本发明涉及医药材料领域，特别是涉及一种治疗烧烫伤的纳米银温敏水凝胶及制备方法。
背景技术：
壳聚糖是自然界唯一大量存在的碱性多糖，是甲壳素经脱乙酰化后形成的一种阳离子多糖。壳聚糖广泛存在于节肢动物的外壳、真菌和酵母的细胞壁中，资源量非常丰富，同时具有可生物降解性、无毒、抑菌等特性。壳聚糖分子上具有大量的羟基和氨基，易被化学修饰，能与金属离子结合形成配合物，形成一系列新型壳聚糖衍生物，具有了更多的生物学功能，因此在医学、生物学领域得到了深入的研究和广泛的应用。
银离子在早期就由于其优异的抗菌杀菌性能被人们所广泛关注,其在医药材料和抗菌材料等领域具有广阔的应用前景。用低浓度银离子处理后的细胞没有明显的细胞聚集、细胞变形、细胞溶解等的变化。由此可见少量的银离子对人体没有明显的伤害作用,同时银具有很好的杀菌作用。纳米银是以纳米技术为基础研制而成的新型抗菌产品，比ag+具有更稳定的物理化学特性，纳米银由于量子效应、小尺寸效应,不易产生耐药性，加速伤口的愈合，在医药材料和抗菌材料等领域具有广阔的应用前景。
温度敏感型水凝胶是指随着外界温度的变化而产生刺激响应性的智能材料。温度敏感型水凝胶结构中具有一定比例的亲水和疏水基团，温度的变化可以影响这些基团的疏水作用和大分子链间的氢键作用，从而影响其形态变化。最常见的温敏性水凝胶是聚ｎ－异丙基丙烯酰胺水凝胶，这种水凝胶的体系内既有疏水基团又有亲水基团，这些基团可以在分子内与水分子作用，在分子外也与水分子发生作用。与合成高分子相比,天然高分子凝胶具有低毒性、生物相容性和可降解性等优点。温敏性壳聚糖水凝胶可根据温度变化处于不同物理形态。常温下为液态，进入人体组织后，在体温作用下凝胶化而固定在局部组织中。壳聚糖只在酸性环境下保持溶液状态，当ph值升高到6.2时，壳聚糖溶液开始出现沉淀，若加入甘油磷酸钠，该系统可在中性条件下保持溶液状态，该系统具有温度敏感性，在体温以下保持溶液状态，温度升高到体温时可形成凝胶。它具有生物相容性好、体内降解时间及凝固时间可调节控制等优点,在工程等领生物工程、医药领域已经得到广泛关注。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种治疗烧烫伤的纳米银温敏水凝胶及制备方法，该水凝胶抗菌谱广、无细胞毒性，高效低毒；均匀喷洒后可在创伤表面形成一层凝胶薄膜，抑菌作用持久、透气性和吸湿性良好，并具有促进创面愈合、止血、止痛、抗炎杀菌的作用。
本发明的技术方案是：
治疗烧烫伤的纳米银温敏水凝胶，取下列重量份的原料制备而成：壳聚糖120-160；硝酸银0.06-0.09；甘油磷酸钠8-12；磺胺嘧啶银19-25；蜂胶14-18；邻苯二甲酸二丁酯22-26；海藻酸钠18-24；犁头草15-23；全蝎9-17；积雪草16-20；鬼毛针14-19；地黄6-11；及己5-10。
优选的方案是：壳聚糖130-150；硝酸银0.07-0.08；甘油磷酸钠9-11；磺胺嘧啶银21-23；蜂胶15-17；邻苯二甲酸二丁酯23-25；海藻酸钠20-22；犁头草17-21；全蝎11-15；积雪草17-19；鬼毛针15-18；地黄7.5-9.5；及己6-9。
