专利名称：酪磷肽钙营养液的制作方法
技术领域：
本发明公开了一种促钙吸收的营养液，尤其是一种酪磷肽钙的营养液，其属于含肽类的食品技术领域。
目前市场上销售的大量补钙营养品或药品，大多是以钙素加V-D的制剂，其疗效有限，而且长期使用V-D，在临床上发现V-D中毒病例已不在少数。V-D介导钙吸收是举世公认的促钙吸收利用的因子，从V-D药理学看V-D的效应主要集中在体内十二指肠及小肠上部肠道内主动吸收钙离子，而在小肠下部PH值7.8弱碱性条件下，V-D促钙吸收作用无或不明显。然而小肠下部较长的肠道内又是钙吸收的主要场所，其占体内钙吸收阈值的70～80％，其钙吸收机理是依赖肠道内钙离子浓度梯度差来完成的。在该部位肠道区内呈弱碱性，很容易形成不溶性钙盐，这样就限制了钙的吸收。有资料证明，人体从饮食中摄取的钙，其吸收率仅在21-26％。要提高钙的吸收率，必须阻断肠道内钙与磷酸结合形成的不溶性磷酸钙。然而目前市场上销售的各种补钙制品几乎忽视了体内小肠下部肠道内钙吸收的主要区域。在该区域V-D不起作用，因此目前的补钙制品，其补钙量是盲目的。
本发明的目的是要解决上述补钙制品的弊端，提供一种不必使用V-D，而既有补钙功能，又有促钙吸收功能的双功能的营养液食品，该食品的营养液能在体内小肠下部肠道区内阻碍不溶性磷酸钙形成，保持增加肠道内可溶性钙离子浓度梯度差，以促进钙的吸收，其促钙吸收能力要达到40％以上。提供的酪磷肽钙(以下简称CPP-Ca)营养液及其制法要安全，无毒付作用，其中CPP-Ca的制备工艺要有较高的提取收率。
本发明的任务是有以下技术方案完成的，研制了一种酪磷肽钙营养液，该营养液是由以下组合混配而成的组合物，组分 重量比(份)去离子水 100可溶性钙盐(以钙元素计)0.005～0.5CPP-Ca0.005～0.025甜味剂 0.5～15酸味剂 0.1～0.15
稳定剂 0.01～0.2V-C0.1～0.5防腐剂 适量香味剂 适量以上组分中肽(CPP)∶钙＝1∶(1～20)，经分批混合溶解，过滤，紫外线灭菌，高压均质，稀释定容，灌装，制成瓶装产品，该产品呈透明的乳白色胶体溶液。
本酪磷肽钙营养液，所述的可溶性钙盐，其可以是乳酸钙，葡萄糖酸钙，泛酸钙，醋酸钙，氯化钙，其中的一种或几种。
本酪磷肽钙营养液，所述的CPP-Ca其是由25个氨基酸组成的肽链，其分子量4400，其氨基酸序列结构为Arg-Glu-Leu-Glu-Glu-Leu-Asn-Val-Pro-Gly-Glu-Ile-Val-Glu-Serp-Leu-Serp-Serp-Serp-Glu-Glu-Ser-Ile-THr-Arg，该肽链内含四个Serp(磷酸丝氨酸)，该Serp上含有四个磷酸残基，其具有生物活性，该残基可与钙络合形成络合钙盐-CPP-Ca，该CPP-Ca产品外观呈乳白色粉末。
本酪磷肽钙营养液，所述的CPP-Ca的制备工艺过程是(a)、将酪蛋白按5～30％投料量溶于50～85℃蒸馏水中，在调PH值7～9，均质工作压力8～15MPa高压均质成糊状基料；(b)、按加酶量0.01～0.5％投入胰蛋白酶，调PH值3～6，在25～65℃温浴下1～6小时，水解酪蛋白；(c)、酶解后，迅速加温90℃保温5分钟，灭活胰酶；(d)、分离酶解液在6000～10000p.r.m下，离心5～20分钟，得取上清液；(e)、上清液过液在-4～4℃下，静置12～14小时，除去未水解大分子；(f)、按上清液体积量投入CaCL2，按CaCL2料量20～40％(W/V)，充分搅拌反应2～5小时；(g)、按反应液体积∶乙醇＝1∶(0.3～2.3)加入无水乙醇，凝聚生成乳白色絮状物沉淀-CPP-Ca，回收乙醇；(h)、分离CPP-Ca，高速离心在6000～10000p.r.m10～30分钟；(1)、真空干燥，在60℃以下真空干燥获得纯品CPP-Ca，粉碎包装备用。
