一种提高难溶性药物口服生物利用度的纳米粒微球的制备方法及应用
【技术领域】
[0001] 本发明设及医药领域，特别是一种提高难溶性药物口服生物利用度的纳米粒微球 的制备方法及应用。
【背景技术】
[0002] 临床上有些水中难溶性药物如大多数抗癌药因为口服生物利用度低而只能采用 静脉注射给药方式进行疾病的治疗。静脉给药需要频繁的注射，患者的依从性较差，血药浓 度波动较大导致明显的毒副作用。口服给药患者可自行用药，患者依从性高。运些药物口服 后生物利用度低可能因为存在明显的肝首过效应、胃肠道不稳定或代谢、肠吸收外排或吸 收饱和等障碍。目前运些药物的普通制剂(药物W分子状态进行肠吸收），口服后难W克服 运些障碍导致生物利用度很低。随着社会的发展和生活水平的提高，口服药物的开发必然 成发展趋势。
[0003] 2-甲氧基雌二醇(2-ME)是一种抗癌药，主要通过抗血管生成效应和抗瘤生成效应 用于治疗乳腺癌，前列腺癌等病症。该药是水难溶性的，存在明显的肝首过效应，还存在肠 吸收饱和现象，其口服有效的制剂目前在国内外还未见报道。
【发明内容】
[0004] 针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本发明之目的就是提供一种提高难溶性 口服药物生物利用度的纳米粒微球的制备方法及应用，可有效解决现有药物口服生物利用 度低，药效低，毒副作用大，药物突释造成胃内不适的问题。
[000引本发明方法解决的技术方案是，由W下步骤实现：
[0006] (1)、在70-85°C，将单硬脂酸甘油醋400-600mg，山斋酸甘油醋(AT0888)100-200mg 混合烙融作为油相；
[0007] (2)、将2-]\^15-30111邑、聚乙二醇（分子量5000)-聚已内醋（分子量10000)。66-P化)100-200mg，溶于2-3ml无水乙醇中，边揽拌边加热至70-85°C溶解均匀，加入油相中，揽 拌至无水乙醇完全挥发，成无醇混合物油相；
[000引（3)、在70-85°C、900巧m磁力揽拌下，将大豆卵憐脂（PC-80,憐脂酷胆碱含量〉 80 %，注射级）200-400mg、吐溫80 100-300mg加水溶解，制成水相8-12ml，将水相W8-12ml · mirTi滴加速度滴入无醇混合物油相中，滴加完毕，继续揽拌4-6min，形成初乳，将初 乳W9000-11000巧m的剪切速度剪切2-4min，然后在功率为350-450W下探头超声2-4min，过 0.45WI1的微孔滤膜，得2-ME的固体脂质纳米粒混悬液；
[0009] (4)、将聚丙締酸树脂L10(KEudragit L100)600-900mg加入pH为4-6的PBS溶液 100-300ml中，揽拌均匀，用Imol/L的化0H调节pH为6-7，加入80-120ml质量浓度0.5-1.5 % 的径丙基甲基纤维素化PMC)溶液，用超纯水稀释至500ml，细纱布过滤，得微球材料溶液；
[0010] (5)按体积比15-25:1，将微球材料溶液与2-ME的固体脂质纳米粒混悬液揽拌混 匀，喷雾干燥，即得纳米粒微球。
[0011] 所述方法制备的提高难溶性口服药物生物利用度的纳米粒微球在制备抗癌药物 中的应用。
[0012] 本发明纳米粒微球，对于原来采用常规制剂口服无效的原料药特别适合，将运些 原料药制备成纳米粒微球，可W明显提高其口服利用度，使其口服有效。纳米粒微球主要适 合于水难溶性药物，纳米粒可W提高药物的水溶解度，可W直接口服给药，病人可W自行用 药，服药方便，病人依从性大大提高，微球的抑敏感性实现纳米粒的肠祀向释放，避免在胃 中的大量释放，提高了纳米粒肠转运的效率，而且微球可缓释纳米粒，实现纳米粒的缓释长 效，更重要的是纳米粒微球可W实现纳米粒的肠吸收，克服常规制剂中原料药的肠吸收过 程中存在的障碍，如肝首过效应，肠吸收饱和现象，肠外排现象等，提高药物的口服生物利 用度，改变原来用原料药制备的常规制剂口服无效的现状，提高口服有效率，有显著的经济 和社会效益。
