多巴脱羧酶抑制剂组合物的制作方法

本发明提供卡比多巴(carbidopa)和任选的左旋多巴(levodopa)的药物组合物、其含有安全且耐受浓度的肼(hydrazine)浓度，以及使用方法和包括它们的试剂盒。
背景技术：
：帕金森病是退行性病况，其特征在于脑中神经递质多巴胺的浓度降低。左旋多巴(L-多巴或L-3,4-二羟基苯丙氨酸)是多巴胺的直接代谢前体，与多巴胺不同，左旋多巴能够穿过血脑屏障，并且最常用于恢复脑中的多巴胺浓度。对于过去的40年，左旋多巴一直是治疗帕金森病的最有效的疗法。然而，即时在当前最好的普通护理标准下，左旋多巴在血浆中的半衰期仍很短，导致脉冲式的多巴胺刺激。因此，对于有些患者长期治疗因可表示明显残疾起因的症状波动(motorfluctuation)和运动障碍(dyskinesia)而复杂化。能够以更连续和生理的方式最终将左旋多巴/多巴胺传递至脑的治疗策略将提供运动并发症降低的标准左旋多巴的益处，并且是罹患帕金森病和其它神经或运动障碍的患者非常需要的(Olanow,Mov.Dis.,2008,23(Suppl.3),S613-S622)。已开发了缓释口服左旋多巴制剂，但是发现此类制品充其量也并不比标准片剂更有效。还通过使用携带式泵(ambulatorypump)或贴片尝试由十二指肠内施用或输注来连续施用左旋多巴。此类治疗，特别是十二指肠内的，是极为侵入性和不便的。左旋多巴向多巴胺的代谢转化是由芳族L-氨基酸脱羧酶催化的，该酶是遍在酶，在小肠粘膜、肝、脑和脑毛细血管中浓度特别高。由于左旋多巴的脑外代谢的可能性，有必要施用导致高的多巴胺脑外浓度的大剂量的左旋多巴，这在一些患者中引起恶心。因此，通常与例如卡比多巴或苄丝肼(benserazide)等多巴脱羧酶抑制剂的口服施用而同时施用左旋多巴，多巴脱羧酶抑制剂使临床反应要求的左旋多巴的剂量减少60-80％，并通过抑制脑外左旋多巴向多巴胺的转化而由此防止左旋多巴的某些副作用。各种口服制剂以及与左旋多巴的代谢性降解相关的酶抑制剂是众所周知的，例如脱羧酶抑制剂如卡比多巴和苄丝肼，单胺(monoamone)氧化酶(MAO)-A或MAO-B抑制剂如吗氯贝胺(moclobemide)、雷沙吉兰(rasagiline)、司来吉兰(selegiline)和沙芬酰胺(safinamide)，和儿茶酚-O-甲基转移酶(COMT)抑制剂如托卡朋(tolcapone)和恩他卡朋(entacapone)。现在可得的口服药包括，包含卡比多巴或左旋多巴的和CR缓释片；含有左旋多巴和苄丝肼的片；和含有卡比多巴、恩他卡朋和左旋多巴的片。卡比多巴是DOPA脱羧酶的非竞争性抑制剂。当与左旋多巴混合时，卡比多巴抑制左旋多巴向多巴胺的外周转化。这导致可用于运输到CNS的增加的左旋多巴。卡比多巴还抑制左旋多巴在胃肠道的代谢，从而增加左旋多巴的生物利用度。它用于帕金森病，以减少多巴胺的外周作用。肼官能团的丧失代表卡比多巴的主要代谢途径。肼(N2H4)及其盐在制药工业中用作生产具有不同治疗效果的药物的中间体，包括脱羧酶抑制剂，抗高血压药和抗菌剂。它已经成为对中枢神经系统，肝脏和肾脏的严重不良影响的原因。除了这些效果之外，实验动物还显示以下症状：体重减轻，贫血，低血糖，肝脏的脂肪变性和惊厥。肼已经显示引起DNA损伤，基因突变和染色体畸变(环境健康标准(Environmentalhealthcriteria)No.68肼(1987))，并且在口服、腹膜内和吸入施用后在小鼠、仓鼠和大鼠中诱导肿瘤生长(MacEwan,J.D.,Vernot,E.H.,HaunC.C.,等人,ChronicinhalationtoxicityofHydrazine:oncogeniceffects(1981).AirForceAerospaceMedicalResearchLaboratory,Wright-PattersonAirForceBase,Ohio,NTISSpringfieldVA)。由于肼是有毒的，并且认为是可能的人类致癌物，因此在欧洲药典(Ph.Eur.)的专论中限制其在某些这些药物中的存在。因此，对于含有安全耐受量的肼、能够实现更有效地治疗如帕金森病等运动障碍的连续多巴胺能刺激的液体制剂和组合物有现实紧迫的需求。技术实现要素：现在已经发现，根据本发明，包含两种抗氧化剂或邻醌清除剂的特定组合的卡比多巴制剂，其中那些抗氧化剂中的一种是抗坏血酸或其盐，比仅含有单一抗氧化剂的那些制剂显著更稳定。如特别发现的，由抗坏血酸或其盐、和一种或多种另外的抗氧化剂组成的特定抗氧化剂组合强烈抑制卡比多巴降解，从而显著降低即限制不需要的降解产物的形成，特别是3,4-二羟苯基-2-甲基丙酸(本文中鉴别为(identified)为"降解物")和肼，并且基本上使制剂稳定。令人惊奇的是，还发现这种卡比多巴制剂可以在各种温度和条件下长时间储存，更特别地长达几年，其中维持肼的安全耐受浓度。在一个方面，本发明因此提供了包括卡比多巴、至少两种抗氧化剂和药学上可接受的载体的药物组合物，其中所述抗氧化剂之一是抗坏血酸或其盐，并且所述组合物包括通过气相色谱-质谱(GCMS)测定的小于1μg/ml的肼，或通过高效液相色谱(HPLC)测定的相对于卡比多巴初始量的小于5重量％的3,4-二羟基苯基-2-甲基丙酸。具体的这种药物组合物包括0.1重量％至10重量％，优选0.5重量％至6重量％的卡比多巴，和/或0.1重量％至10重量％，优选0.2重量％至2重量％的抗坏血酸或其盐。在特定的此类方面，本发明的药物组合物还包括(i)：左旋多巴；(ii)：精氨酸、葡甲胺(meglumine)或其组合；或(iii)：(i)和(ii)两者；并可任选地进一步包括表面活性剂。特别地，这种药物组合物包括小于1重量％、或1重量％至20重量％，优选2重量％至16重量％的左旋多巴；和/或0.1重量％至42重量％，优选2重量％至40重量％的精氨酸、葡甲胺、或精氨酸和葡甲胺的组合。根据本发明的具体药物组合物包括卡比多巴；抗坏血酸或其盐；除所述抗坏血酸或其盐以外的至少一种另外的抗氧化剂，例如L-半胱氨酸或其盐，N-乙酰半胱氨酸(NAC)或其盐，谷胱甘肽或其盐，二乙酰胱氨酸或其盐，或亚硫酸氢钠；左旋多巴；精氨酸，葡甲胺或其组合；和任选地表面活性剂，例如聚山梨醇酯80。更具体地，此类组合物包括(i)0.1重量％至10重量％，优选0.5重量％至6重量％的卡比多巴；(ii)0.1重量％至10重量％，优选0.2重量％至2重量％的抗坏血酸或其盐；(iii)0.001重量％至5重量％的L-半胱氨酸或其盐；0.001重量％至5重量％的NAC；或0.01重量％至2重量％的亚硫酸氢钠；(iv)小于1重量％、或1重量％至20重量％、优选2重量％至16重量％的左旋多巴；(v)0.1重量％至42重量％，优选2重量％至40重量％的精氨酸，葡甲胺或其组合；和任选地(vi)0.01重量％至5重量％的聚山梨醇酯80，其中所述组合物包括小于1μg/ml、优选小于0.5μg/ml、更优选小于0.1μg/ml的肼。