更加优选的：壳聚糖140；硝酸银0.075；甘油磷酸钠10；磺胺嘧啶银22；蜂胶16；邻苯二甲酸二丁酯24；海藻酸钠21；犁头草19；全蝎13；积雪草18；鬼毛针17；地黄8.5；及己7.5。
治疗烧烫伤的纳米银温敏水凝胶的制备方法，步骤如下：
（1）取犁头草和鬼毛针混合，置于炒药锅内，文火加热翻炒7-11分钟（优选文火加热翻炒8-10分钟），然后淋入0.25-0.45倍量的麻油（优选淋入0.3-0.4倍量的麻油），继续翻炒至药材表面略有黑斑，取出，与全蝎、积雪草、地黄和及己一同置于中药提取器中，以4.5-7.5倍所述原料药量的乙醇为溶剂，回流提取1-3小时（优选回流提取1.5-2.5小时），收集醇提液，过滤，回收乙醇，得中药浓缩液，备用；
（2）将壳聚糖、硝酸银、磺胺嘧啶银和海藻酸钠混合，置于研磨机内快速研磨2-5小时（优选置于研磨机内快速研磨3-4小时），经紫外光照射10-18小时，得壳聚糖纳米银复合物，备用；
（3）将步骤（2）所得壳聚糖纳米银复合物用稀酸溶解成质量浓度为1%-2%的壳聚糖纳米银复合物溶液，向溶液中加入步骤（1）所得中药浓缩液，混匀，得混合溶液，备用；
（4）向步骤（3）所得混合溶液中加入甘油磷酸钠、蜂胶和邻苯二甲酸二丁酯，升温至30-48℃搅拌18-30分钟（优选升温至36-42℃搅拌22-26分钟），然后经ph调节剂调节ph至6.0-7.0；
（5）将（4）所得的溶液放入35℃-38℃恒温水浴锅中（优选放入36℃-37℃恒温水浴锅中），2-6分钟后即发生相转变，由可流动的胶体溶液转变为不流动的水凝胶。
上述纳米银温敏水凝胶的制备方法，优选的方案是，步骤（1）乙醇的量为所述原料药量的5.5-6.5倍（优选乙醇的量为所述原料药量的6倍）。
上述纳米银温敏水凝胶的制备方法，优选的方案是，步骤（2）紫外光照射12-16小时（优选紫外光照射14小时）。
上述纳米银温敏水凝胶的制备方法，优选的方案是，步骤（3）所述稀酸为0.08-0.16mol/l的柠檬酸水溶液（优选的所述稀酸为0.1-0.14mol/l的柠檬酸水溶液，更加优选的所述稀酸为0.12mol/l的柠檬酸水溶液）。
上述纳米银温敏水凝胶的制备方法，优选的方案是，步骤（3）溶解成质量浓度为1.3%-1.7%的壳聚糖纳米银复合物溶液（优选溶解成质量浓度为1.5%的壳聚糖纳米银复合物溶液）。
上述纳米银温敏水凝胶的制备方法，优选的方案是，步骤（4）ph调节剂为磷酸氢二钠。
上述纳米银温敏水凝胶的制备方法，优选的方案是，步骤（4）调节ph至6.3-6.7（优选调节ph至6.5）。
各原料药的药理功效或理化性质分别为：
壳聚糖：壳聚糖是甲壳素脱n-乙酰基的产物，一般而言，n-乙酰基脱去55%以上的就可称之为壳聚糖，或者说，能在1%乙酸或1%盐酸中溶解1%的脱乙酰甲壳素，这种脱乙酰甲壳素被称之为壳聚糖。生理活性：1、控制胆固醇；2、抑制细菌活性：壳聚糖在弱酸溶剂中易于溶解，特别值得指出的是溶解后的溶液中含有氨基（nh2+），这些氨基通过结合负电子来抑制细菌。壳聚糖的抑制细菌活性，使其在医药、纺织和食品等领域有着广泛的应用。3、预防和控制高血压；4、吸附和排泄重金属；5、免疫效果：壳聚糖具有更高的蛋白吸附能力；在降解酶（溶解酵素）的作用下，壳聚糖具降解性；壳聚糖很容易加工成线，适合做成线状或片状的医用材料；壳聚糖具有亲和力和溶解性，适用于生产各类衍生物；壳聚糖具有更高的化学活性；壳聚糖的持水性高；在血清中，壳聚糖易降解吸收；壳聚糖具有更高的生物降解性；壳聚糖表现出有选择性的高度抑制口腔链球菌生长的作用，同时并不影响其他有益细菌的生长。
