选择性降低血脂水平的药物组合剂制备方法

专利名称：选择性降低血脂水平的药物组合剂制备方法
技术领域：
本发明涉及通过从苜蓿的种子、根、茎和/或叶萃取，萃取液随意浓缩、浓萃取液制成粉或颗粒，从而制备选择性降血脂的药物组合剂的方法。
众所周知，心血管疾病和心肌梗塞的最重要的危险因素与对健康有不利影响的一些血脂成分的量紧密相关，这些疾病在人类的死亡统计中起主导作用。Brown和Goldstein由于对胆固醇会引起这类疾病提出新的见解而被授予1985年的Nobel奖，这一事件也正好强调了这类疾病的重要性。根据文献〔Journal of American Medical Association 248，1465(1982);ibidem 256，2835(1986)〕中发表的最重要的病理学论述，已经澄清，在早期普遍接受的血清胆固醇上限，即6.5mmol/l，局部缺血患者(即由于供血不足而危及生命)的比例是血清胆固醇浓度大约为5mmol/l的人的两倍。
包括详尽弄清各种血脂成分的作用的研究特别重要。于是，已经明了，除血清胆固醇水平高之外(该所谓的血胆固醇过多)，甘油三酸酯型的脂水平增高(甘油三酸酯过多)以及高密脂蛋白(HDL)与低密脂蛋白(LDL)的错误比例分布(即所谓的脂蛋白异常)在冠心病中起着决定性作用。这一点特别得到Frick等〔NewEngl.J.Med.317，1237(1987)〕的研究工作的支持，他们表明通过优先影响所述三种脂的浓度的药物进行治疗，可以使局部缺血疾病及死亡率不仅减少两倍甚至减少三倍。
在几个国家的统计学评价已经说明，65%至76%成年人的血脂水平接近高危险水平。匈牙利人血液中的平均胆固醇水平为5.6-5.7mmol/l〔Magyur Tudomany(“Hangarian Science”)3，265(1989)〕。在美国3.4-4.1mmol/l的LDL胆固醇水平被认为是健康人可以接受的水平，而高于此水平，则认为是危险的〔Arch Intern Med.14836(1988)〕。
高脂蛋白或脂蛋白异常主要是脂肪代谢障碍发展的结果，并能用药物调节。这些药物经口服吸收，抑制脂蛋白的生物合成，并增加它们的分解和排除(例如冠心平或烟酸衍生物);或者它们不从肠道吸收并抑制脂从肠道吸收(例如离子交换树脂、谷甾醇、右旋糖酐硫酸酯，以及类似的化合物)。可是这些药物应象治疗一样使用，结果会导致恶心、腹泻，另一些情况下会发生便秘、鼓胀、肌肉痛、无力、形成结石，少数还出现脱发以及皮肤症状的副反应。
脂蛋白过多的病例意味着高风险，有副作用的药物治疗意味着低风险。与此相反，仅因血脂水平高而有危险的接受治疗的病人要求具有理想疗效无副作用，也就是无风险的组合剂。到目前为止，还没有这样的组合剂。在我的系统研究过程中，正是以开发这种类型的组合剂系统为目标。
对具有抗血脂效应的皂甙，包括植物来源的药物，赋予了最大的注意力。
虽然到目前还不大知道皂甙在植物生理中的作用，但是在种植期的非常多数量的植物个体中都存在皂甙。除少数例外，这些皂甙都对人体有毒。
类似地从文献中还知道，来自于植物的所谓中性或酸性皂甙可以和胆酸或胆甾醇及其衍生物选择性地生成络合物〔Biochemistry and Function of Isopentenoids in plants.Monograqh(Marcel Dekker，New York，1984)pages 229-246〕，而且在许多植物中都存在这些皂甙。