如本文所示，本发明的药物组合物是高度稳定的，其中抗氧化剂的特定组合使卡比多巴稳定，从而使卡比多巴的降解最小化，从而抑制降解物和肼的形成。因此，那些组合物可以在各种条件下储存，例如在-20℃至25℃的范围内的温度下，基本上不降解，其中1-24小时、1-30天、1-12个月或1-3年后组合物的肼含量维持在小于1μg/ml，优选小于0.1μg/ml。在另一方面，本发明涉及治疗患者中(更具体地通常是指哺乳动物或特别是人中)的、与多巴胺或多巴胺能神经元的丧失有关的疾病、障碍或病症例如帕金森氏病的方法，所述方法包括对所述患者施用有效量的如上定义的药物组合物。本发明的方法可以包括基本上连续施用组合物。在另一方面，本发明涉及如上定义的药物组合物，其用于治疗与多巴胺或多巴胺能神经元的丧失相关的疾病、障碍或病症例如帕金森氏病。在另一方面，本发明涉及如上定义的药物组合物的用途，其用于制备用于治疗与多巴胺或多巴胺能神经元丧失相关的疾病、障碍或病症例如帕金森病的药物。在另一方面，本发明提供了试剂盒，其包括至少一个，即1、2、3或更多个容器，容器各自含有如上所定义的药物组合物，其中所述组合物的存在量足以治疗患者(即，患有与多巴胺或多巴胺能神经元的丧失相关的疾病，障碍或病症例如帕金森病的哺乳动物或人)，至少1、2、3、4或5天；1、2、3或4周；1至12(例如，1、2、3、6、9或12)个月；或1至20(例如，1、2、3、4、5、6、8、10或12)年。在一些实施方案中，组合物以单独的剂量存在。在任何这些方面的一些实施方案中，本发明的药物组合物、方法或试剂盒进一步包含或包含使用第二活性剂。这种第二剂可以是儿茶酚-O-甲基转移酶(COMT)抑制剂，例如托卡朋、恩他卡朋或其药学上可接受的盐。附图说明图1显示描绘保留时间为约14.5±0.2分钟时的主要杂质("降解物")的图。图2A-2B显示描绘来自制剂样品的所收集的主杂质峰的负(2A)和正(2B)模式的典型MS谱的图。图3A-3B显示描绘来自制剂样品的所收集的主杂质峰的典型MS/MS子体扫描(离子M/Z＝179)光谱(3A)和母体(离子M/Z＝105)光谱(parentspectrum)(3B)的图。具体实施方式本发明提供卡比多巴的药物组合物，其长期特别是几天、几周、几个月或几年是高度稳定的，并且含有非常低的含量，即安全耐受量的肼。虽然含有抗氧化剂的卡比多巴类组合物已经在现有技术中公开，但是本发明的药物组合物通过两种或更多种，即2、3、4或更多种抗氧化剂的特别组合而稳定，其中这些抗氧化剂之一是抗坏血酸或其盐，并且抗氧化剂组合的其他抗氧化剂各自独立地选自例如L-半胱氨酸、NAC、谷胱甘肽、二乙酰胱氨酸，上述的盐、或亚硫酸氢钠。此类组合物可以包括除卡比多巴以外的活性剂，特别是左旋多巴，以及用于进一步稳定组合物的其它成分，例如精氨酸(Arg；L-Arg)、葡甲胺、或精氨酸和葡甲胺，以及一种或多种表面活性剂。在一个方面，本发明提供了包括卡比多巴(和/或其酯)、至少两种抗氧化剂(本文也称为邻醌清除剂)、和药学上可接受的载体的药物组合物(本文也称为"药物制剂")，其中所述抗氧化剂之一是抗坏血酸或其盐，并且所述组合物包括通过GCMS测定的小于1μg/ml的肼，或通过HPLC测定的相对于卡比多巴初始量的至多(且不大于)5重量％的3,4-二羟苯基-2-甲基丙酸。在一些实施方案中，本发明的药物组合物包括通过GCMS测定的小于1.0、0.75、0.5、0.25、0.1、0.05或0.025μg/ml的肼，特别是通过GCMS测定小于0.1或0.05μg/ml的肼，或例如0.1至0.5μg/ml的肼；或通过HPLC测定的相对于卡比多巴初始量的小于5重量％，4重量％，3重量％，2重量％，1重量％，0.5重量％，0.3重量％，0.2重量％，0.1重量％或0.05重量％的降解物。在一些实施方案中，本发明的药物组合物包括0.1％至10重量％的卡比多巴。在具体的此类实施方案中，本发明的药物组合物包括0.5重量％至6重量％，优选0.75重量％至4重量％，更优选0.75重量％、1.4重量％、3重量％、3.3重量％或4重量％的卡比多巴。本发明的药物组合物包括两种或更多种抗氧化剂的组合，其中这些抗氧化剂之一是抗坏血酸或其盐。抗坏血酸盐的实例包括但不限于抗坏血酸钠，抗坏血酸钾，抗坏血酸钙，抗坏血酸硬脂酸酯(ascorbylstearate)和抗坏血酸棕榈酸酯，其中优选抗坏血酸钠。在一些实施方案中，本发明的药物组合物包括0.1重量％至10重量％的抗坏血酸或其盐。在具体的此类实施方案中，组合物包含0.2重量％至2重量％，优选0.4重量％至1.3重量％，更优选0.5重量％、0.6重量％、0.75重量％、0.85重量％、1.0重量％、1.2重量％、或1.3重量％的抗坏血酸或其盐，如抗坏血酸钠、抗坏血酸钾、抗坏血酸钙、抗坏血酸硬脂酸酯、和抗坏血酸棕榈酸酯。根据本发明，包括在本发明的药物组合物中的除了抗坏血酸或其盐以外的每一种抗氧化剂可以是任何抗氧化剂或邻醌清除剂，但优选此类抗氧化剂，其与抗坏血酸或其盐一起提供了组合，该组合可以强烈抑制卡比多巴的降解，从而使肼的形成最小化并因此使所述组合物基本上稳定足够长的时间，例如几小时、几天、几周、几个月或几年。在一些实施方案中，除抗坏血酸或其盐以外的抗氧化剂中的每一种独立地选自L-半胱氨酸(L-Cys)或半胱氨酸衍生物如NAC，谷胱甘肽，二乙酰胱氨酸，S-甲基-N-乙酰半胱氨酸酰胺，S-甲基-N-乙酰半胱氨酸甲基酰肼的乙酰衍生物，S-甲基半胱氨酸吗啉酰胺，和S-甲基-N-乙酰半胱氨酸吗啉酰胺，上述的盐，或亚硫酸氢盐如亚硫酸氢钠(sodiumbisulfite)、亚硫酸氢钠(sodiumhydrogensulfite)或偏亚硫酸氢钠，但优选来自L-半胱氨酸或其盐如半胱氨酸盐酸盐、NAC或亚硫酸氢钠。在具体的此类实施方案中，本发明的药物组合物包括(i)0.001重量％至5重量％，优选0.01重量％至1重量％，更优选0.1重量％至0.6重量％、0.3重量％或0.4重量％的L-半胱氨酸或其盐如半胱氨酸盐酸盐；和/或(ii)0.001重量％至5重量％，优选0.01重量％至1重量％，更优选0.1重量％、0.2重量％、0.3重量％或0.4重量％的NAC；和/或(iii)0.01重量％至2重量％，优选0.075重量％至0.75重量％，更优选0.1重量％的亚硫酸氢钠；和/或(iv)0.001重量％至5重量％，优选0.1重量％至1重量％的谷胱甘肽；和/或(v)0.001重量％至5重量％，优选0.01重量％至1重量％的二乙酰胱氨酸或其盐。