一种氯硝西泮的药物组合物及其医药用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物医药领域，设及氯硝西泮的新用途，具体设及氯硝西泮的药物组 合物及其在抗炎止咳中的应用。
【背景技术】
[0002] 氯硝西泮作用类似地西泮及硝西泮。但抗惊厥作用比前二者强5倍，且作用迅速。 与其他BDZ类药物的中枢抑制作用类似，由于加速神经细胞的氯离子内流，使细胞超极化， 使神经细胞兴奋性降低。同时它还对谷氨酸脱簇酶有一定作用，因而具有广谱抗癒痛作用。 本品尚具有抗焦虑、催眠及中枢性肌肉松弛作用。
[0003] 迄今为止，尚未见氯硝西泮及其药物组合物与抗炎止咳的相关性报道。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供一种氯硝西泮的药物组合物，该药物组合物中含有氯硝西 泮和一种天然产物，氯硝西泮和该天然产物可W协同抗炎止咳。
[0005] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得W实现的：
[0006] -种具有下述结构式的化合物(I)，
U
[0008] -种氯硝西泮的药物组合物，包括氯硝西泮、如权利要求1所述的化合物（I)和药 学上可W接受的载体，制备成需要的剂型。
[0009] 进一步地，药学上可W接受的载体包括稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、 崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体或润滑剂。
[0010] 进一步地，所述剂型包括片剂、胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、 膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、栓剂、喷雾剂、滴剂或贴剂。
[0011] 上述化合物（I)的制备方法，包含W下操作步骤：（a)将积雪草粉碎，用70~80%乙 醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油酸、乙酸乙醋和水饱和的正下醇萃 取，分别得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物；（b)步骤(a)中正下醇萃取物 用大孔树脂除杂，先用15%乙醇洗脱6个柱体积，再用70%乙醇洗脱10个柱体积，收集70% 洗脱液，减压浓缩得70%乙醇洗脱浓缩物；（C)步骤(b)中70%乙醇洗脱浓缩物用正相硅胶 分离，依次用体积比为80:1、30:1、15:1和5:1的二氯甲烧-甲醇梯度洗脱得到4个组分；（d) 步骤(C)中组分3用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为25:1、15:1和2:1的二氯甲烧-甲 醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体 积百分浓度为72 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~14个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得 到纯的化合物(I)。
[0012] 进一步地，化合物（I)的制备方法中，步骤(a)用75%乙醇热回流提取，合并提取 液。
[0013] 进一步地，化合物(I)的制备方法中，所述大孔树脂为DlOl型大孔吸附树脂。
[0014] 进一步地，化合物（I)的制备方法中，步骤(a)中用二氯甲烧代替乙酸乙醋进行萃 取，得到二氯甲烧萃取物。
[0015] 上述化合物(I)在制备抗炎止咳的药物中的应用。
[0016] 上述氯硝西泮的药物组合物在制备抗炎止咳的药物中的应用。
[0017]本发明的优点：
[0018] 本发明提供的氯硝西泮的药物组合物中含有氯硝西泮和一种结构新颖的天然产 物，氯硝西泮和该天然产物单独作用时，具有抗炎止咳作用；二者联合作用时，抗炎止咳效 果更好，可W开发成抗炎止咳的药物。本发明与现有技术相比具有突出的实质性特点和显 著的进步。
【具体实施方式】
[0019] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不W此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可W对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0020] 实施例1:化合物(I)分离制备及结构确证
[0021] 试剂来源：乙醇、石油酸、乙酸乙醋、正下醇、二氯甲烧为分析纯，购自上海凌峰化 学试剂有限公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。
