠中小肠黏膜的损伤。(A)示出注射了 5-FU的小鼠中的Isc变化。(B)示出注射了顺钼的小鼠中的Isc变化。图21示出施用本发明的治疗组合物提高了已接受5-FU的小鼠的小肠功能。发明详述本发明提供了用于提高小肠功能的治疗组合物和方法。该组合物被配制为用于经肠施用(enteral administration)。本发明的组合物和方法尤其可用于治疗或改善与小肠上皮细胞(特别是绒毛区和刷状缘中)的损失相关`的胃肠损伤，和/或用于治疗与小肠上皮中转运蛋白功能的改变相关的疾病或病症。有利地，可将本发明治疗组合物定制为适于由小肠上皮细胞(特别是小肠绒毛区和刷状缘中)之损失及转运蛋白功能之改变引起的胃肠系统的失衡吸收状态。特别地，本发明可在有小肠黏膜损伤的患者中改善小肠黏膜愈合、恢复小肠功能、增强液体潴留、预防或缓解小肠萎缩，和/或恢复或增强小肠屏障功能。在一个实施方案中，治疗组合物包含以下、基本由以下组成或者由以下组成:选自赖氨酸、甘氨酸、苏氨酸、缬氨酸、酪氨酸、天冬氨酸、异亮氨酸、色氨酸、天冬酰胺和丝氨酸中的一种或更多种游离氨基酸；以及任选地，可药用载体、电解质、维生素、缓冲剂和矫味齐U。治疗组合物通过经肠途径施用。在一个实施方案中，组合物的总摩尔渗透压浓度为约230mosm至280mosm,或者优选为约250mosm至260mosm。在一个实施方案中，组合物的pH为约4.0至8.5，优选为5.0至8.2，更优选为6.0至8.0，更优选为7.1至7.9，最优选为约7.4。
在一个具体的实施方案中，本发明的组合物不包含葡萄糖、谷氨酰胺、甲硫氨酸和/或乳糖。
还提供了用于治疗或改善与小肠上皮细胞(特别是绒毛区和刷状缘中)损失相关之疾病或病症和与小肠上皮中转运蛋白功能改变相关之疾病或病症的方法。该方法包括通过经肠途径向有此治疗需要的对象施用有效量的本发明组合物。
本发明至少部分地基于这样的发现:在小肠黏膜损伤之后，仅以保持或获得充分吸收能力的营养物向对象进行经肠饲喂改善黏膜愈合、恢复小肠功能、增强流体潴留，以及缓解一系列相关疾病症状，所述症状包括但不限于吸收不良、腹泻、恶心、呕吐、电解质失衡和脱水。
根据本发明，已确定，辐射和化学治疗之后，参照例如葡萄糖、谷氨酰胺和赖氨酸以及电解质(如Na+、HC03_和CD观察到了转运蛋白功能的改变。此外，辐照引起升高的净阴离子分泌。营养物和电解质吸收能力的改变在辐射和化学治疗后立即发生，但吸收能力可恢复至正常(在小鼠模型中，辐照后约8至14天)。
具体地，辐照引起葡萄糖吸收辐照剂量依赖地降低，这是由于钠依赖的葡萄糖转运系统(SGLT-1)对葡萄糖的亲和力下降。对葡萄糖刺激的功能性研究示出，辐照引起葡萄糖转运活性剂量依赖性地下降以及SGLT-1对葡萄糖的亲和力下降。
已知肠腔中未吸收营养物或溶质的存在可引起渗透性腹泻。根据本发明，已发现对经辐照对象经口饲喂葡萄糖和/或谷氨酰胺引起渗透性腹泻和降低的存活，而经口饲喂选自以下的每种氨基酸或其组合延长存活:赖氨酸、甘氨酸、苏氨酸、缬氨酸、酪氨酸、天冬氨酸、异亮氨酸、色氨酸、天冬酰胺和/或丝氨酸。
用于升高小肠功能的治疗组合物
在一个方面，本发明提供了用于提高小肠功能的治疗组合物。在一个实施方案中，治疗组合物包含以下、基本由以下组成或者由以下组成:选自赖氨酸、甘氨酸、苏氨酸、缬氨酸、酪氨酸、天冬氨酸、异亮氨酸、色氨酸、天冬酰胺和丝氨酸中的一种或更多种游离氨基酸；以及任选地， 可药用载体、电解质、维生素、缓冲剂和矫味剂。治疗组合物通过经肠途径施用。
优选地，组合物是弱碱性的，并且与小肠上皮细胞(如小肠的绒毛细胞和隐窝细胞)的渗透压相比是低渗的。优选地，本发明组合物包含水。优选地，将组合物配制为用于提高因绒毛上皮细胞的损失或损伤而被破坏之小肠功能的经口再水化饮品(oralrehydration drink)。
在一个实施方案中，组合物的总摩尔渗透压浓度为约230mosm至280mosm，或者其间的任何值。优选地，总摩尔渗透压浓度为约250mosm至260mosm。在另一个实施方案中，组合物的总摩尔渗透压浓度为低于280mosm的任何值。
在一个实施方案中，组合物的pH为约7.1至7.9，或其间的任何值。优选地，组合物的PH为约7.3至7.5，更优选为约7.4。
