具有PDE-5抑制活性的5,7-二氨基吡唑并[4,3-d]嘧啶的制作方法

专利名称：具有PDE-5抑制活性的5,7-二氨基吡唑并[4,3-d]嘧啶的制作方法
本申请是2004年11月12日递交的、名为“具有PDE-5抑制活性的5，7-二氨基吡唑并[4，3-d]嘧啶”的中国发明专利申请No.200480034570.7(PCT/IB2004/003747)的分案申请。
本发明涉及一系列新的5，7-二氨基吡唑并[4，3-d]嘧啶，其是可用于高血压或者其它病症的治疗的环状单磷酸鸟苷(cyclic guanylatemonophosphate，cGMP)特异性5型磷酸二酯酶抑制剂(此后称为PDE-5)，本发明还涉及其制备方法，在其制备中所使用的中间体，含有其的组合物和所述化合物和组合物的用途。
i)高血压 血压(BP)由许多血液动力学参数单独或者相组合来定义。心脏收缩血压(SBP)是当心脏收缩时所获得的最大的动脉压。心脏舒张血压是当心脏舒张时所获得的最小的动脉压。SBP和DBP之间的差被定义为脉搏压(PP)。
高血压已经被定义为具有至少140mmHg的SBP和/或至少90mmHg的DBP。按照此定义，发达国家的高血压发病率为成年人口的约20％，在年龄为60或者更大的人口中上升到约60—70％，然而这些高血压患者中的一大部分具有正常的BP(当以非临床方式测量时)。此老年高血压患者人口中的大约60％具有孤立的心脏收缩高血压(ISH)，即他们具有高的SBP和正常的DBP。高血压导致中风、心肌梗塞、心室纤维颤动、心脏衰竭、外周脉管疾病和肾损伤的危险提高(Fagard，RH；Am.J.Geriatric Cardiology 11(1)，23-28，2002；Brown，MJ和Haycock，S；Drugs 59(Suppl 2)，1-12，2000)。
高血压的病理生理学仍然是一个存在争议的话题。虽然一般都承认高血压是心脏输出和外周脉管阻力之间的不平衡的结果，并且大多数高血压患者具有不正常的心脏输出和增大的外周脉管阻力，但是什么参数首先变化并不确定(Beevers，G等；BMJ 322，912-916，2001)。
尽管按照各种药理学分类存在大量的的可用药物，包括利尿剂、α-肾上腺素拮抗剂、β-肾上腺素拮抗剂、钙通道阻隔剂、血管紧张素转换酶(ACE)抑制剂和血管紧张素受体拮抗剂，但是对于有效治疗高血压的需求仍然没有得到满足。
ii)PDE5抑制剂 脉管内皮细胞分泌一氧化氮(NO)。其作用于脉管平滑肌细胞并且导致鸟苷酸环化酶的活化和环状单磷酸鸟苷(cGMP)的积累。cGMP的积累导致肌肉松弛并且导致血管扩张。这样的扩张减小了脉管阻力，由此使得血压下降。
cGMP通过由cGMP特异性磷酸二酯酶水解成5’-单磷酸鸟苷(GMP)而失活。一种重要的磷酸二酯酶已经被确认为是5型磷酸二酯酶(PDE5)。PDE5的抑制剂减小了cGMP的水解率，因此加强了一氧化氮的作用。
已经报道了若干化学类型的PDE5抑制剂，包括吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮(例如已公布的国际专利申请WO 93/06104，WO 98/49166，WO 99/54333，WO 00/24745，WO 01/27112和WO 01/27113)；吡唑并[4，3-d]嘧啶-4-酮(例如已公布的国际专利申请WO 93/07149)；吡唑并[4，3-d]嘧啶(例如已公布的国际专利申请WO 01/18004)；喹唑啉-4-酮(例如已公布的国际专利申请WO 93/12095)；吡啶并[3，2-d]嘧啶-4-酮(例如已公布的国际专利申请WO 94/05661)；嘌呤-6-酮(例如已公布的国际专利申请WO 94/00453)；六氢吡嗪并[2’，1’:6，1]吡啶并[3，4-b]吲哚-1，4-二酮(例如已公布的国际专利申请WO 95/19978)，以及咪唑并[5，1-f][1，2，4]三嗪酮(例如已公布的国际专利申请WO 99/24433)。
虽然这些PDE5抑制剂已经被建议作为诸如心绞痛之类的相关病症的治疗剂，但是其还没有被用来作为高血压的治疗剂。PDE5抑制剂已知可用于男性勃起官能阻碍，例如西地那非(sildenafil)、他达拉非(tadalafil)和伐地那非(vardenafil)。仍然存在对新的PDE5抑制剂的需求，特别是具有改善的药物动力学和药效性能的PDE5抑制剂。本文中所提供的化合物是有效的PDE5抑制剂，其具有改善的体外选择性和/或延长的体内半衰期。
WO 20/00660和WO 01/18004公开了具有PDE5抑制效果的吡唑并[4，3-d]嘧啶，其可以用于治疗心血管系统紊乱。
根据第一个方面，本发明提供式(I)的化合物，以及该化合物的互变异构体或者该化合物或其互变异构体的药学上可接受的盐或溶剂化物，
其中， R1是选自RA、RB、RC和RD的环状基团，其中的每一个可选地被一个或者多个R7基团取代； R2是氢或者C1-C2烷基； R3和R4分别独立地是C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基或C3-C10环烷基，其中的每一个可选地被一个或者多个R8基团取代，或者R3和R4分别独立地是RE或氢，RE可选地被一个或者多个R9基团取代； 或者—NR3R4形成RF，RF可选地被一个或者多个R10基团取代； R5选自-Y-CO2R15和-Y-R16； 连接在N1或者N2上的R6是C1-C6烷基、C1-C6卤烷基、C2-C6烯基或C2-C6炔基，其中的每一个可选地被C1-C6烷氧基、C1-C6卤烷氧基或者选自RJ、RK、RL和RM的环状基团取代，或者R6是RN，C3-C7环烷基或者C3-C7卤环烷基，其中的每一个可选地被C1-C6烷氧基、C1-C6卤烷氧基取代，或者R6是氢； R7是卤素、C1-C6烷基、C1-C6卤烷基、C2-C6烯基或C2-C6炔基、C3-C10环烷基、C3-C10卤环烷基、苯基、OR12、OC(O)R12、NO2、NR12R13、NR12C(O)R13、NR12CO2R14、C(O)R12、CO2R12、CONR12R13或CN；R8是卤素、苯基、C1-C6烷氧基苯基、OR12、OC(O)R12、NO2、NR12R13、NR12C(O)R13、NR12CO2R14、C(O)R12、CO2R12、CONR12R13、CN、C3-C6环烷基、RG或RH，RG和RH可选地被一个或者多个R9基团取代； R9是C1-C6烷基、C1-C6卤烷基或CO2R12； R10是卤素、C3-C10环烷基、C3-C10卤环烷基、苯基、OR12、OC(O)R12、NO2、NR12R13、NR12C(O)R13、NR12CO2R14、C(O)R12、CO2R13、CONR12R13、CN、氧代(oxo)、C1-C6烷基或C1-C6卤烷基，C1-C6烷基和C1-C6卤烷基可选地被R11基团取代； R11是苯基、NR12R13或NR12CO2R14； R12和R13分别独立地是氢、C1-C6烷基或C1-C6卤烷基； R14是C1-C6烷基或C1-C6卤烷基； R15是氢或者C1-C6烷基，其中C1-C6烷基可选地被一个或者多个选自苯基、卤素、OH、C1-C6烷氧基、NH2、NH(C1-C6烷基)和N(C1-C6烷基)2的基团取代； R16是选自四唑-5-基、5-三氟甲基-1，2，4-三唑-3-基、5-(甲磺酰基)-1，2，4-三唑-3-基、2，5-二氢-5-氧代-1，2，4-噁二唑-3-基、-SO2NHR17和-CONHR18的羧酸电子等排物； R17选自C1-C6烷基、苯基、-CO-(C1-C6烷基)和-CO-苯基； R18选自-SO2-(C1-C6烷基)和-SO2-苯基； RA和RJ分别独立地是C3-C10环烷基或C3-C10环烯基，其中的每一个可以或者是单环，或者当存在适当数量的成环原子时是多环，并且可以稠合到 (a)选自苯环和5元或者6元芳杂环的单环芳香环，所述芳杂环含有至多三个选自氮、氧和硫的杂原子，或者 (b)5元、6元或7元脂杂环，所述脂杂环含有至多三个选自氮、氧和硫的杂原子； RB和RK分别独立地是苯基或者萘基，其中的每一个可以稠合到 (a)C5-C7环烷基环或C5-C7环烯基环， (b)5元、6元或7元脂杂环，所述脂杂环含有至多三个选自氮、氧和硫的杂原子，或 (c)5元或者6元芳杂环，所述芳杂环含有至多三个选自氮、氧和硫的杂原子， RC、RL和RN分别独立地是单环的或者当存在适当数量的成环原子时是多环的、饱和或者部分不饱和的环体系，其含有3到10个其中至少一个是选自氮、氧和硫的杂原子的成环原子，所述环可以稠合到C5-C7环烷基环或C5-C7环烯基环或选自苯环和5元或者6元芳杂环的单环芳香环，所述芳杂环含有至多三个选自氮、氧和硫的杂原子； RD和RM分别独立地是5元或者6元芳杂环，所述芳杂环含有至多三个独立地选自氮、氧和硫的杂原子，所述环可以进一步稠合到 (a)第二5元或者6元芳杂环，所述第二芳杂环含有至多三个选自氮、氧和硫的杂原子； (b)C5-C7环烷基环或C5-C7环烯基环； (c)5元、6元或7元脂杂环，所述脂杂环含有至多三个选自氮、氧和硫的杂原子；或 (d)苯环； RE、RF和RG分别独立地是是单环的或者当存在适当数量的成环原子时是多环的、饱和的环体系，其含有3到10个其中至少一个是选自氮、氧和硫的杂原子的成环原子； RH是5元或者6元芳杂环，所述芳杂环含有至多三个独立地选自氮、氧和硫的杂原子；和 Y是共价键、-CH2-O-CH2-、C1-C6亚烷基或C3-C7亚环烷基。
如在本文中所使用的，亚烷基是指m，n-烷二基单元，其中m和n是相同或不同的，亚烷基诸如是亚甲基(-CH2-)、亚乙基(-CH2CH2-)和1，2-丙二基(-CH(CH3)CH2-)。
如在本文中所使用的，亚环烷基是指m，n-环烷二基单元，其中m和n是相同或不同的，亚环烷基诸如是1，1-环丙二基和1，4-环己二基。
除非另有说明，烷基或者烷氧基可以是直链的或者枝化的，并且含有1～8个碳原子，优选1～6个碳原子并且特别优选1～4个碳原子。烷基的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、戊基和己基。烷氧基的实例包括甲氧基、乙氧基、异丙氧基和正丁氧基。
除非另有说明，烯基或者炔基可以是直链的或者枝化的，并且含有2～8个碳原子，优选2～6个碳原子并且特别优选2～4个碳原子，并且可以包含多达3个的可以是共轭的双键或者三键。烯基和炔基的实例包括乙烯基、烯丙基、丁二烯基和炔丙基。
除非另有说明，环烷基或者环烷氧基可以含有3～10个成环原子，可以或者是单环的或者当存在适当数量的成环原子时是多环的。环烷基的实例是环丙基、环戊基、环己基和金刚烷基。
除非另有说明，环烯基可以含有3～10个成环原子，可以或者是单环的或者当存在适当数量的成环原子时是多环的，并可以包含多达3个的双键。环烯基的实例是环戊烯基和环己烯基。
芳基包括苯基、萘基、蒽基和菲基。
除非另有说明，脂杂环基含有3～10个成环原子，其中至多4个可以是诸如氮、氧和硫的杂原子，并且脂杂环可以是饱和或者部分不饱和的。脂杂环基的实例是环氧乙烷基、氮杂环丁烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩、吡咯烷基、吡咯啉基、咪唑烷基、咪唑啉基、硫杂环戊烷基、二氧杂环戊烷基、二氢吡喃基、四氢吡喃基、哌啶基、吡唑啉基、吡唑烷基、二氧杂环己烷基、吗啉基、二硫杂环己烷基、硫代吗啉基、哌嗪基、氮杂卓基(zaepinyl)、氧氮杂卓基、硫氮杂卓基、噻唑啉基和二氮杂环己烷基(diazapanyl)。
除非另有说明，芳杂环基含有3～10个成环原子，其中至多4个可以是诸如氮、氧和硫的杂原子。芳杂环的实例是呋喃基、噻吩基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异噁唑基、异噻唑基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、四唑基、三嗪基。此外，术语芳杂环基包括稠合芳杂环基，例如，苯并咪唑基、苯并噁唑基、咪唑并吡啶基、苯并嗪基、苯并噻嗪基、噁唑并吡啶基、苯并呋喃基、喹啉基、喹唑啉基、喹喔啉基、苯并噻唑基、苯二酰亚氨基、苯并呋喃基、苯并二氮杂卓基、吲哚基和异吲哚基。
卤素是指氟、氯、溴或者碘。
卤烷基包括单卤代烷基、多卤代烷基和全卤代烷基，诸如2-溴乙基、2，2，2-三氟乙基、二氟氯甲基和三氯甲基。卤烷氧基包括单卤代烷氧基、多卤代烷氧基和全卤代烷氧基，诸如2-溴乙氧基、2，2，2-三氟乙氧基、二氟氯甲氧基和三氯甲氧基。卤环烷基包括单卤代环烷基、多卤代环烷基和全卤代环烷基。
除非另有说明，术语“被取代”是指被一个或者多个特定基团取代。在这些基团可以选自多个可选的基团的情况下，所选的基团可以是相同的或不同的。
在一个优选实施例中，R1是RA，RA可选地被一个或多个R7基团取代；并且RA是C3-C10环烷基，其可以或者是单环的或者当存在适当数量的成环原子时是多环的，并且其可以稠合到或者 (a)选自苯环和5元或者6元芳杂环的单环芳香环，所述芳杂环含有至多三个选自氮、氧和硫的杂原子，或者 (b)5元、6元或7元脂杂环，所述脂杂环含有至多三个选自氮、氧和硫的杂原子。
优选地，RA是单环C3-C8环烷基。
更优选地，RA是单环C5-C7环烷基。
最优选地，RA是环戊基或环己基。
在另一个优选实施例中，R1是RB，RB可选地被一个或多个R7基团取代。
优选地，RB是苯基。
在另一个优选实施例中，R1是RC，RC可选地被一个或多个R7基团取代。
优选地，RC是单环的饱和或者部分不饱和的环体系，该环体系含有3～8个成环原子，其中至少一个是选自氮、氧和硫的杂原子。
更优选地，RC是单环的饱和或者部分不饱和的环体系，该环体系含有5～7个成环原子，其中至少一个是选自氮、氧和硫的杂原子。
最优选地，RC是单环的饱和环体系，该环体系含有5～7个成环原子，其中至少一个是选自氮、氧和硫的杂原子。
在另一实施例中，R1是RD，RD可选地被一个或多个R7基团取代。
优选地，RD是5元或6元芳杂环，该芳杂环含有至多3个独立地选自氮、氧和硫的杂原子。
更优选地，RD是5元芳杂环，该芳杂环在环中含有选自氮、氧和硫的一个杂原子和可选地还含有至多2个其他氮原子，或者RD是包含1个、2个或者3个氮原子的6元芳杂环。
更优选地，RD是呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、异噁唑基、噁唑基、异噻唑基、噻唑基、噁二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基或吡嗪基。
最优选地，RD是吡唑基、咪唑基、异噁唑基、噁唑基、噁二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基或吡嗪基。
优选地，R7是卤素，C1-C6烷基、C1-C6卤烷基、OR12或CONR12R13。
更优选地，R7是卤素、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、羟基或者CONH(C1-C3烷基)。
更优选地，R7是氟、甲基、乙基、羟基、甲氧基、丙氧基或者CONHMe。
优选地，R2是氢或者甲基。
更优选地，R2是氢。
优选地，R3是氢、可选地被一个或多个R8取代的C1-C6烷基、或者可选地被一个或者多个R9取代的RE，并且其中RE是单环的或者当存在适当数量的成环原子时是多环的饱和环体系，该环体系含有3～7个成环原子，其中至少一个是选自氮、氧和硫的杂原子。
更优选地，R3是氢、可选地被一个或多个R8取代的C1-C4烷基、或者可选地被一个或者多个R9取代的RE，并且其中RE是单环的饱和环体系，该环体系含有3～7个成环原子，其中至少一个是选自氮、氧和硫的杂原子。
在一个实施例中，R3是可选地被一个或者多个R9取代的RE，并且其中RE是单环的饱和环体系，该环体系含有3～7个成环原子，含有一个氮原子。
更优选地，RE是氮杂环丁烷基、吡唑烷基或哌啶基。
在另一个实施例中，R3是可选地被一个或多个R8基取代的C1-C4烷基，其中R8是卤素、苯基、C1-C6烷氧基苯基、OR12、NR12R13、NR12CO2R14、CO2R12、CONR12R13、RG或RH，RG和RH可选地被一个或多个R9基取代。
更优选地，R8是羟基、甲氧基、甲氧基苯基、NH2、NHMe、NMe2、NHCO2tBu、NMeCO2tBu、CO2H、CONHMe、RG或RH，RG和RH可选地被一个或多个R9基取代。
在一个实施例中，R8是可选地被一个或多个R9基取代的RG，其中RG是单环的饱和环体系，该环体系含有3～7个成环原子，其中至少一个是选自氮、氧和硫的杂原子。
更优选地，RG是单环的饱和环体系，该环体系含有3～7个成环原子，其中含有一个氮原子和可选的一个氧原子。
最优选地，RG吡咯烷基、哌啶基或吗啉基。
在另一个优选实施例中，R8是可选地被一个或多个R9基取代的RH，其中RH是含有至多两个氮原子的5元或6元芳杂环。
更优选地，RH是吡唑基。
优选地，R9是甲基或CO2tBu。
在另一个优选实施例中，R3是氢或者可选地被一个或多个R8基取代的C1-C4烷基，或者R3是氮杂环丁烷基、吡咯烷基或者哌啶基，其中每一个可选地被一个或多个R9基取代，其中R8是羟基、甲氧基、甲氧基苯基、NH2、NHMe、NMe2、NHCO2tBu、NMeCO2tBu、CO2H、CONHMe、吡咯烷基、哌啶基、吗啉基或吡唑基，最后的四个基团可选地被一个或多个R9基取代，并且其中R9是甲基或CO2tBu。
在一个优选实施例中，R4是氢、C1-C6烷基、C1-C6卤烷基、C2-C6烯基或C2-C6炔基。
更优选地，R4是氢、C1-C6烷基或C1-C6卤烷基。
最优选地，R4是氢、甲基或乙基。
在另一个优选实施例中，-NR3R4形成RF，RF可选地被一个或多个R10基取代，并且其中RF是单环的或者当存在适当数量的成环原子时是多环的饱和环体系，该环体系含有3～10个成环原子，其中包含至少一个氮原子和可选的一个选自氧和硫的其他的原子。
更优选地，RF是单环的或者当存在适当数量的成环原子时是多环的饱和环体系，该环体系含有3～10个成环原子，其中包含一个或者两个氮原子和可选的一个选自氧和硫的其他的原子。
更优选地，RF选自氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基、高哌嗪基、2，5-二氮杂双环[4.3.0]壬烷-2-基、3，8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-基、3，8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-基、2，5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-基、1，4-二氮杂双环[4.3.0]壬烷-4-基和1，4-二氮杂双环[3.2.2]壬烷-4-基。
优选地，R10是卤素、OR12、NR12R13、NR12CO2R14、CO2R13、氧代、C1-C6烷基或C1-C6卤烷基，最后两种基团可选地被R11基取代。
更优选地，R10是卤素、甲基、乙基、异丙基、羟基、甲氧基、NH2、NHMe、NMe2、NHCO2tBu、CO2H、CO2tBu、氧代、苯甲基、-CH2NH2、-CH2NHMe、CH2NMe2或-CH2NMeCO2tBu。
在一个优选实施例中，R5是-Y-CO2R15。优选地，R15是氢或C1-C3烷基。更优选地，R15是氢。优选地，Y是共价键或C1-C6亚烷基。更优选地，Y是共价键或亚甲基。最优选地，Y是共价键。
在另一个优选实施例中，R5是-Y-R16。优选地，R16是选自-CONHR18、四唑-5-基和2，5-二氢-5-氧代-1，2，4-噁二唑-3-基的羧酸电子同排物。优选地，Y是共价键或C1-C6亚烷基。更优选地，Y是共价键或亚甲基。
优选地，R6位于N1上，形成式(IA)的化合物
在本发明的可选实施例中，R6可以位于N2上，形成式(IB)的化合物
优选地，R6是C1-C6烷基或C1-C6卤烷基，其中的每一个可选地被C1-C6烷氧基、C1-C6卤烷氧基或选自RJ，RL和RM的环状基团取代，或者R6是RN或氢； RJ是C3-C7单环环烷基； RL和RN分别独立地是单环的、饱和或部分不饱和的环体系，该环体系含有4～7个成环原子，其中至少一个是选自氮、氧和硫的杂原子；和 RM是5元或6元芳杂环，其含有至多三个独立地选自氮、氧和硫的杂原子。
更优选地，R6是C1-C4烷基或C1-C4卤烷基，其中的每一个可选地被C1-C4烷氧基、C1-C4卤烷氧基或选自RJ，RL和RM的环状基团取代，或R6是RN或氢； RJ是环丙基或环丁基； RL和RN分别独立地是单环饱和环体系，该环体系含有5个或者6个成环原子，其中至少一个是选自氮、氧和硫的杂原子；和 RM是5元或6元芳杂环，其含有选自氮、氧和硫的杂原子。
更优选地，R6是C1-C4烷基或C1-C4卤烷基，其中每一个可选地被C1-C4烷氧基或选自RJ，RL和RM的环状基团取代，或者R6是RN或氢； RJ是环丙基或环丁基； RL和RN分别独立地是单环饱和环体系，该环体系含有5个或者6个成环原子，其中含有一个选自氮、氧和硫的杂原子；和 RM是5元或6元芳杂环，其含有一个氮原子。
更优选地，R6是C1-C4烷基或C1-C4卤烷基，其中每一个可选地被C1-C4烷氧基、环丙基、环丁基、四氢呋喃基、四氢吡喃基或吡啶基取代，或者R6是氢或者四氢吡喃。
更优选地，R6是氢、甲基、乙基、异丙基、异丁基、甲氧基乙基、甲氧基丙基、乙氧基乙基、乙氧基丙基、丙氧基乙基、2，2，2-三氟乙基、四氢呋喃基甲基、四氢吡喃基甲基、四氢吡喃基或者吡啶基甲基。
式(I)的化合物的优选实施例是包含两个或者多个前述的优选选项的化合物。
优选地，R1是选自RA，RB，RC和RD的环状基团，其中的每一个可选地被一个或多个R7基取代。
R2是氢或C1-C2烷基。
R3是氢、可选地被一个或多个R8基取代的C1-C4烷基，或者是可选地被一个或多个R9基取代的RE。
R4是氢、C1-C6烷基、或C1-C6卤烷基； 或者，-NR3R4形成RF，其可选地被一个或多个R10基取代； R5是-Y-CO2R15或-Y-R16； R6是C1-C4烷基或C1-C4卤烷基，其中的每一个可选地被C1-C4烷氧基、C1-C4卤烷氧基或选自RJ，RL和RM的环状基团取代，或者R6是RN或氢； R7是卤素、C1-C6烷基、C1-C6卤烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C10环烷基、C3-C10卤环烷基、苯基、OR12、OC(O)R12、NO2、NR12R13、NR12C(O)R13、NR12CO2R14、C(O)R12、CO2R12、CONR12R13或CN； R8是卤素、苯基、C1-C6烷氧基苯基、OR12、OC(O)R12、NO2、NR12R13、NR12C(O)R13、NR12CO2R14、C(O)R12、CO2R12、CONR12R13、CN、RG或RH，RG和RH可选地被一个或多个R9基取代； R9是C1-C6烷基、C1-C6卤烷基或CO2R12； R10是卤素、C3-C10环烷基、C3-C10卤环烷基、苯基、OR12、OC(O)R12、NO2、NR12R13、NR12C(O)R13、NR12CO2R14、C(O)R12、CO2R13、CONR12R13、CN、氧代、C1-C6烷基或C1-C6卤烷基，最后两种基团可选地被R11取代； R11是苯基、NR12R13或NR12CO2R14； R12和R13分别独立地是氢、C1-C6烷基或C1-C6卤烷基； R14是C1-C6烷基或C1-C6卤烷基； R15是氢或C1-C3烷基； R16是四唑-5-基、5-三氟甲基-1，2，4-三唑-3-基或2，5-二氢-5-氧代-1，2，4-噁二唑-3-基； RA是单环C3-C8环烷基； RB是苯基； RC是单环饱和的或者部分不饱和的环体系，该环体系含有3～8个成环原子，其中至少一个是选自氮、氧和硫的杂原子； RD是5元或6元芳杂环，其含有至多三个独立地选自氮、氧和硫的杂原子； RE是单环的饱和环体系，其含有3～7个成环原子，其中至少一个是选自氮、氧和硫的杂原子； RF和RG分别独立地是单环的或者当存在适当数量的成环原子时是多环的饱和环体系，该环体系含有3～10个成环原子，其中至少一个是选自氮、氧和硫的杂原子； RH是5元或6元芳杂环，其含有至多三个独立地选自氮、氧和硫的杂原子； RJ是环丙烷或环丁烷； RL和RN分别独立地是单环的饱和环体系，该环体系含有5个或者6个成环原子，其中至少一个是选自氮、氧和硫的杂原子； RM是5元或6元芳杂环，其含有选自氮、氧和硫的杂原子；以及 Y是共价键或C1-C6亚烷基。
更优选地，R1是选自RA，RB，RC和RD的环状基团，其中的每一个可选地被一个或多个R7基取代； R2是氢或C1-C2烷基； R3是氢、可选地被一个或多个R8基取代的C1-C4烷基或可选地被一个或多个R9基取代的RE； R4是氢、C1-C6烷基或C1-C6卤烷基； 或者-NR3R4形成RF，其可选地被一个或多个R10基取代； R5是-Y-CO2R15； R6是C1-C4烷基或C1-C4卤烷基，其中的每一个可选地被C1-C4烷氧基、C1-C4卤烷氧基或者选自RJ，RL和RM的环状基团取代，或者R6是RN或氢； R7是卤素、C1-C6烷基、C1-C6卤烷基、OR12或CONR12R13； R8是卤素、苯基、C1-C6烷氧基苯基、OR12、NR12R13、NR12CO2R14、CO2R12、CONR12R13、RG或RH，RG和RH可选地被一个或多个R9基取代； R9是C1-C6烷基、C1-C6卤烷基或CO2R12； R10是卤素、C3-C10环烷基、C3-C10卤环烷基、苯基、OR12、OC(O)R12、NO2、NR12R13、NR12C(O)R13、NR12CO2R14、C(O)R12、CO2R13、CONR12R13、CN、氧代、C1-C6烷基或C1-C6卤烷基，最后两种基团可选地被R11取代； R11是苯基、NR12R13或NR12CO2R14； R12和R13分别独立地是氢、C1-C6烷基或C1-C6卤烷基； R14是C1-C6烷基或C1-C6卤烷基； R15是氢； RA是单环C5-C7环烷基； RB是苯基； RC是单环饱和的环体系，该环体系含有5～7个成环原子，其中至少一个是选自氮、氧和硫的杂原子； RD是5元芳杂环，其在环中含有选自氮、氧和硫的杂原子和可选地还包含至多2个其他的氮原子，或者RD是包含1个、2个或者3个氮原子的6元芳杂环； RE是单环的饱和环体系，其含有3～7个成环原子，其中含有一个氮原子； RF是单环的或者当存在适当数量的成环原子时是多环的饱和环体系，该环体系含有3～10个成环原子，其中含有至少一个氮原子并且可选地还含有一个选自氧和硫的其他原子； RG是单环的饱和环体系，该环体系含有3～7个成环原子，其中至少一个是选自氮、氧和硫的杂原子； RH是5元或6元芳杂环，其含有至多2个氮原子； RL和RN分别独立地是单环的饱和环体系，该环体系含有5个或者6个成环原子，其中至少一个是选自氮、氧和硫的杂原子； RM是5元或6元芳杂环，其含有选自氮、氧和硫的杂原子；以及 Y是共价键或亚甲基。
在本发明的另一个替换实施例中，本发明提供式(I-AA)的化合物以及其互变异构体或者所述化合物或互变异构体的药学上可接受的盐或溶剂化物，
其中 R1是可选地被一个或多个C1-C6烷基取代的吡啶基； R3和R4分别独立地是氢或C1-C6烷基； R5是-CONHR18； R6是C1-C6烷基，其任选地被选自-OH、C3-C6环烷氧基、C1-C6烷氧基和C1-C6卤烷氧基的取代基取代； R18选自由-SO2-(C1-C6烷基)和-SO2-苯基组成的组。
在式I-AA的化合物的另一个实施例中，R1是被一个或者多个甲基取代的2-吡啶基。在式I-AA的化合物的另一个实施例中，R3和R4独立地选自甲基、乙基、丙基、和异丙基。在式I-AA的化合物的另一个实施例中，R18选自-SO2CH3，和-SO2CH2CH3.在式I-AA的化合物的另一个实施例中，R6是任选地被选自羟基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、氟甲氧基、氟乙氧基、氟丙氧基、二氟甲氧基、二氟乙氧基、二氟丙氧基、三氟甲氧基、三氟乙氧基、三氟丙氧基和环丁氧基的取代基取代的乙基。
在式I-AA的化合物的另一个实施例中，R1是被一个或多个甲基取代的吡啶基； R3和R4独立地选自氢、甲基、乙基、丙基和异丙基； R6是任选地被选自-OH，C3-C6环烷氧基，C1-C6烷氧基和C1-C6卤烷氧基的取代基取代的乙基；以及 R18选自-SO2CH3，和-SO2CH2CH3。
在本发明的另一个替换实施例中，本发明提供式(I-BB)的化合物
其中 R3和R4分别独立地选自甲基、乙基和异丙基； R6A选自甲基、乙基、丙基、氟甲基、氟乙基、氟丙基、二氟乙基、二氟丙基、三氟乙基和三氟丙基；以及 R18选自-SO2CH3，和-SO2CH2CH3。
最优选的化合物是 5-((1S，4S)-2，5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-基)-1-(2-乙氧基乙基)-7-(4-甲基-吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯， 1-(2-乙氧基乙基)-5-(N-异丙基-N-甲基氨基)-7-(6-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯， 1-(2-乙氧基乙基)-5-(N-乙基-N-甲基氨基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸乙酯， 5-二甲氨基-1-(2-乙氧基乙基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸2-(二甲基氨基)乙酯， 1-(2-乙氧基乙基)-5-(N-甲基-N-丙基氨基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸， 5-(N-异丙基-N-甲基氨基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1-(2-丙氧基-乙基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸， 7-(4，6-二甲基吡啶-2-基氨基)-1-(2-乙氧基乙基)-5-(N-异丙基-N-甲基-氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸， 5-(N-环丁基-N-甲基氨基)-1-(2-乙氧基乙基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸， 1-(2-乙氧基乙基)-5-异丙基氨基-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸， 1-(2-乙氧基乙基)-5-(N-乙基-N-甲基氨基)-7-(2-甲氧基嘧啶-4-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸， 3-[1-(2-乙氧基乙基)-5-(N-异丙基-N-甲基氨基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-基]-2H-1，2，4-噁二唑-5-酮， 3-[1-(2-乙氧基乙基)-5-(N-乙基-N-甲基氨基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-基]-2H-1，2，4-噁二唑-5-酮， 1-(2-乙氧基乙基)-7-(4-氟-3-甲基苯基氨基)-5-(N-异丙基-N-甲基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸， 1-(2-乙氧基乙基)-5-(N-乙基-N-甲基氨基)-7-(4-氟-3-甲基苯基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸， 7-(3，4-二甲基苯基氨基)-1-(2-乙氧基乙基)-5-(N-乙基-N-甲基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸， 1-(2-(环丙基甲氧基)乙基)-5-(N-异丙基-N-甲基氨基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸， 1-(2-(环丙基甲氧基)乙基)-5-(N-乙基-N-甲基氨基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸， 1-(2-乙氧基乙基)-5-(N-异丙基-N-甲基氨基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸， 1-(2-异丙氧基乙基)-5-(N-异丙基-N-甲基氨基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸， N-[1-(2-乙氧基乙基)-5-(N-异丙基-N-甲基氨基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羰基]甲磺酰胺，和 N-[1-(2-乙氧基乙基)-5-(N-乙基-N-甲基氨基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羰基]甲磺酰胺， 以及这些化合物的互变异构体或者这些化合物或其互变异构体的药学上可接受的盐或溶剂化物。
式(I)的化合物的药学上可接受的盐包括其酸加合盐和碱盐。
合适的酸加合盐由形成无毒盐的酸形成。
实例包括乙酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、碳酸氢盐/碳酸盐、硫酸氢盐/硫酸盐、硼酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、乙二磺酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚酸盐、葡萄糖酸盐、葡糖醛酸盐、六氟磷酸盐、海苯酸盐(hibenzate)、氢氯化物/氯化物、氢溴化物/溴化物、氢碘化物/碘化物、羟乙基磺酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、甲硫酸盐、萘酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、乳清酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、磷酸盐/磷酸氢盐/磷酸二氢盐、糖二酸盐、硬脂酸盐、丁二酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐和三氟乙酸盐。
合适的碱盐是由形成无毒盐的碱形成。实例包括铝、精氨酸、苄星、钙、胆碱、二乙胺、二乙醇胺(diolamine)、甘氨酸、赖氨酸、镁、甲葡胺、乙醇胺、钾、钠、氨丁三醇和锌盐。
对于合适的盐的评述，参见Stahl和Wermuth的“Handbook ofPharmaceutical SaltsProperties，Selection，and Use”(Wiley-VCH，Weinheim，Germany，2002)。
式(1)的化合物的药学上可接受的盐可以容易地通过将式(I)的化合物和所期望的酸或碱的溶液适当地混合在一起来制备。盐可以从溶液中沉淀出，并且通过过滤收集或者可以通过蒸发溶剂来回收。盐中离子化的程度可以在完全离子化到几乎没有离子化之间变化。
本发明的化合物可以以非溶剂化物和溶剂化物两种形式存在。术语“溶剂化物”在此被用来描述包括本发明的化合物和一个或者多个药学上可接受的溶剂分子(例如乙醇)的分子络合物。在所述溶剂是水时使用术语“水合物”。
包括在本发明范围内的是如下络合物，诸如与前述溶剂化物相比不同的其中药物和主体以化学计量或者非化学计量存在的笼合物、药物主体包合物。还包括含有可以具有化学计量或非化学计量的两种或者更多种有机和/或无机组分的药物络合物。所得的络合物可以是离子化的、部分离子化的、或非离子化的。对于这样的络合物的评述，参见Haleblian的JPharm Sci，64(8)，1269-1288(August 1975)。
此后，每当涉及式(I)的化合物时，都同时包括其盐、溶剂化物和络合物，并且包括其盐的溶剂化物和络合物。
本发明的化合物包括此前所定义的式(I)的化合物、如此后所定义的其多晶型物、前药和异构体(包括光学、几何和互变异构体)和式(I)的同位素标记化合物。
同样处于本发明的范围中的是式(I)的化合物的所谓的“前药”。式(I)的化合物的这样的特定衍生物(其本身可以具有很小或没有药学活性)在被给药到人体中或者人体上时可以例如通过水解分解转化为具有所期望的活性的式(I)的化合物。这样的衍生物被称为“前药”。关于前药的使用的进一步的信息可以在‘Pro-drugs as Novel Delivery Systems，Vol.14，ACS Symposium Series(T Higuchi和W Stella)和‘Bioreversible Carriers in Drug Design’，Pergamon Press，1987(ed.EBRoche，American Pharmaceutical Association)中找到。
根据本发明的前药可以例如通过将式(I)的化合物中具有的合适的官能团用本领域技术人员已知可作为“前体部分”的某种部分(如例如在H Bundgaard的＂Design of Prodrugs＂(Elsevier，1985)中所述的)来替换而制成。
根据本发明的前药的某些实例包括 (i)在式(I)的化合物包含羧酸官能团(-COOH)的情况下，其酯，例如用(C1-C8)烷基替代氢； (ii)在式(I)的化合物包含羟基官能团(-OH)的情况下，例如其醚，例如用(C1-C6)烷酰氧基甲基代替氢；以及 (iii)在式(I)的化合物包含伯氨基官能团或仲氨基官能团(-NH2或-NHR，其中R≠H)的情况下，其酰胺，例如用(C1-C10)烷酰基替代一个或者两个氢。
根据前述的实例和其他前药类型的实例的取代基团的其他实例可以在前述的参考文献中找到。
最后，式(I)的某些化合物可以本身作为式(I)的其他化合物的前药。
包含一个或者多个不对称碳原子的式(I)的化合物可以作为两种或更多种立体异构体存在。当式(I)的化合物包含烯基或者亚烯基时，几何顺反(或Z/E)异构体是可能的。当化合物包含例如酮或肟基或者芳香部分时，可能出现互变异构。应该理解，一个化合物可以表现为多于一种类型的同分异构。
本发明的范围包括式(I)的化合物的所有立体异构体、几何异构体和互变异构体，包括具有多于一种类型的同分异构的化合物，以及其一种或者多种异构体的混合物。还包括其中反离子是光学活性的(例如，D-乳酸盐或L-赖氨酸)或外消旋的(例如，DL-酒石酸盐或者DL-精氨酸)的酸加合盐或碱盐。
顺反异构体可以通过本领域技术人员所公知的常规技术(例如色谱和分级结晶)来分离。
用于制备和分离单一对映异构体的常规技术包括由合适的光学纯前驱体进行手性合成或者利用例如手性高压液相色谱(HPLC)进行外消旋体(或者盐或者衍生物的外消旋体)的拆分。
或者，外消旋体(或者外消旋前驱体)可以与合适的光学活性化合物(例如醇，或者在式(I)的化合物包含酸性或碱性部分的情况下，诸如酒石酸或者1-苯基乙胺)反应。所得到的非对映异构的混合物可以通过色谱和/或分级结晶分离，并且通过本领域技术人员公知的手段将非对映异构体中的一种或者两种转化成相应的纯的对映异构体。
本发明的手性化合物(及其手性前驱体)可以利用色谱(一般来说是HPLC，)在非对称树脂上使用由烃(一般来说是庚烷和己烷，含有0～50％一般是2～20％的异丙醇，以及0～5％的烷基胺，一般是0.1％的二乙胺)组成的移动相以对映异构体富集的形式获得。洗脱物的浓度提供了富集混合物。
立体异构的聚集体可以通过本领域技术人员已知的常规技术(例如参见E L Eliel的“Stereochemistry of Organic Compounds”(Wiley，NewYork，1994))来分离。
本发明包括式(I)的所有药学上可接受的同位素标记化合物，在该同位素标记化合物中，一个或者多个原子被具有与通常在自然界中所发现的原子相同原子序数但是不同原子质量或者质量数的原子所替换。
适用于包含在本发明的化合物中的同位素的实例包括氢的同位素，诸如2H和3H，碳的同位素，诸如11C，13C和14C，氯的同位素，诸如36Cl，氟的同位素，诸如18F，碘的同位素，诸如123I和125I，氮的同位素，诸如13N和15N，氧的同位素，诸如15O，17O和18O，磷的同位素，诸如32P，以及硫的同位素，诸如35S。
式(I)的某些同位素标记化合物(例如包含放射性同位素的那些)可用于药物和/或底物组织分布研究。考虑到引入的容易性和检测手段的方便性，放射性同位素氚(即3H)和碳-14(即14C)对于该目的是特别有用的。
