专利名称：：一类具有抗炎活性的熊果酸噁唑啉类新药及其制备方法一类具有抗炎活性的熊果酸噁唑啉类新药及其制备方法
背景技术：
：本发明是涉及天然产物及它的结构改造，特别是涉及到具有抗炎的熊果酸衍生物的合成。熊果酸即3"-羟基-熊果-12-烯-28-酸(3"-1^(11"(丫-1^-12-en-28-oicacid,1)属于a-香树脂醇(a-amyrin)型五环三萜类化合物，它是自然界中分布较广的天然活性化合物，具有多种生物活性,如保肝、抗炎、抗肿瘤、抗艾滋病毒等多种作用,而且副作用小,毒性低,显示出较大的临床应用潜力.熊果酸的结构式研究表明，熊果酸对角叉菜胶和右旋糖酐诱导的鼠爪水肿和棉球诱导的慢性肉芽肿有显著的抗炎活性。目前，将熊果酸做为制剂的报道较多，且以申请专利。在公开号为CN1410064中，报道了熊果酸豆磷脂纳米粒冻干粉针剂及制备方法；公开号为CN1410065中提供一种熊果酸氰基丙烯酸酯纳米粒冻干粉针剂及制备方法；公开号为CN1410066中公开了熊果酸聚乳酸纳米粒冻干粉针剂及制备方法；公开号为CN1771968中公开了一种熊果酸脂肪儒注射剂及其制备方法；公开号为CN1857273中公开了一种熊果酸脂微球制剂及其制备方法。有关熊果酸的药理研究也有很多，如熊斌等的"熊果酸药理学的研究进展"(《国外医学药学分册》,2004,31[3]);夏国豪等的"熊果酸抗肿瘤作用研究进展"(《国外医学肿瘤学分册》，2002,29[6]);王婷等的"熊果酸药理作用研究进展"(《中华医学研究杂志》)；等等。
发明内容本发明的目的之一是以熊果酸为先导化合物，对其结构修饰从而合成新衍生物。本发明的目的之二是合成一系列新的具有更好药理活性的抗炎类药物。本发明的目的之三是提供以这些化合物作为有效的药用活性成分而用于抗炎类药物，使医生和/或病员在对疾病的防治时能增加对可供使用药物的选择。本发明以熊果酸为先导化合物，对其结构改造得到的化合物，其结构式如式(I)所示aX)N—N.COfH3(I)其中，式中的R，R'可以是氢，苯基，取代苯基、甲基等如上所述的熊果酸衍生物I由以下步骤制备5s5g本发明用熊果酸与氯乙酸乙酯在丙酮中反应制得熊果酸乙氧甲酰基甲酯2，2与水合肼在无水乙醇中回流制得3，3在冰乙酸做催化剂下与羰基化合物縮合得到4，4在醋酸酐环合下得到I。如上所述的熊果酸衍生物具有保肝和抗炎活性，可用于治疗肝炎和炎症疾病。如上所述，本发明具有合成路线短，成本低，易于实现工业化生产等优点。动物实验的结果表明，本发明上述的化合物(I)可以具有加强熊果酸的抗炎活性作用，增强药效。按照《新药临床前研究指导原则》要求，采用了二甲苯至小鼠右耳致炎，左耳作对照的办法，本发明对上述化合物(I)和1所示母体化合物熊果酸进行了对比实验。二甲苯致小鼠右耳致炎实验将化合物5a5g和UA(熊果酸)用0.5。/。CMC(羧甲基纤维素钠)液配制成0.2°/。浓度混悬液，以0.5XCMC液和0.75%阿司匹林溶液作为对照组，取昆明种小鼠66只,按体重随机分为11组，每组6只,雌雄各半.各组小鼠,每日给药一次，连续给药六天,于末次给药后30min,用二甲苯0.05ml/鼠涂抹每鼠右耳致炎，左耳作对照，致炎后30分钟脱颈椎处死小鼠,以7mm直径打孔器取下耳缘左、右耳片,分别用电子天平称重,以右、左耳片重量差表示肿胀度,进行组间显著差比较.实验结果见表1.表l目标化合物的抗炎活性Table1Anti-inflammatoryactivitiesfortargetcompounds<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>上述对比实验结果显示，本发明的熊果酸类化合物与其母体化合物l比较，在抗炎方面有更好的效果。按照上述内容，在不脱离本发明上述基本技术思想的前提下，根据本领域的普通技术知识和惯用手段，对其内容还可以有多种形式的修改、替换或变更。