在某些实施方案中，各游离氨基酸可以4mM至40mM或其间任何值的浓度存在，其中组合物的总摩尔渗透压浓度为约230mosm至280mosm。或者,如果基于mg/1计算氨基酸浓度，则各游离氨基酸可以300mg/l至8000mg/L或其间任何值的浓度存在，其中组合物的总摩尔渗透压浓度为约240mosm至280mosm。在某些具体的实施方案中，治疗组合物包含以如下各浓度存在的一种或更多种游离氨基酸:浓度为约730mg/l至6575mg/l或其间任何值的赖氨酸；浓度为约532mg/l至4792mg/l或其间任何值的天冬氨酸；浓度为约300mg/l至2703mg/l或其间任何值的甘氨酸；浓度为约525mg/l至4722mg/l或其间任何值的异亮氨酸；浓度为约476mg/l至4288mg/I或其间任何值的苏氨酸；浓度为约725mg/l至6523mg/l或其间任何值的酪氨酸；浓度为约469mg/l至4217mg/l或其间任何值的纟颜氨酸；浓度为约817mg/l至7352mg/l或其间任何值的色氨酸；浓度为约528mg/l至4756mg/l或其间任何值的天冬酰胺；和/或浓度为约420mg/l至3784mg/l或其间任何值的丝氨酸；其中，组合物的总摩尔渗透压浓度为约240mosm 至 280mosm。在一个实施方案中，本发明提供了包含以下组分的饮品:赖氨酸(Ilmosm至2Imosm)、天冬氛酸(3mosm 至 l3mosm)、甘氛酸(l9mosm 至 29mosm)、异亮氛酸(l9mosm至 29mosm)、苏氛酸(l9mosm 至 29mosm)、酿氛酸(0.5mosm 至 5mosm)、纟颜氛酸(l9mosm 至29mosm)、色氨酸(5mosm至2Omosm)、天冬酸胺(3mosm至13mosm)和丝氛酸(3mosm至8mosm)或这些成分的子集(subset)。在一个具体的实施方案中，组合物包含游离氨基酸形式的赖氨酸、甘氨酸、苏氨酸、缬氨酸和酪氨酸。在另一个具体实施方案中，组合物包含游离氨基酸形式的赖氨酸、甘氨酸、苏氨酸、缬氨酸、酪氨酸、天冬氨酸、异亮氨酸、色氨酸、天冬酰胺和丝氨酸。在另一个实施方案中，组合物包含由选自以下的相同或不同氨基酸制成的一种或更多种二肽:赖氨酸、甘氨酸、苏氨酸、缬氨酸、酪氨酸、天冬氨酸、异亮氨酸、色氨酸、天冬酰胺或丝氨酸。在一个实施方案中，组合物不包含谷氨酰胺和/或甲硫氨酸；以及可水解为谷氨酰胺和/或甲硫氨酸的任何二肽、寡肽或多肽或者蛋白质。在一个替选实施方案中，组合物可包含游离氨基酸谷氨酰胺，和任选地，一种或更多种含谷氨酰胺的二肽，其中游离氨基酸谷氨酰胺和含谷氨酰胺之二肽的总浓度为小于 300mg/l,或者低于 300mg/l 的任何浓度，例如 100mg/l、50mg/l、10mg/l、5mg/l、lmg/1、0.5mg/l 或 0.0 lmg/1 o在另一个替选实施方案中，治疗组合物可包含游离氨基酸甲硫氨酸，和任选地，一种或更多种含甲硫氨酸的二肽，其中游离氨基酸甲硫氨酸和含甲硫氨酸之二肽的总浓度为小于 300mg/1,或者低于 300mg/1 的任何浓度，例如 IOOmg/1、50mg/1、IOmg/1、5mg/1、lmg/1、0.5mg/l 或 0.0 lmg/1 o在一个实施方案中 ，治疗组合物不包含任何糖类，所述糖类包括任何单糖、二糖、寡糖、多糖和碳水化合物。在一个具体的实施方案中，治疗组合物不包含葡萄糖，和/或可水解为葡萄糖的任何二糖、寡糖、多糖和碳水化合物。在一个具体的实施方案中，组合物不包含乳糖。在另一个具体的实施方案中，治疗组合物不包含果糖和/或半乳糖，和/或可水解为果糖和/或半乳糖的任何二糖、寡糖、多糖和碳水化合物。在一个替选实施方案中，治疗组合物可包含单糖葡萄糖，和任选地，一种或更多种包含葡萄糖的二糖(乳糖除外)，其中单糖葡萄糖和包含葡萄糖之二糖的总浓度为小于3g/I，或低于 3g/l 的任何浓度，如 lg/l、500mg/l、300mg/l、100mg/l、50mg/l、10mg/l、5mg/l、lmg/l、0.5mg/l 或 0.01mg/lo
在某些实施方案中，治疗组合物包含选自例如以下的一种或更多种电解质:Na+ ；K+ ;HC03_ ;C032_ ；Ca2+ ；Mg2+ ；Fe2 ;C1_ ;磷酸根离子，如 H2PO4'HP042_ 和 P043_ ;锌；碘；铜；铁；硒；铬；和钥。在一个替选实施方案中，组合物不包含HCO3-或CO32'在另一个替选实施方案中，组合物包含总浓度小于5mg/l或者浓度低于5mg/l的HC03_和CO广。
在另一个实施方案中，治疗组合物包含一种或更多种维生素，包括但不限于维生素A、维生素C、维生素D (例如，维生素Dp D2、D3> D4和/或D5)、维生素E、维生素B1 (硫胺素)、维生素B2 (例如，核黄素)、维生素B3 (例如，烟酸或烟酰胺)、维生素B5 (泛酸)、维生素B6 (吡多醇)、维生素B7 (生物素)、维生素B9 (例如，叶酸)、维生素B12 (钴胺素)和维生素K (例如,维生素Kp K2、K3> K4和K5)和胆碱。