化学上了解最多的皂角苷配基组分〔CRC Crit Rev.Food Sci Nutr.26，27-135(1987)〕为大豆皂角苷配基A、B、C、D、E和F，在一些植物中的所谓中性皂甙中，这些皂角苷配基上连接了各种糖基。所有这些都存在于大豆和苜蓿中，而它们中的一部分存在于蚕豆、豌豆和三叶草类中，以及花生、莲及类似的植物中。其它中性皂甙有燕麦中的燕麦根皂甙A和B、纽阿替皂甙元、异纽阿替皂甙元和类似组分;土豆和辣椒中的羟基螺甾酮、新克洛皂甙元、吉托皂甙元、辣椒皂甙、melongosides、园锥茄碱和西红柿中的蕃茄素;洋葱和主要在大蒜中的谷甾醇、香树精、吉托皂甙元及类似组分;天冬属中的officinalgsin和天冬皂甙;茶树中的茶皂甙;特别是钩吻根(jam root)中的薯蓣皂甙元;马粟树中的七叶皂甙、aescinialin、cryptoaescin。在胡萝卜、丝兰、南瓜、黄瓜、黑果莓、桑葚、越桔、草莓、木贼和玫瑰中，特别是蔷薇果、common confrey、人参根及类似植物中，发现了其它皂甙。
酸性皂甙的主要代表是石竹素、oleandiolic acid、medicagenic acid、glyeirrhizetic acid、ep
catonic acid、echinocistoic acid、常春配基、丝石竹配基、medicoside、helianthoside衍生物和类似的化合物，在各个皂甙中含不同的糖基。它们可以存在于黄香草木犀、苜蓿、向日葵、洋葱、大蒜、肉豆蔻、菠菜、甜菜、菖蒲、巴拿马种植果皮、肥皂草、菌幕、野百合、铁线莲及类似植物中。
从抗血脂活性角度看，虽然苜蓿不是单一皂甙的来源，由于已经知道它的所有皂甙均与胆固醇形成络合物〔J.Amer.Chem.Soc.，76，2271(1954)〕，所以认为是最有用的;有关这种络合物的研究也已详细发表〔Biochim.Biophys.Acta.270，1818(1972)〕。
广义的苜蓿是指Medicago L.genus，狭义的苜蓿表示最了解的普通培养的种，即用作饲料的苜蓿(兰苜蓿Medieago soctiva L.)。与后一种密切相关的其它重要的家庭种植的苜蓿是长在沙质土壤的苜蓿(或称谷苜蓿)，即镰刀形苜蓿、黄苜蓿或黑苜蓿。
兰苜蓿和谷苜蓿的嫩苗的茎由从根部发育的基组成，它们在苜蓿的底部分支。苜蓿的簇叶是掌状混成三重叶。各个部位的叶子均由叶柄(叶-茎)支撑。在兰苜蓿下部叶上，嫩叶的肩为楔形，而叶子显颠倒的鸡蛋形。
兰苜蓿的花簇为紧密的花束，常常有8-25朵花。花茎常常比叶柄和叶片的总长度延长。苜蓿花具有特征的蝶形结构。绿色的花由五片叶组成，表面通常为多绒毛状。花长度大约为10mm。兰苜蓿的副花冠的颜色可以显示多种色泽，从亮兰色至深兰色。
兰苜蓿的种子2-2.8mm长、1.5-1.7mm宽、1.1-1.2mm厚;形状或为蚕豆状或为肾状或为侧面有压缩了的歪曲对称性的三角形。
苜蓿中的主要组分如下a)普通蛋白原性氨基酸，例如谷氨酰胺、天冬氨酸、丙氨酸、精氨酸、半胱氨酸、甘氨酸、组氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、脯氨酸、丝氨酸、酪氨酸、苏氨酸、色氨酸、苯丙氨酸和缬氨酸。
b)特殊氨基酸(虽然有些结合成蛋白，但大多数为游离氨基酸)鸟氨酸、瓜氨酸、γ-氨基丁酸、γ-亚甲基谷氨酸、δ-羟基赖氨酸，ε-氨基-α-羟基己酸和刀豆氨酸。
c)胺胆碱和三甲胺。
d)脂肪酸亚油酸、油酸、亚麻酸和硬脂酸。
e)磷脂卵磷脂、脑磷脂和磷脂酸。
f)类异戊二烯脂甾醇和三萜皂甙。
g)类胡萝卜素胡萝卜素和叶黄素。
h)单萜类罗勒烯(苜蓿的主要芳香组分)。
i)二萜类叶绿醇和叶绿醌。
j)花色素类萃雀素的二苷、3′-甲花萃素和二甲花萃素。
