氨磷汀在细胞周期素d1高表达类型肿瘤中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于生学医药领域，涉及一种氨磷汀在细胞周期素Dl高表达类型肿瘤中 的应用。
【背景技术】
[0002] 细胞周期素Dl(CyclinDl)在多种肿瘤细胞中高表达，包括套细胞淋巴瘤、急、慢 性白血病、乳腺癌、食管癌、肺癌、前列腺癌、甲状腺癌、骨髓瘤、头颈部肿瘤、肉瘤、胃癌、宫 颈癌、结肠癌、脑胶质瘤等，是一个理想的肿瘤治疗靶点。但目前临床缺乏有针对性的靶向 治疗药物。
[0003] 细胞周期素Dl (CyclinDl)致癌的分子机理如下： I.CyclinDl、p16的生物学功能及其对细胞周期的调控机制 真核细胞的分裂必须通过Gl-S期转换开始进行DNA合成，通过G2 -M期转换进 入有丝分裂期，其中CyclinDl与Gl期密切相关，CyclinDl可与⑶K4和⑶K6结合形 成复合体，随着CDK活化激酶活化而被激活，激活的复合体与CyclinE、CDK2复合体一 起使Rb磷酸化，释放出转录因子E2F，驱动细胞由Gl期进入S期，促进细胞增殖。Gl 期处于低磷酸化状态（功能状态）的PRb和转录因子E2F结合并抑制其活性，从而抑 制了进入S期所需蛋白的相关基因的转录。当外源性增殖分裂信号（如生长因子）与相 应受体结合后，通过信号传递促进CyclinDl基因表达。CyclinDl蛋白与⑶K4/6结合， 促之激活。CyclinDl的过表达可导致pRb蛋白的磷酸化修饰提前实现，并加速细胞从 Gl-S期转变过程。pl6蛋白与CyclinDl竞争结合⑶K，pl6蛋白能特异性抑制⑶K4 活性，使PRb保持去磷酸化状态，从而阻止细胞从Gl期进入S期，抑制细胞增殖，当 P16基因由于缺失或突变不能表达时，CyclinDl占优势与⑶K4结合，过度刺激细胞分 裂，使细胞呈失控性生长，而形成肿瘤。这些调节因于以PRb为中心构成一个复杂的调 控途径，即pl6-CyclinDl/CDK4/6,RB-Pi和E2F通路。总之，CyclinDl的过度表达，可导 致肿瘤的发生，抑制CyclinDl的过度表达，是治疗肿瘤的有效途径之一。
[0004] 2.CyclinDl、pl6 基因与肿瘤 (I)CyclinDl、pl6与妇科肿瘤 CyclinDl作为原癌基因最初于1991年在人甲状腺瘤中得到证实，之后相继报道CyclinDl与其它肿瘤的关系也较为密切。Lisui等应用免疫组化法检测79例卵巢肿瘤 中CyclinDl表达情况显示，良性肿瘤和交界性肿瘤中高于恶性肿瘤，表达率分别为72. 7%、69. 6%、32. 4%。提示CyclinDl过表达是卵巢恶变过程中的早期事件。并可作为区分 卵巢良恶性肿瘤的指标。Duk-sooBae等应用免疫组化和Western印迹检测28例正常 宫颈、31例CIN、32例宫颈癌中CyclinDl的表达，表达率分别为100%、3%、28%，得出结 论认为应用免疫组化检测CyclinDl可作为预测早期宫颈癌的预后。Andrzej等应用免疫 组化技术检测48例子宫内膜癌中细胞周期相关蛋白pRb、CyclinDl、pl6及⑶K4的表达 情况，结果分别为2%、50%、6%和25%。有69% (33/48)子宫内膜癌中至少有一种Rb通 路蛋白的表达异常，pl6、CyclinDl、pRb的异常表达与子宫内膜癌不同临床病理特征无相 关性，而CDK4的异常表达与患者年龄呈负相关，得出结论，Rb通路相关蛋白异常尤其 是CyclinDU⑶K4参与了子宫内膜癌的发生发展。
