专利名称：乳糖酸修饰的脂肪酸-三甲基壳聚糖聚合物制备方法及应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种乳糖酸修饰的脂肪酸-三甲基壳聚糖聚合物、制备方法，及作为载体在制备抗肿瘤药物受体靶向纳米胶束制剂中的应用，属于药物制剂领域。
背景技术：
目前，临床上对于肝癌的治疗缺乏特异性，疗效不理想。超过90%的药物都被机体正常组织摄取，仅有2% 5%的药物到达肿瘤包部分。而且实际上临床使用的抗肿瘤化疗药物均有一定程度的毒副作用，有些严重的毒副反应是限制药物用药剂量和使用的直接原因。发生这些毒副反应的主要原因在于化疗药物缺乏对肿瘤部位的特异性，大剂量给药时产生非特异性毒性，甚至对正常组织造成严重的损伤。所以，人们希望寻找出可以增加难溶性抗肿瘤药物的溶解度，并能提高肿瘤组织内药物浓度而正常组织中药物浓度较低的一种 制剂形式，从而提高疗效，降低药物带来的毒副反应。药物靶向技术就是为了解决这些问题而提出，并已成为整个药学研究领域的热点之一。纳米给药系统是近年来抗肿瘤药物载体研究中的热点。它具有改善药物的溶解性，延长药物在肿瘤部位的滞留时间，提高生物利用度和具有一定靶向性等优点，因此可提高抗肿瘤药物的疗效和减少化疗中的非特异性不良反应，尤其适用于肿瘤治疗。近年来，由亲水基和疏水基团组成的两亲性胶束在生物工程和药物制剂领域得到了广泛的应用。在水溶液中，各种两亲性聚合物为了减小表面自由能，通过疏水基团的分子内或分子间的促进作用自发的形成胶束或自聚物。这些聚合物的胶束或自聚物由疏水性的内核和亲水性的外壳组成，由于疏水性的内核能够作为许多水溶性差药物的储库，这种核壳结构被认为是一种有前途的药物传输载体。再者，这些聚合物胶束显示了特殊性质，诸如不同的流变学特征、小的流体半径和热力学稳定性。因此，在过去的十年里，研究者在开发新型的两亲聚合物诸如两亲性嵌段共聚物和疏水修饰的聚合物方面做了很大的努力。近年，诸如壳聚糖、葡萄糖和普鲁兰糖等天然多糖受到了广泛的关注，它们能够被烷基链和胆汁酸疏水性修饰，形成纳米大小的胶束作为药物传输系统。近年来，由于壳聚糖良好的生物相容性、生物课降解性和低毒，壳聚糖作为药物或基因的载体得到了科研人员的关注。然而，壳聚糖在生理溶液中水溶性差是其在药物传输中广泛应用的主要缺陷。据报道，壳聚糖的水溶性可通过许多途径得以提高，如现有技术中的氨基的磺基化(参见中国发明专利CN1439655)和羟乙基化(参见文献Uchenbu, I.F. Sadiq, L. Arastoo, M.，Int J Pharm, 2001, 224(1-2)，185-99)，上述的磺基化反应中，需将N-长链烷基壳聚糖加入氯磺酸的DMF溶液中，在N2保护的条件下反应18 24h，条件苛刻且所用氯磺酸是个极其活泼的酸，遇水会爆炸，生产上不安全。有些高分子共聚物对疏水性药物的增溶还不是十分理性，例如，有文献(Zhang Z. , Feng. S. S，Bioma terials, 2006,27 (2), 262-270)报道合成的 Poly (latide)/Vi tamin E TPGScopolymer,其紫杉醇最高载药量仅为5%(w/w)。中国发明专利CN1760213A公开了一种季铵化壳聚糖衍生物，只是其聚合物中的脂肪酸链的长度(6 11)较短，且缺乏主动靶向肿瘤的靶头。
一般聚合物胶束不能从网状内皮系统逃逸，可被单核巨噬细胞系统清除。且自聚物在肿瘤部位的不充分摄取降低了给药剂量的药物疗效，非特异性的相关正常组织毒副作用限制了最大给药剂量的安全使用。为了完成肿瘤靶向给药，可以利用在肿瘤组织特定过度表达的独特的分子标记物。众所周知，去唾液酸糖蛋白是在肝脏肿瘤中过度表达，乳糖酸作为配体作用于细胞膜并通过去唾液酸糖蛋白受体促进纳米粒的内吞作用。乳糖酸类化合物作为肝脏肿瘤靶向的生理性配体，与肿瘤特异性单克隆抗体相t匕，具有费用低，高度的化学和生物稳定性、无免疫原型、与受体的高度亲和性，较快的肿瘤摄取等特点。综上所述，研制一种可逃避巨噬细胞吞噬的主动靶向纳米胶束作为难溶性抗肿瘤药物的载体有重要意义