k)在呋喃并香豆精中，苜蓿中存在重要量的有高度子宫收缩活性的拟雌内酯。由于这一事实，用苜蓿喂羊，可以改变羊的促黄体激素水平并导致不育，而且用于人体结核的苜蓿制剂是至少可以是一种危险因子〔I.Bocsa and L.Szabo“Alfalfa and its Relatives”(in Hungarian)，Aka-demiai kiado，Budapest 1987，pp，79 and 80〕。
1)苜蓿中含非常丰富的苜蓿皂甙，即由五环皂角苷配基与各种糖形成的甙。最重要的皂角配基是大豆皂角苷配基A、B、C、D、E以及苜蓿酸和medicagenic acid。在植物中，叶子中皂的含量为主茎中的两倍;而根中皂甙的含量大约是嫩芽中的10倍。根中皂甙的组成不同于嫩芽中皂甙的组成。
根据以前的文献，是使用乙醇水溶液从苜蓿植物的各部分提取皂甙〔The Ameriean Journal of Nutrition 30，2061(1977);Second Munster International Arteriosclerosis Symposium;Clinical Implica-tions of Recent Research Resutts in Arterioscherosis，Westdeuscher Uerlag，Munster 1983，P.240〕或用乙醇萃取〔Phyto-chemistry 13，2253〕(1974)〕。
从苜蓿的主茎和叶子中萃取的总皂甙对猴子显示降低血胆固醇水平和血脂水平的活性已有报道〔J.Clim.Invest.67，156(1981);Clinical Implications of Recent Research Results in Arteriosclerosis，Westdeutscher Uerlag，Munster 1983，pp.241-254〕。Carolinska研究所(瑞典)研究了苜蓿种子粉对人的降低血液胆固醇水平和阿朴脂蛋白水平的作用，结果表明每天服用40g粉末，非常高的浓度值(9.58-8.00mmol/l)能被降低大约17-18%。〔Atherosclerosis 65，173(1987)〕。不过，这种效应不能看作充分的治疗作用。
虽然从植物的各部分(种子、根、主茎和叶子)按已知方法即用乙醇水溶液或乙醇萃取得到萃取物可用来降低血液胆固醇或血脂水平，但已经知道这些植物部位含毒性刀豆氨酸〔2-氨基-4-(胍氧基)-丁酸〕〔The Merek Index，11th Edotion(1989)Rahway，N.J.，U.S.A.，P，263〕和有害的植物雌激素，主要是拟雌内酯(The Merck Index，page 401)。这样一来在这类萃取物的治疗作用中伴随着副作用。
苜蓿植物的种子和嫩芽中，按干重计算，刀豆氨酸含量为1.5%刀豆氨酸可以诱发以苜蓿喂养的猴子产生类似红斑狼疮综合症〔Science 216，415(1982)〕。
市售苜蓿片是用干苜蓿制的，含20-190ppm的拟雌内酯。这意味着，服用苜蓿片的人每天体内要摄入1mg以上的拟雌内酯，这样一种雌激素的量可以导致病理副作用〔J.Agric.Food Chem.，32，173(1984)〕。
目前还没有能够减少萃取物中有副作用的拟雌内酯和刀豆氨酸含量的萃取苜蓿的方法。
本发明的目标是，发展一种方法，以便可能从苜蓿的各个部位制备既不含植物雌激素又不含刀豆氨酸的萃取物。
本发明是基于这样一种认识，即使用温度至少为40℃，pH最多为8的水或者水溶液萃取苜蓿植物的各个部位，可以完全达到上述目的。
这样一来，本发明是通过萃取苜蓿植物的种子、根、主茎和/或叶、随意浓缩萃取物、用浓萃取物随意制备干粉或颗粒，制备选择性降低血脂水平的药物组合剂的方法。根据本发明，萃取是使用至少40℃、pH至多为8的水或水溶液进行，这样得到的萃取物单独或与几乎不消化或不消化的多糖、胶体稳定剂、和随意使用制药工业中用的普通载体一道转变为药物组合剂。
