一种微管蛋白抑制剂磷酸酯及其组合物和用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药领域，具体而言，本发明涉及作为微管蛋白抑制剂磷酸酯或药学 上可接受的盐的化合物、包含所述化合物的药物组合物、以及所述化合物和药物组合物在 制备药物和治疗相关疾病中的用途。
【背景技术】
[0002] 恶性肿瘤是一种严重威胁人类健康的常见疾病。寻找有效的抗肿瘤药物与方法， 彻底攻克癌症，是一项世界性的难题。虽然抗肿瘤药物的化学结构和作用机制是多种多样 的，但是目前临床上常用的抗肿瘤药物普遍存在对实体瘤疗效较差、毒副作用大以及容易 产生多药耐药性等诸多缺陷。因此发现高效低毒的新型抗肿瘤药物，仍是一项极其重要的 研究课题。
[0003] 微管蛋白抑制剂是目前临床上应用的一类非常重要的抗肿瘤药物。它们作用于细 胞的微管蛋白，从而阻止细胞正常的有丝分裂。这类药物大部分都来源于天然产物，主要包 括：秋水仙碱、喜树碱、长春碱、紫杉醇以及鬼白毒素等。
[0004] 微管是广泛存在于真核细胞的胞质内，由α β两种微管蛋白聚合而成的管状聚 合物。作为构成细胞骨架的主要成分之一，微管在维持细胞形态，参与细胞的收缩和胞质内 物质的运输等方面发挥着重要的作用。尤其是其在细胞分裂前期解聚重组形成纺锤体参与 到细胞有丝分裂中的这一特殊的生物学功能使之成为抗肿瘤药物的重要靶点。肿瘤细胞 具有快速增殖的能力，若抑制其纺锤体的形成，必将影响细胞有丝分裂的正常进行，使得肿 瘤细胞生长停滞于G2/M期。二十世纪初以微管为靶点的紫杉醇类药物在临床上的成功应 用激起了人们寻找和改造新型微管类靶点药物的浓厚兴趣。尽管人们对紫杉醇不断地进 行结构改造和修饰但其水溶性差，易产生多药耐药以及毒副作用强等问题还是限制了其临 床上的广泛运用。寻找新型的微管靶点药物一直是抗肿瘤药物学领域研究的热点之一，直 到1987年美国国家癌症研究所Pettit等从南非矮生柳树（Combretum caffrum)中发现了 天然活性产物CA-4。CA-4是一类结构简单的顺式二苯乙烯类化合物，它是目前已知的微 管蛋白抑制剂中活性最强的化合物之一。然而CA-4水溶性差、生物利用度低，而且给药后 CA-4很容易转变为无药理活性的结构相对稳定的反式结构。因此，为了克服这一缺点，国 际上近年来围绕CA-4的结构进行改造，作了大量的工作，已合成了数百个CA-4衍生物。例 如以下式I表示的化合物1其为含有二氮杂卓官能团CA-4衍生物，能有效抑制微管蛋白聚 集及肿瘤细胞增殖，具有抗肿瘤活性（参见Ubaldina Galli等人，Design, Synthesis, and Biological Evaluation of Combretabenzodiazepines:A Novel Class of Anti-Tubulin Agents. J. Med. Chem. 2015, 58, 1345-1357) 〇
[0005]
式I (化合物1) 然而，研究表明，化合物1溶解度很差（少于0. lmg/ml)，分子中的酚羟基在肝微 粒体中与葡萄糖醛酸结合，发生II相代谢，快速排出体外，导致化合物1的体内半衰 期短（参见 Ubaldina Galli 等人，Design, Synthesis, and Biological Evaluation of Combretabenzodiazepines:A Novel Class of Anti-Tubulin Agents.J. Med. Chem. 2015, 58, 1345-1357)。限制了其在治疗肿瘤疾病方面的应用。
【发明内容】