在一些实施方案中，本发明的药物组合物包含0.1重量％至10重量％的卡比多巴；0.1重量％至10重量％的抗坏血酸或其盐如抗坏血酸钠、抗坏血酸钾、抗坏血酸钙、抗坏血酸硬脂酸酯或抗坏血酸棕榈酸酯；和(i)0.001重量％至5重量％的L-半胱氨酸或其盐，例如半胱氨酸盐酸盐；或(ii)0.001重量％至5重量％的NAC；或(iii)0.001重量％至5重量％的谷胱甘肽；或(iv)0.001重量％至5重量％的二乙酰胱氨酸或其盐；或(v)0.01重量％至2重量％的亚硫酸氢钠。特别的此类实施方案是其中组合物包括0.5重量％至6重量％，优选0.75重量％至4重量％，更优选0.75重量％，1.4重量％，3重量％，3.3重量％或4重量％的卡比多巴；0.2重量％至2重量％，优选0.4重量％至1.3重量％，更优选0.5重量％，0.6重量％，0.75重量％，0.85重量％，1.0重量％或1.2重量％的抗坏血酸或其盐；和(i)0.01重量％至1重量％，优选0.1重量％至0.6重量％的L-半胱氨酸或其盐；(ii)0.01重量％至1重量％，优选0.1重量％至0.4重量％的NAC；或(iii)0.075重量％至0.75重量％的亚硫酸氢钠。在具体的此类方面，根据上文定义的任一实施方案的本发明的药物组合物还包含(i)：左旋多巴(和/或其酯)；(ii)：精氨酸、葡甲胺、上述的盐、或其组合；或(iii)：(i)和(ii)两者；和任选地进一步包括表面活性剂。特别的此类组合物不包括左旋多巴。在一些实施方案中，本发明的药物组合物包括卡比多巴和至少两种抗氧化剂，各自如上述任一实施方案中所定义，并进一步包括左旋多巴。某些特定的此类组合物包括小于1重量％(例如，小于0.5重量％，0.25重量％，0.1重量％，0.05重量％，或0.01重量％)的左旋多巴，而其他组合物包含1重量％至20重量％，优选2重量％至16重量％(例如2重量％至8重量％，4重量％至8重量％，5重量％至7重量％，8重量％至16重量％，10重量％至15重量％，12重量％至15重量％)，更优选4重量％，6重量％，12重量％或13.2重量％的左旋多巴。在一些实施方案中，本发明的药物组合物包括卡比多巴和至少两种抗氧化剂，各自如上述任一实施方案中所定义，并进一步包括精氨酸、葡甲胺、或其组合。特定的此类组合物包括0.1重量％至42重量％(例如0.1重量％至40重量％，10重量％至25重量％，13重量％至18重量％，14重量％至16重量％，12重量％至40重量％，25重量％至40重量％，30重量％至38重量％，10重量％至20重量％，和20重量％至42重量％)，优选2重量％至40重量％、或10重量％至38重量％，更优选12重量％至36重量％、或15.2重量％至32重量％的精氨酸、葡甲胺或其组合。应当理解，尽管某些特定的此类组合物仅包含精氨酸，但其它特定组合物仅包含葡甲胺，且其它特定组合物包含精氨酸和葡甲胺二者。在一些实施方案中，本发明的药物组合物包括卡比多巴；至少两种抗氧化剂；和(i)：左旋多巴；(ii)：精氨酸，葡甲胺或其组合；或(iii)：(i)和(ii)两者，各自如上述任一实施方案中所定义，并且进一步包含表面活性剂，例如非离子表面活性剂如聚山梨醇酯20[聚氧乙烯(20)脱水山梨醇单月桂酸酯]，聚山梨醇酯40[聚氧乙烯(20)脱水山梨醇单棕榈酸酯]，聚山梨醇酯60[聚氧乙烯(20)脱水山梨醇单硬脂酸酯]，聚山梨醇酯80[聚氧乙烯(20)脱水山梨醇单油酸酯；80]，或其组合。具体的这种组合物包括0.01重量％至5重量％，优选0.1重量％至0.5重量％、或0.2重量％至0.4重量％，更优选0.3重量％的如上所列的非离子表面活性剂，优选聚山梨醇酯80。在一些实施方案中，本发明的药物组合物包括卡比多巴和至少两种抗氧化剂，各自如上述任一实施方案中所定义，并且还包含1重量％至20重量％的左旋多巴；和0.1重量％至42重量％的精氨酸，葡甲胺或其组合。特别的此类实施方案是其中组合物包含2重量％至16重量％(例如，2重量％至8重量％，4重量％至8重量％，5重量％至7重量％，8重量％至16重量％，10重量％至15重量％，12重量％至15重量％)，优选4重量％，6重量％，12重量％或13.2重量％的左旋多巴；和0.1重量％至42重量％(例如0.1重量％至40重量％，10重量％至25重量％，13重量％至18重量％，14重量％至16重量％，12重量％至40重量％，25重量％至40重量％，30重量％至38重量％，10重量％至20重量％和20重量％至42重量％)，优选10重量％至38重量％，更优选12重量％至36重量％、或15.2重量％至32重量％的精氨酸，葡甲胺或其组合。在更具体的此类实施方案中，本发明的组合物还包含表面活性剂，例如聚山梨醇酯80，更具体地0.1重量％至0.5重量％、或0.2重量％至0.4重量％，优选0.3重量％的聚山梨醇酯80。在一些实施方案中，本发明的药物组合物包括(i)0.1重量％至6重量％的卡比多巴；(ii)0.1重量％至10重量％的抗坏血酸或其盐；(iii)0.01重量％至1重量％的L-半胱氨酸或其盐，NAC或谷胱甘肽；(iv)0重量％至16重量％的左旋多巴；和(v)0.1重量％至40重量％的精氨酸。在一些实施方案中，本发明的药物组合物因此包括(i)0.1重量％至10重量％的卡比多巴；(ii)0.1重量％至10重量％的抗坏血酸或其盐，如抗坏血酸钠，抗坏血酸钾，抗坏血酸钙，抗坏血酸硬脂酸酯和抗坏血酸棕榈酸酯；(iii)0.001重量％至5重量％的L-半胱氨酸或其盐，如半胱氨酸盐酸盐；或0.001重量％至5重量％的NAC；或0.001重量％至5重量％的谷胱甘肽；或0.001重量％至5重量％的二乙酰胱氨酸或其盐；或0.01重量％至2重量％的亚硫酸氢钠；(iv)1重量％至20重量％的左旋多巴；(v)0.1重量％至42重量％的精氨酸，葡甲胺或其组合；和任选地(vi)0.01重量％至5重量％的聚山梨醇酯80，其中所述组合物包括小于1μg/ml、优选小于0.5μg/ml、更优选小于0.1μg/ml的肼。在具体的此类实施方案中，组合物包括(i)0.5重量％至6重量％，优选0.75重量％至4重量％，更优选0.75重量％，1.4重量％，3重量％，3.3重量％或4重量％的卡比多巴；(ii)0.2重量％至2重量％，优选0.4重量％至1.3重量％，更优选0.5重量％，0.6重量％，0.75重量％，0.85重量％，1.0重量％，1.2重量％或1.3重量％的抗坏血酸或其盐；(iii)0.01重量％至1重量％，优选0.1重量％至0.6重量％的L-半胱氨酸或其盐；0.01重量％至1重量％，优选0.1重量％至0.4重量％的NAC；或0.075重量％至0.75重量％的亚硫酸氢钠；(iv)2重量％至16重量％，优选4重量％至14重量％，更优选4重量％，6重量％，12重量％或13.2重量％的左旋多巴；(v)2重量％至42重量％，优选10重量％至38重量％，更优选12重量％至36重量％、或15.2重量％至32重量％的精氨酸，葡甲胺或其组合；和任选地(vi)0.1重量％至0.5重量％、或0.2重量％至0.4重量％，优选0.3重量％的聚山梨醇酯80。