于免疫球蛋白 纯化。与捕获树脂的结构相关的W098/08603的内容通过引用并入本文。W098/08603描述了 从细胞培养上清液、血清、血浆或初乳使用亲和性树脂分离免疫球蛋白。
[0151] 在一种实施方式中，捕获树脂的配体的结构如根据W02009/141384的公开内容叙 述的结构。W02009/141384的捕获树脂的通式为：
[0152]
[0153] 其中fo、R2和R3表示分子量为15-1000g/mol的有机部分，总重是200-2000g/mol，向 其配体经Ri、R 2和R3之一通过酰胺键固定至固相载体。W02009/141384与捕获树脂的结构相 关的内容通过引用并入本文。W02009/141384描述了配体结合蛋白质因子VII多肽。
[0154] 在一种实施方式中，捕获树脂的配体的结构如根据US20010045384的公开内容叙 述的结构。US20010045384的捕获树脂是在亚氨基二醋酸酯（IDA)型支架上组装的蛋白质A 模拟物配体-复合物。US20010045384与捕获树脂的结构相关的内容通过引用并入本文。IDA 支架用三唑基配体衍生化，以提供多价三唑基配体-复合物。下面显示US20010045384中限 定的示意性三唑基配体复合物：
[0155]
[0156] 该蛋白质A模拟物已经表明用作免疫球蛋白比如IgG的亲和性纯化媒介。推测配 体-复合物中临近三嗪配体的分子几何学是使用IDA支架的优势。
[0157] 下面显不US20010045384中限定的另一不意性复合物：
[0158]
[0159] 该分支多价酞酸-配体支架蛋白质A模拟物配体-复合物表明具有对免疫球蛋白的 亲和性。
[0160] 在一种实施方式中，捕获树脂的配体的结构如根据W09710887和US6117996公开内 容的结构。W09710887和US6117996与捕获树脂的结构相关的内容通过引用并入本文。 W09710887和US6117996公开了下述类型的三唑基-配体亲和性构建体：
[0161]
[0162] 其中，（A)表示三嗪支架与多糖固体载体的共价附着点，其任选地通过间插在配体 和固体载体之间的间隔臂，和RjPQ是具有对蛋白质材料的亲和性的任选取代的配体。有机 部分描述为蛋白质A模拟物并且提议和举例为对用于纯化蛋白质材料的蛋白质A的可选的 纯化媒介。
[0163] 在一种实施方式中，捕获树脂的配体的结构如根据W02004/035199公开内容叙述 的结构。W02004/035199与捕获树脂的结构相关的内容通过引用并入本文。W02004/035199 公开了由下述通式的分支配体支架组成的蛋白质L模拟物的用途，
[0164]
[0165] 其中R1和R2相同或不同并且每个是任选取代的烷基或芳基配体，和R3是任选地通 过间隔基序附着的固体载体。三唑基-配体支架已经公开为用于亲和性结合免疫球蛋白或 其片段抗体(fAb)的适当的蛋白质L模拟物配体。此外，公开了这些三唑基-配体支架具有对 免疫球蛋白k和A轻链的优先结合亲和性。
[0166] 在一种实施方式中，捕获树脂的配体的结构如根据US20110046353公开内容叙述 的结构。US20110046353与捕获树脂的结构相关的内容通过引用并入本文。US20110046353 公开了从生产培养基纯化片段抗体(fAb)。片段抗体不能在蛋白质A媒介上纯化。fAb表征为 具有能够结合抗原的结合结构域并且在公开的许多实施方式中具有一条重链(Vh)，或其功 能片段，和一条轻链(VI)，或其功能片段，以及至少一条其他链。限定的是对于fAb的亲和性 配体，其由下式的分支三唑基支架组成，
[0167]
[0168] 其中Q表示与固体载体基质的附着点，任选地具有间隔基序，和基团A和B是用一个 或多个能够氢键合--优选地一个或多个-〇H、-SH或-C0 2H--的取代基取代的苯基或萘 基基团。已经报道了使用商业上可获得自Prometic Biosciences商标名为MAbsorbent A1P 和MAbsorbent A2P的载体亲和性配体的卓越结果。
[0169] 在一种实施方式中，捕获树脂的配体具有下述结构：
[0170]
[0171] 在一种实施方式中，捕获树脂的配体具有下述结构：
[0172]
[0173] 在一种实施方式中，捕获树脂的配体具有下述结构：
[0174]
[0175] 在一种实施方式中，捕获树脂为珠的形式。在一种实施方式中，就珠直径而言，珠 的尺寸是约1 Own至约2000iim，优选地约50iim至约1 OOOtim，和最优选地约75um至约500iim。
