[ (5-氨基-4- {[ (2-氨 基乙基）氨甲酰基]氨基}-1_甲基-1H-吡唑-2-鑰-2-基）甲基]-7-({(22)-2-(5-氨 基_1，2,4_噻二唑-3-基）-2-[(1_羧基-1-甲基乙氧基）亚氨基]乙酰基}氨基）-8_氧 代-5-硫杂-1-氮杂双环[4. 2. 0]辛-2-烯-2-羧酸酯或其药学上可接受的异构体、盐、 酯、水合物、溶剂化物或其组合。在一个特别优选的实施方案中，内酰胺化合物为5-氨 基-4- {[ (2-氨基乙基）氨甲酰基]氨基} -2- {[ (6R，7R) -7- ({(2Z) -2- (5-氨基-1，2, 4-噻 二唑-3-基）-2-[(1_羧基-1-甲基乙氧基）亚氨基]乙酰基}氨基）-2_羧基-8-氧 代-5-硫杂-1-氮杂双环[4. 2.0]辛-2-烯-3-基]甲基}-1_甲基-1H-吡唑鑰单硫酸酯。
[0136] 在一个优选实施方案中，结晶他唑巴坦精氨酸为他唑巴坦精氨酸多晶型物 la。可用在约8.9° ±0.3°、约18.0° ±0.3°和约21. 2° ±0.3°的角度处具有一 个或多个用度数2 0表示的特征峰的X-射线粉末衍射图表征结晶他唑巴坦精氨酸。 可用在约 4. 8° ±0.3°、约 8. 9° ±0.3°、约 11.3 ° ±0.3°、约 14. 9 ° ±0.3°、 约 18.0° ±0.3°、约 19. 4° ±0.3°、约 21.2° ±0.3°、约 22. 8° ±0.3° 和约 24.3° ±0.3°的角度处具有用度数2 0表示的峰的X-射线粉末衍射图表征结晶他唑巴坦 精氨酸。在一些实施方案中，用在约209. 2至约211. 9的温度范围内具有用°C单位表示的 特征峰的差示扫描量热法热分析图表征结晶他唑巴坦精氨酸。可用起始温度为约201. 9°C 的热重曲线表征结晶他唑巴坦精氨酸。
[0137] 在最优选的实施方案中，内酰胺化合物为5-氨基_4_{[ (2-氨基乙基）氨甲酰 基]氨基} -2- {[ (6R，7R) -7- ({(2Z) -2- (5-氨基-1，2, 4-噻二唑-3-基）-2- [ (1-羧基-1-甲 基乙氧基）亚氨基]乙酰基}氨基）-2-羧基-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0] 辛-2-烯-3-基]甲基} -1-甲基-1H-吡唑鑰单硫酸酯并且结晶他唑巴坦精氨酸为他唑 巴坦精氨酸多晶型物la。
[0138] 一方面，本发明提供了用于治疗的结晶他唑巴坦精氨酸和内酰胺化合物。在 一个实施方案中，结晶他唑巴坦精氨酸和内酰胺化合物均肠胃外施用。通常，结晶他唑 巴坦精氨酸和内酰胺化合物均静脉内施用。在一些实施方案中，结晶他唑巴坦精氨酸 和内酰胺化合物均作为输注液施用。
[0139] 在一个优选实施方案中，0 -内酰胺化合物为（6R，7R) -3- [ (5-氨基-4- {[ (2-氨 基乙基）氨甲酰基]氨基}-1_甲基-1H-吡唑-2-鑰-2-基）甲基]-7-({(22)-2-(5-氨 基_1，2,4_噻二唑-3-基）-2-[(1_羧基-1-甲基乙氧基）亚氨基]乙酰基}氨基）-8_氧 代-5-硫杂-1-氮杂双环[4. 2. 0]辛-2-烯-2-羧酸酯或其药学上可接受的异构体、盐、 酯、水合物、溶剂化物或其组合。在一个特别优选的实施方案中，内酰胺化合物为5-氨 基-4- {[ (2-氨基乙基）氨甲酰基]氨基} -2- {[ (6R，7R) -7- ({(2Z) -2- (5-氨基-1，2, 4-噻 二唑-3-基）-2-[(1_羧基-1-甲基乙氧基）亚氨基]乙酰基}氨基）-2_羧基-8-氧 代-5-硫杂-1-氮杂双环[4. 2.0]辛-2-烯-3-基]甲基}-1_甲基-1H-吡唑鑰单硫酸酯。
[0140] 在一个优选实施方案中，结晶他唑巴坦精氨酸为他唑巴坦精氨酸多晶型物 la。可用在约8.9° ±0.3°、约18.0° ±0.3°和约21. 2° ±0.3°的角度处具有一 个或多个用度数2 0表示的特征峰的X-射线粉末衍射图表征结晶他唑巴坦精氨酸。 可用在约 4. 8° ±0.3°、约 8. 9° ±0.3°、约 11.3 ° ±0.3°、约 14. 9 ° ±0.3°、 约 18.0° ±0.3°、约 19. 4° ±0.3°、约 21.2° ±0.3°、约 22. 8° ±0.3° 和约 24.3° ±0.3°的角度处具有用度数2 0表示的峰的X-射线粉末衍射图表征结晶他唑巴坦 精氨酸。在一些实施方案中，用在约209. 2至约211. 9的温度范围内具有用°C单位表示的 特征峰的差示扫描量热法热分析图表征结晶他唑巴坦精氨酸。可用起始温度为约201. 9°C 的热重曲线表征结晶他唑巴坦精氨酸。