在某些实施方案中，组合物不包含选自以下的一种或更多种成分:寡糖、多糖和碳水化合物；寡肽或多肽或蛋白质；脂质；小链、中链和/长链脂肪酸；和/或包含一种或更多种上述营养物的食物。
在一个实施方案中，使用磷酸根离子(如Η2Ρ04_、ΗΡ042_和Ρ0/_)来缓冲本发明的组合物。在一个实施方案中，治疗组合物使用HCO3-或CO32-作为缓冲剂。在另一个实施方案中，治疗组合物不使用HC03_或C032_作为缓冲剂。
本文所使用的术语“基本由...组成”将成分和步骤的范围限制为指定的材料或步骤以及不在本质上影响本发明的基本特征和新特征的那些，即，用于治疗小肠上皮(特别是绒毛区和刷状缘中)损伤的组合物和方法。例如，通过使用“基本由...组成”，治疗组合物不包含任何未指定的成分，包括但不限于对小肠上皮(特别是绒毛区和刷状缘中)损伤的治疗具有直接的有利或不利治疗效果的游离氨基酸、二肽、寡肽或多肽或蛋白质以及单糖、二糖、寡糖、多糖和碳水化合物。此外，通过使用术语“基本由...组成”，组合物可包含对小肠上皮损伤的治疗不具有治疗效果的物质；这样的成分包括载体、赋形剂、辅料(adjuvant)、矫味剂等，它们不影响被损伤小肠上皮(特别是绒毛区和刷状缘中)的健康或功能。
本文所使 用的术语“寡肽”是指由三至二十个氨基酸组成的肽。本文所使用的术语“寡糖”是指由三至二十个单糖组成的糖。
在一个实施方案中，本发明的组合物包含与没有小肠上皮细胞(如绒毛细胞、隐窝细胞、肠细胞和肠祖细胞(intestinal projenitor cell))损伤的正常对照的吸收能力相比，在有小肠上皮细胞损伤的对象中保持或获得提高的吸收能力的营养物(如游离氨基酸)和/或电解质。
在另一个实施方案中，本发明的组合物不包含不被吸收或者与没有小肠上皮细胞(如绒毛细胞、隐窝细胞、肠细胞和肠祖(projenitor)细胞)损伤的正常对照的吸收能力相t匕，在有小肠上皮细胞损伤的对象中具有降低之吸收的营养物(如氨基酸)和/或电解质。有利地，本发明的组合物有助于小肠容易地吸收营养物，以降低不适当的能量消耗，从而在黏膜损伤后即时提供肠休息。
用于提高小肠功能的治疗方法
技术领域：
本发明的另一方面提供了用于治疗或改善与小肠上皮细胞(特别是绒毛区和刷状缘中)的损失或损伤相关之疾病或病症的方法。在一个实施方案中，小肠上皮细胞的损失或损伤引起营养物、电解质和/或流体的吸收能力改变。有利地，针对有小肠上皮细胞损失或损伤的患者，特别是针对有小肠绒毛萎缩的患者，本发明改善小肠上皮黏膜愈合；提高小肠功能；增强小肠中营养物吸收和流体潴留；预防或缓解小肠萎缩；减轻腹部疼痛；预防和/或治疗腹泻；恢复或增强小肠屏障功能；和/或减轻小肠黏膜炎症、菌血症和/或内毒素血症。因此，本发明特别有利于改善以下对象的胃肠健康:接受了细胞毒性化学治疗剂、骨盆或腹部辐射、质子治疗和腹部手术的对象；患有与急性或慢性小肠炎症相关的感染或自身免疫疾病的对象；经常性地或者偶尔地暴露于辐射的对象，如经常性地暴露于空间辐射的宇航员和飞行员；以及由于核事故、战争行为或恐怖行为而暴露于辐射的对象。在一个实施方案中，该方法包括通过经肠途径向有此治疗需要的患者或对象施用有效量的本发明组合物。组合物可在损伤小肠上皮细胞之前即刻、期间和/或之后施用于患者或对象，并且每天可施用一次或多次。本文所使用的术语“对象”或“患者”描述了可向其提供用根据本发明的组合物进行治疗的生物(包括哺乳动物如灵长类动物)。可从所公开的治疗方法获益的哺乳动物物种包括但不限于:猿(ape)、黑猩猩、猩猩、人、猴；驯养动物(domesticated animal)如狗、猫；畜禽(live stock)如马、牛、猪、绵羊、山羊、鸡；以及动物如小鼠、大鼠、豚鼠和仓鼠。在一个具体的实施方案中，有治疗需要的对象是有小肠黏膜上皮细胞(包括十二指肠、空肠和回肠的黏膜层)损伤的患者。特别地，有治疗需要的对象是有小肠绒毛区和刷状缘损伤的患者。