利用诸如氘(即2H)的较重同位素进行取代可以提供某些治疗方面的好处并且因此在某些情况下可能是优选的，所述治疗方面的好处是由更大的代谢作用稳定性(例如，增长的体内半衰期或者减小的剂量要求)带来的。
利用正电子放射同位素(诸如11C，18F，15O和13N)进行取代可以用于正电子放射受体图像(Positron Emission Topography(PET))研究，用于检测底物受体占用状态。
式(I)的同位素标记化合物一般可以通过本领域技术人员已知的常规技术或者通过使用合适的同位素标记试剂代替先前使用的非标记试剂以类似于在所附的实例和制备中所描述的方法，来进行制备。
根据本发明的药学上可接受的溶剂化物包括其中结晶溶剂可以是同位素取代的(例如，D2O，d6-丙酮，d6-DMSO)的那些。
意在用于药学用途的本发明的化合物可以作为晶体或者非晶体产品被服用。它们可以通过诸如沉淀，结晶、冰冻干燥、喷雾干燥或者蒸发干燥的方法作为例如固体栓剂、粉末或者薄膜而被获得。
式(I)的化合物是PDE5的抑制剂。因此，在本发明的另一个方面中，提供了式(I)的化合物、或其互变异构体、盐或溶剂化物作为药剂的用途，特别是作为用于治疗其中PDE5的抑制作用已知，或表明，可产生有益效果的病症的治疗剂的用途。
术语“治疗”包括缓和治疗、医疗治疗和预防治疗。
适于用本发明的化合物进行治疗的病症包括高血压(包括原发性高血压、肺高血压、继发性高血压、单纯收缩期高血压、糖尿病引发的高血压、动脉硬化引发的高血压、以及肾血管高血压)，充血性心力衰竭，心绞痛(包括稳定型、不稳定型和变异型(Prinzmetal)心绞痛)，中风，冠心病，充血性心力衰竭，血管开放性减小的病症(诸如后经皮冠状动脉成形术)，外周脉管疾病，动脉硬化症，硝酸盐诱发耐受性，硝酸盐耐受性，糖尿病，糖耐量受损，代谢症候群，肥胖，性官能障碍(包括男性勃起功能紊乱、阳痿、女性性唤起功能紊乱、阴蒂官能障碍、女性性欲减退功能紊乱、女性性交不适功能紊乱(female sexual pain disorder)、女性性器官官能障碍和由于脊髓损伤导致的性官能障碍)，早产，子痫前症，痛经，多囊卵巢综合征，良性前列腺增生，膀胱出口梗阻，失禁，慢性阻塞性肺病，急性呼吸衰竭，支气管炎，慢性哮喘，过敏性哮喘，过敏性鼻炎，肠运动失调(包括肠易激综合征)，川崎氏综合征，多发性硬化，阿尔茨海默病脑，牛皮癣，皮肤坏死，瘢，纤维症，疼痛(特别是神经性疼痛)，癌症，次生肿瘤，秃顶，尖嘴钳样食管(nutcrackeroesophagus)，肛裂以及痔。
在另一个方面，本发明提供式(I)的化合物，或其互变异构体、盐或溶剂化物用于制造治疗这样的病症的药物的用途。
本发明的化合物可以单独使用或者可以与其他的治疗剂组合使用。当与另一种治疗剂组合使用时，两种药剂的服用可以是同时的或顺序的。同时服用包括服用包含两种药剂的单一配药形式和在几乎同时服用两种具有单独配药形式的药剂。顺序服用包括根据不同的时间安排服用两种药剂，倘若提供治疗的多个时间段存在重叠的话。可以与式(I)的化合物一同服用的合适药剂包括阿司匹林、血管紧缩素II受体拮抗剂(诸如洛沙坦(losartan)、坎地沙坦(candesartan)、替米沙坦(telmisartan)、缬沙坦(valsartan)、伊贝沙坦(irbesartan)以及依普沙坦(eprosartan))，钙通道阻隔剂(诸如氨氯地平(amlodipine))，β-阻隔剂(即，β-肾上腺素受体拮抗剂，诸如索他洛尔(sotalol)、普萘洛尔(proporanolol)、噻吗洛尔(timolol)、安托洛尔(antenolol)、卡维洛尔(carvedilol)以及美托洛尔(metoprolol))，CI1027，CCR5受体拮抗剂，咪唑啉，sGCa’s(可溶性鸟苷酸环化酶活化剂)抗高血压药，利尿剂(诸如氢氯噻嗪、torsemide、氯噻嗪、氯噻酮和阿咪洛利(amiloride))，α-肾上腺素拮抗剂(诸如多沙唑嗪(doxazosin))，ACE(血管紧缩素转化酶)抑制剂(诸如喹那普利(quinapril)、依那普利(enalapril)、雷米普利(ramipril)和赖诺普利(lisinopril))，醛甾酮受体拮抗剂(诸如依普利酮(eplerenone)和安体舒通(spironolactone))，中性肽链内切酶抑制剂，抗糖尿病药(诸如胰岛素，磺酰脲(诸如格列本脲(glyburide)、格列吡嗪(glipizide)和格列美脲(glimepiride))，格列酮类(诸如罗格列酮(rosiglitazone)和砒格列酮(pioglitazone))以及二甲双胍)，降胆固醇药(诸如阿托伐他汀(atorvastatin)、普伐他汀(pravastatin)、洛伐他汀(lovastatin)、辛伐他汀(simvastatin)、氯贝丁酯和罗苏伐他汀(rosuvastatin))以及α-2-δ配体(诸如加巴喷丁(gabapentin)、普瑞巴林(pregabalin)、[(1R，5R，6S)-6-(氨基甲基)双环[3.2.0]庚烷-6-基]乙酸、3-(1-氨基甲基-环己基甲基)-4H-[1，2，4]噁二唑-5-酮、C-[1-(1H-四唑-5-基甲基)-环庚基]-甲基胺、(3S，4S)-(1-氨基甲基-3，4-二甲基-环戊基)-乙酸、(1α，3α，5α)-(3-氨基-甲基-双环[3.2.0]庚烷-3-基)-乙酸、(3S，5R)-3-氨基甲基-5-甲基-辛酸、(3S，5R)-3-氨基-5-甲基-庚酸、(3S，5R)-3-氨基-5-甲基-壬酸以及(3S，5R)-3-氨基-5-甲基-辛酸)。
式(I)的化合物可以单独服用或者与一种或者多种本发明的其他化合物组合服用或者与一种或者多种其他药物组合服用(或者作为其任意组合服用)。一般来说，它们将作为与一种或者多种药学上可接受的赋形剂结合的配方被服用。术语“赋形剂”在此用于描述除本发明的化合物之外的任何其他组分。赋形剂的选择在很大程度上取决于如下的因素，诸如具体的服用方式、赋形剂对可溶性和稳定性的影响以及药剂形式的属性。
适于输送本发明的化合物的药物组合物和其制备方法对于本领域技术人员将是显而易见的。这样的组合物和其制备方法可以在例如‘Remington’s Pharmaceutical Sciences’，第19版(Mack PublishingCompany，1995)中找到。
本发明的化合物可以口服。口服可以包括吞服，使得化合物进入胃肠道，或可以使用口腔或舌下服用，通过其所述化合物直接从嘴进入血流。
适于口服的配方包括固体配方(诸如片剂、含有粒子、液体或者粉末的胶囊、锭剂(包含充液的)、咀嚼片、多粒子和纳米粒子、凝胶、固体溶液、胶质体、膜(包括粘膜粘附膜)、丸剂(ovule)、喷雾剂)和液体配方。
液体配方包括悬浮液、溶液、糊浆和酏剂。这些配方可以用作软胶囊或硬胶囊中的填充物，并且一般包含载体，例如水、乙醇、聚乙二醇、丙二醇、甲基纤维素、或者合适的油，以及一种或者多种乳化剂和/或悬浮剂。液体配方也可以通过例如由香囊(sachet)进行固体再生来制备。
本发明的化合物也可以以快速溶解、快速崩解的药剂形式(诸如在Liang和Chen的Expert Opinion in Therapeutic Patents，11(6)，981-986(2001)中所述的)使用。
对于片剂的剂型，取决于剂量，药物可以构成剂型的1wt％～80wt％、更典型地占剂型的5wt％～60wt％。除了药物之外，片剂一般包含崩解剂。崩解剂的实例包括淀粉羟乙酸钠、羧甲基纤维素钠、羧甲基纤维素钙、交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮(crospovidone)、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纤维素、微晶纤维素、低级烷基取代的羟丙基纤维素、淀粉、预胶化淀粉和藻酸钠。一般来说，崩解剂将占剂型的1wt％～25wt％、优选5wt％～20wt％。
粘结剂一般用于赋予片剂配方粘附性。合适的粘结剂包括微晶纤维、明胶、糖、聚乙二醇、天然和合成树胶、聚乙烯基吡咯烷酮、预胶化淀粉、羟丙基纤维素和羟丙基甲基纤维素。片剂还可以包含稀释剂，诸如乳糖(单水合物、喷雾干燥单水合物、无水的等)、甘露醇、木糖醇、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、微晶纤维素、淀粉和磷酸氢钙二水合物。
片剂还可以任选地包含诸如月桂基硫酸钠和聚山梨醇酯80的表面活性剂，和诸如二氧化硅和滑石之类的助流剂。当存在表面活性剂和助流剂时，表面活性剂可以占片剂的0.2wt％～5wt％，并且助流剂可以占片剂的0.2wt％～1wt％。
片剂还一般包含润滑剂，诸如硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸锌、十八烷基富马酸钠、以及硬脂酸镁与月桂基硫酸钠的混合物。润滑剂一般占片剂的0.25wt％～10wt％，优选从0.5wt％至3wt％。
其他可能的成分包括抗氧化剂、着色剂、调味剂、防腐剂和味道掩盖剂。
示例性的片剂包含至多80％的药物，从约10wt％至约90wt％的粘结剂、从约0wt％至约85wt％的稀释剂、从约2wt％至约10wt％的崩解剂、以及从约0.25wt％至约10wt％的润滑剂。
片剂混合物可以被直接压制或者通过辊子压制形成片剂。片剂混合物或者混合物中的一部分也可以在制片之前被湿法、干法或者熔融造粒、熔融凝固、或者挤出、最终的配方可以包含一个或者多个层，并且可以是包覆或者未被包覆的；其甚至可以是胶囊化的。
片剂的配方在H.Lieberman和L Lachman的“PharmaceuticalDosage FormsTablets，Vol.1”，Marcel Dekker，N.Y.，N.Y.，1980(ISBN0-8247-6918-X)中有讨论。
用于口服的固体配方可以被配制成立即释放或者改进释放。改进释放配方包括延缓释放、持续释放、脉冲释放、受控释放、靶向释放和程序释放。
用于本发明的目的的合适的改进释放配方在美国专利No.6,106,864有描述。其他的合适的释放技术(诸如高能分散和渗透包覆粒子)的细节可以在Verma et al的Pharmaceutical Technology On-line，25(2)，1-14(2001)中找到。使用咀嚼树胶以实现受控释放在WO 00/35298中有描述。
本发明的化合物也可以被直接给药到血流、肌肉或者内部器官中。适用于肠胃外给药的方式包括静脉内的、动脉内的、腹膜内的、胸内的、心室内的、尿道内的、胸骨内的、颅骨内的、肌肉内的和皮下的给药。适用于肠胃外给药的器械包括针(包括微针)、注射器、无针注射器和输液技术。
肠胃外的配方一般是可以包含诸如盐、碳水化合物和缓冲剂(优选从3～9的pH)之类的赋形剂的水溶液，但是对于某些应用，其可能更适于被配制成无菌的非水溶液或将与诸如无菌、无热原(pyrogen-free)水之类的合适载体组合使用的干燥形式。
在无菌条件下例如通过冻干法进行的肠胃外配方的制备可以通过使用本领域技术人员公知的标准制药技术容易地实现。
用于制备肠胃外的溶液的式(I)的化合物的可溶性可以通过使用适当的配制技术(诸如加入增溶剂)来增大。
用于肠胃外给药的配方可以被配制成立即释放或者改进释放。改进释放配方包括延缓释放、持续释放、脉冲释放、受控释放、靶向释放和程序释放。因此，本发明的化合物可以被配制成固体、半固体、或者触变性液体，用于作为提供活性化合物的改进释放的植入储存被服用。这样的配方的实例包括药物包覆支架和PGLA微球。
本发明的化合物也可以局部地给药到皮肤或粘膜，就是说在皮肤上或透过皮肤地给药。用于此目的的典型配方包括凝胶、水凝胶、洗液、溶液、乳剂、软膏、撒粉剂、敷料剂、泡沫、膜、皮肤补贴、薄片、植入物、棉球、纤维、绷带和微乳液。还可以使用脂质体。典型的载体包括醇、水、矿物油、液体矿脂、白矿脂、甘油、聚乙二醇和丙二醇。可以加入助渗剂-参见例如Finnin和Morgan的J Pharm Sci，88(10)，955-958(October 1999)。
其他的局部给药方式包括通过电穿孔、离子导入、声波导入、超声波导入和微针或无针(例如PowderjectTM，BiojectTM，等)注射的输送等。
用于局部给药的配方可以被配制成立即释放或者改进释放。改进释放配方包括延缓释放、持续释放、脉冲释放、受控释放、靶向释放和程序释放。
本发明的化合物还可以一般以干粉(或者是单独的、作为例如与乳糖的干燥共混物的混合物、或者是例如与诸如卵磷脂的磷脂混合的混合组成粒子)形式从干粉吸入器或者作为气溶胶喷雾从加压容器、泵、喷射器、喷雾器(优选使用电流体动力学产生细雾的喷雾器)或者雾化器，在使用或者不使用诸如1，1，1，2-四氟乙烷或者1，1，1，2，3，3，3-七氟丙烷的合适推进剂的情况下，进行鼻内给药或者通过吸入给药。对于鼻内使用，粉末可以包含生物胶粘剂，例如壳聚糖或者环糊精。
加压容器、泵、喷射器、喷雾器或者雾化器含有本发明的化合物的溶液或者悬浮液，所述溶液或者悬浮液包含例如乙醇、含水乙醇、或者合适的用于分散、溶解或者延长活性物质的释放的替代剂、作为溶剂的推进剂和诸如脱水山梨糖醇三油酸酯、油酸或者寡聚乳酸的任选的表面活性剂。
在用于干粉或者悬浮液配方之前，药物产品被微粉化到适于通过吸入进行输送的尺寸(通常小于5微米)。这可以通过任何合适的粉碎方法(诸如螺旋喷射研磨、流化床喷射研磨、用于形成纳米粒子的超临界流体处理、高压均化、或者喷雾干燥)来实现。
用于吸入器或者吹药器的胶囊(例如由明胶或者HPMC制成)、泡形罩和盒体可以被配置成包含本发明的化合物、合适的粉末基体(诸如乳糖或者淀粉)和性能改性剂(诸如亮氨酸、甘露醇或者硬脂酸镁)的粉末混合物。乳糖可以是无水的或者是单水合物的形式，后者是优选的。其他合适的赋形剂包括右旋糖苷、葡萄糖、麦芽糖、山梨醇、木糖醇、果糖、蔗糖和海藻糖。
适用于利用电流体动力学产生细雾的喷雾器的溶液配方可以每次喷射包含1μg～10mg的本发明的化合物，并且喷射体积可以在1μl到100μl之间变化。典型的配方可以包括式(I)的化合物、丙二醇、无菌水、乙醇和氯化钠。可以用于代替丙二醇的其他溶剂包括甘油和聚乙二醇。
合适的调味剂(诸如薄荷醇和左薄荷脑或者诸如糖精或糖精钠的甜味剂)可以被加到本发明的用于吸入/鼻内给药的配方中。
用于吸入/鼻内给药的配方可以被配制成立即释放和/或使用例如共聚(DL-乳酸乙醇酸)(PGLA)改进释放的。改进释放配方包括延缓释放、持续释放、脉冲释放、受控释放、靶向释放和程序释放。
在干粉吸入器和气溶胶的情形中，剂量单位通过输送计量量的阀来确定。根据本发明的单位通常被设置成给予含有从1μg～20mg的式(I)的化合物的计量剂量和“喷雾”。总的日剂量一般将在1μg～80mg的范围内，这可以以一次剂量服用或者更常见的，在一天中分成多次剂量服用。
本发明的化合物可以例如以栓剂、阴道栓或者灌肠剂的形式进行直肠或者阴道给药。可可油是传统的栓剂基体，但是可以根据需要使用各种可替代物。
用于直肠/阴道给药的配方可以被配制成立即释放和/或改进释放的。改进释放配方包括延缓释放、持续释放、脉冲释放、受控释放、靶向释放和程序释放。
本发明的化合物还可以一般以在等渗的、pH受调节的、无菌的盐水中的微粉化悬浮液或溶液的液滴形式，被直接给药到眼或耳。适于眼部和耳部给药的其他配方包括软膏、可生物降解(例如可吸收凝胶海绵、胶原质)植入物和非生物降解(例如硅)植入物、薄片、透镜和粒子或泡囊体系，诸如非离子表面活性剂囊泡或者脂质体。诸如交联聚丙烯酸、聚乙烯醇的聚合物、透明质酸、例如羟基聚甲基纤维素、羟乙基纤维素或者甲基纤维素的纤维素聚合物、或者例如结冷胶的杂多糖聚合物可以与诸如苯扎氯铵之类的防腐剂一起被加入。这样的配方也可以通过离子导入来输送。
用于眼/耳给药的配方可以被配制成立即释放和/或改进释放的。改进释放配方包括延缓释放、持续释放、脉冲释放、受控释放、靶向释放和程序释放。
本发明的化合物可以与诸如环糊精及其合适的衍生物或者含聚乙二醇聚合物之类的可溶大分子体结合，以改善其以任何前述的给药方式使用时的溶解度、溶解速度、味道遮盖、生物可利用性和/或稳定性。
药物环糊精络合物例如被认为一般可用于大多数剂型和给药方案。包合物和非包合物两者都可以被使用。作为与药物直接络合的替代，环糊精可以被用作辅助添加剂，即作为载体、稀释剂或增溶剂。最常用于这些目的的是α-、β-、和γ-环糊精，其实例可以在国际专利申请WO 91/11172，WO 94/02518和WO 98/55148中找到。
由于例如为了治疗特定疾病或者病症的目的服用活性化合物的组合可能是理想的，因而下面的方案也落入本发明的范围中，即其中至少之一包含根据本发明的化合物的两种或者更多种药物组合物可以以适于组合物的一同给药的药盒的形式被方便地组合。
因此，本发明的药盒包括两种或者多种单独的药物组合物，其中至少之一包含根据本发明的式(I)的化合物，并且该药盒包括用于单独地保存所述组合物的装置，诸如容器、分开的瓶、或者分开的箔包装。这样的药盒的实例是用于包装片剂、胶囊等的常见水泡眼包装。
本发明的药盒特别适于不同剂型的给药，例如口服给药和胃肠外的给药，适于以不同的服药间隔服用各单独的组合物，或者适于相互滴定各单独的组合物。为了帮助接受预定的疗程，药盒一般包含对于服用的指导，并且可以具有所谓的备忘辅助。
对于向人类病人的给药，本发明的化合物的总的日剂量一般在0.1mg～500mg的范围内，这当然取决于给药方式。例如，口服可能要求从0.1mg～500mg的总的日剂量，而静脉内剂量可以仅仅要求从0.1mg～50mg。总的日剂量可以以一次或者分开多次剂量进行给药。
这些剂量基于具有约65kg～70kg体重的普通人类对象。医师将能够容易地确定用于其体重在该范围之外的对象(诸如婴幼儿和老年人)的剂量。
本发明的化合物可以以各种方法通过已知的方式制备。在下面的反应路线中以及此后，除非另有说明，R1～R6为如第一方面中所定义的。这些方法形成了本发明的其他多个方面。
a)式(IC)的化合物，即其中R5为-Y-CO2R15并且R15为H的式(I)的化合物，一般可以由其中RA为烷基(具体来说，甲基、乙基或者叔丁基)或者苯甲基的式(II)的相应的酯来制备，如路线1所示。
路线1
当R15为甲基或乙基时，该转化可以通过用诸如氢氧化锂、氢氧化钠、或者氢氧化钾之类的碱金属氢氧化物在合适的溶剂中在约10℃和该溶剂的沸点之间的温度下处理式(II)的化合物来方便地实现。合适的溶剂包括水、甲醇、乙醇和水与甲醇、乙醇、四氢呋喃以及二氧杂环己烷的混合物。当R15为叔丁基时，该转化可以通过用诸如氯化氢或者三氟乙酸之类的酸在合适的溶剂中在0℃和环境温度之间的温度下处理式(II)的化合物来实现。合适的溶剂包括二氧杂环己烷和二氯甲烷。当R15为苯甲基时，该转化可以通过在诸如甲醇的合适溶剂中，用如上所述的碱金属氢氧化物处理式(II)的化合物，或者通过使用分子氢或者诸如甲酸铵的合适的氢给体在过渡金属或者过渡金属的盐的催化剂(诸如钯碳)的存在下进行氢解，来实现 当在(IC)的结构的另一部分中存在受保护的官能基团(诸如R1或R3中的氨基)时，选择R15和保护基团以使得它们在一次操作中都可以被去除，这可能是方便的。例如，如果氨基由BOC基保护，则将R15选择为叔丁基将允许用一次酸处理实现两个去掩蔽操作。类似地，如果苯甲基氧羰基是优选的胺保护基团，则使用苯甲基作为R15允许在一个氢解步骤中进行同时的去掩蔽。或者，保护基团和R15可以被选择为“正交”，即其中之一对于用于分解另一个的条件是稳定的。因此，去掩蔽是两步工艺，但是可以对中间体进行纯化步骤。
b)式(ID)的化合物，即其中R5为-Y-CO2R15并且R15不是H的式(I)的化合物，一般可以通过式(IC)的相应的酸的酯化来制备，如路线2所示，但是该步骤只有在R15的特性使得酯基-CO2R15与所用的合成步骤中的一步或者多步不相容的情况下才是必要的。
路线2
该转化可以通过在合适溶剂中，用诸如碳二亚胺(例如二氯己基碳二亚胺)或者N-(3-二甲氨基丙基)-N’-乙基碳二亚胺)的缩合剂，任选地在4-二甲氨基吡啶的存在下，在0℃和溶剂沸点之间的温度下处理式(IC)和醇R15-OH的混合物，来实现。
c)式(IIA)和(IIB)的化合物，其中除了R6A不能为氢之外，R6A与R6的定义相似，即其中R6不为氢的式(II)的化合物，可以由式(IIC)的化合物，即其中R6为H的式(II)的化合物来制备，如路线3所示。
路线3
将式(IIC)的化合物用诸如碱金属碳酸盐或碳酸氢盐(例如碳酸钾或碳酸铯)或者叔胺(例如三乙胺、二异丙基乙基胺、或吡啶)之类的碱和合适的氯化物(R6A-Cl)，溴化物(R6A-Br)，碘化物(R6A-I)，甲磺酸酯(R6A-OSO2CH3)或者甲苯磺酸酯(R6A-OSO2Tol)，在合适的溶剂中在-70℃和100℃之间的温度下进行处理。合适的溶剂包括诸如四氢呋喃和二氧杂环己烷之类的醚、二甲基甲酰胺和乙腈。还可以使用更强的碱，诸如氢化钠、叔丁氧化钾和六甲基二硅氮化钠或钾。或者，该转化可以使用Mitsunobu反应来实现，其中，式(IIC)的化合物和合适的醇R6A-OH在适当的溶剂中的溶液被用三苯基膦和诸如偶氮二甲酸二乙酯或者偶氮二甲酸二异丙酯的偶氮二甲酸二烷基酯处理。优选的溶剂是四氢呋喃。该反应优选在-10℃和环境温度之间的温度下进行。
当反应提供两种产品(IIA)和(IIB)的混合物时，可以使用标准技术将它们分离。
在合成工序的此阶段引入R6不总是必要的。通常在较早的阶段引入R6并将其维持到最终的产品是更方便的。
d)式(II)的化合物可以由相应的式(III)的单氯化物通过与HNR3R4反应来制备，如路线4所示。
路线4
将单氯化物(III)和胺HNR3R4在合适的两极性非质子溶剂中的溶液在升高的温度下搅拌1到24小时。合适的溶剂包括二甲基亚砜、二甲基甲酰胺和N-甲基吡咯烷酮。可以任选地包含过量的诸如N-乙基二异丙基胺、N-甲基吗啉或三乙胺之类的叔胺和/或诸如氟化铯或氟化四乙铵之类的氟化物源。在密闭的容器中在高压下进行该反应有时是必要的，特别是当胺HNR3R4或溶剂是挥发性的时。应当理解，HNR3R4中的任何官能基团，特别是任何伯胺或仲胺基团，可能需要被保护，以便使该反应可以顺利进行。
优选地，任选地在密闭容器中，将单氯化合物用3-5当量的胺HNR3R4和任选地2-5当量的N-乙基二异丙基胺在二甲基亚砜或N-甲基吡咯烷酮中，任选地在氟化铯或氟化四乙铵的存在下，在80-125℃下处理12-18小时。
或者，式(III)的化合物可以如在上面的a)部分中所述地那样被氢解，以提供相应的式(IV)的羧酸，然后将所述羧酸用胺HNR3R4进行处理，以提供式(IC)的化合物，如路线4a所示。
路线4a
优选地，任选地在密闭容器中，将单氯化合物(IV)用3-5当量的胺HNR3R4和任选地2-5当量的N-乙基二异丙基胺在二甲基亚砜或N-甲基吡咯烷酮中，任选地在氟化铯或氟化四乙铵的存在下，在80-125℃下处理12-18小时。
e)式(III)的化合物可以由相应的式(V)的二氯化物通过与HNR1R2反应来制备，如路线5所示。
优选地，任选地在密闭容器中，将单氯化合物用3-5当量的胺HNR3R4和任选地2-5当量的N-乙基二异丙基胺在二甲基亚砜或N-甲基吡咯烷酮中，任选地在氟化铯或氟化四乙铵的存在下，在80-125℃下处理12-18小时。
路线5
将二氯化物(V)，胺HNR1R2和任选地过量的诸如N-乙基二异丙基胺、N-甲基吗啉或者三乙胺之类的叔胺在合适的溶剂的溶液在环境温度或升高的温度下搅拌1到24小时。合适的溶剂包括二氯甲烷、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、乙腈、四氢呋喃和N-甲基吡咯烷酮。应当理解，HNR1R2中的任何官能基团，特别是任何伯胺或仲胺基团，可能需要被保护，以便使该反应可以顺利进行。优选地，将单氯化合物用3-5当量的胺HNR1R2和任选地2-5当量的N-乙基二异丙基胺在二氯甲烷、二甲基亚砜或二甲基亚砜和N-甲基吡咯烷酮的混合物中，在25-90℃下处理1-18小时。
或者，将胺HNR1R2在合适的溶剂中的溶液用丁基锂或六甲基二硅氮化钠在低温下进行处理，将二氯化物加入到所得溶液中。合适的溶剂包括四氢呋喃、二氧杂环己烷和N-甲基吡咯烷酮。
在某些情况下，特别是当Y为共价键并且胺HNR1R2仅仅是弱亲核性的时，将式(V)的化合物直接转化成式(III)的化合物得到了不令人满意的结果，并且可以采用更间接的可替代路线。此路线在下面的W)部分中进行描述。
f)式(V)的化合物可以由相应的式(VI)的吡唑并嘧啶二酮制备，如路线6所示。
路线6
将二酮用大量过量的诸如氧氯化磷(POCl3)或者苯基膦酰二氯(PhP(O)Cl2)之类的氯化试剂在诸如N-乙基二异丙基胺、N-甲基吗啉、三乙胺或N，N-二甲基苯胺之类的叔胺的存在下，在升高的温度下处理8-48小时。任选地，可以加入二甲基甲酰胺作为催化剂。或者，将二酮用POCl3或PhP(O)Cl2在合适的溶剂中在诸如氯化四乙铵的氯化四烷基铵的存在下，并且任选地在诸如N-乙基二异丙基胺的叔胺的存在下，在升高的温度下进行处理。合适的溶剂包括乙腈和丙腈。优选地，将二酮用10-30当量的POCl3和3-5当量的氯化四乙铵在丙腈或乙腈中在回流下处理4-24小时。
g)式(VI)的化合物可以由相应的式(VII)的氨基酰胺制备，如路线7所示。
路线7
将吡唑羧基酰胺(VII)和光气或其等同物(诸如1，1’-羰基二咪唑、氯甲酸三氯甲基酯或者碳酸二(三氯甲基)酯在合适的溶剂中的溶液在环境温度和溶剂的沸点之间的温度下、任选地在高压下搅拌2～18小时。合适的溶剂包括乙腈、二氯甲烷和二甲基甲酰胺。优选地，将式(VII)的胺和1-2.5当量的1，1’-羰基二咪唑在N，N-二甲基甲酰胺、乙腈或二氯甲烷中的溶液在室温和该反应的回流温度下加热1到18小时。
h)式(VII)的化合物可以由相应的式(VIII)的硝基酰胺制备，如路线8所示。
路线8
硝基的还原可以通过例如转移氢化或催化氢化，或者通过溶解金属还原来实现。
对于转移氢化，硝基化合物在诸如四氢呋喃、甲醇或乙醇的极性溶剂中，在诸如钯或者氢氧化钯(II)之类的过渡金属或过渡金属盐的催化剂的存在下，任选地在升高的温度和压力下，与合适的诸如甲酸铵或者环己烯之类的氢给体反应。
对于催化氢化，将硝基化合物在诸如四氢呋喃、甲醇或者乙醇中的溶液在氢气氛下，在诸如钯或者氢氧化钯(II)之类的过渡金属或过渡金属盐的催化剂的存在下，任选地在升高的温度和压力下进行搅拌。催化剂可以处在溶液中(均相催化剂)或者处在悬浮体系中(异相催化剂)。
对于溶解金属还原，将硝基化合物在诸如乙酸或者氢氯酸的存在下用合适的诸如锌或锡之类的反应性金属进行处理。也可以使用其他的还原剂，诸如氯化锡(II)。
i)式(VIII)的化合物可以由相应的式(IX)的硝基酯制备，如路线9所示。
路线9
式(IX)的甲基酯化合物可以如上面的a)部分所述被氢解。然后通过用草酰氯和二甲基甲酰胺在诸如二氯甲烷的合适溶剂中进行处理，或者用亚硫酰氯进行处理，将该酸转化成相应的酸氯化物。最后，该酸氯化物在诸如二氯甲烷、四氢呋喃或者二氧杂环己烷之类的合适的溶剂中的溶液用气态氨或者氨水在-78℃和室温之间进行处理，以提供式(VIII)的酰胺。
在其中Y是共价键并且R15为甲基的实施例(IXA)中，使用1当量的金属氢氧化物导致邻近R6取代基的酯基的化学选择性水解(Chambers，D.etal.，J.Org.Chem.50，4736-4738，1985)，如路线9A所示。
路线9A
j)其中R6A为除氢之外的根据R6的任何基团的式(IXB)的化合物，即除了其中R6为氢的式(IX)的化合物，可以由相应的式(IXC)的酯来制备，如路线10所示。
路线10
将式(IXC)的化合物用烷基化剂和碱的组合，或者如在上面部分c)中所述的用醇、三苯基膦和偶氮二甲酸二烷基酯进行处理。
k)其中R15为甲基并且Y为共价键的式(IXC)的化合物在已公布的国际专利申请WO00/24745(参见Preparation 2，page 48)中有描述。式(IX)的其他化合物，特别是式(IXC)的化合物，可以由式(X)的二元酸以两步制备，如路线11所示。
路线11
在第一步中，将式(X)的化合物用诸如硝酸或者硝酸和硫酸的混合物之类的硝化剂进行处理，以提供式(XI)的化合物。在第二步中，两个羧酸基团被酯化。当R15为甲基时，这在一次操作中被方便地实现。当R15不是甲基时，需要两个子步骤，并且两个基团被酯化的次序将取决于Y和R6的性质。适于形成酯的条件是本领域所公知的。当R15为甲基时，优选的方法是用亚硫酰氯处理二元酸，以形成二氯化物，然后使之与甲醇反应。
I)式(X)的某些化合物是商业上可得的，或者在文献中有描述，特别是其中Y为共价键的那些化合物。式(X)的没有商业化的那些化合物可以如路线12，13和14那样进行制备。
路线12
路线12中所示的方法是Knorr吡唑合成法。将式(XII)的1，3-二酮与肼反应以提供式(XIIIA)的吡唑，或者与被取代的肼R6A-NHNH2(其中R6A如上面c)部分中所定义的)反应以提供式(XIIIB)的吡唑。
式(XIIIB)的吡唑还可以采用上面的c)部分中所述的方法通过相应的式(XIIIA)的吡唑的N-烷基化来获得。然后，如在上面的a)部分中所述的酯基的水解提供式(X)的化合物。
式(XII)的化合物可以利用如路线13中所示的交叉Claisen缩合由相应的式(XIV)的甲基酮制备。
路线13
将式(XIV)的甲基酮在合适的溶剂中在合适的碱的存在下与草酸二甲酯反应。合适的溶剂包括诸如四氢呋喃的醚。合适的碱包括氢化钠、叔丁氧化钾和二异丙基酰胺锂。或者，甲醇钠可以被用作碱，甲醇用作溶剂。
路线14
路线14中所示的方法为Pechmann吡唑合成法。重氮化合物和乙炔被化合以生成式(XIIIA)的吡唑。当Y不是共价键时，可以考虑该方法的两个变例。可以将式(XV)的乙炔与重氮乙酸甲酯化合，或者可以将式(XVI)的重氮化合物与丙炔酸甲酯化合。如上所述，可以将式(XIIIA)的产物向前进行。
除了上述的方法之外，如在下面将进一步说明的，通式(III)和(IV)的某些化合物可以通过修饰在吡唑并嘧啶的C-3位置处的取代基来制备。应该理解，所讨论的合成转化也可以用于诸如式(IX)的吡唑的前驱体化合物的制备。
m)式(IIIA)的化合物，即其中Y为CH2的式(III)的化合，可以由相应的式(IVA)的化合物，即其中Y是共价键的式(IV)的化合物，通过诸如Arndt-Eistert反应的一碳同系化法来制备，如路线15所示。
路线15
羧酸被转化成诸如酸的氯化物(通过与草酰氯反应)或者混合酸酐(通过与氯甲酸异丁酯反应)之类的活性中间体。将此中间体与重氮甲烷反应，以提供α-重氮酮。在将其在R15-OH的存在下用氧化银处理，以提供式(IIIA)的同系化的酯。
n)式(IVB)的化合物，即其中Y为CH2的式(IV)的化合物，可以由相应的式(XVII)的腈通过路线16所示的方法来制备。
路线16
该腈可以例如通过用含水无机酸，诸如盐酸进行处理而被水解。
o)式(XVII)的化合物可以由相应的式(XVIII)的氯化物通过路线17所示的方法来制备。
路线17
将该氯化物用诸如氰化钠或者氰化钾之类的金属氰化物在诸如二甲基亚砜、二甲基甲酰胺或乙醇之类的合适溶剂中进行处理。
p)式(XVIII)的化合物可以由相应的式(XIX)的醇通过路线18所示的方法来制备。
路线18
将该醇用三苯基膦和N-氯琥珀酰亚胺或四氯甲烷的混合物，或者用亚硫酰氯进行处理。
q)式(XIX)的化合物可以通过路线19所示的方法，由相应的式(IIIB)的酯，即根据式(III)的其中Y是共价键的化合物，或者由相应的式(IVA)的酸来制备。
路线19
式(IVA)的酸和式(IIIB)的酯可以通过在合适的溶剂中在0℃和溶剂沸点之间的温度下用氢化锂铝进行处理，而还原成式(XIX)的醇。合适的溶剂包括诸如四氢呋喃之类的醚。该酸也可以通过用氯甲酸异丁酯和叔胺碱进行处理以提供混合酸酐，随后与硼氢化钠进行反应，而被还原。该酯也可以通过用氢化二异丁基铝或者硼氢化锂进行处理而被还原。
r) 式((IIIC)的化合物，即其中Y是CH2CH2的式(III)的化合物，可以通过路线20所示的方法，由相应的式(XX)的丙烯酸酯来制备。
路线20
还原(XX)的碳碳双键以提供式(IIIC)的化合物可以通过在诸如钯、铂或者镍的过渡金属催化剂的存在下使用分子氢的催化氢化来实现。当R15为苯甲基时，可以对条件进行选择，以使得仅仅所述双键被还原，或者还原伴随酯的氢解分解，以提供羧酸。
式(XX)的丙烯酸酯也可以用烷基铜试剂进行处理，以提供式(IIIC)的化合物的类似物，其中烷基取代基被引入到紧邻吡唑并嘧啶环体系的碳原子上，或者也可以用于锍内鎓盐或者卡宾等同物进行处理，以提供2-(吡唑并嘧啶基)-环丙烷-1-羧酸酯衍生物。
s)式(XX)的化合物可以由相应的式(XXI)的醛通过路线21所示的方法来制备。
路线21
式(XXI)的醛可以通过采用Wittig，Horner或Wadsworth-Horner-Emmons反应规则与磷试剂进行反应，转化成式(XX)的丙烯酸酯。该试剂通过将三苯基鏻盐Ph3P+CH2CO2R15.X-(Wittig)，氧化膦Ph2P(O)CH2CO2R15(Horner)，或者膦酸酯(EtO)2P(O)CH2CO2R15(Wadsworth-Horner-Emmons)，在诸如四氢呋喃之类的合适溶剂中用诸如丁基锂、二烷基酰胺锂或者碱金属烷氧化物之类的碱进行处理来制备，其中X-为合适的阴离子，诸如例如氯、溴或碘的卤离子。
该方法不限于α-未取代丙烯酸酯的制备。使用烷基取代的磷试剂可以获得相应的α-烷基丙烯酸酯衍生物(XXZZ)，所述磷试剂诸如为Ph3P+CH(Rα)CO2R15.X-或者等同的氧化膦或者膦酸酯，其中Rα是烷基，并且其中X-为合适的阴离子，诸如例如氯、溴或碘的卤离子。
式(XXI)的醛到式(XX)的丙烯酸酯的转化也可以通过采用Knoevenagel缩合的方法与丙二酸的衍生物反应来实现。
t)式(XXI)的化合物可以通过路线22所示的方法由式(IIIB)的酯或者更优选地由相应的式(XIX)的醇来制备。
路线22
式(IIIB)的酯的还原可以利用氢化二异丁基铝(DIBAL)在合适的溶剂中在低于0℃，优选低于-60℃的温度下来实现。合适的溶剂包括诸如戊烷、己烷和甲苯之类的烃，诸如四氢呋喃之类的酯，以及它们的混合物。
式(XIX)的醇的氧化可以使用诸如吡啶氯铬酸盐的铬(VI)试剂，诸如Dess-Martin过碘烷的超价碘试剂，或者过钌酸四正丙基铵和N-甲基吗啉-N-氧化物的组合在合适的溶液中在0℃和环境温度之间的温度下来实现。
u)式(XXI)的醛可以转化为式(IIIA)的酯，如路线23所示。
路线23
将醛用甲基·甲硫基甲基亚砜(CH3SCH2S(O)CH3)和triton B在四氢呋喃中进行处理，提供中间体(XXII)，将该中间体用适当的醇R15OH和乙酰氯处理，提供式(IIIA)的酯。该方法在R15为甲基时特别有用。
v)式(IIIC)的化合物也可以通过路线24所示的方法由相应的式(XVIII)的氯化物来制备。
路线24
将式(XVIII)的氯化物与丙二酸二烷基酯(R15O2C)2CH2和碱在合适的溶剂中反应。一般来说，碱是碱金属烷氧化物，诸如乙醇钠或者叔丁氧化钾，并且溶剂是诸如乙醇的醇和诸如四氢呋喃的醚。优选地，选择碱和溶剂，以使其与丙二酸酯试剂和中间体(XXIII)的酯交换最小化。例如，当试剂是丙二酸二乙酯时，碱优选是乙醇钠并且溶剂为乙醇。然后，将中间体(XXIII)脱羧，以提供产物(IIIC)。这可以通过使用1当量的诸如氢氧化钠之类的碱金属氢氧化物进行选择性水解然后进行酸化来实现，或者通过本领域已知的任何其他方法来实现。
该方法不限于对称的丙二酸酯。例如，使用丙二酸叔丁·甲酯将提供其中一个R15为甲基而另一个为叔丁基的中间体(XXIII)。然后通过选择适当的条件，可以控制脱羧以提供其中R15或者是甲基或者是叔丁基的产物(IIIC)。
可以将该方法延伸到取代丙二酸酯(R15O2C)2CHR，其中R为烷基。这可以获得类似于(IIF)的化合物，其中基团R为紧邻R15O2C基团的碳原子上的取代基。这些化合物也可以通过在碱金属烷氧化物碱的存在下用R-Br或R-I对中间体(XXIII)烷基化来制备。
w)如在上面e)部分所述的，式(VA)的化合物，即其中Y为共价键的式(V)的化合物与弱亲核性胺HNR1R2的反应有时收率不高。替代路线示于路线25A和25B中。
路线25A
根据上面q)部分中所述的方法，可以将式(VA)的酯还原为式(XXIV)的醇。优选的方法是在-20℃和0℃之间的温度下用氢化二异丁基铝进行还原。然后对伯醇进行保护，以提供式(XXV)的化合物，其中PG为醇保护基团。优选的保护基团为三烷基甲硅烷基，特别优选叔丁基二甲基甲硅烷基。然后根据上面e)部分中所述的方法，将式(XXV)的化合物与胺HNR1R2反应，以提供式(XXVI)的化合物。
路线25B
利用适当的条件，将式(XXVI)的化合物去保护以提供式(XXVII)的伯醇。当PG为三烷基甲硅烷基时，其可以通过用诸如氟化四丁基铵的氟化物盐进行处理，或者用氢氯酸进行处理而去除。然后，根据上面的d)部分中所述的方法引入-NR3R4基团，以提供式(XXVIII)的化合物。如上面t)部分中所述的，氧化伯醇，以提供式(XXIX)的醛。优选的氧化剂是Dess-Martin过碘烷。最后，将式(XXIX)的醛氧化，以提供式(ID)的酸，即其中Y是共价键的式(IC)的化合物。合适的氧化剂包括高锰酸钾、Jones’试剂和亚氯酸钠。优选的方法是将醛用亚氯酸钠、磷酸二氢钠和2-甲基-2-丁烯在叔丁醇中在室温下处理约1小时。
或者，可能优选的是在与HNR3R4反应之前，使用前述的方法，进行式(XXVII)的醇到相应的酸(经过相应的醛)的氧化，以提供式(ID)的化合物。
x)式(IE)的化合物，即其中R5为-Y-R16的式(I)的化合物，可以由相应的式(XXX)的单氯化物来制备，如路线26所示。
路线26
如上面d)部分中所示，将式(XXX)的单氯化物与胺HNR3R4反应。
或者，-NR3R4基可以被引入适当的前驱体，然后制备-Y-R16基团。
y)式(XXXA)的化合物，即其中R16为-CONHR18的式(XXX)的化合物，可以由相应的式(IV)的化合物来制备，如路线27所示。
路线27
将式(IV)的酸用适当的磺酰胺R18-NH2和碳二亚胺在合适的溶剂中在4-(二甲氨基)吡啶的存在下进行处理。合适的溶剂是二甲基甲酰胺或者二氯甲烷。在最后的步骤中，即在制备-NR3R4基团之后引入R18-NH2有时是优选的。
优选地，将该酸用1.3当量的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺氢氯化物、1.3当量的4-二甲氨基吡啶和1.2-1.3当量的磺酰胺R18-NH2，在二氯甲烷中在室温下处理至多18小时。
z)其中R16为杂环羧酸电子等排物(诸如四唑-5-基(式(XXXB)的化合物)，5-三氟甲基-1，2，4-三唑-3-基(式(XXXC)的化合物)和2，5-二氢-5-氧代-1，2，4-噁二唑-3-基(式(XXXD)的化合物))的式(XXX)的化合物可以由式(XXXI)的化合物使用诸如路线28A，28B和28C中所示的标准方法来制备。
路线28A
将式(XXXI)的腈用叠氮化合物，诸如碱金属叠氮化物(M＝Na，K)，三烷基甲硅烷基叠氮化物(M＝alkyl3Si)或者三烷基锡叠氮化物(M＝alkyl3Sn)，在合适的溶剂中在环境温度和溶剂沸点之间的温度下进行处理。优选的叠氮化物是三丁基锡叠氮。优选的溶剂是二氧杂环己烷。
路线28B
将式(XXXI)的腈用乙醇和氯化氢处理形成亚氨酸酯，然后将其用氨处理以形成脒。将脒用三氟乙酸乙酯和肼进行处理，以提供式(XXXC)的三唑。5-(甲基磺酰基)-取代的三唑可以用类似的方式制备。
路线28C
将式(XXXI)的腈用羟胺处理，以形成N-羟基脒，然后将其用1，1’-羰基二咪唑处理，以提供式(XXXC)的噁二唑酮。
aa)式(XXXI)的化合物可以使用如上面o)部分中所述的方法来制备，或者使用如路线29中所示的方法由式(IV)的化合物来制备。
路线29
采用上面i)部分中所述的方法，将式(IV)的酸转化成相应的伯酰胺。然后利用三氟乙酸酐将该酰胺脱水。
bb)其中Y为-CH2-O-CH2-的式(III)或者(XXXI)的化合物可以由式(XIX)的醇通过用α-卤代乙酸烷基酯或者α-卤代乙腈衍生物进行烷基化来制备，如路线29所示。
路线30
HaI为氯、溴或者碘，优选为氯或者溴。醇(XIX)和烷基化剂在合适的溶剂中在诸如碳酸钾或者氢化钠之类的碱的存在下化合。合适的溶剂包括四氢呋喃和二甲基甲酰胺。
本领域技术人员将理解，式(I)的某西化合物可以经过标准的化学转化以提供式(I)的替代化合物，例如实例184的制备，通过烷基醚的脱烷基化进行。
对于式(I)的化合物的制备的此前所述的方法的某些步骤，可能必要的是，保护不希望发生反应的潜在活性官能团并且最终裂解所述保护基团。在这样的情况下，可以使用任何相容的保护基。具体地，可以使用诸如T.W.GREENE(Protective Groups in Organic Synthesis，A.Wiley-Interscience Publication，1981)或者P.J.Kocienski(Protecting groups，Georg Thieme Verlag，1994)所述的那些保护和去保护的方法。
下面的化合物形成本发明的其他方面。
式(III)的化合物
其中R1，R2，R6，RA和Y如上所定义。
优选的是式(IIID)的化合物。

