用于抑制或治疗多重耐药细菌的富里酸与抗生素组合物的制作方法
【专利摘要】富里酸作为有效成分用于治疗或抑制多重耐药细菌，特别是产生碳青霉烯酶的NDM-1细菌或超广谱β内酰胺酶(ESBL)耐药细菌。多重耐药细菌可以是革兰氏阴性菌，包括但不限于肺炎克雷伯菌或大肠杆菌。富里酸可以与碳青霉烯类或多粘菌素抗生素类中的一种或多种抗生素组合使用。
【专利说明】用于抑制或治疗多重耐药细菌的富里酸与抗生素组合物
[0001] 发明背景
[0002] 本发明涉及富里酸作为有效成分用于治疗或抑制多重耐药细菌，特别是产生碳青 霉烯酶的NDM-1细菌或超广谱β内酰胺酶（ESBL)耐药细菌。本发明还涉及富里酸作为有 效成分与碳青霉烯类或多粘菌素抗生素类中的一种或多种抗生素组合用于治疗多重耐药 细菌，特别是产生碳青霉烯酶的NDM-1细菌。
[0003] 富里酸是环境中植物和动物残体在腐烂的过程中所形成的腐殖质的一部分 (MacCarthy et al.，1985)，并且它在所有pH值条件下都溶于水。与同样在腐殖质中发现 的腐殖酸相比，它通常具有较低的分子大小和分子量，以及较低的色度。
[0004] 通常，使用可控湿式氧化工艺由烟煤生产富里酸（Bergh et al.，1997)。这些富 里酸通常被称为氧化富里酸。美国专利第4, 912, 256号描述了由煤炭生产富里酸的这类方 法。
[0005] 国际专利公开第W000/19999号已经公开了使用富里酸治疗炎症、痤疮、湿疹以及 细菌、真菌和病毒感染。另外，美国专利号第4, 999, 202号和第5, 204, 368号公开了包含富 里酸、其盐或衍生物的组合物，其具有抑菌或杀菌特性，且可用作消毒剂。
[0006] 但是，源自煤的氧化的富里酸含有高浓度的重金属，包括铝、汞、镉、铬和铅，现已 知这些重金属对人体有害，且应该在药物制剂中避免。国际专利公开第W02007/125492号 公开了通过湿式氧化法得到源自碳水化合物的富里酸组合物和生产这种组合物的方法。由 于碳水化合物为原材料，因此通过这种方法生产的富里酸含有低量的这些有害元素。已描 述这种组合物可用于药物应用。
【发明内容】
[0007] 根据本发明的一个方面，提供了富里酸或其盐、酯或衍生物作为有效成分用于治 疗或抑制多重耐药细菌。
[0008] 特别是，多重耐药细菌是产生碳青霉烯酶的NDM-1阳性细菌或超广谱β内酰胺酶 (ESBL)耐药细菌。例如，多重耐药细菌可以是革兰氏阴性菌，包括但不限于肺炎克雷伯菌 (Klebsiella pneumoniae)或大肠杆菌（Escherichia coli) 〇
[0009] 根据本发明的另一方面，提供了包含富里酸或其盐、酯或衍生物作为有效成分与 碳青霉烯类或多粘菌素抗生素类中的一种或多种抗生素的组合物，用于治疗多重耐药细 菌。
[0010] 特别是，多重耐药细菌是产生碳青霉烯酶的NDM-1阳性细菌。例如，多重耐药细菌 可以是革兰氏阴性菌，包括但不限于肺炎克雷伯菌。
[0011] 优选地，所述碳青霉烯选自美罗培南、厄他培南、多尼培南、帕尼培南/倍他米隆 和比阿培南。
[0012] 优选地，所述多粘菌素抗生素选自硫酸粘菌素和多粘菌素 E甲磺酸钠 (colistimethate sodium)(粘杆菌素甲基横酸钠 （colistin methanesulfonate sodium)、 粘杆菌素甲基横酸钠 （colistin sulfomethate sodium))。
[0013] 富里酸或其盐、酯或衍生物的pH值可以为从酸性到碱性的任何pH值，尽管其pH 值通常是从酸性到中性。富里酸可以是缓冲至适当的pH值的溶液的形式。优选地，富里酸 是酸或盐的形式，例如钾盐。
[0014] 优选的富里酸是如W02007/125492中描述的碳水化合物衍生的富里酸（CHD-FA)。 在本公开中描述的富里酸的分子量不超过20, 000道尔顿，且低含量的元素铝、汞、镉、铬和 铅对于在人类和动物中的药物用途是安全的。优选地，这些元素的含量都不超过20ppm。所 述富里酸可源自碳水化合物如糖类。优选的糖类为蔗糖、葡萄糖或果糖。
[0015] 可以将富里酸或其盐、酯或衍生物或组合物配制成药物剂型，尤其是液体、片剂、 胶囊、乳剂、凝胶或本领域技术人员已知的其它药物剂型。
[0016] 根据本发明的另一个方面，提供了本发明的富里酸或其盐、酯或衍生物或组合物 在制造用于治疗或抑制个体中多重耐药细菌的方法的药物组合物中的用途，所述方法包括 对个体施用富里酸或其盐、酯或衍生物或组合物。
