专利名称：一种簕菜提取物及其制备方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种簕菜提取物及其制备方法和应用。
背景技术：
M莱(Acanthopanan trifoliatus (L. ) iferr)又称白簕、苦刺、鹅掌霸、三叶五加、三加皮，为五加科攀援状灌木，主要分布于我国云南、四川、广东等地区，印度东北部至印度支那、日本和菲律宾也有分布。簕菜自古就是药食同源的地方特产，其使用具有悠久的历史。李时珍曰“五加治风湿痪库，壮筋骨，其功良深”。明代《食物本草》中记有“五加，叶作蔬食，去皮肤风湿”。据《广东药用植物简编》(吴修仁编)记载，簕菜根、茎、叶均可入药， 其辛、微苦、涩、凉，气微香。根，祛风除湿、散痕、止痛。叶，疏风，消肿，止痒，有舒筋活血、消肿解毒之功效。据《中国高等植物图鉴》，簕菜味苦、辛、凉，具有清热解毒、祛风利湿、舒筋活血、止咳平喘之功效。在广东恩平等地，簕菜因其色泽翠绿、口感脆嫩、品味清香、苦中带甘， 可泡茶、熬汤、清炒，且具有清热除湿降火等作用而深受当地人们的喜爱。
国内外有研究者对簕菜进行了初步研究与开发。研究发现簕菜叶中含有大量的萜烯、萜醇类化合物以及少量的长链脂肪族和芳香族化合物，推测其应具有明显的镇咳、祛痰、抗真菌、抗炎和祛痛等作用，但至今未见有系统深入研究和开发应用。发明内容
本发明的目的在于提供来源于植物，用于炎症治疗或抗氧化的化妆品、药物和保健食品。
本发明以五加科植物簕菜trifoliatus (L. ) iferr)为原料。
本发明制备簕菜提取物能有效清除各种自由基(如超氧阴离子、羟基自由基和过氧化氢)。
本发明制备簕菜提取物能抑制炎症细胞巨噬细胞的生长，抑制核转录因子NF-κ B 活性，降低小鼠巨噬细胞RAW264. 7中Erkl/2的活化程度，从而有效地减轻或抑制炎症。
本发明提供了一种簕菜提取物的制备方法，其具体步骤如下1)称取自然干燥的簕菜IOOOg粉碎，过60目筛，取IOOg置于5L圆底烧瓶中，加70wt% 乙醇溶液2000mL加热至沸腾后保持2h，再用纱布过滤，取滤液，重复3次；2)将上述提取液减压蒸干，称重，加适量蒸馏水，超声提取，冷冻干燥，得醇提物；3)在醇提物中加入质量比1:10的蒸馏水溶解，加入等体积的石油醚，摇匀，在分液漏斗中静置lh，得石油醚层和水层，分别萃取三次，收集石油醚层萃取物；继续按照1:1的体积比依次加入乙酸乙酯、正丁醇溶剂进行萃取，分液后取上层溶液，重复3次；收集水层物、乙酸乙酯层萃取物和正丁醇层萃取物。
本发明提供的一种簕菜提取物，采用上述的制备方法制备而得。
本发明提供的一种用于制备治疗炎症的药物或抗氧化的化妆品组合物，其含所述的簕菜提取物。
本发明提供的一种用于制备防治炎症药物或抗氧化的食品组合物，其含有所述的簕菜提取物
本发明提供的一种用于治疗炎症的药物或药物组合物，其含有所述的簕菜提取物，以及一种或多种在药学上可接受的辅助剂。
所述的治疗炎症的药物或药物组合物，包括片剂、丸剂、胶囊剂、悬浮剂或乳剂。
上述簕菜的石油醚萃取物在制备抗炎抗氧化剂中的用途。
上述簕菜的乙酸乙酯萃取物在制备抗炎抗氧化剂中的用途。
一种用于抗炎抗氧化的饮料、化妆品、药物或保健食品，其中含有簕菜及其提取物，以及药学上可接受的辅助剂。
上述用于抗炎抗氧化的饮料、化妆品、药物或保健食品，其中含有簕菜石油醚萃取物，以及药学上可接受的辅助剂。
上述用于抗炎抗氧化的饮料、化妆品、药物或保健食品，其中含有簕菜乙酸乙酯萃取物，以及药学上可接受的辅助剂。
所述的抗炎抗氧化的饮料、化妆品、药物或保健食品是制成片剂、丸剂、胶囊剂、悬浮剂或乳剂。
本发明的有益效果是通过抗自由基氧化以及炎性因子实验验证簕菜及其提取物具有抗炎抗氧化能力。其中簕菜的石油醚及乙酸乙酯萃取物有很强的抗炎抗氧化能力。
图I.簕菜提取物对RAW264. 7细胞NK- κ B转录活性的影响。
图2.簕菜提取物对Erkl / 2活化的抑制作用。
上述图中C :对照组；WE :水提物；EE :醇提物；PEL :石油醚部分；EAL :乙酸乙酯部分NBL:正丁醇部分；WL :水溶物；CUR :姜黄素。
磷酸化丝裂原活蛋白激酶I即Phospho-Erkl ；磷酸化丝裂原活蛋白激酶2即Phospho-Erk2 ；β肌动蛋白即β-actin。
具体实施方式