硝酸银：无色透明斜方晶系片状晶体，易溶于水和氨水，溶于乙醚和甘油，微溶于无水乙醇，几乎不溶于浓硝酸。其水溶液呈弱酸性。硝酸银溶液由于含有大量银离子，故氧化性较强，并有一定腐蚀性，医学上用于腐蚀增生的肉芽组织，稀溶液用于眼部感染的杀菌剂。熔化后为浅黄色液体，固化后仍为白色。用途：分析化学用于沉淀氯离子，工作基准的硝酸银用于标定氯化钠溶液。无机工业用于制造其他银盐。电子工业用于制造导电粘合剂、新型气体净化剂、a8x分子筛、镀银均压服和带电作业的手套等。感光工业用于制造电影胶片、x光照相底片和照相胶片等的感光材料。电镀工业用于电子元件和其他工艺品的镀银，也大量用作镜子和保温瓶胆的镀银材料。电池工业用于生产银锌电池。医药上用作杀菌剂、腐蚀剂。日化工业用于染毛发等。分析化学中用于测定氯、溴、碘氰化物和硫氰酸盐。
甘油磷酸纳：为无色结晶或白色结晶状粉末；无臭，味咸。本品在水中易溶，在乙醇或丙酮中不溶。单纯的壳聚糖只在酸性环境下保持溶液状态,当ph值升高到6.2时,壳聚糖溶液开始出现沉淀,但在弱碱甘油磷酸钠参与下,该系统可在中性条件下保持稳定的溶液状态,这为该系统加载蛋白质类的药物甚至活的细胞提供了便利条件。最后是该系统具有温敏特性,在室温以下呈溶液状态,温度升高到体温时可固化形成凝胶,从而可以缓释加载药物的效果。
磺胺嘧啶银：是一种磺胺类/银盐抗细菌药，为白色或类白色的结晶性粉末。用于治疗烧烫伤创面感染，除控制感染外，还可促使创面干燥、结痂和促进愈合。具有磺胺嘧啶的抗菌作用与银盐的收敛作用，对绿脓杆菌具有强大抑制作用，比甲磺灭隆强。抗菌谱广，对多数革兰阳性菌和阴性菌有良好的抗菌活性，抗菌作用不受脓液中paba（对氨苯甲酸）的影响；抗铜绿假单胞菌作用显著强于磺胺米隆。用于预防和治疗ⅱ度、ⅲ度烧伤或者烫伤继发的创面感染。
蜂胶：是蜜蜂从植物芽孢或树干上采集的树脂，将其混入其上腭腺、蜡腺的分泌物加工而成的一种具有芳香气味的胶状固体物。是蜜蜂科动物中华蜜蜂等修补蜂巢所分泌的黄褐色或黑褐色的粘性物质，可入药。其性平，味苦、辛、微甘，有润肤生肌，消炎止痛的功效，可治疗胃溃疡、口腔溃疡、烧烫伤、皮肤裂痛，防辐射等病症。主要功效：蜂胶具有的抗菌、美容养颜、促进细胞再生的作用，它不但能消灭真菌感染，还能够分解色素、平复皱纹、减缓衰老，加快组织细胞的再生和伤口的愈合，对痘痘遗留下的痘疤痘印也有很好疗效。