[0176] 在一种实施方式中，捕获树脂包括由选自下述的材料制备的移动载体:聚苯乙烯、 聚苯乙烯(PS-DVB)-与二乙烯基苯稍微交联(0.1-5.0%DVB，称为微孔的）、聚苯乙烯(PS-DVB)-与二乙烯基苯高度交联(5-60%DVB，称为大孔的）、聚乙二醇、聚乙二醇接枝的聚苯乙 烯(PS-PEG共聚物）、聚丙烯酰胺、可控孔径的玻璃(CPG)珠、二氧化硅、硅藻土、聚丙烯、聚 (四氟乙烯）、聚乙烯、纤维素、聚甲基丙烯酸酯、官能化的整体材料、官能化的纤维、整体柱 (比如Nikzad等，(^0,2007，11，458-462)、琼脂糖、琼脂糖凝胶和磁性可恢复的聚合物珠。 [0177]在优选的实施方式中，捕获树脂是由选自下述的材料制造的移动载体:琼脂糖、琼 脂糖凝胶和纤维素。
[0178] 在一种实施方式中，捕获树脂是商业上可获得的捕获树脂，比如Fabsorbant? F1P HF树脂。在一种实施方式中，捕获树脂是商业上可获得的捕获树脂，比如Mabsorbant?树脂。
[0179] 生物分子:
[0180] 在一种实施方式中，生物分子天然存在于活的生物体中。可选地，生物分子可以是 天然存在于活的生物体中的化合物的衍生物。例如，生物分子可以是已经以不影响其生物 活性的方式被化学上或遗传上改变的生物分子。
[0181] 在一种实施方式中，生物分子是抗体。
[0182] 在一种实施方式中，生物分子是改性的抗体，例如包括非天然氨基酸的抗体。
[0183] 在一种实施方式中，生物分子是抗体片段。
[0184] 在一种实施方式中，抗体是单克隆抗体。
[0185] 在一种实施方式中，抗体是曲妥珠单抗。
[0186] 在一种实施方式中，抗体、改性的抗体或抗体片段是免疫球蛋白（Ig)，例如下述五 种人免疫球蛋白类型之一 ：186、以4、以11、以0和以￡。术语抗体包括单克隆抗体。术语抗体包 括多克隆抗体。术语抗体包括抗体片段，只要它们展示期望的生物活性。抗体可以是人抗 体、动物抗体、鼠抗体、包括人和动物序列的人源化抗体或嵌合抗体。
[0187] 抗体结构的基本单元是至少20,000道尔顿，例如约150,000道尔顿的异四聚体糖 蛋白复合物。抗体长度可能是至少900个氨基酸，例如长度是1400个氨基酸。抗体可包括通 过两个非共价结合和通过二硫键连接在一起的两条等同的轻(L)链和两条等同的重(H)链。 每条重链和轻链也有规律地间隔开的链内二硫桥键。每条重链是约50,000道尔顿。每条重 链长度是至少300个氨基酸，例如约450个氨基酸的长度。抗体可以是仅仅重链抗体。每条轻 链是约20,000道尔顿。每条轻链长度是至少100个氨基酸，例如约250个氨基酸的长度。
[0188] 抗体生物分子可包含两个等同的多肽链对，每对具有一条轻链和一条重链。每条 轻链和重链接着由下述两个区域组成:参与结合靶抗原的可变("V")区，和与免疫系统的其 他组分相互作用的恒定（〃C〃）区。轻链和重链可变区在3维空间中聚集在一起，以形成结合 抗原(例如，细胞表面上的受体)的可变区。
[0189]在一种实施方式中，生物分子是抗体片段。抗体片段包括全长抗体的一部分，一般 其抗原结合区或其可变区。
[0190]抗体片段的例子包括Fab、pFc'、F(ab'）2和scFv片段、双抗体、线性抗体、单链抗体 生物分子和来自抗体片段的多特异性抗体。抗体片段长度可以是至少10个氨基酸，例如抗 体片段的长度可以是至少 20、40、60、80、100、120、140、160、180、200、220、240、260、280或 300个氨基酸。
[0191] 在一种实施方式中，生物分子是是改性的抗体或改性的抗体片段。"改性的抗体" 或"改性的抗体片段"意思是由于至少一个氨基酸修饰而与亲代抗体(parent antibody)不 同的抗体。改性的抗体或改性的抗体片段指与野生型抗体相比其尺寸不同，或其糖基化不 同但是与野生型抗体具有对其配体类似亲和性的抗体。
[0192] 药物:
[0193] 术语"药物"包括当施用至活的生物体体内时改变正常的身体功能的任何物质。大 体上，药物是用于治疗、治愈、预防或诊断疾病或用于以其他方式增强身体或精神状况的物 质。在一种实施方式中，药物是细胞毒素药物。
[0194] 迄今，主要的'超效力'（药物)候选物定义在两个目录之一中：（i)微管蛋白抑制 剂;和（ii)DNA相互作用试剂。微管蛋白抑制剂调节微管蛋白聚合。DNA相互作用试剂靶向细 胞DNA
[0195] 在一种实施方式中，药物是微管蛋白抑制剂。
[0196] 在一种实施方式中，微管蛋白抑制剂选自：（a)阿里他汀;和(b)美登素衍生物。
[0197] 在一种实施方式中，药物是阿里他汀。