一下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的实施内容再进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于一下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。具体实施例方式本发明是通过下列步骤完成的1.熊果酸1与氯乙酸乙酯得到化合物22.化合物2与水合肼在无水乙醇中回流得到化合物33.化合物3与羰基化合物进一歩縮合得到化合物4<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>其中R、R，为H、CH:,、Ph以及取代苯基等4.化合物4与乙酸酐环合得到化合物I<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>下面举例说明实施例1化合物(2)的制备将4.560g(10mmo1)1溶于250ml丙酮中,加热回流使其充分溶解，待溶液澄清后停止加热,加入2.073g(l5mmol)K2C03,室温搅拌溶液成乳白色后,将0.0498g(0.3mmol)KI禾n4mlEt3N加入到该溶液中，缓慢滴加4mlClCH2COOC2H5(28.2mmol),室温反应,TLC监测反应.反应结束后，过滤,少量丙酮冲洗，减压浓縮后加入饱和食盐水,乙酸乙酯萃取3次,合并乙酸乙酯层,有机层水洗至中性后用无水Na2S04干燥，过滤、浓缩，所得产物用无水乙醇重结晶得无色颗粒状晶体2,产率95%，m.p.l74175。C。实施例2化合物(3)的制备将2.710g(5mmo1)2和2mL80。/。水合肼在20ml无水乙醇中加热回流反应,TLC监测反应.反应结束后,冷却至室温,有白色固体析出,抽滤烘干,粗产物用无水乙醇重结晶,得白色针状晶体3,产率93%.m.p.256~257°C;'丽MR(400MHz,CDC13)S:0.69(s,3H,CH3),0.78(s,3H,CH3)，0.87(d,J=6.4HZ,3H,CH3),0.91(s,3H,CH3),0.94(d,J=6.0HZ,3H，CH3),0.99(s,3H,CH3),1.10(3H，s，CH3),2.22(d,J=12.0HZ,1H，H-18),3.21(dd，J=11.2，4.8HZ,1H,H-3),4.30(brs，2H,NH),4.32(d,J=16,0HZ，1H，COOCHaCOO)，4.83(d，J=16.0HZ，1H，COOCHbCOO),5.33(t,J=3.6HZ，1H，H-12),9.00(s，1H,NH);IR(KBr)v:3330，3278,2920,1728，1663,1602cm";MSm/z(0/o):551.4([M+Na]+);HRMS(ESI)calcdforC32H52N204Na[M+Na]+551.3822,found551.3819实施例3化合物(4)的制备将1.056g(2mmol)的3溶于30ml无水乙醇中加入2.6mmol的苯甲醛(加入催化剂量的冰乙酸)，搅拌，加热回流反应,TLC监测反应，反应结束后，冷却，静置2h后抽滤，用乙醇重结晶得化合物4a.白色固体，产率89%,m.p,290292。C;'HNMR(CDC13，400MHz)S:0.71(s,3H,CH3),0.78(s，3H，CH3),0.83(d，J=6.4HZ,3H，CH3)，0.91(s,3H,CH3),0.94(d，J=6.0HZ,3H,CH3)，0.98(s,3H,CH3),1.10(s,3H,CH3)，2.29(d,J=11.6HZ，IH，H-18)，3.21(dd,J=10.8,4.8HZ,IH,H-3)，5.00(d,J=16.0HZ，lH,COOCHaCOO)，5.14(d,J=16.0HZ,IH,COOCHbCOO)，5.28(t，J=3.6HZ,1H，H-12),7.407.70(m，5H,PhH),8.78(s，IH,N=CH),11.40(s，1H，NH);IR(KBr)v:3446，3248,2920，1730，1701，1667cm";MSm/z(%):639.4([M+Na]+);HRMS(ESI)calcdforC39H56N204Na[M+Na]十639.4159,found639.4132.