hesive Technology)，Α·皮兹（A. Pizzi)和 K.L.米塔尔 (Κ. L. Mittal)编（CRC 出版社 2003)。
[0077] 不可渗透背衬执行双重功能：（1)防止药剂损失和（2)提供药剂味道掩蔽。
[0078] 一般来说，不可渗透的涂层由如乙酸纤维素、羟丙基甲基纤维素或尤特奇 (Eudragit)(聚丙烯酰胺）的聚合物形成。这些也可以是生物粘附性的。生物可降解的材 料是优选的，因为所述材料可能被吞咽的可能性。
[0079] E.待囊封药剂
[0080] 任何治疗剂、防治剂、诊断剂或营养药剂都可以被囊封。代表性药剂包括化学治疗 剂、抗感染剂、抗生素、抗真菌剂、抗病毒剂、抗炎剂、免疫调节剂、疫苗以及其组合。
[0081] 优选药剂是铂基化学治疗剂，如顺铂（CIS)。历史上，CIS已处于铂基化学治疗剂 的前沿并且是包括OC的许多癌症的治疗中的护理标准。尽管CIS是许多癌症的主导疗法， 但其常常由于传统大丸剂全身IV剂量而受其显著的全身性毒性阻碍。这一系统避免所述 毒性。
[0082] 诊断剂可以是不透射线的、放射性的或其它。举例来说，诊断剂可以是成像剂，如 氧化铁、钆络合物、放射性同位素、金以及其组合。
[0083] F.额外添加剂
[0084] 可以包括的其它化合物是味道掩蔽剂，如调味剂（薄荷、橙子或柑桔调味剂等）； 以及抗氧化剂，其可用于预防细菌污染。代表性抗血管生成剂是姜黄素和其纯化组分；抗生 素，如四环素和其衍生物；以及化学治疗剂，如沙立度胺（thalidomide)。这些还可以帮助 治疗癌症或治疗部位处的感染。
[0085] 这些药剂可以涂布于基质或纳米粒子上、分散在基质或纳米粒子内或囊封在基质 或纳米粒子内。
[0086] II.制造方法
[0087] 至少存在四种可用方法以制得壳聚糖粒子：离子型胶凝、微乳液、乳化溶剂扩散以 及聚电解质络合物。最广泛研发的方法是离子型胶凝和自组装聚电解质。这些方法提供许 多优势，如简单并且温和的制备方法，而不使用有机溶剂或较高剪切力。其适用于较宽类别 的药剂，包括作为不稳定药剂众人皆知的大分子。一般来说，发现影响纳米粒子形成（包括 粒径和表面电荷）的因素是壳聚糖的分子量和脱乙酰化程度。发现截留效率取决于PKa和 截留药剂的溶解度。
[0088] 离子型胶凝方法常用于制备壳聚糖纳米粒子。在酸性溶液中，壳聚糖分子的胺基 被质子化并且通过离子相互作用与如三聚磷酸盐（TPP)的阴离子相互作用形成粒子（李 (Lee)等人，聚合物（Polymer), 42:1879-1892(2001))。这种方法极其简单并且温和。应 用可逆的通过静电相互作用的物理交联替代化学交联以防止试剂的可能的毒性和其它非 所需作用（舒（Shu)等人，国际药学杂志（Internal J. Pharm. ),201:51-58 (2000))。
[0089] 还参见吕等人，分子药物学，9:1736-1747(2012)，其描述通过接枝有环状 Arg-Gly-Asp(RGD)肽的PEG化0-羧甲基-壳聚糖（CMC)纳米粒子的不溶性药剂（太平洋 紫杉醇，PTX)的肿瘤靶向递送系统。为了提高负载效率（LE)，将0/W/0双乳液方法与程序 升温固化技术组合，并且控制呈原位纳米微晶形式的基质网络内的PTX。此外，这些CMC纳 米粒子被PEG化，其可以减少网状内皮系统（RES)识别并且延长在血液中的循环时间。
