G113)溶液的1% 乙酸溶液添加到其中，并且搅拌额外的1分钟。接着将这一混合物转移到12孔盘中，每孔 4ml。冷冻工艺在液氮中进行30分钟，继而冻干2天。
[0227] 结果
[0228] 这一平台使可再生性最大化并且允许精确控制晶片形状和每个晶片中的药物量。 另外，已进行实验探究冷冻晶片的替代方法。发现在液氮中冷冻晶片溶液30分钟产生与在 干冰上将其冷冻3小时相同的效果。所述工艺产生12个晶片单一个，并且在冷冻时间内缩 减 83%。
[0229] 实例14 :将甜味剂和味道掩蔽剂的最佳化调配物并入NP嵌入晶片中。
[0230] 存在与顺铂相关的令人不愉快的金属味道。这令人不愉快的并且常常不能忍受的 味道可能大大降低化学疗法患者的生活品质，并且给顺铂的局部投与造成显著障碍。进行 严格实验以测定可以并入NP嵌入晶片方案的甜味剂和味道掩蔽剂的最佳调配物，同时使 改变减到最小。在各种条件下测试许多调味剂和甜味剂调配物。这一实验的目标是确定用 于隐藏顺钼的金属味道的调味剂/掩蔽剂的最佳组合。
[0231] 材料和方法
[0232] 六种不同调味剂样品和一种拆分剂获自威尔德调味剂公司（WILD Flavors)。粉末 状鹿糖素和怡滋甜（EZ-Sweetz)购自Amazon, com，并且温和铁（Gentle Iron)补充剂购自 维生素专柜（Vitamin Shoppe) 〇
[0233] 所使用的试剂和设备：
[0234] 水果果汁调味剂
[0235] 热带果汁调味剂
[0236] 橙子霜调味剂
[0237] 橙子奶昔调味剂
[0238] 胡椒薄荷调味剂
[0239] 香草薄荷调味剂
[0240] 拆分剂
[0241] 25mg温和铁胶囊（以测试顺铂调味剂）
[0242] 怡滋甜
[0243] 粉末状蔗糖素
[0244] 结果
[0245] 在6种不同参数下测试每种调味剂：
[0246] 1滴调味剂+2ml 5 %铁溶液
[0247] 1滴调味剂+2ml 5 %铁溶液+1滴怡滋甜
[0248] 1滴调味剂+2ml 5 %铁溶液+1滴42mg/ml蔗糖素溶液
[0249] 1滴调味剂+2ml 5 %铁溶液+1滴拆分剂
[0250] 1滴调味剂+2ml 5 %铁溶液+1滴怡滋甜+1滴拆分剂
[0251 ] 1滴调味剂+2ml 5 %铁溶液+1滴42mg/ml蔗糖素溶液+1滴拆分剂
[0252] 几乎所有组合都产生完全掩盖了强烈的金属味道的溶液。当将怡滋甜添加到大多 数调味剂中时，其味道太强达到仅品尝甜度的程度。一些是如此甜；其难以吞咽。另外，当 与怡滋甜组合时，拆分剂对一些调味剂具有非常重要的作用。其不仅降低甜度，通过拆分剂 还使6个测试组合中的5个的核心味道增强（例如，胡椒薄荷更加显著）。6种调味剂中的 5种的最佳结果来自怡滋甜与拆分剂的组合。
[0253] 实例15.渗透增强剂的最佳化以及渗透增强剂到晶片中的并入
[0254] 本研究为测定嵌入晶片中的顺铂囊封NP可以渗透猪舌中的渗透深度。平台技术 可以在纳米粒子表面添加各种类型的渗透增强剂或混合进入海绵基质中。平台的灵活性可 以产生具有可以渗透不同深度组织的渗透增强剂的各种组合的文库。可以使用逐层方法将 如胆酸的带负电荷的渗透增强剂添加到纳米粒子的表面上。
[0255] 材料和方法
[0256] 使用FITC标记的壳聚糖NP。
[0257] 使用以下渗透增强剂（"PE"）：
[0258] a)无 PE (仅 PBS)
[0259] b)乙醇（用50% PBS稀释的100%乙醇）
[0260] c) 2-二甲基氨基丙酸十二烷基酯（DDAIP) ( "DDAIP"）（2g/100ml稀释于PBS中）