例如，有治疗需要的对象与正常相比有绒毛萎缩(例如，绒毛区和刷状缘的部分地或完全地日渐衰减(wasting away));小肠中绒毛细胞减少至少5% (如至少10%、20%、30%或50% );损失至少5% (如至少10%、20%、30%或50% )的绒毛高度；损失小肠的绒毛区和刷状缘中一种或更多种转运蛋白(transporter)的功能,其中转运蛋白包括但不限于SGL T-1转运蛋白、AE2转运蛋白、NHEl转运蛋白和NBCel-A/B转运蛋白，其中转运蛋白功能的损失为至少5% (如至少10%、20%、30%或50% );和/或小肠中一种或更多种营养物的吸收能力变化，其中所述营养物选自:异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、组氨酸、酪氨酸、丙氨酸、精氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、半胱氨酸、甘氨酸、脯氨酸、丝氨酸、天冬酰胺、葡萄糖、果糖和/或乳糖，其中吸收能力的变化为至少5% (如至少10%，20%、30%或50% )。例如，可通过如本文的“材料和方法”部分所述使用尤斯室来确定小肠的吸收能力。例如，可通过例如测量指标(包括，例如Km、Vmax和IJ的组合来确定吸收状态的变化。可通过例如对小肠黏膜的生物活检样本的检查来确定小肠的绒毛区和其他区的损伤。熟练的医师可容易地确定造成小肠黏膜上皮细胞(如小肠绒毛细胞)损伤的疾病和治疗方法。如在医疗职业中公知的，患有某些疾病(如炎性肠病(IBD))、溃疡性结肠炎、十二指肠溃瘍和克罗恩病(Crohn’ s disease)的患者遭受小肠黏膜的慢性破坏。放射治疗、化学治疗和质子治疗也引起小肠细胞的损伤。本文所使用的术语“治疗”或其任何语法变化形式包括但不限于缓解疾病或病症的症状；和/或减轻、压制、抑制、降低或影响疾病或病症的进程、严重程度和/或范围。
本文所使用的术语“改善”或其任何语法变化形式包括但不限于延迟发病，或者降低疾病或病症(例如，腹泻，菌血症和/或内毒素血症)的严重程度。本文所使用的改善不要求症状完全不存在。
本文所使用的术语“有效量”是指能够治疗或改善疾病或病症或者能够产生预期治疗效果的量。
在一个具体的实施方案中，本发明提供了用于促进有小肠上皮细胞损伤之对象的肠健康的方法，其中所述方法包括:鉴定有小肠上皮细胞损伤，或者将遭受这样的损伤以及需要治疗或改善的对象，并且通过经肠途径向对象施用有效量的包含以下、基本由以下组成或者由以下组成的组合物:选自赖氨酸、甘氨酸、苏氨酸、缬氨酸、酪氨酸、天冬氨酸、异亮氨酸、色氨酸、天冬酰胺和丝氨酸中的一种或更多种游离氨基酸；水；以及任选地，可治疗用载体、电解质、维生素、缓冲剂和矫味剂，其中组合物的总摩尔渗透压浓度为240mOsm至280mosm, pH 为约 7.1 至 7.9。
在一个实施方案中，未通过经肠途径向有(或者即将有)小肠上皮细胞损伤的对象施用一种或更多种以下营养物，其中所述营养物选自:谷氨酰胺、甲硫氨酸、和可水解为谷氨酰胺和/或甲硫氨酸的任何二肽、寡肽或多肽或蛋白质；葡萄糖和可水解为葡萄糖的任何二糖、寡糖、多糖和碳水化合物；和/或消化后需要 在小肠中吸收任何上述营养物的食物。
在另一个实施方案中，对于有(或即将有)小肠上皮细胞损伤的对象而言，未通过经肠途径施用以下营养物，其中所述营养物选自:糖类、脂质、脂肪酸和/或消化后需要在小肠中吸收任何上述营养物的食物。对于暴露于辐射或者接受放射治疗、化学治疗和质子治疗的患者而言，小肠上皮细胞的损伤通常持续至少3、7、14、21、30天或者I至30天之间的任何时间。
在另一个实施方案中，在I至30天之间的任何时间(如3、7、14、21、30天)之后，因为对象暴露于辐照或者接受放射治疗、化学治疗和/或质子治疗，所以通过经肠途径施用一种或更多种以下营养物以增强黏膜愈合，其中所述营养物选自:谷氨酰胺、甲硫氨酸和可水解为谷氨酰胺和/或甲硫氨酸的任何二肽、寡肽或多肽或蛋白质；葡萄糖和可水解为葡萄糖的任何二糖、寡糖、多糖和碳水化合物；和/或消化后需要在小肠中吸收任何上述营养物的食物。
在一个具体的实施方案中，本发明组合物经口施用并且达到对象的小肠。任选地，该方法还包括通过肠胃外途经施用未以充分量通过经肠途径施用的所需营养物和电解质。
在一个实施方案中，本发明未用于向对象提供显著量的或者全部的必需营养物，但用于改善小肠黏膜愈合、恢复小肠功能、增强流体潴留、预防或缓解小肠绒毛萎缩、预防和/或治疗腹泻，和/或恢复或增强肠屏障功能。在一个具体的实施方案中，饮品组合物也基于屏障功能的提高。屏障功能可通过使用多种技术来确定，包括:a)对安放在尤斯室中组织的电导测量结果升高，b)用于测量Cl和Na的相对渗透性(PCl/PNa)的稀释电势(只有完整的和功能性的屏障可保持离子选择性；当失去屏障功能时，离子选择比值接近于1)，以及c)测量血浆内毒素水平。当失去黏膜屏障功能时，共生的肠道细菌可找到进入体循环的途径，导致升高的血浆内毒素水平。可测量患者血液样本中的内毒素水平。血浆内毒素水平还可用作测量治疗改善的指标。