[0198] 阿里他汀包括天然存在的化合物多拉司他汀-10的合成衍生物。阿里他汀是抗肿 瘤/细胞抑制伪肽家族。多拉司他汀结构上是独特的，原因是并入了 4种天然生物合成的产 物中鉴定的不常见氨基酸(多拉缴氨酸(0〇]^￥3；[116)、多拉异亮氨酸(00131801611；[116)、多拉 脯氨酸(Dolaproine)和多拉苯丙氨酸(Dolaphenine))上。另外，该类型的天然产物具有许 多通过Pettit等的总合成研究限定的不对称中心(1^4,978,744)。从结构活性关系显而易 见，多拉异亮氨酸和多拉脯氨酸残基对于抗肿瘤活性似乎是必要的（US5，635，483和US5， 780,588)。
[0199] 在一种实施方式中，阿里他汀选自：阿里他汀E(AE)、单甲基阿里他汀E(MMAE)、阿 里他汀F(MMAF)、vcMMAE和vcMMAF。
[0200] 在一种实施方式中，药物是美登素或美登素的结构类似物。
[0201 ]在一种实施方式中，药物是美登素。
[0202]美登素包括结构上复杂的抗有丝分裂聚酮化合物(polyketide)。美登素是微管组 装的有力抑制剂，其导致肿瘤细胞的细胞凋亡。
[0203]在一种实施方式中，美登素选自：Mertansine(DMl);和美登素的结构类似物，比如 DM3或DM4。优选地，药物是mertans ine (DM1)。
[0204]在一种实施方式中，药物是DNA相互作用试剂。DNA相互作用试剂称为'超有力'（药 物)候选物。
[0205]在一种实施方式中，DNA相互作用试剂选自：（a)刺孢霉素、（b)多米卡新和(c)吡咯 并苯二氮杂(PBD)。
[0206]在一种实施方式中，药物是刺孢霉素。
[0207]刺孢霉素是有力的细胞毒素试剂，其使得双链DNA断裂，造成细胞死亡。刺孢霉素 是天然存在的烯二炔抗生素(A.L.Smith等，J.Med.Chem.，1996，39,11,2103-2117)。刺孢霉 素见于土壤微生物刺抱小单抱菌(Micromonosporaechinospora)。
[0208] 在一种实施方式中，刺孢霉素是刺孢霉素y 1。
[0209] 在一种实施方式中，药物是多米卡新。
[0210] 多米卡新是有力的抗肿瘤抗生素，其通过DNA双链的小沟中的选择性结合序列和 烷基化腺嘌呤的似发挥它们的生物作用（0上(^61?11代&4 ??1.(：116111.，1994,66,4,837-844) 〇
[0211]在一种实施方式中，多米卡新选自：多米卡新A、多米卡新B1、多米卡新B2、多米卡 新C 1、多米卡新C 2、多米卡新D、多米卡新S A、环丙基苯并吲哚（C B I )多米卡新、 Centanamycin、拉奇霉素(Rachelmycin) (CC-1065)、阿多来新、比折来新和卡折来新。
[0212] 在一种实施方式中，药物是吡咯并苯二氮杂。
[0213] 吡咯并苯二氮杂(PBD)是一类天然存在的抗肿瘤抗生素。吡咯并苯二氮杂见于链 霉菌(StreptomyceshPBD通过特异性共价结合在嘌呤-鸟嘌呤-嘌呤单元的小沟中的DNA发 挥它们的抗肿瘤活性。它们经缩醛胺连接插入在鸟嘌呤的N2和，由于它们的形状，它们对 DNA螺旋造成最小的破坏。相信DNA-PBD加合物的形成抑制了核酸合成并且造成DNA螺旋中 切除-依赖性单链和双链断裂。作为合成衍生物，两个PBD单元经柔性聚亚甲基系链 (polymethylene tether)连接在一起使得PBD二聚体交联相对侧的DNA链，产生非常致死的 损害。
[0214]在一种实施方式中，药物是经柔性聚亚甲基系链连接在一起的两个吡咯并苯二氮 杂单元的合成衍生物。
[0215]在一种实施方式中，R比略并苯二氮杂选自：氨茴霉素（Anthramycin)(和其二聚 体）；甲基氨茴霉素(Mazethramycin)(和其二聚体）；妥布霉素（和其二聚体）；普拉卡素 (Prothracarcin)(和其二聚体）；奇卡霉素(Chicamycin)(和其二聚体）；新茴霉素A(和其二 聚体）；新茴霉素B(和其二聚体）；DC-81(和其二聚体）；西伯利亚霉素（Sibiromycin)(和其 二聚体）；泊罗霉素(Porothramycin)A(和其二聚体）；泊罗霉素B(和其二聚体）；西巴霉素 (Sibanomycin)(和其二聚体）；赤霉素(Abbeymycin)(和其二聚体）；SG2000 和 SG2285。
[0216] 在一种实施方式中，药物是通过烷基化靶向DNA链间交联的药物。通过烷基化靶向 DNA链间交联的药物选自：DNA革巴向芥子(DNA targeted mustard)、鸟噪呤特异性烷基化试 剂;和腺嘌呤特异性烷基化试剂。
[0217] 在一种实施方式中，药物是DNA靶向芥子。