同法合成4a一g.4b:白色固体，产率85%,m.p.214~215°C,'HNMR(CDC13,400MHz)5:0.75(s,3H,CH3)，0.78(s,3H,CH3),0.83(d,J=6.4HZ,3H,CH3),0.91(s,3H,CH3),0.94(d,J=6.0HZ,3H,CH3)，0.99(s,3H,CH3),1.09(s,3H，CH3),2.29(d,J=11.6HZ,IH,H-18)，3.21(dd,J=10.8,4.8HZ,IH，H-3),3.84(s,3H，OCH3),4.98(d,J=16.0HZ,lH,COOCHaCOO),5.12(d,J=16.0HZ,IH,COOCHbCOO),5.28(t，J=3.6HZ，IH,H-12),6.907.57(m,4H,PhH),8.60(s,1H,N=CH),l].32(s,IH,NH);IR(KBr)v:3435，2927,1710,1685cm.1;MSm/z(%):669.4([M+Na]+);HRMS(ESI)calcdforC40H58N2O5Na[M+Na]+669.4262,found669.4238.4c:白色固体，产率90%,m.p.276277。C,'HNMR(CDC13,400MHz)S:0.74(s,3H,CH3),0.78(s,3H,CH3),0.86(d,J=6.4HZ，3H,CH3)，0.91(s,3H,CH3)，0.94(d,J=6,0HZ，3H，CH3),0.99(s,3H,CH3),1.10(s,3H，CH3)，2.29(d，J=11.6HZ,IH,H-18),3.21(dd,J=10.8,4.8HZ，1H，H-3)，5.02(d,J=16.0HZ,IH,COOCHaCOO)，5.15(d,J=16.0HZ,1H，COOCHbCOO),5.28(t,J=3.6HZ，1H，H-12)，7.59~8.27(m,4H，PhH)，8.81(s，IH,N=CH)，11.45(s，IH,丽)；IR(KBr)v:3435,3256,2927，1710，1677cm-';MSm/z(0/o):684.3([M+Na]+);HRMS(ESI)calcdforC39H55N306Na[M+Na]+684.3976，found684.3983.4d:黄色固体，产率95%,m.p.273274。C，'HNMR(CDC13,400MHz)S:0.75(s，3H，CH3),0.78(s，3H,CH3),0.87(d，J=6.4HZ，3H,CH3),0.92(s,3H,CH3)，0.95(d,J=6.4HZ,3H,CH3),0.98(s，3H,CH3),1.10(s，3H，CH3),2.29(d,J=10.8HZ，1H，H-18)，3.21(dd,J=11.2，5.2HZ，IH,H-3),5.02(d，J=16,0HZ，1H，COOCHaCOO),5.14(d,J=16.0HZ,IH,COOCHbCOO),5.27(t,J=3.6HZ,IH,H-12),7.778.28(m,4H,PhH),8.70(s，IH,N=CH),11.50(s，IH,NH);IR(KBr)v:3512,3119，2920，1718，1680cm-1;MSm/z(%):684.3([M+Na]+);HRMS(ESI)calcdforC39H55N306Na[M+Na]+684.3973，found684.3983.4e:白色固体，产率82%，m.p.215217。