本发明的组合物可用于治疗或改善与小肠上皮细胞的损失、破坏或减少(特别是小肠的绒毛细胞、肠细胞和/或肠祖细胞的功能或数目的损失、破坏或减少)相关的任何疾病或病症。本发明尤其可用于治疗或改善与小肠上皮细胞中的转运蛋白(特别是小肠绒毛细胞中的转运蛋白)的损失、失活或功能改变相关的任何疾病或病症。在一个实施方案中，本发明的组合物和方法可用于治疗或改善产生自以下或者与以下相关的疾病或病症:钠依赖的葡萄糖转运系统(SGLT-1)对葡萄糖的亲和力下降；NH2-末端产电Na+-HC03 (-)协同转运蛋白(NBCe 1-A/B)的损失或活性下降；顶端C1_-HC03_交换转运蛋白(AEl)的损失或活性下降；和/或CFTR和/或NKCC-1转运蛋白系统的水平或活性升高。在一个特别优选的实施方案中，本发明的组合物和方法可用于治疗或改善由辐射引起的小肠损伤。在一个具体的实施方案中，本发明可用于治疗或改善由放射治疗(特别是骨盆和腹部放射治疗)引起的小肠损伤。在一个具体的实施方案中，辐照治疗用于癌症治疗。此外，本发明可用于治疗或改善由经常性辐射暴露(如宇航员和飞行员暴露于空间辐射，如由放射性武器和意外核泄露引起的辐射暴露)引起的小肠损伤。具体地，本发明可用于治疗或改善急性和/或慢性放射性肠炎。在某些具体的实施方案中，本发明的组合物和方法可用于治疗或改善小肠损伤，其中患者接受了以下辐射:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19 或20Gy。在另一个实施方案中，对象接受了剂量高于20Gy的辐射。此外，本发明可用于治疗或改善由化学治疗剂引起的小肠损伤，所述化学治疗剂包括但不限于:顺钼、5-氟尿喃唳(5-FU)、轻基脲、依托泊苷、阿糖胞苷(arabinoside)、6-巯嘌呤、6-硫鸟嘌呤、氟达拉滨、甲氨蝶呤、类固醇和/或其组合。此外，本发明可用于治 疗或改善由质子治疗引起的小肠损伤。在某些实施方案中，本发明可用于治疗或改善涉及小肠损伤的疾病，包括但不限于炎性肠病(IBD)、溃疡性结肠炎、十二指肠溃疡、克罗恩病、和/或乳糜泻(还称为腹腔疾病)。本发明可用于治疗或改善由病原性感染(如病毒、细菌、真菌或其他微生物感染)引起的小肠损伤。在一个具体的实施方案中，本发明可用于治疗或改善小肠绒毛萎缩，S卩，绒毛区和刷状缘的部分地或完全地日渐衰减，以及产生自小肠绒毛萎缩、与小肠绒毛萎缩相关和/或由小肠绒毛萎缩引起的疾病和病症。在某些实施方案中，本发明可用于治疗或改善局灶性绒毛萎缩和/或弥漫性绒毛萎缩；增生性绒毛萎缩和/或发育不良性绒毛萎缩；和/或有和没有黏膜炎症的绒毛萎缩。在某些实施方案中，本发明可用于治疗或改善增生性绒毛萎缩(有隐窝增生)和相关疾病和病症，包括但不限于乳糜泄(有面筋(gluten)敏感性肠病)；慢性创伤；小肠移植；尿回肠导管；肠黏膜炎症；肠溃疡；肠吻合；胰高血糖素瘤；广泛性小肠切除；原发性回肠绒毛萎缩；显微镜结肠炎(microscopic colitis)萎缩；肠微绒毛萎缩；和线粒体细胞病(线粒体呼吸链异常)。在某些实施方案中，本发明可用于治疗或改善发育不良性绒毛萎缩(没有隐窝增生)和相关疾病或病症，包括 但不限于:恶性肿瘤；帕内特细胞缺陷(paneth celldeficiency);垂体功能减退；对无面筋饮食不响应的乳糜泄；热带口炎性腹湾(tropicalsprue);辐射相关的局部缺血；药物诱导的绒毛萎缩，如由新霉素和硫唑嘌呤诱导的绒毛萎缩。
在某些实施方案中，本发明可用于治疗或改善有黏膜炎症的绒毛萎缩以及相关的疾病和病症，包括但不限于:乳糜泄；严重的食物不耐受(alimentary intolerance);先天性克罗恩病；自身免疫性肠病；小肠结肠炎；和免疫缺陷综合征。
在某些实施方案中，本发明可用于治疗或改善由包括但不限于以下的疾病引起的绒毛萎缩:肝炎；肠癌；肠淋巴瘤；1型糖尿病；变态反应；嗜酸细胞性胃肠炎(eosinophilic gastroenteritis);病毒性胃肠炎；以及自身免疫性肠病。
在某些实施方案中，本发明可用于治疗或改善与小肠中与乳糜泄相关的绒毛萎缩，包括但不限于Marsh3a型绒毛萎缩(每100个肠细胞> 40个上皮内淋巴细胞)、Marsh3b型绒毛萎缩(每100个肠细胞> 40个上皮内淋巴细胞；显著的绒毛萎缩)、Marsh3c型绒毛萎缩(每100个肠细胞> 40个上皮淋巴细胞，绒毛区不存在或几乎不存在)(基于乳糜泄和肠绒毛萎缩的经修改的Marsh分类)。