[0261] d)乙醇+DDAIP(用4g/100ml DDAIP稀释的100%乙醇，以获得与分别在（b)和 (c)中所使用的乙醇和DDAIP相同的最终工作浓度。
[0262] e) TDCA (IOOmM 稀释于 PBS 中）
[0263] 举例来说，选择脱氧胆酸（DCA)钠。将2. 4mL含有顺铂（lmg/mL)的TPP溶液缓慢 添加到3mL壳聚糖溶液（乙酸溶液0· 175% v/v)中。通过迅速将60uL DCA(1. 6mg/mL)添 加到混合物中来进行渗透增强剂（在此情况下，DCA)的逐层涂布。接着在室温下剧烈搅拌 溶液10分钟，并且获得DCA涂布的顺铂囊封纳米粒子（DCA涂布的CIS-NP)。
[0264] 或者，将ImL含有1 %壳聚糖的1 % w/v柠檬酸溶液和IOmg脱氧胆酸（DCA)钠添 加到ImL CHI-NP溶液中。接着在-80°C下冷冻所得溶液并且冻干2天以获得DCA/CIS-NP 嵌入海绵。
[0265] 新鲜猪舌获自剑桥（Cambridge)的屠夫商店（Butcher shop)。选择舌头的中间 部分用于这些研究。在这一部分上选择5个指定切片，并且在这些切片中的每一个处施 加0. 75mL这些PE中的每一种，继而添加晶片（每个25mg)，其中在晶片顶部上具有额外 0. 75mL的PE。在暗处在室温下进行培育1小时。接着用水洗涤舌头，并且从其指定切片中 去除所有晶片。各个切片单独切割并且嵌入OCT中以用于使用超薄切片机切片。从这些切 片中的每一个切割50微米切片，并且将2个切片放置在载玻片上。载玻片浸没在水中保持 3小时以去除任何结合0CT，因为其干扰图像质量。之后，使用含有封固介质的DAPI给不同 切片的载玻片中的每一个安装有盖玻片，并且使用荧光显微镜进行成像。在4X、10X和 20X下，在两个FITC和DAPI通道中获取图像。另外，还切割未经处理的舌头的切片并且成 像以解释舌头的固有荧光。然而，在进行渗透研究之前，进行许多实验以发现将不会使当前 晶片合成方案显著改变并且允许无缝集成晶片的PE最佳浓度。
[0266] 结果
[0267] 研究结果显示DDAIP是最有效的渗透增强剂（表8)。
[0268] 表8 :渗透增强剂和渗透深度
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[0270] 口腔药物递送的主要挑战中的一个是确保药物成功地绕过颊内屏障到达其标靶 位点。两个最显要的屏障是脂质屏障和基膜。脂质屏障存在于上部上皮中并且由膜被颗粒 和紧密连接组成，而基膜在上皮中更深并且由阻止大分子进入的细胞外基质蛋白质组成。 尽管壳聚糖其本身就是一种渗透增强剂，但其无法渗透足够深进入上皮中（如表8中所示 的70 μπι)以便充分递送药物。其阳离子特性与带负电细胞膜相互作用，破坏脂质屏障并且 增加渗透。当DDAIP-HC1用作PE时，NP渗透的最大深度是200 μ m，远超出基膜屏障（约 100 μπι)。DDAIP-HC1是已显示改变细胞脂双层的动力学并且松散细胞之间的紧密连接、增 加渗透的亲水性分子。研究还显示，DDAIP NP遵循渗透的旁细胞路径，意指NP使用细胞之 间的细胞内空间以更深地进入上皮。
[0271] 这些结果显示，壳聚糖和DDAIP-HC1能够克服脂质屏障和基膜，足够渗透上皮到 达甚至较深的肿瘤。
【主权项】