【具体实施方式】
[0013] W下结合实施例对本发明的【具体实施方式】做详细说明。
[0014] 实施例1
[0015] 本发明在具体实施中，纳米粒微球的制备方法由W下步骤实现：
[0016] (1)、在80°C，将单硬脂酸甘油醋500mg，山斋酸甘油醋(AT0888) lOOmg混合烙融作 为油相；
[0017] (2)、将2-ME 20mg、聚乙二醇5000-聚已内醋 10000(阳G-PCL)100mg，溶于2.5ml无 水乙醇中，边揽拌边加热至80°C溶解均匀，加入油相中，揽拌至无水乙醇完全挥发，成无醇 混合物油相；
[001引（3)、在80°C、900巧m磁力揽拌下，将大豆卵憐脂(PC-80，憐脂酷胆碱含量>80 %，注 射级)400mg、吐溫80 200mg加水溶解，制成水相10ml，将水相WlOml · mirfi滴加速度滴入无 醇混合物油相中，滴加完毕，继续揽拌5min，形成初乳，将初乳W1000化pm的剪切速度剪切 3min，然后在功率为400W下探头超声3min，过0.45μπι的微孔滤膜，得2-ME的固体脂质纳米粒 混悬液；
[0019] (4)、将聚丙締酸树脂L100化lulragit L100)750mg加入抑为7的PBS溶液200ml中， 揽拌均匀，用Imol/L的化0H调节pH为6.5,加入100ml质量浓度1 %的径丙基甲基纤维素 化PMC)溶液，用超纯水稀释至500ml，细纱布过滤，得微球材料溶液；
[0020] (5)按体积比15:1，将微球材料溶液与2-ME的固体脂质纳米粒混悬液揽拌混匀，喷 雾干燥，即得纳米粒微球。
[0021] 实施例2
[0022] 本发明在具体实施中，纳米粒微球的制备方法也可由W下步骤实现：
[0023] (1)、在75°C，将单硬脂酸甘油醋400mg，山斋酸甘油醋(AT0888) 120mg混合烙融作 为油相；
[0024] (2)、将2-ME 50mg、聚乙二醇5000-聚已内醋 10000(PEG-P化）160mg，溶于2ml无水 乙醇中，边揽拌边加热至75°C溶解均匀，加入油相中，揽拌至无水乙醇完全挥发，成无醇混 合物油相；
[002引（3)、在75°C、900巧m磁力揽拌下，将大豆卵憐脂(PC-80,憐脂酷胆碱含量>80%，注 射级）250mg、吐溫80 140mg加水溶解，制成水相8ml，将水相WlOml · min-i滴加速度滴入无 醇混合物油相中，滴加完毕，继续揽拌4min，形成初乳，将初乳W9000rpm的剪切速度剪切 2min，然后在功率为350W下探头超声2min，过0.45μπι的微孔滤膜，得2-ME的固体脂质纳米粒 混悬液；
[0026] (4)、将聚丙締酸树脂L10(KEudragit L100)700mg加入pH为4的PBS溶液30ml中，揽 拌均匀，用Imol/L的化OH调节pH为6，加入50ml质量浓度1 %的径丙基甲基纤维素化PMC)溶 液，用超纯水稀释至500ml，细纱布过滤，得微球材料溶液；
[0027] (5)按体积比20:1，将微球材料溶液与2-ME的固体脂质纳米粒混悬液揽拌混匀，喷 雾干燥，即得纳米粒微球。
[002引 实施例3
[0029] 本发明在具体实施中，纳米粒微球的制备方法也可由W下步骤实现：
[0030] (1)、在85°C，将单硬脂酸甘油醋600mg，山斋酸甘油醋(AT0888)200mg混合烙融作 为油相；