[0090] 已知通过微乳液制得壳聚糖粒子的方法。举例来说，使用壳聚糖（CS)作为亲水性 主链和聚（乳酸-共-乙醇酸）（PLGA)作为疏水性侧链的两亲性接枝共聚物经由乳液自 组装合成制备。CS水溶液用作水相，并且三氯甲烷中的PLGA用作油相。在表面活性剂斯 潘-80(叩&11-80)存在下制造油包水（1/0)乳液。031-?11^两亲物可以自组装形成尺寸在 ~100-300nm范围内的胶束，使得其容易应用到各种靶向药物释放和生物材料领域中。壳 聚糖可以与1-羟基苯并三唑一起溶解于去离子水中。制备油包水（W/0)壳聚糖和聚（乳 酸-共-乙醇酸）微乳液，并且接着制造壳聚糖-接枝-聚（乳酸-共-乙醇酸）刺激反 应两亲物。所得两亲物可以在适合的溶剂中自组装形成胶束。蔡（Cai)，国际纳米医学杂 志（Int J Nanomedicine), 6:3499-508(2011)描述了针对整合素过度表达肿瘤细胞靶向递 送的RGD肽介导的壳聚糖基聚合胶束。
[0091] 壳聚糖微米粒子可以通过油包水乳液溶剂扩散方法制备。在搅拌下将壳聚糖溶液 逐滴添加到乙酸乙酯中持续45分钟。在乳化扩散之后，通过离心回收壳聚糖微米粒子并且 在30°C下在真空烘箱中干燥24小时。
[0092] 壳聚糖的重复吡喃葡萄糖单元的C2位置上的阳离子氨基可以与其它聚离子的阴 离子基团（通常羧酸基团）以静电方式相互作用以形成聚电解质络合物。已使用许多来 自天然来源（例如果胶、海藻酸盐、角叉菜胶、黄原胶、羧甲基纤维素、硫酸软骨素、硫酸葡 聚糖、玻尿酸）或合成来源（例如聚（丙烯酸））、聚磷酸、聚（L-交酯）的不同聚阴离子来 形成具有壳聚糖的聚电解质络合物以提供对于特定药物递送系统设计所需的物理化学特 性（伯杰（Berger)等人欧洲制药学与生物制药学杂志（Eur J Pharm Biopharm. )2004; 57:35-52)。
[0093] 如实例5所展示，壳聚糖海绵可以通过形成壳聚糖溶液、添加酸、接着冷冻并且冻 干壳聚糖来制备。在一个优选实施例中，使含有药物的纳米粒子悬浮于壳聚糖溶液中以产 生具有分散于其中的药物纳米粒子的壳聚糖海绵。
[0094] II.投与方法
[0095] 两种通常报道的口腔癌给药方案（假设平均生理资料档案）产生15-40 μ g/ml范 围内的治疗剂浓度。这些浓度范围可以使用NP递送系统获得。然而，重要的是理解药剂被 吸收通过口腔粘膜时的生物可用性。意图是将药剂递送到局部组织，其在待递送药剂总浓 度方面具有直接影响。需要浓度小于全身治疗剂给定的浓度。举例来说，CIS传统上以静 脉内大丸剂剂量形式递送，并且受其全身性毒性限制。这一毒性尤其导致肾毒性（肾脏） 和耳毒性（听觉）以及骨髓抑制、恶心和呕吐。在累积剂量200mg/m2的情况下观测到神经 毒性。发现CIS的近期脂质形式具有300mg/m2的最大耐受剂量。假设平均生理资料档案， 血浆浓度应小于76 μ g/ml。通过保持累积剂量在所报道的耐受范围内，这一途径避免全身 性毒性和其相关作用。如果由于唾液清除药剂到达胃肠（GI)道，那么这还将避免全身性毒 性。最终在GI道中的大多数药剂将被排泄出，因为大多数铂基抗癌剂在GI道中的吸收较 低。
[0096] 将通过参考以下非限制性实例进一步理解本发明。
[0097] 实例1 :制备无药物壳聚糖基纳米粒子
[0098] 使用如下文所描述的低分子量研究级壳聚糖制备纳米粒子。
[0099] 材料和方法
[0100] 简单来说，在剧烈搅拌的同时将以各种w/v(0. 1%-1% )于纯化水中的5mL 三聚磷酸盐（TPP)溶液添加到含有各种浓度低分子量、中等重量并且脱乙酰化壳聚糖 (0. 1% -1% w/v)的IOmL乙酸溶液（0. 175% v/v)中。在室温下连续搅拌混合物10分钟， 产生具有各种尺寸的壳聚糖纳米粒子（CHI-NP)的集合。
[0101] 表征纳米粒子。通过泽塔塞泽纳米仪（英国马尔文仪器有限公司（Malvern Instruments, Ltd.，UK))测量纳米粒子的尺寸、多分散指数（PDI)、每秒千计数（KCPS)以及 ζ电位（ZP)。
[0102] 结果
