本发明涉及生物医药技术领域，特别是涉及一种蛹虫草提取物及其制备方法和应用。
背景技术：
蛹虫草，又称蛹草、北虫草，分类上隶属于高等真菌的子囊菌亚门麦角菌科虫草属，是虫草属中两个模式种之一，与冬虫夏草同属，是一种具有滋补作用的中药和营养品。研究表明，蛹虫草具有抗肿瘤的作用。
肿瘤是机体在各种致瘤因素作用下，局部组织的细胞在基因水平上失去对其生长的正常调控，导致异常增生和分化所形成的新生物。新生物一旦形成，其生长不受机体的调节，同时破坏正常组织与器官。目前，肿瘤的治疗方法有放疗、化疗等方法，放疗、化疗在消灭肿瘤细胞的同时，均会对人体产生副作用。
如何提供一种可治疗肿瘤的纯天然物质，是肿瘤治疗领域亟待解决的问题之一。
技术实现要素：
本发明主要解决的技术问题是提供一种蛹虫草提取物及其制备方法和应用，可制备出纯天然的蛹虫草提取物，该提取物可用于治疗肿瘤。
为解决上述技术问题，本发明提供一种蛹虫草提取物的制备方法，包括以下步骤：取蛹虫草干粉，加入50-70%的乙醇溶液，料液比为1g:20-30ml，而后在20-30℃水浴中振荡提取2-3h，提取完成后，进行过滤，获得滤液；对滤液进行除醇浓缩，并进行离心，获取上清液；将上清液以1.5-2.5bv/h的流速上大孔吸附树脂柱，用25-35%的乙醇以0.5-1.5bv/h的流速进行解吸，收集解吸液，对解吸液进行干燥处理，获得蛹虫草提取物。
其中，大孔吸附树脂为hp-10。
其中，上清液的上样量为4-5bv。
其中，乙醇的解吸量为2-3bv。
其中，提取蛹虫草干粉时，加入的乙醇的体积分数为60%，蛹虫草干粉与乙醇的料液比为1g:25ml，水浴温度为25℃。
其中，上清液的流速为2.0bv/h，乙醇的流速为1.0bv/h，其体积分数为30%。
为解决上述技术问题，本发明提供一种上述制备方法制备得到的蛹虫草提取物。
为解决上述技术问题，本发明提供一种蛹虫草提取物作为治疗肿瘤药物或保健品的应用。具体地，蛹虫草提取物作为治疗肿瘤药物或保健品的剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂或散剂。
本发明的有益效果是：区别于现有技术的情况，本发明的蛹虫草提取物的制备方法包括以下步骤：取蛹虫草干粉，加入50-70%的乙醇溶液，料液比为1g:20-30ml，而后在20-30℃水浴中振荡提取2-3h，提取完成后，进行过滤，获得滤液；对滤液进行除醇浓缩，并进行离心，获取上清液；将上清液以1.5-2.5bv/h的流速上大孔吸附树脂柱，用25-35%的乙醇以0.5-1.5bv/h的流速进行解吸，收集解吸液，对解吸液进行干燥处理，获得蛹虫草提取物。通过上述方法，可制备出纯天然的蛹虫草提取物，蛹虫草提取物可应用于肿瘤的治疗。上述制备方法具有以下特点：简单、易操作；利用大孔吸附树脂柱，可提高提取物的纯度；本发明的制备流程和制备参数可提高蛹虫草提取物的提取率，且制备的蛹虫草提取物无毒、无害。
具体实施方式
实施例1
蛹虫草提取物的制备方法包括以下步骤：取蛹虫草干粉，加入60%的乙醇溶液，料液比为1g:25ml，而后在25℃水浴中振荡提取2.5h，提取完成后，进行过滤，获得滤液；对滤液进行除醇浓缩，并进行离心，获取上清液；将上清液以2.0bv/h的流速上大孔吸附树脂柱，用30%的乙醇以1.0bv/h的流速进行解吸，收集解吸液，对解吸液进行干燥处理，获得蛹虫草提取物。