C,'HNMR(CDC13，400MHz)S:0.78(s,3H,CH3)，0.81(s,H，CH3)，0.86(d,J=6.4HZ,3H,CH3),0.92(s，H，CH3)，0.95(d,J=6.4HZ,3H,CH3),0.99(s，3H,CH3),1.10(s,3H,CH3),2.19(s,3H,CH3),2.29(d,J=11.6HZ,IH,H-18),3.20(dd,J=11.6,5.6HZ,1H，H-3),5.01(d,J=16.0HZ，IH,COOCHaCOO),5.17(d,J=16,0HZ,1H，COOCHbCOO),5.27(t,J=3.6HZ,IH,H-12)，7.39~7.71(m,5H,PhH),8.48(s,IH,N=CH),11.20(s,1H，NH);IR(KBr)v:3444，3265,2930,1740,1688cm-1;MSm/z(%):653.4([M+Na]+);HRMS(ESI)calcdforC40H58N2O4Na[M+Na]+653.4319，found653.4289.4f:白色固体,产率79%,m.p.l78180。C,'HNMR(CDC13,400MHz)5:0.73(s，3H,CH3),0.80(s,3H,CH3),0.86(d，J=6.0HZ，3H，CH3),0.92(s,3H，CH3)，0.95(d,J=6.0HZ,3H,CH3)，0.99(s,3H,CH3)，1.09(s,3H,CH3),2.17(s,3H,CH3)，2.29(d，J=l1.6HZ，IH,H-18)，3.21(dd,J=12.0,5.6HZ,IH,H-3),5.00(d,J=16.0HZ，IH,COOCHaCOO),5.16(d,J=16.0HZ，IH,COOCHbCOO)，5.27(t，J=3.6HZ,IH,H-12),7.187.60(m,4H,PhH),8.43(s，1H,N=CH),11.15(s,IH,NH);IR(KBr)v:3444，3250,2926，1721,1689crrT1;MSm/z(%):667.4([M+Na]+);HRMS(ESI)calcdforC4lH6。N204Na[M+Na]+667.4461,found667.4445.4g:白色固体，产率83%,m.p.l79180。C'，'HNMR(CDC13,400MHz)3:0.74(s,3H，CH3),0.80(s,3H,CH3),0.86(d,J=6.4HZ,3H,CH3),0.92(s，3H,CH3)，0.95(d，J=6.4HZ,3H,CH3),0.99(s,3H,CH3),1.10(s,3H,CH3),2.17(s,3H,CH3)，2.28(d,J=11.6HZ,IH,H-18),3.21(dd,J=12.0,5.2HZ,1H，H-3),4.99(d,J=16.0HZ，IH,COOCHaCOO),5.14(d,J=16.0HZ,IH,COOCHbCOO),5.27(t,J=3.6HZ,1H，H-12),7.357.65(m,4H，PhH)，8.50(s,1H,N=CH)，11.25(s,1H,NH);IR(KBr)v:3444,2927,1720,1692cm";MSm/z(%):687.3([M+Na]+);HRMS(ESI)calcdforC40H57ClN2O4Na[M+Na]+687.3870，found687.3899.实施例4化合物5的制备取0.616g(lmmol)的4a加入到25ml的反应瓶中,加入10mlAc2O,加热回流lh,冷却后倒入冰水中，剧烈搅拌至油状物完全固化，过滤，水洗,粗产品干燥后经硅胶柱层析纯化得目标产物5a.白色固体，产率60%，m.p.8486。C,'HNMR(CDC13，400MHz)S:0.70(s,3H，CH3)，0.75(s,3H,CH3),0.86(d，J=6.4HZ,3H，CH3),0.91(s,3H，CH3),(X94(d，J=6.4HZ,3H，CH3)，0.98(s,3H，CH3)，1.09(s,3H，CH3),2.04(s，3H，OCOCH3),2.09(s，3H,NCOCH3),2.27(d，J=10.8HZ，1H，H-18),4.52(t,J=7.6HZ，1H,H-3)，4.70(m，2H,COOCH2COO),5.24(t,J=4.0HZ，1H，H-12)，6.87(s,1H，2-H),7.397.90(m,5H,PhH);IR(KBr)v:2926,1732,1682,1244,1027cm";MSm/z(%):723.4([M+Na]+);HRMS(ESI)calcdforC43H60N2O6Na[M+Na]+723.4310,found723,4344.