[0103] 表1概括了由低分子量壳聚糖制备的纳米粒子的特性。到目前为止，颗粒样品的 最重要的物理性质是粒径。在广泛范围的工业领域中常规地进行粒径分布的测量，并且其 常常是制造许多产品时的关键参数。NP必须小于200nm以渗透通过粘膜并且被癌细胞摄 取。
[0104] 如休托特（Heurtault)等人，生物材料（Biomaterials)，24:4283-4300 (2003)中 所描述，ζ电位是粒子表面电荷的重要并且有用的指标，其可以用于预测并且控制胶体悬 浮液或乳液的稳定性。几乎所有与液体接触的粒子在其表面上获得电荷。剪切面处的电势 称为ζ电位。剪切面是分离在运动中结合到固体表面的液体薄层（由抗衡离子构成的液 体层）的假想表面。ζ电位越大，悬浮液越有可能稳定，因为带电粒子彼此排斥并且因此克 服聚集的自然倾向。ζ电位的测量允许对胶体分散液的储存稳定性进行预测。
[0105] 纳米粒子的电荷对其粘膜粘附特性来说是关键的（生物药效学公报（Biol Pharm Bull. )2003年5月；26(5) :743-6. ζ电位与猪膀胱粘膜的粘膜粘着强度之间的相关性（The correlation between zeta potential and mucoadhesion strength on pig vesical mucosa).)。带正电荷纳米材料具有较佳粘膜粘着强度。因此，所需ζ电位是在10-50mV 范围内的正电荷，其被视为稳定的。
[0106] 表1 :低分子量壳聚糖纳米粒子。
[0109] KCPS =每秒千计数
[0110] PDI =多分散指数，也称为分散度
[0111] ZP = ζ 电位
[0112] 中等分子量研究级壳聚糖还用于由低分子量研究级壳聚糖制备如上文所描述的 纳米粒子。如表2中所示出表征纳米粒子。
[0113] 表2 :中等分子量壳聚糖纳米粒子。
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[0115] 在单独的实验中，还使用医药级壳聚糖PROTASAN? UP CL 113(壳聚糖氯化物）如 上文所描述制备纳米粒子。PROTASAN? UP CL 113 (壳聚糖氯化物）是基于壳聚糖，其中去 除75%与90%之间的乙酰基。阳离子聚合物是高度纯化并且充分表征的水溶性氯化物盐。 功能特性通过分子量和脱乙酰化程度描述。通常，PROTASAN? UP CL 113 (壳聚糖氯化物） 的分子量在50, 000-150, OOOg/mol范围内（如乙酸壳聚糖所测量）。内毒素和蛋白质的超 低水平允许很多种活体外和活体内应用。
[0116] 表3 :PR0TASAN? UP CL 113(壳聚糖氯化物）纳米粒子。
[0118] 通过使用高纯度壳聚糖（阳离子聚合物是高度纯化并且充分表征的水溶性氯化 物盐。），获得具有较佳品质的壳聚糖纳米粒子，如表3中所示。通过优化TPP与壳聚糖溶 液之间的不同比率（0.6:1 ;0.5:1 ;0.4:1)获得最佳调配物。如表3中所示，最佳形成是使 用大约0. 5:1的TPP与壳聚糖的比率，其具有理想的尺寸和ζ电位。
[0119] 实例2 :顺铂囊封纳米粒子的制备和表征
[0120] 材料和方法
[0121] 使用低分子量研究壳聚糖，使用如下文所描述的不同浓度顺铂制备顺铂负载纳米 粒子。
[0122] 简单来说，在剧烈搅拌的同时将以0. 1% w/v含有顺铂（0. l_2mg)的5mL三聚磷酸 盐（TPP)溶液添加到含有0. 1% w/v壳聚糖的IOmL乙酸溶液（0. 175% v/v)中。在室温下 连续搅拌混合物10分钟，产生具有不同顺铂负载量的顺铂囊封CHI-NP的集合。
[0123] 空白纳米粒子的最佳调配是在