[0141] 在最优选的实施方案中，内酰胺化合物为5-氨基-4-{[(2-氨基乙基）氨 甲酰基]氨基} -2- {[ (6R，7R) -7- ({(2Z) -2- (5-氨基-1，2, 4-噻二唑-3-基）-2-[ (1-羧 基-1-甲基乙氧基）亚氨基]乙酰基}氨基）-2-羧基-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环 [4. 2. 0]辛-2-烯-3-基]甲基}-1-甲基-1H-吡唑鑰单硫酸酯并且结晶他唑巴坦精氨酸 为他唑巴坦精氨酸多晶型物la。
[0142] 如本文所使用，"治疗（treating, treat, treatment) "描述为了对抗疾病、疾患或 病症对患者的管理和照顾并且包括施用本发明的药物组合物以减轻疾病、疾患或病症的症 状或并发症，或消除疾病、疾患或病症。术语"治疗"也可包括体外细胞或动物模型的治疗。
[0143]用本发明化合物的"治疗有效量"指所述化合物治疗病症（例如，细菌感染）的 足够量。治疗任何特定患者或生物（例如，哺乳动物）所需的具体治疗有效量将取决于各 种因素，包括治疗的病症和病症的严重程度；采用的特定化合物或组合物的活性；采用的 特定组合物；患者的年龄、体重、总体健康状况、性别和饮食；采用的特定化合物的施用时 间、施用途径和排泄率；治疗持续时间；与采用的特定化合物联合或同时使用的药物；和医 学领域中众所周知的类似因素（参见，例如，Goodman和Gilman的"The Pharmacological Basis of Therapeutics'，，第 10 版，A. Gilman, J. Hardman 和 L. Limbird 编辑，McGraw-Hill Press，155-173, 2001，其以引用的方式整体并入本文）。给定情况的治疗有效量可通过常规 实验容易地测定并且在普通临床医师的技术和判断范围内。
[0144] MM.
[0145] 本文提供了一种检测或鉴定将抑制一种或多种产内酰胺酶的生物的试剂的 方法，所述方法包括合并：
[0146] (a)试验试剂；
[0147] (b)包含一种或多种产0 -内酰胺酶的生物的组合物；和
[0148] (c) 0 _内酰胺酶抑制剂；并且检测或测量产0 _内酰胺酶的生物的活性变化，其 中产内酰胺酶的生物的活性降低表明试验试剂抑制产内酰胺酶的生物。
[0149] 如上述方法中所使用，"活性"是指产P_内酰胺酶的生物繁殖和/或感染另一种 生物的能力，或"活性"指存在产0 _内酰胺酶的生物繁殖和/或感染另一种生物的能力的 指示。检测和/或测量产内酰胺酶的生物的活性变化的方法为本领域中的技术人员已 知。
[0150] 另一方面，本文提供了一种测定产内酰胺酶的生物对包含内酰胺化 合物和内酰胺酶抑制剂的组合物的易感性的方法。可通过标准试验程序评估本 发明组合物的体外活性。这种程序的非限制性实例包括如美国宾夕法尼亚州维拉诺 瓦国家临床实验室标准化委员会（National Committee for Clinical Laboratory standards, Villanova, Pa.，USA) 1"3 年公布的 "Approved Standard. Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria that Grow Aerobically'， 增刊第3版中所述的用于测定最小抑制浓度（MIC)的柯-鲍二氏法（Kirby-Bauer method)、斯托克斯试验（Stokes test)、E试验、肉汤稀释法和琼脂稀释法。在某些实施方 案中，使用自动化技术（例如，西门子的MicroScan系统）进行本文所述方法。
[0151] 在上述方法的一个实施方案中，内酰胺酶抑制剂为他唑巴坦精氨酸。在一个 优选实施方案中，内酰胺酶抑制剂为他唑巴坦精氨酸多晶型物la。
[0152] 所述试验试剂可选自由青霉素、头孢菌素、碳青霉烯及其组合组成的组。在一些实 施方案中，所述试验试剂选自表2所列的化合物及其药学上可接受的异构体、盐、酯、水合 物、溶剂化物或其组合。
[0153] 在本文所述方法的某些实施方案中，产内酰胺酶的生物选自由以下组成的 组：
[0154] (1)选自由肠杆菌科某些种：大肠埃希氏菌、克雷伯杆菌某些种（包括克雷伯氏 肺炎菌和产酸克雷伯氏菌）、奇异变形菌、普通变形菌、肠杆菌某些种、沙雷氏菌某些种、柠 檬酸杆菌某些种和拟杆菌某些种组成的组的产ESBL(超广谱0 -内酰胺酶）的生物；
