和 ITT;
[0087] (J)肝脏胰岛素信号通路。
[0088] 以上细胞实验至少重复三次，动物实验至少重复两次，结果以平均值土SEM的形 式呈现，统计显著性通过双尾student t-test计算，* :p〈0. 05在A和B中表示Ad-PSATl 组或者Ad-shPSATl组和对照组比较，在C图中表示db/db小鼠和HFD小鼠与对照组的比 较，或者利用单向ANOVA结合SNK test计算，* :p〈0. 05在D-J表示任意组和没有注射 Ad-shPSAT 及 Ad-shTRB3 组比较，# :ρ〈0· 05 表示 Ad-shPSATl 组中注射 Ad-shTRB3 和没有注 射Ad-shTRB3组比较。
[0089] 图8、在!fepG2细胞中PSATl通过丝氨酸调节TRB3表达
[0090] ⑷雄性C57BL/6J野生型小鼠尾静脉注射Ad-PSATl (+Ad-PSATl)或者 Ad-GFP (-Ad-PSATl) 7天，检测血清及肝脏丝氨酸水平；
[0091] ⑶雄性C57BL/6J野生型小鼠尾静脉注射Ad-shPSATl (+Ad-shPSATl)或者 Ad-scrambled (-Ad-shPSATl) 13天，检测血清及肝脏丝氨酸水平；
[0092] (C) !fepG2 细胞感染Ad-PSATl (+Ad-PSATl)或者 Ad-GFP (-Ad-PSATl) 24h 后，换包含 或者不含丝氨酸的培基继续处理24h，检测TRB3表达（左，免疫印迹图；右，TRB3表达统计 图）；
[0093] (D) HepG2 细胞感染 Ad-shPSATl( + Ad_shPSATl)或者 Ad-scrambled (-Ad-shPSATl)48h，换包含正常含量或者含2倍丝氨酸的培基继续处理24h， 检测TRB3表达（左，免疫印迹图；右，TRB3表达统计图）；
[0094] (E) HepG2 细胞感染 Ad-shPSATl( + Ad_shPSATl)或者 Ad-scrambled (-Ad-shPSATl)48h，换包含正常含量或者含2倍丝氨酸的培基继续处理24h， IOOnM胰岛素刺激20min之后，检测胰岛素信号通路变化（左，免疫印迹图；右，p-IR， P-AKT，p-GSK3 β 和 PSATl 统计图）；
[0095] (F) db/db小鼠及HFD喂养16周小鼠肝脏中丝氨酸水平；
[0096] (G)模式图。
[0097] 以上细胞实验至少重复三次，动物实验至少重复两次，结果以平均值土SEM的形 式呈现，统计显著性通过双尾student t-test计算，* :p〈0. 05在A和B中表示Ad-PSATl组 或者Ad-shPSATl组和对照组比较，在F图中表示db/db小鼠和HFD小鼠与对照组的比较， 或者利用单向ANOVA结合SNK test计算，* :p〈0. 05在C-E图中表示任意组与正常培基没 有Ad-PSAT或者Ad-shPSATl组比较，# :p〈0. 05在C图中表示在Ad-PSAT处理条件下丝氨 酸缺乏组与正常组比较，在D和E图中表示在Ad-shPSAT处理条件下丝氨酸添加组和正常 组比较。
[0098] 图9、db/db小鼠饮食中添加丝氨酸可以提高其胰岛素敏感性。
[0099] 8周（w)大db/db小鼠给予对照粮食或者3倍丝氨酸粮食喂养，8天时检测空腹血 糖并且做GTT，12天时检测饱腹血糖，10天时做ITT。㈧体重；(B)摄食；（C)血糖；(D)葡 萄糖耐受实验；(E)胰岛素耐受实验。结果以平均值土SEM的形式呈现，统计显著性通过双 尾student t-test计算，* :p〈0. 05表示3倍丝氨酸饮食与对照组比较。
[0100] 图10、PSATl对胰岛素激活的磷酸化胰岛素受体底物（IRSl)及3-磷酸肌醇依赖 性蛋白激酶I(I 3DKl)。
[0101] ㈧细胞感染过表达PSATl腺病毒（+Ad-PSATl)或者对照GFP (绿色荧光蛋 白）腺病毒（-Ad-PSATl)，48h后，胰岛素刺激或者不刺激20min，检测p-IRSl (tyrosine 612/608-human/mouse)，p_PDKl(ser241)水平（上，免疫印迹图；下，p-IRSl，p-PDKl 统计 图）；