1. 一种用于将药剂递送到粘膜腔中的部位的调配物，所述调配物包含 粘膜粘附聚合基质，其具有并入其中的含有治疗剂、防治剂、诊断剂或营养药剂的纳米 粒子，其味道被掩蔽或在所述粘膜腔中释放后靶向组织， 其中所述基质具有至少两个表面，用于接触所述口腔中的部位以递送所述药剂的第一 表面，以及暴露于所述口腔的第二表面， 其中所述基质的所述第一表面包含在所述基质的表面上具有一定分子量和密度的聚 合材料以促进所述纳米粒子穿过所述口腔的粘膜，以及 其中所述基质的所述第二表面包含对待递送药剂来说不可渗透穿过的涂层或膜。2. 如权利要求1所述的调配物，其中所述基质包含具有并入其中的药剂的壳聚糖或环 糊精的纳米粒子。3. 如权利要求1所述的调配物，其中所述涂层或膜由选自由以下组成的群组的聚合物 形成：羟丙基甲基纤维素、乙酸纤维素以及聚丙烯酰胺。4. 如权利要求1所述的调配物，其中所述纳米粒子的直径在约60nm与450nm之间。5. 如权利要求1所述的调配物，其中所述纳米粒子涂布有聚二醇部分以增强通过所述 粘膜到达所述递送部位的渗透。6. 如权利要求1所述的调配物，其中所述纳米粒子在其表面上包含靶向部分以引导所 述纳米粒子到达所述药剂递送部位。7. 如权利要求1所述的调配物，其中所述基质包含附着肽，其有效地使所述基质粘着 到所述药剂的待递送部位的组织上。8. 如权利要求1所述的调配物，其中所述药剂选自由以下组成的群组：化学治疗剂、抗 感染剂、抗炎剂、免疫调节剂、疫苗以及其组合。9. 如权利要求8所述的调配物，其中所述抗感染剂选自由以下组成的群组：抗生素、抗 真菌剂、抗病毒剂以及其组合。10. 如权利要求1所述的调配物，其中所述诊断剂是选自由以下组成的群组的成像剂： 氧化铁、钆络合物、放射性同位素、金以及其组合。11. 如权利要求1所述的调配物，其中所述药剂是铂基化学治疗剂。12. 如权利要求1所述的调配物，其进一步包含一种或多种渗透增强剂。13. 如权利要求12所述的调配物，其中所述渗透增强剂选自由以下组成的群组：2_二 甲基氨基丙酸十二烷基酯、聚乙二醇、柠檬酸、胆汁盐以及(6-环糊精。14. 如权利要求1所述的调配物，其包含一种或多种味道掩蔽剂。15. 如权利要求14所述的调配物，其中所述味道掩蔽剂选自由以下组成的群组：柠檬 酸、甜味剂以及食品调味剂。16. 如权利要求1所述的调配物，其进一步包含抗炎剂或抗氧化剂。17. 如权利要求5所述的调配物，其中所述聚二醇部分是分子量小于10, OOODa的聚乙 二醇。18. 如权利要求6所述的调配物，其中所述部分是RGD肽。19. 如权利要求1所述的调配物，其中所述聚合基质材料是壳聚糖，所述壳聚糖味道掩 蔽所述待递送药剂并且所述壳聚糖在暴露于所述口腔的PH后释放所述纳米粒子。20. 如权利要求19所述的调配物，其中所述纳米粒子在暴露于所述口腔的pH后释放化 学治疗剂或诊断剂。21. -种将药剂递送到粘膜腔中的部位的方法，其包含向区域投与如权利要求1到20 中任一权利要求所述的调配物。22. 如权利要求21所述的方法，其中所述部位包含癌细胞。23. 如权利要求21所述的方法，其中所述部位包含口腔、颊内或舌下粘膜。24. 如权利要求21所述的方法，其中所述药剂以不会引起所述药剂的全身性有效水平 的剂量递送。
【专利摘要】已研发出一种用于将药剂局部和全身递送到靶向口腔位置，如口腔癌细胞的递送装置。调配物包括如壳聚糖的粘膜粘附聚合基质，其含有一种或多种治疗剂和/或诊断剂、味道掩蔽剂、渗透增强剂，待递送治疗剂或诊断剂以及亲水性聚合涂层，如聚乙二醇(“PEG”)。
【IPC分类】A61K9/51, A61K31/282, A61K9/70
【公开号】CN105142619
【申请号】CN201480022645
【发明人】M·N·歌德伯格, M·J·阿隆索, 陈冠如
【申请人】麻省理工学院
【公开日】2015年12月9日
【申请日】2014年2月21日
【公告号】CA2901948A1, EP2958555A2, US20140234212, WO2014130866A2, WO2014130866A3