一种具有耐草甘膦功能的细菌及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明发现沙漠红细菌Rhodobacter?shamoensis?W402具有耐草甘膦功能，可作为胁迫环境修复的功能菌株，并可构建转基因生物，培育抗逆境生物。
【专利说明】—种具有耐草甘膦功能的细菌及其应用
【技术领域】
[0001]本 发明属于微生物【技术领域】，涉及一种具有耐草甘膦功能的沙漠红细菌。本发明还涉及该菌作为草甘膦污染环境修复的功能菌株方面的应用。
【背景技术】
[0002]草甘膦是全世界使用量最大的除草剂品种之一，但它作为一种非选择性除草剂，对农作物同样有灭生性作用，这大大限制了草甘膦在农业生产中的应用范围。虽然目前国际国内对耐草甘膦菌株的开发和研究较多，大多集中在假单胞菌属。Rhodobacter属耐草甘膦微生物却鲜有报道。
[0003]因此，筛选新的具有优良草甘膦耐受性的菌株对于草甘膦土壤环境的修复及克隆新的抗草甘膦基因意义重大，可为转基因抗草甘膦作物的培育提供新的资源。同时，通过对其抗草甘膦机理的研究，进一步加深人们对于草甘膦耐受性产生机理的认识，构建新的转基因生物，使其获得其它优良性状。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是分离出具有耐草甘膦功能的新种微生物。
[0005]本发明人发现并分离培养出一种新的菌种，经鉴定确认该菌种属于红细菌，被命名为沙漠红细菌，Rhodobacter shamoensis【sha.m0.en’ sis.N.L.masc.adj.】。本发明发现该菌具有耐草甘膦功能。
[0006]该菌种已在国家知识产权局指定的保藏单位中国普通微生物菌种保藏中心保藏。
[0007]本发明的耐草甘膦沙漠红细菌具有下述特征:
[0008]1.形态特征
[0009]在电子显微镜下可见，为杆状细菌(图3)。
[0010]2.在各种培养基上的特征:
[0011]在LB琼脂培养基上，菌落呈现柠檬黄色、凸起状，表面湿润，边缘整齐，无胞外分泌物(图2)。
[0012]在TGY培养基上长势缓慢。
[0013]3.生理生化特征
[0014]该菌株为严格好氧生长，革兰氏阴性，无运动性，非自养菌株。白氨酸芳胺酶阳性，酸性磷酸酶阳性，萘酚-AS-B1-磷酸水解酶阳性，α -葡萄糖甙酶阳性。
[0015]4.碳源利用
[0016]能以葡萄糖、乳糖、半乳糖、果糖、L-鼠李糖、L-丙氨酸、D-甘露糖为碳源,但不能以L-海藻糖、蔗糖、D-纤维二糖、D-蜜二糖和α -环糊精等为碳源。
[0017]5.其它性质
[0018]最适生长温度30 °C。细胞壁脂肪酸含有Summed Feature8 (C18:1 ω 7c and/or C18:1 ω 6c)，C18:0, ll_MethylC18:1 ω 7c, C17:0, C10:03_OH，C16:0 和 C12:03_OH，其中以 SummedFeature8 (C18:1 ω 7c and/or Cl8llCoGchCl81c^PIll-Methyl C18:1co7c 为主。
[0019]所述的耐草甘膦沙漠红细菌的培养条件为:
[0020](1)培养基:采用LB琼脂培养基。具体配方为:胰蛋白胨10g/L，酵母提取物5g/L，氯化钠10g/L
[0021](2)pH7.0 ；
[0022](3)培养温度:30°C。
[0023]本发明发现的耐草甘膦沙漠红细菌的16SrDNA与同属的其它种的差异显著(相似度〈96%):
[0024]与Rhodobacter capsulatus ATCCl 1166 的相似度为 ％.833% ；
[0025]与Rhodobacter sphaeroides2.4.1 的相似度为 95.681% ；
[0026]与Haematobacter missouriensis H1892 的相似度为 95.529% ；
[0027]与Rhodobacter megalophilus JA194 的相似度为 95.309% ；
[0028]与Rhodobacter veldkampii ATCC35703 的相似度为 95.202% ；
[0029]与Rhodobacter azotoformans KA25 的相似度为 94.337% ；
[0030]与Rhodobacter aestuarii JA296 的相似度为 93.486% 等等。
[0031]此外，与红细菌属标准菌株-Rhodobacter capsulatus ATCC11166的对比实验
显示，本发明发现的耐草甘膦沙漠红细菌与标准菌株的微生物学特性有显著差异(表1)。
[0032]表1耐草甘膦沙漠红细菌与R.capsulatusATCC11166的微生物学特性比较
[0033]
【权利要求】
1.沙漠红细菌(Rhodobactershamoensis),其保藏编号为:CGMCC8817。
2.权利要求1所述的沙漠红细菌作为草甘膦污染环境修复的功能菌株的应用。
3.权利要求1所述的沙漠红细菌在构建具有抗草甘膦功能的转基因生物方面的应用。
4.权利要求1所述的沙漠红细菌在诱变育种和改良植物的抗草甘膦功能性状方面的应用。
【文档编号】C12N1/20GK103911317SQ201410083783
【公开日】2014年7月9日 申请日期:2014年3月7日 优先权日:2014年3月7日
【发明者】张维, 吴港, 王琳, 林敏 , 陈明 申请人:中国农业科学院生物技术研究所