本发明还可用于治疗或改善与小肠损伤相关的症状，包括但不限于吸收不良、腹泻、恶心、呕吐、电解质失衡、吸收不良和脱水。
制备用于提高小肠功能的治疗组合物
在另一方面，提供了用于制备本发明治疗组合物的方法。在一个实施方案中，该方法包括制备用于促进有小肠上皮细胞损失或损伤之对象的肠健康的组合物，其中所述组合物包含以下、基本由以下组成或者由以下组成:有效量的一种或更多种成分，其中这些成分被有小肠上皮细胞损失或损伤的对象的小肠吸收，其中该组合物的总摩尔渗透压浓度为230mosm至280mosm,或其间的任何值(优选为约250mosm至260mosm)，其中该组合物的pH为约7.1至7.9或其间的任何值(优选为约7.4)，其中该组合物被配制为用于经肠施用。
在一个实施方案中，成分选自:游离氨基酸、二肽、单糖、二糖或其组合，以及任选地，电解质、维生素、矫味剂和/或载体。
在一个实施方案中，本发明提供了通过筛选在绒毛和隐窝区的小肠上皮细胞破坏之后保持或获得吸收能力的营养物或电解质，筛选用于包含进本发明治疗组合物之营养物或电解质的方法。
本发明的筛选方法可用于确定可用于治疗或改善与小肠上皮细胞的损失、破坏或减少(特别是绒毛细胞、肠细胞和/或肠祖细胞的损失、破坏或减少)相关的疾病或病症的治疗营养物和/或电解质。在一些具体的实施方案中，该方法可用于设计用以满足特定患者或患者群体之需求的组合物和方法。在一个具体的实施方案中，本发明组合物可用于治疗或改善放射治疗、化学治疗治疗、质子治疗之后的或者由小肠的急性或慢性炎症引起的小肠损伤。
在一个实施方案中，本发明筛选方法包括:
a)使有黏膜损伤的小肠上皮 组织与候选营养物或电解质相接触；
b)确定小肠上皮组织吸收所述营养物或电解质的能力水平；
c)将所述水平与预定水平(如正常组织中)进行比较；以及
d)如果候选营养物或电解质的吸收能力是预定水平的至少例如50%、60%、70 %、80 %或90 %，则选择该候选营养物或电解质。在一个实施方案中,本发明筛选方法包括:a)通过经肠途径向有小肠黏膜损伤的对象施用候选营养物或电解质；b)确定所述营养物或电解质的肠吸收能力水平；c)将所述水平与预定水平(如正常对象中)进行比较；以及d)如果候选营养物或电解质的吸收水平是预定水平的至少例如50%、60%、70 %、80 %或90 %，则选择该候选营养物或电解质。可根据指标(包括，例如K1^Vniax和IJ的组合来确定吸收能力的水平。本领域技术人员可建立预定参考值。例如，可通过测量没有黏膜(如绒毛细胞、隐窝细胞、肠细胞和肠祖细胞)损伤的正常小肠上皮组织中的所述营养物或电解质的吸收能力水平来建立预定的参考值。在另一情况下，可通过测量没有小肠上皮细胞(如绒毛细胞、隐窝细胞、肠细胞 和肠祖细胞)损伤的正常群体中的所述营养物或电解质的吸收能力水平来建立预定参考值。在另一个实施方案中，本发明筛选方法包括:a)确定有黏膜损伤的小肠组织的功能；b)使候选营养物或电解质与小肠组织相接触；c)确定小肠组织与候选营养物或电解质接触后小肠组织的功能；以及d)如果所述候选营养物或电解质提高了小肠功能，则选择该候选营养物或电解质。在另一个实施方案中，本发明筛选方法包括:a)确定有小肠黏膜损伤的对象的小肠功能；b)通过经肠途径向对象施用候选营养物或电解质；c)确定施用候选营养物后对象的小肠功能；以及d)如果所述候选营养物或电解质提高了小肠功能，则选择该候选营养物或电解质。在某些实施方案中，如果候选营养物或电解质的施用使细胞旁通透性(paracellular permeability)下降、增强了小肠屏障功能，则小肠功能得到了提高。此外，如果候选营养物或电解质的经肠施用预防或治疗了腹泻和/或延长了存活，则小肠功能得到了提高。在某些实施方案中，可使用如实施例(特别是实施例15至17)中所说明的方法来选择提高了有小肠黏膜损伤之对象的小肠功能的营养物和电解质。合适的候选电解质包括例如Na+、K+、HCO3' Cl—、Mg2+、Ca2+、Fe2+和/或Zn2+。合适的候选营养物包括选自例如以下的必需氨基酸和非必需氨基酸:异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、组氨酸、酪氨酸、硒半胱氨酸(selenocysteine)、丙氨酸、精氨酸、天冬氨酸、半胱氨酸、甘氨酸、脯氨酸、丝氨酸、天冬酰胺和吡咯赖氨酸。