本酪磷肽钙营养液，所述的甜味剂，其可以是蔗糖，乳糖，木糖醇，果糖浆，甜菊甙，其中的一种或几种。
本酪磷肽钙营养液，所述的酸味剂，其可以是柠檬酸，酒石酸，苹果酸，其中的一种或几种。
本酪磷肽钙营养液，所述的稳定剂，其可以是黄原胶，瓜尔豆胶，阿拉伯胶，西黄耆胶，其中的一种或几种。
本酪磷肽钙营养液，所述的防腐剂，其可以是山梨酸，苹果酸钠。
本酪磷肽钙营养液，所述的香精，其可以是草莓香精，桔子香精，菠萝香精，水蜜桃香精。
本酪磷肽钙营养液的制造方法如下该营养液的组分按下列步骤配制(一)、先将按配方称量的稳定剂加1/5配方量的甜味剂，干粉混合搅拌均匀，再投入化胶罐加去离子水，在50～60℃温度下充分溶解；(二)、将按配方称量的可溶性钙盐投入调配罐中，加去离子水，加温50～60℃，充分溶解；(三)、将按配方称量的CPP-Ca，酸味剂，防腐剂，依次投入另一调配罐中，加去离子水，在50～60℃温度下充分溶解；(四)、将余下4/5配方量的甜味剂投入化糖罐中，加去离子水在50～60℃温度下，搅拌充分溶解，再经过滤器投入中配罐中；(五)、将上述(一)-(三)罐中溶解液，经管道紫外线灭菌后泵入中配罐中，再加入适量香味剂，搅拌混合均匀制成浓配液；(六)、将浓配液泵入高压均质机，在8-25MPa下均质物料；(七)、将均质的浓配液泵入稀配罐，用2/5配方用水量充分冲洗上述各罐和均质机，洗水江入稀配罐，加去离子水定容，待装瓶备用；
(八)、稀释定容的营养液，再经管道紫外线灭菌后，灌装入瓶，再经巴氏灭菌，检验合格后制成瓶装CPP-Ca营养液。
本发明的营养液，其优点在于成功地开发了CPP-Ca盐作为食品添加剂制成口服营养液，能顺利地维持体内的可溶性钙量的吸收，经实验测定正常人体表现消化钙吸收率达46％，达到促进钙吸收的效果。该营养液经急性毒理实验，微核实验，Ames试验，精子畸形实验，细菌总数和大肠菌群实验，这五项实验证明无任何毒付作用，食用安全可靠。该营养液所含的CPP-Ca是一种具有生物活性的物质，其极易被肠道吸收，经同位素示踪证实CPP-Ca可被吸收入体内并沉积于骨骼之中。由于CPP-Ca存在于小肠肠道下部，可以有效地阻止肠道内不溶性钙盐的形成，这样就增加了肠道内钙离子浓度，从而提高了钙的扩散吸收能力，而此时肠道内并无V-D作用存在，达到了不使用V-D而补钙的功能。
本发明所采取的CPP-Ca的提取制备方法，由于采用在弱碱性条件下PH7-9下均质酪蛋白溶液，通过高压短时间的充分均质，使酪蛋白分子充分分散于溶液中，达到充分与胰蛋白酶接触环境，从而使酶解反应进行得完全迅速，以提高CPP肽链切断率。采用高速离心分离与低温过滤静置沉淀后的上清液加入氯化钙，搅拌充分反应，使Serp上的磷酸残基络合形成CPP-Ca盐。该肽链上的钙盐具有生物活性。再经无水乙醇以1∶(1-2.3)体积比，凝聚提取CPP-Ca，使提取收率接近了理论提取率15％，达到了14.5％的好收率。
本发明的实施例如下本发明的保护范围不仅限于实施例中。
本发明的营养液，其中生物活性物质CPP-Ca的制备，如表1所列数据
表1CPP-Ca的制备实例
本发明的营养液具体实施配方，如表2所列配方实例表2CPP-Ca营养液的配方实例(单位kg)
<p>本发明的CPP-Ca营养液实际生产过程是以每批次生产2500L营养液为例。