其中R1，R2，R6，RA和Y如上所定义。
式(V)的化合物
其中R6，RA和Y如上所定义。
优选的是式(VB)的化合物。

其中R6，RA和Y如上所定义。
通过下面的非限制性实例进一步来说明本发明。
熔点使用玻璃毛细管在Gallenkamp熔点仪上测定，并且没有经过校正。除非另有说明，所有反应在氮气氛下进行，使用商业上可得的无水溶剂。‘0.88Ammonia’是指比重为约0.88的商业上可得的氨水溶液。薄层色谱在玻璃支撑的预涂覆Merck硅胶(60 F254)板上进行，并且利用40-63μm硅胶(Merck silica gel 60)进行硅胶柱色谱。利用已用去离子水预先冲洗的专用离子交换树脂进行离子交换色谱。质子NMR谱在规定溶剂中在Varian Inova 300，Varian Inova 400，或Varian Mercury 400谱仪上测量。在NMR谱中，仅仅报道了与溶剂峰明显不同的不可交换的质子。以Fisons Trio 1000，使用热喷雾正电离，或者以Finnigan Navigator，使用电喷雾正或负电离，来记录低分辨质谱。以Bruker Apex II FT-MS，使用电喷雾正电离来记录高分辨质谱。燃烧分析由Exeter Analytical UK.Ltd.，Uxbridge，Middlesex进行。旋光性在25℃下使用Perkin Elmer 341旋光计利用规定的溶剂和浓度来测定。指定为(+)或(-)旋光异构体的实例化合物基于在合适溶剂中进行测定时的旋光符号来标定。
缩写、定义和术语表 AcOH 乙酸

15离子交换树脂，可从Aldrich Chemical Company获得 APCI 大气压化学电离 ArbocelTM 过滤剂，从J.Rettenmaier & Sohne，Germany得到 atm 大气压(1atm＝760Torr＝101.3kPa) BiotageTM 色谱，使用得自Biotage，UK的Flash75硅胶盒进行 BOC 叔丁氧羰基 br宽的 c 浓度，用于旋光性测量，单位为克每100ml(1mg/ml 为c0.10) cat 催化 CBz 苯甲氧羰基 CDI N，N’-羰基二咪唑 d 双峰 DCC N，N’-二环己基碳二亚胺 DCM 二氯甲烷 dd双二重峰 DEAD 偶氮二甲酸二乙酯

10110wt％钯活性碳，可得自Aldrich Chemical Company 的Degussa type E101 Dess-Martin过 1，1，1-三乙酰氧基-1，1-二氢-1，2-苯碘酰-3(1H)-酮 碘烷 Develosil 由Phenomenex提供-Nomura Chemical Co.制造由 Combi-RP C30 具有C30链化学键合表面的球形硅石粒子组成(尺寸3 hplc柱μm或5μm)。这些粒子被填装在内部直径为2cm并 且长为25cm的不锈钢柱中。
DIAD 偶氮二甲酸二异丙酯 DIBAL 氢化二异丁基铝 DMAP 4-二甲氨基吡啶 DMFN，N-二甲基甲酰胺 DMSO 二甲基亚砜

离子交换树脂，得自Aldrich Chemical Company ee 对映异构体过量 Et3N 三乙胺 EtOAc 酸乙酯 EtOH 醇 HOAT 1-羟基-7-氮杂苯并三唑 HOBT 1-羟基苯并三唑水合物 HRMS 高分辩质谱(电喷雾电离正扫描) Hünig’s碱 N-乙基二异丙基胺 HyfloTM Hyflo supercel

，得自Aldrich Chemical Company KHMDS 二(三甲基甲硅烷基)酰胺钾 liq液体 LRMS 低分辩质谱(电喷雾或热喷雾电离正扫描) LRMS(ES-) 低分辩质谱(电喷雾电离负扫描) m 多重峰 m/z质谱峰 MCI TM凝胶 多孔聚合物，CHP20P75-150m，得自Mitsubishi Chemical Corporation MeOH 甲醇 Mukaiyama’s试 碘化2-氯-1-甲基吡啶鎓 剂 NaHMDS 二(三甲基甲硅烷基)酰胺钠 NMMN-甲基吗啉 NMO 4-甲基吗啉N-氧化物 NMP 1-甲基-2-吡咯烷酮 Phenomenex 由Phenomenex提供。由具有C18链化学键合表面的 Luna C18 hplc 球形硅石粒子组成(尺寸5μm或10μm)。这些粒子被 柱 填装在内部直径为2.1cm并且长为25cm的不锈钢柱中。
psi 磅每平方英寸(1psi＝6.9kPa)