合适的候选营养物还可包括脂肪酸、糖类(例如，单糖、二糖和寡糖)、电解质和维生素。候选营养物还可包括非天然氨基酸，如鸟氨酸、瓜氨酸、羟脯氨酸、高丝氨酸(homoserine)、苯甘氨酸、牛磺酸、碘化酪氨酸、2，4_ 二氨基丁酸、a-氨基异丁酸、4_氨基丁酸、2-氨基丁酸、Y-氨基丁酸、ε-氨基己酸、6-氨基己酸、2-氨基异丁酸、3-氨基丙酸、正亮氨酸(norleucine)、正纟颜氨酸(norvaline)、肌氨酸(sarcosine)、高瓜氨酸(homocitrulline)、磺基丙氨酸(cysteic acid)、τ-丁基甘氨酸、τ-丁基丙氨酸、苯基甘氨酸、环己基丙氨酸和丙氨酸。
在另一个实施方案中，营养物和电解物的选择还至少部分取决于对象所接受的IR剂量、辐射源、被辐照的身体部分、和/或辐射后的时间；化学治疗剂的类型、剂量、和/或化学治疗后的时间；以及对象所接受的质子治疗的剂量，和/或质子治疗后的时间。
本发明筛选测定可采用本领域中公知的技术组合来进行，包括但不限于尤斯室研究、细胞学、免疫组化、Western印迹、酶联免疫吸附测定(ELISA)、聚合酶链反应(PCR)、离子通量实验(ion flux exper iment)、免疫沉淀、免疫荧光、放射免疫测定和免疫细胞化学。
具体地，成分可根据成分被患者小肠黏膜吸收的能力(如通过原位或分离的肠制备物确定的)来选择，采用技术如尤斯室来测量小肠对此类成分的吸收能力。
制剂和施用
本发明提供了包含治疗有效量的本发明组合物和任选的可药用载体的治疗组合物或药物组合物。这样的药用载体可以是无菌液体，例如水。治疗组合物还可包含不影响受损伤小肠上皮(特别是绒毛区和刷状缘中)之健康或功能的赋形剂、辅料、矫味剂等。在一个实施方案中，治疗组合物和其中所包含的全部成分都是无菌的。
术语“载体”是指与化合物一起施用的稀释剂、辅料、赋形剂或载剂。合适的药用载体的实例描述于 E.W.Martin 的 “Remington, sPharmaceutical Sciences” 中。这样的组合物包含治疗有效量的治疗组合物，以及合适量的载体以向患者提供适当的施用形式。制剂应当适合经肠施用模式。
本发明还提供了药物包(pharmaceutical pack)或药盒(kit),其包括填充有一种或更多种成分(例如，本发明的化合物、载体或药物组合物)的一个或更多个容器。
在一个实施方案中，药物包或药盒还包括施用说明书,例如,关于有效治疗剂量，和/或参考例如暴露于辐射、化学治疗或质子治疗后之时间的施用时间。在一个实施方案中，组合物的治疗剂量根据小肠黏膜的损伤程度来确定。例如，对于接受了或者即将接受辐射的对象，组合物的治疗剂量根据辐射源、被辐照的身体部分和/或辐射后的时间来确定。对于接受了或者即将接受化学治疗的对象，组合物的治疗剂量根据化学治疗剂的类型、化学治疗剂的剂量和/或化学治疗后的时间来确定。对于接受了或者即将接受质子治疗的对象，组合物的治疗剂量根据对象所接受的质子治疗的剂量和/或质子治疗后的时间来确定。
材料和方法
实验动物
为了研究活性HC<V分泌，从国家癌症研究所(National Cancer Institute)获得8周龄的、未经辐照和经辐照的雄性BALB/c小鼠。将小鼠随机分组，使用以1.84Gy/分钟递送Y -福照的mCs源,根据胃肠急性放射综合征(gastrointestinal acute radiationsyndrome,GI ARS)模型以 Shepherd Mark-1 福照腹部。福射以单分割(single fraction)给出。在骨盆或腹部肿瘤的放射治疗期间，GIARS模型将实现肠组织的最大辐射损伤，并模拟肠损伤。
检查作为辐射后的时间和辐射剂量升高二者之函数的短路电流(short circuitcurren,Isc)的变化以确定产生显著的Is。变化所需的最早时间和最小辐射剂量。这些研究经罗切斯特大学动物管理与使用委员会(UniVersity of Rochester Animal Care and UseCommittee)批准。离子通量研究放血(exsanguination)之后,通过排除邻近盲肠的小肠远端的12cm而得到空肠段。在从下面的肌肉层剥离黏膜之前，在冰冷的林格液中清洗和冲洗该段(Zhang，Ameen等.2007)。将黏膜安放在面积为0.30cm2的尤斯型璐彩特(Lucite)室(P2304，Physiologicinstruments, San Diego, CA92128USA)的两半之间，使用电压 / 电流钳装置(VCC MC-8，Physiologicinstruments, San Diego, CA92128USA)记录电参数(Vidyasagar 等 2005 ；Vidyasagar 等 2004 ；Zhang 等 2007 ；Vidyasagar 和 Ramakrishna2002)。在包含 8mM 的谷氨酰胺且用95%氧气(O2)与5%二氧化碳(CO2)之混合物充气的常规林格液(表I)中沐浴(bathed)肠制备物的两边。表1.溶液的组成
