本发明涉及中医药及生物科技领域，尤其是一种具有补肾益精、润肺养阴、抗疲劳、增强机体免疫力、调节内分泌、改善睡眠、健脑益智、延缓衰老功效的雪蛤活性肽及其制备方法。
背景技术：
雪蛤是东北林蛙的别名,作为一味很有滋补作用的药食两用药材,取自雌性东北林蛙的输卵管，东北一带称呼为林蛙油，广东、香港一带称呼为雪蛤油、雪蛤膏，但是，随着时间推移“油”、“膏”就省略掉了，简称为“雪蛤”；主要产于我国东北的长白山脉、小兴安岭、张广才岭、老爷岭、完达山脉，是东北地区特有的蛙种，其雌蛙输卵管的干燥物称之为"雪蛤油"，具有补虚润肺、强身健体的功效，自古在民间就被誉为与东北三宝齐名的传世滋补佳品。《本草纲目》记载：雪蛤油具有：解虚劳发热，利水消肿、补虚损。尤益产妇。林蛙油的主要成分是蛙醇，具有“补肾益精，养阴润肺”的功效。《中国药典》收载：雪蛤油具有“补肾益精，养阴润肺”之功效。用于“阴虚体弱，神疲乏力、心悸失眠、盗汗不止、劳嗍咳血”等正的治疗。《中药大词典》记载：雪蛤油具有独特的“补肾益精、润肺养阴”之功效。用于治疗“病后、产后虚弱、肺痨咳嗽吐血、盗汗”等症。《中国药物学》记载：雪蛤油是“润肺、生津、补虚的身体增强剂，是身体衰弱的滋补佳品”。作为一味很有滋补作用的药材，具有补肾益精、润肺养阴的功效。还可用于阴虚体弱，神疲乏力、心悸失眠、盗汗不止、劳嗍咳血、心烦不眠，肺燥咳嗽等症。现代药理研究发现雪蛤含有蛋白质、赖氨酸、精氨酸、组氨酸等多种人体必需的氨基酸和钙、钾、钠、镁、锌等多种微量元素。雪蛤还具有抗疲劳、增强机体免疫力、调节内分泌、改善睡眠、健脑益智、延缓衰老等功效，男女老少都可以服用。雪蛤营养丰富，但雪蛤蛋白是大分子蛋白，相对吸收率低，如添加中草药，结合现代生物技术做成小分子活性肽，将具有更好的临床功效。
活性肽是一千多种肽的总称（如大豆肽，海参肽等是活性肽中的一种）。它在人的生长发育，新陈代谢，疾病以及衰老，死亡的过程中起着关键作用。活性肽是人体中最重要的活性物质。正是因为它在体内分泌量的增多或减少，才使人类有了幼年，童年，成年，老年直到死亡的周期。而服用活性肽便打破了生命的这一周期，从而达到延长生命，有效减缓衰老的神奇效果。肽在生物体内作为载体和运输工具，将人们平常所食的营养输送到人体各个部位，充分发挥其功能；肽在生物体内作为神经递质，传递信息；肽具有极强的活性和多样性，可全面调节人体生理功能，增强人体生理活性；肽不仅能提供人体生长发育所需的营养物质，而且具有特殊的生物学功能，可防治血栓、高血脂、高血压，延缓衰老，抗疲劳，提高机体免疫力，促进人体对蛋白质、维生素、氨基酸、钙、铁、锌、硒、镁、铜等多种对人体有益微量元素的吸收；有些小肽具有原食品蛋白质或其他组成氨基酸所没有的重要的生理机能。生物活性肽中有些分子量较小的小肽，与氨基酸运输功能相比，生物活性肽中的小肽具有吸收快速、低耗和不饱和的特点。因此如何将具有：抗疲劳、增强机体免疫力、调节内分泌、改善睡眠、健脑益智、延缓衰老等功效的雪蛤以及中草药做成功能和吸收更好的活性肽，更好地达到中医药治未病的目的，真正实现中药现代化，已成为中医药及生物科技领域亟待解决的课题。
技术实现要素：