海藻酸钠：是一种天然多糖，具有药物制剂辅料所需的稳定性、溶解性、粘性和安全性。可制成薄膜，用于糖果防粘包装。可用于增加血容量和维持血压，排除烧伤所产生的组胺类毒素以及创伤失血、手术前后循环系统的稳定、大量出血性休克、烧伤性休克、高烧和急性痢疾等全身脱水，治疗效果良好。还具有使胆固醇排出体外，抑制pb、cd、sr被人体吸收以及保护胃肠道、整肠、减肥、降血糖的作用。在药剂上主要用作助悬剂、乳化剂、黏稠剂、微囊的囊材等。藻酸钠是一种高粘性的高分子化合物。它与淀粉、纤维素等的不同之处，是它具有羧基，是β-d-甘露糖醛酸的醛基以苷键形成的高聚糖醛酸。其功能性质如下：（1）亲水性强，在冷水和温水中都能溶解，形成非常粘稠的均匀的溶液。（2）形成的真溶液具有其他类似物难于获得的柔软性、均一性及其他优良特性。（3）具有很强的保护胶体的作用，对油脂的乳化力强。（4）在溶液中加入铝、钡、钙、铜、铁、铅、锌、镍等金属盐，就会生成不溶性的藻酸盐。这些金属盐是钠、钾的磷酸盐、乙酸盐等的缓冲剂，可以抑制、延迟凝固。（5）通常ph值为7，呈中性，可在4-10之间调整。（6）是线状高分子电解质，可制成强韧的纤维（藻朊酸纤维）或薄膜，具有防止龟裂作用。（7）粘着性小，适用于经纱浆料、脱模等。
犁头草：基源：为堇菜科植物犁头草的全草或根。性味：味苦；微辛；性寒。归经：肝；脾经。功能主治：清热解毒；化瘀排脓；凉血清肝。主痈疽肿毒；乳痈；肠痈下血；化脓性骨髓炎；黄疸；目赤肿痛；瘰疬；外伤出血；蛇伤。
全蝎：基源：本品为钳蝎科动物东亚钳蝎的干燥体。性味：辛，平；有毒。归经：归肝经。功效：息风镇痉，攻毒散结，通络止痛。主治：用于小儿惊风，抽搐痉挛，半身不遂，破伤风，风湿顽痹，偏正头痛，疮疡，瘰疬。
积雪草：基源：为双子叶植物伞形科积雪草的干燥全草或带根全草。成分：含多种α-香树脂醇型的三萜成分，其中有积雪草苷、参枯尼苷、异参枯尼苷，羟基积雪草苷，玻热模苷、破热米苷和破热米酸等，以及马达积雪草酸。药性：苦、辛，寒。归肝、脾、肾经。功用主治：清热解毒，利湿消肿。是东方人的长寿药，可益脑提神。研究表明具有滋补、消炎、愈合伤口、利尿通便和镇定作用。对麻风病、溃疡也有疗效，对血液净化及免疫力有激活作用，因其可刺激深层皮肤细胞的更替。它是神经滋补剂，能提高记忆力，减轻精神疲劳；还可降血压，治疗肝病等。
鬼毛针：真菌类担子菌纲伞菌目伞菌科鬼毛针，以菌索入药。为白蘑科真菌安络小皮伞菌素。化学成份：安络小皮伞菌丝，菌索中含甘露醇，胆甾醇乙酸酯，甘氨酸，天冬氨酸，苏氨酸，缬氨酸等，还从菌丝体中分离出β-谷甾醇，棕榈酸，二十八碳酸，对羟基桂皮酸及小麦黄素，另含腐殖酸。性味：微苦；性温。归经：归肝经。功能主治：活血定痛。主跌打损伤；骨折疼痛；偏头痛，各种神经痛，腰腿疼痛，风湿痹痛。
地黄：基源：本品为玄参科植物地黄的新鲜或干燥块根。生地黄：多呈不规则的团块状或长圆形，中间膨大，两端稍细，有的细小，长条状，稍扁而扭曲。性味：鲜地黄甘、苦，寒。生地黄：性味：甘，寒。归经：归心、肝、肾经。功效：鲜地黄清热生津，凉血，止血。主治：用于热病伤阴，舌绛烦渴。发斑发疹，吐血，衄血。咽喉肿痛。生地黄：功效：清热凉血，养阴，生津。用于热病舌绛烦渴，阴虚内热，骨蒸劳热，内热消渴，吐血，岖血，发斑发疹。
及己：基源：为金粟兰科植物及己的根。化学成份：全草含焦莪术酮、左旋二氢焦莪术酮。性味：“味苦，平，有毒。”归经：肝经。功能主治：活血散瘀。治跌打损伤，疮疥，疖肿，月经闭止。杀虫。用于跌打损伤、无名肿毒、头癣、白秃、皮肤瘙痒、闭经；杀蛆和孑孓。