在本实施例中，蛹虫草干粉为其子实体制成的干粉。对滤液进行除醇浓缩时，将其浓缩至原体积的1/8至1/10，优选1/9。利用大孔吸附树脂柱时，大孔吸附树脂为hp-10，上清液的上样量为4.5bv，乙醇的解吸量为2.5bv。
本实施例的蛹虫草提取物可作为治疗肿瘤药物或保健品的应用，剂型主要有片剂、胶囊剂、颗粒剂或散剂。
实施例2
蛹虫草提取物的制备方法包括以下步骤：取蛹虫草干粉，加入55%的乙醇溶液，料液比为1g:21ml，而后在20℃水浴中振荡提取2.5h，提取完成后，进行过滤，获得滤液；对滤液进行除醇浓缩，并进行离心，获取上清液；将上清液以1.8bv/h的流速上大孔吸附树脂柱，用25%的乙醇以0.8bv/h的流速进行解吸，收集解吸液，对解吸液进行干燥处理，获得蛹虫草提取物。
在本实施例中，蛹虫草干粉为其子实体制成的干粉。对滤液进行除醇浓缩时，将其浓缩至原体积的1/8至1/10，优选1/9。利用大孔吸附树脂柱时，大孔吸附树脂为hp-10，上清液的上样量为4.5bv，乙醇的解吸量为2.5bv。
本实施例的蛹虫草提取物可作为治疗肿瘤药物或保健品的应用，剂型主要有片剂、胶囊剂、颗粒剂或散剂。
下面通过实验来说明本发明蛹虫草提取物的抗肿瘤效果。
将对数生长期的白血病细胞k562细胞制成浓度为1×105个/ml的细胞悬液，加入96孔板中，对照组加入pbs缓冲液，实验组加入蛹虫草提取物（实施例1制备）溶液，加入的pbs缓冲液与蛹虫草提取物溶液的体积相同，每组5个重复孔，其中，蛹虫草提取物溶液由pbs缓冲液配制，其加入孔板后，使蛹虫草提取物的浓度分别为0.2mg/l、1mg/l、5mg/l、25mg/l、125mg/l；24h后每孔加入mtt溶液，37℃继续培养4h，弃上清，每孔加入dmso，酶标仪自动混匀10min后测570nm处的od值；抑制率=（1-od实验组/od对照组）×100%，其中，od实验组和od对照组均为5个重复孔的平均值。
实验结果：与对照组相比，实施例1制备的蛹虫草提取物对k562细胞具有抑制作用，当蛹虫草提取物浓度为0.2mg/l、1mg/l、5mg/l、25mg/l、125mg/l时，生长的细胞数量是对照组的81.3%、75.6%、46.2%、30.4%、12.5%，根据实验结果，可以看出蛹虫草提取物具有强的抗肿瘤功能。
利用上述方法对实施例2制备的蛹虫草提取物进行抗肿瘤检测，实验结果为，与对照组相比，实施例2制备的蛹虫草提取物对k562细胞具有抑制作用，当蛹虫草提取物浓度为0.2mg/l、1mg/l、5mg/l、25mg/l、125mg/l时，生长的细胞数量是对照组的82.1%、75.9%、47.0%、30.6%、12.7%，根据实验结果，可以看出蛹虫草提取物具有强的抗肿瘤功能。
利用上述方法对蛹虫草虫草素进行抗肿瘤检测，实验结果为，与对照组相比，当虫草素浓度为0.2mg/l、1mg/l、5mg/l、25mg/l、125mg/l时，生长的细胞数量是对照组的91.3%、83.4%、53.6%、41.8%、20.1%，根据实验结果，可以看出实施例1或实施例2制备的蛹虫草提取物较蛹虫草虫草素具有更好的抗肿瘤效果。
以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书内容所作的等效变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。