六氟磷酸苯并三唑-1-基氧三(吡咯烷)鏻

六氟磷酸溴-三吡咯烷-鏻 q四重峰 Rf TLC的保留因子 s单峰

反相C18硅胶盒，Waters Corporation t三重峰 TBDMS-Cl 叔丁基二甲基氯硅烷 TFA 三氟乙酸 THF 四氢呋喃 TLC 薄层色谱 TMS-Cl 氯三甲基硅烷 WSCDI氢氯化1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺 δ化学位移 下面的实例描述了式(I)的化合物的制备 制备1 (3R)-3-甲氧吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
将(3R)-3-羟基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(12.5g，66.70mmol)溶解在四氢呋喃(334mL)中，并且将反应混合物在冰水浴中冷却到0℃。将反应混合物用80％的矿物油中的氢化钠(2.20g，73.3mmol)进行处理，并且进行搅拌直到回到室温。然后将反应混合物用碘甲烷(14.5g，100.0mmol)进行处理，并且在室温下搅拌18小时。将反应混合物用水(100mL)稀释，并且在真空下浓缩直到仅仅保留水相。将水溶液用乙酸乙酯(750mL)进行处理，分离有机层，用硫酸镁干燥，并且在真空下浓缩，得到棕色油状的标题产物，12.48g。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.41(s，9H)，1.95(m，2H)，3.30(s，3H)，3.40(m，4H)，3.86(m，1H) 制备2 (3S)-3-甲氧吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
标题产物通过类似于制备1中所述的方法，使用(3S)-3-羟基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯来制备。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.41(s，9H)，1.95(m，2H)，3.30(s，3H)，3.40(m，4H)，3.86(m，1H) 制备3 氢氯化(3R)-3-甲氧基-吡咯烷
将氯化氢鼓泡通过得自制备1的化合物(6.02g，30.0mmol)在二氯甲烷(30ml)中的冰水冷却溶液，然后允许反应混合物升温到室温并且搅拌48小时。在减压下浓缩该溶液，并且将残余物用醚研磨。将所得的晶体滤出并且在真空下干燥，得到标题化合物。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ2.06(m，1H)，2.20(m，1H)，3.26-3.42(m，7H)，4.17(m，1H). 制备4 氢氯化(3S)-3-甲氧基-吡咯烷
标题产物采用类似于制备3中所述的方法，由得自制备2的化合物得到。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ2.14(m，1H)，2.20(m，1H)，3.24-3.44(m，7H)，4.18(m，1H). 制备5 2-氯嘧啶-4-基胺
将2，4-二氯嘧啶(625mg，4.23mmol)溶解在正丁醇(3mL)中，将该溶液用氨(620μL)处理。将反应混合物加热到100℃，在使其冷却到室温之前保持20分钟。加入甲醇以帮助溶解在冷却时形成的沉淀，并且将溶液在真空下浓缩。通过柱色谱在硅胶上以100:0到96:4的二氯甲烷甲醇洗脱，而将残余物纯化。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ6.41(d，1H)，7.90(d，1H) 制备6 2-甲氧基嘧啶-4-基胺
将制备5的含氯化合物(1.52g，11.8mmol)溶解在甲醇(17mL)中，并且将该溶液用甲醇钠在甲醇中的4.62M溶液(2.8mL，12.9mmol)进行处理。然后将反应混合物在氮气下回流6小时。将反应混合物热过滤，并且在真空下浓缩至2mL的体积，以结晶出固体。将粗产物从甲醇中再结晶，并且在烘箱中干燥，得到标题产物，390mg。
1H NMR(DMSO-D6，400MHz)δ3.75(s，3H)，6.05(d，1H)，6.80(m，2H)，7.80(d，1H) 制备7 4-硝基-1-(2-丙氧基乙基)-1H-吡唑-3，5-二甲酸二甲酯
将4-硝基-1H-吡唑-3，5-二甲酸二甲酯(WO00/24745，48页，preparation 2)(15g，60mmol)，2-丙氧基乙醇(8.2mL，70mmol)和三苯基膦(18.9g，70mmol)溶解在四氢呋喃(150mL)中，并且将溶液冷却到0℃。将溶液用偶氮二甲酸二异丙酯(14.2mL，70mmol)进行处理，并且将反应混合物在升温到室温之前在0℃下搅拌3小时。将反应混合物在真空下浓缩，并且通过柱色谱在硅胶上以15:85的乙酸乙酯戊烷、然后再用二氯甲烷洗脱，而将残余物纯化，得到标题化合物。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ0.82(t，3H)，1.47(q，2H)，3.34(t，2H)，3.78(t，2H)，3.91(s，6H)，4.76(t，2H).MS APCI+ m/z 316[MH]+ 制备8 (2’R)-1-(2’-甲氧基丙基)-4-硝基-1H-吡唑-3，5-二甲酸二甲酯
标题化合物通过类似于制备7中所述的方法利用(2R)-2-甲氧基丙醇来制备(Chem.Eur.J.，1997，3(12)，2063-2070)。通过柱色谱在硅胶上以20:80的戊烷二氯甲烷洗脱，而将标题化合物纯化。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.18(d，3H)，3.20(s，3H)，3.70(m，1H)，3.92(s，3H)，3.94(s，3H)，4.42(m，1H)，4.74(m，1H).MS APCI+ m/z302[MH]+ 制备9 1-(2-异丙氧乙基)-4-硝基-1H-吡唑-3，5-二甲酸二甲酯
将4-硝基-1H-吡唑-3，5-二甲酸二甲酯(11.4g，50mmol)溶解在四氢呋喃(200mL)中，并且将溶液用三苯基膦(14.4g，55mmol)和2-异丙氧基乙醇(6.36mL，55mmol)进行处理。将混合物用冰水浴冷却到0℃，并且在10分钟内逐滴加入偶氮二甲酸二异丙酯(10.8mL，55mmol)，同时将温度保持在20℃和30℃之间。然后将反应混合物在室温下搅拌30分钟。将反应混合物在真空下浓缩，并且将粗产物与二氯甲烷共沸，得到标题产物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.02(d，6H)，3.45(m，1H)，3.72(t，2H)，3.90(s，3H)，3.94(s，3H)，4.74(t，2H).MS ES+ m/z 216[MH]+ 下方所示的通式的如下化合物通过类似于制备9中所述的方法，利用合适的R6OH醇来制备。



·制备11使用2-(环丙基甲氧基)乙醇(FR 2248255，Pg.2，example 1)作为R6OH醇进行制备。
·制备12使用四氢-2H-吡喃-4-甲醇(DE 4233431，Pg.4，example 1)作为R6OH醇进行制备。
制备14 1-(2-乙氧基乙基)-4-硝基-1H-吡唑-3，5-二甲甲酸二甲酯
将4-硝基-1H-吡唑-3，5-二甲酸二甲酯(2.0g，8.83mmol)添加到2-乙氧基乙基溴(1.18mL，10.45mmol)和碳酸钾(1.32g，9.56mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(35mL)的溶液中，并且将反应混合物在室温下搅拌48小时。将反应混合物在真空下浓缩，并且将残余物在乙酸乙酯(200mL)和水(100mL)之间分配。分离有机层，用硫酸镁干燥，并且在真空下浓缩。通过柱色谱在硅胶上以1000到7030的戊烷乙酸乙酯洗脱，而将粗产物纯化，得到标题化合物1.63g。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.07(s，3H)，3.41(q，2H)，3.73(t，2H)，3.89(s，3H)，3.94(s，3H)，4.76(t，2H).MS APCI+ m/z 302，[MH]+ 制备15 1-[2-(2-甲氧基乙氧基)乙基]-4-硝基-1H-吡唑-3，5-二甲酸二甲酯
将4-硝基-1H-吡唑-3，5-二甲酸二甲酯(9.539，41.6mmol)和碳酸钾(3.449，25mmol)在氮气下溶解在N，N-二甲基甲酰胺(140mL)中。然后将混合物用1-溴-2-(2-甲氧基乙氧基)乙烷(9.909，54mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(10mL)中的溶液进行处理。将反应混合物在30℃下搅拌18小时，然后使其冷却到室温。加入额外的1-溴-2-(2-甲氧基乙氧基)乙烷(9.909，54mmol)和碳酸钾(3.449，25mmol)，并且将反应混合物在30℃下搅拌4小时。将反应混合物在真空下浓缩，并且将残余物置于乙酸乙酯(200mL)和水(200mL)中。将水相分离，并用乙酸乙酯(200mL)冲洗。将有机物合并并且用水冲洗。将有机层在硫酸镁上干燥，并且在真空下浓缩，得到标题产物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ3.25(s，3H)，3.38(m，2H)，3.50(m，2H)，3.80(t，2H)，3.92(s，3H)，3.93(s，3H)，4.77(t，2H).MS APCI+ m/z 333[MH]+ 制备16 1-(2-甲氧基乙基)-4-硝基-1H-吡唑-3，5-二甲酸二甲酯
标题化合物通过类似于在制备15中所述的方法，使用1-溴-2-甲氧基乙烷来制备。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ3.22(s，3H)，3.67(m，2H)，3.89(m，6H)，4.77(m，2H) MS ES+ m/z 288[MH]+ 制备17 4-硝基-1-(2-丙氧基乙基)-1H-吡唑-3，5-二甲酸3-甲酯
将制备7中的酯(150mg，0.5mmol)和氢氧化钾(29mg，0.55mmol)溶解在甲醇(2mL)中，并且将反应混合物在室温下搅拌48小时。将反应混合物在真空下浓缩，并且将残余物置于水中。将水相用醚冲洗(x2)，并且用二氯甲烷萃取。然后将有机相用2M盐酸(x2)和water(x2)冲洗，在硫酸镁上干燥并且在真空下浓缩，得到标题产物。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ0.83(t，3H)，1.49(q，2H)，3.36(t，2H)，3.80(t，2H)，3.90(s，3H)，4.78(t，2H).MS APCI+ m/z 302[MH]+ 制备18 4-硝基-1-(2-乙氧基乙基)-1H-吡唑-3，5-二甲酸3-甲酯
将制备14中的酯(1.63g，5.4mmol)加入氢氧化钾(330mg，5.9mmol)在甲醇(20mL)中的溶液中，并且将反应混合物在室温下搅拌18小时。将反应混合物在真空下浓缩，并且将粗产物溶解在水中，并用醚冲洗。将水相用2M的盐酸酸化，并且萃取到二氯甲烷(3×100mL)中。将有机物合并，在硫酸镁上干燥，并且在真空下浓缩，得到标题产物。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ1.07(s，3H)，3.47(q，2H)，3.80(t，2H)，3.88(s，3H)，4.77(t，2H).MS APCI+ m/z 288[MH]+ 制备19 1-(2-异丙氧基乙基)-4-硝基-1H-吡唑-3，5-二甲酸3-甲酯
将制备9中的酯(15.8g，50mmol)溶解在甲醇(200mL)中，并且将该溶液在冰水浴中冷却，之后用氢氧化钾(2.8g，50mmol)处理。然后将反应混合物在温室下搅拌18小时。将反应混合物在真空下浓缩，并且将残余物在二氯甲烷(500mL)和水(250mL)之间分配。将水相分离，用盐酸酸化，然后用二氯甲烷萃取(2×500mL)。将合并的二氯甲烷萃取物在硫酸镁上干燥，并且在真空下浓缩，得到白色固体状的标题产物11.4g。
1H NMR(DMSO-D6，400MHz)δ0.92(d，6H)，3.45(m，1H)，3.67(t，2H)，3.82(s，3H)，4.66(t，2H).MS ES+ m/z 302[MH]+ 下方所示的通式的如下化合物通过类似于制备19中所述的方法，使用制备8，10，11，13，15和16中的适当的酯来制备。


制备26 4-硝基-1-(四氢吡喃-4-基甲基)-1H-吡唑-3，5-二甲酸3-甲酯
将制备12中的酯(13.7g，42mmol)加入到氢氧化钾(2.59g，46.2mmol)在甲醇(200mL)中的溶液中，并将反应混合物在室温下搅拌18小时。将反应混合物在真空下浓缩，并且将残余物在二氯甲烷(300mL)和水(200mL)之间进行分配。将二氯甲烷层在真空下浓缩，并且将残余物在醚(200mL)和水(200mL)之间分配。将水相加入到第一水相萃取物，用醚冲洗(2×200mL)，并用氢氯酸酸化。将溶液用二氯甲烷萃取(3×400mL)，在硫酸镁上干燥并且在真空下浓缩，得到标题产物。
1H NMR(DMSO-D6，400MHz)δ1.24(m，2H)，1.36(m，2H)，2.10(m，1H)，3.20(m，2H)，3.78(m，2H)，3.84(s，3H)，4.43(d，2H)，MS APCI+ m/z 314[MH]+ 制备27 5-氨基甲酰基-4-硝基-1-(2-丙氧基乙基)-1H-吡唑-3-羧酸甲酯
将制备17中的羧酸(13.2g，44mmol)溶解在二氯甲烷(140mL)中，并且将溶液用N，N-二甲基甲酰胺(150μL)处理。将混合物在丙酮冰水浴中冷却到-5℃，并且在30分钟内逐滴加入草酰氯(11.48mL，132mmol)。将反应混合物在-5℃下搅拌1小时，然后升温到室温，并且再搅拌90分钟。将反应混合物在真空下浓缩，并且将残余物与二氯甲烷(x2)共沸。将粗产物溶解在四氢呋喃中，并且在冰水浴中冷却。将0.88Ammonia(60mL)在10分钟内加入到反应混合物中，去除冰水浴，并且将反应混合物搅拌1小时直到室温。将反应混合物在真空下浓缩，并且将残余物置于水中。将所形成的沉淀滤出，并且在烘箱中在70℃下干燥18小时，得到标题产物10.22g。
1H NMR(DMSO-D6，400MHz)δ0.81(t，3H)，1.45(q，2H)，3.32(t，2H)，3.74(t，2H)，3.90(s，3H)，4.40(t，2H)，8.33(s，1H)，8.48(s，1H) 制备28 5-氨基甲酰基-1-(2-甲氧基乙基)-4-硝基-1H-吡唑-3-羧酸甲酯
标题化合物通过类似于制备27中所述的方法使用制备24中的羧酸来制备。
1H NMR(DMSO-D6，400MHz)δ3.18(s，3H)，3.65(m，2H)，4.82(s，3H)，4.38(m，2H)，8.33(m，1H)，8.47(m，1H).MS ES+ m/z 273[MH]+ 制备29 5-氨基甲酰基-1-(2-乙氧基乙基)-4-硝基-1H-吡唑-3-羧酸甲酯
将草酰氯(1.2mL，13.76mmol)和N，N-二甲基甲酰胺(39μL)加入到制备18中的羧酸(1.33g，4.63mmol)在二氯甲烷(20mL)中的溶液中，将反应混合物在室温下搅拌2小时。将反应混合物在真空下浓缩，并且与二氯甲烷(3×50mL)共沸。将产物溶解在四氢呋喃(50mL)中，在冰水浴中冷却，用0.88Ammonia溶液(10mL)处理，并且在室温下搅拌18小时。将混合物在真空下浓缩，并且将残余物在二氯甲烷(200mL)和水(50mL)之间分配。将有机相在硫酸镁上干燥，并且在真空下浓缩，得到标题产物。
1H NMR(DMSO-D6，400MHz)δ1.06(t，3H)，2.48(m，2H)，3.77(m，2H)，3.84(s，3H)，4.38(m，2H)，8.35(m，1H)，8.46(m，1H).MS APCI+ m/z287[MH]+ 制备30 5-氨基甲酰基-1-[2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙基]-4-硝基-1H-吡唑-3-羧酸甲酯
标题产物通过类似于制备29中所述的方法使用制备21中的羧酸进行制备。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ3.30(s，3H)，3.50(m，2H)，3.58(m，2H)，3.90(m，2H)，3.99(s，3H)，4.50(t，2H)，6.25(m，1H)，7.80(m，1H).MSAPCI+ m/z 317[MH]+ 制备31 5-氨基甲酰基-1-(2-环丙基甲氧基-乙基)-4-硝基-1H-吡唑-3-羧酸甲酯
标题产物通过类似于制备29中所述的方法使用制备23中的羧酸进行制备。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ0.12(m，2H)，0.52(m，2H)，0.95(m，1H)，3.27(m，2H)，3.87(t，2H)，3.96(s，3H)，4.61(t，2H)，6.09(m，1H)，7.72(m，1H) MS ES+ m/z 335[MNa]+ 制备32 5-氨基甲酰基-1-(2-异丙氧基乙基)-4-硝基-1H-吡唑-3-羧酸甲酯
将制备19中的羧酸(11.9，37.8mmol)溶解在二氯甲烷(140mL)中，并且将溶液用草酰氯(4.0mL，45.4mmol)和N，N-二甲基甲酰胺(310μL，4mmol)处理。将反应混合物在室温下搅拌18小时，然后在真空下浓缩，并且将残余物用二氯甲烷(2×100mL)共沸。将产物溶解在四氢呋喃(200mL)中，并且将溶液在冰水浴中冷却，然后用0.88Ammonia(50mL)处理。将反应混合物搅拌15分钟，然后在真空下浓缩，并且在二氯甲烷(1000mL)和水(500mL)之间分配。分离出水相，并且用二氯甲烷(3×300mL)萃取，将有机物合并，在硫酸镁上干燥，并且在真空下浓缩，得到标题产物10.4g。
1H NMR(DMSO-D6，400MHz)δ0.95(d，6H)，3.44(m，1H)，3.68(t，2H)，3.83(s，3H)，4.66(t，2H).MS APCI+ m/z 301[MH]+ 下面所示通式的如下化合物通过类似于制备32中所述的方法，使用制备20和22中的适当的羧酸来制备。


制备35 5-氨基甲酰基-4-硝基-1-(四氢吡喃-4-基甲基)-1H-吡唑-3-羧酸甲酯
将制备26中的羧酸(11.3g，36mmol)溶解在二氯甲烷(150mL)中，并且将溶液用草酰氯(38mL，43.2mmol)和N，N-二甲基甲酰胺(280μL，3.6mmol)处理。将反应混合物在室温下搅拌18小时，然后在真空下浓缩。将残余物与二氯甲烷(2×200mL)共沸，并且将所得固体溶解在四氢呋喃中，冷切到-30℃。将溶液用0.88Ammonia(3.85mL，79.2mmol)处理，并且在-30℃下搅拌1小时。将反应混合物在真空下浓缩，用水(100mL)稀释，并且用乙酸乙酯(2×400mL)萃取。将合并的有机物在硫酸镁上干燥，并且在真空下浓缩。将残余物用甲醇和醚研磨，并且在真空下干燥，得到标题产物。
1H NMR(DMSO-D6，400MHz)δ1.20(m，2H)，1.40(m，2H)，2.10(m，1H)，3.22(m，2H)，3.81(m，2H)，3.86(s，3H)，4.19(d，2H)，8.37(m，1H)，8.53(m，1H)， MS APCI+ m/z 313[MH]+ 制备36 5-氨基甲酰基-4-硝基-1-(四氢吡喃-2-基甲基)-1H-吡唑-3-羧酸甲酯
标题化合物通过类似于制备35中所述的方法，使用制备25中的羧酸来制备。
1H NMR(DMSO-D6，400MHz)δ1.18(m，1H)，1.40(m，3H)，1.58(m，1H)，1.78(m，1H)，3.22(m，1H)，3.65(m，1H)，3.78(m，1H)，3.85(s，3H)，4.22(m，2H)，8.27(m，1H)，8.46(m，1H).MS APCI+ m/z 313[MH]+ 制备37 4-氨基-5-氨基甲酰基-1-(2-丙氧基乙基)-1H-吡唑-3-羧酸甲酯
将制备27中的硝基化合物(10g，33mmol)溶解在乙醇(180mL)中，并且将溶液用氢氧化钯(II)(933mg，6.7mmol)处理，并且加热到75℃。加入甲酸铵(21g，330mmol)，并且将反应混合物在75℃下搅拌3小时。将反应混合物通过

在氮气下用乙醇冲洗进行过滤。将滤出液在真空下浓缩，得到淡粉红色固体状的标题产物9.1g。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ0.84(t，3H)，1.51(q，2H)，3.40(t，2H)，3.83(t，2H)，3.89(s，3H)，4.56(t，2H).MS APCI+ m/z 271[MH]+ 制备38 4-氨基-5-氨基甲酰基-1-(2-乙氧基乙基)-1H-吡唑-3-羧酸甲酯
将氢氧化钯(II)(100mg)加入到制备29中的硝基化合物(970mg，3.39mmol)在甲醇(20mL)中的溶液中，并且将混合物升温进行回流。加入甲酸铵(1.07g，16.97mmol)，并且将反应混合物在回流下搅拌2小时。通过

进行过滤去除催化剂，并且将反应混合物在真空下浓缩，得到标题产物。
1H NMR(DMSO-D6，400MHz)δ1.02(t，3H)，3.33(m，2H)，3.66(m，2H)，4.80(s，3H)，4.57(m，2H)，5.11(m，2H)，7.49(m，2H)，MS APCI+ m/z257[MH]+ 下面所示的通式的如下化合物通过类似于制备38中所述的方法，使用制备30，31，32，33，34，35和36中的适当的硝基-吡唑来制备。



制备46 4-氨基-5-氨基甲酰基-1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-3-羧酸甲酯
将制备28中的硝基化合物(1.00g，3.7mmol)溶解在乙酸乙酯(15mL)中，并且用10％ Pd/C(100mg)进行处理。将反应混合物在室温下在15psi的氢气下搅拌18小时。将反应混合物通过Arbocel

用乙酸乙酯冲洗进行过滤，并且将滤出液在真空下浓缩。通过柱色谱在硅胶上以5050到3466到0100的戊烷乙酸乙酯洗脱，而将残余物纯化，得到标题产物。
1H NMR(DMSO-D6，400MHz)δ3.16(s，3H)，3.60(m，2H)，3.76(s，3H)，4.45(m，2H)，5.07(m，2H)，7.42(m，2H).MS ES+ m/z 244[MH]+ 制备47 5，7-二氧代-1-(2-丙氧基乙基)-4，5，6，7-四氢-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将制备37中的酰胺(9g，33mmol)和N，N′-羰基二咪唑(5.4g，33mmol)溶解在N，N-二甲基甲酰胺(400mL)中，并且将反应混合物在室温下搅拌30分钟，然后在75℃下搅拌18小时。加入额外的N，N′-羰基二咪唑(400mg，2.69mmol)，并且将反应混合物再搅拌90分钟。将反应混合物在真空下浓缩，并且将残余物置于水中，搅拌30分钟。将形成的沉淀滤出，得到淡粉红色固体状标题产物6.05g。
1H NMR(DMSO-D6，400MHz)δ0.72(t，3H)，1.37(q，2H)，3.28(t，2H)，3.76(t，2H)，3.82(s，3H)，4.64(t，2H)，10.77(s，1H)，11.37(s，1H).MSAPCI- m/z 295，[M-H]- 制备48 1-(2-乙氧基乙基)-5，7-二氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将制备38中的酰胺(570mg，3.38mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(30mL)中的溶液用N，N′-羰基二咪唑(658mg，4.06mmol)处理，并且将反应混合物在室温下搅拌1小时，然后在90℃下搅拌18小时。将反应混合物在真空下浓缩，并且将粗产物悬浮在丙酮中，并用超声波处理30分钟。将固体产物滤出，并且在真空下干燥，得到标题产物。
1H NMR(DMSO-D6，400MHz)δ1.02(t，3H)，3.37(m，2H)，3.77(m，2H)，4.83(s，3H)，4.63(m，2H)，10.75(s，1H)，11.40(s，1H).MS ES- m/z281[M-H]- 下面所示的通式的如下化合物通过类似于制备48中所述的方法，使用制备39，40，41，42，43和46中的适当的酰胺来制备。



制备55 5，7-二氧代-1-(四氢吡喃-4-基甲基)-4，5，6，7-四氢-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将制备44中的酰胺(9.8g，34.9mmol)溶解在乙腈(100mL)中，并且将溶液用N，N′-羰基二咪唑(6.8g，42mmol)处理。将反应混合物加热回流18小时，然后回到室温。通过过滤去除所形成的白色沉淀，用乙腈冲洗并且在真空下干燥，得到标题产物。
1H NMR(DMSO-D6，400MHz)δ1.24(m，2H)，1.36(m，2H)，2.08(m，1H)，3.21(m，2H)，3.80(m，2H)，3.83(s，3H)，4.40(d，2H)，10.78(m，1H)，11.37(m，1H) MS APCI- m/z 307[M-H]- 制备56 5，7-二氧代-1-(四氢吡喃-2-基甲基)-4，5，6，7-四氢-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
标题化合物通过类似于制备55中所述的方法，使用制备45中的酰胺来制备。
1H NMR(DMSO-D6，400M Hz)δ1.20(m，1H)，1.40(m，3H)，1.52(d，1H)，1.75(m，1H)，3.22(m，1H)，3.74(m，2H)，3.80(s，3H)，4.40(m，1H)，4.58(m，1H)，10.75(m，1H)，11.35(m，1H).MS APCI+ m/z 309[MH]+ 制备57 5，7-二氯-1-(2-丙氧基乙基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将制备47中的二酮(3g，10mmol)，氧氯化磷(14.2mL，152mmol)和氯化四乙铵(3.95g，30mmol)溶解在丙腈(80mL)中，并且将反应混合物在115℃下加热18小时。将反应混合物在真空下浓缩，并且将残余物溶解在额外的丙腈(80mL)中，用额外的氧氯化磷(15mL，145mmol)进行处理。然后将反应混合物加热到115℃，再保持18小时。将反应混合物在真空下浓缩，并且将残余物与甲苯共沸。将粗产物置于乙酸乙酯中，并且小心地用水处理。将两层进行分离，并且将水层用乙酸乙酯(x3)再萃取。将合并的有机物用盐水冲洗，在硫酸镁上干燥，并在真空下浓缩。通过柱色谱在硅胶上以7525的戊烷乙酸乙酯洗脱，而将粗产物纯化，得到标题产物3.1g。
1H NMR(DMSO-D6，400MHz)δ0.65(t，3H)，1.33(q，2H)，3.26(t，2H)，3.82(t，2H)，3.93(s，3H)，4.94(t，2H).MS APCI+ m/z 333，[MH]+ 制备58 5，7-二氯-1-(2-乙氧基乙基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将氧氯化磷(934μL，10.0mmol)和氯化四乙铵(195mg，1.50mmol)加入制备48中的二酮(140mg，0.50mmol)在丙腈(5mL)中的溶液中，并且将反应混合物回流18小时。将反应混合物在真空下浓缩，并且将粗产物在乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)之间分配。将有机层在硫酸镁上干燥，并且在真空下浓缩。通过柱色谱在硅胶上以1000到7525的戊烷乙酸乙酯洗脱，而将粗产物纯化，得到标题产物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.05(t，3H)，3.41(m，2H)，3.84(m，2H)，4.06(s，3H)，5.00(m，2H).MS APCI+ m/z 319[MH]+ 制备59 5，7-二氯-1-(2-异丙氧基乙基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将制备49中的二酮(2.37g，8.00mmol)悬浮在乙腈(30mL)中，并且将溶液用氧氯化磷(15mL，160mmol)和氯化四乙铵(3.97g，24mmol)处理。将反应混合物在回流下搅拌18小时。将反应混合物冷却，随后在真空下浓缩，然后在二氯甲烷(300mL)和水(200mL)之间分配。分离出二氯甲烷层，在硫酸镁上干燥，并且在真空下浓缩。通过柱色谱在硅胶上以1000到7525的戊烷乙酸乙酯洗脱，而将粗产物纯化，得到白色固体状的标题产物1.54g。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 0.96(d，6H)，3.43(m，1H)，3.86(t，2H)，4.08(s，3H)，4.96(t，2H).MS ES+ m/z 355[MNa]+ 下面所示的通式的如下化合物通过类似于制备59中所述的方法，使用制备50，51，52，54，55和56中的合适的二酮来制备。


制备66 5，7-二氯-1-(2-(环丙基甲氧基)乙基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将制备53中的二酮(2.529，8.17mmol)悬浮在乙腈(40mL)中，并且将悬浮液用氧氯化磷(15mL，163.4mmol)和氯化四乙铵(4.089，24.51mmol)处理。将反应混合物加热回流24小时。将反应在真空下浓缩，并且将残余物用醚研磨。将滤出液在真空下浓缩，并且通过柱色谱在硅胶上以5050的二氯甲烷乙酸乙酯洗脱进行纯化，得到无色油状的标题产物907mg。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ0.03(m，2H)，0.40(m，2H)，0.82(m，1H)，3.18(d，2H)，3.92(t，2H)，4.07(s，3H)，4.99(t，2H).MS ES+ m/z 345[MH]+ 制备67 5-氯-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1-(2-丙氧基乙基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将制备57中的二氯化合物(400mg，1.2mmol)和2-氨基-4-甲基吡啶(649mg，6.0mmol)溶解在二甲基亚砜(5mL)中，并且将反应混合物在30℃下搅拌1小时。将反应混合物在二氯甲烷和水之间分配，并且将水层用二氯甲烷(x2)萃取。将合并的有机物用水(x2)，柠檬酸水溶液和盐水冲洗，然后在硫酸镁上干燥，并且在真空下浓缩，得到黄色固体状的标题产物800mg。
MS APCI+ m/z 405[MH]+ 制备68到71
上面的通式的如下化合物通过类似于制备67中所述的方法，使用制备58和63中的适当的二氯化物原料和适当的HNR1R2胺来制备。

制备72 5-氯-1-(2-乙氧基乙基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
制备58中的二氯化合物(1.98g，6.20mmol)溶解在二甲基亚砜(10mL)中，并且将溶液用2-氨基-4-甲基吡啶(1.34g，12.4mmol)处理。将反应混合物在室温下搅拌18小时。将反应混合物在二氯甲烷(300mL)和水(50mL)之间分配，并且分离出二氯甲烷层。将有机相用水(3×100mL)冲洗，在硫酸镁上干燥，并且在真空下浓缩。通过柱色谱在硅胶上以1000到982的二氯甲烷甲醇洗脱，而将残余物纯化。将粗产物用醚(500ml)研磨，过滤并且在真空下浓缩，得到标题产物1.2g。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.06(t，3H)，2.49(s，3H)，3.62(m，2H)，4.00(t，2H)，4.06(s，3H)，5.05(m，2H)，6.98(m，1H)，8.16(m，1H)，8.50(m，1H).MS APCI+ m/z 391[MH]+ 制备73到85 下面所示的通式的如下化合物通过类似于制备72中所述的方法，使用适当的HNR1R2胺和制备58和61中的适当的二氯化合物来制备。



·制备73使用四氢吡喃-4-基胺(WO 98/08855，Pg.17，e.g.3)作为HNR1R2胺 ·制备75使用6-甲氧基-吡啶-2-基胺(US 01/0047013，pg.3，example 2)作为HNR1R2胺 ·制备83使用(3R)-四氢呋喃-3-基胺甲苯磺酸酯与1当量的N-乙基二异丙基胺作为HNR1R2胺 制备86 5-氯-1-(3-甲氧基丁基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将制备60中的二氯化合物(700mg，2.11mmol)和4-甲基吡啶-2-基胺(1.14g，10.54mmol)溶解在二甲基亚砜(10mL)中，并且将反应混合物加热到30℃在氮气下保持3小时。将反应混合物在真空下浓缩，并且将残余物置于二氯甲烷(100mL)和水(150mL)中。将该两层分离，并且将水层用二氯甲烷(50mL)冲洗。将有机物合并，用水(100mL)和柠檬酸(50mL)溶液冲洗，在硫酸镁上干燥，并且在真空下浓缩。通过柱色谱在硅胶上以1000到991的二氯甲烷甲醇洗脱，而将粗产物纯化，得到黄色固体状标题产物330mg。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ1.20(m，3H)，2.10(m，2H)，2.45(s，3H)，3.30(s，3H)，3.40(m，1H)，3.98(s，3H)，5.00(m，2H)，6.90(m，1H)，7.30(m，1H)，8.00(m，1H) MS ES+ m/z 405[MH]+ 下面所示的通式的如下化合物通过类似于制备86中所述的方法，使用适当的HNR1R2胺和制备58，59，62，64和65中的适当的二氯化合物来制备。