根据本发明的方法中的优选具体方案，进行萃取时用温度为50-120℃，pH为5.5-6.5的水溶液，更优先的温度是60-70℃，pH为5.8-6.2。
酸性缓冲溶液适宜于用作水溶液，最好是含醋酸和醋酸钠的水溶液;或含磷酸二氢钾和磷酸氢二钠的水溶液;或含磷酸氢二钠和柠檬酸的水溶液。
对于萃取来说，最好使用盐酸、醋酸、柠檬酸、苹果酸、酒石酸、琥珀酸或抗坏血酸的水溶液，或这些酸的盐、或硫酸与铁、镁、钙、锰、硒、锌、钴和/或铜离子形成的盐的水溶液，或上述离子与天冬氨酸或谷氨酸形成的盐的水溶液。
最好用苜蓿叶或干叶粉以十倍量的95-100℃的水萃取25-35分钟制备萃取物。萃取物过滤之后，全量的表面活性剂用一半体积的丁醇分数次萃取。丁醇层合并，并蒸发至干。
往干萃取物中加入酸性调味剂，最好是柠檬酸、加入甜味剂，合适的是aspartame、加入芳香剂，最好是留兰香和百里香萃取物，以及加入胶态乳剂稳定剂，最好是麦芽糖胡精，按照终产物中干物质里由重量分析得到的总皂甙重量计算，这些物料加入后皂甙占1.5-30%，最好是14%。
这样获得的按重量百分比含14%皂甙的产品，进行各种检查。首先按文献〔Analyst 114，965(1989)〕中已知的方法检查，产品中应不存在出现于苜蓿中的毒性氨基酸刀豆氨酸。类似地，研究产品是否含有拟雌内酯，这是苜蓿中的另一种特征的毒性化合物〔J.Agric Food Chem.32，173(1984)〕。产物中也不应检测到拟雌内酯。
由于产品的无毒程度已经达到了不必测定急性毒性，即使用的剂量不引起50%的死亡率(LD50值)的水平，故使用体重为160g的雄性SD大鼠对产品进行所谓的70天亚急性毒性研究。实验分为两组，每组12只大鼠，一组作为对照，另一组用含15%皂甙的产品的干料与食物的混合物喂养。
两组动物的日平均食物耗量相等，为28g(日限量分别为21.4g和37.3g)。这样一来，亚急性毒性研究的剂量水平对应于3.67g(限值分别为2.81g和4.81g)总皂甙/kg体重/天。
在70天的研究中两组动物都未发生死亡。两组动物的血糖、尿、尿酸、肌酸酐、钠、钾、盐酸盐、二氧化碳、钙、磷、总蛋白、白蛋白、胆红素、碱性磷酸酯酶、红血胞、血细胞比容和反映血液学状态的特征值血红蛋白值方面均无显著性差异。但是与对照组比较，用皂甙喂养的动物，血液胆固醇水平降低18.7%，甘油三酸酯水平降低5.6%。
对肝、胃、肾、脾、肺、心和脑等器官的检查，未观察到病理变化;两组间的器官重量未见显著性差异。所以未进行组织学检查。
产品中的全部活性成分的中性和酸性皂甙采用薄层分析(TLC)检查如下
1.0g产品加热溶于100ml蒸馏水中，用正丁醇(每次10ml)萃取5次。合并的正丁醇层减压蒸发至干，使合乎分析精度。残留物代表重量分析的总皂甙活性成分的重量。该残留物溶于50ml甲醇中，并按下面描述的条件进行色谱检查。
薄层硅胶G(Merck)展开系统正丁醇+乙醇+浓氨水(35+15+30)饱和时间盖有滤纸的缸中60分钟展开时间4小时展开距离160mm点样25/μl甲醇溶液由于酸性或中性皂甙能够与胆固醇或胆酸选择性地形成乳胶性络合物，所以它们抑制脂在胃肠道系统吸收，并发展了一种体外方法用来检测全量皂甙的乳胶形成能力。