本发明提供的治疗烧烫伤的纳米银温敏水凝胶组方科学，制备方法简单，。除此之外，本发明的优良效果还表现在：
1、本发明以固相法制成壳聚糖纳米银复合物，并加载多味中药原料，制备治疗烧烫伤的纳米银温敏水凝胶，同时具有纳米银和壳聚糖的特点和优势，不仅具备纳米银抗菌性，还具备壳聚糖促进细胞生长，减少疤痕生成的作用；
2、本发明所得纳米银温敏水凝胶具有抑菌、促进创伤愈合、减少疤痕生成、止血的作用，并具有良好的保湿、透气性，无细胞毒性，抑菌效果好，作用持久；
3、本发明所得纳米银温敏水凝胶对烧烫伤的治疗率高，能较好的预防创面感染，还可以减少抗生素的使用，并且制备工艺简单，具有广阔的应用前景。
具体实施方式
下面结合实施例和实验例详细说明本发明的技术方案，但保护范围不被此限制。
实施例1治疗烧烫伤的纳米银温敏水凝胶，取下列重量份的原料制备而成（50g/份）：壳聚糖120份；硝酸银0.06份；甘油磷酸钠8份；磺胺嘧啶银19份；蜂胶14份；邻苯二甲酸二丁酯22份；海藻酸钠18份；犁头草15份；全蝎9份；积雪草16份；鬼毛针14份；地黄6份；及己5份。
治疗烧烫伤的纳米银温敏水凝胶的制备方法是：
（1）取犁头草和鬼毛针混合，置于炒药锅内，文火加热翻炒7分钟，然后淋入0.25倍量的麻油，继续翻炒至药材表面略有黑斑，取出，与全蝎、积雪草、地黄和及己一同置于中药提取器中，以4.5倍所述原料药量的乙醇为溶剂，回流提取1小时，收集醇提液，过滤，回收乙醇，得中药浓缩液，备用；
（2）将壳聚糖、硝酸银、磺胺嘧啶银和海藻酸钠混合，置于研磨机内快速研磨2小时，经紫外光照射10小时，得壳聚糖纳米银复合物，备用；
（3）将步骤（2）所得壳聚糖纳米银复合物用稀酸溶解成质量浓度为1%的壳聚糖纳米银复合物溶液，向溶液中加入步骤（1）所得中药浓缩液，混匀，得混合溶液，备用；所述稀酸为0.08mol/l的柠檬酸水溶液；
（4）向步骤（3）所得混合溶液中加入甘油磷酸钠、蜂胶和邻苯二甲酸二丁酯，升温至30℃搅拌18分钟，然后经ph调节剂磷酸氢二钠调节ph至6.0；
（5）将（4）所得的溶液放入35℃恒温水浴锅中，6分钟后即发生相转变，由可流动的胶体溶液转变为不流动的水凝胶。
实施例2治疗烧烫伤的纳米银温敏水凝胶，取下列重量份的原料制备而成（30g/份）：壳聚糖160份；硝酸银0.09份；甘油磷酸钠12份；磺胺嘧啶银25份；蜂胶18份；邻苯二甲酸二丁酯26份；海藻酸钠24份；犁头草23份；全蝎17份；积雪草20份；鬼毛针19份；地黄11份；及己10份。
治疗烧烫伤的纳米银温敏水凝胶的制备方法是：
（1）取犁头草和鬼毛针混合，置于炒药锅内，文火加热翻炒11分钟，然后淋入0.45倍量的麻油，继续翻炒至药材表面略有黑斑，取出，与全蝎、积雪草、地黄和及己一同置于中药提取器中，以7.5倍所述原料药量的乙醇为溶剂，回流提取3小时，收集醇提液，过滤，回收乙醇，得中药浓缩液，备用；
（2）将壳聚糖、硝酸银、磺胺嘧啶银和海藻酸钠混合，置于研磨机内快速研磨5小时，经紫外光照射18小时，得壳聚糖纳米银复合物，备用；
（3）将步骤（2）所得壳聚糖纳米银复合物用稀酸溶解成质量浓度为2%的壳聚糖纳米银复合物溶液，向溶液中加入步骤（1）所得中药浓缩液，混匀，得混合溶液，备用；所述稀酸为0.16mol/l的柠檬酸水溶液；