同法制得5b~6g5b:白色固体，产率58%,m.p.l06108。C,'HNMR(CDC13,400MHz)5:0.73(s,3H,CH3),0.85(s,3H,CH3),0.87(d，J=6.4HZ，3H，CH3),0.90(s,3H,CH3),0.93(d,J=6.0HZ,3H,CH3),0.96(s,3H,CH3),1.09(s,3H,CH3),2.04(s,3H,OCOCH3),2.09(s，3H，NCOCH3),2.25(d,J=l.2HZ,1H，H-18),3.89(s，3H，OCH3),4.51(t,J=7.6HZ,1H,H画3),4.67(m，2H,COOCH2COO)，5.24(t,J=3.6HZ，1H,H-12),6.67(s,1H，2-H)，7.00~7.86(4H,m,PhH);IR(KBr)v:2946,1733,1679,1248,1030cm-1;MSm/z(%):753.4([M+Na]+);HRMS(ESI)calcdforC44H62N207Na[M+Na]「753.4416,,found753.4449.5c:白色固体，产率62%,m.p.ll912rC,'HNMR(CDC13,400MHz)&0.75(s，3H,CH3),0.83(s,3H,CH3),0.86(d,J=6.0HZ,3H,CH3),0,90(s,3H,CH3),0.93(d，J=6.4HZ,3H,CH3)，0.96(s,3H,CH3),1.08(s,3H,CH3),2.04(s,3H，OCOCH3),2.15(s,3H，NCOCH:,)，2.27(d，J=10.8HZ,1H,H-18),4.47(t,J=7.6HZ,1H,H-3)，4.74(m，2H,COOCH2COO),5.24(t，J=3.6HZ,1H，H-12),6,93(s,1H,2-H),7.59~8.26(m,4H,PhH);IR(KBr)v:2949，1733，1715,1698,1244,1027cm-1;MSm/z(%):768.4([M+Na]+);HRMS(ESI)calcdforC43H59N308Na[M+Na]+768.4193，found768.4194.5d:白色固体，产率70。/0,m.p,120122。C，'HNMR(CDCl3，400MHz)S:0.74(s，3H,CH3)，0.84(s，3H,CH3)，0.86(d,J=6.4HZ，3H，CH3)，0.91(s,3H，CH3)，0.93(d,J=6.4HZ，3H，CH3)，1.00(s，3H，CH3),1.08(s，3H,CH3),2.04(s，3H，OCOCH3)，2.14(s，3H，NCOCH3),2.27(d，J=10.8HZ，1H，H-18),4.49(t,J=7.6HZ，1H,H-3)，4.77(m,2H,COOCH2COO)，5.23(t，J=3.6HZ，1H，H-12),6.94(s,1H,2-H),7.598.26(4H,m，PhH).IR(KBr):2947,1732,1694,1244,1027cm";MSm/z(%):768.4([M+Na]+);HRMS(ESI)calcdforC43H59N308Na[M+Na]+768.4185，found768.4194.5c:白色固体，产率50%,m.p.9698。C，HNMR(CDC13，400MHz)5:0.79(s,3H,CH3),0.82(s，3H，CH3)，0.86(d,J=6.4HZ,3H，CH3)，0.91(s，3H，CH3)，0.93(d,J=6.4HZ,3H，CH3),0.96(s,3H，CH3),1.09(s，3H,CH3),2.04(s，3H,OCOCH3)，2.09(s，3H,NCOCH3),2.20(s,3H,2-CH3)，2.27(d,J=10.8HZ，1H,H-18),4.47(t，J=7.6HZ,1H，H-3),4.69(m,2H，COOCH2COO),5.22(t,J=3.6HZ,1H，H-12),7.36~7.51(m,5H，PhH).IR(KBr):2947，1733,1678,1244,1028cm";MSm/z(%):737.4([M+Na]+);HRMS(ESI)calcdforC44H62N206Na[M+Na]+737.4466,found737.4500.5f:白色固体，产率45%,m.p.9496。