根据色谱研究，用重量分析法测定的按本发明方法制备的产品中，14(±0.2)%重量的皂甙总量由8种皂甙按不同比例组成。200mg该产品溶于10.0ml水中，并与各种量(mg)的向日葵油(向日葵籽油Sigma S5007，Sigma，st.Louis，Mo，USA)混合。样品于35℃下在实验室机器上激烈振摇1分钟，然后测定形成的乳胶与含油的样品比较，以百分数表示(〔%〕)相对浊度〔“Physico-Chemical Practicum”(in Hungarian)，Tankongvkiado，Budapest 1068，Vol.Ⅱ，P.316〕。测值列入下表 0 10 20 40 60 80 100[Z%] 60 8.5 4.5 2.5 1.7 1.3 1.1表中的数据 可以用下述表示它特征的饱和功能的通式描述〔Z%〕＝a·(mg)-1/n式中的a和n是取决于测定方法和被测化合物的乳化形成能力的参数，在我们的测定中，它们的值分别为a＝60，n＝1.19。
在测定了大量样品的基础上，发现参数n受重量比和测定中使用的振动的物理方式(例如机械振动或磁力控制振动或超声波振动及类似的振动)的影响，但被测样品的乳化形成能力可以通过比较性测试(按相同的方式进行)作出正确的判断。这样一来，实验数据总可以用上面的通式表述，而n的值与乳化形成能力成反比。很弱的表面活性样品具有低的乳化形成能力，在这种情况下，n的值可以达到10-15。使用高表面活性的样品，n值接近于1，甚至小于1。
使用该法可以阐明，几乎不消化或不消化的多糖由于稳定乳化胶体颗粒而能够增加整个皂甙的乳化形成能力，所以它们协同地增加皂甙和亲水性-亲脂性-类型的组分(例如黄酮、胡萝卜素、萜类及类似化合物)的乳化形成能力。结果增加了所有活性试剂的抗血脂的生物有效度。
在这些观察的基础上，根据本发明的方法的另一优选具体方案。产品除含酸性和中性皂之外，还含有溶于极性溶剂或适度溶于非极性溶剂中的几乎不消化或不消化的多糖。该产品可以按这样的方法适宜地制备，即以干净苜蓿上分离下来的嫩芽在干燥状态下研磨，然后用10倍体积的沸水浸泡1小时，冷后过滤。然后按滤液中含25份总皂甙的重量比往滤液中加55份麦芽糖胡精、5份大麦-β-葡糖聚糖、5份燕麦-β-葡聚糖、4份苹果果胶、4份柠檬酸、1.5份抗坏血酸和0.5份人造甜味剂。该液相中间体在减压下喷雾干燥或微波干燥，或简单蒸发至干，以便制成固相产品。
按此法制得的产品使用前面描述的体外方法研究它对脂吸收的抑制能力。根据优选的方法测得的表示乳化形成能力的参数n的值为1.05，该值表明了产品有极好的素质。
该产品的研究时间为1个月。有19名年龄在31岁和63岁之间的志愿人员(14位男性和5位女性)接受了试验，把1g该产品分布在100ml水中，每天服2次，每次1g，早饭后和晚饭后服用。下面给出的血脂参数(mmol/l)是研究前和研究后获得的结果
结果表明，按照本发明的方法制备的组合剂可以刺激肝脏，加强血液胆固醇的分解。根据我的推断，这种作用来自于尚未见文献报道的选择性专属激动剂的效应。作为这种效应的结果，由于总的胆固醇水平及其中的LDL水平下降，而HDL水平升高，高血脂和主要是危险的脂蛋白异常可以被选择性地优先受到影响。该组合剂的另一个优点是它能降低甘油三酸脂的水平。
按照本发明的方法制备的萃取物可以单独使用，也可以和其它已知对降血脂水平有效的活性剂合用。正如我上面的实验毫不含糊地显示的那样，把按照本发明的方法制备的萃取物与多氧化物一和/或碳水化合物-类型的胶体稳定剂合用，可以达到特别优良的效果。
作为治疗剂，按照本发明的方法制备的萃取物既可以单独，也可以和其它类似的活性剂联合，转变为主要适于口服的药物组合剂，即将其与非毒性的固体或液体载体和/或其它在制药工业中使用的添加剂混合，得到的混合物再转变为液态组合剂，最好是溶液，糖浆剂、混悬剂、凝胶剂。也可以制备固态水可混溶的颗粒、片剂、硬明胶胶囊或软明胶胶囊、栓剂及类似的剂型。