[0102] (B)细胞感染敲减PSATl腺病毒（+Ad-shPSATl)和对照scramble腺病 毒（-Ad-shPSATl)，72h后，胰岛素刺激或者不刺激20min，检测p-IRSl (tyrosine 612/608_human/mouse)，p-PDKl(ser241)水平（上，免疫印迹图；下，p-IRS l，p_PDKl 统计 图）；
[0103] (C)雄性C57BL/6J野生型小鼠尾静脉注射Ad-PSATl (+Ad-PSATl)或 者 Ad-GFP(-Ad_PSATl)7 天，检测肝脏p-IRSl(tyrosine 612/608-human/mouse)， p-PDKl (ser241)水平（上，免疫印迹图；下，p-IRSl，p-PDKl统计图）；
[0104] (D)雄性C57BL/6J野生型小鼠尾静脉注射Ad-shPSATl (+Ad-shPSATl)或者 Ad-scrambled(-Ad-shPSATl) 13 天，检测肝脏 p-IRSl (tyrosine 612/608-human/mouse)， p-PDKl (ser241)水平（上，免疫印迹图；下，p-IRS 1，p-PDKl统计图）。
[0105] 以上细胞实验至少重复三次，动物实验至少重复两次，结果以平均值土SEM的 形式呈现，统计显著性通过双尾student t-test计算，* :p〈0. 05表示胰岛素刺激之后 Ad-PSATl组或者Ad-shPSATl组和对照组比较。
[0106] 图11、小鼠尾静脉注射Ad-PSATl或者Ad-shPSATl之后，摄食和体重均没有显著变 化。
[0107] (A)雄性C57BL/6J野生型小鼠尾静脉注射Ad-PSATl (+Ad-PSATl)或者 Ad-GFP (-Ad-PSATl) 7天，小鼠体重变化；
[0108] ⑶雄性C57BL/6J野生型小鼠尾静脉注射Ad-PSATl (+Ad-PSATl)或者 Ad-GFP (-Ad-PSATl) 7天，小鼠摄食变化；
[0109] (C)雄性C57BL/6J野生型小鼠尾静脉注射Ad-shPSATl (+Ad-shPSATl)或者 Ad-scrambled(-Ad-shPSATl) 13 天，小鼠体重变化；
[0110] (D)雄性C57BL/6J野生型小鼠尾静脉注射Ad-shPSATl (+Ad-shPSATl)或者 Ad-scrambled(-Ad-shPSATl) 13 天，小鼠摄食变化；
[0111] 以上实验至少重复两次，结果以平均值土SEM的形式呈现，统计显著性通过双尾 student t-test计算，* :ρ〈0· 05表示Ad-PSATl组或者Ad-shPSATl组和对照组比较。
[0112] 图12、PSATl对脂肪组织和肌肉组织的信号通路没有影响。
[0113] (A)雄性C57BL/6J野生型小鼠尾静脉注射Ad-PSATl (+Ad-PSATl)或者 Ad-GFP(-Ad-PSAT1)7天，检测白脂和肌肉中PSATl蛋白表达（上，免疫印迹图；下，PSATl表 达统计图）；
[0114] ⑶雄性C57BL/6J野生型小鼠尾静脉注射Ad-PSATl (+Ad-PSATl)或者 Ad-GFP (-Ad-PSATl) 7天，检测白脂和肌肉中信号通路表达（上，免疫印迹图；下，下，p-IR， P-AKT 和 P-GSK3 0 统计图）；
[0115] (C)雄性C57BL/6J野生型小鼠尾静脉注射Ad-shPSATl (+Ad-shPSATl)或者 Ad-scrambled(-Ad-shPSATl) 13天，检测白脂和肌肉中PSATl蛋白表达（上，免疫印迹图； 下，PSATl表达统计图）；
[0116] (D)雄性C57BL/6J野生型小鼠尾静脉注射Ad-shPSATl (+Ad-shPSATl)或者 Ad-scrambled (-Ad-shPSATl) 13天，检测白脂和肌肉中信号通路表达（上，免疫印迹图；下， 下，p-IR，P-AKT 和 p-GSK3 β 统计图）。
[0117] 以上实验至少重复两次，结果以平均值土SEM的形式呈现，统计显著性通过双尾 student t-test计算，* :ρ〈0· 05表示胰岛素刺激之后Ad-PSATl组或者Ad-shPSATl组和对 照组比较。
[0118] 图13、胰岛素抵抗小鼠和肌肉中PSATl及TRB3蛋白表达没有差异。
[0119] (A) db/db小鼠白脂和肌肉中PSATl及TRB3表达（上，免疫印迹图；下，PSATl及 TRB3表达统计图）；