为克服现有技术的不足，本发明提供了一种营养丰富、吸收好、并具有显著抗疲劳、增强免疫力、调节内分泌、改善睡眠、健脑益智、延缓衰老等功效的雪蛤活性肽及其制备方法。本发明一种雪蛤活性肽及其制备方法是以雪蛤和中草药为主要原料，采取传统中医配方及严谨中药炮制规范，运用现代生物技术先进的加工工艺制备而成，其工序科学严谨，操作性强。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：一种雪蛤活性肽及其制备方法，其特殊之处在于包括雪蛤活性肽、中药活性肽、低聚异麦芽糖组成。其组分分别为：雪蛤活性肽10%-80%;中药活性肽1%-5%；低聚异麦芽糖5%-15%，所述组分重量百分比之和为100%。
本发明所述的雪蛤活性肽及其制备方法是以雪蛤为原料，经泡发、匀浆、酶解、离心而成的雪蛤活性肽液。
本发明所述的中药活性肽是以山楂、龙眼肉、葛根、人参、红景天、枸杞子、熟地、黄芪中的一种或两种以上的组合原料，采用传统中药炮制规范炮制后，经破碎、蒸煮、酶解、离心而成的中草药活性肽液。
本发明所述的低聚异麦芽糖是赋形剂或甜味剂，也是功能性益生元。
本发明一种雪蛤活性肽的制备方法，其特征在于经下列步骤实施：
1、雪蛤活性肽的制备：选取干燥净雪蛤，添加雪蛤重量20-30倍的纯净水进行稀释泡发24小时后用组织破碎机破碎匀浆，匀浆后的雪蛤调ph值5-7，加入蛋白水解酶进行酶解，酶用量为每克阿胶添加6000-10000个酶活单位（u），温度控制50-60摄氏度之间，酶解3-6小时；酶解完毕沸水热浴灭酶10-20分钟后冷却离心，离心机转速8000-13000rpm左右，即得雪蛤活性肽液。
2、中药活性肽的制备：称取中草药，按中药炮制规范炮制后破碎处理；添加中草药10-20倍的纯净水进行加热煮沸60-90分钟后冷却，过80目筛滤去药渣，加纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶（1:1:1）进行多酶酶解，酶用量为每克中药添加3000-8000个酶活单位（u），温度控制在45-60摄氏度之间，酶解2-4小时；酶解完毕沸水热浴灭酶10-20分钟后冷却离心，离心机转速5000-10000rpm左右，即得中草药活性肽液。
3、调配：取步骤1得到的雪蛤活性肽液、步骤2得到的中草药活性肽液，称取低聚异麦芽糖粉进行复合调配。
4、调配好的混合肽液放不锈钢桶进蒸汽灭菌柜进行杀菌，蒸汽灭菌柜升温至105-120摄氏度杀菌15-40分钟，冷却后即可加纯净水按照口服液生产工艺规范灌装成口服液产品；可将混合肽液按照冻干工艺规范灌装冻干瓶上冻干机冷冻干燥成瓶装冻干粉产品；可将混合肽液喷雾干燥或冷冻干燥制备成粉末状颗粒，按胶囊生产工艺规范灌装成胶囊产品。
5、本发明步骤1、所述的蛋白水解酶为胰蛋白酶、风味蛋白酶、复合蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶中的一种或两种以上的组合。
本发明选用雪蛤、中草药为原料，通过控制酶解生成大量活性肽成分，其营养价值和吸收利用率以及食用安全性大大提高，抗疲劳、增强免疫力、调节内分泌、改善睡眠、健脑益智、延缓衰老等活性增强，并减轻了中药的腥苦味，辅以具有益生元称号的低聚异麦芽糖，不仅改善了口感，也使肠道菌群增殖，改善了胃肠功能，使有效成分更好地吸收利用。本发明一种雪蛤活性肽按照冻干工艺规范灌装冻干瓶上冻干机冷冻干燥成瓶装冻干粉产品，真空冷冻干燥无添加剂防腐剂，安全性高，保质期长；可加纯净水按照口服液生产工艺规范灌装成口服液产品，特有的天然风味口感良好；将混合肽液喷雾干燥或冷冻干燥制备成粉末状颗粒，按胶囊生产工艺规范灌装成胶囊产品，服用、携带方便。本发明制备工艺严谨合理，操作性强，非常适合规模化生产。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步说明