在其它特定的此类实施方案中，组合物包括(i)0.1重量％至3重量％，优选0.5重量％至2重量％、或0.6重量％至1.5重量％的卡比多巴；(ii)0.1重量％至10重量％，优选0.1重量％至2重量％、或0.3重量％至0.7重量％的抗坏血酸或其盐；(iii)0.001重量％至5重量％，优选0.1重量％至2重量％、或0.3重量％至0.5重量％的L-半胱氨酸或其盐，NAC，谷胱甘肽或二乙酰胱氨酸；(iv)2重量％至8重量％，优选4重量％至8重量％、或5重量％至7重量％的左旋多巴；(v)10重量％至25重量％，优选13重量％至18重量％、或14重量％至16重量％的精氨酸，葡甲胺或其组合；和任选地(vi)0.01重量％至5重量％、或0.1重量％至0.5重量％或0.3重量％的聚山梨醇酯80。在进一步特别的此类实施方案中，组合物包括(i)1重量％至4重量％，优选1.2重量％至4重量％、或2重量％至4重量％的卡比多巴；(ii)0.1重量％至10重量％，优选0.1重量％至2重量％、或0.3重量％至0.7重量％的抗坏血酸或其盐；(iii)0.001重量％至1重量％，优选0.1重量％至1重量％、或0.2重量％至0.5重量％的L-半胱氨酸或其盐，NAC，谷胱甘肽或二乙酰胱氨酸；(iv)8重量％至16重量％，优选10重量％至15重量％、或12重量％至15重量％的左旋多巴；(v)12重量％至40重量％，优选25重量％至40重量％、或30重量％至38重量％的精氨酸，葡甲胺或其组合；和任选地(vi)0.01重量％至5重量％、或0.1重量％至0.5重量％或0.3重量％的聚山梨酯80。在另一个特定的此类实施方案中，组合物包括(i)0.1重量％至1.5重量％的卡比多巴；(ii)0.1重量％至1.5重量％，优选0.4重量％至0.6重量％、或0.4重量％至1重量％的抗坏血酸或其盐；(iii)0.1重量％至0.7重量％的L-半胱氨酸或其盐或NAC；(iv)4重量％至8重量％的左旋多巴；(v)10重量％至20重量％的精氨酸；和任选地(vi)0.1重量％至0.5重量％的聚山梨醇酯80。在另一个特定的此类实施方案中，组合物包括(i)1重量％至4重量％的卡比多巴；(ii)0.1重量％至1.5重量％，优选1重量％至1.4重量％的抗坏血酸或其盐；(iii)0.1重量％至1重量％，优选0.1重量％至0.5重量％的L-半胱氨酸或其盐或NAC；(iv)8重量％至16重量％的左旋多巴；(v)20重量％至40重量％的精氨酸，葡甲胺或其组合。在更具体的实施方案中，本发明的药物组合物因此包括(i)12重量％至15重量％的左旋多巴，1.2重量％至4重量％的卡比多巴，32重量％至42重量％，例如32重量％、33重量％、34重量％、35重量％或36重量％的精氨酸或葡甲胺，1重量％至1.3重量％的抗坏血酸钠，0.1-0.5重量％的L-半胱氨酸(或半胱氨酸盐酸盐)或NAC，和任选地聚山梨醇酯80，例如0.3重量％；或(ii)6重量％的左旋多巴，0.6重量％至1.4重量％的卡比多巴，15重量％至16重量％的精氨酸，0.5重量％的抗坏血酸，0.3重量％的聚山梨醇酯80和0.5重量％的NAC或0.4重量％的L-半胱氨酸。表1：本文示例的具体药物组合物1或半胱氨酸盐酸盐。在一些具体的实施方案中，本发明的药物组合物是本文示例并列于表1中的那些。这些组合物包括(i)12重量％左旋多巴，3重量％卡比多巴，32重量％精氨酸，1.2重量％抗坏血酸钠，和0.3重量％L-半胱氨酸或半胱氨酸盐酸盐；(ii)13.2重量％左旋多巴，3.3重量％卡比多巴，36重量％精氨酸，1.3重量％抗坏血酸钠，和0.3重量％L-半胱氨酸或半胱氨酸盐酸盐；(iii)13.2重量％左旋多巴，3.3重量％卡比多巴，36重量％葡甲胺，1.3重量％抗坏血酸钠，和0.3重量％L-半胱氨酸或半胱氨酸盐酸盐；(iv)12重量％左旋多巴，3重量％卡比多巴，32重量％葡甲胺，1.2重量％抗坏血酸钠和0.3重量％NAC；(v)12重量％左旋多巴，3重量％卡比多巴，32重量％精氨酸，1.2重量％抗坏血酸钠和0.3重量％NAC；(vi)6重量％左旋多巴，1.4重量％卡比多巴，15.5重量％精氨酸，0.5重量％抗坏血酸，0.4重量％L-半胱氨酸和0.3重量％聚山梨醇酯80；(vii)6重量％左旋多巴，1.4重量％卡比多巴，15.5重量％精氨酸，0.5重量％抗坏血酸，0.5重量％NAC和0.3重量％聚山梨醇酯80；(viii)6重量％左旋多巴，0.75重量％卡比多巴，15.2重量％精氨酸，0.5重量％抗坏血酸，0.4重量％L-半胱氨酸和0.3重量％聚山梨醇酯80；或(ix)6重量％左旋多巴，0.75重量％卡比多巴，15.2重量％精氨酸，0.5重量％抗坏血酸，0.5重量％NAC和0.3重量％聚山梨醇酯。上述(i)-(v)的组合物可以进一步包含聚山梨醇酯80，例如0.3重量％。根据本发明的药物组合物可包括另外的抗氧化剂，如二叔丁基甲基苯酚，叔丁基-甲氧基苯酚，多酚，生育酚和泛醌，例如咖啡酸；和/或葡萄糖胺，其可例如置换制剂中存在的一些或全部精氨酸。根据本发明的组合物还可以包括酪氨酸酶抑制剂，例如但不限于卡托普利(captopril)，甲巯咪唑(methimazole)，槲皮素(quercetin)，熊果苷(arbutin)，芦荟素(aloesin)，N-乙酰葡萄糖胺，视黄酸(retinoicacid)，α-生育酚阿魏酸酯(α-tocopherylferulate)，抗坏血酸磷酸镁(MAP)，底物类似物、例如苯甲酸钠和L-苯丙氨酸，Cu++螯合剂例如Na2-EDTA、Na2-EDTA-Ca，DMSA(二巯基丁二酸酯(succimer))，DPA(D-青霉胺(D-penicillamine))，曲恩汀(trientine)-HCl，二巯基丙醇，氯碘羟喹(clioquinol)，硫代硫酸钠，TETA，TEPA，姜黄素(curcumin)，新亚铜(neocuproine)，丹宁酸和双环己酮草酰二腙(cuprizone)。组合物还可包括药学上可接受的填充剂，载体，稀释剂或佐剂，以及其它惰性成分和赋形剂。在一些实施方案中，本发明的药物组合物包括卡比多巴；至少两种抗氧化剂；左旋多巴；精氨酸，葡甲胺或其组合；和任选地表面活性剂，各自如上述任一实施方案中所定义，其中所述组合物的pH为9.1至10，优选9.4-9.8，更优选9.6至9.8。