[0120] ⑶高脂喂养（+HFD) 16周小鼠肝脏中PSATl表达（上，免疫印迹图；下，PSATl及 TRB3表达统计图）。
[0121] 以上实验至少重复2次，结果以平均值土SEM的形式呈现统计显著性通过双尾 student t-test计算db/db小鼠和HFD小鼠与对照组的差异（* :ρ〈0· 05)。
[0122] 图14、胰岛素抵抗小鼠和肌肉中PSATl及TRB3蛋白表达没有差异。
[0123] (A) !fepG2细胞转染3-磷酸甘油酸脱氢酶（Ρ⑶Η)干扰片段（+P⑶H RNAi)或者对 照片段，48h后，检测P⑶H mRNA水平；
[0124] (B) !fepG2细胞转染3-磷酸甘油酸脱氢酶（P⑶H)干扰片段（+P⑶H RNAi)或者对 照片段，48h后，胰岛素刺激或者不刺激20min，检测胰岛素信号通路变化（上，免疫印迹图； 下，p-IR，P-AKT 和 p-GSK3 β 统计图）；
[0125] (C) !fepG2细胞转染磷酸丝氨酸磷酸酶（PSPH)干扰片段（+PSPH RNAi)或者对照片 段，48h后，检测PSPH mRNA水平；
[0126] (D)!fepG2细胞转染丝氨酸磷酸酶（PSPH)干扰片段（+PSPH RNAi)或者对照片 段，48h后，胰岛素刺激或者不刺激20min，检测胰岛素信号通路变化（上，免疫印迹图；下， p-IR，ρ-ΑΚΤ 和 p-GSK3 β 统计图）；
[0127] 以上实验至少重复三次，结果以平均值土SEM的形式呈现，统计显著性通过双尾 student t-test计算，* :ρ〈0· 05表示胰岛素刺激之后+P⑶H RNAi或者+PSPH RNAi和对照 组的比较。
[0128] 图15、PSATl对糖代谢基因的作用。
[0129] (A)雄性C57BL/6J野生型小鼠尾静脉注射Ad-PSATl (+Ad-PSATl)或者 Ad-GFP (-Ad-PSATl) 7天，检测糖代谢相关基因表达；
[0130] ⑶雄性C57BL/6J野生型小鼠尾静脉注射Ad-shPSATl (+Ad-shPSATl)或者 Ad-scrambled (-Ad-shPSATl) 13天，检测糖代谢相关基因表达。
[0131] 以上实验至少重复两次，结果以平均值土SEM的形式呈现，统计显著性通过双尾 student t-test计算，* :ρ〈0· 05表示胰岛素刺激之后Ad-PSATl组或者Ad-shPSATl组和对 照组比较。
[0132] 图16、PSATl对脂代谢基因的作用。
[0133] (A)雄性C57BL/6J野生型小鼠尾静脉注射Ad-PSATl (+Ad-PSATl)或者 Ad-GFP (-Ad-PSATl) 7天，检测脂代谢相关基因表达；
[0134] ⑶雄性C57BL/6J野生型小鼠尾静脉注射Ad-shPSATl (+Ad-shPSATl)或者 Ad-scrambled(-Ad-shPSATl) 13天，检测脂代谢相关基因表达。
[0135] 以上实验至少重复两次，结果以平均值土SEM的形式呈现，统计显著性通过双尾 student t-test计算，* :ρ〈0· 05表示胰岛素刺激之后Ad-PSATl组或者Ad-shPSATl组和对 照组比较。相关引物序列见tableS2。
[0136] 图17、TNFa处理H印G2细胞之后，PSATl表达下降。
[0137] 40ng/ml TNFa处理H印G2细胞24h，检测PSATl蛋白表达（上，免疫印迹图；下， PSATl表达统计图）。
[0138] 以上实验至少重复三次，结果以平均值土SEM的形式呈现，统计显著性通过双尾 student t-test计算，* :p〈0. 05TNFa处理组和对照组的比较。
【具体实施方式】
[0139] 本发明人经过广泛而深入的研究，首次论证了磷酸化丝氨酸氨基转移酶I (PSATl) 能够提高胰岛素敏感性，下调PSATl会明显加重胰岛素抵抗的症状并且丝氨酸参与其中。 因此，PSAT1、其上调剂或者终产物丝氨酸能够用于防治糖尿病；并且，可基于PSATl的上述 功能，筛选对于提尚膜岛素敏感性有用的物质。
[0140] PSATl及其用途
[0141] 本发明人在研究中发现，过表达PSAT1无论在细胞水平还是在动物水平都可以提 高胰岛素敏感性，反之，降低PSATl表达可以导致胰岛素抵抗。另外在胰岛素抵抗模型瘦素 受体缺乏（leptin receptor-deficient，db/db)小鼠以及高脂诱导的胰岛