实施例一、1、雪蛤活性肽液的制备：选取干燥净雪蛤20kg；添加雪蛤重量30倍的纯净水进行稀释泡发24小时后用组织破碎机破碎匀浆，匀浆后的雪蛤调ph值6，加入木瓜蛋白酶、风味蛋白酶、胰蛋白酶（1:1:1）多酶进行酶解，酶用量为每克雪蛤添加9500个酶活单位（u），温度控制50摄氏度，酶解3.5小时；酶解完毕沸水热浴灭酶10分钟后冷却离心，离心机转速12000rpm左右，即得雪蛤活性肽液。
2、中草药活性肽的制备：称取葛根1.5kg红景天1.5kg龙眼肉2kg黄芪1.5kg，按中药炮制规范炮制后破碎处理；添加破碎中草药20倍的纯净水进行加热煮沸90分钟后冷却，用80目筛滤去药渣，加纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶（1:1:1）进行多酶酶解，酶用量为每克中药添加5000个酶活单位（u），温度控制在50摄氏度，酶解3小时；酶解完毕沸水热浴灭酶10分钟后冷却离心，离心机转速12000rpm左右，即得中草药活性肽液。
3、调配：取步骤1得到的雪蛤活性肽液、步骤2得到的中草药活性肽液，称取低聚异麦芽糖粉10kg进行复合调配。
4、调配好的雪蛤混合肽液放不锈钢桶进蒸汽灭菌柜进行杀菌，蒸汽灭菌柜升温至120摄氏度杀菌20分钟，冷却后即可加纯净水按照口服液生产工艺规范灌装成口服液产品；可将混合肽液按照冻干工艺规范灌装冻干瓶上冻干机冷冻干燥成瓶装冻干粉产品；可将混合肽液喷雾干燥或冷冻干燥制备成粉末状颗粒，按胶囊生产工艺规范灌装成胶囊产品。
实施例二、1、雪蛤活性肽液的制备：选取干燥净雪蛤16kg，添加雪蛤重量25倍的纯净水进行稀释泡发24小时后用组织破碎机破碎匀浆，匀浆后的雪蛤调ph值6.5，加入木瓜蛋白酶、复合蛋白酶、风味蛋白酶（1:1:1）多酶进行酶解，酶用量为每克雪蛤添加10000个酶活单位（u），温度控制55摄氏度，酶解3小时；酶解完毕沸水热浴灭酶15分钟后冷却离心，离心机转速12000rpm左右，即得雪蛤活性肽液。
2、中草药活性肽的制备：称取山楂2kg枸杞子2kg人参0.5kg熟地2kg，按中药炮制规范炮制后破碎处理；添加破碎中草药15倍的纯净水进行加热煮沸60分钟后冷却，用80目筛滤去药渣，加纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶（1:1:1）进行多酶酶解，酶用量为每克中药添加4000个酶活单位（u），温度控制在45摄氏度，酶解3.5小时；酶解完毕沸水热浴灭酶10分钟后冷却离心，离心机转速11000rpm左右，即得中草药活性肽液。
3、调配：取步骤1得到的雪蛤活性肽液、步骤2得到的中草药活性肽液，称取低聚异麦芽糖粉12kg进行复合调配。
4、调配好的雪蛤混合肽液放不锈钢桶进蒸汽灭菌柜进行杀菌，蒸汽灭菌柜升温至115摄氏度杀菌30分钟，冷却后即可加纯净水按照口服液生产工艺规范灌装成口服液产品；可将混合肽液按照冻干工艺规范灌装冻干瓶上冻干机冷冻干燥成瓶装冻干粉产品；可将混合肽液喷雾干燥或冷冻干燥制备成粉末状颗粒，按胶囊生产工艺规范灌装成胶囊产品。