·制备95使用2-氨基-4，5-二甲基吡啶(J.Het.Chem.，1981，18(8)，1613-1618，page 1616)作为HNR1R2胺来制备 制备102 5-氯-1-(2-(环丙基甲氧基)乙基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将制备66中的二氯化合物(900mg，2.61mmol)溶解在二甲基亚砜(10mL)中，并且将溶液用4-甲基吡啶-2-基胺(1.13g，10.46mmol)处理。然后将反应混合物在35℃下在油浴中搅拌1小时。冷却反应混合物，并且用水处理，以沉淀出固体。将粗产物滤出，并且在真空中在50℃下干燥18小时。将母液用二氯甲烷(2×50mL)萃取，然后在真空下浓缩。通过柱色谱在硅胶上以1000到982的二氯甲烷甲醇洗脱，而将合并的固体纯化。然后，通过柱色谱在硅胶上以7030的二氯甲烷乙酸乙酯洗脱，而将粗产物再纯化，得到标题产物160mg。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ0.05(d，2H)，0.27(m，2H)，0.92(m，1H)，2.48(s，3H)，3.38(d，2H)，4.02(m，2H)，4.03(s，3H)，5.08(m，2H)，6.80(m，1H)，7.00(m，1H)，7.80(m，1H)，8.18(m，1H).MS ES+ m/z 439[MNa]+ 制备103 5-氯-7-(环己基)氨基-1-(2-乙氧基乙基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将制备58中的二氯化合物(2.50g，7.84mmol)溶解在四氢呋喃(10mL)中，并且将溶液在冰水浴冷却的同时用环己基胺(4.48mL，39.20mmol)的溶液逐滴处理。将反应混合物在室温下搅拌15分钟。将反应混合物用水(50mL)和乙酸乙酯(50mL)稀释，并且将反应混合物搅拌1小时。通过过滤收集所出现的固体，用水冲洗，并且在真空下干燥。分离出乙酸乙酯层，并且用水冲洗，在硫酸镁上干燥，并且在真空下浓缩。将残余物用醚研磨，得到另外的固体。收集到总共2.25g的所期望的产物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.18(t，3H)，1.27(m，2H)，1.47(m，2H)，1.53-1.75(m，2H)，1.78(m，2H)，2.12(m，2H)，3.76(q，2H)，3.92(t，2H)，4.00(s，3H)，4.12(m，1H)，4.70(t，2H)，7.20(d，1H).MS ES+ m/z 382[MH]+ 制备104到117 将适当的单氯化合物(1eq)，适当的HNR3R4胺(3-5eq)，N-乙基二异丙基胺(5eq)和氟化四乙铵水合物(1eq)溶解在1-甲基-2-吡咯烷酮(5.3mLmmol-1)中，并且将反应容器密封，并且在微波炉中加热45分钟。将反应混合物冷却到室温，然后在乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)之间分配。将有机层用水冲洗(25mL)，在硫酸镁上干燥，并且在真空下浓缩。通过柱色谱在硅胶上以5050的二氯甲烷乙酸乙酯洗脱，而将残余物纯化，得到所期望的产物。
使用制备73，74，75，76，77，81，86，87，88，92，97和102中的单氯化合物。



制备118 5-(N-异丙基-N-甲基氨基)-1-[2-(2-甲氧基乙氧基)乙基]-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将制备85中的单氯化合物(150mg，0.36mmol)，N-乙基二异丙基胺(186μL，1.07mmol)和N-甲基·异丙基胺(50μL，0.43mmol)溶解在二甲基亚砜(1.5mL)中，将反应混合物在120℃下搅拌18小时。加入额外的N-甲基·异丙基胺(62μL，0.36mmol)，将反应物在120℃下再搅拌4小时。将反应混合物在真空下浓缩，并且将残余物置于二氯甲烷(50mL)和水(100mL)的混合物中。将两层分离，并且用二氯甲烷(50mL)冲洗水层。将有机物合并，并用水(2×50mL)冲洗，然后在硫酸镁上干燥，并且在真空下浓缩。通过柱色谱在硅胶上以955的二氯甲烷甲醇洗脱，而将粗产物纯化，得到黄色油状标题产物65mg。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ1.25(d，6H)，2.39(s，3H)，2.93(m，3H)，3.05(s，3H)，3.45(t，2H)，3.62(m，2H)，3.95(s，3H)，4.00(t，2H)，4.78(m，2H)，5.10(m，1H)，6.90(m，1H)，8.15(d，1H)，8.25(m，1H).MS APCI+m/z 458[MH]+ 制备119 5-(二甲氨基)-1-(2-乙氧基乙基)-7-(6-乙基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将制备94中的单氯化合物(200mg，0.50mmol)和N-乙基二异丙基胺(172μL，0.99mmol)在二甲基亚砜(2mL)中的溶液用二甲基胺在乙醇(180μL，1.0mmol)中的5.6M溶液处理，并且将反应混合物在120℃下搅拌18小时。将反应混合物在真空下浓缩，并且将残余物置于醚(100mL)中，用水(50mL)冲洗。将水相用醚(25mL)萃取，并且将合并的有机物用水(2×100mL)和盐水(50mL)冲洗，在硫酸镁上干燥，在真空下浓缩。通过柱色谱在硅胶上以1000到955的二氯甲烷甲醇洗脱，而将残余物纯化。从乙醇重结晶粗产物，得到标题产物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.30(m，6H)，2.76(q，2H)，3.30(s，6H)，3.70(q，2H)，4.01(m，2H)，4.02(s，3H)，4.80(t，2H)，6.83(d，1H)，7.60(t，1H)，8.10(d，1H)，9.80(s，1H).MS APCI- m/z 412[M-H]- 下面所示的通式的如下化合物通过类似于制备119中所述的方法，使用适当的HNR3R4胺和制备72，78，79，80，92，94，96，97，98，99，100和101中的单氯化合物来制备。



制备134 1-(2-(环丙基甲氧基)乙基)-5-(N-乙基-N-甲基-氨基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将制备102中的氯化合物(40mg，0.096mmol)和N-乙基二异丙基胺(83μL，0.48mmol)在二甲基亚砜(2mL)中的溶液用N-甲基乙基胺(41μL，0.48mmol)处理，并且将反应混合物在120℃下搅拌18小时。冷却反应混合物，并且在水(25mL)和乙酸乙酯(25mL)之间分配。将有机层用水(25mL)冲洗，在硫酸镁上干燥，并在真空下浓缩。通过柱色谱在硅胶上以乙酸乙酯洗脱，而将残余物纯化，得到标题产物。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ0.02(m，2H)，0.23(m，2H)，0.95(m，1H)，1.24(t，3H)，2.37(s，3H)，3.21(s，3H)，3.35(d，2H)，3.76(m，2H)，3.95(s，3H)，3.98(t，2H)，4.79(m，2H)，6.94(m，1H)，8.13(d，1H)，8.32(s，1H).MS ES+ m/z 462[MNa]+ 制备135 5-氯-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1-(2-丙氧基乙基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸
将制备67中的酯(500mg，1.24mmol)溶解在二氧杂环己烷(5mL)中，并且将溶液用1M的氢氧化钠水溶液(6.20mL，6.2mmol)处理。然后将反应混合物在室温下搅拌18小时。将反应混合物用1M的柠檬酸溶液(10mL)处理，并且形成黄色沉淀。将混合物搅拌15分钟，然后过滤，并将固体产物在真空中干燥，得到标题产物360mg。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ0.73(t，3H)，1.52(m，2H)，2.51(s，3H)，3.51(t，2H)，4.01(t，2H)，5.05(m，2H)，6.98(m，1H)，7.24(m，1H)，8.14(m，1H).MS APCI+ m/z 391[MH]+ 如下的化合物通过类似于制备135中所述的方法，使用制备68，69，70，71，72，80，82，83，84，87，88，89，90，91，92，93和103中的适当的酯来制备。



制备153 [5，7-二氯-1-(2-乙氧基乙基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-基]甲醇
将制备58中的二氯化合物(2.4g，7.52mmol)溶解在四氢呋喃(60mL)中，并且将溶液冷却到-78℃。将四氢呋喃(20mL)中的氢化二异丁基铝(37.6mL，37.6mmol)在10分钟内逐滴加入，并将反应混合物在-78℃下搅拌10分钟，然后在-10℃下搅拌1小时。将反应混合物冷却到-78℃，用氯化铵溶液(25mL)骤停(quench)，升温回到室温。将反应混合物用二氯甲烷(200mL)和水(100mL)稀释，将溶液通过

过滤，用二氯甲烷(3×100mL)冲洗。分离出有机相，在硫酸镁上干燥，并且在真空下浓缩。通过柱色谱在硅胶上以991的二氯甲烷甲醇洗脱，而将粗产物纯化，得到标题产物1.67g。
1HNMR(CDCl3，400MHz)δ1.08(t，3H)，3.42(m，2H)，3.80(m，2H)，4.90(m，2H)，5.10(s，2H).MS APCI+ m/z 291[MH]+ 制备154 3-(叔丁基二甲基甲硅氧甲基)-5，7-二氯-1-(2-乙氧基乙基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶
将制备153中的醇(1.32g，4.53mmol)溶解在二氯甲烷(25mL)中，并且将溶液用咪唑(339mg，4.98mmol)然后用叔丁基二甲基甲硅基氯(750mg，4.98mmol)进行处理。然后，将反应混合物在室温下搅拌18小时。将反应混合物用二氯甲烷(200mL)稀释，并且用10％的碳酸钾溶液(100mL)冲洗。将有机相在硫酸镁上干燥，并且在真空下浓缩。通过柱色谱在硅胶上以991的二氯甲烷甲醇洗脱，而将粗产物纯化，得到标题产物1.56g。
1HNMR(CDCl3，400MHz)δ0.00(s，6H)，0.78(s，9H)，0.93(t，3H)，3.29(m，2H)，3.71(t，2H)，4.72(m，2H)，4.94(s，2H).MS APCI+ m/z 405[MH]+ 制备155 N-[3-(叔丁基二甲基甲硅氧甲基)-5-氯-1-(2-乙氧基乙基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-基]嘧啶-4-基胺
将嘧啶-4-基胺(1.10g，11.55mmol)溶解在四氢呋喃(30mL)中，并且将溶液用六甲基二硅氮化钠(2.12g，11.55mmol)处理，并且在室温下搅拌20分钟。然后，将溶液用制备154的二氯化合物(1.56g，3.85mmol)在四氢呋喃(10mL)中的溶液处理，并且将反应混合物在室温下搅拌90分钟。将反应混合物用氯化铵溶液(100mL)骤停，并且用二氯甲烷(200mL)萃取。分离有机相，在硫酸镁上干燥，并且在真空下浓缩。通过柱色谱在硅胶上以973的二氯甲烷甲醇洗脱，而将粗产物纯化，得到标题产物，830mg。
1HNMR(CDCl3，400MHz)δ0.00(s，6H)，0.77(s，9H)，1.08(t，3H)，3.54(m，4H)，4.63(m，2H)，4.90(s，2H)，8.33(d，1H)，8.51(d，1H)，8.77(s，1H) MS APCI+ m/z 464[MH]+ 下面所示的通式的如下化合物通过类似于制备155中所述的方法，使用适当的HNR1R2胺来制备。


·制备157使用制备6中的胺作为HNR1R2胺。
·制备158使用2-甲基吡啶-4-基胺(J.Het.Chem，1987，24，1377-1380)作为HNR1R2胺。
制备160 [5-氯-1-(2-乙氧基乙基)-7-(嘧啶-4-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-基]甲醇
将制备155的经保护的醇(815mg，1.76mmol)溶解在四氢呋喃(40mL)中，并且将溶液用氟化四丁基铵在四氢呋喃中的1M的溶液(8.63mL，8.63mmol)处理。将反应混合物在室温下搅拌90分钟，然后用额外的氟化四丁基铵溶液(4.32mL)处理，并且再搅拌1小时。将反应混合物用水(50mL)稀释，并且将水相用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机物在硫酸镁上干燥，并且在真空下浓缩。通过柱色谱在硅胶上以991到955的二氯甲烷甲醇洗脱，而将粗产物纯化，得到标题产物1.25g。
1HNMR(CDCl3，400MHz)δ1.26(t，3H)，3.70(m，2H)，3.97(m，2H)，4.76(m，2H)，5.10(s，2H)，8.51(d，1H)，8.72(d，1H)，8.99(s，1H).MSAPCI+ m/z 350[MH]+ 下面所示的通式的如下化合物通过类似于制备160中所述的方法，使用适当的制备156，157，158和159中的经保护的醇来制备。



制备165 5-氯-1-(2-乙氧基乙基)-7-(吡嗪-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-甲醛
将制备161中的醇(251mg，0.72mmol)溶解再二氯甲烷(12mL)中，并且将溶液在冰水浴中冷却到0℃。加入1，1，1-三乙酰氧基-1，1-二氢-1，2-苯碘酰-3(1H)-酮(Dess-Martin过碘烷，456mg，1.08mmol)，并且将反应混合物在室温下搅拌2小时。将反应混合物用硫代硫酸钠的饱和水溶液(7.8mL)，然后用饱和的碳酸氢钠溶液(7.8mL)和醚(7.8mL)进行处理。将混合物在室温下搅拌15分钟，分离有机相，并且用二氯甲烷(x3)萃取水相。将有机物合并，在硫酸镁上干燥，并且在真空下浓缩。通过柱色谱在硅胶上以991的二氯甲烷甲醇洗脱，而将粗产物纯化，得到标题产物200mg。
1HNMR(CDCl3，400MHz)δ1.22(t，3H)，3.69(m，2H)，4.06(m，2H)，4.92(m，2H)，7.22(m，1H)，8.32(m，1H)，8.40(m，1H)，9.77(m，1H)，10.35(m，1H) 下面所示的通式的如下化合物通过类似于制备165中所述的方法，使用适当的制备160，162，163，164中的醇来制备。


制备170 5-氯-1-(2-乙氧基乙基)-7-(嘧啶-4-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸
将制备166中的醛(220mg，0.63mmol)溶解在叔丁醇(40mL)中，并且将溶液用2-甲基-2-丁烯在四氢呋喃(44mL)中的2M的溶液进行处理。将溶液在室温下搅拌，然后在5分钟内逐滴地用亚氯酸钠(683mg，7.59mmol)和正磷酸二氢钠(699mg，5.82mmol)在水(8mL)的溶液进行处理。将反应混合物在室温下搅拌30分钟。将水(40mL)和二氯甲烷(40mL)加到反应混合物，然后将各相进行分离。将水相层用二氯甲烷(2×40mL)萃取，并且然后将水相酸化到pH3，然后再一次用二氯甲烷(2×40mL)萃取。将有机物合并，在硫酸镁上干燥，并且在真空下浓缩。通过柱色谱在硅胶上首先以973的二氯甲烷甲醇然后以85:15:1的二氯甲烷甲醇乙酸洗脱，而将粗产物纯化，得到标题产物194mg。
1HNMR(CD3OD，400MHz)δ1.20(t，3H)，3.68(m，2H)，4.01(t，2H)，4.92(t，2H)，8.42(m，1H)，8.68(m，1H)，8.87(m，1H).MS APCI+m/z364[MH]+ 下面所示的通式的如下化合物通过类似于制备170中所述的方法，使用适当的制备165，167，168，169中的醛来制备。


制备175 5-氯-1-(2-乙氧基乙基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸乙酯
将制备137中的羧酸(565mg，1.5mmol)悬浮于1-甲基-2-吡咯烷酮(5mL)中，并且将溶液用N-乙基二异丙基胺(313μL，1.8mmol)和N，N′-羰基二咪唑(364mg，2.25mmol)进行处理，并在室温下搅拌30分钟。将溶液用乙醇钠(408mg，6.0mmol)处理，并且将反应混合物在室温下再搅拌30分钟。将反应混合物用柠檬酸溶液(5mL)骤停，并在真空下浓缩。将残余物在二氯甲烷(100mL)和水(50mL)之间分配，并分离出有机相，在硫酸镁上干燥，并在真空下浓缩。将残余物用乙酸乙酯(10mL)研磨，在真空下干燥，得到标题产物。
1H NMR(DMSO-D6，400MHz)δ0.96(t，3H)，1.32(t，3H)，2.40(s，3H)，3.44(q，2H)，3.86(t，2H)，4.36(q，2H)，4.93(t，2H)，7.06(m，1H)，7.87(s，1H)，8.23(d，1H)， MS APCI+ m/z 405[MH]+ 制备176 5-氯-1-(2-乙氧基乙基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸2-(二甲氨基)乙酯
将制备137中的羧酸(282mg，0.75mmol)悬浮于1-甲基-2-吡咯烷酮(2.5mL)中，并且将溶液用N-乙基二异丙基胺(157μL，0.9mmol)和N，N′-羰基二咪唑(182mg，1.13mmol)处理，并且在室温下搅拌30分钟。将溶液用2-(二甲氨基)乙醇(309μL，3.0mmol)和4-(N，N-二甲氨基)吡啶(12mg，0.1mmol)处理，并且将反应混合物加热到50℃，保持18小时。将反应混合物在真空下浓缩，并且通过柱色谱在硅胶上以10000到90101的二氯甲烷甲醇0.88Ammonia洗脱，而将残余物纯化，得到标题产物170mg。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ1.08(t，3H)，2.40(s，6H)，2.45(s，3H)，2.84(t，2H)，3.60(m，2H)，3.98(t，2H)，4.57(t，2H)，5.01(m，2H)，6.98(d，1H)，8.12(m，1H). MS APCI+ m/z 448[MH]+ 制备177 5-氯-1-(2-乙氧基乙基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-甲酰胺
将制备137中的羧酸(376mg，1.0mmol)加入到六氟磷酸N-[(二甲氨基)-1H-1，2，3-三唑并[4，5-b]吡啶-1-基-亚甲基]-N-甲基甲铵N-氧化物(HATU，380mg，1.0mmol)和N-乙基二异丙基胺(1mL，5.6mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(15mL)的溶液中。然后将混合物用氨在四氢呋喃(600μL)中的饱和溶液进行处理，并且将反应混合物在室温下搅拌48小时。将反应混合物在真空下浓缩，并且将残余物在乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)之间分配。将水相用乙酸乙酯(2×50mL)和二氯甲烷(50mL)萃取。将有机物合并，在硫酸镁上干燥，并且在真空下浓缩。通过柱色谱在硅胶上以1000到955的二氯甲烷甲醇洗脱，而将残余物纯化，得到标题产物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.17(t，3H)，2.47(s，3H)，3.68(m，2H)，4.01(t，2H)，4.92(m，2H)，6.94(m，1H)，8.08(m，1H)，8.22(m，1H).MSAPCI+ m/z 376[MH]+ 制备178 5-氯-1-(2-乙氧基乙基)-7-(4-氟-3-甲基苯基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-甲酰胺
标题化合物通过类似于制备177中所述的方法，使用制备152中的羧酸来制备。
1H NMR(DMSO-D6，400MHz)δ0.96(t，3H)，2.26(s，3H)，3.45(q，2H)，3.82(m，2H)，4.93(m，2H)，7.23(t，1H)，7.50(m，2H)，7.64(s，1H)，7.81(s，1H)，9.37(s，1H) MS APCI+ m/z 393[MH]+ 制备179 5-氯-1-(2-乙氧基乙基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-腈
将制备177中的酰胺(140mg，0.37mmol)溶解在三氟乙酸酐(53μL，0.37mmol)和吡啶(59mg，0.75mmol)在四氢呋喃(5mL)的溶液中，并且将反应混合物在室温下搅拌18小时。将反应混合物在真空下浓缩，并且通过柱色谱在硅胶上用二氯甲烷将残余物纯化，得到标题产物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.09(t，3H)，2.40(s，3H)，3.66(m，2H)，3.91(m，2H)，5.00(m，2H)，6.85(m，1H)，8.05(m，1H)，8.08(m，1H).MS APCI+ m/z 358[MH]+ 制备180 5-氯-1-(2-乙氧基乙基)-7-(4-氟-3-甲基苯基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-腈
标题化合物通过类似于制备179中所述的方法，使用制备178中的酰胺来制备。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.19(t，3H)，2.32(s，3H)，3.68(q，2H)，4.04(m，2H)，4.80(m，2H)，7.05(t，1H)，7.56(m，2H)，9.37(s，1H).MS ES+m/z 397[MNa]+ 制备181 5-氯-1-(2-乙氧基乙基)-N-羟基-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-甲脒
将制备179中的腈(100mg，0.28mmol)溶解在羟胺(23mg，0.34mmol)在乙醇(2mL)的溶液中，将溶液用氢氧化钠(68μL，0.34mmol)的5M水溶液处理。将反应混合物在50℃下搅拌18小时，在真空下浓缩，得到标题产物。
1H NMR(DMSO-D6，400MHz)δ1.02(m，3H)，2.37(s，3H)，3.50(m，2H)，3.85(m，2H)，4.84(m，2H)，6.96(m，1H)，8.16(m，1H)，8.20(m，1H).MS ES+ m/z 358[MH]+ 制备182 5-氯-1-(2-乙氧基乙基)-7-(4-氟-3-甲基苯基氨基)-N-羟基-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-甲脒
标题化合物通过类似于制备181中所述的方法，使用制备180中的腈来制备。
1H NMR(DMSO-D6，400MHz)δ0.95(t，3H)，2.26(s，3H)，3.44(d，2H)，3.79(m，2H)，4.88(m，2H)，7.21(t，1H)，7.50(m，2H)，9.30(m，1H)，9.95(s，1H) MS ES- m/z 406[M-H]- 制备183 3-[5-氯-1-(2-乙氧基乙基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-基]-2H-1，2，4-噁二唑-5-酮
将制备181中的产物(109mg，0.28mmol)溶解在N，N′-羰基二咪唑(49mg，0.30mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(2mL)的溶液中，并且将反应混合物在80℃下搅拌2小时。将反应混合物在真空下浓缩，并且将残余物用丙酮(3mL)研磨，过滤，并用乙腈重结晶，得到标题产物。
1H NMR(DMSO-D6，400MHz)δ1.00(t，3H)，2.39(s，3H)，3.47(m，2H)，3.87(t，2H)，4.95(t，2H)，6.98(d，1H)，7.87(s，1H)，8.17(m，1H).MSAPCI+ m/z 417[MH]+ 制备184 3-[5-氯-1-(2-乙氧基乙基)-7-(4-氟-3-甲基苯基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-基]-2H-1，2，4-噁二唑-5-酮
标题化合物通过类似于在制备183中所述的方法，使用制备182的产物来制备。
1H NMR(DMSO-D6，400MHz)δ0.96(t，3H)，2.27(s，3H)，3.45(m，2H)，3.83(m，2H)，4.97(m，2H)，7.24(t，1H)，7.50(m，2H)，9.40(s，1H).MSAPCI+ m/z 434[MH]+ 制备185 N-[5-氯-1-(2-乙氧基乙基)-3-(2H-四唑-5-基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-基]-(4-甲基吡啶-2-基)胺
将制备179中的腈(100mg，0.28mmol)加入到叠氮三丁基锡(104mg，0.32mmol)在二氧杂环己烷(3mL)中的溶液中，并且将反应混合物加热回流18小时。将反应混合物再用叠氮三丁基锡(104mg，0.32mmol)处理，并且将反应混合物再加热回流18小时。将反应混合物用氢氯酸在醚(20mL)中的2M溶液稀释，并且将混合物在室温下搅拌30分钟。将反应混合物在真空下浓缩，并且将残余物吸收到硅胶上，通过柱色谱在硅胶上以10000到90101的二氯甲烷甲醇乙酸洗脱，而将残余物纯化，得到标题产物。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ1.11(t，3H)，2.57(s，3H)，3.64(q，2H)，4.05(t，2H)，5.09(t，2H)，7.25(d，1H)，7.90(s，1H)，8.35(d，1H).MSAPCI+ m/z 401[MH]+ 制备186 N-[5-氯-1-(2-乙氧基乙基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羰基]甲磺酰胺
将制备137中的羧酸(1.0g，2.70mmol)，甲磺酰胺(330mg，3.5mmol)，氢氯化1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(660mg，3.5mmol)和4-二甲氨基吡啶(390mg，3.5mmol)溶解在N，N-二甲基甲酰胺(10mL)中，并且将反应混合物在室温下搅拌60小时。加入额外的甲磺酰胺(165mg，1.7mmol)，氢氯化1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(330 1.7mmol)和4-二甲氨基吡啶(195 1.7mmol)，并且将反应混合物再搅拌20小时。进一步加入甲磺酰胺(165mg，1.7mmol)，氢氯化1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(330 1.7mmol)和4-二甲氨基吡啶(195 1.7mmol)，并且将反应混合物最后搅拌18小时。将反应混合物在真空下浓缩，并且将残余物在二氯甲烷(25mL)和水(25mL)之间分配。分离出有机相，用水(2×25mL)冲洗，在硫酸镁上干燥并且在真空下浓缩。通过柱色谱在硅胶上以10000到963.50.5的二氯甲烷甲醇乙酸洗脱，而将粗产物纯化，得到标题产物290mg。
1H NMR(DMSO-D6，400MHz)δ0.95(t，3H)，2.40(s，3H)，3.40(s，3H)，3.45(d，2H)，3.85(m，2H)，4.95(m，2H)，7.15(d，1H)，7.85(s，1H)，8.25(d，1H)MS ES- m/z 452[M-H]- 制备187 3-(甲氧基羰基)-1-[(2S)-2-甲氧基丙基]-4-硝基-1H-吡唑-5-羧酸
在搅拌的同时、在氮气下，将偶氮二甲酸二异丙酯(14.9mL，76mmol)逐滴加入到4-硝基吡唑-3，5-二甲酸二甲酯(15.73g，69mmol)，(S)-(+)-2-甲氧基丙醇(6.81g，76mmol)和三苯基膦(19.9g，76mmol)在四氢呋喃(220mL)的溶液中，通过冰水浴冷却将反应温度保持在0℃和10℃之间。一旦加料完成，可以将反应混合物在室温下搅拌18小时。将反应混合物在减压下浓缩，并且将残余的油状物重新溶解在甲醇(200mL)中。加入氢氧化钾(3.88g，69mmol)，并且将反应混合物在室温下搅拌18小时。将混合物在减压下浓缩，并且将残余物悬浮在水(50mL)中，并且用二氯甲烷(2×100mL)冲洗。用浓盐酸将水溶液酸化到pH1，然后用二氯甲烷(3×100mL)萃取。将从酸性溶液萃取得到的合并有机萃取物蒸发至干燥，然后置于饱和的碳酸氢钠水溶液(100ml)中。将该水溶液用二氯甲烷(100mL)，和乙酸乙酯(2×100ml)顺序地冲洗，然后用浓盐酸酸化到pH1，并且用乙酸乙酯(3×100ml)萃取。将从酸性溶液萃取得到的合并有机萃取物在硫酸镁上干燥，并且在减压下浓缩，得到黄色油状的标题化合物。
1H NMR(DMSO-D6，400MHz)δ1.05(d，3H)，3.10(s，3H)，3.70(m，1H)，3.85(d，3H)，4.45-4.70(m，2H). MS APCI+ m/z 288[MH]+ 制备188 2-(环丁基氧基)乙醇
将丁基锂(2.5M的己烷溶液，61mL，0.152mol)逐滴加入到环丁醇(10g，0.139mol)在四氢呋喃(250mL)中的冰水冷却溶液中，使得反应温度保持在10℃以下。然后将混合物在5-10℃下再搅拌2小时，并将2，2-二氧化1，3，2-二氧杂硫杂环戊烷(18.90g，0.152mol)在四氢呋喃(50mL)中的溶液逐滴加入，以使反应温度保持在15℃以下。一旦加料完成，将反应混合物在室温下再搅拌3小时，然后加入水(3mL)，之后加入浓硫酸(7.5mL)，并且反应混合物再搅拌18小时。通过加入固体碳酸钠和碳酸氢钠小心地中和反应混合物，并且将混合物在减压下于室温下浓缩。将残余物用水稀释，通过加入氯化钠直到实现饱和来用氯化钠饱和，然后将该溶液用乙酸乙酯(4×100mL)萃取。将合并的有机萃取物在硫酸镁上干燥，并且在减压下于室温下蒸发。将残余的橙色有机物油通过Kugelrohr蒸馏纯化，得到标题化合物7.7g。在10mmHg下沸点为70-80℃。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.38-1.57(m，1H)，1.63(m，1H)，1.80-1.98(m，2H)，2.06-2.15(m，2H)，3.40(t，2H)，3.65(t，2H)，3.95(m，1H). 制备189 1-[2-(环丁基氧基)乙基]-3-(甲氧基羰基)-4-硝基-1H-吡唑-5-羧酸
采用类似于制备187中所述的工艺，由制备188中的醇和4-硝基吡唑-3，5-二甲酸二甲酯，得到白色固体状的标题化合物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.38-1.50(m，1H)，1.62(m，1H)，1.70-1.81(m，2H)，2.10(m，2H)，3.76(m，2H)，3.90(m，4H)，4.78(t，2H)，9.68(br s，1H). MS ES+ m/z 331[MNH4]+ 制备190 2-(2，2-二氟乙氧基)乙醇
将溴化四丁基铵(1.96g，6.08mmol)逐份加入到2，2-二氟乙醇(25g，304.9mmol)在三乙胺(45mL，322.9mmol)的溶液中，并且将混合物搅拌5分钟。加入碳酸乙二酯(29.53g，335.3mmol)，并且将反应混合物在100℃下加热18小时。然后将冷却后的混合物在减压下蒸馏，并且将含有所期望的产物的馏分在大气压下再蒸馏，得到黄色液体状的标题化合物4.95g(b.p.127-128℃)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ2.04(br s，1H)，3.65(m，2H)，3.72(m，4H)，5.70-6.02(m，1H). 制备1g1 1-[2-(2，2-二氟乙氧基)乙基]-3-(甲氧基羰基)-4-硝基-1H-吡唑-5-羧酸
采用类似于制备187中所述的工艺，由制备190中的醇和4-硝基吡唑-3，5-二甲酸二甲酯，得到白色固体状的标题化合物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ3.61(m，2H)，3.92(m，5H)，4.80(t，2H)，5.60-5.88(m，1H). MS ES+ m/z 324[MH]+ 制备192 3-(甲氧基羰基)-4-硝基-1-[2-(2，2，2-三氟乙氧基)乙基]-1H-吡唑-5-羧酸
在搅拌的同时在氮气下，将偶氮二甲酸二异丙酯(71.9mL，366mmol)在四氢呋喃(80mL)中的溶液逐滴加入到4-硝基吡唑-3，5-二甲酸二甲酯(60g，260mmol)，2，2，2-三氟乙氧基乙醇(Journal of Fluorine Chemistry(1992)，59(3)，387-96)，(45.2g，314mmol)和三苯基膦(96.15g，366mmol)在四氢呋喃(650mL)的溶液中，通过冰水浴冷却将反应温度保持在0℃和10℃之间。在加料完成之后，将混合物升温到室温，并且搅拌2天。在减压下去除溶剂，并将残余物溶解在甲醇(800mL)中，并且冷却到0℃。在0℃下加入氢氧化钾(16.16g，288mmol)在甲醇(200mL)中的溶液，并且将反应混合物升温到室温，并且搅拌16小时。在减压下去除溶剂，并且将残余物在水(600mL)和乙酸乙酯(600mL)之间分配。将水层用乙酸乙酯(2×200mL)冲洗，然后用盐酸将水相酸化到pH1。将水溶液用乙酸乙酯(3×400mL)萃取，将合并的萃取物在硫酸镁上干燥，并且在减压下浓缩，得到无色固体(52.86g，59％)。该产物是3-甲氧羰基-4-硝基-1-(2，2，2-三氟乙氧基)乙基吡唑-5-羧酸(大部分)和5-甲氧羰基-4-硝基-1-(2，2，2-三氟乙氧基)乙基吡唑-3-羧酸(小部分)的混合物，并且可以直接用于下一步骤。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ3.77(q，2H)，3.93(s，3H)，4.00(t，2H)，4.84(t，2H). 制备193 2-(3，3，3-三氟丙氧基)乙醇
将正丁基锂(39mL，2.5M的己烷溶液，97.5mmol)逐滴加入到3，3，3-三氟-1-丙醇(10g，87.7mmol)在四氢呋喃(130mL)中的冰水冷却溶液，使得温度保持在5℃以下，并且一旦完成加料，将反应混合物在0℃下再搅拌1小时。
然后逐滴加入2，2-二氧化1，3，2-二氧杂硫杂环戊烷(11.97g，96.5mmol)在四氢呋喃(35mL)中的溶液，使得内部温度保持5℃以下，并且一旦完成加料，将反应混合物在室温下搅拌18小时。加入水(2mL)，之后加入浓硫酸(5mL)，并且将反应混合物在室温下再搅拌6小时。通过加入碳酸钠中和混合物，然后用水(20mL)稀释，并且将所得固体滤出，并用乙酸乙酯冲洗。将滤出液在减压下浓缩，并将残余物悬浮在盐水中，用乙酸乙酯(3x)萃取。将合并的有机萃取物在硫酸镁上干燥，并且在减压下蒸发。将残余的胶状物在高真空下蒸馏，得到无色液体状的标题化合物6.75g(b.p.57-80℃)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ2.38(m，2H)，2.57(m，2H)，3.69(m，4H). 制备194 3-(甲氧基羰基)-4-硝基-1-[2-(3，3，3-三氟丙氧基)乙基]-1H-吡唑-5-羧酸
采用类似于制备187中所述的工艺，由制备193中的醇和4-硝基吡唑-3，5-二甲酸二甲酯，得到白色固体状的标题化合物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ2.39(m，2H)，3.54(t，2H)，3.78(m，2H)，3.80(s，3H)，4.69(t，2H). MS ES+ m/z 356[MH]+ 制备195 2-(3-氟丙氧基)乙醇
采用类似于制备193中所述的工艺，由3-氟-1-丙醇和2，2-二氧化1，3，2-二氧杂硫杂环戊烷以71％的收率，得到标题化合物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.96(m，2H)，2.10(bs，1H)，3.58(t，2H)，3.62(t，2H)，3.75(t，2H)，4.50(dd，1H)，4.62(dd，1H). 制备196 1-[2-(3-氟丙氧基)乙基]-3-(甲氧基羰基)-4-硝基-1H-吡唑-5-羧酸
采用类似于制备187中所述的工艺，由制备195中的醇和4-硝基吡唑-3，5-二甲酸二甲酯，以92％的收率得到标题化合物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.81-1.95(m，2H)，3.56(t，2H)，3.83(t，2H)，3.97(s，3H)，4.38(m，1H)，4.48(m，1H)，4.82(m，2H). MS ES+ m/z 320[MH]+ 制备197 5-(氨基羰基)-1-[(2S)-2-甲氧基丙基]-4-硝基-1H-吡唑-3-羧酸甲酯
在0℃下，将草酰氯(6.83mL，78.3mmol)加入从制备187中得到的酸(15g，52.2mmol)在二氯甲烷(250mL)中的溶液中。加入N，N-二甲基甲酰胺(0.15mL)，并将混合物在室温下搅拌18小时。Tlc分析(二氯甲烷:甲醇:0.88Ammonia，95:5:1)表明还存在起始原料，于是逐滴加入额外的草酰氯(0.91mL，10mmol)，并且将反应混合物在室温下再搅拌18小时。在减压下蒸发溶液，并且将残余物溶解在四氢呋喃(250mL)中。将溶液冷却到0℃，逐滴加入0.88 Ammonia(20mL)，并且一旦完成加料，将反应混合物在室温下搅拌1小时。将反应混合物在减压下浓缩，并且将残余物在二氯甲烷(200mL)和水(50mL)之间分配，并且分离各个层。水溶液用额外的二氯甲烷(200mL)萃取，将有机溶液合并，在硫酸镁上干燥，并且在减压下蒸发，得到白色固体状的标题化合物。
1H NMR(DMSO-D6，400MHz)δ1.25(d，3H)，3.30(s，3H)，3.85(m，1H)，4.00(s，3H)，4.40-4.50(m，2H)，6.20(s，1H)，7.50(s，1H). MS APCI+ m/z 287[MH]+ 制备198 5-(氨基羰基)-1-[2-(环丁基氧基)乙基]-4-硝基-1H-吡唑-3-羧酸甲酯
在搅拌的同时将草酰氯(6.71mL，76.7mmol)在二氯甲烷(30mL)中的溶液缓慢加入到从制备189得到的酸(20g，63.9mmol)和N，N-二甲基甲酰胺(0.28mL)在二氯甲烷(140mL)中的溶液中，将混合物在室温下搅拌2小时。在减压下浓缩混合物，并且将残余物与二氯甲烷(4×200mL)共沸，得到有机油状物，将该油状物在真空下干燥。将残余物溶解在四氢呋喃(170mL)中，将溶液冷却到-78℃，并且逐滴加入浓氨水(23.2mL，0.42mol)。一旦完成加料，将反应混合物在-78℃下再搅拌2小时。通过-在78℃下加入过量的6N的盐酸(17mL)骤停反应。将混合物升温到室温，并且再减压下去除四氢呋喃。将所得的水性悬浮液过滤，并用饱和的碳酸氢钠溶液(2×50mL)冲洗所得的固体。然后用水冲洗该固体，直到滤出液是中性的，然后在真空下干燥。
将固体在醚:甲醇(体积比10:1，以5mL/g固体的量)的溶液中搅拌1小时，然后过滤并干燥。然后将固体在醚:甲醇(体积比5:1，5mL/g固体)的溶液中搅拌1小时，过滤并且在真空下干燥，得到标题化合物10.34g。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.41-1.82(m，4H)，2.17(m，2H)，3.74(t，2H)，3.86(m，1H)，3.97(s，3H)，4.60(t，2H)，6.06(br s，1H)，7.54(br s，1H). MS ES+ m/z 330[MNH4]+ 制备199 5-(氨基羰基)-4-硝基-1-[2-(2，2，2-三氟乙氧基)乙基]-1H-吡唑-3-羧酸甲酯
在氮气下、在20℃下，将从制备192得到的羧酸(70.0g，204mmol)溶解在二氯甲烷(1000mL)和N，N-二甲基甲酰胺(1mL)的混合物中。在搅拌的同时逐滴加入草酰氯(25mL，366mmol)。将混合物搅拌16小时，然后在减压下浓缩。加入三份二氯甲烷(200mL)，并且顺序地蒸发，以去除过量的草酰氯。将残余物溶解在四氢呋喃(1000mL)中，并且冷却到-78℃。逐滴加入浓0.88Ammonia氨水(70mL)，并将混合物保持在-78℃。在完成加料之后，将混合物搅拌1小时，然后在-78℃下加入过量的盐酸(以提供pH1)。将混合物升温到室温，并且在减压下去除溶剂。通过过滤收集所得的乳白色固体，并且用水冲洗(3×100mL)，得到无色固体(47.01g)。将固体用二乙基醚和甲醇的混合物(20:1，20mL/g)研磨，得到无色固体状的标题化合物(40.0g，61％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)3.78(q，2H)，3.95(s，3H)，3.98(t，2H)，4.76(t，2H)，5.91(br s，1H)，7.03(br s，1H). 制备200 5-(氨基羰基)-1-[2-(2，2-二氟乙氧基)乙基]-4-硝基-1H-吡唑-3-羧酸甲酯
采用类似于制备199中所述的工艺，由从制备191得到的化合物得到白色固体状的标题化合物。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)3.63(m，2H)，3.85(m，5H)，4.39(t，2H)，5.84-6.19(m，1H)，8.38(s，1H)，8.45(s，1H). MS ES+ m/z 323[MH]+ 制备201 5-(氨基羰基)-4-硝基-1-[2-(3，3，3-三氟丙氧基)乙基]-1H-吡唑-3-羧酸甲酯
采用类似于制备199中所述的工艺，由从制备194得到的酸，得到白色固体状的标题化合物。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)2.43(m，2H)，2.55(m，2H)，3.76(t，2H)，3.94(s，3H)，4.28(m，2H)，8.38(m，2H). MS ES- m/z 353[M-H]- 制备202 5-(氨基羰基)-1-[2-(3-氟丙氧基)乙基]-4硝基-1H-吡唑-3-羧酸甲酯
采用类似于制备199中所述的工艺，由从制备196得到的酸，得到白色固体状的标题化合物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.83-1.99(m，2H)，3.58(t，2H)，3.84(t，2H)，3.98(s，3H)，4.40(m，1H)，4.54(m，1H)，4.70(t，2H). MS APCI+ 319[MH]+ 制备203 4-氨基-5-(氨基羰基)-1-[(2S)-2-甲氧基丙基]-1H-吡唑-3-羧酸甲酯
将从制备197得到的化合物(7.1g，25mmol)和氢氧化钯(500mg)在甲醇(200mL)中的溶液升温以温和回流，然后逐份加入甲酸铵(5.95g，94mmol)(小心放热)。一旦完成加料，将反应混合物在氮气下回流搅拌18小时。将冷却后的混合物通过湿的Arbocel