[0006] 为了改善化合物1的溶解性，从而优化化合物1抗肿瘤活性，本发明有针对性地设 计了化合物1的磷酸酯及药学上可接受的盐，并通过大量实验测定化合物1磷酸酯及药学 上可接受的盐的溶解度以及对裸鼠的抗肿瘤活性。本发明制备得到化合物1的磷酸酯及药 学上可接受的盐溶解性明显高于化和物1，延长其在动物体内的半衰期，增强其在裸鼠的抗 肿瘤药效。
[0007] 因此，本发明的一个目的在于提供一种作为微管蛋白抑制剂磷酸酯的化合物或其 药物可接受的盐，以满足目前对于抗肿瘤类药物的需求。
[0008] 本发明的另一个目的在于提供以所述化合物或其药物可接受的盐为活性成分的 药物组合物。
[0009] 本发明的又一个目的在于提供所述化合物或其药物可接受的盐或药物组合物在 制药方面的用途。
[0010] 本发明的还一个目的在于提供采用所述化合物或其药物可接受的盐或采用所述 药物组合物用于治疗肿瘤相关疾病的方法。
[0011] 为了实现上述目的，本发明采取的技术方案如下： 一种式Ial所示的化合物或其药学上可接受的盐，
上述化合物Ial为化合物1的磷酸酯。 进一步的，式Ial所示的化合物可以形成药学上可成的盐，优选的，所述药学上可成的 盐具有如下结构式： 式la
11、]?2相同或不同，为!1+、1(+、似 +或順4+，且]\11、]\12不同时为!1 +。
[0012] 根据本发明的【具体实施方式】，本发明提供式la所示的化合物，其中所述式la所示 的化合物的结构分别如下式所示：
优选地，本发明提供的化合物的结构分别如式Ial、Ia2、Ia3、Ia4、Ia5,进一步优选如式 Ia4戶斤示。
[0013] 再一方面，本发明提供一种药物组合物，该药物组合物包含式la所述的化合物以 及药学上可接受的辅料。
[0016] 根据具体剂型和施用方式，所述药物组合物中的药学上可接受的辅料可以包括下 述的一种或多种：稀释剂、增溶剂、崩解剂、悬浮剂、润滑剂、粘合剂、填充剂、矫味剂、甜味 剂、抗氧化剂、表面活性剂、防腐剂、包裹剂、和色素等。
[0017] 所述药物组合物可以为临床施用的任何剂型，例如片剂、栓剂、分散片、肠溶片、咀 嚼片、□崩片、胶囊、糖衣剂、颗粒剂、干粉剂、□服溶液剂、注射用小针、注射用冻干粉针或 大输液。
[0018] 优选地，本发明提供的药物组合物经胃肠外输注、局部施用或口服施用。进一步优 选经胃肠外输注施用，例如采用静脉点滴、静脉注射和肌肉注射施用。
[0019] 又一方面，本发明提供上述化合物上述药物组合物在制备药物中的用途，所述药 物用于抗肿瘤治疗。示例性肿瘤病症包括：纤维肉瘤、粘液肉瘤、脂肪肉瘤、软骨肉瘤、骨源 性肉瘤、脊索瘤、血管肉瘤、内皮肉瘤、淋巴管肉瘤、淋巴管内皮肉瘤、滑膜瘤、间皮瘤、尤文 氏瘤、平滑肌瘤、横纹肌肉瘤、结肠癌、胰癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、鳞状细胞癌、基底细 胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳突癌、乳头状腺癌、囊腺癌、髓样癌、支气管癌、肾细胞癌、 肝细胞癌、胆管癌、绒毛膜癌、精原细胞瘤、胚胎性癌、威尔姆氏肿瘤、子宫颈癌、睾丸肿瘤、 肺癌、小细胞肺癌、膀胧癌、上皮癌、神经胶质瘤、星细胞瘤、成神经管细胞瘤、颅咽管瘤、室 鼓膜瘤、松果体瘤、血管母细胞瘤、听觉神经瘤、少突神经胶质瘤、脑膜瘤、黑素瘤、成神经细 胞瘤、以及视网膜母细胞瘤。
[0020] 并且，本发明还提供上述化合物或所述药物组合物在制备微管蛋白抑制活性药物 中的用途。
[0021] 综上所述，本发明提供了一种新型化合物，所述化合物可作为具有微管蛋白抑制 剂（具体为化合物1)的前药。实验证明，本发明的化合物通过酶促和/或非酶促机制，可 以产生具有活性的微管蛋白抑制剂化合物1，本发明所述化合物的溶解度明显高于化合物 1，其中化合物Ia4、Ia5的溶解度是化合物1的100倍以上，在动物体内的半衰期提高到大 于6小时，在裸鼠的抗肿瘤药效提高1. 5倍。因此本发明的化合物适合制成多种剂型的药 物，以广泛用于治疗肿瘤疾病。