制备药物组合剂时按制药工业的已知方法进行，即把萃取物与惰性的无机或有机固体或液体载体混合，然后把混合物转变为盖伦剂。
乳糖、玉米淀粉、土豆淀粉、滑石粉、碳酸镁、硬脂酸镁、碳酸钙、硬脂酸和硬脂酸盐是制备片剂(dragees)和硬明胶胶本的有用载体。在制备软明胶胶本时，使用植物油、脂肪、蜡或适宜的多元醇作载体更为合适。水多元醇、蔗糖或葡萄糖是制备溶液制剂和糖浆剂的合适载体。具有适宜稠度的油、蜡、脂肪或多元醇能够用作制备栓剂的载体。
该药物组合剂可以含有制药中普通使用的添加剂，例如湿润剂、甜味剂、芳香剂、缓冲剂及类似的添加剂。
含有按照本发明的方法制备的萃取物的药物组合剂的日剂量可以在大的限度内变化，这主要取决于诸如活性剂的活性、患者的状态和年龄及类似的情形等几种因素。对于成年患者，口服剂量为含30-1200mg皂，最好是300-400mg皂的组合剂。下述这些剂量只是作为信息提供，实际使用的剂量应由医生根据病例确定。
在治疗应用中，按照本发明的方法制备的萃取物主要以片剂、胶囊剂、或水溶性颗粒剂或片剂等剂型口服给药。
本发明提供的方法主要有下述优点a)使用含最多9ppm拟雌内酯和最多1ppm刀豆氨酸的苜蓿萃取物，b)根据本发明的方法制备的萃取物中含有的中性和酸性皂以有益的比例存在于苜蓿植物的各个部位。这样一来，与日前已知的苜蓿萃取物相比较，使用本发明中的萃取物治疗高脂蛋白症或脂蛋白失调，可以获得明显好的治疗结果。
c)把这样制备的萃取物与几乎不消化或不消化的多糖联合应用，可以协同性地加强专属的降低血脂水平的效应。
借助下述非限制性的实施例对本发明的方法作详细说明。
实施例15×100kg干苜蓿叶或嫩芽研碎并过Ⅲ号筛。在体积为4M3的耐酸萃取罐中进行萃取。往萃取容器中加1M3预热至90℃的水后，直接用蒸汽使水温升至100℃，然后往容器中加入头一个100kg所述植物部位，并在100℃下搅拌10分钟进行萃取。
使用Alfa-Laval螺旋倾斜器从植物残渣中分离滤液。得到的溶液中干物料的含量经折光计测定，按重量比计算，为2.5-3%。其它四个100kg物料按相同的方法萃取并倾出，然后合并所得的溶液。
合并的溶液的pH为5.9，该溶液在稀压下用可连续操作的蒸发仪在40-45℃下浓缩，按重量计算，干物料的含量为22-28%。干物料的含量可用折光仪进行观测。测定了体积和比重之后计算总干物料的含量。
13.5%重量的麦芽糖糊精(按植物干物料含量计算)溶于水中并加到所得的浓缩物中作为喷雾干燥的添加剂，然后在170-180℃的内温和90℃的外温下喷雾干燥。
往所得的粉末中分次加入17.5%重量的研碎的含一分子水的柠檬酸和1.2%重量的aspartame，这些组分在Lodig型的搅匀器中与基质物料均匀混合。
制粒之后，这样获得的粉末可以作为速溶茶组合剂直接配方。
实施例2按照实施例1中描述的方法，进行萃取时的差别是把植物与含0.1mol/l醋酸和0.1mol/l醋酸钠的pH为4.6的水溶液一块煮沸。
实施例3
按照实施例1中描述的方法，进行萃取时的差别是把植物用含0.01mol/l盐酸pH为2.0的水溶液进行萃取。
实施例4按照实施例1中描述的方法，进行萃取时的差别是用预热至40℃的水对植物萃取15分钟，倾斜后得到的合并的溶液加热至沸并通过压滤过滤。象实施例1中描述的那样浓缩之后，滤液喷雾干燥。得到的粉末制粒后压成每片800mg的片剂。
实施例5按照实施例4中描述的方法，差别在于进行萃取时使用含2g/l天冬氨酸硒的pH为5.8的水溶液，浓缩之后不进行喷雾干燥，而是往浓缩物中加0.5%重量的抗坏血酸钾和0.5%重量的aspartame。得到的溶液可作为糖浆剂使用。