实施例三、1、雪蛤活性肽液的制备：选取干燥净雪蛤15kg；添加雪蛤重量23倍的纯净水进行稀释泡发24小时后用组织破碎机破碎匀浆，匀浆后的阿胶调ph值6，加入中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味蛋白酶（1:1:1）多酶进行酶解，酶用量为每克阿胶添加8000个酶活单位（u），温度控制58摄氏度，酶解4小时；酶解完毕沸水热浴灭酶12分钟后冷却离心，离心机转速10000rpm左右，即得雪蛤活性肽液。
2、中草药活性肽的制备：称取龙眼肉2kg山楂2.5kg红景天2kg黄芪2kg，按中药炮制规范炮制后破碎处理；添加破碎中草药12倍的纯净水进行加热煮沸55分钟后冷却，用80目筛滤去药渣，加纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶（1:1:1）进行多酶酶解，酶用量为每克中药添加3000个酶活单位（u），温度控制在55摄氏度，酶解3.5小时；酶解完毕沸水热浴灭酶12分钟后冷却离心，离心机转速10000rpm左右，即得中草药活性肽液。
3、调配：取步骤1得到的雪蛤活性肽液、步骤2得到的中草药活性肽液，称取低聚异麦芽糖粉8kg进行复合调配。
4、调配好的雪蛤混合肽液放不锈钢桶进蒸汽灭菌柜进行杀菌，蒸汽灭菌柜升温至112摄氏度杀菌40分钟，冷却后即可加纯净水按照口服液生产工艺规范灌装成口服液产品；可将混合肽液按照冻干工艺规范灌装冻干瓶上冻干机冷冻干燥成瓶装冻干粉产品；可将混合肽液喷雾干燥或冷冻干燥制备成粉末状颗粒，按胶囊生产工艺规范灌装成胶囊产品。
实施例四、1、雪蛤活性肽液的制备：选取干燥净雪蛤10kg，添加雪蛤重量26倍的纯净水进行稀释泡发24小时后用组织破碎机破碎匀浆，匀浆后的阿胶调ph值6，加入木瓜蛋白酶、风味蛋白酶（1:1）双酶进行酶解，酶用量为每克阿胶添加8500个酶活单位（u），温度控制56摄氏度，酶解4.5小时；酶解完毕沸水热浴灭酶13分钟后冷却离心，离心机转速12000rpm左右，即得雪蛤活性肽液。
2、中草药活性肽的制备：称取葛根2kg枸杞子2.5kg龙眼肉3kg，按中药炮制规范炮制后破碎处理；添加中草药16倍的纯净水进行加热煮沸75分钟后冷却，用80目筛滤去药渣，加纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶（1:1:1）进行多酶酶解，酶用量为每克中药添加3000个酶活单位（u），温度控制在58摄氏度，酶解4小时；酶解完毕沸水热浴灭酶10分钟后冷却离心，离心机转速12000rpm左右，即得中草药活性肽液。
3、调配：取步骤1得到的雪蛤活性肽液、步骤2得到的中草药活性肽液，称取低聚异麦芽糖粉11kg进行复合调配。
4、调配好的雪蛤混合肽液放不锈钢桶进蒸汽灭菌柜进行杀菌，蒸汽灭菌柜升温至105摄氏度杀菌40分钟，冷却后即可加纯净水按照口服液生产工艺规范灌装成口服液产品；可将混合肽液按照冻干工艺规范灌装冻干瓶上冻干机冷冻干燥成瓶装冻干粉产品；可将混合肽液喷雾干燥或冷冻干燥制备成粉末状颗粒，按胶囊生产工艺规范灌装成胶囊产品。