【附图说明】 图1为化合物Ia4体内抑瘤结果图（(A)各组小鼠图片，（B)各组小鼠的剥离肿瘤图片； (C)给药期间各组肿瘤重量图；(D)给药期间各组肿瘤体积图）。
【具体实施方式】
[0022] 以下通过实施例说明本发明的具体步骤，但不受实施例限制。
[0023] 在本发明中所使用的术语，除非另有说明，一般具有本领域普通技术人员通常理 解的含义。
[0024] 下面结合具体实施例并参照数据进一步详细描述本发明。应理解，这些实施例只 是为了举例说明本发明，而非以任何方式限制本发明的范围。
[0025] 在以下实施例中，未详细描述的各种过程和方法是本领域中公知的常规方法。
[0026] 下面结合具体实施例对本发明进一步说明。 化合物 1 可参照已发表文献制备。（Design, Synthesis, and Biological Evaluation of Combretabenzodiazepines:A Novel Class of Anti-Tubulin Agents.J. Med. Chem. 2015, 58, 1345-1357)。
[0027] 实施例1化合物Ial的制备 第一步8_甲氧基_2_氧代_5_ (3, 4, 5_二甲氧基苯基）_2, 3_二氛-1H-苯并[e] [1，4] 二氮杂-9-磷酸二乙酯（Ml)的制备
将9-羟基-8-甲氧基-5-(3, 4, 5-三甲氧基苯基）-1,3-二氢-2H-苯并[e] [1，4]二 氮杂-2-酮（化合物物1，20_〇1)置于100ml圆底烧瓶中，用干燥的二氯甲烷溶解并冷却 到_5°C，加入三乙胺（120mm〇l)。搅拌反应5分钟，缓慢加入四氯化碳稀释的亚磷酸二乙酯 (70mmm〇l)。反应液-5°C搅拌过夜。加入0. 5mmol/ml ΚΗ2Ρ04溶液淬灭反应，分离有机相并用 饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥。有机层减压蒸馏得到粗产品，粗产品经柱层析纯化 (二氯甲烷/甲醇，100:1)得到黄色油状物6.78g。产率66.7%。虫NMR(400MHz，DMS0-d6) δ 8. 76 - 8. 72 (m, 1H) , 8. 06 - 8. 0 2 (m, 2H) , 7. 45 - 7. 38 (m, 1H) , 6. 84 (dd, J = 18. 9, 3. 9Hz, 3H), 4. 11 - 3. 97 (m, 4H) ,3.85-3.81 (m, 9H), 3. 73 - 3. 69 (m, 3H), 1. 33 - 1. 24 (m, 6H)； 第二步8-甲氧基_2_氧代-5_ (3, 4, 5-二甲氧基苯基）-2, 3-二氢-1H-苯并[e] [1, 4] 二氮杂-9-基二氢磷酸酯（Ial)的制备。
将8-甲氧基-2-氧代-5-(3, 4, 5-三甲氧基苯基）-2, 3-二氢-1H-苯并[e] [1，4]二氮杂_9_磷酸二乙酯（Ml, 12mmol)置于100ml圆底烧瓶中，用干燥的二氯甲 烷溶解，加入三甲基溴硅烷（240mmol)，室温搅拌反应24小时，减压蒸馏除去溶剂得 到粗产品。粗品用甲醇重结晶得到化合物Ial2.84g。黄色固体。产率52.3%。4 NMR (400MHz, D20) δ 8. 44 - 8. 40 (m, 1H), 8. 06 - 8. 02 (m, 2H), 7. 45 - 7. 38 (m, 1H), 6. 84 (dd, J =18. 9, 3. 9Hz, 3H), 3. 85 - 3. 81 (m