如上所述，本发明的药物组合物是高度稳定的，因为特定的抗氧化剂组合稳定组合物中的卡比多巴、并强烈抑制其降解为降解物和肼。此外，这些组合物可以在各种条件和温度下储存，例如在高达25℃的温度下长时间保存，更特别是长达几年，同时保持肼的安全耐受的浓度。在一些实施方案中，根据上述任一实施方案的本发明的药物组合物，在储存1、2、3、4、5、6、8、10、12、14、16、18、20、22或24小时；1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、21、28或30天；1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个月；或者1、1.5、2、2.5或3年之后，在-20℃至25℃范围内的温度，例如-20℃，2-8℃或25℃的温度下，包括，由GCMS测定的小于1μg/ml，优选小于0.5μg/ml，更优选小于0.1μg/ml的肼，或通过HPLC测定的相对于卡比多巴初始量的小于5重量％，优选小于1重量％，更优选小于0.75重量％，0.6重量％，0.5重量％，0.4重量％，0.3重量％，0.25重量％，0.2重量％，0.1重量％，0.05重量％，或0.01重量％的降解物。本发明提供的药物组合物可以通过常规技术制备，例如，如Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy,19thEd.,1995中所述，根据此文实验部分中所述的一种方法。例如，此类组合物可以通过将所有成分，即卡比多巴、抗氧化剂和任选地左旋多巴、精氨酸和/或葡甲胺和表面活性剂，全部以粉末的形式以上述量混合，以形成粉末混合物。然后可以将水加入到混合物中以形成悬浮液。可以将水预热或可以将形成的悬浮液在足以溶解混合物的温度和时间下加热，例如至40℃至100℃，40℃至80℃或60℃至90℃，例如65±5℃，72±5℃或73±3℃，例如通过添加预热的水和/或通过将混合物置于热水浴中任选地搅拌，例如，长达3、5、10、20、30、40、50、60分钟或更长，以形成溶液。然后冷却溶液以形成组合物。N2可以提供容器的顶部空间。具体的制备方法在下面实施例1中描述。本文公开的药物组合物可以例如使用0.2μm过滤器如尼龙类过滤器或聚偏二氟乙烯(PVDF)膜进行灭菌。本发明的药物组合物可以配制为液体(liquid)，凝胶，乳膏(cream)，固体，膜(film)，乳液，悬浮液，溶液(solution)，冻干物或气溶胶(aerosol)，但其优选配制为液体。此类组合物可以配制用于任何合适的施用途径，但其优选配制用于皮下，经皮，皮内，静脉内，肌内，气管内，鞘内，十二指肠内或口服施用。组合物还可以配制用于吸入，或用于通过粘膜组织的直接吸收。另一方面，本发明涉及治疗有需要的个体中与多巴胺或多巴胺能神经元丧失相关的疾病、障碍或病症的方法，所述方法包括施用所述个体有效量的如上述任一实施方案中所定义的药物组合物，即含有安全耐受的浓度的肼的卡比多巴类组合物。与多巴胺或多巴胺能神经元丧失相关的疾病、障碍或病症可以是神经性或运动障碍，包括下肢不宁综合征(restlesslegsyndrome)，帕金森病，继发性帕金森症，亨廷顿舞蹈病，Shy-Drager综合征和包括一氧化碳或锰中毒在内的由脑损伤引起的病症。在一个具体实施方案中，神经障碍是帕金森病。根据本发明的方法，药物组合物可以在规定的时间段内施用，例如，数天，数周，数月或数年；并且可以受到任何合适的途径的影响，例如皮下，经皮，静脉内，肌内，皮内，气管内，鞘内，十二指肠内或口服，以及通过吸入或通过粘膜组织直接吸收。在一些实施方案中，根据本发明的方法施用药物组合物是基本上连续的，例如皮下或经皮。本文所用的术语“基本上连续”是指在特定的预定时间段内向所述患者或个体施用单一剂量的组合物，例如持续至少10、20或30分钟，1小时，2小时，4小时，6小时，8小时，12小时，15小时，18小时，21小时或24小时，而不是作为团块(bolus)，例如口服丸剂或快速浓注(bolusinjection)。这些药物组合物的基本连续施用可以使用例如经皮贴剂或随时间连续向患者施用组合物的泵装置来实现。在一些实施方案中，根据本发明的液体组合物，特别是当包括左旋多巴时，可以以0.01ml/小时/部位至0.4ml/小时/部位的速率施用，例如0.16ml/小时/部位至0.24ml/小时/部位。此类速率可以在白天和晚上恒定，或根据患者的需要而变化，例如可以反映患者休息或睡眠时间表、以及唤醒或更高活动水平的时间表。因此，此类药物组合物可以例如以早晨(例如，在醒来前2-4小时)0.32ml/小时/部位，白天或活动时间(例如10至12小时)0.24ml/小时/部位，和/或休息或夜间0.08ml/小时/部位施用。在其它实施方案中，此类组合物在白天或活动时间期间(例如，在醒来之前2-3小时和之后10-12小时)以1.0ml/小时，和休息或夜间0至0.5ml/小时的速率通过例如十二指肠内施用。在另外的实施方案中，此类组合物可以在白天或活动时间期间(例如，在醒来之前或之后2-3小时，并且之后10-14小时)以1.25ml/小时、和休息或夜间0至0.5ml/小时(例如，0.5±0.25ml/小时)的速率施用。在另外的实施方案中，此类组合物可以以0.1至1000μl/小时/部位；或2至10ml/24小时/部位优选4至6ml/24小时/部位的体积；或以80至800mg左旋多巴/天和20至200mg卡比多巴/天的剂量；或以240至360mg左旋多巴和60至90mg卡比多巴/天/部位的速率施用。在一些实施方案中，根据本发明的药物组合物可以基本上连续施用，例如使用泵用于皮下输注(例如胰岛素泵)，连续24小时平均速率为10-1000μl/小时(例如10-250μl/小时)，300±100μl/小时或200±40μl/小时；连续16小时(在醒来时间期间)440±200μl/小时或200±50μl/小时，8小时(夜间)0至80μl/小时或0至200μl/小时；或使用经皮贴剂。通过使用多于一个泵、贴片或输注部位，将组合物基本上连续施用至患者可以倍增或三倍增。在一些实施方案中，使用例如液体组合物的基本上连续施用可以通过泵、经皮贴剂或适合于例如皮下、静脉内、鞘内和/或十二指肠内施用的递送装置的组合采用以下平均速率：以0.2-2μl/小时，或1±0.5μl/小时的连续24小时；连续16小时(在清醒时间期间)1±0.5μl/小时和8小时(夜间)0至0.5μl/小时。在一些实施方案中，本发明的药物组合物用于通过急性和立即施用例如通过吸入或注射治疗所述神经障碍或运动障碍。