权利要求
1.一种无菌的治疗组合物，其用于改善小肠健康，特别是在绒毛萎缩的情况下改善小肠健康，其中所述组合物配制为用于经肠施用，并且包含作为游离氨基酸的赖氨酸、甘氨酸、苏氨酸、缬氨酸和酪氨酸；以及水；并且其中所述组合物的总摩尔渗透压浓度为230mosm 至 280mosm。
2.根据权利要求1所述的治疗组合物，其中所述组合物不包含选自葡萄糖、谷氨酰胺和甲硫氨酸中的一种或更多种成分，或者，如果存在这些成分，则葡萄糖以小于lg/1的浓度存在，谷氨酰胺以小于300mg/l的浓度存在，甲硫氨酸以小于300mg/l的浓度存在。
3.根据权利要求2所述的治疗组合物，其还包含天冬氨酸、异亮氨酸、色氨酸、天冬酰胺和/或丝氨酸。
4.根据权利要求1所述的治疗组合物，其中所述组合物不包含葡萄糖、谷氨酰胺或甲硫氨酸。
5.根据权利要求1所述的组合物，其中所述组合物还包含电解质、维生素、矿物质和/或矫味剂。
6.一种用于治疗有绒毛萎缩之对象的方法，其中所述方法包括通过经肠施用向所述对象施用权利要求1所述的组合物。
7.根据权利要求6所述的方法，其中所述对象是人。
8.根据权利要求6所述的方法，其中所述对象的绒毛区中小肠上皮细胞的总数目与正常相比减少至少10%。
9.根据权利要求6所述的方法，其中所述对象的小肠中绒毛的高度与正常相比损失至少 10%。
10.根据权利要求6所述的方法，其中所述组合物不包含选自葡萄糖、谷氨酰胺和甲硫氨酸中的一种或更多种成分，或者，如果存在这些成分中的一种或更多种，则葡萄糖以小于lg/1的浓度存在，谷氨酰胺以小于300mg/l的浓度存在，甲硫氨酸以小于300mg/l的浓度存在。
11.根据权利要求6所述的方法，其中所述组合物还包含天冬氨酸、异亮氨酸、色氨酸、天冬酰胺和/或丝氨酸。
12.根据权利要求6所述的方法，其中所述组合物不包含选自葡萄糖、谷氨酰胺或甲硫氨酸中的一种或更多种成分。
13.根据权利要求5所述的方法，其中所述绒毛萎缩是由疾病、辐射、化学治疗、质子治疗、腹部手术和/或细胞毒性剂造成的。
14.根据权利要求13所述的方法，其中在所述对象接受辐射、化学治疗、质子治疗或细胞毒性剂后施用所述组合物I至14天时间。
15.根据权利要求13所述的方法，其用于治疗放射性肠炎。
16.根据权利要求13所述的方法，其用于治疗由化学治疗或选自以下的细胞毒性剂造成的小肠损伤:顺钼、5-氟尿嘧啶(5-FU)、羟基脲、依托泊苷、阿糖胞苷、6-巯嘌呤、6-硫鸟嘌呤、氟达拉滨、甲 氨蝶呤、类固醇或其组合。
17.根据权利要求13所述的方法，其用于治疗炎性肠病(IBD)、溃疡性结肠炎、十二指肠溃疡或克罗恩病。
18.一种用于制备无菌治疗组合物的方法，所述组合物用于促进有绒毛萎缩之对象的肠健康，其中所述方法包括将一种或更多种选自以下的成分相组合:游离氨基酸、二肽、单糖、二糖或其组合， 其中，已确定各成分在有绒毛萎缩之对象的小肠中保持与正常相比至少50%的吸收能力，并且 其中所述组合物不包含浓度高于lg/Ι的葡萄糖或浓度高于300mg/l的谷氨酰胺。
19.通过权利要求18所述的方法生产的组合物。
20.根据权利要求19所述的组合物，其包含水，并且摩尔渗透压浓度为230mOsm至280mosmo
21.根据权利要求19所述 的组合物，其为粉末形式。
22.—种成套试剂，其包含权利要求1所述的组合物或当与水组合时形成权利要求1所述组合物的粉末，其中所述成套试剂还包含用于向有或预期发生绒毛萎缩之患者施用所述组合物的说明书。
全文摘要
本发明提供了治疗组合物及其用于治疗或改善小肠黏膜损伤的用途。在一些优选的实施方案中，所述组合物包含一种或更多种获得或保持相当大吸收能力的营养物和/或电解质。
文档编号A61K31/198GK103153298SQ201180045566
公开日2013年6月12日 申请日期2011年9月26日 优先权日2010年9月24日
发明者萨达希瓦·维佳萨加尔, 保罗·奥库尼夫, 张鲁榕 申请人:佛罗里达大学研究基金会有限公司