[0022] 分离方法：（a)将积雪草(化g)粉碎，用75%乙醇热回流提取(2化X3次），合并提取 液，浓缩至无醇味（化），依次用石油酸(化X3次）、乙酸乙醋（化X3次）和水饱和的正下醇 (化X3次）萃取，分别得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物；（b)步骤(a)中 正下醇萃取物用DlOl型大孔树脂除杂，先用15%乙醇洗脱6个柱体积，再用70%乙醇洗脱10 个柱体积，收集70%洗脱液，减压浓缩得70%乙醇洗脱浓缩物；（C)步骤(b)中70%乙醇洗脱 浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1 (8个柱体积）、30:1 (8个柱体积）、15:1 (8个柱 体积)和5:1(10个柱体积）的二氯甲烧-甲醇梯度洗脱得到4个组分；（d)步骤(C)中组分3用 正相硅胶进一步分离，依次用体积比为25:1 (8个柱体积）、15:1 (10个柱体积)和2:1 (5个柱 体积)的二氯甲烧-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的 反相硅胶分离，用体积百分浓度为72%的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~14个柱体积洗脱 液，洗脱液减压浓缩得到化合物(IKHPLC归一化纯度大于98% )。
[0023] 结构确证:皿-ESI-MS显示[M+化r为m/z 397.1988,结合核磁特征可得分子式为 C22H3QO5，不饱和度为8。核磁共振氨谱数据SH(ppm，CDCl3,500MHz ):H-la( 1.27，m) ,H-Ib (1.43，m)，H-2a(1.82，m)，H-2b(1.99，m)，H-3(4.88，s)，H-6a(2.56，d，J=12.2Hz)，H-6b (2.71，d，J=12.2Hz)，H-9(2.26，m，2H)，H-12(1.83，s)，H-13(2.03，s)，H-14(0.95，s)，H-15 (1.12, s)，H-4'（ 1.26, s)，H-5'（ 1.32, s)，3'-Ac0( 1.95, s);核磁共振碳谱数据Sc(ppm， CDCl3，125MHz):32.4(Ol2，l-C)，27.6(CH2,2-C)，77.3(CH，3-C)，137.8(C，4-C)，137.3(C，5- C)，22.3(CH2,6-C)，130.2(C，7-C)，201.1(C，8-C)，58.5(CH2,9-C)，36.7(C，10-C)，136.3(C， ll-C)，22.3(Ol3，12-C)，23.1(ai3，13-C)，18.4(CH3，14-C)，15.3(ai3，15-C)，167.3(C，r-C)，104.6(C，2，-C)，155.8(C，3，-C)，16.8(C 出，4，-C)，10.7(CH3,5，-C)，169.6(C，3，-Ac0)， 21.3(C出，3'-AcO)。红外波谱中的1715cnfi与1680cm-i吸收带表明结构中存在幾基与双键片 段。Uc-NMR、DEPT和HSQ村普中显示有22个碳信号，包括屯个甲基，四个亚甲基，一个连氧次甲 基，W及十个季碳(=个幾基碳和六个締控碳）。W上功能结构再结合不饱和数表明该化合 物为双环结构。Ih-MIR谱结合HSQC谱显示六个甲基质子信号Sh 1.83(3H，s)、2.03(3H，s)、 0.95(3H，s)、H-15(1.12，s)、1.26(3H，s)、1.32(3H，s)，一个乙酷基甲基质子信号Sh 1.95 (3H，s)，一个连氧次甲基质子信号?4.88aH，s);W上NMR数据可W确认该化合物为阔巷 菊酬衍生物。HMBC谱中曲-12与C-Il，曲-13与C-Il，曲-14与C-10,曲-15与C-4的相关信号可 W归属为阔巷菊酬上的甲基片段，C-3位质子信号移向低场说明C-3^基被醋化，而通过 HMBC谱中H-3与C-r的相关信号得到进一步确认。通过HMBC谱中出-4'与C-3 '，曲-5 '与C-2 ' 和C-1'，W及乙酷甲基质子信号与C-3'的相关信号可W确认结构中存在3'-乙酷基-2'-甲 基-2'-下締酷基氧基边链结构，而质子信号Sh 1.26(3H，s)W及1.32(3H，s)可W归属为H-4'的甲基信号与H-5 '的甲基信号。NOESY谱中He-I/曲-14，也-1/H-3的相关信号表明H-3和 曲-14为0构型。此外，该化合物的相对构型进一步通过X-单晶衍射确认，C-3位的绝对构型 通过酸解反应与Mosher法可W确认为R构型。综合氨谱、碳谱、HMB幻普和NOESY谱，W及文献 关于相关类型核磁数据，可基本确定该化合物如下所示，立体构型进一步通过ECD试验确 定，理论值与实验值基本一致。该化合物化学式及碳原子编号如下：
[00巧]实施例2:药理作用
[0026] 1、材料与方法
[0027] 1.1药物和试剂
[002引氯硝西泮购自中国药品生物制品检定所。化合物（I)自制，制备方法见实施例1。冰 醋酸，广西南宁化学试剂厂生产;二甲苯，中国医药集团上海化学试剂公司生产;伊文思兰， 上海化学试