本文所用的术语“药学上可接受的载体”或“药学上可接受的赋形剂”可互换地指任何和所有的溶剂，分散介质，防腐剂，抗氧化剂，涂料，等渗剂和吸收延迟剂(absorptiondelayingagent)，和与药物施用相容的类似物。此类介质和成分用于药物活性物质的用途是本领域公知的。应当理解，本发明的组合物还可以含有提供补充的、额外的或增强的治疗功能的其它活性剂。关于包含在药物组合物内的载体或赋形剂的术语“可接受的”是指当适当地施用于哺乳动物或人时不产生不利的、过敏的或其它不良反应的任何载体、成分或分子实体。对于人施用，组合物应满足例如美国食品药品管理局(FDA)或欧洲药品管理局(EMA)所要求的无菌性、致热原性(pyrogenicity)和一般安全性和纯度标准。术语“生理学上可接受的pH”被理解为是指例如有助于向患者施用制剂或组合物而没有显著不利作用的pH，例如pH为4至9.8(例如，4±0.3至9.5±0.3)。本文所用的术语“环境温度”是指10℃至30℃的范围内的温度。在具体实施方案中，环境温度可以为25℃。除非另有说明，本文中关于本发明的药物组合物所公开的百分比为重量百分比。在另一方面，本发明涉及如上所定义的药物组合物，即用于治疗与多巴胺或多巴胺能神经元的丧失相关的疾病、障碍或病症例如帕金森病的、含有安全耐受的浓度的肼的卡比多巴类组合物。在另一方面，本发明涉及如上所定义的药物组合物的用途，即，含有安全耐受的浓度的肼的卡比多巴类组合物在用于制备治疗与多巴胺或多巴胺能神经元的丧失相关的疾病、障碍或病症例如帕金森病的药品的用途。在另一方面，本发明提供了试剂盒，其包括至少一个，即1、2、3或更多个容器，容器各自含有根据上述任一个实施方案的药物组合物，其中所述组合物的存在量足以治疗需要其的个体与多巴胺或多巴胺能神经元的丧失相关的疾病、障碍或病症例如帕金森病至少1天，1周，1个月，2个月，6个月，或1年。包括在本发明的试剂盒内的容器可以是例如适合由患者或医生使用的预填充的药筒(cartridge)或小瓶(vial)。在一些实施方案中，本发明的试剂盒因此包括含有如上定义的药物组合物的预填充药筒，例如包含单剂量或适于给所述组合物的患者单次施用或多次施用的剂量的预填充药筒，和任选的使用说明书。此类容器、小瓶、或预填充的注射器等可以包括例如1-10ml所公开的组合物。在具体实施方案中，本发明的试剂盒包括一个或多个预填充的小瓶、容器或注射器，各自以适于填充注射器泵或贴片泵的量含有公开的液体药物组合物，例如1-10ml，1-2ml，2-5ml，1-2ml或4-10ml所公开的组合物。考虑到本发明的组合物的增加的稳定性，根据本发明的特定试剂盒包括足够量的组合物以供应至少1、2、3、4或5天；1周、2周、3周或4周；1、2、3、4、6或9个月；或1或1.5年给患者施用，其可以包装成例如合适的剂量(例如单位剂量)的组合物。此类试剂盒可以任选地包括它们的使用说明。例如，用于日常使用的试剂盒可以包括一个、两个或更多个所公开的组合物的容器或小瓶，输注装置和一次性的患者输送单元，例如注射器。通过参考以下实施例将更容易理解现在总体上描述的本发明，所述实施例仅仅为了说明本发明的某些方面和实施方案的目的而被包括，并且不意在以任何方式限制本发明。实施例实施例1.制剂制备方法左旋多巴(LD)和卡比多巴(CD)的制剂可如下制备：方法#1(L-Arg溶液)：将L-Arg和亚硫酸氢钠(Na-Bis)溶解在水中。将溶液添加至LD和CD粉末中。将混合物在75℃下搅拌加热13分钟直至完全溶解。将LD/CD溶液在室温(RT)下保持10分钟以冷却。方法#2(所有粉末一起)：称重所有粉末(LD，CD和L-Arg)，并添加含有Na-Bis的水。将悬浮液在75℃下搅拌加热13分钟直至完全溶解。将LD/CD溶液在RT下保持10分钟以冷却。方法#3(与不具有Na-Bis预热的#2相同)：将所有粉末(LD，CD和L-Arg)一起称重，并添加水。将悬浮液在75℃下搅拌加热13分钟直至完全溶解。将LD/CD溶液在RT下保持10分钟以冷却。方法#4(步骤制备)：称量LD和各量的L-Arg；添加水和Na-Bis溶液。将悬浮液在75℃加热7分钟直到完全溶解，随后在RT下加热7分钟。称量CD和各量的L-Arg，并加入到60℃的LD/Arg溶液中直至完全溶解。最后，加入额外的L-Arg。方法#5(与没有Na-Bis预热的#4相同)：称量LD和各量的L-Arg；添加水。将悬浮液在75℃加热7分钟直至完全溶解，随后在RT下加热7分钟。称量CD和各量的L-Arg，并加入到60℃的LD/Arg溶液中直至完全溶解。最后，加入额外的L-Arg。冷却后，将来自所有方法的所有制剂分成3个小瓶，并向各小瓶中加入水，Na-Bis溶液或Na-Bis-Arg溶液。实施例2.包含CD的制剂中主要降解物的鉴别使用实施例1中概述的方法制备具有左旋多巴、卡比多巴和精氨酸的液体制剂，并且使用Agilent1100系统对卡比多巴左旋多巴制剂根据APH稳定性指示分析方法进行HPLC分析。本文使用的HPLC系统包括由Agilent制造的以下组件：泵系统(型号G1311A)，二极管阵列检测器(型号G1315B)，自动进样器(型号G1329A)，脱气器(型号G1379A)，恒温器(型号G1330B)，恒温器柱室(型号G1316A)。使用的柱是新的Synergi4μFusion-RP80A，250×4.6mmHPLC工作条件：波长：280nm；流速：1.0ml/min；注射体积：10μl；柱温：30℃；恒温器温度：4℃；停止时间：27分钟；压力：105bar。流动相制备：溶剂A：乙腈，溶剂B：20mM磷酸二氢钾，pH＝2.4。流动相B通过称重2.72g/l磷酸二氢钾来制备。通过加入H3PO4将pH调节至2.4。使用的梯度根据表2。稀释剂：0.1MHCl/MeOH9:1(8.3mlHCl37％至1L)→0.1MHCl。STDLDOPA＝100.00mg/100ml。STDCDOPA＝25.00mg/100ml。校准曲线描述于表3中。表2时间溶剂A溶剂B流量05951.055951.01560401.02060401.020.015951.2275951.2表3将1ml样品(左旋多巴/卡比多巴制剂)转移至25ml琥珀色容量玻璃烧瓶中，并用稀释剂(0.1MHCl/MeOH9/1)填充至体积。样品用过氧化氢降解。在约14.5±0.2分钟的保留时间观察到杂质(图1)。为了确保观察到的峰实际上是感兴趣的化合物，从分析性HPLC收集主要降解峰，在氮气流下蒸发并用稀释剂重构。通过HPLC/MS测试获得的样品。最初，应用MS扫描分析(图2A-2B)。未知化合物在负模式下显示清晰和强烈的信号，在正模式中显示更吵杂的信号。