（4）向步骤（3）所得混合溶液中加入甘油磷酸钠、蜂胶和邻苯二甲酸二丁酯，升温至48℃搅拌30分钟，然后经ph调节剂磷酸氢二钠调节ph至7.0；
（5）将（4）所得的溶液放入38℃恒温水浴锅中，2分钟后即发生相转变，由可流动的胶体溶液转变为不流动的水凝胶。
实施例3治疗烧烫伤的纳米银温敏水凝胶，取下列重量份的原料制备而成（45g/份）：壳聚糖130份；硝酸银0.07份；甘油磷酸钠9份；磺胺嘧啶银21份；蜂胶15份；邻苯二甲酸二丁酯23份；海藻酸钠20份；犁头草17份；全蝎11份；积雪草17份；鬼毛针15份；地黄7.5份；及己6份。
治疗烧烫伤的纳米银温敏水凝胶的制备方法是：
（1）取犁头草和鬼毛针混合，置于炒药锅内，文火加热翻炒8分钟，然后淋入0.3倍量的麻油，继续翻炒至药材表面略有黑斑，取出，与全蝎、积雪草、地黄和及己一同置于中药提取器中，以5.5倍所述原料药量的乙醇为溶剂，回流提取1.5小时，收集醇提液，过滤，回收乙醇，得中药浓缩液，备用；
（2）将壳聚糖、硝酸银、磺胺嘧啶银和海藻酸钠混合，置于研磨机内快速研磨3小时，经紫外光照射12小时，得壳聚糖纳米银复合物，备用；
（3）将步骤（2）所得壳聚糖纳米银复合物用稀酸溶解成质量浓度为1.3%的壳聚糖纳米银复合物溶液，向溶液中加入步骤（1）所得中药浓缩液，混匀，得混合溶液，备用；所述稀酸为0.1mol/l的柠檬酸水溶液；
（4）向步骤（3）所得混合溶液中加入甘油磷酸钠、蜂胶和邻苯二甲酸二丁酯，升温至36℃搅拌22分钟，然后经ph调节剂磷酸氢二钠调节ph至6.3；
（5）将（4）所得的溶液放入36℃恒温水浴锅中，5分钟后即发生相转变，由可流动的胶体溶液转变为不流动的水凝胶。
实施例4治疗烧烫伤的纳米银温敏水凝胶，取下列重量份的原料制备而成（35g/份）：壳聚糖150份；硝酸银0.08份；甘油磷酸钠11份；磺胺嘧啶银23份；蜂胶17份；邻苯二甲酸二丁酯25份；海藻酸钠22份；犁头草21份；全蝎15份；积雪草19份；鬼毛针18份；地黄9.5份；及己9份。
治疗烧烫伤的纳米银温敏水凝胶的制备方法是：
（1）取犁头草和鬼毛针混合，置于炒药锅内，文火加热翻炒10分钟，然后淋入0.4倍量的麻油，继续翻炒至药材表面略有黑斑，取出，与全蝎、积雪草、地黄和及己一同置于中药提取器中，以6.5倍所述原料药量的乙醇为溶剂，回流提取2.5小时，收集醇提液，过滤，回收乙醇，得中药浓缩液，备用；
（2）将壳聚糖、硝酸银、磺胺嘧啶银和海藻酸钠混合，置于研磨机内快速研磨4小时，经紫外光照射16小时，得壳聚糖纳米银复合物，备用；
（3）将步骤（2）所得壳聚糖纳米银复合物用稀酸溶解成质量浓度为1.7%的壳聚糖纳米银复合物溶液，向溶液中加入步骤（1）所得中药浓缩液，混匀，得混合溶液，备用；所述稀酸为0.14mol/l的柠檬酸水溶液；
（4）向步骤（3）所得混合溶液中加入甘油磷酸钠、蜂胶和邻苯二甲酸二丁酯，升温至42℃搅拌26分钟，然后经ph调节剂磷酸氢二钠调节ph至6.7；
（5）将（4）所得的溶液放入37℃恒温水浴锅中，3分钟后即发生相转变，由可流动的胶体溶液转变为不流动的水凝胶。
