瑞舒伐他汀中间体的酶法制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种瑞舒伐他汀中间体的酶法制备方法。该方法是在有机溶剂中，以式（Ⅰ）化合物为底物，在脂肪酶和手性有机胺的作用下，再添加壳聚糖或壳聚糖复合物进行反应，生成式（Ⅱ）化合物，即为瑞舒伐他汀手性中间体。本发明有效地提高了反应速度，减少了副反应，且降低了副产物对酶的毒害作用，酶的重复利用率高；同时本发明的产物收率和ee值高，操作简便，具有优越的工业化应用价值。
【专利说明】瑞舒伐他汀中间体的酶法制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种瑞舒伐他汀手性中间体的脂肪酶催化制备方法，属于制药和生物化工【技术领域】。
【背景技术】
[0002]心脑血管疾病是危害人类(特别是中老年)健康最常见、最严重的疾病之一。根据近年卫生部在全国范围内进行的中国居民营养与健康状况调查显示，总患病率为18.6%，全国患者总人数达1.6亿。他汀类药物是目前治疗高血压、高血脂等心血管疾病最有效的药物。
[0003]瑞舒伐他汀在药效和安全性方面均达到令人满意的结果，被称为“超级他汀”。该他汀由阿斯利康(Astrazeneca)公司研究开发并于2002年11月首次在荷兰获批,2003年8月通过美国FDA上市审批，2009年在全球销售额高达44亿美元。 [0004]在瑞舒伐他汀的合成和制备工艺中，高光学纯度(> 99% )的手性侧链的合成是关键步骤，同时也是难点。利用传统的化学合成的方法，由于(S)-3-羟基戊二酸单甲酯或单乙酯的碳链长度比较短，而且含有羟基、羧基和酯基等活泼基团，很容易破坏产物分子的结构，其制备成本相比其他他汀类药物要高出许多，所以销售价格一直居高不下，制约了其市场的开拓和发展，同时也妨碍了心血管疾病的有效控制和治疗。
[0005]目前多篇文献已经报道了脂肪酶法催化转胺反应获得瑞舒伐他汀手性中间体
[5]-3-羟基戍二酸单甲酯或单乙酯。SusanaPuertas等[J.0rg.Chem.1996, 61, 6024-6027]在1996年的时候就报道了脂肪酶催化不带支链的有机胺胺解3-羟基戊二酸二甲酯，反应在1，4_ 二氧六环中进行，加入4A分子筛并且通氮气保护，产物的ee值仅为80%。Sa' nchez等[J.0rg.Chem.1999，64，1464-1470]在同样的反应条件下，采用消旋苯乙胺胺解3-羟基戊二酸二甲酯，ee值较高能达到96%，但是产物的收率仅为45%。该反应虽然获得了很好的选择性，但是收率较低，反应体系中的水含量对于脂肪酶催化胺解反应影响很大。
[0006]脂肪酶法催化转胺反应获得瑞舒伐他汀手性中间体的方法存在着以下几个问题:(1)溶剂1，4-二氧六环的水分含量较高，会导致脂肪酶水解的副产物产生；(2)副产
物甲醇量大，对酶有毒害作用；(3) 41分子筛容易吸附氮气，从而影响其对水和甲醇的吸
附能力；(4)苯乙胺的利用率最高仅为50%，反应后处理复杂，需要通氯化氢将反应剩余的S- (-) - α -苯乙胺成盐后水洗除去。
【发明内容】
[0007]本发明的目的在于，提供一种瑞舒伐他汀中间体的酶法制备方法。本发明有效地提高了反应速度，减少了副反应，且降低了副产物对酶的毒害作用，使得酶的重复利用率高；同时本发明的产物收率和ee值高，操作简便，具有优越的工业化应用价值。
[0008]为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案如下:一种瑞舒伐他汀中间体的酶法制备方法，在有机溶剂中，以式(I )化合物为底物，在脂肪酶和手性有机胺的作用下，再添加壳聚糖或壳聚糖复合物进行反应，生成式(II)化合物，即为瑞舒伐他汀手性中间体。
[0009]
【权利要求】