[0005] (2)CyclinDl、pl6 与消化道肿瘤 Li等应用免疫组化检测了 10例正常胰腺组织，12例胰腺上皮瘤，47例胰腺癌组 织中CyclinDl及 0-catenin的表达，结果分别为 0? 0%( 0/ 10)、50. 0% ( 6/ 12)、 74. 5%( 35/ 47)和 100% ( 10/10)、50. 0% ( 6/ 12)、68. 0% ( 32/ 47)。分析结 果，胰腺癌中CyclinDl与细胞增值及分化程度相关，与肿瘤大小、转移与否及一年存活 期无关。0-catenin的异常表达通过上调CyclinDl的表达在胰腺癌的发生发展中起重 要作用。应用免疫组化方法对CyclinDl进行检测发现在不同消化道肿瘤中预后意义不 同，Yukihiko等对25例肝细胞癌CyclinDl的检测，其中两种不同染色模式即细胞核 染色与细胞浆染色CyclinDl的阳性率分别为8%和32%，在细胞核染色阳性的两例标本 中，没有特征性的病理诊断特征，而8例细胞浆染色阳性的标本中，CyclinDl表达与 门静脉癌栓、肝内转移有密切相关性。这一结果表明，细胞浆CyclinDl表达与肝细胞癌 的预后相关。与Yukihiko报道不同，TakaoIto等对25例慢性胆囊炎、5例胆囊腺瘤、 6例腺瘤癌变，42例胆囊癌（20例粘膜内癌、22例浸润癌），进行免疫组化检测发现， CyclinDl的核表达在粘膜内癌及浸润癌中分别为40%、54%，而在非肿瘤性损害，腺瘤及 腺瘤癌变标本中无核表达，细胞浆CyclinDl的过表达可在肿瘤性和多种非肿瘤性异常 胆囊上皮中检测到，且过表达率仅为15%。这一结果表明，CyclinDl细胞核染色，与胆 囊癌的预后相关。同时他认为，CyclinDl在胆囊癌中的过表达大部分集中在胞核，很少 在胞浆或胞浆、胞核同时存在，在胞浆和胞核同时表达，很有可能是胞核CyclinDl漏出 胞楽?所致。是否将pl6、CyclinDl、pRb同时做为肿瘤细胞增殖调控问题，是当前细胞生物 学、遗传学和分子生物学等不同领域中共同的研宄热点，主要包括两方面内容：一方面 研宄细胞是怎样启动和完成有关细胞增殖的生物学事件；另一方面研宄细胞如何保证这 些事件精确地按次序进行。CyclinDl基因是一种非显性致癌基因与激活的ras或myc基 因协同能引起细胞转化，而肿瘤抑制基因pl6和p53对CyclinDl活性也有调节作用， 大多数肿瘤类型均有CyclinDl基因扩增和/或表达增强，虽然临床意义尚待进一步研 宄，但用反义CyclinDlcDNA转染的人类结肠癌和食管癌细胞确实表现出倍增时间延长 或致瘤性的丧失，因此，CyclinDl有望成为肿瘤基因治疗的一个新靶点。
[0006] 氨磷汀目前的临床应用 氨磷汀是由美军陆军研宄所开发出来的广谱细胞保护剂，用于核辐射和化学武器损伤 的防护。其分子式为C5H15N203SP，分子量为214. 22,化学结构为2-[ (3-氨基丙基）氨基] 乙基硫代二氢磷酸醋。英文别名Ethyol、Ethiofos、Fosteamine、Gammaphos、WR-2721 和 YM-08310,结构式如下：
【主权项】
1. 一种氨磷汀在治疗细胞周期素Dl高表达类型肿瘤中的应用。
2. 按照权利要求1所述的应用，其特征在于：所述肿瘤为套细胞淋巴瘤、急、慢性白血 病、乳腺癌、食管癌、肺癌、前列腺癌、甲状腺癌、骨髓瘤、头颈部肿瘤、肉瘤、胃癌、宫颈癌、结 肠癌、脑胶质瘤。
3. 按照权利要求1所述的应用，其特征在于：采用氨磷汀单药治疗，剂量为0. 4g/天， 静脉滴注，每周连续5天，停2天，连续用药4周。
【专利摘要】本发明公开了一种氨磷汀（化学名：依硫磷酸，英文名：amifostine，简称：AMF）在治疗细胞周期素D1（CyclinD1）高表达类型肿瘤中的应用。本发明人通过研究发现氨磷汀具有靶向抑制癌基因CyclinD1表达的抑制肿瘤细胞生长的作用和通过抑制CyclinD1表达的抗肿瘤作用，并通过巨核细胞白血病细胞系Dami成功验证了这种作用；在临床实践中，并成功治愈以CyclinD1高表达及白细胞高表达为特征的套细胞淋巴瘤。
【IPC分类】A61P35-02, A61K31-661, A61P35-00
【公开号】CN104800231
【申请号】CN201510142245
【发明人】杨波, 卢学春, 迟小华
【申请人】杨波
【公开日】2015年7月29日
【申请日】2015年3月27日