(一)、先取2.5kg黄原胶与25kg蔗糖，干粉混合均匀，投入化胶罐中，加去离子水200l，加热50℃±5℃搅拌溶解至半透明状胶体溶液备用；(二)、取38.75kg乳酸钙投入调配罐，加去离子水150l，并加热50℃±5℃充分溶解后备用；(三)、取CPP-Ca 0.25kg，柠檬酸3.75kg、V-C2.5kg，苯甲酸钠1.25kg，山梨酸0.5kg，依次投入另一调配罐中，加去离水200l，在50℃±5℃温度下搅拌充分溶解备用；(四)、将余下的100kg蔗糖投入化糖罐中，加去离子水100l，在50℃±5℃下搅拌充分溶解，再将该糖溶液泵入双联过滤器过滤后投入中配罐中；(五)、将上述(一)-(三)罐中溶液分别经管道紫外线灭菌后，泵入中配罐中，再在该罐中加入1l草莓香精，搅拌混合均匀制成浓配液；(六)、将浓配液650l泵入高压均质机，在25MPa下，将浓配液均质完全；(七)、用1000l去离子水充分冲洗上述各罐和均质机，洗水汇入稀配罐，再加去离子水定容2500l，待装瓶备用；(八)、将2500l稀释的营养液，经管道紫外线灭菌后，入灌装机灌装入瓶，再经巴氏灭菌，检验合格后制成瓶装CPP-Ca营养液。
制成的CPP-Ca营养液，经人体消化吸收实验，其实验报告如下CPP-Ca人体消化吸收试验总结报告I一、实验对象先取学院在校学生，年龄18～22岁，健康状态良好，30名作为实验对象，随机分成二组，分别为实验组及对照组。
二、实验期限共分二期，食物适应期二天，实验期二天，在实验期内收集成食物、粪便，待检测。
三、实验食物按全价食物制订出整个实验期内食谱，固定就餐内容及量，实验对象将食物全部食尽。实验期内，将每餐留出一分作分析检测。其中，实验期中午饭、晚饭实验组服葡萄糖酸钙400mg和表1实例2制备的CPP-Ca10mg，对照组服葡萄糖酸钙400mg，不服CPP-Ca。
四、粪便采集以活性碳标记物分别在收集粪便前及后内服，收采实验期粪便，称总重，拌匀，取出部分检测，计算排出Ca总量。
五、检测分析及数据处理检测方法按高锰酸钾滴定法检测，检测时用质控样品GBW-08551猪肝粉同时测定，测得数据。经统计学处理，算出人体Ca的表现消化吸收率。六.实验结果
七、结论本实验结果，实验组(服用10mgCPP-Ca组)Ca的消化吸收率为40.54±6.56％，对照组(未服CPP-Ca组)Ca的消化吸收率为29.13±12.75％。二组的表现消化吸收率差异有极显著意义。
CPP-Ca消化吸收率试验报告II一、实验对象选取某学院在校学生，年龄22-24岁，健康男子12名为实验对象，随机分成二组，分别为实验组和对照组。
二、实验期限
共分二期，食物适应期二天，实验期二天，在实验期内收集好食物、粪便。
三、实验食物按全价食物制订出整个实验期内食谱，固定就餐内容，实验对象将食物全部食尽。实验期内，将每餐留出一分作分析检测。每日早餐实验组服用表1实例5制备的CPP-Ca和含Ca饮料，对照组服含Ca饮料。
四、粪便采集以活性碳标记物内服，收集实验期粪便，称总重，拌匀，取出部分检测，计算排出Ca总量。
五、成分分析及数据处理每个样品做2个平行样，按高锰酸钾滴定法检测，经统计学处理，算出Ca的表现消化吸收率。六、实验结果
七、结论由本实验结果，可以说明，服用CPP-Ca组Ca的消化吸收率43.126±2.190高于不服CPP-Ca组25.372±11.933％，差异有显著性。
权利要求
1.一种酪磷肽钙营养液，其特征在于该营养液是由以下组分混配而成的组合物，组分重量比(份)去离子水100可溶性钙盐(以钙元素计) 0.005～0.5CPP-Ca 0.005～0.025甜味剂 0.5～15酸味剂 0.1～0.15稳定剂 0.01～0.2V-C 0.1～0.5防腐剂适量香味剂适量以上组分中肽(CPP)∶钙＝1∶(1～20)，经分批混合溶解，过滤，紫外线灭菌，高压均质，稀释定容，灌装，制成瓶装产品，该产品呈透明的乳白色胶体溶液。
2.根据权利要求1所述酪磷肽钙营养液，其特征在于所述的可溶性钙盐，其可以是乳酸钙，葡萄糖酸钙，泛酸钙，醋酸钙，氯化钙，其中的一种或几种。
3.根据权利要求1所述酪磷肽钙营养液，其特征在于所述的CPP-Ca其是由25个氨基酸组成的肽链，其分子量4400，其氨基酸序列结构为Arg-Glu-Leu-Glu-Glu-Leu-Asn-Val-Pro-Gly-Glu-Ile-Val-Glu-Serp-Leu-Serp-Serp-Serp-Glu-Glu-Ser-Ile-THr-Arg，该肽链内含四个Serp(磷酸丝氨酸)，该Serp上含有四个磷酸残基，其具有生物活性，该残基可与钙络合形成络合钙盐-CPP-Ca，该CPP-Ca产品外观呈乳白色粉末。