过滤，将滤出液在减压下蒸发，得到黄色油状的标题化合物5.4g。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.25(d，3H)，3.30(s，3H)，3.90(m，4H)，4.21-4.50(m，2H). MS APCI+ m/z 279[MNa]+ 制备204 4-氨基-5-(氨基羰基)-1-[2-(环丁基氧基)乙基]-1H-吡唑-3-羧酸甲酯
将从制备198得到的化合物(10.34g，33mmol)在甲醇(400mL)中的溶液在10％钯碳(Degussa 101 type，2.1g)上在50psi H2和50℃下氢化5小时。将溶液通过

助滤器过滤。将滤出液在减压下浓缩，得到无色液体状的标题化合物9.32g。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.39-1.52(m，1H)，1.60-1.80(m，3H)，2.12(m，2H)，3.80(t，2H)，3.90(m，4H)，4.32-4.70(m，2H). MS ES+ m/z 305[MNa]+ 制备205 4-氨基-5-(氨基羰基)-1-[2-(2，2-二氟乙氧基)乙基]-1H-吡唑-3-羧酸甲酯
将从制备200得到的化合物(4.83g，15mmol)和10％钯碳(1.2g)在甲醇(250mL)中的混合溶液在3巴的氢和室温下氢化24小时。将混合物升温到50℃，通过

过滤，用温甲醇(500mL)冲洗。将滤出液在减压下浓缩，并且将残余物与乙腈共沸，得到白色固体状的标题化合物3.8g。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ3.68(m，2H)，3.91(s，3H)，4.03(t，2H)，4.61(t，2H)，5.61-5.96(m，1H)，6.20-6.39(br s，2H). MS ES+ m/z 293[MH]+ 制备206 4-氨基-5-(氨基羰基)-1-[2-(2，2，2-三氟乙氧基)乙基]-1H-吡唑-3-羧酸甲酯
将从制备199得到的化合物(40.0g，118mmol)在甲醇(640mL)中的溶液在10％钯碳(10.0g)上在3巴和50℃下氢化3小时。将热溶液通过

助滤器过滤，并且用二氯甲烷冲洗滤饼。将滤出液在减压下浓缩。将残余物在室温下在真空下保持过夜，得到白色固体状的标题化合物(34.2g，94％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ3.80(q，2H)，3.91(s，3H)，4.07(t，2H)，4.63(t，2H)，6.29(br s，2H). 制备207 4-氨基-5-(氨基羰基)-1-[2-(3，3，3-三氟丙氧基)乙基]-1H-吡唑-3-羧酸甲酯
采用类似于制备205中所述的工艺，由从制备201得到的化合物，得到白色固体状的标题化合物。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ2.41(m，2H)，3.52(t，2H)，3.68(t，2H)，3.74(s，3H)，4.49(t，2H)，5.09(s，2H)，7.40(s，2H). MS APCI+ m/z 325[MH]+ 制备208 4-氨基-5-(氨基羰基)-1-[2-(3-氟丙氧基)乙基]-1H-吡唑-3-羧酸甲酯
采用类似于制备206中所述的工艺，由从制备202得到的化合物，以定量的收率制备标题化合物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.83-1.99(m，2H)，3.61(t，2H)，3.95(m5H)，4.38(m，1H)，4.50(m，1H)，4.58(m，2H). 制备209 1-[(2S)-2-甲氧基丙基]-5，7-二氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将从制备203得到的胺(2.7g，9.7mmol)和1，1’-羰基二咪唑(1.89g，11.7mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(80mL)中的混合物在室温下搅拌1小时。将混合物在减压下浓缩，并且将残余物溶解在丙酮中。将混合物进行30分钟的超声波处理，并且滤出所得的沉淀并且进行干燥。将滤出液再次进行超声波处理，过滤出沉淀，干燥并且合并，得到标题化合物740mg。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ1.05(m，3H)，3.15(s，3H)，3.75-3.85(m，1H)，3.88(s，3H)，4.40，4.60(2xm，2H). MS APCI+ 305[MNa]+ 制备210 1-[2-(环丁基氧基)乙基]-5，7-二氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将从制备204得到的酰胺(9.32g，33mmol)在乙腈(70mL)中的溶液逐滴加入到1，1’-羰基二咪唑(13.38g，82.5mmol)在乙腈(230mL)中的正在回流的溶液中。然后在回流下将反应混合物搅拌18小时，然后冷却到0℃。将所得的黄色沉淀滤出，用由冰水冷却的乙腈冲洗，在真空下干燥，得到标题化合物7.28g。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.26-1.40(m，1H)，1.54(m，1H)，1.63(m，2H)，2.01(m，1H)，3.63(t，2H)，3.81(m，4H)，4.59(t，2H)，11.78(br s，1H)，11.38(br s，1H). MS ES-m/z 307[M-H]- 制备211 1-[2-(2，2-二氟乙氧基)乙基]-5，7-二氧代-4，5，6，7-四氢-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将1，1’-羰基二咪唑(3.16g，19.5mmol)在乙腈(60mL)中的溶液在3小时内逐滴加入到在回流下搅拌的从制备205得到的化合物(3.8g，13.0mmol)在乙腈(150mL)中的溶液中。然后将反应混合物在回流下再搅拌3小时，并冷却。在减压下浓缩反应混合物，并且用水研磨残余物，将所得的固体滤出，用水冲洗，并且在真空下干燥，得到淡灰色固体状的标题化合物3.17g。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ3.61(m，2H)，3.79(s，3H)，3.90(t，2H)，3.64(t，2H)，5.99(m，1H)，10.78(bs，1H)，11.35(bs，1H). MS ES+ m/z 318[MH]+ 制备212 5，7-二氧代-1-[2-(2，2，2-三氟乙氧基)乙基]-4，5，6，7-四氢-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
在氮气下，将从制备206得到的胺(21.7g，70.0mmol)在乙腈(150mL)中的溶液在2小时内逐滴加到1，1’-羰基二咪唑(17.02g，105mmol)在回流的乙腈(850mL)中的搅拌溶液中。将混合物在回流下加热2小时，冷却，并且在减压下去除溶剂。将残余物用水(150mL)处理。将所得的淡灰色固体滤出，用水(3×100mL)冲洗，在真空和80℃下干燥，得到标题化合物21.26g。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ3.79(q，2H)，3.98(s，3H)，4.07(t，2H)，4.77(t，2H)，7.87(br s，1H)，8.41(br s，1H). MS ES- m/z 335[M-H]- 制备213 5，7-二氧代-1-[2-(3，3，3-三氟丙氧基)乙基]-4，5，6，7-四氢-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
采用类似于制备212中所述的工艺，由制备207得到的化合物和1，1’-羰基二咪唑，得到淡黄色固体状的标题化合物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ2.26(m，2H)，3.61(t，2H)，3.88(t，2H)，3.98(s，3H)，4.75(t，2H)，8.05(s，1H)，8.49(s，1H). MS m/z 351[MH]+ 制备214 5，7-二氧代-1-[2-(3-氟丙氧基)乙基]-4，5，6，7-四氢-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将从制备208得到的胺(2.3g，8.0mmol)在乙腈(35mL)中的溶液逐滴加入到1，1’-羰基二咪唑(2.0g，12.3mmol)在氮气下回流的乙腈(35mL)中的搅拌溶液中。然后，将混合物在回流下加热2小时，并冷却到室温。将所得的固体滤出，用乙腈冲洗，并将滤出液在减压下蒸发。将残余物用水研磨，将固体滤出，并且将两份分开的固体合并，在真空下干燥，得到标题化合物2.3g。
1H NMR(DMSO-D6，400MHz)δ1.70-1.92(m，2H)，3.42(t，2H)，3.79(t，2H)，3.83(s，3H)，4.27(dd，1H)，4.40(dd，1H)，4.65(m，2H). MS APCI+ m/z 315[MH]+ 制备215 5，7-二氯-1-[(2S)-2-甲氧基丙基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将氧氯化磷(3.46mL，37.2mmol)添加到得自制备209的化合物(700mg，2.48mmol)和氯化四乙铵水合物(616mg，3.72mmol)在乙腈(8mL)中的溶液中，并且将反应混合物在回流加热24小时。将冷却后的混合物在减压下浓缩，并将残余物与甲苯(3x)共沸，得到白色固体状的标题化合物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.30(d，3H)，3.15(s，3H)，3.90(m，1H)，4.10(s，3H)，4.68(dd，1H)，4.98(dd，1H). 制备216 5，7-二氯-1-[2-(环己基氧基)乙基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将N，N-二异丙基乙基胺(3.4mL，19.5mmol)逐滴加入到从制备210得到的化合物(2g，6.5mmol)，氧氯化磷(9.04mL，97.3mmol)和氯化四乙铵(2.15g，13.0mmol)在乙腈(25mL)中的溶液中，并且将反应混合物加热回流18小时。Tlc分析表明仍存在起始原料，于是加入额外的氧氯化磷(10mL，107mmol)，并将反应混合物再回流加热24小时。在减压下浓缩冷却后的混合物，并且将残余物用甲苯(2×100mL)共沸。将产物溶解在二氯甲烷(500mL)中，用水(3×200mL)冲洗，在硫酸镁上干燥，并且在减压下蒸发。通过柱色谱使用

硅胶盒和乙酸乙酯戊烷(20:80到100:0)的洗脱梯度，而将粗产物纯化，得到白色固体状的标题化合物1.0g。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.40(m，1H)，1.55-1.75(m，3H)，2.10(m，2H)，3.80(m，3H)，4.10(s，3H)，5.00(t，2H). 制备217 5，7-二氯-1-[2-(2，2-二氟乙氧基)乙基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将氧氯化磷(14mL，148mmol)逐份加入到从制备211得到的化合物(3.13g，9.84mmol)和氯化四乙铵(4.08g，2.46mmol)在丙腈(50mL)中的溶液中，然后将反应混合物在回流下搅拌18小时。在减压下浓缩冷却后的混合物，并且将残余物与甲苯(2x)共沸。将残余固体用戊烷:醚(40mL:10mL)研磨，并且将所得的固体滤出。将次预吸附到硅胶上，通过柱色谱在硅胶上使用乙酸乙酯戊烷(34:66)来纯化，得到白色固体状的标题化合物2.69g。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ3.55(m，2H)，4.03(t，2H)，4.06(s，3H)，5.00(t，2H)，5.66(m，1H). 微分析发现C，37.14；H，2.85；N，15.68。C11H10Cl2F2N4O3要求C，37.20；H，2.84；N，15.78％. 制备218 5，7-二氯-1-[2-(2，2，2-三氟乙氧基)乙基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将得自制备212的化合物(10g，29.8mmol)，氧氯化磷(42mL，447mmol)和氯化四乙铵水合物(14.8g，89.4mmol)在丙腈(125mL)中的混合物在回流下搅拌8小时。在减压下浓缩冷却后的混合物，并且将残余物与甲苯共沸。将产物在二氯甲烷(600mL)和水(500mL)之间分配，并且分离各层。将水溶液用二氯甲烷(2×500mL)进一步萃取，将合并的有机溶液用水(500mL)和盐水(200mL)冲洗，然后在硫酸镁上干燥，在减压下浓缩。通过柱色谱在硅胶上使用乙酸乙酯戊烷(3367到5050)的洗脱梯度，而将粗产物纯化，得到白色固体状的标题化合物5.4g。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ3.75(q，2H)，4.10(s，3H)，4.15(t，2H)，5.05(t，2H). MS APCI+ m/z 373[M]+ 制备219 5，7-二氯-1-[2-(3，3，3-三氟丙氧基)乙基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将得自制备213的化合物(3.28g，9.37mmol)，氧氯化磷(13.1mL，140mmol)和氯化四乙铵水合物(3.88g，23.4mmol)在丙腈(50mL)中的混合物在回流下搅拌18小时。在减压下浓缩冷却后的混合物，并且将残余物与甲苯共沸。将产物在二氯甲烷(50mL)和水(50mL)之间分配，并且分离各层。将水溶液用二氯甲烷(2×500mL)进一步萃取，将合并的有机溶液在硫酸镁上干燥，在减压下浓缩。将残余物用戊烷醚研磨，将所得的固体滤出，用戊烷冲洗，并在真空下干燥，得到固体状的标题化合物3.2g。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ2.20(m，2H)，3.57(t，2H)，3.90(t，2H)，4.06(s，3H)，4.99(t，2H). MS+ m/z 387[MH]+ 制备220 5，7-二氯-1-[2-(3-氟丙氧基)乙基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
采用类似于制备219中所述的工艺，由得自制备214的化合物，以86％的收率得到乳白色固体状的标题化合物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.76-86(m，2H)，3.48(t，2H)，3.95(t，2H)，4.09(s，3H)，4.29(dd，1H)，4.42(dd，1H)，5.01(t，2H). MS APCI+ m/z 351[MH]+ 制备221 5-氯-1-[(2S)-2-甲氧基丙基]-7-[(4-甲基吡啶-2-基)氨基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将2-氨基-4-甲基吡啶(850mg，7.83mmol)在二甲基亚砜(7mL)中的溶液升温到30℃，并加入得自制备215的二氯化合物(500mg，1.56mmol)。将反应混合物在30℃下再搅拌2小时，然后冷却到室温。将反应混合物倒入水(100mL)中，用二氯甲烷(2×200mL)萃取。将合并的有机溶液用水(200mL)，1M柠檬酸溶液(100mL)冲洗，然后在硫酸镁上干燥，并且在减压下浓缩。将产物用醚研磨，将固体滤出并干燥，得到黄色晶体状的标题化合物200mg。
1H NMR(DMSO-D6，400MHz)δ1.18(d，3H)，2.40(s，3H)，3.25(m，1H)，3.30(s，3H)，3.90(s，3H)，4.85(d，2H)，7.00(br s，1H)，8.20(br s，1H).MS APCI- m/z 389[MH]- 制备222 7-{[4-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基I]氧基}甲基)吡啶-2-基]氨基}-5-氯-1-(2-乙氧基乙基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将得自制备58的二氯化合物(400mg，1.25mmol)和4-(叔丁基-二甲基-甲硅烷基氧基甲基)-吡啶-2-基胺(WO 2001 017995，prep 8-5)(746mg，3.13mmol)在二氯甲烷(10mL)中的混合物在室温下搅拌18小时。将混合物在水(30mL)和二氯甲烷(30mL)之间分配，分离各层，并且将有机相在硫酸镁上干燥，在减压下蒸发。通过柱色谱使用Isolute

硅胶盒和乙酸乙酯戊烷(0:100到70:30)的洗脱梯度，将所得的黄色油状物纯化，得到标题化合物229mg。
1H NMR(MeOD-D6，400MHz)δ0.06(s，6H)，0.87(s，9H)，0.99(t，3H)，3.48(q，2H)，3.87(m，2H)，3.88(s，3H)，4.53(s，2H)，4.88(m，2H)，6.96(m，1H)，8.12(m，1H) MS ES+ m/z 521[MH]+ 制备223 5-氯-1-(2-丙氧基乙基)-7-(吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将得自制备57的二氯化合物(1.33g，4mmol)和2-氨基吡啶(1.88g，20mmol)在二氯甲烷(16mL)中的混合物在35℃下搅拌18小时。将反应混合物用二氯甲烷(200mL)稀释，将混合物用1M柠檬酸溶液(2×50mL)冲洗，在硫酸镁上干燥，并且在减压下蒸发，得到黄色油状的标题化合物1.48g。
1H NMR(DMSO-D6+1滴TFA-d，400MHz)δ0.80(t，3H)，1.38(m，2H)，3.37(t，2H)，3.85(t，2H)，3.88(s，3H)，4.94(t，2H)，7.20(m，1H)，8.01(m，1H)，8.10(d，1H)，8.38(d，1H). MS APCI+ m/z 391[MH]+ 制备224 5-氯-1-[2-(环丁基氧基)乙基]-7-[(4-甲基吡啶-2-基)氨基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将得自制备216的二氯化合物(1.0g，2.90mmol)和2-氨基-4-皮考啉(1.57g，14.53mmol)在二氯甲烷(12mL)中的混合物在室温下搅拌18小时。将混合物在二氯甲烷(250mL)和1M的柠檬酸溶液(100mL)之间分配，分离各层。将有机层再次用1M的柠檬酸溶液(100mL)，水(100mL)，和盐水(20mL)冲洗，然后在硫酸镁上干燥，并且在减压下蒸发。将产物悬浮在醚(50mL)中，对混合物进行超声波处理，然后过滤，并且将固体在真空下干燥，得到黄色固体状的标题化合物618mg。
1H NMR(DMSO-D6+TFA-d，400MHz)δ1.35(m，1H)，1.50(m，1H)，1.70(m，2H)，2.00(m，2H)，2.42(s，3H)，3.75(t，2H)，3.90(m，4H)，4.95(t，2H)，7.10(d，1H)，7.82(s，1H)，8.30(d，1H). MS APCI+ m/z 417[MH]+ 制备225 5-氯-1-[2-(2，2-二氟乙氧基)乙基]-7-[(4-甲基吡啶-2-基)氨基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
采用类似于制备224中所述的工艺，由得自制备217的氯化合物和2-氨基-4-皮考啉(1.62g，15mmol)，以56％的收率得到黄色固体状的标题化合物。
1H NMR(DMSO-D6+1滴TFA-d，400MHz)δ2.40(s，3H)，3.68(m，2H)，3.88(s，3H)，4.00(t，2H)，5.05(t，2H)，6.00(m，1H)，7.04(d，1H)，7.76(s，1H)，8.24(d，1H). 制备226 5-氯-7-[(4-甲基吡啶-2-基)氨基]-1-[2-(2，2，2-三氟乙氧基)乙基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将得自制备218的氯化合物(5.6g，14.9mmol)和2-氨基-4-皮考啉(4.85g，44.8mmol)在乙腈(60mL)中的混合物在回流下搅拌5小时。冷却反应混合物，并用10％的柠檬酸水溶液(33.6mL)稀释，并将混合物搅拌10分钟。然后将混合物在冰水浴中冷却30分钟，将得到的沉淀滤出，用经冰水冷却的乙腈水溶液(体积比50:50，37mL)和经冰水冷却的水(19mL)冲洗。然后将固体在真空下干燥，得到标题化合物5.05g。
1H NMR(DMSO-D6，400MHz)δ2.38(s，3H)，3.81(s，3H)，4.00(m，4H)，5.02(br s，2H)，6.85(br s，1H)，7.64(br s，1H)，8.04(br s，1H). MS ES+ m/z 445[MH]+ 制备227 5-氯-7-[(3-甲基苯基)氨基]-1-[2-(2，2，2-三氟乙氧基)乙基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将得自制备218的氯化合物(746mg，2mmol)和3-甲基苯胺(650μL，6mmol)在二甲基亚砜(8mL)中的混合物在室温下搅拌3小时。将混合物在二氯甲烷(200mL)和水(50mL)之间分配，分离各层。将有机相用1M盐酸(20mL)和水(2×50mL)冲洗，然后在硫酸镁上干燥，在减压下蒸发，得到白色固体状的标题化合物880mg。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ2.38(s，3H)，3.98(q，2H)，4.05(s，3H)，4.30(t，2H)，4.90(t，2H)，7.00(d，1H)，7.31(m，1H)，7.35(s，1H)，7.55(d，1H)，8.45(s，1H). MS APCI+ m/z 444[MH]+ 制备228 5-氯-7-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-1-[2-(2，2，2-三氟乙氧基)乙基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
采用类似于制备227中所述的工艺，由得自制备218中的氯化合物和4-氟-3-甲基苯胺，得到标题化合物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ2.30(s，3H)，3.98(q，2H)，4.05(s，3H)，4.27(t，2H)，4.90(s，2H)，7.06(m，1H)，7.38(m，1H)，7.47(m，1H)，8.36(s，1H). MS APCI+ m/z 462[MH]+ 制备229 5-氯-7-[(4-甲基吡啶-2-基)氨基]-1-[2-(3，3，3-三氟丙氧基)乙基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
采用类似于制备223中所述的工艺，由得自制备219的化合物和2-氨基-4-皮考啉，以74％的收率得到固体状的标题化合物。
1H NMR(DMSO-D6+1滴TFA-d，400MHz)δ2.41(s，3H)，2.44(t，2H)，3.63(t，2H)，3.88(s，3H)，3.91(t，2H)，5.01(t，2H)，7.04(d，1H)，7.79(s，1H)，8.21(d，1H). MS APCI+ m/z 459[M]+ 制备230 5-氯-1-[2-(3-氟丙氧基)乙基]-7-[(4-甲基吡啶-2-基)氨基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
采用类似于制备223中所述的工艺，由得自制备220的化合物和2-氨基-4-皮考啉，以75％的收率得到固体状的标题化合物。
1H NMR(DMSO-D6+1滴TFA-d，400MHz)δ1.68-1.82(m，2H)，2.40(s，3H)，3.49(t，2H)，3.85-3.89(m，5H)，4.21-4.36(m，2H)，4.99(t，2H)，7.01(d，1H)，7.81(s，1H)，8.19(d，1H). MS APCI+ m/z 423[M]+ 制备231 5-氯-1-(2-乙氧基乙基)-7-{[4-(羟甲基)吡啶-2-基]氨基}-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸
将得自制备222的化合物(229mg，0.44mmol)在1N的氢氧化钠溶液(2.2mL)和二氧杂环己烷(10mL)中的溶液在室温下搅拌72小时。使用1N的盐酸将混合物酸化到pH4，并用甲醇在二氯甲烷中的10％的溶液进行萃取。将合并的有机萃取物在硫酸镁上干燥，并且在减压下蒸发，得到黄色固体状的标题化合物140mg。
1H NMR(DMSO-D6，400MHz)δ1.07(t，3H)，3.55(q，2H)，3.93(t，2H)，4.65(t，2H)，4.99(s，2H)，5.60(m，1H)，7.10(m，1H)，8.29(m，1H). 制备232 5-氯-1-[2-(环丁基氧基)乙基]-7-[(4-甲基吡啶-2-基)氨基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸
将得自制备224的酯(600mg，1.44mmol)在二氧杂环己烷(5mL)和1N的氢氧化钠溶液(5mL)中的溶液在室温下搅拌18小时。将溶液在减压在浓缩，并用1M的柠檬酸溶液(25mL)浓缩。过滤出所得的沉淀，用醚冲洗，并且在真空50℃下干燥，得到黄色固体状的标题化合物566mg。
1H NMR(DMSO-D6+TFA-d，400MHz)δ1.35(m，1H)，1.55(m，1H)，1.75(t，2H)，2.05(m，2H)，2.40(s，3H)，3.79(t，2H)，3.95(m，1H)，4.90(t，2H)，6.98(d，1H)，7.85(s，1H)，8.20(d，1H). MS APCI+ m/z 403[MH]+ 制备233 5-氯-7-[(4-甲基吡啶-2-基)氨基]-1-[2-(2，2，2-三氟乙氧基)乙基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸
将得自制备226的酯(1.2g，2.70mmol)的酯和1M的氢氧化钠溶液(4.1mL，4.1mmol)在二氧杂环己烷(17.4mL)中的混合物在室温下搅拌18小时。将反应混合物在减压在浓缩，并将残余物溶解在水(50mL)中。将溶液用二氯甲烷(10mL)冲洗，然后用1M的柠檬酸酸化。过滤出所得的固体，并在真空下干燥，得到标题化合物925mg。
1H NMR(DMSO-D6，400MHz)δ2.50(s，3H)，3.32(q，2H)，4.07(t，2H)，5.06(t，2H)，6.93(d，1H)，7.73(s，1H)，8.13(d，1H). 制备234 3-({[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}甲基)-5-氯-1-(2-乙氧基乙基)-N-(6-甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-胺
将4-氨基-6-甲基嘧啶(1.13g，10.4mmol)和二(三甲基甲硅烷基)酰胺钠(3.80g，20.74mmol)在四氢呋喃(40mL)中的溶液在室温下搅拌15分钟。加入得自制备154的二氯化合物(3.5g，8.64mmol)在四氢呋喃(50mL)中的溶液，并且将反应混合物在室温下搅拌1.5小时。将反应混合物在减压下浓缩，并且将残余物在二氯甲烷和饱和氯化铵溶液之间分配，并且分离各层。将有机相在硫酸镁上干燥，并且在减压下蒸发，得到红色固体。通过柱色谱使用