因此，预期它更多地是质子供体而不是受体。负模式中的基峰是M/Z＝195Da，怀疑为(M-H)。该离子和峰M/Z＝217之间的质量差为22，其应为钠加合物。这是羧基或/和酚基团存在的证据。由于这个事实，分子量提出为196Da。在正模式中没有发现峰M/Z＝197(M+H+)+，但是观察到峰M/Z＝197(M-H2O)+。这是含氧分子的典型。还进行子母MS/MS(daughterandparentMS/MS)以定义分子结构。发现在M/Z＝179、161、151、133、123、105的正模式下观察到的峰是相对的。它们被定义为源自M/Z＝197的分子离子(molecularion)的源内碎片离子(in-sourcefragmention)。典型的MS和MS/MS光谱显示在图上(图3A-3B)。降解化合物的化学式为C10H12O4，具有由3-(3,4-二羟苯基)-2-甲基丙酸给出的分子结构。实施例3.具有或不具有EDTA的抗坏血酸对LD/CD制剂稳定性的影响通过称量所有粉末(LD，CD，EDTA，抗坏血酸和L-Arg)并加入预热至73±3℃的水来制备液体制剂。将悬浮液置于73±3℃的水浴中，搅拌10分钟直至完全溶解。将LD/CD溶液在RT下保持10分钟以冷却。将溶液分成玻璃小瓶，并在+25℃和-20℃保持指定的时间。在分析之前，将冷冻的小瓶放置在RT下直至完全解冻。然后将制剂混合并进行稳定性分析。通过HPLC测量具有或不具有EDTA的抗坏血酸对LD/CD制剂的稳定性的影响。表4和表5中呈现的降解物的水平(作为初始CD量的百分比)表示LD/CD制剂的稳定性水平，并表明EDTA对LD/CD制剂的稳定性没有显著影响。表4表5*成分总量的百分比。实施例4.L-半胱氨酸对含CD/LD溶液稳定性的影响通过称重所有粉末(LD，CD，L-半胱氨酸，抗坏血酸和L-Arg)并加入预热至73±3℃的水来制备液体制剂。将悬浮液置于73±3℃的水浴中，搅拌10分钟直至完全溶解。将LD/CD溶液在RT下保持10分钟以冷却。对于CD制剂，称重CD、L-半胱氨酸和抗坏血酸，并加入预热的水(60℃)。将溶液分至玻璃小瓶，并在+25℃和-20℃保持指定的时间。在分析之前，将冷冻的小瓶放置在RT下直至完全解冻。然后将制剂混合并进行稳定性分析。使用HPLC分析当在25℃下储存亦或暴露于空气或保持在厌氧条件(N2)下时，L-半胱氨酸对卡比多巴制剂的稳定性的影响。表6中呈现的降解物的水平(作为初始CD量的百分比)指向卡比多巴制剂的稳定性水平。如表6所示，当在25℃下在厌氧条件下保持至少5周时，具有0.1％L-半胱氨酸的抗坏血酸足以抑制含有卡比多巴(含或不含左旋多巴)的制剂中的降解物形成。从该表可以进一步推断，L-半胱氨酸在需氧条件下在25℃下以剂量依赖性方式降低了降解物形成。在含有卡比多巴和0.4％L-半胱氨酸的制剂中，在制剂的制备期间抑制了降解物形成。这些制剂在需氧和厌氧二者条件下在25℃下稳定至少5周。当暴露于空气时，含有卡比多巴的制剂也比含有LD时更稳定。表6实施例5.L-半胱氨酸对6/1.4％LD/CD制剂稳定性的影响如实施例3所述制备液体制剂。使用HPLC分析25℃下L-半胱氨酸对6/1.4％左旋多巴/卡比多巴溶液的稳定性的影响。表7-10中呈现的降解物的水平(作为初始CD量的百分比)指向参考制剂的稳定性水平。结果表明，与单独的抗坏血酸相比，左旋多巴/卡比多巴制剂在具有抗坏血酸和L-半胱氨酸两者一起的情况下更稳定，表明L-半胱氨酸和抗坏血酸具有协同效应以防止降解物形成。其他结果表明单独的L-半胱氨酸完全没有效果(数据未显示)。此外，L-半胱氨酸在制剂制备期间抑制降解物形成，并且以剂量依赖性方式在25℃下保持制剂的稳定性至少达5周。增加抗坏血酸的量减少了降解物的形成，但是这显著低于抗坏血酸与L-Cys的组合的效率。表7表8表9表10实施例6.Tween-80和抗坏血酸钠对LD/CD制剂稳定性的影响通过称重所有粉末(LD，CD，L-半胱氨酸，抗坏血酸，抗坏血酸钠和L-Arg)并加入预热至73±3℃的水来制备液体制剂。将悬浮液置于73±3℃的水浴中，搅拌10分钟直至完全溶解。将LD/CD溶液在RT下保持10分钟以冷却。然后，加入Tween-80。将溶液分至玻璃小瓶中，并在+25℃和-20℃下保持指定的时间。在分析之前，将冷冻的小瓶放置在RT下直至完全解冻。然后将制剂混合并进行稳定性分析。使用HPLC分析Tween-80和抗坏血酸钠对卡比多巴/左旋多巴制剂的稳定性的影响。表11中呈现的降解物的水平(作为初始CD量的百分比)指向卡比多巴/左旋多巴制剂的稳定性水平。表111抗坏血酸钠；N/A-不可用。结果表明，Tween-80对降解物形成没有影响。还显示L-半胱氨酸对制剂的稳定性的影响是剂量依赖性的。如进一步所示，抗坏血酸钠和抗坏血酸对制剂的稳定性和降解物形成的影响是相似的。实施例7.具有或不具有L-Cys或NAC的抗坏血酸对LD/CD制剂的长期稳定性的影响通过称重所有粉末(LD，CD，精氨酸，L-半胱氨酸或NAC，和抗坏血酸或抗坏血酸钠)并通过加入预热至73±3℃的水来制备液体制剂。将悬浮液置于73±3℃的水浴中并搅拌直至完全溶解。将LD/CD溶液保持在RT下冷却。然后加入Tween-80。将溶液分成玻璃小瓶，并在+25℃和-20℃保持指定的时间。在分析之前，将冷冻的小瓶放置在RT下直至完全解冻。然后将制剂混合并进行稳定性分析。使用HPLC分析具有或不具有L-半胱氨酸或NAC的抗坏血酸对卡比多巴/左旋多巴制剂的稳定性的影响。表12中呈现的降解物的水平(作为初始CD量的百分比)表示卡比多巴/左旋多巴制剂的稳定性水平。表12中所示的结果表明，在a)T0，即在制剂制备后即刻，b)在-20℃下至少9个月，和c)在环境温度下至少1个月时，含有抗坏血酸和NAC两者的制剂比仅具有抗坏血酸的制剂更稳定。表12*2×F-T-在-20℃下在至少2个冻融循环之后>3个月(m)，和环境温度下>7天(d)。实施例8.抗氧化剂对CD制剂的稳定性的影响如上所述制备具有卡比多巴和精氨酸的液体制剂。使用HPLC分析抗氧化剂对卡比多巴制剂的稳定性的影响。表13和表14中呈现的降解物的水平(作为初始CD量的百分比)指向卡比多巴制剂的稳定性水平。表13和表14中的结果表明含有抗坏血酸+L-半胱氨酸的制剂比含有亚硫酸氢钠的制剂(制剂3和4相对于制剂1和2)显著更稳定。用0.075和0.1％亚硫酸氢钠测量相同量的杂质，表明获得了用亚硫酸氢钠的最大可能的保护。总之，抗坏血酸/L-半胱氨酸的组合能够防止降解物和其他杂质形成，例如肼(参见其他实施例)，而亚硫酸氢钠不以相同的程度保护含卡比多巴的制剂。表13表14实施例9.