[0017] 根据本发明的另一方面，提供了通过使用本发明的富里酸、或盐、酯或其衍生物或 组合物而治疗、杀死或抑制多重耐药细菌生长的方法。
[0018] 特别是，治疗、杀死或抑制多重耐药细菌生长的方法可以通过对个体施用有效量 的本发明的富里酸或其盐、酯或衍生物或组合物而在所述个体内进行。
[0019] 所述个体可以是人或非人类动物。
[0020] 特别是，多重耐药细菌是产生碳青霉烯酶的NDM-1阳性细菌或超广谱β内酰胺酶 (ESBL)耐药细菌。例如，多重耐药细菌可以是革兰氏阴性菌，包括但不限于肺炎克雷伯菌或 大肠杆菌。
[0021] 施用可以是口服、静脉注射、外用或任何其它合适的施用形式。
【专利附图】
【附图说明】
[0022] 图1显示了在所有治疗组中感染肺炎克雷伯菌（ATCC BAA2146，NDM-1+)后的平均 大腿荷载（thigh burden)。
[0023] 图2显示了在所有治疗组中感染肺炎克雷伯菌（ATCC BAA2146，NDM-1+)后的大腿 荷载散点图。
[0024] 发明详述
[0025] 本文描述了富里酸作为有效成分用于治疗多重耐药细菌，特别是产生碳青霉烯酶 的NDM-1细菌或超广谱β内酰胺酶（ESBL)耐药细菌。此外，描述了富里酸作为有效成分 与碳青霉烯类或多粘菌素抗生素类中的一种或多种抗生素组合用于治疗多重耐药细菌，特 别是产生碳青霉烯酶的NDM-1细菌。
[0026] 2008年在肺炎克雷伯菌分离物中首次检测到新德里金属β-内酰胺酶-1(或 NDM-1)。然而，它后来在世界各地的细菌中被检测出来，包括印度、巴基斯坦、英国、北美、日 本和巴西。通常，上述酶是由革兰氏阴性菌如大肠杆菌、不动杆菌（Acinetobacter)和克雷 伯菌（Klebsiella)产生，但是，NDM-1基因可以通过基因水平转移在不同的细菌菌株间传 播，从而扩大了抗药感染的发病率。尤其是革兰氏阴性菌，它们的DNA片段的交换混杂，因 此抗性例如NDM-1抗性可以通过革兰氏阴性菌群广泛传播。
[0027] 超广谱β内酰胺酶（ESBL)是能水解广谱头孢菌素的β -内酰胺酶，广谱头孢菌素 为例如头孢噻厢、头孢曲松、头孢他陡和氧亚氨基-内酰胺氨曲南（oxyimino-monobactam aztreonan)，它们都具有氧亚氨基侧链（oxyimino side chain)。
[0028] NDM-1是使细菌对广泛的β -内酰胺类抗生素如碳青霉烯家族的抗生素产生抗性 的酶。例如，碳青霉烯包括美罗培南、厄他培南、多尼培南、帕尼培南/倍他米隆和比阿培 南。不幸的是，这些抗生素目前是用于治疗抗生素耐药细菌感染的中流砥柱，因此这种抗性 基因是受到高度关注的原因。NDM-1蛋白质属于β-内酰胺酶大家族，即碳青霉烯酶，且产 生碳青霉烯酶的细菌感染很难治疗，因为几乎没有新的化合物能对抗这些多重耐药细菌。 此外，由于希望避免抗性的广泛发展，和通常碳杂青霉烯的口服生物利用度差这一事实，在 医院里它们被选择性地进行静脉注射施用。
[0029] 已经被成功地用于抗产生碳青霉烯酶的多重耐药细菌的碳青霉烯酶的一种替 代抗生素是粘菌素。粘菌素（或多粘菌素 Ε)是由多粘芽肥杆菌粘菌素变种（Bacillus polymyxa var. colistinus)的某些菌株产生的抗生素。其也是用于多重耐药细菌如克雷 伯菌、铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa)和不动杆菌的最后使用的抗生素，但不幸 的是对粘菌素的耐药性已经被确定。粘菌素不会经由胃肠道吸收，因此必须予以静脉注射。 此外，配量是复杂的。
[0030] 因此，可以口服使用的替代有效药剂非常有利。
[0031] 富里酸是W02007/125492中描述的且通过其中描述的方法产生的富里酸，并且下 文中称为CHD-FA。
[0032] 在本文所描述的第一项研究中，评估了富里酸抗若干多重耐药细菌菌株的抗菌功 效。
[0033] 第二项研究评估了富里酸与来自碳青霉烯家族的抗生素一起抗NDM-1多重耐药 细菌菌株的抗菌功效。
[0034] 以下实施例仅用于说明的目的，且不应解释为以任何形式对本发明进行限制。
[0035] 实施例1 :富里酸的抗多重耐药细菌的抗菌活性
[0036] 概要