硅胶盒和甲醇二氯甲烷(0:100到3:97)的洗脱梯度，纯化该产物，得到橙色固体状的标题化合物3.7g。
1H NMR(DMSO-D6，400MHz)δ0.02(s，6H)，0.79(s，9H)，1.06(t，3H)，2.44(s，3H)，3.53(q，2H)，3.82(t，2H)，4.71(t，2H)，4.89(s，2H)，8.19(s，1H)，8.59(s，1H). MS ES+ m/z 478[MH]+ 制备235 {5-氯-1-(2-乙氧基乙基)-7-[(6-甲基嘧啶-4-基)氨基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-基}甲醇
将得自制备234(3.7g，7.75mmol)的化合物和氟化四丁基铵(23.2mL，1M的四氢呋喃溶液，23.2mmol)在四氢呋喃(61mL)中的混合物在室温下搅拌18小时。将混合物在减压下浓缩，并且将残余物在乙酸乙酯(100mL)和水(100mL)之间分配，并分离各层。将水溶液用额外的乙酸乙酯(2×50mL)萃取，并将合并的有机溶液在减压下浓缩。
通过柱色谱使用

硅胶盒和甲醇二氯甲烷(0:100到2:98)的洗脱梯度，纯化残余物，得到标题化合物2.6g。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ1.19(t，3H)，2.57(s，3H)，3.66(q，2H)，3.96(t，2H)，4.84(t，2H)，4.90(s，2H)，8.33(s，1H)，8.72(s，1H). MS ES+ m/z 364[MH]+ 制备236 5-氯-1-(2-乙氧基乙基)-7-[(6-甲基嘧啶-4-基)氨基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-甲醛
将Dess-Martin过碘烷(4.56g，10.73mmol)逐份加入到得自制备235的醇(2.6g，7.15mmol)在二氯甲烷(150mL)中的经冰水冷却的溶液中，然后将反应混合物在室温下再搅拌2小时。逐份加入硫代硫酸钠(7.5g，30mmol)在水(75mL)中的溶液，之后加入饱和碳酸氢钠溶液(75mL)，然后加入醚(75mL)。将混合物搅拌15分钟，并分离各层。将水溶液用额外的二氯甲烷(2×40mL)萃取，并且将合并的有机溶液在硫酸镁上干燥，并且在减压下蒸发。通过柱色谱使用Isolute

硅胶盒和乙酸乙酯戊烷(0:100到100:0)的洗脱梯度，纯化残余的棕色固体，得到固体状的标题化合物1.66g。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.25(t，3H)，2.63(s，3H)，3.72(q，2H)，4.06(t，2H)，4.91(t，2H)，8.29(s，1H)，8.81(s，1H)，10.34(s，1H)，10.42(s，1H). MS ES+ m/z 362[MH]+ 制备237 5-氯-1-(2-乙氧基乙基)-7-[(6-甲基嘧啶-4-基)氨基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸
将2-甲基-2-丁烯(160mL，0.32mol)加入到得自制备236的醛(1.66g，4.59mmol)在叔丁醇(300mL)中的溶液中。在5分钟内逐份加入亚氯酸钠(4.96g，55.1mmol)和磷酸二氢钠(5.07g，42.2mmol)在水(60mL)中的溶液，然后将反应混合物在室温下搅拌1小时。将反应混合物用二氯甲烷(300mL)和水(150mL)稀释，分离各层。蒸发水层，并且过滤出所得的沉淀，在真空下干燥，得到标题化合物1.02g。
1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δ1.07(t，3H)，2.48(s，3H)，3.51(m，2H)，3.88(t，2H)，4.90(t，2H)，8.02(br s，1H)，8.78(s，1H). MS APCI+ m/z 378[MH]+ 制备238 5-氯-1-(2-乙氧基乙基)-7-[(3-甲基苯基)氨基]-1H-吲唑-3-羧酸
将得自制备81的酯(800mg，2.06mmol)和1N的氢氧化钠溶液(5mL，5mmol)在二氧杂环己烷(3mL)中的混合物在室温下搅拌18小时。在减压下浓缩反应混合物，并且将残余物用1M的柠檬酸溶液稀释，并用超声波处理混合物。过滤出所得的沉淀，用水和醚冲洗，在真空下干燥，得到白色固体状的标题化合物600mg。
1H NMR(DMSO-D6，400MHz)δ1.00(t，3H)，2.35(s，3H)，3.50(q，2H)，3.82(t，2H)，4.95(t，2H)，7.01(d，1H)，7.35(t，1H)，7.41(s，1H)，7.50(d，1H)，9.39(s，1H). MS APCI+ m/z 376[MH]+ 制备239 5-氯-1-(2-乙氧基乙基)-7-[(1-甲基-6-氧代-1，6-二氢吡啶-3-基)氨基]-1H-吲唑-3-羧酸
将得自制备58的化合物(10.85g，34mmol)逐份加到3-氨基-1-甲基-1，6-二氢吡啶-6-酮(EP 677519)(4.6g，37mmol)和N-乙基二异丙基胺(5.92mL，34mmol)在二甲基亚砜(40mL)中的溶液中，然后将反应混合物在室温下搅拌4小时。将混合物用水(600mL)稀释，过滤出所得的固体，用水冲洗，在真空中干燥，得到10.8g。
将此固体的一部分(6.75g，16.59mmol)溶解在二氧杂环己烷(65mL)中，并将溶液用1N氢氧化钠(33mL，1M，33mmol)处理，将反应混合物在室温下搅拌18小时。在减压下浓缩反应混合物，将残余物溶解在水(120mL)中，用二氯甲烷(15mL)冲洗，然后使用固体柠檬酸酸化到pH3。过滤出所得的沉淀，用水(3×20mL)冲洗，并在真空下干燥，得到黄色固体状的标题化合物6.19g。
1H NMR(DMSO-D6，400MHz)δ0.95(t，3H)，3.40(q，2H)，3.47(s，3H)，3.79(t，2H)，4.92(t，2H)，6.49(d，1H)，7.58(dd，1H)，7.90(s，1H)，MS APCI+ m/z 376[MH]+ 制备240 环丁基氨基甲酸苯甲酯
将氯甲酸苯甲酯(5.2mL，36.4mmol)逐滴加入到环丁基胺(2g，28.1mmol)在二氯甲烷中的(20mL)的冰水冷却的溶液中，同时进行搅拌。将三乙胺(4.7mL，33.7mmol)逐滴加入到所述冰水冷却的溶液中，一旦完成加料，就将反应混合物升温到室温，并且搅拌18小时。将反应混合物用饱和的碳酸氢钠溶液冲洗(x2)，在硫酸钠上干燥，并在减压下浓缩。通过柱色谱在硅胶上使用二氯甲烷作为洗脱剂，将残余物纯化，得到标题化合物3.72g。
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ1.68(m，2H)，1.82(m，2H)，2.35(m，2H)，4.19(m，1H)，4.92(m，1H)，5.14(s，2H)，7.25-7.39(m，5H). MS TSP+ m/z 223.2[MH]+ 制备241 氢氯化N-环丁基-N-甲基胺
将得自制备240的化合物(500mg，2.43mmol)的溶液逐滴加入氢化锂铝(12.18mL，1M的四氢呋喃溶液，12.18mmol)在四氢呋喃(12mL)中的冰水冷却的溶液中，并且将反应混合物在室温下搅拌24小时。将混合物冷却到0℃，逐滴加入水(0.46mL)，之后逐滴加入15％的氢氧化钠溶液(0.46mL)，最后再逐滴加入水(1.4mL)。过滤出所得的沉淀，并用醚冲洗。将滤出液用水冲洗，并且使用1M的氢氯酸醚溶液酸化到pH2。将溶液在室温下蒸发，将残余的油状物溶解在乙醚中，在硫酸钠上干燥，在减压下蒸发，得到标题化合物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.78-2.04(m，2H)，2.34(m，2H)，2.44(m，2H)，2.54(s，3H)，3.58(m，1H)，9.60(br s，2H). 制备242到244
将适当的胺(HNR3R4)(2mmol)和氟化铯(100mg，0.67mmol)加入到处于

中的得自制备233的氯化物(260mg，0.67mmol)在二甲基亚砜(2mL)中的溶液中。然后将反应混合物密封，在120℃下加热18小时。将冷却的溶液在二氯甲烷(50mL)和水(50mL)之间分配，并且分离各层。将有机相用水(50mL)冲洗，在硫酸镁上干燥，并且在减压下蒸发。通过柱色谱在硅胶上以二氯甲烷甲醇(982)作为洗脱剂，将粗产物纯化，得到标题化合物。


制备245到249
将适当的胺(HNR3R4)(2mmol)加入到处于

中的得自制备227或228的氯化物(296mg，0.67mmol)和氟化铯(101mg，0.67mmol)在二甲基亚砜(2.5mL)中的溶液中。然后将反应混合物密封，在120℃下加热12小时。将冷却的溶液在二氯甲烷(200mL)和水(50mL)之间分配，并且分离各层。将有机相用水(2×50mL)冲洗，在硫酸镁上干燥，并且在减压下蒸发，得到标题化合物。


制备250到258 下面的表中所示的通式的化合物使用制备245～249中所述的方法，由得自制备225，229和230的化合物和适当的HNR3R4胺来制备。



制备259 1-(2-乙氧基乙基)-7-[(4-甲基吡啶-2-基)氨基]-5-吡啶-1-基-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
由得自制备72的氯化物和吡咯烷，采用类似于制备245-249中所述的工艺，得到黄色油状的标题化合物，不同之处在于将5当量的N-乙基二异丙基胺加入反应混合物，并且通过柱色谱使用Isolute

硅胶盒和二氯甲烷甲醇0.88Ammonia(100:0:0到95:5:0.5)作为洗脱剂来纯化产物。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ1.05(t，3H)，2.02(m，4H)，2.40(s，3H)，3.60(q，2H)，3.65(m，4H)，3.90(m，5H)，4.80(t，2H)，6.95(d，1H)，8.18(d，1H)，8.50(s，1H). MS APCI+ m/z 426[MH]+ 制备260 5-[异丙基(甲基)氨基]-1-[(2S)-2-甲氧基丙基]-7-[(4-甲基吡啶-2-基)氨基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将得自制备221的氯化物(110mg，0.28mmol)，N-乙基二异丙基胺(0.25mL，1.40mmol)，N-甲基二异丙基胺(0.15mL，1.40mmol)和氟化四乙铵(37mg，0.28mmol)在1-甲基-2-吡咯烷酮(1mL)中的混合物在

中在120℃下加热18小时。在减压下浓缩冷却后的混合物，并将残余物在二氯甲烷(50mL)和水(50mL)之间分配，并且分离各层。将水相用额外的二氯甲烷(50mL)萃取，并且将合并的有机溶液用水(100mL)冲洗，在硫酸镁上干燥，在减压下蒸发。通过柱色谱使用

硅胶盒以二氯甲烷作为洗脱剂，将粗产物纯化，得到黄色油状的标题化合物43mg。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ1.21(m，6H)，1.28(d，3H)，2.39(s，3H)，3.03(s，3H)，3.40(s，3H)，3.98(m，4H)，4.50-4.70(m，2H)，5.17(m，1H)，6.92(d，1H)，8.18(m，2H). MS APCI+ m/z 428[MH]+ 制备261 5-氯-7-[(4-甲基吡啶-2-基)氨基]-N-(甲基磺酰基)-1-[2-(2，2，2-三氟乙氧基)乙基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-甲酰胺
将得自制备233的酸(300mg，0.70mmol)，甲磺酰胺(87mg，0.91mmol)，氢氯化1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(175mg，0.91mmol)和4-二甲氨基吡啶(102mg，0.91mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(3mL)中的混合物在室温下搅拌18小时。Tlc分析表明仍然存在起始原料，于是加入额外的甲磺酰胺(43mg，0.45mmol)，氢氯化1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(87mg，0.45mmol)和4-二甲氨基吡啶(51mg，0.45mmol)，然后将混合物再搅拌4小时。将混合物在二氯甲烷(50mL)和水(50mL)之间分配，并且分离各层。将有机溶液用1N的盐酸(5mL)和水(3×50mL)冲洗，然后在硫酸钠上干燥，并且在减压下蒸发，得到标题产物100mg。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ2.42(s，3H)，3.39(s，3H)，4.02(q，2H)，4.17(t，2H)，5.07(t，2H)，6.99(d，1H)，7.81(s，1H)，8.18(d，1H). MS ES- m/z 506[M-H]- 实例1 1-(2-乙氧基乙基)-5-(N-异丙基-N-甲基氨基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将制备72中的氯化合物(130mg，0.33mmol)溶解在二甲基亚砜(1mL)中，并且将溶液用氟化四乙铵(50mg，0.33mmol)和N-甲基异丙基胺(104μL，1.0mmol)处理。将反应混合物在ReactiVialTM中在120℃下搅拌18小时，之后冷却并在真空下浓缩。将残余物在乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)之间分配，并将有机相在硫酸镁上干燥，在真空下浓缩。通过柱色谱在硅胶上以1000到973的二氯甲烷甲醇洗脱，而将残余物纯化，得到标题产物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.18(t，3H)，1.24(s，6H)，2.40(m，3H)，3.11(s，3H)，3.60(q，2H)，3.96(t，2H)，4.02(s，3H)，4.80(t，2H)，5.10(m，1H)，6.91(d，1H)，8.18(m，1H)，8.37(d，1H).MS APCI+ m/z 428[MH]+ 实例2 1-(2-乙氧基乙基)-5-(N-乙基-N-甲基氨基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将制备72中的氯化合物(130mg，0.33mmol)溶解在二甲基亚砜(1mL)中，并将溶液用氟化四乙铵(50mg，0.33mmol)和N-甲基乙基胺(86μL，1.0mmol)处理。将反应混合物在ReactiVialTM中加热到110℃，并保持18hours小时，然后冷却到室温。将反应混合物在二氯甲烷(50mL)和水(50mL)之间分配，并且将有机相用水(2×30mL)冲洗，在硫酸镁上干燥，在真空下浓缩。通过柱色谱在硅胶上以1000到9010的二氯甲烷甲醇洗脱，而将残余物纯化，得到标题产物。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ1.10(t，3H)，1.25(m，3H)，2.40(s，3H)，3.25(s，3H)，3.60(q，2H)，3.78(q，2H)，3.86(m，5H)，4.80(t，2H)，6.93(d，1H)，8.15(d，1H)，8.32(s，1H).MS APCI+ m/z 414[MH]+ 下面所示的通式的如下化合物通过类似于实例2中所述的方法，使用适当的HNR3R4胺来制备。


·实例4使用(1S，4S)-2，5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁酯(Aldrich Chem.)作为HNR3R4胺。在通过柱色谱进行纯化之前，将粗产物溶解在二氯甲烷(5mL)中，并且将溶液用三氟乙酸(5mL)在室温下处理4小时。将反应混合物在真空下浓缩，并且将残余物在二氯甲烷(50mL)和饱和碳酸氢钠溶液(50mL)之间分配。分离出有机相，在硫酸镁上干燥，并在真空下浓缩。
实例6 1-(2-乙氧基乙基)-5-(N-异丙基-N-甲基氨基)-7-(6-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将制备93中的氯化合物(200mg，0.51mmol)加入到N-乙基二异丙基胺(440μL，2.55mmol)，异丙基甲基胺(260μL，2.55mmol)和氟化铯(77mg，0.51mmol)在二甲基亚砜(1mL)中的溶液中，并且将反应混合物在ReactiVialTM中加热到120℃，保持18小时。将反应混合物在真空下浓缩，并且将残余物置于1M的柠檬酸溶液(5mL)中，用二氯甲烷(3×25mL)萃取。将有机物合并，在硫酸镁上干燥，并在真空下浓缩，得到标题产物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.16(t，3H)，1.24(d，6H)，2.37(s，3H)，3.11(s，3H)，3.62(q，2H)，3.98(t，2H)，4.01(s，3H)，4.77(m，2H)，5.15(m，1H)，6.82(d，1H)，8.18(d，1H)，8.26(s，1H)，9.76(s，1H). 实例7 1-(2-乙氧基乙基)-5-(N-乙基-N-甲基氨基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸乙酯
将制备175中的乙基酯(100mg，0.25mmol)溶解在二甲基亚砜(1mL)中，并且将溶液用N-甲基·乙基胺(78μL，0.75mmol)和氟化四乙铵(37mg，0.25mmol)处理。然后，将反应混合物在ReactiVialTM加热到120℃，并保持18小时，之后冷却。将反应混合物在真空下浓缩，将残余物在乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)之间分配，并将有机相在硫酸镁上干燥，在真空下浓缩。通过柱色谱在硅胶上以1000到9010的二氯甲烷乙腈洗脱，而将残余物纯化。将粗产物在二氯甲烷(30mL)和饱和碳酸氢钠溶液(10mL)之间分配。分离出有机相，在硫酸镁上干燥，并在真空下浓缩。通过柱色谱在硅胶上以9550.5的二氯甲烷甲醇0.88Ammonia洗脱，而将残余物纯化，得到标题产物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.14(t，3H)，1.24(t，3H)，1.46(t，3H)，2.39(s，3H)，3.25(s，3H)，3.62(q，2H)，3.80(q，2H)，3.95(t，2H)，4.52(q，2H)，4.78(t，2H)，6.82(d，1H)，8.20(d，1H)，8.30(s，1H)，9.75(m，1H).MSAPCI+ m/z 428[MH]+ 下面所示的通式的如下化合物通过类似于实例7中所述的方法，使用适当的HNR3R4胺来制备。


·实例9-此化合物不用通过柱色谱纯化进行分离 实例10 5-二甲氨基-1-(2-乙氧基乙基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸2-(二甲氨基)乙酯
标题化合物通过类似于实例7中所述的方法，使用制备176中的酯和2M的二甲基胺甲醇溶液来制备。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ1.10(t，3H)，2.38(s，6H)，2.40(s，3H)，2.84(t，2H)，3.26(s，6H)，3.60(q，2H)，3.94(t，2H)，4.52(t，2H)，4.80(m，2H)，6.94(d，1H)，8.15(d，1H)，8.34(s，1H).MS APCI+ m/z 457[MH]+ 实例11到41 将适当的单氯前驱体(1当量)溶解在二甲基亚砜(1-2mLmmol-1)中，并将溶液用适当的HNR3R4胺(3当量)和N-乙基二异丙基胺(3当量)处理。然后将反应混合物在120℃下搅拌18小时，冷却到室温，并且在真空下浓缩。将残余物溶解在二氯甲烷中，将有机相用柠檬酸溶液(20mL)冲洗，在硫酸镁上干燥并在真空下浓缩。通过柱色谱在硅胶上以1000到946的二氯甲烷甲醇洗脱，而将粗产物纯化，得到所期望的产物。
使用得自制备135，136，137，140，141，142，143，144，146，147，148，149，170和171的单氯前驱体。






·实例14和24-31不需使用N-乙基二异丙基胺 ·实例38-41使用氟化铯代替N-乙基二异丙基胺 ·实例12使用制备4中的胺作为HNR3R4胺 ·实例13使用制备3中的胺作为HNR3R4胺 实例42到48
将制备144中的单氯化合物(99mg，0.27mmol)溶解在二甲基亚砜(3mL)中，并且将溶液用适当的HNR3R4胺(1.08mmol)处理。将反应混合物加热到120℃，并保持18小时，之后冷却到室温。将反应混合物用二氯甲烷稀释，用水，盐水(x2)和柠檬酸冲洗。将二氯甲烷相在硫酸镁上干燥，并在真空下浓缩。通过柱色谱在硅胶上以1000到8515的二氯甲烷甲醇洗脱，而将残余物纯化。将粗产物用醚研磨，得到所期望的产物。


实例49到74
将适当的单氯前驱体(0.266mmol)和氟化四乙铵(39.6mg，0.266mmol)溶解在二甲基亚砜(1.0mL)中，并且将溶液用N-乙基二异丙基胺(230μL，1.33mmol)和适当的HNR3R4胺(1.33mmol)在二甲基亚砜(500μL)中的溶液进行处理。将反应混合物置于密封的容器中，并且以350rpm在120℃下振荡18小时。将反应混合物用二氯甲烷稀释，并且用1M的柠檬酸溶液和水冲洗。然后，将二氯甲烷相在硫酸镁上干燥，并且在真空下浓缩。通过柱色谱在硅胶上以1000到9010的二氯甲烷甲醇洗脱，而将残余物纯化，得到所期望的产物。
使用得自制备137，138，139，145，150，151，172，173和174的单氯前驱体。





·实例51使用环丁基-甲基-胺(J.Med.Chem.，1994，37，3482-3491)作为HNR3R4胺来制备。
·实例67，68和69通过柱色谱在硅胶上以90101的二氯甲烷甲醇乙酸洗脱来纯化 ·实例70和71不需使用N-乙基二异丙基胺。
实例75 3-[1-(2-乙氧基乙基)-5-(N-异丙基-N-甲基氨基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-基]-2H-1，2，4-噁二唑-5-酮
将制备183中的噁二唑酮(50mg，0.12mmol)加入到甲基异丙基胺(44mg，0.60mmol)和N-乙基二异丙基胺(83μL，0.60mmol)在二甲基亚砜(1mL)中的溶液中，并且将反应混合物在120℃下搅拌18小时。将反应混合物用乙酸乙酯(20mL)稀释，并且用水(15mL)冲洗。然后，将水相用乙酸乙酯(2×20mL)萃取，用乙酸溶液酸化，并用额外的乙酸乙酯萃取(2×20mL)。将有机物合并，在硫酸镁上干燥，并在真空下浓缩。通过柱色谱在硅胶上以10000到97.52.50.25的二氯甲烷甲醇乙酸洗脱，而将残余物纯化，得到标题产物。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ1.11(t，3H)，1.25(d，6H)，2.41(s，3H)，3.09(s，3H)，3.60(m，2H)，3.95(t，2H)，4.83(t，2H)，5.16(m，1H)，6.95(d，1H)，8.16(m，1H)，8.25(m，1H) MS ES+ m/z 454[MH]+ 下面所示的通式的如下化合物通过类似于实例75中所述的方法，使用得自制备183，184和185的单氯前驱体来制备


实例81 1-(2-乙氧基乙基)-7-(5-氟吡啶-2-基氨基)-5-(N-异丙基-N-甲基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸
将制备108中的酯(30mg，0.07mmol)和1M的氢氧化钠水溶液(105μL，0.105mmol)溶解在二氧杂环己烷(1mL)中，并将反应混合物在室温下搅拌18小时。将反应混合物在真空下浓缩，并将残余物用1M的柠檬酸溶液(5mL)处理，用二氯甲烷(3×50mL)萃取。将有机物合并，在硫酸镁上干燥，并在真空下浓缩。将粗产物用醚研磨，然后过滤，得到白色固体状的标题产物27mg。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ1.22(t，3H)，1.30(d，6H)，3.12(s，3H)，3.70(q，2H)，3.98(t，2H)，4.84(t，2H)，5.01(m，1H)，7.71(m，1H)，8.29(m，1H)，8.31(d，1H) MS ES- m/z 416[M-H]- 下面所示的通式的如下化合物通过类似于实例81中所述的方法，使用适当的制备103，106，108，109，110，111，112，113，114，115，116，117，118，119，121，122，123，124，125，126，128，129，130，131，132，133，134和实例6中的酯来制备。






实例110 1-(2-乙氧基乙基)-5-(N-异丙基-N-甲基氨基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸
将制备121的酯(219mg，0.51mmol)溶解在1M的氢氧化钠水溶液(3mL)在二氧杂环己烷(1.5mL)中的溶液中，并将反应混合物在室温下搅拌18小时。将反应混合物用1M的柠檬酸溶液(50mL)稀释，并且将混合物用二氯甲烷(3×100mL)冲洗。将合并的二氯甲烷萃取物在硫酸镁上干燥，并在真空下浓缩。通过柱色谱在硅胶上以1000到928的二氯甲烷甲醇洗脱，而将残余物纯化，得到黄色油状的标题产物80mg(38％)。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ1.12(t，3H)，1.30(d，6H)，2.45(s，3H)，3.12(s，3H)，3.60(m，2H)，3.96(t，2H)，4.88(m，2H)，4.98(m，1H)，7.04(d，1H)，8.14(s，1H)，8.18(d，1H).MS APCI-m/z 412[M-H]- 实例111 1-(2-异丙氧基乙基)-5-(N-异丙基-N-甲基氨基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸
将制备106的酯(140mg，0.32mmol)溶解在甲醇(2mL)中，并且将溶液用1M的氢氧化钠水溶液(640μL)处理。将反应混合物在室温下搅拌18小时，之后在真空下浓缩。将残余物溶解水(20mL)中，用乙酸乙酯(10mL)冲洗，用柠檬酸酸化，并且用二氯甲烷(2×20mL)萃取。将有机物合并，在硫酸镁上干燥，并且在真空下浓缩。通过柱色谱在硅胶上以1000到955的二氯甲烷甲醇洗脱，而将残余物纯化。将产物用醚研磨，得到白色固体状的标题产物45mg。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ1.10(d，6H)，1.32(d，6H)，2.42(s，3H)，3.12(s，3H)，3.66(m，1H)，3.94(t，2H)，4.83(t，2H)，5.05(m，1H)，7.04(d，1H)，8.16(s，1H)，8.20(d，1H).MS ES+m/z 428[MH]+ 实例112 (2’R)-5-(N-异丙基-N-甲基氨基)-1-(2’-甲氧基丙基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸
标题化合物通过类似于实例111中所述的方法，使用制备105中的酯来制备。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ1.32(m，9H)，2.44(s，3H)，3.10(s，3H)，3.42(s，3H)，3.97(m，1H)，4.73(m，2H)，4.99(m，1H)，7.08(m，1H)，8.08(s，1H)，8.20(d，1H).MS APCI+m/z 414[MH]+ 实例113 N-[1-(2-乙氧基乙基)-5-(N-异丙基-N-甲基氨基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羰基]甲磺酰胺
将制备186中的氯化合物(90mg，0.20mmol)，N-甲基-异丙基胺(73mg，1.0mmol)，N-乙基二异丙基胺(170μL，1.0mmol)和氟化铯(30mg，0.20mmol)溶解在二甲基亚砜(1mL)中，并且将反应混合物在110℃下搅拌5小时。将反应混合物冷却，然后用乙酸乙酯(10mL)和水(10mL)稀释。分离出有机相，并且用水(2×10mL)冲洗，在硫酸镁上干燥并在真空下浓缩。通过柱色谱在硅胶上以991到973的二氯甲烷甲醇洗脱，而将残余物纯化。将粗产物溶解在乙酸乙酯(2mL)中，并且用戊烷处理。过滤出所形成的沉淀，并且在真空下干燥，得到标题产物42mg。
1H NMR(DMSO-D6+CF3CO2D，400MHz)δ0.98(t，3H)，1.18(d，6H)，2.44(s，3H)，3.02(s，3H)，3.40(s，3H)，3.44(d，2H)，3.86(t，2H)，4.75(m，1H)，4.94(t，2H)，7.18(d，1H)，8.06(s，1H)，8.25(d，1H).MS ES-m/z489[M-H]- 实例114 N-[5-(二甲氨基)-1-(2-乙氧基乙基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羰基]甲磺酰胺
标题产物通过类似于实例113中所述的方法，使用33％的二甲基胺在乙醇中的溶液作为HNR3R4胺来制备。制备出55mg的所期望的产物。
1H NMR(DMSO-D6+CF3CO2D，400MHz)δ0.97(t，3H)，2.45(s，3H)，3.20(s，6H)，3.40(s，3H)，3.44(d，2H)，3.88(t，2H)，4.95(t，2H)，7.18(d，1H)，8.07(s，1H)，8.25(d，1H)，13.40(s，1H).MS ES+ m/z 485[MNa]+ 实例115 N-[1-(2-乙氧基乙基)-5-(N-乙基-N-甲基氨基)-7-(4-甲基吡啶-2-基氨基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羰基]甲磺酰胺
将制备186中的氯化合物(110mg，0.24mmol)，N-甲基-乙基胺(79mg，1.2mmol)，N-乙基二异丙基胺(210μL，1.20mmol)和氟化铯(37mg，0.24mmol)溶解在二甲基亚砜(1mL)中，并且将反应混合物在ReactiVialTM中加热到110℃并保持5小时。将反应混合物在乙酸乙酯(10mL)和水(10mL)之间分配，并且分离出有机相，用水(2×10mL)冲洗。然后将有机相在硫酸镁上干燥，并在真空下浓缩。通过柱色谱在硅胶上以991到973的二氯甲烷乙酸乙酯洗脱，而将残余物纯化，得到淡黄色固体状的标题产物66mg。
或者，实例115可以通过使用实例96的羧酸来制备。将实例96的羧酸(1.0g，2.50mmol)，甲磺酰胺(356mg，3.75mmol)，氢氯化1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(1.0g，5.2mmol)和4-二甲氨基吡啶(305mg，2.5mmol)溶解在二氯甲烷(5mL)中，并且将反应混合物在室温下搅拌16小时。将反应混合物用10％的柠檬酸水溶液(3mL)稀释，并且分离出有机相，用水(3mL)冲洗，在硫酸镁上干燥并在真空下浓缩。
1H NMR(DMSO-D6+CF3CO2D，400MHz)δ0.99(t，3H)，1.17(t，3H)，2.44(s，3H)，3.18(s，3H)，3.41(s，3H)，3.44(d，2H)，3.66(d，2H)，3.88(t，2H)，4.93(t，2H)，7.16(d，1H)，8.09(s，1H)，8.26(d，1H).MS ES-m/z475[M-H]- 实例116 1-(2-乙氧基乙基)-5-[乙基(甲基)氨基]-7-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
将得自制备92的氯化合物(200mg，0.49mmol)，N-乙基甲基胺(0.084mL，0.98mmol)和N-乙基二异丙基胺(0.17mL，0.98mmol)在二甲基亚砜(2mL)中的混合物在