实施例五、1、雪蛤活性肽液的制备：选取雪蛤11kg；添加雪蛤重量27倍的纯净水进行稀释泡发24小时后用组织破碎机破碎匀浆，匀浆后的雪蛤调ph值6.5，加入木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、复合蛋白酶（1:1:1）多酶进行酶解，酶用量为每克雪蛤添加6000个酶活单位（u），温度控制56摄氏度，酶解6小时；酶解完毕沸水热浴灭酶13分钟后冷却离心，离心机转速9500rpm左右，即得雪蛤活性肽液。
2、中草药活性肽的制备：称取枸杞子3kg葛根3.5kg山楂2kg，按中药炮制规范炮制后破碎处理；添加中药15倍的纯净水进行加热煮沸80分钟后冷却，用80目筛滤去药渣，加纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶（1:1:1）进行多酶酶解，酶用量为每克中药添加4000个酶活单位（u），温度控制在50摄氏度，酶解3小时；酶解完毕沸水热浴灭酶10分钟后冷却离心，离心机转速8000rpm左右，即得中草药活性肽液。
3、调配：取步骤1得到的雪蛤活性肽液、步骤2得到的中草药活性肽液，称取低聚异麦芽糖7kg进行复合调配。
4、调配好的雪蛤混合肽液放不锈钢桶进蒸汽灭菌柜进行杀菌，蒸汽灭菌柜升温至110摄氏度杀菌35分钟，冷却后即加纯净水按照口服液生产工艺规范灌装成口服液产品；可将混合肽液按照冻干工艺规范灌装冻干瓶上冻干机冷冻干燥成瓶装冻干粉产品；可将混合肽液喷雾干燥或冷冻干燥制备成粉末状颗粒，按胶囊生产工艺规范灌装成胶囊产品。
实施例六、1、雪蛤活性肽液的制备：选取干燥净雪蛤12kg；添加雪蛤重量24倍的纯净水进行稀释泡发24小时，匀浆后的阿胶调ph值6，加入木瓜蛋白酶、风味蛋白酶（1:1）双酶进行酶解，酶用量为每克阿胶添加6000个酶活单位（u），温度控制56摄氏度，酶解6小时；酶解完毕沸水热浴灭酶13分钟后冷却离心，离心机转速9000rpm左右，即得阿胶活性肽液。
2、中草药活性肽的制备：称取枸杞子3.5kg葛根2.5kg红景天2.5kg，按中药炮制规范炮制后破碎处理；添加中药15倍的纯净水进行加热煮沸80分钟后冷却，用80目筛滤去药渣，加纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶（1:1:1）进行多酶酶解，酶用量为每克中药添加6500个酶活单位（u），温度控制在50摄氏度，酶解2小时；酶解完毕沸水热浴灭酶10分钟后冷却离心，离心机转速12000rpm左右，即得中草药活性肽液。
3、调配：取步骤1得到的雪蛤活性肽液、步骤2得到的中草药活性肽液、称取低聚异麦芽糖粉6.5kg进行复合调配。
4、调配好的雪蛤混合肽液放不锈钢桶进蒸汽灭菌柜进行杀菌，蒸汽灭菌柜升温至110摄氏度杀菌40分钟，冷却后即可加纯净水按照口服液生产工艺规范灌装成口服液产品；可将混合肽液按照冻干工艺规范灌装冻干瓶上冻干机冷冻干燥成瓶装冻干粉产品；可将混合肽液喷雾干燥或冷冻干燥制备成粉末状颗粒，按胶囊生产工艺规范灌装成胶囊产品。
本发明制备的一种雪蛤活性肽按照冻干工艺规范灌装冻干瓶上冻干机冷冻干燥成瓶装冻干粉产品，真空冷冻干燥无添加剂防腐剂，安全性高，保质期长；加纯净水按照口服液生产工艺规范灌装成口服液产品，颜色天然，易于吸收，特有的天然风味口感良好；将混合肽液喷雾干燥或冷冻干燥制备成粉末状颗粒，按胶囊生产工艺规范灌装成胶囊产品，服用携带方便。本发明制备的一种雪蛤活性肽采取传统中医配方及严谨中药炮制规范，运用现代生物技术先进的加工工艺制备而成，其工序科学严谨合理，操作性强，非常适合规模化生产。