实施例5治疗烧烫伤的纳米银温敏水凝胶，取下列重量份的原料制备而成（40g/份）：壳聚糖140份；硝酸银0.075份；甘油磷酸钠10份；磺胺嘧啶银22份；蜂胶16份；邻苯二甲酸二丁酯24份；海藻酸钠21份；犁头草19份；全蝎13份；积雪草18份；鬼毛针17份；地黄8.5份；及己7.5份。
治疗烧烫伤的纳米银温敏水凝胶的制备方法是：
（1）取犁头草和鬼毛针混合，置于炒药锅内，文火加热翻炒6分钟，然后淋入0.35倍量的麻油，继续翻炒至药材表面略有黑斑，取出，与全蝎、积雪草、地黄和及己一同置于中药提取器中，以6倍所述原料药量的乙醇为溶剂，回流提取2小时，收集醇提液，过滤，回收乙醇，得中药浓缩液，备用；
（2）将壳聚糖、硝酸银、磺胺嘧啶银和海藻酸钠混合，置于研磨机内快速研磨3.5小时，经紫外光照射14小时，得壳聚糖纳米银复合物，备用；
（3）将步骤（2）所得壳聚糖纳米银复合物用稀酸溶解成质量浓度为1.5%的壳聚糖纳米银复合物溶液，向溶液中加入步骤（1）所得中药浓缩液，混匀，得混合溶液，备用；
（4）向步骤（3）所得混合溶液中加入甘油磷酸钠、蜂胶和邻苯二甲酸二丁酯，升温至39℃搅拌24分钟，然后经ph调节剂磷酸氢二钠调节ph至6.5；
（5）将（4）所得的溶液放入36.5℃恒温水浴锅中，4分钟后即发生相转变，由可流动的胶体溶液转变为不流动的水凝胶。
试验例1本发明治疗烧烫伤的纳米银温敏水凝胶的抑菌作用试验
1试验用材料
测试样品：a样品：0.05%含纳米银的温敏水凝胶；b样品：0.025%含纳米银的温敏水凝胶；c样品：0.01%含纳米银的温敏水凝胶；d样品：壳聚糖温敏水凝胶。
培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、沙氏培养基、血清培养基。
供试菌株：（1）细菌：铜绿假单胞菌atcc27853、金黄色葡萄球菌atcc25923、大肠杆菌atcc25922（均由泰山医学院提供）、阴沟肠杆菌（购置于南京一基生化科技有限公司）和肺炎链球菌（购置于上海北诺生物科技有限公司）。
（2）真菌：白色念珠菌atcc10231（购置于上海素尔生物科技有限公司）、光滑念珠菌（购置于南京便诊生物科技有限公司）、絮状表皮癣菌（购置于上海丰寿生物科技有限公司）。
2.实验方法
2.1各样品对5种细菌的抑菌作用
将保存的各菌种分别进行活化培养，长出单菌落后，用接种环挑取少许菌体于装有9ml无菌生理盐水的试管内，振荡均匀，分别制备107cfu/ml的悬浮液。在无菌条件下，在90mm的培养皿中加适量的培养基，凝固后加100微升菌液，涂布均匀，静置20-30min。将制备的温敏水凝胶样品分别做成直径为0.4cm的圆形，放置在固体培养基上，同一培养皿上依次放置壳聚糖温敏、0.01%含纳米银的温敏水凝胶、0.025%含纳米银的温敏水凝胶、0.05%含纳米银的温敏水凝胶，重复6次，在37℃的恒温培养箱中培养24h；观察样品与培养基的接触面有无细菌生长，并测量抑菌圈的大小，采用spssv11.5软件统计分析，数据以均数±标准差（x±s）表示。
2.2各样品对3种真菌的抑菌作用