[0155] (2)本领域中技术人员已知的产CSBL(常规谱0 -内酰胺酶）的生物；和
[0156] (3)AmpC诱导型内酰胺酶，诸如柠檬酸杆菌某些种、沙雷氏菌某些种、摩氏摩 根菌、普通变形菌和阴沟肠杆菌。
[0157] 仪器和方法
[0158] I.使用Bruker D8Advance X射线粉末衍射仪，利用归零娃板、0. 01 °步长、0. 3 秒/步的步进时间、Cu/Ka辐射、40kV/40mA的管功率、镍滤光片和LynxEye高速检测器进 行X-射线粉末衍射（XRPD)实验。直接将适量样品置于样品架上，压平至光滑，并且使用 Bragg-Brentano光学器件从3° -40° 2 0分析。样品制备后立即开始分析。
[0159] II.在TA Instruments Q100仪器上进行差示扫描量热法（DSC)实验。利用升降 温速率为l〇°C /分钟的40°C -300°C的温度范围。向配衡铝样品盘称取约1. Omg样品并气 密性密封。将小孔推入样品盘的盖内以允许压力释放。
[0160] III?从20-300°C，以10°C /分钟的加热速率，在TA Instruments 5000仪器上对 所有样品进行热重量分析（TGA)实验。 实施例
[0161] 实施例1:他唑巴坦精氨酸结晶多晶型物la的制备
[0162] 将非晶形他唑巴坦精氨酸（1. 00g)溶于10.0 mL去离子水中。通过滴加，向水溶液 中添加30mL丙酮。使混合物在环境温度下静置过夜，产生白色细针。过滤和真空干燥4小 时后，得到他唑巴坦精氨酸多晶型物Ia(516mg)。图1中描述了他唑巴坦精氨酸多晶型物 la的XRTO谱。
[0163] 实施例2:使用他唑巴坦精氨酸多晶型物la和头孢特咯瓒制备药物组合物
[0164] 制备混合物，其包含摩尔比在1:2至2:1的范围内的他唑巴坦精氨酸多晶型物la 和头孢特咯瓒；L-精氨酸，使得L-精氨酸与头孢特咯瓒的摩尔比在4:1至1:4的范围内； 柠檬酸，使得混合物水溶液的pH在5-7的范围内；和氯化钠，使得混合物水溶液中氯化钠的 浓度在0. 1M-1M的范围内。将混合物溶于去离子水中，使得水溶液中头孢特咯瓒的摩尔比 在0. 01M - 10M的范围内。然后冻干所得水溶液以获得标题药物组合物。
[0165] 实施例3:头孢特咯瓒和固体形式他唑巴坦的制剂的稳定性
[0166] 如下制备表3的制剂A-D:
[0167]制剂 A:格 1. 237g(l. 5mmol)的 90%硫酸头孢特咯瓒、0. 62g(3. 56mmol)的 L-精 氨酸、0.022g(0.115mmol)的朽1 檬酸、0.49g(8.39mmol)的 NaCl 溶于 30mL 水中（最终 pH 5. 81)，然后通过0. 2 ym膜过滤，并且冻干24小时以获得2. 2g灰白色粉末。在25°C下用一 份480mg进行稳定性试验（60% RH)。
[0168]制剂 B:格 1. 237g(l. 5mmol)的 90%硫酸头孢特咯瓒、0? 93g(5. 34mmol)的 L-精 氛酸、0? 022g(0. 115mmol)的朽1 樣酸、0? 50g(1. 67mmol)的他挫巴坦酸和 0? 49g(8. 39mmol) 的NaCl溶于30mL水中（最终pH 6. 72)，然后通过0.2 ym膜过滤，并且冻干24小时以获得 3. 22g灰白色粉末。在25°C下用一份490mg进行稳定性试验（60% RH)。
[0169]制剂 C:格 1. 237g(l. 5mmol)的 90%硫酸头孢特咯瓒、0? 62g(3. 56mmol)的 L-精 氨酸、0? 022g(0. 115mmol)的朽1 檬酸和 0? 49g(8. 39mmol)的 NaCl 溶于 30mL 水中（所得 pH 6. 34)，然后添加0. 79g(l. 67mmol)的他唑巴坦精氨酸多晶型物la并搅拌至溶解（最终pH 6. 30)，通过0. 2 ym膜过滤，并且冻干24小时以获得3. 10g灰白色粉末。在25°C下用一份 510mg进行稳定性试验（60% RH)。
[0170]制剂D:将1. 0g的制剂A(0. 7mmol硫酸头孢特略馈；1. 67mmol L-精氨酸）和 0.21g(0.65mmol)他唑巴坦钠溶于20mL水中（最终pH 5.89)，然后通过0.2 111]1膜过滤，并 且冻干24小时以获得1. 074g灰白色粉末。在25C下用一份195mg进行稳定性试验（60% RH) 〇
[0171] 在下列时间点通过HPLC分析以上制剂：T0 (冻干后立即）；T1 (在25°C和60%相 对湿度下1个月后）和T2 (在25°C和60 %相对湿度下3