各种抗氧化剂和不同浓度的精氨酸对含有4％CD的制剂的稳定性的影响如上所述制备具有卡比多巴和精氨酸的液体制剂(表15)。使用HPLC分析来评价各种抗氧化剂和不同浓度的精氨酸对储存在需氧(空气)或厌氧(N2)条件下在环境(25℃)或冷(2-8℃)温度下的含有4％CD的制剂的稳定性的影响。如表16和表17中所示的降解物和总杂质的水平分别指向卡比多巴制剂的稳定性水平。表16和表17中所示的结果表明，当暴露于25℃的空气(制剂2相对于制剂3)时，含有更多精氨酸的制剂更稳定。此外，当在氮气(厌氧条件)下储存时，含有亚硫酸氢钠的制剂比含有抗坏血酸和L-半胱氨酸的制剂(制剂2相对于制剂1，分别地)更不稳定。N2提供了对降解和降解物形成的显著保护。与室温(环境)温度相比，暴露于空气的制剂比在保持冷藏时更稳定。表15表16表17实施例10.40℃下各种抗氧化剂对含4％CD的制剂的稳定性的影响如上所述制备具有卡比多巴和精氨酸的液体制剂(表18)。使用HPLC分析来评价在40℃下各种抗氧化剂对含有4％CD的制剂的稳定性的影响。表19和表20中分别示出的降解物(作为初始CD量的百分比)和总杂质的水平表示卡比多巴制剂的稳定性水平。表181234卡比多巴4.04.04.04.0L-精氨酸3.43.74.64.6N-甲基吡咯烷酮(NMP)3.5000抗坏血酸000.40.5半胱氨酸000.20.1亚硫酸氢钠0.10.07500总溶质12.99.29.29.2水87.190.890.890.8L-精氨酸(mM)195212265265卡比多巴(mM)177177177177摩尔比L-Arg/CD1.11.21.51.5pH测量值8.768.969.139.12表19-20中给出的结果表明，在制备期间和当在40℃下储存时，含有亚硫酸氢钠的制剂比含有抗坏血酸和L-半胱氨酸的制剂(制剂1和2相对于制剂3和4)更不稳定。此外，存在半胱氨酸剂量-反应，即L-半胱氨酸的浓度越高，形成的降解物越少。用亚硫酸氢钠没有观察到剂量反应，表明用0.075％亚硫酸氢钠可达到最大可能的保护。表19-降解物表20-总杂质实施例11.抗坏血酸结合各种抗氧化剂对含有4％CD的制剂的稳定性的影响如上所述制备具有或不具有额外抗氧化剂的卡比多巴和抗坏血酸的液体制剂。使用HPLC分析来评价在25℃下抗坏血酸和各种抗氧化剂之间对含有4％CD的制剂的稳定性的组合效果。表21和表22中所示的降解物(作为初始CD量的百分比)和总杂质的水平分别指向卡比多巴制剂的稳定性水平。表21-22中给出的结果表明，0.5％的抗坏血酸不足以防止含卡比多巴的制剂中的降解物形成。此外，抗坏血酸需要其它抗氧化剂以发挥其最大抗氧化剂活性，例如0.5％抗坏血酸与L-半胱氨酸、NAC或亚硫酸氢钠以协同方式抑制卡比多巴降解。含有抗坏血酸和L-半胱氨酸的制剂在25℃下3天后具有最低量的降解物。亚硫酸氢钠对卡比多巴降解的影响类似于完全没有抗氧化剂获得的影响。表21-降解物4％CDt＝0t＝3天25℃/N2下t＝2天25℃/O2下无抗氧化剂0.241.293.270.5％抗坏血酸0.543.175.090.5％抗坏血酸+0.2％亚硫酸氢盐0.160.762.980.5％抗坏血酸+0.2％半胱氨酸0.090.272.670.5％抗坏血酸+0.2％NAC0.140.833.640.75％亚硫酸氢盐(对照)0.391.232.98表22-总杂质4％CDt＝0t＝3天25℃/N2下t＝2天25℃/O2下无抗氧化剂1.041.884.010.5％抗坏血酸1.073.966.400.5％抗坏血酸+0.2％亚硫酸氢盐0.701.293.640.5％抗坏血酸+0.2％半胱氨酸0.670.743.430.5％抗坏血酸+0.2％NAC0.721.364.490.75％亚硫酸氢盐(对照)1.131.713.58实施例12.在25℃下抗氧化剂对含有4％CD的制剂的稳定性的影响如上所述制备具有卡比多巴(4％)和精氨酸的液体制剂(表23)，并且使用HPLC分析来评价在25℃下各种抗氧化剂对这些制剂的稳定性的影响。表24中呈现的降解物(作为初始CD量的百分比)和总杂质的水平表明那些制剂的稳定性水平。表24中呈现的结果表明，各自单独使用的抗坏血酸，亚硫酸氢盐或半胱氨酸不抑制降解物形成。亚硫酸氢盐和半胱氨酸或抗坏血酸之间的组合不抑制降解物形成。抗坏血酸和半胱氨酸之间对降解物形成具有协同抑制作用，但没有观察到半胱氨酸和亚硫酸氢盐之间的这种协同作用。这种协同效应可以在抗坏血酸和亚硫酸氢盐(具有较高的抗坏血酸浓度)之间看到。这些结果进一步表明，含有抗坏血酸和半胱氨酸的独特组合的制剂可以提供抑制降解物形成的最佳方法。0.2％的抗坏血酸不足以预防降解物形成。在减少杂质和降解物形成的总量方面，使用0.2％半胱氨酸，0.5％抗坏血酸比0.2％更有效，这表明具有0.2％半胱氨酸的至少0.5％抗坏血酸是理想的。表23表24实施例13.CD和CD/LD制剂中肼水平的测定通过使用Aceton-d6的衍生化来进行肼的测定。通过气相色谱质谱(GC/MS)分析肼衍生物。根据Solvias标准操作方法(SOP’s)在选择的离子监测模式(SIM模式)中测量肼衍生物的比质量(specificmass)。如上所述制备具有卡比多巴、左旋多巴和精氨酸的液体制剂(表25)。测量参考制剂中的肼水平(表26)。表251用N2密封；2用O2密封。表26表26中呈现的结果清楚地显示，在左旋多巴制剂相对于没有左旋多巴的制剂中，肼的水平至少低2倍。此外，与不含L-半胱氨酸或NAC的制剂相比，包含L-半胱氨酸或NAC的制剂显示出低至少4倍的肼的水平。实施例14.CD/LD制剂基于具有降低的降解物和肼形成的组合的发现，我们开发了新的CD/LD制剂。这些配方示于表27和表28中。表27表281可代替L-半胱氨酸。2任选地添加以稳定制剂。在表29中提供了可用于本文公开的那些背景下的另外的制剂。制剂可以包括另外的组分(例如，本文所述的那些中的任一种)。表30和表31描述了可用于本文所述的那些背景下的其它制剂。表29表30表31等同物虽然已经讨论了本发明的具体实施方案，但是上述说明书是说明性的而不是限制性的。在阅读本说明书后，本发明的许多变化对于本领域技术人员将变得显而易见。本发明的全部范围应当通过参考权利要求以及它们的等同物的全部范围和说明书以及这些变化来确定。除非另有说明，否则说明书和权利要求书中使用的表示成分的量、和反应条件等的所有数字应理解为在所有情况下由术语“约”修饰。因此，除非相反地指出，否则本说明书和所附权利要求中阐述的数值参数是近似值，其可以根据本发明寻求获得的期望性质而变化。通过参考引入本文引用的所有专利、公开的专利申请、网站和其他参考文献的全部内容通过参考以其全文清楚地引入此处。当前第1页1 2 3