将保存的各菌种分别进行活化培养，分别制备浓度为1×106cfu/ml的菌液,其它操作同上，37℃的恒温培养箱中培养48h，观察样品与培养基的接触面有无细菌生长，测量抑菌圈的大小。采用spss软件统计分析，计量资料以均数±标准差（x±s）表示。
3结果与分析
3.1含纳米银温敏水凝胶对5种常见细菌：铜绿假单胞菌atcc27853、金黄色葡萄球菌atcc25923、大肠杆菌atcc25922、阴沟肠杆菌和肺炎链球菌的抑菌圈直径见表1。
表1各样品对5种细菌的接触抑菌抑菌圈直径（单位：cm；样品直径0.4cm）
由表1数据可知，含纳米银的温敏水凝胶及壳聚糖温敏水凝胶对实验所用
5种细菌均具有较好的接触抑菌作用，样品与培养基的接触面均无细菌生长。随着纳米银含量的增加，抑菌效果增强，说明纳米银增强了壳聚糖温敏水凝胶的抑菌作用。
3.2各样品对三种真菌：白色念珠菌atcc10231、光滑念珠菌、絮状表皮癣菌的接触抑菌抑菌圈直径见表2。
表2各样品对3种真菌的接触抑菌抑菌圈直径（单位：cm；样品直径0.4cm）
含纳米银的温敏水凝胶及壳聚糖温敏水凝胶对实验所用三种真菌均具有较好的接触抑菌作用，凝胶样品与培养基的接触面均无真菌生长，随着纳米银含量的增加，抑菌作用增强。含纳米银的温敏水凝胶对絮状表皮癣的抑菌作用最明显，其次是光滑念珠菌，对白色念珠菌的抑菌作用明显弱于前两种真菌。
4.结果与讨论
实验结果显示：含纳米银的温敏水凝胶对上述5种细菌菌株和3种真菌菌株均具有较好的接触抑菌作用。含纳米银温敏水凝胶的抑菌作用优于壳聚糖温敏水凝胶的抑菌作用；对细菌的抑菌作用优于对真菌的抑菌作用；随着纳米银含量的增加，抑菌作用增强，纳米银增强了壳聚糖温敏水凝胶的抑菌作用。
试验例2本发明治疗烧烫伤的纳米银温敏水凝胶的临床应用：
选取2012年7月-2014年11月我院收治的烧烫伤患者共400例，其中男性235例，女性165例，年龄在7-59岁，烧伤深度：一度烧烫伤200例，二度烧烫伤149例，三度烧烫伤51例。将患者随机分为实验组和对照组，两组患者在性别、病情、年龄等方面，经统计学处理差异无显著性意义（p＞0.05），具有可比性。实验组使用本发明所得治疗烧烫伤的纳米银温敏水凝胶，使用方法为：根据伤口大小，取适量均匀涂抹于患处，一天2-3次，4天一个疗程。共观察治疗三个疗程。对照组使用其他药物（如烧烫膏、京万红烫伤药膏和紫花烧伤膏等药物）。疗效判定标准：治愈：症状消失、创面愈合、无红肿、色素沉着；显效：症状消失，创面愈合50%以上，肤色轻度充血；有效：症状明显减轻，创面愈合25%以上，肤色充血明显，伴轻度色素沉着；无效：症状未见改善，创面感染。总有效率=（治愈例数+显效例数+有效例数）/总观察病例数×100%。结果如表3所示。
表3：实验组和对照组的治疗结果比较
由表3数据可知，实验组中治愈163例（67.92%），显效48例（20%），有效26例（10.83%），无效3例（1.25%），总有效率为98.75%；而对照组总有效率为81.25%，实验组治疗效果明显优于对照组。
最后应说明的是，实施例只是本发明最优的具体实施方式而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。