[0037] 对CHD-FA体外抗多重耐药肠杆菌（Enterobactenaceae)活性的功效进行评估。递 送后，将CHD-FA有效成分于室温下避光保存。
[0038] 方法
[0039] a)菌株
[0040] 对一系列多重耐药肠杆菌菌株进行药敏试验。所用菌株的详情列于表1中。
[0041] b)菌株的复活及生长
[0042] 通过在CLED琼脂平板上传代培养，所有菌株从-80°C下的长期存储物恢复。然后， 将平板在空气中于35-37°C下培养24小时。肉眼检查以确保纯净和适当的菌落特征后，分 离物被认为适合使用。
[0043] 表1 :含NDM-1和KPC的肠杆菌菌株（研究1)
[0044]
【权利要求】
1. 富里酸或其盐作为有效成分用于治疗或抑制多重耐药细菌。
2. 根据权利要求1所述的富里酸或其盐，其中所述多重耐药细菌是产生碳青霉烯酶的 NDM-1阳性细菌或超广谱β内酰胺酶（ESBL)耐药细菌。
3. 根据权利要求1或2所述的富里酸或其盐，其中所述多重耐药细菌是革兰氏阴性菌， 包括但不限于肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae)或大肠杆菌（Escherichia coli)。
4. 包含富里酸或其盐作为有效成分与来自碳青霉烯类或多粘菌素抗生素类中的一种 或多种抗生素的组合物，用于治疗多重耐药细菌。
5. 根据权利要求1-3中任一项所述的富里酸或其盐，或根据权利要求4所述的组合物， 其中所述多重耐药细菌是产生碳青霉烯酶的NDM-1阳性细菌。
6. 根据权利要求5所述的富里酸或其盐或组合物，其中所述产生碳青霉烯酶的NDM-1 阳性细菌是革兰氏阴性菌，包括但不限于肺炎克雷伯菌。
7. 根据权利要求4所述的组合物，其中所述碳青霉烯选自美罗培南、厄他培南、多尼培 南、帕尼培南/倍他米隆和比阿培南，且其中所述多粘菌素抗生素选自硫酸粘菌素和多粘 菌素 E甲横酸钠（包括粘杆菌素甲基横酸钠 （colistin methanesulfonate sodium)和粘 杆菌素甲基横酸钠 （colistin sulfomethate sodium))。
8. 根据权利要求1-3、5或6中任一项所述的富里酸或其盐，或根据权利要求4-7中任 一项所述的组合物，其中所述富里酸或其盐的pH值为从酸性到中性。
9. 根据权利要求1_3、5、6或8中任一项所述的富里酸或其盐，或根据权利要求4-8中 任一项所述的组合物，其中所述富里酸是碳水化合物衍生的富里酸（CHD-FA)。
10. 根据权利要求1_3、5、6、8或9中任一项所述的富里酸或其盐，或根据权利要求4-9 中任一项所述的组合物，其可配制成药物剂型。
11. 根据权利要求10所述的富里酸或其盐或组合物，其中所述药物剂型是液体、片剂、 胶囊、乳剂、凝胶或本领域技术人员已知的其它药物剂型。
12. 根据权利要求1_3、5、6或8-11中任一项所述的富里酸或其盐，或根据权利要求 4-11中任一项所述的组合物在制造用于治疗或抑制个体中多重耐药细菌的方法的药物组 合物中的用途，所述方法包括对所述个体施用所述富里酸或其盐或组合物。
13. 通过使用权利要求1-3、5、6、或8-11中任一项所述的富里酸或其盐，或根据权利要 求4-11中任一项所述的组合物，治疗、杀死或抑制多重耐药细菌生长的方法。
14. 根据权利要求13所述的方法，其中所述治疗、杀死或抑制多重耐药细菌生长是通 过施用有效量的所述富里酸或其盐或所述组合物进行。
15. 根据权利要求12所述的用途或根据权利要求14所述的方法，其中所述个体是人或 非人类动物。
16. 根据权利要求12所述的用途或根据权利要求14或权利要求15所述的方法，其中 所述多重耐药细菌是产生碳青霉烯酶的NDM-1阳性细菌或超广谱β内酰胺酶（ESBL)耐药 细菌。
17. 根据权利要求16所述的用途或方法，其中所述多重耐药细菌是革兰氏阴性菌，包 括但不限于肺炎克雷伯菌或大肠杆菌。
18. 根据权利要求12所述的用途或根据权利要求14或权利要求15所述的方法，其中 所述施用是口服、静脉注射、外用或任何其它合适的施用形式。
【文档编号】A61P31/04GK104203227SQ201380012421
【公开日】2014年12月10日 申请日期:2013年3月6日 优先权日:2012年3月7日
【发明者】斯蒂芬·威廉·雷弗斯, 彼得·沃恩 申请人:南彻森英国有限公司