本发明是通过以下方案实现实施例I :簕菜提取物的制备提取首先称取自然干燥的簕菜IOOOg粉碎，过60目筛，取IOOg置于5L圆底烧瓶中， 加70%乙醇溶液2000mL加热至沸腾后保持2h，再用纱布过滤，取滤液，重复3次；将上述提取液减压蒸干，称重，加适量蒸馏水，超声提取，冷冻干燥，得醇提物；在醇提物中加入质量比1:10的蒸馏水溶解，加入等体积的石油醚，摇匀，在分液漏斗中静置lh，得石油醚层和水层，分别萃取三次，收集石油醚层萃取物；继续按照1:1的体积比依次加入乙酸乙酯、正丁醇溶剂进行萃取，分液后取上层溶液，重复3次；收集水层物、乙酸乙酯层萃取物和正丁醇层萃取物。得到石油醚萃取物I. Ig,乙酸乙酯萃取物7. 66g，正丁醇萃取物7. 43g，水溶物418.05g。
实施例2 :DPPH法测定簕菜提取物抗氧化活性使用1，I-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)测定簕菜提取物的抗氧化活性。DPPH是一种比较稳定的脂性自由基，其N上有一个游离电子，其乙醇溶液呈紫色，在517nm处有最大的吸收峰。加入簕菜提取物以后，DPPH捕捉一个电子与游离电子配对，紫色褪去，变为无色物质，在517nm处的吸收消失，其褪色程度与其接受的电子数成定量关系。依此原理用分光光度计检测DPPH自由基与簕菜提取物反应后吸光值的变化，可检定试样提供氢原子、清除自由基抗氧化的能力。方法称取O. 02g的DPPH晶体，用无水乙醇溶解，定容至500ml，配制成0.04mg/L溶液，避光保存。分别称取各种簕菜提取物样品，配制成O. 5mg/ml的样品溶液。 使用I. 5ml的离心管作为反应容器，参比管中加900 μ I的DPPH·溶液和100 μ I的无水乙醇，以Iml的无水乙醇做为空白对比。样品管中分别按5“1、1(^1、2(^1、4(^1、8(^1的梯度体积加入样品溶液和900 μ I的DPPH·溶液，再加无水乙醇使总体积为1ml。4°C恒温反应30min。用紫外可见分光光度计测得参比管的吸光度为AC，样品管的吸光度为AS，通过公式计算其清除率，并计算其IC5tl值(IC50值指清除率达到50%时对应的样品浓度)。簕菜提取物的清除效果如表I所示。
表I各组分抗氧化活性测试结果(DPPH法)
权利要求
1.一种簕菜提取物的制备方法，其特征在于具体步骤如下1)称取自然干燥的簕菜IOOOg粉碎，过60目筛，取IOOg置于5L圆底烧瓶中，加70%乙醇溶液2000mL加热至沸腾后保持2h，再用纱布过滤，取滤液，重复3次；2)将上述提取液减压蒸干，称重，加适量蒸馏水，超声提取，冷冻干燥，得醇提物；3)在醇提物中加入质量比1:10的蒸馏水溶解，加入等体积的石油醚，摇匀，在分液漏斗中静置lh，得石油醚层和水层，分别萃取三次，收集石油醚层萃取物；继续按照1:1的体积比依次加入乙酸乙酯、正丁醇溶剂进行萃取，分液后取上层溶液，重复3次；收集水层物、乙酸乙酯层萃取物和正丁醇层萃取物。
2.一种簕菜提取物，其特征在于采用权利要求I所述的制备方法制备而得。
3.权利要求2所述的簕菜提取物在制备治疗炎症的药物或抗氧化的化妆品组合物中的应用。
4.权利要求2所述的簕菜提取物在制备防治炎症药物或抗氧化的食品组合物中的应用。
5.一种治疗炎症的药物或防治炎症药物，其含有权利要求2所述的簕菜提取物，以及一种或多种在药学上可接受的辅助剂。
6.权利要求5所述的治疗炎症的药物或药物组合物，其特征在于所述的药物或药物组合物包括片剂、丸剂、胶囊剂、悬浮剂或乳剂。
全文摘要
本发明提供了一种簕菜提取物及其制备方法和应用，首先称取簕菜全草，用乙醇浸泡，经旋转蒸发浓缩后得到水溶液，然后分别用油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取水溶液；萃取液经减压蒸馏后得到膏体，即得到石油醚萃取物，乙酸乙酯萃取物，正丁醇萃取物，水溶物；通过抗自由基氧化实验，巨噬细胞生长实验、NF-kB核转录因子的抑制实验和Erk1/2的激活作用实验，证实簕菜提取物具有抗氧化和抗炎能力，添加了簕菜及其提取物的治疗炎症的药物或抗氧化的化妆品或食品组合物具有抗炎和抗氧化作用，而可用于防治炎症或衰老的化妆品、药物、植物性饮料及保健食品。
文档编号A61K36/254GK102920759SQ201210274788
公开日2013年2月13日 申请日期2012年8月3日 优先权日2012年8月3日
发明者张焜, 胡瑞连, 王华倩, 艾伦·康尼, 杜志云, 郑希, 李晨悦, 郑俊霞, 卢宇靖, 吴盼盼, 黄华容, 方岩雄, 赵肃清, 汪舰, 曾华强 申请人:广东工业大学, 完美(中国)有限公司, 五邑大学