发明内容
针对上述现有技术存在的不足，本发明的目的是提供一种乳糖酸修饰的复合物，作为介导靶向聚合物纳米胶束，用于包载难溶性抗肿瘤药，制得的载药聚合物胶束能有效逃避巨噬细胞的吞噬，延长药物在体内的滞留时间，并可通过受体途径有效摄入肿瘤细胞，增加药物在肿瘤组织的分布，提高疗效，降低毒副作用，达到靶向治疗的效果。本发明是通过以下技术方案实现的提供一种乳糖酸修饰的脂肪酸-三甲基壳聚糖聚合物，它的结构式为
权利要求
1.ー种乳糖酸修饰的脂肪酸-三甲基壳聚糖聚合物，其特征在于它的结构式为
2.根据权利要求I所述的乳糖酸修饰的脂肪酸-三甲基壳聚糖聚合物，其特征在于取代度X为20 40%。
3.根据权利要求I所述的乳糖酸修饰的脂肪酸-三甲基壳聚糖聚合物，其特征在于取代度y为10 20%。
4.根据权利要求I所述的乳糖酸修饰的脂肪酸-三甲基壳聚糖聚合物，其特征在于取代度z为5 10%。
5.根据权利要求I所述的乳糖酸修饰的脂肪酸-三甲基壳聚糖聚合物，其特征在于脱こ酰度为90 95%。
6.—种如权利要求I所述的乳糖酸修饰的脂肪酸-三甲基壳聚糖聚合物的制备方法，其特征在于包括如下步骤 (1)取壳聚糖加入N-甲基吡咯烷酮、NaI、NaOH水溶液和碘甲烷，壳聚糖的质量浓度为8 20%，充分搅拌下升温至40 100°C反应I 2. 5h，冷却，离心，收集下层固体溶于NaCl溶液中，搅拌置换碘离子，经截留分子量为7000 12000的透析袋透析36 96h，干燥得到三甲基壳聚糖； (2)按浓度2 4g/L将长链脂肪酸溶于有机溶剂A中，用I 2倍摩尔量的1-(3-ニ甲氨基丙基)-3-こ基碳ニ亚胺盐酸盐和N-羟基丁ニ酰亚胺活化后挥干有机溶剂A，按浓度3 7g/L将得到的反应物溶于有机溶剂B中，再加入同等体积的三甲基壳聚糖水溶液反应，冷却离心，上层液体经截留分子量为7000 12000的透析袋透析36 96h，干燥后得到脂肪酸-三甲基壳聚糖；所述的有机溶剂A包括ニ氯甲烷、三氯甲烷、甲醇或こ醇中的ー种或几种；所述的有机溶剂B包括甲醇、こ醇或它们的混合液； (3)以2 10g/L脂肪酸-三甲基壳聚糖为基准，称取I I.5倍摩尔量的乳糖酸、O. 8 I. 5倍摩尔量的I- (3- ニ甲氨基丙基)-3-こ基碳ニ亚胺盐酸盐和O. 8 I. 5倍摩尔量的N-羟基丁ニ酰亚胺，混合后溶于蒸馏水中反应，冷却离心，上层液体经截留分子量为7000 12000的透析袋透析36 96h，干燥得到乳糖化修饰的脂肪酸-三甲基壳聚糖聚合物。
7.—种如权利要求I所述的乳糖酸修饰的脂肪酸-三甲基壳聚糖聚合物的应用，其特征在于将其作为主动靶向的载体材料，应用于制备抗肿瘤药物受体靶向纳米胶束制剂，制备步骤如下将抗肿瘤药物按浓度O. I O. 4g/L、乳糖酸修饰的脂肪酸-三甲基壳聚糖聚合物按浓度O. 5 lg/L溶于甲醇溶剂中，在温度为60 100°C的条件下旋转蒸发挥去有机溶剂后成膜；用纯水复溶后再用O. 45 μ m O. 8 μ m的微孔滤膜过滤，得到一种抗肿瘤药物受体祀向纳米胶束制剂。
8.根据权利要求7所述的一种乳糖酸、脂肪酸-三甲基壳聚糖聚合物的应用，其特征在于所述的抗肿瘤药物为去氢骆驼蓬碱、紫杉醇、阿霉素或喜树碱。
全文摘要
本发明公开了乳糖酸修饰的脂肪酸-三甲基壳聚糖聚合物、制备方法及应用，是一种主动靶向的纳米胶束载体材料，本发明采用水溶性良好的三甲基壳聚糖为载体材料，用脂肪酸进行疏水性改造，然后用乳糖酸表面修饰，制成乳糖酸介导肿瘤组织靶向的聚合物胶束。以去氢骆驼蓬碱为模型药物擦偶自组装制备载药纳米胶束，经试验证实，该载药纳米胶束载药量和包封率高，具有缓释性，通过乳糖酸受体途径有效摄入细胞，增加药物在肿瘤组织的分布，从而提供疗效，降低毒副作用，达到靶向治疗的目的。该发明为难溶性抗肿瘤药物提供了一种理想的新型药物载体和制剂形式。
文档编号A61K47/36GK102863557SQ20121038730
公开日2013年1月9日 申请日期2012年10月12日 优先权日2012年10月12日
发明者张学农, 贝永燕, 陈维良, 朱爱军 申请人:苏州大学