1.瑞舒伐他汀中间体的酶法制备方法，其特征在于:在有机溶剂中，以式(I)化合物为底物，在脂肪酶和手性有机胺的作用下，再添加壳聚糖或壳聚糖复合物进行反应，生成式(II)化合物，即为瑞舒伐他汀手性中间体。 η πη π-〇 OH O 三 Rh0A^AcrR1 + h2n^O —、人"人>0^^+ Rl0H
I
2.根据权利要求1所述的瑞舒伐他汀中间体的酶法制备方法，其特征在于:所述R1为C1-C4直链或支链烷基。
3.根据权利要求2所述的瑞舒伐他汀中间体的酶法制备方法，其特征在于:所述R1为甲基或乙基。
4.根据权利要求1所述的瑞舒伐他汀中间体的酶法制备方法，其特征在于:所述的手性有机胺为R- ( + )_α_苯乙胺。
5.根据权利要求1所述的瑞舒伐他汀中间体的酶法制备方法，其特征在于:所述的脂肪酶为 lipaseTLIM、Novozym435> 猪胰脂肪酶 PPL、IipasePS “Amano，，SD 或IipaseAK “Amano，，。
6.根据权利要求5所述的瑞舒伐他汀中间体的酶法制备方法，其特征在于:所述的脂肪酶为 Novozym435 。
7.根据权利要求1所述的瑞舒伐他汀中间体的酶法制备方法，其特征在于:所述的有机溶剂为甲苯。
8.根据权利要求7所述的瑞舒伐他汀中间体的酶法制备方法，其特征在于:所述的甲苯与式(I )化合物的质量比为I~10倍。
9.根据权利要求1所述的瑞舒伐他汀中间体的酶法制备方法，其特征在于:所述壳聚糖或壳聚糖复合物的分子量为2 X IO5~5X 105。
10.根据权利要求9所述的瑞舒伐他汀中间体的酶法制备方法，其特征在于:所述的壳聚糖复合物为聚乙二醇的壳聚糖复合物。
11.根据权利要求1所述的瑞舒伐他汀中间体的酶法制备方法，其特征在于:所述的反应在氮气保护下进行。
12.根据权利要求1所述的瑞舒伐他汀中间体的酶法制备方法，其特征在于:所述脂肪酶与式(I)化合物的质量比为0.001~100: I。
13.根据权利要求12所述的瑞舒伐他汀中间体的酶法制备方法，其特征在于:所述脂肪酶与式(I)化合物的质量比为0.1~0.2: I。
14.根据权利要求1所述的瑞舒伐他汀中间体的酶法制备方法，其特征在于:所述手性有机胺与式(I )化合物的摩尔比为0.01~50: I。
15.根据权利要求14所述的瑞舒伐他汀中间体的酶法制备方法，其特征在于:所述手性有机胺与式(I )化合物的摩尔比为1.05~1.1: I。
16.根据权利要求1所述的瑞舒伐他汀中间体的酶法制备方法，其特征在于:所述壳聚糖或壳聚糖复合物与式(I )化合物的质量比为0.01~100: I。
17.根据权利要求16所述的瑞舒伐他汀中间体的酶法制备方法，其特征在于:所述壳聚糖或壳聚糖复合物与式(I)化合物的质量比为0.5~2: I。
18.根据权利要求1所述的瑞舒伐他汀中间体的酶法制备方法，其特征在于:所述反应的温度为-10~90°C。
19.根据权利要求18所述的瑞舒伐他汀中间体的酶法制备方法，其特征在于:所述反应的温度为30~40°C。
20.根据权利要求1所述的瑞舒伐他汀中间体的酶法制备方法，其特征在于:所述反应的时间为I~72h。
21.根据权利要求20所述的瑞舒伐他汀中间体的酶法制备方法，其特征在于:所述反应的时间为8~12h。
22.根据权利要求1至21任一项所述的瑞舒伐他汀中间体的酶法制备方法，其特征在于:反应后所得的反应液，经过滤除去脂肪酶和壳聚糖或壳聚糖复合物，再通空气30~400min，水溶液萃取I~3次，水相用二氯甲烷萃取2~5次，合并所有有机相，旋转蒸发干燥得粗产品，再经乙酸乙酯重结晶得式(II )化合物。
23.根据权利要求22所述的瑞舒伐他汀中间体的酶法制备方法，其特征在于:再通空气60~120min，水溶液 萃取I次，水相用二氯甲烷萃取3次。
【文档编号】C12P13/02GK104017837SQ201410083458
【公开日】2014年9月3日 申请日期:2014年3月7日 优先权日:2014年3月7日
【发明者】黄悦, 朱建荣, 金志平 申请人:浙江京新药业股份有限公司, 上虞京新药业有限公司