C,'HNMR(CDC13,400MHz)5:0.79(s，3H,CH3),0.82(s，3H,CH3),0.86(d,J=6.4HZ,3H,CH3)，0.91(s,3H,CH3)，0.93(d，J=6.4HZ,3H,CH3)，0.96(s,3H，CH3)，1.09(s，3H,CH3),2.04(s,3H,OCOCH3),2.09(s，3H,NCOCH3),2.20(s,3H,2-CH3)，2.27(d,J=10.8HZ,1H，H-18),4.47(t，J=7.6HZ,1H,H陽3)，4.69(m,2H,COOCH2COO)，5.22(t,J-3.6HZ,1H,H-12)，7.167.38(m，5H,PhH).IR(KBr):2948,1733,1678,244，1027cm陽'；MSm/z(%):75L4([M+Na]+);HRMS(ESI)calcdforC45H64N206Na[M+Na]+75.4656,found751.4657。5g:白色固体，产率50%，m.p.9193。C,'HNMR(CDC13,400MHz)&0.79(s,3H,CH3),0.83(s,3H，CH3),0.86(d，J=6.4HZ,3H,CH3),0.91(s,3H,CH3),0.95(d,J=6.4HZ,3H,CH3),0.99(s,3H,CH3)，1.09(s,3H,CH3),2.04(s,3H,COCH3),2.10(s，3H，NCOCH3),2.21(s,3H,2-CH3),2.27(d,J=10.8HZ,1H，H-18),4.47(t,J=7.6HZ，H,H-3),4.70(m,2H，COOCH2COO),5.22(t,J=3.6HZ,1H,H-12),7.33~7.45(m,4H,PhH);IR(KBr)v:2948,1734,1676,1244，1027;MSm/z(%):771.4([M+Na]+);HRMS(ESI)calcdforC44H61ClN206Na[M+Na]+771.4096，found771.4110。权利要求1一类具有抗炎的熊果酸噁二唑啉衍生物，其结构如式(I)id="icf0001"file="S2007100507976C00011.gif"wi="88"he="40"top="5"left="5"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="no"/>其中，式中的R，R可以是氢，苯基，取代苯基、甲基等。2以化学式(l)为代表的化合物的合成方法，其特征是熊果酸与氯乙酸乙酯反应制得熊果酸乙氧甲酰基甲酯，后者与水合肼反应得到相应的酰肼，酰肼与取代羰基化合物在乙醇作溶剂下回流得到熊果酸酰腙，熊果酸酰腙在环合剂作用下得到化合物(I)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>3本发明化合物可以做成片剂、丸剂、颗粒剂、胶囊剂以及注射剂或其它临床可以接受的适宜剂型。全文摘要本发明公开了具有抗炎的熊果酸类衍生物及其制备方法。该类化合物具有良好的抗炎作用。该类熊果酸类衍生物新药具有如下化学式(I)。本发明所提供的熊果酸类衍生物是具有抗炎活性，它以熊果酸为母体化合物，根据药物构效分子学的原理进行结构修饰，设计并制备了治疗炎症功能的具有高活性的化合物。文档编号C07J63/00GK101182345SQ20071005079公开日2008年5月21日申请日期2007年12月14日优先权日2007年12月14日发明者春支,颖李,杨定菊,石万棋,睿蒋,聪邓申请人:四川国康药业有限公司