4.根据权利要求3所述酪磷肽钙营养液，其特征在于所述的CPP-Ca的制备工艺过程是(a)、将酪蛋白按5～30％投料量溶于50～85℃蒸馏水中，在调PH值7～9，均质工作压力8～15MPa，条件高压均质成糊状基料；(b)、按加酶量0.01～0.5％投入胰蛋白酶，调PH值3～6，在25～65℃温浴下1～6小时，水解酪蛋白；(c)、酶解后，迅速加温90℃保温5分钟，灭活胰酶；(d)、分离酶解液在6000～10000p.r.m下，离心5～20分钟，得取上清液；(e)、上清液过夜在-4～4℃下，静置12～14小时，除去未水解大分子；(f)、按上清液体积量投入CacL2，投CacL2料量20～40％(W/V)，充分搅拌反应2～5小时；(g)、按反应液体积∶乙醇＝1∶(0.3～2.3)加入无水乙醇，凝聚生成乳白色絮状物沉淀-CPP-Ca，回收乙醇；(h)、分离CPP-Ca，高速离心在6000～10000p.r.m10～30分钟；(1)、真空干燥，在60℃以下真空干燥获得纯品CPP-Ca，粉碎包装备用。
5.根据权利要求1所述酪磷肽钙营养液，其特征在于所述的甜味剂，其可以是蔗糖，乳糖，木糖醇，果糖浆，甜菊甙，其中的一种或几种。
6.根据权利要求1所述酪磷肽钙营养液，其特征在于所述的酸味剂，其可以是柠檬酸，酒石酸，苹果酸，其中的一种或几种。
7.根据权利要求1所述酪磷肽钙营养液，其特征在于所述的稳定剂，其可以是黄原胶，瓜尔豆胶，阿拉伯胶，西黄耆胶，其中的一种或几种。
8.根据权利要求1所述酪磷肽钙营养液，其特征在于所述的防腐剂，其可以是山梨酸，苹果酸钠。
9.根据权利要求1所述酪磷肽钙营养液，其特征在于所述的香精，其可以是草莓香精，桔子香精，菠萝香精，水蜜桃香精。
10.根据权利要求1所述的酪磷肽钙营养液的制造方法，其特征在于该营养液的组分按下列步骤配制(一)、先将按配方称量的稳定剂加1/5配方量的甜味剂，干粉混合搅拌均匀，再投入化胶罐加去离子水，在50～60℃温度下充分溶解；(二)、将按配方称量的可溶性钙盐投入调配罐中，加去离子水，加温50～60℃，充分溶解；(三)、将按配方称量的CPP-Ca，酸味剂，防腐剂，依次投入另一调配罐中，加去离子水，在50～60℃温度下充分溶解；(四)、将余下4/5配方量的甜味剂投入化糖罐中，加去离子水在50～60℃温度下，搅拌充分溶解，再经过滤器投入中配罐中；(五)、将上述(一)-(三)罐中溶解液，经管道紫外线灭菌后泵入中配罐中，再加入适量香味剂，搅拌混合均匀制成浓配液；(六)、将浓配液泵入高压均质机，在8-25MPa下均质物料；(七)、将均质的浓配液泵入稀配罐，用2/5配方用水量充分冲洗上述各罐和均质机，洗水泵入稀配罐，加去离子水定容，待装瓶备用；(八)、稀释定容的营养液，再经管道紫外线灭菌后，灌装入瓶，再经巴氏灭菌，检验合格后制成瓶装CPP-Ca营养液。
全文摘要
本发明公开了一种酪磷肽钙营养液，该食品主要含有酪磷肽钙，可溶性钙盐以及其它甜味剂，酸味剂，稳定剂和抗氧化剂。其中肽∶钙比为1∶(1～20)，采用高科技提取纯化工艺，从酪蛋白中提取酪磷肽，再经加钙制取具有生物活性的酪磷肽钙，以提高人体肠道区内钙离子扩散吸收作用，达到钙的表现消化吸收率46％以上。该营养液的保健功能是补充钙元素，促进钙吸收，而不必使用V-D。
文档编号A61K38/16GK1162489SQ9710269
公开日1997年10月22日 申请日期1997年2月25日 优先权日1997年2月25日
发明者宋汉梁, 王仁元, 张恒生, 张心明, 丁玉芳, 牛立新 申请人:青岛盖宝特保健品有限公司