实施例6800kg研成粉末的干净苜蓿取出50kg，用3M340℃的水搅拌1小时后过滤。挤压干植物残渣，压出液与滤液合并之后，若有必要，压出的液体用水补足到3M3，然后再加另一个50kg苜蓿粉悬浮于其中。在反复搅拌、过滤和挤压之后，反复进行同样的操作，直至萃取完800kg总量的苜蓿粉。最后一步得到的pH为6.0的滤液加热至沸并过滤。加入68kg乳化稳定剂多糖，25kg含一分子结晶水的柠檬酸和4kg aspartame之后，滤液在高压釜中于120℃进行40分钟热处理。冷至15℃后，混合物过滤并在无菌条件下装入隔绝空气的瓶内。
另外，在灌装入瓶中之前，亦可加入微生物稳定剂。
实施例7往100kg干净、干燥、研碎的苜蓿主茎中加1M3沸水之后，混合物在缓慢的搅拌下煎煮。过滤之后，溶液在减压下蒸发至终体积为50升，所得到的浓溶液用正丁醇萃取5次，每次正丁醇的用量为5升。把正丁醇萃取液合并并蒸发至干。得到的残留物研成细末，悬浮到30倍重量的(药用质量)亚麻子油中，或悬浮于含相同油酸组份的天然油中，或悬浮于鳕鱼鱼肝油中，或悬浮于它们的混合物中，然后按照制药工业的已知方法装入软明胶胶囊。
实施例8从40kg干苜蓿根和60kg干苜蓿嫩芽制得的粉末与500升含12g/l苹果酸的水在高压釜中于120℃加热30分钟。得到的萃取物于袋式离心器中与植物残渣分离、在减压下浓缩成干物料含量为14-16%重量的浓溶液，最终冷冻干燥。
制得的颗粒压成片剂或用于制备硬明胶胶囊。
权利要求
1.制备选择性降低血脂水平的药物组合剂的方法，该方法包括苜蓿种子、根、主茎和/或叶子进行萃取，随意浓缩萃取液、用浓缩的萃取物随意制备干粉末或颗粒，进行萃取时使用温度最低为40℃PH最高为8的水或水溶液，这样得到的萃取物单独或与几乎不消化或不消化的多糖一道并随意使用制药工业中普通使用的载体，转变为药物组合剂。
2.权力要求1中的方法，包括使用温度为50-120℃，pH为5.5-6.5的水溶液进行萃取。
3.权力要求2中的方法，包括使用温度为60-70℃，pH为5.8-6.2的水溶液进行萃取。
4.权力要求1-3中的任一方法，包括使用盐酸、酯酸、柠檬酸、苹果酸、酒石酸、琥珀酸或抗坏血酸的水溶液进行萃取。
5.权力要求1或2中的方法，包括使用含盐酸盐、醋酸盐、柠檬酸盐、苹果酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、抗坏血酸盐或硫酸与铁、镁、钙、铝、碘、锌、钴和/或铜离子形成的盐的水溶液进行萃取。
6.权力要求1或2中的方法，包括使用含铁、镁、钙、锰、硒 锌、钴和/或铜离子与天冬氨酸或各氨酸形成的盐的水溶液进行萃取。
7.权利要求1或2中的方法，包括使用酸性缓冲液作为水溶液。
8.权力要求7中的方法，包括使用含醋酸和醋酸钠、磷酸二氢钾和磷酸氢二钠、磷酸氢二钠和柠檬酸或醋酸钠的水溶液作为酸性缓冲液。
9.按权力要求1-8中的任一方法制备的选择性降低血脂水平的药物组合剂。
10.用于选择降低血脂水平的苜蓿萃取物，其含最多1ppm刀豆氨酸和最多9ppm拟雌内酯。
全文摘要
本发明涉及从苜蓿的种子、根、主茎和/或叶子提取，以制备选择性降低血脂水平的药物组合剂的方法。本发明的方法，是用温度至少为40℃和pH至多为8的水或水溶液进行萃取，此后得到的萃取物单独与几乎不消化或不消化的多糖一起并随意使用制药工业中常用的载体转变为药物组合剂。本发明的组合剂既不含刀豆氨酸(毒性氨基酸)，也不含拟雌内酯(具有激素效应)。
文档编号A61P3/06GK1074123SQ9211420
公开日1993年7月14日 申请日期1992年12月11日 优先权日1991年12月12日
发明者M·海威基 申请人:M·海威基