中在120℃下加热18小时。在减压下浓缩冷却后的混合物，并且将残余物在二氯甲烷(100mL)和水(100mL)之间分配，分离各层。将水溶液用额外的二氯甲烷(50mL)萃取，并且将合并的有机溶液用水(100mL)，盐水(50mL)冲洗，在硫酸镁上干燥，并且在减压下蒸发。通过通过柱色谱在Isolute

硅胶盒上使用二氯甲烷甲醇(1000到955)作为洗脱梯度，而将粗产物纯化，得到白色结晶固体状的标题化合物70mg。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ1.15(t，3H)，1.20(t，3H)，2.30(s，3H)，3.19(s，3H)，3.60(q，2H)，3.70(q，2H)，3.96(s，3H)，3.98(m，2H)，4.80(t，2H)，7.01(m，1H)，7.42(m，1H)，7.67(m，1H). MS APCI+ m/z 431[MH]+ 实例117 5-(二乙氨基)-1-(2-乙氧基乙基)-7-[(4-氟-3-甲基苯基)氨基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸甲酯
采用类似于实例116中所述的工艺，由制备92中的化合物，在从甲醇重结晶之后得到白色结晶固体状的标题化合物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.20(m，9H)，2.30(s，3H)，3.65(m，6H)，4.00(m，5H)，4.75(t，2H)，6.95(m，1H)，7.35(m，1H)，7.60(m，1H). MS APCI+ m/z 445[MH]+ 实例118 1-(2-乙氧基乙基)-5-[乙基(甲基)氨基]-7-[(3-甲基苯基)氨基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸
将得自制备238的氯化物(200mg，0.53mmol)，氟化铯(81mg，0.53mmol)和N-乙基甲基胺(0.25mL，2.65mmol)在二甲基亚砜(1.5mL)中的混合物在

中在110℃下加热18小时。将冷却后的混合物在二氯甲烷(50mL)和1N的柠檬酸溶液(100mL)之间分配，并分离各层。将水溶液用额外的二氯甲烷(50mL)萃取，并将合并的有机溶液用水(2×100mL)然后用盐水(50mL)冲洗。将溶液在硫酸镁上干燥，并在减压下浓缩，得到白色固体状的标题化合物150mg。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ1.10(t，3H)，1.25(t，3H)，2.40(s，3H)，3.25(s，3H)，3.65(q，2H)，3.75(q，2H)，4.00(t，2H)，4.85(t，2H)，7.10(d，1H)，7.35(m，1H)，7.50(d，1H)，7.61(s，1H). MS APCI+ m/z 399[MH]+ 实例119到124 下面所示的通式的如下化合物
采用类似于实例118中所述的工序，由得自制备149，231，232和237中的相应的氯化物来制备。



A-产物从二氯甲烷重结晶，然后在醚中进行超声波处理，在真空下干燥。
实例125 5-(二乙氨基)-1-(2-乙氧基乙基)-7-[(1-甲基-6-氧代-1，6-二氢吡啶-3-基)氨基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸
将得自制备239的氯化合物(170mg，0.43mmol)，二乙胺(0.18mL，1.73mmol)和氟化铯(66mg，0.43mmol)在二甲基亚砜(1mL)中的混合物在110℃下搅拌2小时。加入额外的二乙胺(0.18mL，1.73mmol)的二甲基亚砜(0.5mL)溶液，将混合物转移到

并且在110℃下再搅拌2小时。将冷却后的混合物用二氯甲烷(40mL)稀释，用1M的柠檬酸溶液(3×20mL)冲洗。将合并的水溶液用二氯甲烷(20mL)冲洗，然后使用固体碳酸氢钠碱化到pH6。将此溶液用二氯甲烷(3×30mL)萃取，并且将合并的有机溶液用水(20mL)和盐水(20mL)冲洗，然后干燥(使用相分离盒)并在减压下浓缩。将所得的油状物悬浮在水(30mL)中，并且将混合物用超声波处理30分钟。将所得的固体过滤出，并且在真空下干燥，得到固体状的标题化合物。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ1.12(t，3H)，1.25(t，6H)，3.59(q，2H)，3.62(s，3H)，3.65(m，4H)，3.92(t，2H)，4.90(m，2H)，6.65(d，1H)，7.75(m，1H)，8.10(s，1H). MS ES- m/z 428[M-H]- 实例126 5-[异丙基(甲基)氨基]-7-[(4-甲基吡啶-2-基)氨基]-1-[2-(2，2，2-三氟乙氧基)乙基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸
将得自制备233的氯化物(75mg，0.17mmol)，N-乙基二异丙基胺(0.15mL，0.85mmol)，氟化铯(26mg，0.17mmol)和N-甲基异丙基胺(0.09mL，0.85mmol)在1-甲基-2-吡咯烷酮(1mL)中的混合物在110℃下在Reactivial

中搅拌4小时。
使用Phenomenex Luna C18反相硅胶柱且利用乙腈95％水/5％甲醇/0.1％三氟乙酸(5:95到95:5)作为洗脱梯度，直接纯化冷却后的反应混合物。将产物溶解在二氯甲烷中，并且将溶液用碳酸氢钠冲洗，在硫酸镁上干燥，并在减压下蒸发，得到标题化合物24mg。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ1.31(d，6H)，2.48(s，3H)，3.11(s，3H)，3.98(q，2H)，4.15(t，2H)，4.95(m，1H)，4.99(t，2H)，7.08(d，1H)，8.00(s，1H)，8.12(d，1H). MS ES- m/z 466[M-H]- 实例127 5-[乙基(甲基)氨基]-7-[(4-甲基吡啶-2-基)氨基]-1-[2-(2，2，2-三氟乙氧基)乙基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸
采用类似于制备126中所述的工艺，由得自制备233的化合物和N-乙基甲基胺，制备标题化合物，不同之处仅仅在于使用2当量的N-乙基甲基胺和N-乙基二异丙基胺。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ1.30(t，3H)，2.49(s，3H)，3.26(s，3H)，3.73(q，2H)，3.98(q，2H)，4.16(t，2H)，4.98(t，2H)，7.05(d，1H)，8.00(s，1H)，8.10(d，1H). MS ES- m/z 452[M-H]- 实例128 5-(二乙氨基)-7-[(4-甲基吡啶-2-基)氨基]-1-[2-(2，2，2-三氟乙氧基)乙基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸
将得自制备233的氯化物(100mg，0.23mmol)，氟化铯(35mg，0.23mmol)和二乙胺(0.07mL，0.69mmol)在二甲基亚砜(1mL)中的混合物在120℃下在

中搅拌18小时。
Tlc分析表明还存在起始原料，于是加入额外的二乙胺(0.07mL，0.69mmol)，并将反应混合物在135℃下再加热3小时。将冷却后的混合物悬浮在1M的柠檬酸溶液(200mL)中，并且用二氯甲烷(3×50mL)萃取。将合并的有机萃取物用水(50mL)，盐水(25mL)冲洗，在硫酸镁上干燥，然后在减压下浓缩。通过柱色谱使用Isolute

硅胶盒和10％的乙酸甲醇溶液二氯甲烷(1:99～7:93)作为洗脱梯度，而将粗产物纯化，得到黄色粉末状的标题化合物44mg。
1HNMR(CD3OD，400MHz)δ1.35(t，6H)，2.50(s，3H)，3.70(q，4H)，4.00(q，2H)，4.18(t，2H)，5.00(t，2H)，7.10(d，1H)，8.05(s，1H)，8.13(d，1H). MS ES+ m/z 468[MH]+ 实例129 7-[(4-甲基吡啶-2-基)氨基]-5-(2-甲基吡咯烷-1-基)-1-[2-(2，2，2-三氟乙氧基)乙基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸
采用制备128中所述的工艺，由得自制备233的氯化物和2-甲基吡咯烷，以45％的收率得到固体状的标题化合物。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ1.38(d，3H)，1.85(m，1H)，2.10(m，1H)，2.25(m，2H)，2.50(s，3H)，3.60(m，1H)，3.79(m，1H)，3.98(q，2H)，4.15(t，2H)，4.45(m，1H)，5.00(t，2H)，7.10(d，1H)，7.98(s，1H)，8.15(d，1H).MS ES+ m/z 480[MH]+ 实例130 5-[环丁基(甲基)氨基]-7-[(4-甲基吡啶-2-基)氨基]-1-[2-(2，2，2-三氟乙氧基)乙基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸
采用类似于制备128中所述的工艺，由得自制备241的胺和得自233的氯化物，以42％的收率得到黄色固体状的标题化合物，不同之处在于还加入5当量的N-乙基二异丙基胺。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ1.80(m，2H)，2.35(m，4H)，2.50(s，3H)，3.21(s，3H)，3.99(q，2H)，4.18(t，2H)，4.80(m，1H)，4.99(t，2H)，7.10(d，1H)，8.05(s，1H)，8.18(d，1H). MS APCI+ m/z 480[MH]+ 实例131到133
将得自制备240-242的适当的酯(0.5mmol)在氢氧化钠(1N，4mL，4mmol)和二氧杂环己烷(2mL)中的溶液在室温下搅拌18小时。在减压下浓缩溶液，并且将残余物在二氯甲烷(20mL)和1M的柠檬酸溶液(10mL)之间分配。分离各层，并且将有机相在硫酸镁上干燥，在减压下蒸发，得到标题化合物。

实例134 1-(2-乙氧基乙基)-7-[(4-甲基吡啶-2-基)氨基]-5-吡咯烷-1-基-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸
将得自制备259的酯(50mg，0.12mmol)在1N的氢氧化钠溶液(1mL)和二氧杂环己烷(0.5mL)中的溶液在室温下搅拌18小时。将混合物用1M的柠檬酸溶液(50mL)稀释，并用二氯甲烷(3×200mL)萃取。将合并的有机萃取物在硫酸镁上干燥，并且在减压下蒸发。通过柱色谱使用Isolute

硅胶盒和二氯甲烷甲醇(1000到9010)的洗脱梯度，将粗产物纯化，得到黄色固体状的标题化合物23mg。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ1.10(t，3H)，2.10(m，4H)，2.45(s，3H)，3.59(m，2H)，3.70(m，4H)，3.90(t，2H)，4.90(m，2H)，7.05(d，1H)，8.20(m，2H). MS APCI+ m/z 412[MH]+ 实例135 5-[异丙基(甲基)氨基]-1-[(2S)-2-甲氧基丙基]-7-[(4-甲基吡啶-2-基)氨基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸
将得自260的酯(43mg，0.1mmol)在二氧杂环己烷(2mL)和氢氧化钠(1N，4mL)中的溶液在室温下搅拌18小时。在减压下浓缩混合物，并且用柠檬酸溶液(1M，50mL)稀释残余物。将溶液用二氯甲烷(3×50mL)萃取，将合并的有机溶液用碳酸氢钠溶液(3×15mL)冲洗，在硫酸镁上干燥，并且在减压下蒸发。通过柱色谱使用

硅胶盒和二氯甲烷甲醇(1000到946)的洗脱梯度，将粗产物纯化，得到黄色油状物。将其用醚研磨，过滤出所得的固体并干燥，得到白色固体状的标题化合物26mg。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ1.30(m，9H)，2.42(s，3H)，3.10(s，3H)，3.43(s，3H)，4.00(m，1H)，4.75(m，2H)，4.99(m，1H)，7.02(d，1H)，8.08(s，1H)，8.10(d，1H). MS APCI+ m/z 414[MH]+ 实例136到140
将得自制备245-249的适当的酯(1当量)在氢氧化钠(1N，1.5-3当量)和二氧杂环己烷(6.5-7.5mLmmol-1)中的溶液在室温下搅拌18小时。在减压下浓缩溶液，并且将残余物在二氯甲烷和1M的柠檬酸溶液之间分配，分离各层。将水相用额外的二氯甲烷萃取，将合并的有机溶液在硫酸镁上干燥，并在减压下蒸发。将产物与乙酸乙酯研磨，并且过滤出固体并干燥，得到白色结晶固体状的标题化合物。


实例141到146 将氢氧化钠溶液(1M，3当量)加入到得自制备253-258的酯(1当量)在二氧杂环己烷(8.5-10.5mLmmol-1)中的溶液中，并将反应混合物在室温下搅拌18小时。在减压下去除溶剂，并将残余物在柠檬酸(15mL)和二氯甲烷(15mL)之间分配。分离各相，并将有机层在减压下蒸发，得到标题化合物。



实例147 1-(2-乙氧基乙基)-5-[异丙基(甲基)氨基]-7-[(4-甲基吡啶-2-基)氨基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-羧酸2-(二甲氨基)乙酯
将得自制备176的氯化物(160mg，0.36mmol)，氟化铯(54mg，0.36mmol)和N-甲基异丙基胺(186μL，1.79mmol)在二甲基亚砜(3mL)中的混合物在110℃下在

中加热18小时。将冷却后的混合物在二氯甲烷(20mL)和水(20mL)之间分配，并且分离各层。将水溶液用二氯甲烷(20mL)进一步萃取，并将合并的有机溶液用水(3×20mL)冲洗，在硫酸镁上干燥并在减压下蒸发。通过柱色谱使用

硅胶盒和甲醇二氯甲烷(0100到1090)的洗脱梯度，然后在反相硅胶上使用乙腈水三氟乙酸(95:5:0.1)作为洗脱剂，将残余有机油纯化，得到标题化合物15mg。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ1.09(t，3H)，1.33(d，6H)，2.54(s，3H)，3.05(s，6H)，3.16(s，3H)，3.51(q，2H)，3.65(t，2H)，3.98(t，2H)，4.78(t，2H)，4.89(m，1H)，5.04(t，2H)，7.18(d，1H)，8.08(s，1H)，8.14(d，1H).MS m/z 485[MH]+ 实例148到164 将4-二甲氨基吡啶(1.3当量)加入到得自实例11，14，15，17，38，96，118-124，136，137和139的适当的酸(1当量)、氢氯化1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(1.3当量)和和适当的磺酰胺(1.2-1.3当量)在二氯甲烷(13-30mLmmol-1)中的溶液中，并将反应混合物在室温下搅拌18小时。将混合物用二氯甲烷稀释，用1M的柠檬酸溶液冲洗，在硫酸镁上干燥并且在减压下蒸发，得到标题化合物。







A-通过柱色谱在

硅胶盒上以二氯甲烷甲醇作为洗脱剂，而将粗化合物纯化。
B-在18小时之后加入额外的0.5当量的磺酰胺和4-二甲氨基吡啶，并且将反应混合物再搅拌6小时。
C-使用1.5当量的氢氯化1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺，4-二甲氨基吡啶和乙基磺酰胺。
D-在用甲醇研磨之后分离化合物。
E-使用4-二甲氨基吡啶(0.5当量)，氢氯化1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(2当量)和适当的磺酰胺(2当量)。
实例165到171 将4-二甲氨基吡啶(1.3当量)加入到得自实例20和131-133的适当的酸(1当量)、氢氯化1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(1.3当量)和适当的磺酰胺(1.2-1.3当量)在二氯甲烷(13-30mLmmol-1)中的溶液中，并且将反应混合物在室温下搅拌18小时。将混合物用1M的柠檬酸溶液(5mL)冲洗，分离出有机相，并通过柱色谱在硅胶上使用二氯甲烷甲醇(1000到955的)的洗脱梯度直接纯化，得到黄色固体状的标题化合物。



实例172到177 将4-二甲氨基吡啶(1.3当量)加入到得自实例140-145的适当的酸(1当量)、氢氯化1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(1.3当量)和甲磺酰胺(1.3当量)在二氯甲烷(13.5-16mLmmol-1)中的溶液中，并且将反应混合物在室温下搅拌18小时。Tlc分析表明仍然存在起始原料，于是加入额外的氢氯化1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(0.5当量)和甲磺酰胺(0.5当量)，并且将反应混合物再搅拌18小时。将混合物用二氯甲烷和1M的柠檬酸溶液稀释，再持续搅拌40分钟，然后分离各相。通过柱色谱在硅胶上(使用Parallel Flashmaster系统)使用甲醇二氯甲烷(0100到595)的洗脱梯度，而将有机相纯化，得到黄色固体状的标题化合物。


实例178 5-[乙基(甲基)氨基]-7-[(4-甲基吡啶-2-基)氨基]-N-(甲基磺酰基)-1-[2-(2，2，2-三氟乙氧基)乙基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-甲酰胺
将得自制备261的氯化物(50mg，0.1mmol)，N-乙基二异丙基胺(0.05mL，0.3mmol)，N-乙基甲基胺(0.026mL，0.3mmol)和氟化铯(15mg，0.1mmol)在1-甲基-2-吡咯烷酮(1mL)中的混合物在Reactivial

中在110℃下加热90分钟。
使用Phenomenex Luna C18柱反相柱和乙腈95％水/5％甲醇/0.1％三氟乙酸(5:95到95:5)作为洗脱梯度，直接纯化冷却后的反应混合物。将产物溶解在二氯甲烷中，并且将溶液用碳酸氢钠溶液冲洗，在硫酸镁上干燥并在减压下蒸发，得到标题化合物24mg。
或者，实例178可以通过实例172-177的方法来制备。将4-二甲氨基吡啶(22mg，0.20mmol)加入到得自实例127的酸(70mg，0.15mmol)、氢氯化1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(38mg，0.20mmol)和甲磺酰胺(19mg，0.20mmol)在二氯甲烷(2ml)中的溶液中，并且将反应混合物在室温下搅拌18小时。将混合物用二氯甲烷(20mls)和1M的柠檬酸溶液(10ml)稀释，然后分离各相。通过柱色谱在硅胶上(使用ParallelFlashmaster系统)使用甲醇二氯甲烷(0100到298)的洗脱梯度，直接纯化有机相，得到黄色固体状的标题化合物。
1H NMR(DMSO-D6+1滴TFAd，400MHz)δ1.19(t，3H)，2.49(s，3H)，3.20(s，3H)，3.41(s，3H)，3.66(q，2H)，4.06(q，2H)，4.14(t，2H)，5.03(t，2H)，7.20(d，1H)，8.12(s，1H)，8.27(d，1H). MS ES- m/z 529[M-H]- 实例179 5-[异丙基(甲基)氨基]-7-[(4-甲基吡啶-2-基)氨基]-N-(甲基磺酰基)-1-[2-(2，2，2-三氟乙氧基)乙基]-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-甲酰胺
采用实例178中所述的工艺，由得自制备261的氯化物和N-甲基异丙基胺，得到标题化合物。
1H NMR(DMSO-D6+1滴TFAd，400MHz)δ1.20(d，6H)，2.49(s，3H)，3.03(s，3H)，3.41(s，3H)，4.08(q，2H)，4.15(t，2H)，4.78(m，1H)，5.03(t，2H)，7.20(d，1H)，8.10(s，1H)，8.26(d，1H). MS ES- m/z 543[M-H]- 实例180到182
将氢氧化钠溶液(1M，1mL，1mmol)加入到得自制备250-252的适当的酯(0.33mmol)在二氧杂环己烷(3mL)的溶液中，并且将溶液在室温下搅拌18小时。将反应混合物在减压下蒸发，并且将混合物在二氯甲烷(50mL)和1M的柠檬酸溶液之间分配。分离各层，并且将有机溶液在硫酸镁上干燥，并在减压下蒸发。将产物溶解在二氯甲烷(5mL)中，并且加入氢氯化1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(82mg，0.43mmol)，甲磺酰胺(41mg，0.43mmol)和4-二甲氨基吡啶(48mg，0.43mmol)，将反应混合物在室温下搅拌72小时。将混合物用二氯甲烷(10mL)、1M的柠檬酸溶液稀释，将混合物搅拌30分钟。分离各相，通过柱色谱在硅胶上使用二氯甲烷甲醇(982)作为洗脱剂，纯化有机溶液，从而得到标题化合物。

A＝产品从二氯甲烷异丙醇中结晶 实例183 5-(二乙氨基)-7-[(4-甲基吡啶-2-基)氨基]-N-(甲基磺酰基)-1-(2-丙氧基乙基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-甲酰胺
将得自制备67的氯化物(135mg，0.33mmol)，氟化铯(50mg，0.33mmol)和二乙胺(103μL，1mmol)在二甲基亚砜(1mL)中的混合物在

中在120℃下加热18小时。将冷却后的混合物在二氯甲烷(20mL)和水(20mL)之间分配并分离各相。将有机相用水(2×10mL)冲洗，在硫酸镁上干燥并且在减压下蒸发。将氢氧化钠溶液(1M，0.5mL，0.5mmol)和二氧杂环己烷(1mL)加入到残余物，并且将溶液在室温下搅拌18小时。将反应混合物在减压下蒸发，并且将混合物在二氯甲烷(20mL)和1M的柠檬酸溶液(2mL)和水(20mL)之间分配。分离各层，并将有机溶液在硫酸镁上干燥，在减压下蒸发。将产物溶解在二氯甲烷(5mL)中，并加入氢氯化1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(82mg，0.43mmol)、甲磺酰胺(41mg，0.43mmol)和4-二甲氨基吡啶(48mg，0.43mmol)，并将反应混合物在室温下搅拌18小时。将混合物用二氯甲烷(30mL)稀释，用1M的柠檬酸溶液(5mL)稀释，然后在硫酸镁上干燥并在减压下蒸发。通过柱色谱在硅胶上使用二氯甲烷甲醇(1000到973)作为洗脱剂，而将粗产物纯化，得到标题化合物75mg。
1H NMR(DMSO-d6+TFAd，400MHz)δ0.62(t，3H)，1.20(t，6H)，1.40(m，2H)，2.41(s，3H)，3.38(t，2H)，3.41(s，3H)，3.60(m，4H)，3.85(t，2H)，4.90(m，2H)，7.14(d，1H)，8.05(s，1H)，8.24(d，1H). MS APCI+ m/z 505[MH]+ 实例184 5-[异丙基(甲基)氨基]-7-[(4-甲基吡啶-2-基)氨基]-N-(甲基磺酰基)-1-(2-丙氧基乙基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-甲酰胺
采用类似于实例183中所述的工艺，由制备67中的氯化物，以51％的收率得到黄色固体状的标题化合物。
1H NMR(DMSO-D6+1滴TFAd，400MHz)δ0.62(t，3H)，1.18(d，6H)，1.38(m，2H)，2.42(s，3H)，3.00(s，3H)，3.30(t，2H)，3.39(s，3H)，3.84(t，2H)，4.75(m，1H)，4.95(t，2H)，7.18(d，1H)，8.04(s，1H)，8.24(d，1H). MS APCI+- m/z 505[MH]+ 实例185 5-[乙基(甲基)氨基]-1-(2-羟乙基)-7-[(4-甲基吡啶-2-基)氨基]-N-(甲基磺酰基)-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-3-甲酰胺
将三溴化硼(1M的二氯甲烷溶液，1.95mL，1.95mmol)逐滴加入到得自实例119的化合物(100mg，0.22mmol)在二氯甲烷(5mL)中的冷却到-25℃的溶液中，以将温度保持在-20℃以下。将反应混合物在-25℃下搅拌3小时，然后通过逐滴加入饱和碳酸氢钠溶液进行骤停，直到达到pH7。将混合物升温到室温，然后在水(10mL)和二氯甲烷(20mL)之间分配。将有机相用水冲洗，在硫酸镁上干燥，并且在减压下蒸发，得到黄色固体状的标题化合物31mg。
1H NMR(CD3OD+1滴TFAd，400MHz)δ1.31(t，3H)，2.54(s，3H)，3.30(s，3H)，3.41(s，3H)，3.76(q，2H)，4.08(t，2H)，4.98(t，2H)，7.19(d，1H)，8.04(s，1H)，8.15(d，1H). MS m/z 449[MH]+ 化验 本发明的化合物是环状单磷酸鸟苷(cGMP)特异性5型磷酸二酯酶的抑制剂(PDE-5抑制剂)。适用于本发明的优选化合物是有效的选择性的PDE5抑制剂。体外的对于环状3’，5’-单磷酸鸟苷(cGMP)和环状3’，5’-单磷酸腺苷(cAMP)磷酸二酯酶的PDE抑制活性可以通过测量其IC50值(对酶活性实现50％的抑制所需的化合物浓度)来测定。
所需的PDE酶可以分离自各种来源，包括人类海绵体、人类和兔的血小板、人类心室、人类骨骼肌和牛视网膜，基本上按照Thompson，WJ等的Biochemistry 18(23)，5228-5237，1979的方法的改进来进行，如Ballard SA等在J.Urology 159(6)，2164-2171，1998中所述的，。具体来说，cGMP特异性PDE5和cGMP抑制的cAMP PDE3可以从人类海绵体组织、人类血小板或者兔的血小板获得；cGMP刺激的PDE2从人类海绵体获得；钙/钙调蛋白(Ca/CAM)依赖性PDE1从人类心房获得；cAMP特异性PDE4从人类骨骼肌获得；光受体PDE6从牛视网膜获得。磷酸二酯酶7—11可以由转染到SF9细胞中的全长人类重组克隆来产生。
可以使用下述两种方法之一来进行化验基本如Ballard SA等在J.Urology 159(6)，2164-2171，1998中所述的那样使用Thompson WJ和Appleman MM，Biochemistry 10(2)，311-316，1971的“批处理”方面的改进；或者使用由Amersham plc在产品编号TRKQ7090/7100下所述的规则的改进而用于直接检测[3H]标记的AMP/GMP的亲近闪烁检测法(Scintillation Proximity Assay)。简单地说，对于亲近闪烁检测法，PDE抑制剂的效果可以通过化验在不同的抑制剂浓度和低的底物下固定量的酶(在～1/3Km或更小的浓度下，未标记的cGMP或cAMP对[3H]标记的cGMP或cAMP比例为3:1)，使得

来进行研究。连同化验缓冲液[20mM Tris-HCl pH 7.4，5mM MgCl2，1mg/ml牛血清蛋白酶]，最终的化验体积达到100μl。反应由酶引发，在30℃下培养30-60分钟，得到<30％的底物酶变率，并且用50μl硅酸钇SPA珠(含有3mM的PDE 9和PDE 11的相应的未标记的环状核苷酸)来终止反应。将板重新密封并且振荡20分钟，之后在黑暗中将珠静置30分钟，然后在TopCount板读数器(Packard，Meriden，CT)上计数。将放射能单位转化为未抑制的对照物(100％)的百分比(％)活性，对抑制剂浓度作图，并且利用Microsoft Excel扩展的“Fit Curve”得到抑制剂IC50的值。
本发明的所有化合物具有对于PDE-5的小于10，000nM的活性。各化合物的IC50值被列于下面的表中。



权利要求
1.式(V)的化合物
其中
连接在N1或者N2上的R6是C1-C6烷基、C1-C6卤烷基、C2-C6烯基或C2-C6炔基，其中的每一个可选地被C1-C6烷氧基、C1-C6卤烷氧基或者选自RJ、RK、RL和RM的环状基团取代，或者R6是RN，C3-C7环烷基或者C3-C7卤环烷基，其中的每一个可选地被C1-C6烷氧基、C1-C6卤烷氧基取代，或者R6是氢；
RJ是C3-C10环烷基或C3-C10环烯基，其中的每一个可以或者是单环，或者当存在适当数量的成环原子时是多环，并且可以稠合到
(a)选自苯环和5元或者6元芳杂环的单环芳香环，所述芳杂环含有至多三个选自氮、氧和硫的杂原子，或者
(b)5元、6元或7元脂杂环，所述脂杂环含有至多三个选自氮、氧和硫的杂原子；
RK是苯基或者萘基，其中的每一个可以稠合到
(a)C5-C7环烷基环或C5-C7环烯基环，
(b)5元、6元或7元脂杂环，所述脂杂环含有至多三个选自氮、氧和硫的杂原子，或
(c)5元或者6元芳杂环，所述芳杂环含有至多三个选自氮、氧和硫的杂原子；
RL和RN分别独立地是单环的或者当存在适当数量的成环原子时是多环的、饱和或者部分不饱和的环体系，其含有3到10个成环原子，其中至少一个成环原子是选自氮、氧和硫的杂原子，所述环可以稠合到C5-C7环烷基环或C5-C7环烯基环或选自苯环和5元或者6元芳杂环的单环芳香环，所述芳杂环含有至多三个选自氮、氧和硫的杂原子；
RM是5元或者6元芳杂环，所述芳杂环含有至多三个独立地选自氮、氧和硫的杂原子，所述环可以进一步稠合到
(a)第二5元或者6元芳杂环，所述第二芳杂环含有至多三个选自氮、氧和硫的杂原子；
(b)C5-C7环烷基环或C5-C7环烯基环；
(c)5元、6元或7元脂杂环，所述脂杂环含有至多三个选自氮、氧和硫的杂原子；或
(d)苯环；
Y是共价键、-CH2-O-CH2-、C1-C6亚烷基或C3-C7亚环烷基；
并且RA是C1-C6烷基或苯甲基。
2.如权利要求1所述的式(VB)的化合物
全文摘要
本发明涉及一系列新颖的具有PDE-5抑制活性的5，7-二氨基吡唑并[4，3-d]嘧啶，其可用于高血压的治疗或者其它对PDE-5的抑制可产生有益效果的疾病或者病症的治疗。本发明还涉及此类化合物的制备方法，在制备中所使用的中间体，含有此类化合物的组合物和所述化合物和组合物的用途。特别地，本发明还涉及中间体式(V)的化合物。
文档编号C07D487/04GK101362765SQ200810085940
公开日2009年2月11日 申请日期2004年11月12日 优先权日2003年11月24日
发明者安德鲁·西蒙·柏尔, 大卫·格雷厄姆·布朗, 凯文·尼尔·达克, 大卫·内森·亚伯拉罕·福克斯, 伊恩·罗杰·马什, 安德鲁·伊恩·默雷尔, 迈克尔·约翰·帕默尔, 卡罗尔·安·温斯洛 申请人:辉瑞有限公司