[0031 ] (2)、将2-ME 30mg、聚乙二醇5000-聚已内醋 10000 (PEG-P化)200mg，溶于3ml无水 乙醇中，边揽拌边加热至85°C溶解均匀，加入油相中，揽拌至无水乙醇完全挥发，成无醇混 合物油相；
[0032] (3)、在85°C、900巧m磁力揽拌下，将大豆卵憐脂(PC-80,憐脂酷胆碱含量>80%，注 射级)400mg、吐溫80 300mg加水溶解，制成水相12ml，将水相Wl2ml · min-i滴加速度滴入无 醇混合物油相中，滴加完毕，继续揽拌6min，形成初乳，将初乳W1100化pm · mirfi的剪切速 度剪切4min，然后在功率为450W下探头超声4min，过0.45WI1的微孔滤膜，得2-ME的固体脂质 纳米粒混悬液；
[0033] (4)、将聚丙締酸树脂L100化udragit L100)900mg加入抑为5的PBS溶液300ml中， 揽拌均匀，用Imol/L的NaOH调节pH为7,加入200ml质量浓度1%的径丙基甲基纤维素化PMC) 溶液，用超纯水稀释至500ml，细纱布过滤，得微球材料溶液；
[0034] (5)按体积比15:1，将微球材料溶液与2-ME的固体脂质纳米粒混悬液揽拌混匀，喷 雾干燥，即得纳米粒微球。
[0035] 实施例4
[0036] 本发明在具体实施中，纳米粒微球的制备方法也可由W下步骤实现：
[0037] (1)、在70°C，将单硬脂酸甘油醋600mg，山斋酸甘油醋(AT0888) 150mg混合烙融作 为油相；
[003引（2)、将2-ME 25mg、聚乙二醇5000-聚已内醋 10000(阳G-PCL) 150mg，溶于2.5ml无 水乙醇中，边揽拌边加热至70°C溶解均匀，加入油相中，揽拌至无水乙醇完全挥发，成无醇 混合物油相；
[0039] (3)、在70°C、900巧m磁力揽拌下，将大豆卵憐脂(PC-80,憐脂酷胆碱含量>80%，注 射级)300mg、吐溫80 200mg加水溶解，制成水相11ml，将水相Wllml · mirfi滴加速度滴入无 醇混合物油相中，滴加完毕，继续揽拌6min，形成初乳，将初乳W1100化pm · mirfi的剪切速 度剪切2min，然后在功率为350W下探头超声4min，过0.45WI1的微孔滤膜，得2-ME的固体脂质 纳米粒混悬液；
[0040] (4)、将聚丙締酸树脂LlOO化udragit L100)700mg加入抑为5的PBS溶液150ml中， 揽拌均匀，用Imol/L的化0H调节pH为6.5,加入200ml质量浓度1 %的径丙基甲基纤维素 化PMC)溶液，用超纯水稀释至500ml，细纱布过滤，得微球材料溶液；
[0041 ] (5)按体积比25:1，将微球材料溶液与2-ME的固体脂质纳米粒混悬液揽拌混匀，喷 雾干燥，即得纳米粒微球。
[0042] 本发明方法制备的提高难溶性口服药物生物利用度的纳米粒微球可有效用于制 备抗肿瘤药物，实现提高难溶性口服药物生物利用度的纳米粒微球在制备抗肿瘤药物中的 应用。
[0043] 本发明所述方法经过反复多次试验，均得出相同或相近的结果，相关实验资料如 下：
[0044] 本发明的抗皮下肿瘤活性的试验数据具体如下：
[004引1.动物:Ba化/C小鼠，雌性，42±2日龄，体重19 ± 2g，由湖南斯莱克景达实验动物 有限公司提供。合格证编号:SCXK(湘)2011 -0003。每组动物数为10只，共60只。
[0046] 2.癌细胞培养:小鼠乳腺癌4T1细胞.取冻存的4T1细胞株，快速复苏后于37°C、5 % C02及饱和湿度条件下，培养24h后换液，继续培养，待细胞长满培养瓶底部70-80 %时，传代 1次，每2-3d传代一次，传至4-5代W后，开始大量培养。